JP6871958B2 - 生物学的状態を検出するシステムおよび方法 - Google Patents
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Description
本発明は、Kasdan他による2012年12月17日出願の米国仮特許出願第61/737,854号、Kasdan他による2012年12月17日出願の米国仮特許出願第61/737,856号、および2012年12月17日出願の米国特許出願第13/716,246号の優先権を請求し、これらの出願を参考文献として本明細書に援用する。
a)その中で検定を行う固定カートリッジであって、カートリッジは、試料と反応するように作られた少なくとも1つの試薬を収容するように構成され、少なくとも1つのレポータ機能性は、検定の結果を報告するために少なくとも1つの試薬の試料との反応を報告するように構成された固定カートリッジと、
b)機械式制御装置であって、
i.カートリッジ上に外部から力を加えて、少なくとも1つの試薬を放出させるように構成された第1の圧接手段と、
ii.除去可能な力を加えて、カートリッジの中に第1の方向の流体動きを誘発し、力が除去されると、第1の方向と反対方向の流体動きを引き起こすように構成された少なくとも1つの第2の圧接手段とを含む機械式制御装置と、
c)反応を検出するように構成された光学式読取り装置と、
d)光学式読取り装置からデータを受け取って、データを処理して化学性を決定するように構成されたプロセッサとを含む。
i.貯蔵器、
ii.ポンプ、
iii.導管、
iv.小型フローセル、
v.輸送チャネル、
vi.読取りチャネル、
vii.マイクロ流体要素、
viii.圧縮気体保持要素、
ix.圧縮気体放出要素、
x.ノズル要素、
xi.混合要素、
xii.蛇腹要素、
xiii.特定のシーケンスに従って要素を起動するように構成されたソフトウェア、および
xiv.特定のシーケンスに従って要素を起動するハードウェアの少なくとも1つを含む。
a.目標信号基準組成物および
b.基準識別子組成物の少なくとも1つを含む、少なくとも1つの基準組成物を含む。
a.ポジティブ制御部分および
b.ネガティブ制御部分の少なくとも1つを含む。
a.所定の期間、被験対象からの試料を本明細書に記載されるシステムで温置すること、および
b.少なくとも1つのレポータ機能性に応答した表示を受け取り、それによって、化学性に従って被験対象の生物学的状態の表示を提供することを含む。
a.被験対象が生物学的状態を有するとき、被験対象からの検体を本明細書に記載されるシステムで少なくとも1つの組成物と共に所定の期間温置して、少なくとも1つの反応生成物を形成すること、および
b.システムの少なくとも1つのレポータ要素に応答する少なくとも1つの反応生成物の表示を受け取り、それによって、被験対象の生物学的状態の表示を提供することを含む。
a.被験対象からの血液試料を本明細書に記載されるシステムで敗血症マーカに特有の部分である蛍光標識結合部分と接触させることであって、血液試料の体積は、50μL以下である、被験対象からの血液試料を蛍光標識結合部分と接触させることと、
b.試料の結合部分の有無、またはレベルを検出し、それによって、20分以内に被験対象の敗血症の有無を確認することとを含む。
a.試料を本明細書に記載されるシステムに導入することと、
b.少なくとも1つの試薬を試料と反応させることと、 c.少なくとも1つのレポータ機能性に関連する信号を検出することであって、少なくとも1つのレポータ機能性は、少なくとも1つの試薬の試料との反応を報告するように構成されており、それによって化学性を決定する、少なくとも1つのレポータ機能性に関連する信号を検出することとを含む。
a.細胞表面マーカ、
b.細胞染色、
c.固体担体と結合する試薬、
d.化学指示薬、および
e.生物学的細胞指示薬の少なくとも1つを含む。
b.細胞表面マーカおよび血漿タンパクビーズ検定、
c.細胞表面マーカおよび溶液変化マーカ、
d.細胞要素染色および血漿タンパクビーズ検定、および
e.細胞要素染色および溶液変化マーカの少なくとも1つを含む。
a.本明細書に記載されるカートリッジの中に少なくとも1つの組成物を格納すること、および
b.カートリッジの中の少なくとも1つの可膨張室を作動させて、少なくとも1つの試薬に少なくとも1つの気圧力をかけ、それによって、化学反応を誘発することを含む。
a)生物学的検体を受け取って前述の検体を少なくとも1つの組成物と結合させる使い捨て要素と、
b)前述の患者が前述の生物学的状態を有している場合、前述の検体と反応して反応生成物を形成するように構成された少なくとも1つの検出器部分を備えた少なくとも1つの組成物と、
c)反応生成物の表示を提供して、それによって、生物学的状態の表示を提供するように構成された少なくとも1つのレポータ要素とを備える。
d)キットを使用するための使用法をさらに備える。
a)貯蔵器、
b)ポンプ、
c)導管、
d)小型フローセル、
e)輸送チャネル、
f)マイクロ流体要素、
g)圧縮ガス保持要素、
h)圧縮ガス放出要素、
i)ノズル要素、
j)混合要素、
k)蛇腹要素、
l)特定のシーケンスに従って前述の要素を起動させるように構成されたソフトウェア、および m)特定のシーケンスに従って前述の要素を起動するハードウェアの少なくとも1つを備える。
a)反応物を備えた使い捨て要素であって、使い捨て要素は、生物学的実体を備えた試料を受け取るように構成されており、前述の反応物を前述の生物学的実体と結合させて反応生成物を形成する、使い捨て要素と、
b)前述の反応物が消失していることの迅速な表示を提供し、それによって、生物学的実体の迅速な検定を提供するように構成される少なくとも1つのレポータ要素とを備える。
a)反応物を備えた使い捨て要素であって、使い捨て要素は、生物学的実体を備えた試料を受け取るように構成されており、前述の反応物を前述の生物学的実体と結合させて反応生成物を形成する、使い捨て要素と、
b)前述の反応生成物が出現したことの迅速な表示を提供し、それによって、生物学的実体の迅速な検定を提供するように構成された少なくとも1つのレポータ要素とを備える。
a.試料組成物であって、
i.標的部分を備えた生体検体、
ii.ポジティブ制御部分、および
iii.ネガティブ制御部分の少なくとも1つを備えた試料組成物と、
b.検出組成物であって、
i.少なくとも1つの標的抗体、
ii.少なくとも1つのポジティブ制御識別抗体、および
iii.少なくとも1つのネガティブ制御識別検出部分または特性の少なくとも1つを備えた検出組成物と、
c.少なくとも1つの基準組成物であって、
i.標的信号基準組成物、および
ii.基準識別子組成物の少なくとも1つを備えた少なくとも1つの基準組成物とを備える。
a.試料組成物であって、
iii.標的部分を備えた生体検体、
iv.ポジティブ制御部分、および
v.ネガティブ制御部分の少なくとも1つを備えた試料組成物と、
b.抗体組成物であって、
vi.少なくとも1つの標的抗体(CD64抗体)、
vii.少なくとも1つのポジティブ制御識別抗体(CD163)、および
viii.少なくとも1つのネガティブ制御識別抗体または特性の少なくとも1つを備えた抗体組成物と、
c.少なくとも1つの基準組成物であって、
ix.標的信号基準組成物、および
x.基準識別子組成物の少なくとも1つを備えた少なくとも1つの基準組成物とを備える。
d.少なくとも1つの溶解試薬、および
e.少なくとも1つの希釈液を備えた少なくとも1つの調整部分をさらに備える。
a.試料を、特にバイオマーカと結合する蛍光標識結合部分と接触させることと、
b.標識試料の少なくとも一部から第1の蛍光信号を検出することと、
c.蛍光標識粒子の個体群から第2の蛍光信号を検出することであって、個体群は、周知の蛍光強度を一定時間にわたって含む、蛍光標識粒子の個体群から第2の蛍光信号を検出することと、
d.第1の蛍光信号を第2の蛍光信号に標準化させ、それによってバイオマーカを定量化することであって、標準化は、第1の蛍光信号と第2の蛍光信号を比較することができるソフトウェアを備えた装置を使用することを含んでいる、第1の蛍光信号を第2の蛍光信号に標準化させることとを含む。
a.試料であって、
i.標的部分を備えた生体検体、
ii.ポジティブ制御部分、および
iii.ネガティブ制御部分の少なくとも1つを備えた試料と、
b.抗体組成物であって
iv.少なくとも1つの標的抗体、
v.少なくとも1つのポジティブ制御識別抗体、および
vi.少なくとも1つのネガティブ制御識別抗体または特性の少なくとも1つを備えた抗体組成物と、
c.少なくとも1つの基準組成物であって、
vii.標的抗体基準組成物、および
viii.基準識別子組成物の少なくとも1つを備えた少なくとも1つの基準組成物とを備える。
a)少なくとも1つの溶解試薬および
b)少なくとも1つの希釈液を備えた少なくとも1つの調整部分をさらに備える。
a)被験対象からの血液試料を、敗血症マーカに特有の蛍光標識結合部分と接触させることであって、血液試料の体積は、50μL以下である、被験対象からの血液試料を蛍光標識結合部分と接触させることと、
b)試料の結合部分の有無、またはレベルを検出し、それによって、被験対象の敗血症の有無を確認することとを含む。
a)試料を、特にバイオマーカと結合する蛍光標識結合部分と接触させることと、
b)標識試料の少なくとも一部から第1の蛍光信号を検出することと、
c)蛍光標識粒子の個体群から第2の蛍光信号を検出することであって、個体群は、周知の蛍光強度を一定時間にわたって含む、蛍光標識粒子の個体群から第2の蛍光信号を検出することと、
d)第1の蛍光信号を第2の蛍光信号に標準化させ、それによって、バイオマーカを定量化することであって、標準化は、第1の蛍光信号と第2の蛍光信号を比較することができるソフトウェアを備えた装置を使用することを含んでいる、第1の蛍光信号を第2の蛍光信号に標準化させることとを含む。
a)被験対象からの血液試料を敗血症マーカに特有の部分である蛍光標識結合部分と接触させることであって、血液試料の体積は、50μL以下である、被験対象からの血液試料を蛍光標識結合部分と接触させることと、
b)試料の結合部分の有無、またはレベルを検出し、それによって、20分以内に被験対象の敗血症の有無を確認することとを含む。
a)少なくとも1つの抗体を用いた培養、
b)少なくとも1つの抗原を用いた培養、
c)体液の少なくとも1つの細胞タイプの染色、
d)体液の少なくとも1つの細胞タイプを酵素により溶解すること、
e)体液の少なくとも1つの細胞タイプを浸透圧で溶解すること、
f)生体流体の少なくとも一部の加熱または冷却、
g)基準物質を生体流体に加えること、および
h)体液の少なくとも1つの要素との化学反応などの、これらに限定するわけではないが、少なくとも1つの準備工程が体液で実行される。
a)正確な診断決定をするため、生物学的マーカや白血球状態などの複数個の情報が必要な場合、
b)疾患曲線上での患者の位置を決定するため、複数の順次的な測定を行われなければならない場合、
c)白血球および類似のデータが迅速にかつPOC環境で必要とされる場合、および
d)蛍光信号は、波長が重複しており、かつ所与の波長の範囲に関する各信号の相対寄与を決定する必要がある場合、の少なくとも1つのシナリオ、これに限定するわけではないが、などの使用を提示する。
i)少なくとも1つの抗体を培養すること、
j)少なくとも1つの抗原を培養すること、
k)体液の少なくとも1つの細胞タイプを染色すること、
l)体液の少なくとも1つの細胞タイプを酵素溶解すること、
m)体液の少なくとも1つの細胞タイプを浸透圧溶解すること、
n)生体流体の少なくとも一部を加熱または冷却すること、
o)基準材料を生体流体に加えること、および
p)体液の少なくとも1つの要素と化学反応させることの内の、これらに限定するわけではないが、少なくとも1つの準備工程を体液で行う。
a)光子計数分析、 b)マルチスペクトル発光検出1834の他の光出力を測定する他の検出解析要素(図示せず)、などの2つ以上の部分要素(図示せず)を備えることができる。
・静電気または表面との疎水的相互作用を利用した吸着、固定化ポリマー類への閉じ込めなどによる単純な付着
・非共有結合的なまたは物理的な付着、
・タンパク質のビード面への共有結合
・生物学的認識(例えばビオチン/ストレプトアビジン)。
・2つの工程、すなわち第1の層を、表面が反応基(例えばエポキシ、アミノ、チオールなど)を示すように、第1の層は、シランの化学的性質によって形成すること、および第2の層(例えば固定化されるタンパク質またはリンカー分子)を、固定化反応基を利用して共有結合することを必要とする。
・装置の内側上で官能化ポリマー被覆への共有結合、または金の表面上に自己集合した単分子膜(SAM)の遊離末端への結合。
a)そこを通る放射線の転送、
b)その上に放射線を衝突させる、
c)反射放射線、屈折放射線、および/または伝搬放射線を検出する、
d)放出放射線を検出する、
e)その画像を1つ以上取り込む、 f)取り込み画像で画像分析を行う、
g)処理済み検体の電気特性を測定する、
h)その上に音波エネルギーを衝突させる、
i)そこから音波エネルギーを検出する、および
j)上記の工程の任意の1つ以上の出力を分析する、の何れか、またはそれらの組み合わせが含まれ得る。
実施例
適用番号1−CD64感染症及び敗血症
参考文献
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(1)
化学性を決定する検定を実行する自蔵式システムであって、前記システムは、
a)その中で前記検定を行う固定カートリッジであって、前記カートリッジは、試料と反応するように作られた少なくとも1つの試薬を収容するように構成され、少なくとも1つのレポータ機能性は、前記検定の結果を報告するために前記少なくとも1つの試薬の前記試料との反応を報告するように構成された固定カートリッジと、
b)機械式制御装置であって、
i.前記カートリッジ上に外部から力を加えて、前記少なくとも1つの試薬を放出させるように構成された第1の圧接手段と、
ii.除去可能な力を加えて、前記カートリッジの中に第1の方向の流体動きを誘発し、前記力が除去されると、前記第1の方向と反対方向の流体動きを引き起こすように構成された少なくとも1つの第2の圧接手段とを含む機械式制御装置と、
c)前記反応を検出するように構成された光学式読取り装置と、
d)前記光学式読取り装置からデータを受け取って、前記データを処理して前記化学性を決定するように構成されたプロセッサとを含むシステム。
(2)
前記カートリッジは、前記最少で1つのレポータ機能性の検出用に前記カートリッジ上の読取りチャネルを合わせるように構成されたアライメント手段をさらに備える、(1)に記載のシステム。
(3)
カートリッジは、複数の流体開放チャンネルをさらに備えており、前記チャネルは全て、互いに液体連通している、(1)に記載のシステム。
(4)
前記カートリッジは、流体試料を受け取った後、密封され、所定量の前記試料を、前記複数の流体開放チャンネルの少なくとも一部の中に通すように構成される、(3)に記載のシステム。
(5)
前記カートリッジは、前記流体チャネルの中に陰圧および陽圧の少なくとも1つを印加するように構成された、少なくとも1つの膨張可能、変形可能な弾性室をさらに備える、(4)に記載のシステム。
(6)
前記少なくとも1つの変形可能な弾性室は、密封された搭載格納室に格納された前記少なくとも1つの試薬を反応室内の所定量の前記試料にさらに接触させて、前記反応を誘発するように構成される、(5)に記載のシステム。
(7)
前記第1の圧接手段は、動くと前記格納チャンバ上のもろい密封部を破壊するように構成されるように、前記搭載された格納室に近接して配置される、(6)に記載のシステム。
(8)
前記アライメント手段は、前記所定量の前記試料の反応の検出用の前記カートリッジ上の読取りチャネルと合うように構成される、(7)に記載のシステム。
(9)
前記複数の流体開放チャンネルのいくつかは、0.1mm2から2mm2以下の断面である、(7)に記載のシステム。
(10)
前記所定量は、10マイクロリットルから500マイクロリットル以下の体積である、(8)に記載のシステム。
(11)
前記カートリッジは、複数の搭載された試薬を前記試料および反応生成物の前記少なくとも1つと接触させるように構成される、(1)に記載のシステム。
(12)
前記カートリッジは、前記複数の搭載された試薬と、前記試料および前記反応生成物の前記少なくとも1つとのカスケード連続反応を誘発するように構成される、(11)に記載のシステム。
(13)
前記カートリッジは、200マイクロリットルから10000マイクロリットル以下の容積の少なくとも1つの反応室を備える、(1)に記載のシステム。
(14)
前記カートリッジ外部の温度制御装置をさらに備え、前記装置が、前記反応の温度を制御するように構成される、(1)に記載のシステム。
(15)
前記カートリッジの保管寿命は、6カ月から24ヵ月以下である、(1)に記載のシステム。
(16)
前記カートリッジは、無弁である、(1)に記載のシステム。
(17)
前記検定は、フローサイトメトリー検定である、(1)に記載のシステム。
(18)
前記化学性は、生化学的状態である、(1)に記載のシステム。
(19)
前記生化学的状態は、生物学的状態を表している、(18)に記載のシステム。
(20)
前記試料は、生物学的試料である、(1)に記載のシステム。
(21)
前記生物学的試料は、生体試料である、(20)に記載のシステム。
(22)
前記生体試料は、血液、血清、血漿、尿、唾液、脳脊髄液(CSF)、漿液、腹膜流体、および滑液の血液、尿、血漿、血清、および唾液から成る前記群から選択される、(21)に記載のシステム。
(23)
前記カートリッジは、無弁である、(1)に記載のシステム。
(24)
前記カートリッジは、使い捨てマイクロ流体カートリッジである、(1)に記載のシステム。
(25)
前記試料は、毛管作用を利用して前記カートリッジに導入される、(1)に記載のシステム。
(26)
前記カートリッジは、以下の要素、すなわち
i.貯蔵器、
ii.ポンプ、
iii.導管、
iv.小型フローセル、
v.輸送チャネル、
vi.読取りチャネル、
vii.マイクロ流体要素、
viii.圧縮気体保持要素、
ix.圧縮気体放出要素、
x.ノズル要素、
xi.混合要素、
xii.蛇腹要素、
xiii.特定のシーケンスに従って前記要素を起動するように構成されたソフトウェア、および
xiv.特定のシーケンスに従って前記要素を起動するハードウェアの少なくとも1つを備える、(1)に記載のシステム。
(27)
前記カートリッジに配置されている前記少なくとも1つの試薬は、
a.少なくとも1つの目標抗体、
b.少なくとも1つのポジティブ制御識別抗体、および
c.少なくとも1つのネガティブ制御識別検出部分の少なくとも1つを備える、(1)に記載のシステム。
(28)
前記カートリッジに配置されている前記少なくとも1つの試薬は、
a.目標信号基準組成物、および
b.基準識別子組成物の少なくとも1つを備えた少なくとも1つの基準組成物を備える、(1)に記載のシステム。
(29)
前記カートリッジに配置されている前記少なくとも1つの試薬は、
a.ポジティブ制御部分、および
b.ネガティブ制御部分の少なくとも1つを備える、(1)に記載のシステム。
(30)
前記カートリッジに配置されている前記少なくとも1つの試薬は、少なくとも1つの敗血症バイオマーカを備える、(1)に記載のシステム。
(31)
被験対象の生物学的状態を決定する方法であって、前記方法は、
a.所定の期間、前記被験対象からの試料を(1)に記載の前記システムで温置すること、および
b.前記少なくとも1つのレポータ機能性に応答した表示を受け取り、それによって、前記化学性に従って前記被験対象の前記生物学的状態の表示を提供することから成る方法。
(32)
前記生物学的状態は、白血病、血小板減少症、免疫系疾患、局所感染、尿路障害、自己免疫性疾患、および敗血症などの血液疾患から選択される、(31)に記載の方法。
(33)
前記表示は、定量的である、(31)に記載の方法。
(34)
前記方法は、20分以内に完了される、(31)に記載の方法。
(35)
哺乳類の被験対象の生物学的状態を決定する方法であって、前記方法は、
a.前記被験対象が前記生物学的状態を有するとき、前記被験対象からの検体を(1)に記載のシステムで少なくとも1つの組成物と共に所定の期間温置して、少なくとも1つの反応生成物を形成すること、および
b.前記システムの少なくとも1つのレポータ要素に応答する前記少なくとも1つの反応生成物の表示を受け取り、それによって、前記被験対象の前記生物学的状態の前記表示を提供することから成る方法。
(36)
被験対象の敗血症の前記有無を確認する自動化された方法であって、
a.前記被験対象からの血液試料を(1)に記載される前記システムで敗血症マーカに特有の前記部分である蛍光標識結合部分と接触させることであって、前記血液試料の前記体積は、50μL以下である、前記被験対象からの血液試料を蛍光標識結合部分と接触させることと、
b.前記試料の前記結合部分の前記有無、またはレベルを検出し、それによって、20分以内に前記被験対象の敗血症の前記有無を確認することとから成る方法。
(37)
前記敗血症マーカは、CD64である、(36)に記載の方法。
(38)
前記敗血症マーカは、CD163である、(36)に記載の方法。
(39)
前記血液試料を第2の敗血症マーカに特有の第2の蛍光標識結合部分と接触させることをさらに含む、(36)に記載の方法。
(40)
前記敗血症マーカは、CD64であり、前記第2の敗血症マーカは、CD163である、(39)に記載の方法。
(41)
自蔵式固定カートリッジの化学性を決定する検定を行う方法であって、前記方法は、
a.試料を(1)に記載の前記システムに導入することと、
b.少なくとも1つの試薬を前記試料と反応させることと、
c.少なくとも1つのレポータ機能性に関連する信号を検出することであって、前記少なくとも1つのレポータ機能性は、前記少なくとも1つの試薬の前記試料との反応を報告するように構成されており、それによって前記化学性を決定する、少なくとも1つのレポータ機能性に関連する信号を検出することとから成る方法。
(42)
少なくとも1つの製品を形成して、前記製品に関連する信号を検出することをさらに含む、(41)に記載の方法。
(43)
前記検定は、フローサイトメトリー検定である、(41)に記載の方法。
(44)
前記化学性は、生化学的状態である、(41)に記載の方法。
(45)
前記生化学的状態は、生物学的状態を表している、(44)に記載の方法。
(46)
前記試料は、生物学的試料である、(41)に記載の方法。
(47)
前記生物学的試料は、生体試料である、(46)に記載の方法。
(48)
生前記体試料は、血液、血清、血漿、尿、唾液、脳脊髄液(CSF)、漿液、腹膜流体、および滑液から成る前記群から選択される、(47)に記載の方法。
(49)
前記少なくとも1つの試薬は、
a.細胞表面マーカ、
b.細胞染色、
c.固体担体と結合する試薬、
d.化学指示薬、および
e.生物学的細胞指示薬を備える、(41)に記載の方法。
(50)
前記細胞表面マーカは、CD64、CD4、CD8、幹細胞指示薬、微小残存病変指示薬、およびリンパ球亜型指示薬から成る前記群から選択される、(49)に記載の方法。
(51)
前記細胞染色は、白血球区別指示薬、アポトーシス指示薬から成る前記群から選択される、(49)に記載の方法。
(52)
前記固体担体と結合する前記試薬は、固定化酵素、固定化基質、血漿タンパクビーズ、抗体ビーズ、抗原ビーズ、およびELISA検定から成る前記群から選択される、(49)に記載の方法。
(53)
前記化学指示薬は、変色指示薬、比濁指示薬、pH指示薬、吸着指示薬、発光指示薬、および化学反応指示薬から成る前記群から選択される、(49)に記載の方法。
(54)
前記生物学的細胞指示薬は、細胞周期ステージ指示薬、細胞増殖指示薬、サイトカイン指示薬、代謝指示薬、およびアポトーシス指示薬から成る前記群から選択される、(49)に記載の方法。
(55)
前記少なくとも1つの試薬は、少なくとも2つの試薬を備える、(49)に記載の方法。
(56)
前記少なくとも2つの試薬は、
a.細胞表面マーカおよび細胞要素染色、
b.細胞表面マーカおよび血漿タンパクビーズ検定、
c.細胞表面マーカおよび溶液変化マーカ、
d.細胞要素染色および血漿タンパクビーズ検定、および
e.細胞要素染色および溶液変化マーカの少なくとも1つを備える、(55)に記載の方法。
(57)
前記生物学的状態は、白血病、血小板減少症免疫系疾患、局所感染、尿路障害、自己免疫性疾患、および敗血症などの血液疾患から選択される、(45)に記載の方法。
(58)
固定カートリッジの中で化学反応を形成する方法であって、前記方法は、
a.(1)に記載される前記カートリッジの中に少なくとも1つの組成物を格納すること、および
b.前記カートリッジの中の少なくとも1つの可膨張室を作動させて、前記少なくとも1つの試薬に少なくとも1つの気圧力をかけ、それによって前記化学反応を誘発することから成る方法。
Claims (11)
- 流体試料の化学的状態を決定する自動化された検定を実行する方法であって、前記方法は、
a)マイクロ流体用固定カートリッジに流体試料を供給するステップであって、前記マイクロ流体用固定カートリッジは、無弁であり複数の導管を備える構造を有する、該ステップと、
b)自動化された検定を実行するステップを含み、前記自動化された検定を実行するステップは、
i.前記カートリッジ上の蛇腹をアクチュエータで作動させて、前記カートリッジ内の第1のチャンバ内の少なくとも1つの組成物に少なくとも1つの圧力を印加して、前記少なくとも1つの組成物を前記流体試料の少なくとも一部と流動的に混合させて、第2のチャンバ内の10マイクロリットル〜1000マイクロリットルの体積の流体中に処理済み試料を形成するステップと、
ii.前記蛇腹を解放して、前記処理済み試料の前記第2のチャンバから前記第1のチャンバへの戻りを誘発させるステップと、
iii.少なくとも1つのレーザーから、ダイクロイックフィルタおよび集束レンズを介し、光路を介して、読取りチャネル内で前記処理済み試料に放射線を衝突させ、複数のスペクトルの異なる信号を形成するステップと、
iv.前方散乱検出アセンブリにおいて前記試料からの前方散乱を検出し、さらにマルチ発光検出器を用いて前記複数のスペクトルの異なる信号を検出するステップであって、前記複数のスペクトルの異なる信号は、少なくとも1つのレポータ機能性と関連しており、前記少なくとも1つのレポータ機能性は、前記流体試料の前記化学的状態の表示を提供するように適合されている、該ステップと、
v.前記マルチ発光検出器から出力されたデータを処理することによって、前記化学的状態を検出するステップとを含み、
前記検定は30分以内に達成されることを特徴とする方法。 - 前記少なくとも1つの圧力は、少なくとも1つの陽圧および少なくとも1つの陰圧を含むことを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの陽圧および少なくとも1つの陰圧は、交互に印加される陽圧および陰圧を含むことを特徴とする請求項2に記載の方法。
- 前記蛇腹は、少なくとも1つの膨張可能な室を備えることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 前記流体試料は、体液試料を含むことを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 前記検定が、前記体液試料を同定するフローサイトメトリー検定の結果を提供することを特徴とする請求項5に記載の方法。
- 前記体液試料が、哺乳動物の被験体から得られた試料であり、前記検定は、前記哺乳動物の被験体における生物学的状態を決定するために使用されることを特徴とする請求項6に記載の方法。
- 前記表示は、定量的な表示であることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 前記流体試料は、200マイクロリットル以下の体積であることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 前記検定により、細胞表面マーカが特定されることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 前記細胞表面マーカは、CD64、CD34、幹細胞指示薬、CD62、CD20、およびCD4、から成る群から選択されることを特徴とする請求項10に記載の方法。
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