JP6850255B2 - 抗−cd47抗体及びその使用 - Google Patents
抗−cd47抗体及びその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6850255B2 JP6850255B2 JP2017535814A JP2017535814A JP6850255B2 JP 6850255 B2 JP6850255 B2 JP 6850255B2 JP 2017535814 A JP2017535814 A JP 2017535814A JP 2017535814 A JP2017535814 A JP 2017535814A JP 6850255 B2 JP6850255 B2 JP 6850255B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- amino acid
- cell
- seq
- antibodies
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39541—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against normal tissues, cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
本願は、2015年12月27日に作製され、87,612バイトのサイズを有する、ファイル名「Sequence_Listing_12827-563-228.txt」のテキストファイルとして本願と共に提出された配列表を、引用により組み込んでいる。
CD47に特異的に結合する抗体(抗-CD47抗体)、並びに医薬組成物、診断組成物を含む、かかる抗体を含有する組成物、及びキットが、本明細書に提供される。治療及び診断目的で抗-CD74抗体を使用する方法、並びに例えば無細胞(CF)系により、かかる抗-CD47抗体を作製する方法も、提供される。
CD47は、インテグリン結合タンパク質(IAP)、卵巣癌抗原OA3、Rh-関連抗原及びMER6としても知られており、これは免疫グロブリンスーパーファミリーに属するマルチスパニング膜貫通受容体である。マクロファージ上に発現されたSIRPα(シグナル-制御-タンパク質α)は、CD47と相互作用し、且つこの相互作用は、宿主細胞貪食などの、先天性免疫細胞のエフェクター機能を負制御する。CD47発現及び/又は活性は、数多くの疾患及び障害に関与している。従って、CD47を標的とする療法、並びにかかる療法を製造するより良い方法の必要性が存在する。
一態様において、CD47の細胞外ドメイン(ECD)などの、CD47(例えば、ヒトCD47)に特異的に結合する、それらの抗原-結合断片を含む抗体(例えば、モノクローナル抗体)が、本明細書に提供される。具体的態様において、かかる抗-CD47抗体は、SIRPαへのCD47結合をブロックし、貪食を促進し、Fcエフェクター機能(例えば、FcγRへの結合、ADCC、もしくはCDC)を低下するか又は機能を持たず、並びに/又は凝集(例えば、血球凝集)活性をほとんど又は全く有さない。
一態様において、CD47(例えばヒトCD47)に特異的に結合する、抗体(例えば、モノクローナル抗体)、及びその抗原-結合断片が、本明細書に提供される。具体的態様において、かかる抗-CD47抗体は、SIRPαへのCD47結合をブロックし、貪食を促進し、Fcエフェクター機能(例えば、FcγRへの結合、ADCC、もしくはCDC)を低下するか又は機能を持たず、並びに/又は凝集(例えば、血球凝集)活性をほとんど又は全く有さない。
具体的態様において、CD47(例えばヒトCD47)へ特異的に結合する抗体が、本明細書に提供される。特定の態様において、驚くべきことに修飾のない親抗体よりも無細胞(CF)発現系においてより良く生成されることが可能である、1以上のアミノ酸残基の修飾(例えば、重鎖可変領域のフレームワーク領域内の5-13アミノ酸置換)を含む抗-CD47抗体が、本明細書に提供される。いくつかの態様において、かかる抗-CD47抗体は、CD47とSIRPαの相互作用を阻害し、グリコシル化されず、インビボもしくはインビトロのいずれか又は両方において、貪食を促進し、抗-腫瘍活性を有し(例えば、血球凝集などの凝集を促進することなく)、及び/又はFcエフェクター機能(例えば、FcγRへの結合、ADCC、もしくはCDC)を低下するか又は機能を持たない。
CD47(例えば、ヒトCD47のECD)に免疫特異的に結合する本明細書記載の抗体又は抗原-結合断片は、当該技術分野において公知の任意の方法、例えば化学合成によるか又は組換え発現技術(例えば、CF発現系)により、生成することができる。
いくつかの態様において、CD47抗原に免疫特異的に結合する本明細書記載の抗体又はその断片(例えば、可変軽鎖領域及び/又は可変重鎖領域)をコードしているヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド、並びにベクター、例えば宿主細胞(例えば、大腸菌及び哺乳動物の細胞)における組換え発現のためのかかるポリヌクレオチドを含むベクターが、本明細書に提供される。いくつかの態様において、細胞(例えば、宿主細胞)が、本明細書に提供される。同じく、本明細書記載の抗体及び抗原-結合断片を作製する方法が、本明細書に提供される。
いくつかの態様において、CD47及び関連ポリヌクレオチド及び発現ベクターへ、例えばCF発現系における使用に適しているポリヌクレオチド及び発現ベクターへ特異的に結合する、本明細書記載の抗体(又はそれらの抗原-結合断片)を(例えば、組換え的に)発現している細胞(例えば宿主細胞)が、本明細書に提供される。CF発現系における組換え発現のための抗-CD47抗体又は断片をコードしているヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを含む、ベクター(例えば発現ベクター)が、本明細書に提供される。特定の態様において、例えば改善された抗体発現力価又は収量を生じる条件下で、CF発現系を使用し、かかる抗体を発現することを含む、本明細書記載の抗-CD47抗体を生成する方法が、本明細書に提供される。
1以上の本明細書記載の抗体(例えば、抗-CD47抗体)、又はその抗原-結合断片、又はその複合体を含有する組成物、医薬組成物、及びキットが、本明細書に提供される。特定の態様において、本明細書記載の組成物(例えば、医薬組成物)は、インビトロ、インビボ、又はエクスビボにおける用途のためであることができる。用途の非限定的例は、CD47活性を調節(例えば、阻害又は誘導/増強)する用途、並びに障害、例えば癌の管理又は治療のための用途を含む。具体的実施態様において、本明細書記載の抗体(例えば、ヒト化抗体)(又はその抗原-結合断片)、及び医薬として許容し得る担体又は賦形剤を含有する医薬組成物が、本明細書に提供される。
特定の態様において、本明細書記載の抗-CD47抗体又はその抗原-結合断片により、CD47活性を調節する方法が、本明細書に提供される。
一態様において、ヒトCD47のECDへ特異的に結合する、本明細書記載の抗-CD47抗体及びその抗原-結合断片は、癌(例えば、結腸直腸癌、胃癌、肺癌、又はメラノーマ)などの、本明細書記載の状態(例えば、CD47及び/又は異常なCD47シグナル伝達及び/又は異常なCD47発現に関与する状態)を検出、診断、又はモニタリングするため、診断目的で使用することができる。具体的実施態様において、診断目的で使用される本明細書記載の抗-CD47抗体又はその抗原-結合断片は、標識される。本明細書記載の状態を検出、診断、又はモニタリングするために診断目的で本明細書に提供される方法は、インビトロ方法、インサイチュ方法、又はエクスビボ方法であることができる。本明細書記載の状態を検出、診断、又はモニタリングするために診断目的で本明細書に提供される方法は、インビボ方法であることができる。
(a)患者由来の生物学的試料を、1以上の本明細書記載の抗体又はその抗原-結合断片と接触させる工程;
(b)抗体又は抗原-結合断片の、CD47への結合を検出し、患者由来の生物学的試料中のCD47タンパク質レベルを決定する工程;並びに、
(c)このCD47タンパク質レベルを、標準CD47タンパク質レベルと比較する工程:を含む。
(a)患者由来の生物学的試料を、1以上の本明細書記載の抗体又はそれらの抗原-結合断片と接触させる工程;
(b)抗体又は抗原-結合断片の、CD47への結合を検出し、患者由来の生物学的試料中のCD47タンパク質レベルを決定する工程;並びに、
(c)このCD47タンパク質レベルを、標準CD47タンパク質レベルと比較する工程:を含む。
本節(すなわち、第6節)の実施例は、例証のために提供されるものであり、限定のために提供されるものではない。
抗-CD47抗体AB6.12の重鎖及び軽鎖の効率の悪い集成が、無細胞(CF)系において共発現される場合に認められる。このプロセスを向上する一つの方策は、重鎖反応へ折り畳まれた軽鎖を予め添加することを含む。別の方策において、重鎖フレームワーク配列修飾は、驚くべきことにCF系における抗-CD47抗体の重鎖及び軽鎖のより効率的な集成及び共-発現を生じた。重鎖フレームワーク配列修飾を伴うこれらの抗-CD47抗体の特徴決定を、以下により詳細に説明している。
DsbC(2X DsbC)の過剰-発現を伴う無細胞抽出物を、室温まで解凍し、50μMヨードアセトアミドと共に30分間インキュベーションした。30%(v/v)ヨードアセトアミド-処理した抽出物を、8mMグルタミン酸マグネシウム、10mMグルタミン酸アンモニウム、130mMグルタミン酸カリウム、35mMピルビン酸ナトリウム、1.2mM AMP、0.86mMのGMP、UMP、及びCMPの各々、0.5mMで添加したチロシンを除く19種アミノ酸全てについて2mMアミノ酸、4mMシュウ酸ナトリウム、1mMプトレシン、1.5mMスペルミジン、15mMリン酸カリウム、100nM T7 RNAP、及び2mM酸化型グルタチオン(GSSG)と共に含む、無細胞反応を、30℃で最大10時間試行した。この反応物中の重鎖プラスミド及び軽鎖プラスミドの濃度は、各々、7.5μg/mL及び2.5μg/mLであった。合成されたタンパク質を14Cで標識するために、3.33%(v/v)l-[U-14C]-ロイシン(300mCi/mmole;GE Life Sciences社、ピスカタウェイ、NJ)を、更にこの反応物へ添加した。この実験において、同じ軽鎖(LC)、配列番号:13と対形成した下記の重鎖(HC)が発現された。
IgG1-5m及びIgG1-13mZなどの、IgG1変種抗体の大規模CF生成、並びに精製を、実行した。大規模条件は、下記表(例えば、表3-6)により詳細に説明している。両方の変種は、本質的に同じ方法で作製し:最も著しい差は、反応温度であった。IgG1-5mは、25℃で発現させ、及びIgG1-13mZは、30℃で試行した。IgG1-13mZは、25℃と30℃で同様の結果を示したが、IgG1-5mは、30℃に対し、25℃でより高い力価を示した。これら2つの変種間の反応の時機のわずかな差は、単純に、日程計画の都合の結果であり、恐らくこのプロセスに著しい影響は有さないであろう。異なる抽出物を、特定の抽出物必要要件を基にするのではなく、抽出物の入手しやすさを基に、これらの変種について使用した。DsbCの過剰-発現を伴う任意の抽出物は、これらの生成物と同様に作用すると予想される。
S30無細胞抽出物を、50μMヨードアセトアミド(IAM)により、室温で30分間処理した。この処理後、抽出物を、表3の試薬と一緒にし、バイオリアクター(Dci-BioLafitte Evo Bioreactor、最大作業容積10L)に移した。バイオリアクターの制御は、表4に列挙したように構成した。反応の6時間後、追加の5mM(最終濃度)酸化型グルタチオンを、この反応物に添加した。酸化型グルタチオンは、250mMストック溶液として調製し、リアクターへの添加前に、pHを7〜8の間に調節した。この反応を、合計15時間試行し、その後下流の処理へ移した。
S30無細胞抽出物を、50μMヨードアセトアミド(IAM)により、室温で30分間処理した。この処理後、抽出物を、表5の試薬と一緒にし、バイオリアクター(Sartorius Biostat Q Bioreactor、最大作業容積500mL)に移した。バイオリアクターの制御は、表6に列挙したように構成した。反応の5.5時間後、追加の5mM(最終濃度)酸化型グルタチオンを、この反応物に添加した。酸化型グルタチオンは、250mMストック溶液として調製し、リアクターへの添加前に、pHを7〜8の間に調節した。この反応を、合計15.7時間試行し、その後下流の処理へ移した。
材料及び方法:
固定:抗-ヒトFc(AHC)表面を、モノクローナルマウス抗-ヒトFc IgG(ビアコアヒト抗体捕獲キットに含まれている、GE Life Sciences社カタログ番号BR-1008-39)を、ビアコアCM5センサーチップ表面へ、アミン-カップリングさせることにより、調製した。固定化手順のための試行緩衝液は、HBS-EP+(10mM HEPES、150mM NaCl、3mM EDTA、界面活性剤として0.05%v/v P-20)であった。以下を、4つ全てのフローセルにおいて行い、表面アミン-カップリングした抗-ヒトFc IgGを調製した。CM5チップ表面は、400mM EDC及び100mM NHSの1:1(v/v)混合物の、7分間にわたる、10μL/分での注入により、活性化した。この処理の後、抗-ヒトIgGを、10mM酢酸ナトリウム緩衝液pH5.0中に、25μg/mLに希釈し、全てのフローセルに10μL/分で7分間注入した。次に、エタノールアミンを、10μL/分で7分間注入し、その表面全てをブロックした。この手順は、センサーチップ上に、〜10,000−11,000 RUの固定化レベルを生じた。
表7:ビアコア結果のまとめ
結合曲線を得るために、試料変種を、各試料について〜66nMの高濃度から出発し、FACS緩衝液(PBS 2%FCS)中、1:2で力価決定した。0.1×106個CCRF-EM細胞を、96ウェルプレートに播種し、これを指定された濃度の試料変種を含有するFACS緩衝液50μl中で、氷上で1時間インキュベーションした。次に細胞を、FACS緩衝液150μlで洗浄し、1:100に希釈した二次抗体(抗-ヒト-IgG-PE、Jackson ImmunoResearch社)を含有するFACS緩衝液50μl中で、氷上で1時間インキュベーションした。次に細胞を、FACS緩衝液により洗浄し、2%PFA中で固定し、LSR II、DBフローサイトメーター(BD Biosciences社、サンノゼ、CA)により獲得した。フローサイトメトリー分析は、FloJoソフトウェアバージョン9.6.4を使用し、行った。力価決定曲線及びKdを得るために、平均蛍光強度(MFI)値を、濃度(nM)に対してプロットした。Kd値を、Prism 6、非線形回帰曲線フィッティング解析、ヒル勾配を伴う1サイト特異的結合を用いて計算した。
表8:
ヒトマクロファージの作製:ヒト末梢血単核細胞(PBMC)を、Stanford Blood Center(パロアルト、CA, USA)から購入したバフィーコート(遠心分離で沈降させた後の、全血の単位中の赤血球と血漿の間の白色層)から単離した。バフィーコートは、PBSで2倍希釈し、50ml Leucosepチューブ(Greiner Bio One社、モンロー、NC, USA)中で15ml NycoPrep 1.077 (Axis-Shield社、ダンディ、スコットランド)上に積層し、1,000×gで20分間遠心した。PBMCを境界面から収集し、35ml PBSで洗浄し、250×gで5分間遠心した。夾雑している赤血球を、10ml ACK溶解緩衝液(Lonza社、アレンデール、NJ, USA)により2分間溶解し、細胞を、40ml PBSにより希釈し、40μm細胞ストレイナー(BD Biosciences社、サンノゼ、CA, USA)を通過させた。細胞を、250×gで5分間遠心し、10%FBS、2mMグルタミン及びペニシリン−ストレプトマイシンを含有するRPMI培地30ml中に再浮遊させた。PBMCをカウントし、且つRPMI培地において、5×106個細胞/mlで一晩培養した。翌日、CD14-陽性単球を、AutoMacs Proを用い、CD14マイクロビーズ(Miltenyi Biotech社、オーバーン、CA, USA)により単離し、且つ50ng/ml M-CSF(Peprotech社、ロッキーヒル、NJ, USA)を含有するRPMI培地において、5〜7日間培養し、分化したマクロファージを得た。細胞を、Recovery Cell Culture Freezing Medium(Life Technologies社、グランドアイランド、NY, USA)中で凍結させた。
公開された試験は、いくつかの抗-CD47抗体は、ヒト赤血球(RBC)の血球凝集を引き起こし得ることを示唆している。従って、血球凝集アッセイを、抗-CD47抗体のRBCの凝集を促進する能力を特徴付けるために実行した。
方法:96-ウェル高タンパク質結合ELISAプレート(MaxSorp Nunc社)を、0.05M炭酸水素ナトリウム緩衝液(pH9)中に希釈した試料抗-CD47抗体変種により、4℃で一晩コーティングした。試料を、133.4nM(20μg/ml)の高濃度に希釈し、11-ポイント希釈曲線において1:2力価決定した。プレートを、PBS、0.05%Tween 20で3回洗浄し、ELISA希釈剤(0.1M NAPO4、0.1M NaCl、0.1%ゼラチン、0.05%Tween 20、0.05% ProClin300)により、室温で1時間ブロックした。次にプレートを、再度3回洗浄し、ELISA希釈剤中に希釈した2μg/mLヒトC1q(AbD Serotec 2221-5504、1mg/mLストック)と共に、室温で2時間インキュベーションした。次にプレートを、3回洗浄し、ELISA希釈剤中に1:200希釈したヒツジ抗-ヒトC1q HRP(AbD Serotec 2221-5004P)と共に、室温で1時間インキュベーションし、結合したC1qを検出した。次にプレートを、3回洗浄し、次にTMB溶液100μLを添加した。1Mリン酸の100μlの添加により、反応をクエンチし、プレートを、450nMで測定した。対数(インヒビター)、対、反応-可変勾配(4つのパラメータ)を伴う非線形回帰として、Prism6を用い、データをプロットした。
表10:
方法:CD47-発現している細胞株(Raji及び/又はCCRF)を収集し、CDC緩衝液(RPMI 1640、L-グルタミン(100×ストック液)、及び1%BSA)中に、30万個細胞/mLで再浮遊させた。次に細胞を、96ウェル白色組織培養プレート(Falcon社)の1ウェル当たり10,000個細胞で播種し、最終濃度CDC緩衝液中10μg/mLの試料抗-CD47抗体変種と一緒に、37℃で1時間インキュベーションした。スピンフィルター(Costar SpinX微小遠心管)を使用し、残存する夾雑物を除去した。次にウサギ(7.5%)又はヒト(30%)血清を、それぞれ、最終濃度2.5%及び10%で添加し、37℃で2時間インキュベーションした。血清を、CDCアッセイ緩衝液中に希釈した。次に細胞死を、Cell Tox Gloキット(Promega G292)を、製造業者の指示に従い用い、測定した。プレートを、Envisionルミネセントプレートリーダー(Luminescent 96ウェル完全面積プログラム)上で読み取り、
(処理細胞−自発細胞)/(総溶解−自発溶解)×100
として、パーセントCDC活性を処理した。
表11:
方法:PBCを、バフィーコートから調製した。バフィーコートを、PBSにより2-倍希釈し、50ml Leucosepチューブ(Greiner Bio One社、モンロー、NC, USA)中の15ml NycoPrep 1.077(Axis-Shield社、ダンディ、スコットランド)上に積層し、1,000×gで20分間遠心した。PBMCを、境界面から収集し、35ml PBSにより洗浄し、250×gで5分間遠心した。夾雑している赤血球を、10ml ACK溶解緩衝液(Lonza社、アレンデール、NJ, USA)により2分間溶解し、細胞を、40ml PBSで希釈し、40μm細胞ストレイナー(BD Biosciences社、サンノゼ、CA, USA)を通過させた。細胞を、250×gで5分間遠心させ、10%FBS、2mMグルタミン及びペニシリン−ストレプトマイシンを含有するRPMI培地30ml中に再浮遊させた。10,000個のCCRF-CEM細胞又はSKBR3細胞を、96ウェルU字底ポリプロピレンプレート中の各ウェル当たり300,000個PBMCと共に共培養した。PBMCは、Stanford血液センターから受け取ったヒトバフィーコートから調製した。最高濃度22.2nMから開始する試料変種の3倍希釈物を、各ウェルに2つ組で添加し、37℃で3時間インキュベーションした。次に細胞を、製造業者の指示に従い、50μLのGlo試薬により溶解した。プレートを、Envisionルミネセントプレートリーダー(Luminescent 96ウェル完全面積プログラム)上で測定した。ADCC活性%は、
(処理細胞−自発細胞)/(総溶解−自発溶解)×100
として、計算した。
表12:
方法:示差走査熱量測定(DSC)を、GE VPキャピラリーDSC装置において行った。分析を、60℃/時加熱ランプにより、20〜100℃で、行った。フィードバックモードは無効(disable)であり、フィルタリング期間10秒を利用した。プレ-走査サーモスタット(thermostating)は、5分に設定した。全ての試料は、下記緩衝液中、濃度1mg/mLで試験した:50mM L-ヒスチジン、150mM NaCl、2%トレハロース、pH6.0。
1)IgG1-13mZ
2)IgG1-13m
3)IgG1-5m。
表13
1)IgG4PE-5m
2)IgG4P-5m
3)IgG4PE CHO。
方法:抗-CD47抗体IgG4-PE CHO、IgG1-CF及びIgG1-5m-CFを、ボーラス静脈内注射により、マウスへ、各々、投与量レベル3.0、3.0及び2.5mg/kgで投与した。血漿試料を、投与後28日間(672時間)にわたる時間の選択された時点で収集し、且つ各タンパク質の濃度を、免疫学的検定により決定した。次に薬物動態パラメータを、WinNonlin ‘v’ 5.3, Phoenix 64 (Certara社、CA)による、非-コンパートメント法を用いて計算した。AUCを、曲線の上昇する部分については線形台形則を、及び下降する部分については対数台形則を用いて計算した。終末相半減期は、血漿濃度の対数、対、時間の回帰から決定した。この回帰に使用したポイントの数は、3つの終末相時間ポイントの最小値を使用する、データの目視検査により決定した。初期分布容積は、ゼロ時まで外挿した投与量/血漿濃度から計算した。全ての他のパラメータは、標準法を使用し、WinNonlinにおいて計算した。
無細胞系により生成された抗-CD47抗体の抗-腫瘍活性を、ヒト骨髄腫細胞株RPMI8226による異種移植腫瘍モデルを使用し、インビボにおいて試験した。
本件出願は、以下の構成の発明を提供する。
(構成1)
ヒトCD47に特異的に結合するモノクローナル抗-CD47抗体であって、該抗-CD47抗体が、無細胞系を使用し生成される場合、該無細胞系を使用し生成された親抗体と比べ、より高い抗体発現力価又は収量を有する、前記モノクローナル抗-CD47抗体。
(構成2)
前記抗体発現力価又は収量が、親抗体と比べ、少なくとも1倍、少なくとも2倍、又は少なくとも3倍だけ高い、構成1記載の抗-CD47抗体。
(構成3)
ヒト化抗体である、構成1記載の抗-CD47抗体。
(構成4)
IgG1抗体である、構成1記載の抗-CD47抗体。
(構成5)
IgG4抗体である、構成1記載の抗-CD47抗体。
(構成6)
EUナンバリングインデックスに従いS228Pアミノ酸置換を含む、IgG4抗体である、構成1記載の抗-CD47抗体。
(構成7)
EUナンバリングインデックスに従いS228P及びL235Eアミノ酸置換を含むIgG4抗体である、構成1記載の抗-CD47抗体。
(構成8)
前記親抗体が、配列番号:1のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、構成1〜7のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成9)
前記親抗体が、配列番号:12のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、構成8記載の抗-CD47抗体。
(構成10)
前記親抗体が、配列番号:2、3又は4のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、構成1記載の抗-CD47抗体。
(構成11)
(i)抗体2A1の相補性決定領域(CDR)1、2、及び3を含む、重鎖可変領域;並びに、(ii)抗体2A1のCDR1、CDR2、及びCDR3を含む、軽鎖可変領域:を含む、構成1記載の抗-CD47抗体。
(構成12)
(i)各々、アミノ酸配列
(化1)
を含む相補性決定領域(CDR)1、2、及び3を含む、重鎖可変領域;並びに、(ii)各々、アミノ酸配列
(化2)
を含むCDR1、CDR2、及びCDR3を含む、軽鎖可変領域:を含む、構成1記載の抗-CD47抗体。
(構成13)
前記親抗体に対する1以上のアミノ酸修飾を含む、構成1〜12のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成14)
前記1以上のアミノ酸置換が、重鎖可変領域又は軽鎖可変領域のフレームワーク領域内にある、構成13記載の抗-CD47抗体。
(構成15)
前記重鎖可変領域のフレームワーク領域内の13又は14アミノ酸修飾を含む、構成13記載の抗-CD47抗体。
(構成16)
前記重鎖可変領域のフレームワーク領域内の1〜15アミノ酸修飾を含む、構成13記載の抗-CD47抗体。
(構成17)
前記アミノ酸修飾が、保存的アミノ酸置換である、構成13〜16のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成18)
アミノ酸配列:
(化3)
を含む重鎖可変領域(V H )を含み、ここで、位置X 1 のアミノ酸は、任意のアミノ酸であるか、又は位置X 1 にはアミノ酸が存在せず、且つ位置X 2 -X 14 の各々のアミノ酸は、任意のアミノ酸である、構成1〜12のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成19)
前記X 1 はMであるか、又は位置X 1 にはアミノ酸が存在せず、X 2 は、M又はVなどの疎水性側鎖を伴うアミノ酸であり、X 3 は、T又はPであり、X 4 は、S又はAであり、X 5 は、A又はGなどの脂肪族型側鎖を有するアミノ酸であり、X 6 は、F又はLであり、X 7 は、D又はGであり、X 8 は、I又はMなどの疎水性側鎖を伴うアミノ酸であり、X 9 は、R又はTであり、X 10 は、R又はTであり、X 11 は、M又はTであり、X 12 は、S又はRであり、X 13 は、E又はDなどの負帯電したアミノ酸であり、並びにX 14 は、M又はVなどの疎水性側鎖を伴うアミノ酸である、構成18記載の抗-CD47抗体。
(構成20)
前記V H が、配列番号:21のアミノ酸配列を含む、構成18又は19記載の抗-CD47抗体。
(構成21)
前記V H が、配列番号:22のアミノ酸配列を含む、構成18又は19記載の抗-CD47抗体。
(構成22)
配列番号:5のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、構成18又は19記載の抗-CD47抗体。
(構成23)
配列番号:6のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、構成18又は19記載の抗-CD47抗体。
(構成24)
配列番号:7のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、構成18又は19記載の抗-CD47抗体。
(構成25)
配列番号:8のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、構成18又は19記載の抗-CD47抗体。
(構成26)
配列番号:9のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、構成18又は19記載の抗-CD47抗体。
(構成27)
配列番号:10のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、構成18又は19記載の抗-CD47抗体。
(構成28)
配列番号:11のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、構成18又は19記載の抗-CD47抗体。
(構成29)
配列番号:13又はN-末端のアミノ酸Mを伴わない配列番号:13のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、構成18〜28のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成30)
投与後に実質的な赤血球枯渇、貧血、又は赤血球枯渇と貧血の両方を引き起こさない、構成1〜29のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成31)
投与後に実質的な血小板枯渇を引き起こさない、構成30記載の抗-CD47抗体。
(構成32)
投与後に実質的な細胞凝集を引き起こさない、構成30記載の抗-CD47抗体。
(構成33)
投与後に実質的な赤血球の血球凝集を引き起こさない、構成30記載の抗-CD47抗体。
(構成34)
CD47が、シグナル-制御-タンパク質α(SIRPα)と相互作用するのを阻害する、構成1〜33のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成35)
CD47-発現細胞のマクロファージ媒介性貪食を促進する、構成1〜34のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成36)
有意なレベルのエフェクター機能を引き起こさない、構成1〜35のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成37)
無細胞系を使用し発現される場合に、CHO細胞を使用して発現された場合よりも、FcγRへより低い結合親和性を示すか、又は結合しない、構成1〜36のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成38)
前述のより低い結合親和性が、少なくとも1 logより低いか又は少なくとも2 logより低い、構成37記載の抗-CD47抗体。
(構成39)
前記FcγRが、FcγRI、FcγRIIA R131、FcγRIIA H131、FcγRIIB、又はFcγRIIIA V158である、構成37又は38記載の抗-CD47抗体。
(構成40)
無細胞系を使用し発現される場合に、CHO細胞において発現された場合と比べ、グリコシル化されないか、又はより少ないグリコシル化を有する、構成1〜39のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成41)
(i)CD47-発現細胞のマクロファージ媒介性貪食を促進し;(ii)投与後有意なレベルの赤血球の血球凝集を引き起こさず;及び/又は、(iii)有意なレベルのADCC又はCDCを引き起こさないかもしくは促進しない、構成1〜40のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成42)
前記無細胞系が、S30無細胞抽出物を使用することを含む、構成1〜41のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成43)
前記S30無細胞抽出物が、原核生物のジスルフィド結合イソメラーゼDsbCを含む、構成42記載の抗-CD47抗体。
(構成44)
二重特異性抗体である、構成1〜43のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成45)
物質にコンジュゲートされている、構成1〜44のいずれか1記載の抗-CD47抗体。
(構成46)
前記物質が、標識又は毒素である、構成45記載の抗-CD47抗体。
(構成47)
治療的有効量の、構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体又はその抗原-結合断片を含有する、医薬組成物。
(構成48)
医薬として許容し得る担体を更に含有する、構成47記載の医薬組成物。
(構成49)
構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体の、VH鎖領域、VL鎖領域、又はVL鎖領域とVH鎖領域の両方をコードしているヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチド。
(構成50)
構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体の重鎖、軽鎖、又は重鎖と軽鎖の両方をコードしているヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチド。
(構成51)
重鎖をコードしている配列番号:26-32のいずれか一つのヌクレオチド配列を含む、構成50記載のポリヌクレオチド。
(構成52)
軽鎖をコードしている配列番号:33のヌクレオチド配列を含む、構成50記載のポリヌクレオチド。
(構成53)
(i)構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体のVH又は重鎖をコードしているヌクレオチド配列を含む第一のポリヌクレオチド、及び(ii)構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体のVL又は軽鎖をコードしているヌクレオチド配列を含む第二のポリペプチド:を含む、ポリヌクレオチド集団。
(構成54)
前記第一のポリヌクレオチドが、第一のプロモーターへ機能的に連結され、並びに第二のポリヌクレオチドが、第二のプロモーターへ機能的に連結されている、構成53記載のポリヌクレオチド集団。
(構成55)
構成49〜52のいずれか1記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
(構成56)
(i)構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体のVH又は重鎖をコードしているヌクレオチド配列を含む第一のベクター、及び(ii)構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体のVL又は軽鎖をコードしているヌクレオチド配列を含む第二のベクター:を含む、ベクター集団。
(構成57)
無細胞抽出物及び構成55記載の1種以上のベクターを含有する、無細胞タンパク質発現のための組成物。
(構成58)
S30無細胞抽出物を更に含有する、構成57記載の組成物。
(構成59)
原核生物のジスルフィド結合イソメラーゼDsbCを更に含有する、構成57又は58記載の組成物。
(構成60)
それを必要とする対象に、構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体を、該対象における癌の治療に十分な量で投与することを含む、癌を治療する方法。
(構成61)
それを必要とする対象に、構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体を、該対象における癌の1以上の症状を緩和するのに十分な量で投与することを含む、癌の症状を緩和する方法。
(構成62)
放射線又は化学療法を施すことを更に含む、構成60又は61記載の方法。
(構成63)
別の抗癌剤を投与することを更に含む、構成60、61、又は62記載の方法。
(構成64)
前記癌が、血液癌である、構成60〜63のいずれか1記載の方法。
(構成65)
前記癌が、固形癌である、構成60〜63のいずれか1記載の方法。
(構成66)
前記癌が、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、急性骨髄性白血病(AML)、乳癌、膀胱癌、非小細胞肺癌/癌腫、肝細胞癌(HCC)、肉腫、又は頭頸部癌である、構成60〜63のいずれか1記載の方法。
(構成67)
構成49〜52のいずれか1記載のポリヌクレオチドを含む、単離された細胞。
(構成68)
構成53又は54記載のポリヌクレオチド集団を含む、単離された細胞。
(構成69)
構成55記載のベクターを含む、単離された細胞。
(構成70)
構成56記載のベクター集団を含む、単離された細胞。
(構成71)
構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体又は抗原-結合断片を生成する、単離された細胞。
(構成72)
(i)構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体のVH又は重鎖をコードしているヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを含む第一の宿主細胞、及び(ii)構成1〜46のいずれか1記載の抗-CD47抗体のVL又は軽鎖をコードしているヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを含む第二の宿主細胞:を含む、宿主細胞集団。
(構成73)
構成57〜59のいずれか1記載の無細胞タンパク質発現のための組成物により、抗-CD47抗体を発現することを含む、抗-CD47抗体を作製する方法。
(構成74)
構成67〜71のいずれか1記載の細胞により、抗-CD47抗体を発現することを含む、抗-CD47抗体を作製する方法。
(構成75)
前記抗-CD47抗体を精製することを更に含む、構成73又は74記載の方法。
Claims (43)
- ヒトCD47に特異的に結合するモノクローナル抗-CD47抗体であって、
(a)該抗-CD47抗体は、アミノ酸配列:
ここで、X1はMであるか、又は位置X1にはアミノ酸が存在せず、X2はM又はVであり、X3はPであり、X4はS又はAであり、X5はA又はGであり、X6はF又はLであり、X7はGであり、X8はI又はMであり、X9はR又はTであり、X10はR又はTであり、X11はTであり、X12はRであり、X13はE又はDであり、並びにX14はVであり、かつ
(b)該抗-CD47抗体は、配列番号:13のアミノ酸配列又はN-末端のアミノ酸Mを伴わない配列番号:13のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、前記モノクローナル抗-CD47抗体。 - X1はMであるか、又は位置X1にはアミノ酸が存在せず、X2はMであり、X3はPであり、X4はSであり、X5はGであり、X6はFであり、X7はGであり、X8はIであり、X9はRであり、X10はRであり、X11はTであり、X12はRであり、X13はEであり、並びにX14はVである、請求項1記載の抗-CD47抗体。
- 前記抗-CD47抗体が、無細胞系を使用し生成される場合、該無細胞系を使用し生成された親抗-CD47抗体の発現力価又は収量よりも高い発現力価又は収量を有し、該親抗-CD47抗体が、配列番号:1のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、又は、配列番号:2、3又は4のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項1記載の抗-CD47抗体。
- 前記抗体発現力価又は収量が、前記親抗体と比べ、少なくとも1倍、少なくとも2倍、又は少なくとも3倍だけ高い、請求項3記載の抗-CD47抗体。
- IgG1抗体又はIgG4抗体である、請求項1記載の抗-CD47抗体。
- EUナンバリングインデックスに従い、S228Pアミノ酸置換を含むか、又は、S228P及びL235Eアミノ酸置換を含む、IgG4抗体である、請求項1記載の抗-CD47抗体。
- 前記親抗体が、配列番号:1のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、請求項3〜4のいずれか一項記載の抗-CD47抗体。
- 前記親抗体が、配列番号:12のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項7記載の抗-CD47抗体。
- 配列番号:1のアミノ酸配列の前記重鎖可変領域のフレームワーク領域内の13又は14アミノ酸修飾を含む、請求項1〜9のいずれか一項記載の抗-CD47抗体。
- 配列番号:1のアミノ酸配列の重鎖可変領域内の10アミノ酸修飾を含む、請求項1〜9のいずれか一項記載の抗-CD47抗体。
- 前記VHが、配列番号:21又は22のアミノ酸配列を含む、請求項1記載の抗-CD47抗体。
- 配列番号:5、6、7、8、9、10又は11のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項1記載の抗-CD47抗体。
- (i) 投与後に実質的な赤血球枯渇、貧血、又は赤血球枯渇と貧血の両方を引き起こさない、
(ii) CD47がシグナル-制御-タンパク質α(SIRPα)と相互作用するのを阻害する、
(iii) CD47-発現細胞のマクロファージ媒介性貪食を促進する、
(iv) 有意なレベルのエフェクター機能を引き起こさない、又は
(v) 有意なレベルのADCC又はCDCを引き起こさない又は促進しない、請求項1〜13のいずれか一項記載の抗-CD47抗体。 - 投与後に実質的な赤血球枯渇、貧血、又は赤血球枯渇と貧血の両方を引き起こさず、かつ投与後に実質的な血小板枯渇、細胞凝集又は赤血球の血球凝集を引き起こさない、請求項14記載の抗-CD47抗体。
- (i) 無細胞系を使用し発現される場合に、CHO細胞を使用して発現された場合よりも、FcγRへより低い結合親和性を示すか、若しくは結合しない、又は
(ii) 無細胞系を使用し発現される場合に、CHO細胞において発現された場合と比べ、グリコシル化されないか、又はより少ないグリコシル化を有する、請求項1〜15のいずれか一項記載の抗-CD47抗体。 - 無細胞系を使用し発現される場合に、CHO細胞を使用して発現された場合よりも、FcγRへより低い結合親和性を示すか、又は結合しない、かつ該より低い結合親和性が、少なくとも1 logより低いか又は少なくとも2 logより低い、請求項16記載の抗-CD47抗体。
- 前記FcγRが、FcγRI、FcγRIIA R131、FcγRIIA H131、FcγRIIB、又はFcγRIIIA V158である、請求項16又は17記載の抗-CD47抗体。
- 前記無細胞系が、S30無細胞抽出物を使用することを含む、請求項3、4、7、8、16、17又は18のいずれか一項記載の抗-CD47抗体。
- 前記S30無細胞抽出物が、原核生物のジスルフィド結合イソメラーゼDsbCを含む、請求項19記載の抗-CD47抗体。
- 二重特異性抗体である、請求項1〜20のいずれか一項記載の抗-CD47抗体。
- 薬剤と結合しており、該薬剤が標識又は毒素である、請求項1〜21のいずれか一項記載の抗-CD47抗体。
- 請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体又はその抗原-結合断片を含む、医薬組成物。
- 医薬として許容し得る担体を更に含有する、請求項23記載の医薬組成物。
- (i)請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体の、VL鎖領域とVH鎖領域の両方をコードしているヌクレオチド配列、又は(ii)請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体の重鎖と軽鎖の両方をコードしているヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチド。
- 請求項1記載の抗-CD47抗体の重鎖と軽鎖の両方をコードしているヌクレオチド配列を含み、該ヌクレオチド配列が、重鎖をコードしている配列番号:26-32のいずれか一つのヌクレオチド配列、及び軽鎖をコードしている配列番号:33のヌクレオチド配列を含む、請求項25記載のポリヌクレオチド。
- (i)請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体のVH又は重鎖をコードしているヌクレオチド配列を含む第一のポリヌクレオチド、及び(ii)請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体のVL又は軽鎖をコードしているヌクレオチド配列を含む第二のポリペプチド:を含む、ポリヌクレオチド集団。
- 請求項25又は26記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
- (i)請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体のVH又は重鎖をコードしているヌクレオチド配列を含む第一のベクター、及び(ii)請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体のVL又は軽鎖をコードしているヌクレオチド配列を含む第二のベクター:を含む、ベクター集団。
- 無細胞抽出物及び請求項28記載の1種以上のベクターを含有する、無細胞タンパク質発現のための組成物。
- S30無細胞抽出物を更に含有する、請求項30記載の組成物。
- 原核生物のジスルフィド結合イソメラーゼDsbCを更に含有する、請求項30又は31記載の組成物。
- 請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体を含む、癌を治療する、又は癌の症状を緩和するための医薬組成物。
- 前記癌が血液癌又は固形癌である、請求項33記載の医薬組成物。
- 前記癌が、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、急性骨髄性白血病(AML)、乳癌、膀胱癌、非小細胞肺癌/癌腫、肝細胞癌(HCC)、肉腫、又は頭頸部癌である、請求項33記載の医薬組成物。
- 請求項25又は26記載のポリヌクレオチドを含む、単離された細胞。
- 請求項27記載のポリヌクレオチド集団を含む、単離された細胞。
- 請求項28記載のベクターを含む、単離された細胞。
- 請求項29記載のベクター集団を含む、単離された細胞。
- 請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体又はその抗原結合性断片を生成する、単離された細胞。
- (i)請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体のVH又は重鎖をコードしているヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを含む第一の宿主細胞、及び(ii)請求項1〜22のいずれか一項記載の抗-CD47抗体のVL又は軽鎖をコードしているヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを含む第二の宿主細胞:を含む、宿主細胞集団。
- 請求項30〜32のいずれか一項記載の無細胞タンパク質発現のための組成物により、抗-CD47抗体を発現することを含む、抗-CD47抗体を製造する方法。
- 請求項36〜40のいずれか一項記載の細胞により、抗-CD47抗体を発現することを含む、抗-CD47抗体を製造する方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201462098291P | 2014-12-30 | 2014-12-30 | |
US62/098,291 | 2014-12-30 | ||
PCT/US2015/067642 WO2016109415A1 (en) | 2014-12-30 | 2015-12-28 | Anti-cd47 antibodies and uses thereof |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020199312A Division JP2021048858A (ja) | 2014-12-30 | 2020-12-01 | 抗−cd47抗体及びその使用 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018506964A JP2018506964A (ja) | 2018-03-15 |
JP2018506964A5 JP2018506964A5 (ja) | 2019-05-23 |
JP6850255B2 true JP6850255B2 (ja) | 2021-03-31 |
Family
ID=56284963
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017535814A Active JP6850255B2 (ja) | 2014-12-30 | 2015-12-28 | 抗−cd47抗体及びその使用 |
JP2020199312A Pending JP2021048858A (ja) | 2014-12-30 | 2020-12-01 | 抗−cd47抗体及びその使用 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020199312A Pending JP2021048858A (ja) | 2014-12-30 | 2020-12-01 | 抗−cd47抗体及びその使用 |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10870699B2 (ja) |
EP (1) | EP3240569A4 (ja) |
JP (2) | JP6850255B2 (ja) |
KR (1) | KR102489471B1 (ja) |
CN (1) | CN107530421B (ja) |
AU (1) | AU2015374301B2 (ja) |
BR (1) | BR112017014258A2 (ja) |
CA (1) | CA2972604C (ja) |
CL (1) | CL2017001736A1 (ja) |
CO (1) | CO2017007673A2 (ja) |
EA (1) | EA037654B1 (ja) |
EC (1) | ECSP17041865A (ja) |
HK (1) | HK1245154A1 (ja) |
MX (1) | MX2017008819A (ja) |
SG (2) | SG10202007176TA (ja) |
WO (1) | WO2016109415A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201704467B (ja) |
Families Citing this family (66)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EA037654B1 (ru) | 2014-12-30 | 2021-04-27 | Селджин Корпорейшн | Анти-cd47-антитела и их применения |
SG11201708334RA (en) * | 2015-05-04 | 2017-11-29 | Pieris Pharmaceuticals Gmbh | Anti-cancer fusion polypeptide |
EA201990218A1 (ru) * | 2016-07-06 | 2019-07-31 | Селджин Корпорейшн | Антитела с низкой иммуногенностью и их применения |
EP3504234A4 (en) | 2016-09-29 | 2020-12-02 | Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd. | HETERODIMER IMMUNOGLOBULIN CONSTRUCTS AND MANUFACTURING PROCESSES |
CN114773471A (zh) | 2016-10-20 | 2022-07-22 | 天境生物科技(上海)有限公司 | 新的cd47单克隆抗体及其应用 |
EP3534965A4 (en) | 2016-11-03 | 2020-06-24 | Trillium Therapeutics Inc. | IMPROVEMENTS IN CD47 BLOCKADERAPY THROUGH HDAC INHIBITORS |
WO2018089508A2 (en) * | 2016-11-08 | 2018-05-17 | Ablexis, Llc | Anti-cd47 antibodies |
BR112019010051A2 (pt) | 2016-11-18 | 2019-09-03 | Beijing Hanmi Pharmaceutical Co Ltd | anticorpo biespecífico heterodimérico, polinucleotídeo isolado, vetor de expressão recombinante, célula hospedeira, composição, método de produzir o anticorpo biespecífico heterodimérico, uso do anticorpo bieífico heterodimérico, e método de prevenir e/ou tratar uma doença |
CA3051512A1 (en) * | 2017-01-26 | 2018-08-02 | Zlip Holding Limited | Cd47 antigen binding unit and uses thereof |
CN110300603B (zh) * | 2017-02-14 | 2023-04-14 | 亘喜生物科技(上海)有限公司 | Cd47-car-t细胞 |
EP3601351A1 (en) * | 2017-03-27 | 2020-02-05 | Celgene Corporation | Methods and compositions for reduction of immunogenicity |
CA3058966A1 (en) | 2017-04-14 | 2018-10-18 | Tollnine, Inc. | Immunomodulating polynucleotides, antibody conjugates thereof, and methods of their use |
KR102646468B1 (ko) * | 2017-08-02 | 2024-03-11 | 페인스 테라퓨틱스 인코포레이티드 | 항-cd47 항체 및 이의 용도 |
WO2019034895A1 (en) * | 2017-08-18 | 2019-02-21 | Ultrahuman Four Limited | LIAISON AGENTS |
US20210095019A1 (en) * | 2017-11-10 | 2021-04-01 | I-Mab | Fusion Proteins Containing CD47 Antibodies and Cytokines |
JP7391845B2 (ja) | 2017-12-01 | 2023-12-05 | シージェン インコーポレイテッド | Cd47抗体及びがんを治療するためのその使用 |
BR112020011295A2 (pt) | 2017-12-04 | 2020-11-24 | Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd. | anticorpo biespecífico anti-pd-l1/anti-cd47 com estrutura semelhante ao anticorpo natural e em forma de heterodímero e preparação do mesmo |
US20210070855A1 (en) * | 2018-01-24 | 2021-03-11 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | Anti-cd47 antibodies that do not cause significant red blood cell agllutination |
WO2019153200A1 (zh) | 2018-02-08 | 2019-08-15 | 北京韩美药品有限公司 | 抗pd-1/抗her2天然抗体结构样异源二聚体形式双特异抗体及其制备 |
GB201804860D0 (en) * | 2018-03-27 | 2018-05-09 | Ultrahuman Two Ltd | CD47 Binding agents |
CN110577597B (zh) * | 2018-06-11 | 2021-10-22 | 康诺亚生物医药科技(成都)有限公司 | 一种阻断CD47和SIRPα相互作用的抗体 |
CN112566662A (zh) | 2018-06-15 | 2021-03-26 | 阿库鲁斯生物科学公司 | 针对cd47的阻断抗体及其使用方法 |
WO2020009725A1 (en) * | 2018-07-05 | 2020-01-09 | Trican Biotechnology Co., Ltd | Human anti-cd47 antibodies and uses thereof |
CN110872348B (zh) * | 2018-09-03 | 2021-09-03 | 长春金赛药业有限责任公司 | 人源化抗cd47单克隆抗体及其应用 |
JP2022500357A (ja) * | 2018-10-31 | 2022-01-04 | アイ−マブ バイオファーマ ユーエス リミテッド | 新規cd47抗体およびその使用方法 |
EP3936526A4 (en) * | 2019-03-06 | 2023-03-08 | Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. | BIFUNCTIONAL FUSION PROTEIN AND PHARMACEUTICAL USE |
TW202045550A (zh) * | 2019-04-05 | 2020-12-16 | 美商西建公司 | 腫瘤選擇性結合cd47之抗體之工程 |
WO2020247820A1 (en) | 2019-06-07 | 2020-12-10 | ALX Oncology Inc. | Methods and reagents for reducing the interference of drugs that bind cd47 in serological assays |
AU2020315598A1 (en) | 2019-07-16 | 2022-03-03 | Gilead Sciences, Inc. | HIV vaccines and methods of making and using |
KR20220085796A (ko) | 2019-10-18 | 2022-06-22 | 포티 세븐, 인코포레이티드 | 골수이형성 증후군 및 급성 골수성 백혈병을 치료하기 위한 조합 치료 |
US20220403023A1 (en) * | 2019-10-25 | 2022-12-22 | WuXi Biologics Ireland Limited | Novel anti-cd47 antibodies and uses thereof |
US20210147568A1 (en) | 2019-10-31 | 2021-05-20 | Forty Seven, Inc. | Anti-cd47 based treatment of blood cancer |
EP4081305B1 (en) | 2019-12-24 | 2024-09-18 | Carna Biosciences, Inc. | Diacylglycerol kinase modulating compounds |
CN115087488A (zh) | 2020-02-14 | 2022-09-20 | 震动疗法股份有限公司 | 与ccr8结合的抗体和融合蛋白及其用途 |
CN115427458A (zh) | 2020-02-28 | 2022-12-02 | 塔拉克治疗公司 | 转谷氨酰胺酶介导的缀合 |
CA3172449A1 (en) | 2020-03-27 | 2021-09-30 | Erik Hans MANTING | Ex vivo use of modified cells of leukemic origin for enhancing the efficacy of adoptive cell therapy |
EP4168115A1 (en) | 2020-06-22 | 2023-04-26 | The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University | Tsp-1 inhibitors for the treatment of aged, atrophied or dystrophied muscle |
CN116670164A (zh) * | 2020-09-14 | 2023-08-29 | 苏特罗生物制药公司 | 使用无细胞蛋白质合成系统大规模生产抗体的方法 |
US20230365681A1 (en) | 2020-10-07 | 2023-11-16 | Celgene Corporation | Bispecific antibody treatment of lymphoid malignant neoplasm conditions |
JP2023552375A (ja) | 2020-12-06 | 2023-12-15 | エーエルエックス オンコロジー インコーポレイテッド | 血清学的アッセイにおいてcd47に結合する薬物の干渉を低減するための多量体 |
WO2022135460A1 (zh) * | 2020-12-23 | 2022-06-30 | 广东菲鹏制药股份有限公司 | 一种靶向cd47的抗体及其应用 |
EP4276113A1 (en) | 2021-01-08 | 2023-11-15 | Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd. | Antibody specifically binding to cd47 and antigen-binding fragment thereof |
KR20230157388A (ko) | 2021-03-12 | 2023-11-16 | 멘두스 비.브이. | 백신접종의 방법 및 cd47 차단의 용도 |
TW202302145A (zh) | 2021-04-14 | 2023-01-16 | 美商基利科學股份有限公司 | CD47/SIRPα結合及NEDD8活化酶E1調節次單元之共抑制以用於治療癌症 |
US20220389104A1 (en) * | 2021-05-28 | 2022-12-08 | Ose Immunotherapeutics | Method for Treating CD127-Positive Cancers by Administering an Anti-CD127 Agent |
EP4359411A1 (en) | 2021-06-23 | 2024-05-01 | Gilead Sciences, Inc. | Diacylglyercol kinase modulating compounds |
KR20240025616A (ko) | 2021-06-23 | 2024-02-27 | 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 | 다이아실글리세롤 키나제 조절 화합물 |
AU2022297367A1 (en) | 2021-06-23 | 2023-12-07 | Gilead Sciences, Inc. | Diacylglyercol kinase modulating compounds |
EP4359415A1 (en) | 2021-06-23 | 2024-05-01 | Gilead Sciences, Inc. | Diacylglyercol kinase modulating compounds |
KR20240091056A (ko) | 2021-10-28 | 2024-06-21 | 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 | 피리디진-3(2h)-온 유도체 |
CN118201941A (zh) | 2021-10-29 | 2024-06-14 | 吉利德科学公司 | Cd73化合物 |
AU2022417491A1 (en) | 2021-12-22 | 2024-05-23 | Gilead Sciences, Inc. | Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof |
CA3239528A1 (en) | 2021-12-22 | 2023-06-29 | Gilead Sciences, Inc. | Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof |
TW202340168A (zh) | 2022-01-28 | 2023-10-16 | 美商基利科學股份有限公司 | Parp7抑制劑 |
EP4245756A1 (en) | 2022-03-17 | 2023-09-20 | Gilead Sciences, Inc. | Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof |
US20230355796A1 (en) | 2022-03-24 | 2023-11-09 | Gilead Sciences, Inc. | Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers |
TW202345901A (zh) | 2022-04-05 | 2023-12-01 | 美商基利科學股份有限公司 | 用於治療結腸直腸癌之組合療法 |
WO2023205719A1 (en) | 2022-04-21 | 2023-10-26 | Gilead Sciences, Inc. | Kras g12d modulating compounds |
WO2024005423A1 (ko) * | 2022-06-29 | 2024-01-04 | 고려대학교 산학협력단 | 인간 FCγRS 결합력이 제거된 당화 FC 변이체들 |
US20240116928A1 (en) | 2022-07-01 | 2024-04-11 | Gilead Sciences, Inc. | Cd73 compounds |
WO2024015653A1 (en) * | 2022-07-10 | 2024-01-18 | Mbrace Therapeutics, Inc. | Cell-free methods of recombinant antibody production |
WO2024015741A1 (en) | 2022-07-12 | 2024-01-18 | Gilead Sciences, Inc. | Hiv immunogenic polypeptides and vaccines and uses thereof |
US20240091351A1 (en) | 2022-09-21 | 2024-03-21 | Gilead Sciences, Inc. | FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPa DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY |
WO2024124107A2 (en) | 2022-12-09 | 2024-06-13 | Pfizer Inc. | Cd47 blocking agent and anti-cd20 / anti-cd3 bispecific antibody combination therapy |
WO2024121777A1 (en) | 2022-12-09 | 2024-06-13 | Pfizer Inc. | Cd47 blocking agent and anti-bcma / anti-cd3 bispecific antibody combination therapy |
WO2024137852A1 (en) | 2022-12-22 | 2024-06-27 | Gilead Sciences, Inc. | Prmt5 inhibitors and uses thereof |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6005079A (en) | 1992-08-21 | 1999-12-21 | Vrije Universiteit Brussels | Immunoglobulins devoid of light chains |
EP1621554B2 (en) | 1992-08-21 | 2012-08-29 | Vrije Universiteit Brussel | Immunoglobulins devoid of light chains |
US6838254B1 (en) | 1993-04-29 | 2005-01-04 | Conopco, Inc. | Production of antibodies or (functionalized) fragments thereof derived from heavy chain immunoglobulins of camelidae |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
DE60042789D1 (de) | 1999-11-29 | 2009-10-01 | Bac Ip B V | Immobilisierte antigenbindende moleküle aus einer domäne |
EP2298809A3 (en) | 2001-07-12 | 2012-02-15 | FOOTE, Jefferson | Super humanized antibodies |
DE102007001370A1 (de) * | 2007-01-09 | 2008-07-10 | Curevac Gmbh | RNA-kodierte Antikörper |
EP2131860B1 (en) * | 2007-03-20 | 2013-12-18 | Eli Lilly & Company | Anti-sclerostin antibodies |
EP2111869A1 (en) | 2008-04-23 | 2009-10-28 | Stichting Sanquin Bloedvoorziening | Compositions and methods to enhance the immune system |
WO2011004847A1 (ja) * | 2009-07-07 | 2011-01-13 | 一般財団法人化学及血清療法研究所 | 新規ヒト化抗ヒトα9インテグリン抗体 |
SI2477648T1 (sl) | 2009-09-15 | 2022-09-30 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Sinergijska terapija proti CD47 za krvne rake |
AU2012269929A1 (en) * | 2011-06-16 | 2013-12-12 | Novartis Ag | Soluble proteins for use as therapeutics |
RS60606B1 (sr) * | 2012-01-17 | 2020-08-31 | Univ Leland Stanford Junior | Reagensi sirp-alfa visokog affiniteta |
EP2812443B1 (en) | 2012-02-06 | 2019-05-29 | Inhibrx, Inc. | Cd47 antibodies and methods of use thereof |
US20140140989A1 (en) | 2012-02-06 | 2014-05-22 | Inhibrx Llc | Non-Platelet Depleting and Non-Red Blood Cell Depleting CD47 Antibodies and Methods of Use Thereof |
SG11201506132PA (en) * | 2013-02-06 | 2015-09-29 | Inhibrx Llc | Non-platelet depleting and non-red blood cell depleting cd47 antibodies and methods of use thereof |
US10190145B2 (en) * | 2013-04-19 | 2019-01-29 | Sutro Biopharma, Inc. | Expression of biologically active proteins in a bacterial cell-free synthesis system using bacterial cells transformed to exhibit elevated levels of chaperone expression |
EA037654B1 (ru) | 2014-12-30 | 2021-04-27 | Селджин Корпорейшн | Анти-cd47-антитела и их применения |
EP3349787A4 (en) | 2015-09-18 | 2019-03-27 | Arch Oncology, Inc. | THERAPEUTIC CD47 ANTIBODIES |
GB2558131B (en) | 2015-09-21 | 2021-05-19 | Surface Oncology Inc | Anti-CD47 antibodies and methods of use |
-
2015
- 2015-12-28 EA EA201791485A patent/EA037654B1/ru unknown
- 2015-12-28 AU AU2015374301A patent/AU2015374301B2/en active Active
- 2015-12-28 US US15/541,003 patent/US10870699B2/en active Active
- 2015-12-28 EP EP15876093.4A patent/EP3240569A4/en active Pending
- 2015-12-28 JP JP2017535814A patent/JP6850255B2/ja active Active
- 2015-12-28 CA CA2972604A patent/CA2972604C/en active Active
- 2015-12-28 MX MX2017008819A patent/MX2017008819A/es unknown
- 2015-12-28 SG SG10202007176TA patent/SG10202007176TA/en unknown
- 2015-12-28 WO PCT/US2015/067642 patent/WO2016109415A1/en active Application Filing
- 2015-12-28 KR KR1020177021330A patent/KR102489471B1/ko active IP Right Grant
- 2015-12-28 BR BR112017014258A patent/BR112017014258A2/pt active Search and Examination
- 2015-12-28 SG SG11201705310TA patent/SG11201705310TA/en unknown
- 2015-12-28 CN CN201580077136.5A patent/CN107530421B/zh active Active
-
2017
- 2017-06-29 CL CL2017001736A patent/CL2017001736A1/es unknown
- 2017-06-30 EC ECIEPI201741865A patent/ECSP17041865A/es unknown
- 2017-06-30 ZA ZA2017/04467A patent/ZA201704467B/en unknown
- 2017-07-28 CO CONC2017/0007673A patent/CO2017007673A2/es unknown
-
2018
- 2018-04-17 HK HK18104961.7A patent/HK1245154A1/zh unknown
-
2020
- 2020-10-29 US US16/949,459 patent/US11787860B2/en active Active
- 2020-12-01 JP JP2020199312A patent/JP2021048858A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20210054070A1 (en) | 2021-02-25 |
EA201791485A1 (ru) | 2018-02-28 |
MX2017008819A (es) | 2018-03-14 |
ECSP17041865A (es) | 2017-08-31 |
KR20170100652A (ko) | 2017-09-04 |
CN107530421A (zh) | 2018-01-02 |
US20170369572A1 (en) | 2017-12-28 |
SG10202007176TA (en) | 2020-08-28 |
KR102489471B1 (ko) | 2023-01-18 |
US11787860B2 (en) | 2023-10-17 |
SG11201705310TA (en) | 2017-07-28 |
ZA201704467B (en) | 2019-09-25 |
HK1245154A1 (zh) | 2018-08-24 |
BR112017014258A2 (pt) | 2018-03-06 |
US10870699B2 (en) | 2020-12-22 |
EA037654B1 (ru) | 2021-04-27 |
CL2017001736A1 (es) | 2018-03-16 |
CA2972604C (en) | 2023-07-04 |
CO2017007673A2 (es) | 2018-01-05 |
EP3240569A1 (en) | 2017-11-08 |
AU2015374301B2 (en) | 2021-02-11 |
CN107530421B (zh) | 2021-07-20 |
JP2018506964A (ja) | 2018-03-15 |
WO2016109415A1 (en) | 2016-07-07 |
JP2021048858A (ja) | 2021-04-01 |
CA2972604A1 (en) | 2016-07-07 |
EP3240569A4 (en) | 2018-05-30 |
AU2015374301A1 (en) | 2017-07-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6850255B2 (ja) | 抗−cd47抗体及びその使用 | |
JP7237848B2 (ja) | 免疫原性の低下のための方法及び組成物 | |
JP7120989B2 (ja) | 低免疫原性を有する抗体及びその使用 | |
CA3117429A1 (en) | Anti-tim-3 antibodies | |
CA3156983A1 (en) | Antibodies against the poliovirus receptor (pvr) and uses thereof | |
WO2021214329A1 (en) | Composition comprising an ige antibody | |
TW202330027A (zh) | 抗cd-47抗體製劑 | |
CN117580860A (zh) | 抗adgre2抗体及其用途 | |
CN109414492A (zh) | 针对cd81的人源化和嵌合单克隆抗体 | |
CN113454120A (zh) | 针对人免疫检查点CEACAM1(CD66a)的拮抗剂抗体及其制剂,试剂盒,和使用方法 | |
US11981745B2 (en) | Anti-mesothelin antigen-binding molecules and uses thereof | |
US20230151090A1 (en) | Composition comprising an ige antibody | |
NZ733261A (en) | Anti-cd47 antibodies and uses thereof | |
EA041917B1 (ru) | Антитела с низкой иммуногенностью и их применения |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170928 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170824 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181221 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20181221 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190412 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20191203 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200227 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20200811 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201201 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20201201 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20201208 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20201215 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210224 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20210305 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6850255 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |