CN113454120A - 针对人免疫检查点CEACAM1（CD66a）的拮抗剂抗体及其制剂，试剂盒，和使用方法 - Google Patents

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Abstract

提供了与CEACAM1(包括CEACAM1的IgV结构域)特异性结合的分离的抗体及其抗原结合片段，以及其药学制剂，试剂盒，和使用方法。

Description

针对人免疫检查点CEACAM1(CD66a)的拮抗剂抗体及其制剂， 试剂盒，和使用方法
优先权声明
本申请要求于2018年12月20日提交的美国临时申请号62/782,785的优先权，其公开通过引用整体并入本文。
本申请包含已经以ASCII格式通过电子方式提交的序列表，并通过引用整体并入本文。所述ASCII副本创建于2019年12月20日，名为SequenceListing.txt，大小为26,533字节。
发明背景
癌胚抗原相关细胞粘附分子1(CEACAM1)，也称为BGP，C-CAM，和CD66a，是一种I型跨膜蛋白。CEACAM1具有一个N-末端可变免疫球蛋白结构域(IgV)，多达三个恒定C2样免疫球蛋白(IgC)结构域，一个跨膜区，和一个带有基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(ITIM)的胞质尾区。人CEACAM1基因可以产生12种不同的选择性拼接同种型，全部12种同种型均包含相同的N-末端IgV结构域。CEACAM1的细胞外IgV结构域对其功能至关重要，因为它是同嗜性或异嗜性相互作用所必需的。CEACAM1可以在T细胞和NK细胞上表达。两种CEACAM1蛋白的IgV结构域相互作用以经由T细胞和NK细胞中的ITIM基序诱导负信号传导。
发明概述
本文在某些实施例中提供了与CEACAM1特异性结合的分离的抗体或其抗原结合片段，包括包含SEQ ID NO:31中所列氨基酸序列的人CEACAM1。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段以至少1.5nM KD，1.0nM KD，0.5nM KD，或0.25nM KD的结合亲和力与CEACAM1结合。在某些实施例中，抗体或其抗原结合片段与人CEACAM1的IgV结构域结合。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段拮抗CEACAM1活性。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段与CEACAM1的IgV结构域结合并抑制结合后的IgV结构域与其他CEACAM1蛋白的IgV结构域的相互作用。在某些实施例中，抗体或其抗原结合片段抑制人成熟树突细胞或人T细胞产生CEACAM1调节的一种或多种细胞因子。在这些实施例的某些中，一种或多种细胞因子可包括IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，和/或TNF-α。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)，和
RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)；
(b)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16),
ATSSLDS(SEQ ID NO:17)，和
LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)；
(c)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)，和
DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)；
(d)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:23)，和
QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)；
(e)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)，
VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)，和
SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)；或
(f)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:29)，和
QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)，和
RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)；
和包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16)，
ATSSLDS(SEQ ID NO:17)，和
LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)；
(b)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)，和
DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)；
和包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:23)，和
QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)；或
(c)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)，
VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)，和
SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)；
和包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:29)，和
QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含SEQ ID NO:2的重链可变区；
(b)包含SEQ ID NO:4的轻链可变区；
(c)包含SEQ ID NO:6的重链可变区；
(d)包含SEQ ID NO:8的轻链可变区；
(e)包含SEQ ID NO:10的重链可变区；或
(f)包含SEQ ID NO:12的轻链可变区。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含SEQ ID NO:2的重链可变区和包含SEQ ID NO:4的轻链可变区；
(b)包含SEQ ID NO:6的重链可变区和包含SEQ ID NO:8的轻链可变区；或
(c)包含SEQ ID NO:10的重链可变区和包含SEQ ID NO:12的轻链可变区。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段与同上文具体列出的抗体或其抗原结合片段相同的CEACAM1表位的全部或部分特异性结合，和/或与其交叉竞争CEACAM1结合，即包含重链可变区和/或轻链可变区的抗体或其片段，该重链可变区包含SEQID NOs:13–15，SEQ ID NOs:19–21，SEQ ID NOs:25–27，SEQ ID NO:2，SEQ ID NO:6，或SEQID NO:10，该轻链可变区包含SEQ ID NOs:16–18，SEQ ID NOs:22–24，SEQ ID NOs:28–30，SEQ ID NO:4，SEQ ID NO:8，或SEQ ID NO:12。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段与治疗剂连接或缀合。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段被并入融合蛋白。
本文在某些实施例中提供了包含编码如本文提供的抗体或其抗原结合片段的核酸序列的核酸分子。在这些实施例的某些中，核酸分子包含编码以下的核酸序列：
(a)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)，和
RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)；
(b)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16)，
ATSSLDS(SEQ ID NO:17)，和
LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)；
(c)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)，和
DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)；
(d)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:23)，和
QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)；
(e)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)，
VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)，和
SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)；或
(f)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:29)，和
QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子包含编码以下的核酸序列：
(a)包含以下一个或多个的抗体重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)，和
RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)；和
包含以下一个或多个的抗体重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)，和
DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)；
(b)包含以下一个或多个的抗体重链可变区：
GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)，
VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)，和
SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)；和
包含以下一个或多个的抗体轻链可变区：
RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16)，
ATSSLDS(SEQ ID NO:17)，和
LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)；
(c)包含以下一个或多个的抗体轻链可变区：
RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:23)，和
QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)；和
包含以下一个或多个的抗体轻链可变区：
RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:29)，和
QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子包含编码以下的核酸序列：
(a)包含SEQ ID NO:2的重链可变区；
(b)包含SEQ ID NO:4的轻链可变区；
(c)包含SEQ ID NO:6的重链可变区；
(d)包含SEQ ID NO:8的轻链可变区；
(e)包含SEQ ID NO:10的重链可变区；或
(f)包含SEQ ID NO:12的轻链可变区。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子包含编码以下的核酸序列：
(a)包含SEQ ID NO:2的重链可变区和包含SEQ ID NO:4的轻链可变区；
(b)包含SEQ ID NO:6的重链可变区和包含SEQ ID NO:8的轻链可变区；或
(c)包含SEQ ID NO:10的重链可变区和包含SEQ ID NO:12的轻链可变区。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子包含具有SEQ ID NOs:1，3，5，7，9，或11中任一个所列序列的核酸序列。在其他实施例中，本文提供的核酸分子包含具有SEQ ID NOs:1，3，5，7，9，或11中任一个所列的核酸序列，但编码前导序列的部分被去除(例如，包含SEQID NO:1的核苷酸58–420，SEQ ID NO:3的核苷酸61–389，SEQ ID NO:5的核苷酸58–404，SEQID NO:7的核苷酸61–395，SEQ ID NO:9的核苷酸58–417，或SEQ ID NO:11的核苷酸61–392的核酸分子)。
本文在某些实施例中提供了包含本文提供的一种或多种核酸分子的载体。本文在某些实施例中提供了包含本文提供的一种或多种载体的宿主细胞。在某些实施例中还提供了培养本文提供的宿主细胞以产生本文提供的一种或多种抗体或其抗原结合片段的方法。
本文在某些实施例中提供了包含如本文提供的抗体或其抗原结合片段的药学制剂。在某些实施例中，这些药学制剂还包含药学上可接受的载体和/或赋形剂。
本文在某些实施例中提供了抑制人CEACAM1活性的方法，包括使人CEACAM1与足以抑制CEACAM1活性的量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段接触。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段的结合抑制多种CEACAM1蛋白之间的相互作用。
本文在某些实施例中提供了抑制细胞中人CEACAM1活性的方法，包括使细胞与如本文提供的抗体或其抗原结合片段接触。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段的结合抑制细胞中CEACAM1调节的细胞因子的产生。在某些实施例中，细胞是人成熟树突细胞或T细胞。
本文在某些实施例中提供了抑制受试者中CEACAM1活性的方法，包括向受试者施用足以抑制CEACAM1活性的量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段或药学制剂。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段的施用抑制所述受试者中CEACAM1调节的细胞因子的产生。
本文在某些实施例中提供了治疗有需要的受试者中与CEACAM1表达或活性相关联的病症的方法，包括向受试者施用治疗有效量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段或药学制剂。在某些实施例中，与CEACAM1表达或活性相关联的病症是癌症。
本文在某些实施例中提供了治疗有需要的受试者的癌症的方法，包括向受试者施用治疗有效量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段或药学制剂。
本文在某些实施例中提供了抑制有需要的受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制的方法，包括向受试者施用治疗有效量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段或药学制剂。
本文在某些实施例中提供了抑制来自多种CEACAM1蛋白的IgV结构域的相互作用的方法，包括使多种CEACAM1蛋白与如本文提供的抗体或其抗原结合片段接触。
本文在某些实施例中提供了检测细胞中CEACAM1的方法，包括使细胞同与可检测标志物连接或缀合的如本文提供的抗体或其抗原结合片段接触，然后通过检测标志物确定抗体或抗原结合片段是否与细胞结合。
本文在某些实施例中提供了检测受试者中CEACAM1阳性细胞的方法，包括向所述受试者施用与可检测标志物连接或缀合的如本文提供的抗体或其抗原结合片段，然后检测受试者中的标志物。
本文在某些实施例中提供了检测生物学样品中CEACAM1的方法，包括使所述样品同与可检测标志物连接或缀合的如本文提供的抗体或其抗原结合片段接触，然后检测该标志物。
本文在某些实施例中提供了包含如本文提供的抗体或其抗原结合片段以及任选地使用说明的试剂盒。在某些实施例中，试剂盒用于抑制细胞或受试者中的CEACAM1活性，检测细胞，受试者，或生物学样品中的CEACAM1，治疗与CEACAM1活性或表达相关联的病症(包括癌症)，或抑制有需要的受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制。
本文在某些实施例中提供了如本文提供的抗体或其抗原结合片段在制备用于抑制人CEACAM1活性，治疗与CEACAM1活性或表达相关联的病症(包括癌症)，或抑制有需要的受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制的药物中的用途。
附图简要说明
本领域技术人员将理解以下描述的附图仅用于说明目的。附图无意以任何方式限制本教导的范围。
本专利或申请文件包含至少一张彩色绘制的附图。具有一张或多张彩色附图的本专利或专利申请公开的副本将在请求并支付必要费用后由专利商标局(the Office)提供。
图1A-1B。微阵列(A)和RNA测序(B)表明CEACAM1在许多人癌细胞系中广泛表达。
图2。肿瘤(tumor)微环境中较高水平的CEACAM1与HNSC(头颈部鳞状细胞癌)，KIRC(肾脏肾透明细胞癌)，KIRP(肾脏肾乳头状细胞癌)，或LGG(脑低级别胶质瘤)患者的总体生存率较低显著相关联。
图3。由表面等离子体共振确定的10个mAb的动力学参数。
图4A-4B。FACS示出了mAb 38B5，25C8，和36B11识别在人T细胞(A)或人树突细胞(B)上表达的内源性CEACAM1。
图5。在混合淋巴细胞反应试验中，mAb 36B11，38B5，和25C8在48小时或96小时显著增加多种细胞因子的产生。
图6。在混合淋巴细胞反应试验中，mAb 36B11，38B5，和25C8在48小时或96小时显著增加多种细胞因子的产生。
发明详述
如本文所公开，已识别与人CEACAM1的IgV结构域特异性结合的新的单克隆CEACAM1抗体。这些抗体中的三种被证明为识别在人T细胞或人树突细胞上表达的内源性CEACAM1，并且还发现全部三种抗体均拮抗CEACAM1功能，正如它们在混合淋巴细胞反应中显著增加细胞因子的产生的能力所证明。
因此，本申请提供与CEACAM1特异性结合的抗体及其抗原结合片段，以及包含这些抗体及其抗原结合片段的制剂和试剂盒。本文还提供使用所公开的抗体及其抗原结合片段，制剂，和试剂盒以抑制细胞或受试者中的CEACAM1活性，治疗与CEACAM1活性或表达相关联的病症，抑制CEACAM1介导的T细胞抑制，并检测细胞，受试者，或生物学样品中CEACAM1的方法。
定义
如本文所用，术语“抗体”是指全免疫球蛋白分子，即具有两条重链和两条轻链以及完整的Fc和Fv区的免疫球蛋白分子。抗体可以属于任何免疫球蛋白类别，例如，IgA，IgD，IgG1，IgG2，IgG3，IgM等，并且可以是天然抗体，合成抗体，单克隆抗体，多克隆抗体，嵌合抗体，人源化抗体，多特异性抗体，双特异性抗体，双重特异性抗体，或抗独特型抗体。如本文所用，关于抗体的术语“其抗原结合片段”是指抗体的任何免疫学活性部分，即保留与全抗体结合的抗原结合的能力的抗体的任何部分，如通过片段与全抗体竞争抗原结合的能力所测量。抗原结合片段包括但不限于，单结构域抗体(sdAb)(即纳米抗体)，Fv，二硫键连接的Fv，单链Fv(scFv)，双抗体，Fd，Fab，Fab’，或F(ab’)2，并且可以例如，重组制备或通过全抗体的酶促或化学裂解制备(参见，例如，《基础免疫学》，第7章，Paul,W.编辑，第2版，Raven出版社，N.Y.(1989)，通过引用整体并入本文)。
如本文所用，术语“单克隆抗体”是指识别相同抗原的基本上同质的抗体群体中的抗体成员。组成单克隆抗体的群体的各抗体除了可能以少量存在的可能突变(例如，自然发生的突变)之外是相同的。如本文所用，“多克隆”抗体是指识别不同表位的非同质抗体群体的抗体成员。
如本文所用，关于抗体或其抗原结合片段的术语“分离的”是指由于其起源或衍生来源而具有以下特性中的至少一种的抗体或其抗原结合片段：(1)与在其天然状态中相伴的天然相关联成分不相关联，(2)不含来自相同物种的其他蛋白质，(3)由来自不同物种的细胞表达，和/或(4)如果没有人类干预则在自然界中不存在。
如本文所用，“药学上可接受的载体”是指与本抗体或片段一起施用的赋形剂，稀释剂，防腐剂，增溶剂，乳化剂，佐剂，和/或媒介物。此类载体可以是无菌液体，如水和油，包括石油，动物，植物，或合成起源的那些，如花生油，大豆油，矿物油，芝麻油等，聚乙二醇，甘油，丙二醇，或其他合成溶剂。抗菌剂，如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，如乙二胺四乙酸；调节张力的试剂，如氯化钠或葡萄糖，也可以是载体。产生与载体组合的组合物的方法是本领域技术人员已知的。在一些实施例中，语言“药学上可接受的载体”旨在包括与药学施用相容的任何和全部溶剂，分散介质，包衣(coatings)，等渗剂，和吸收延迟剂等。此类介质和试剂的使用为本领域所周知。参见，例如，Remington，《药学的科学与实践》，第22版，药学出版社(2012)。除非任何常规介质或试剂与活性化合物不相容，否则在组合物中考虑这种使用。
如本文所用，关于病症的术语“治疗(treat)”，“治疗(treating)”，和“治疗(treatment)”包括消除病症或与病症相关联的一种或多种症状，降低病症或病症的一种或多种症状的严重程度，预防或减缓病症或与病症相关联的一种或多种症状的发作，预防，减缓，或降低病症或与病症相关联的一种或多种症状发生或复发的可能性，或其一些组合。例如，固体癌的“治疗”可指部分或完全抑制肿瘤生长，减小肿瘤大小，完全或部分根除肿瘤，减少或预防恶性生长，部分或完全根除癌细胞，或其一些组合。在某些实施例中，如果在接受治疗量的本文提供的抗体或其制剂后，受试者表现出可观察和/或可测量的减轻或不存在特定疾病的一种或多种症状，则受试者被“治疗”。受试者也可能感觉到疾病的体征或症状的减轻。如果受试者经历稳定的疾病，则受试者也视为被治疗。用于评估成功治疗的参数可通过本领域具有适当技术的医师所熟悉的常规过程容易地测量。
如本文所用，“预防性”治疗是指预防或减缓病症或与病症相关联的一种或多种症状的发作，预防，减缓，或降低病症或与病症相关联的一种或多种症状发生或复发的可能性，或其一些组合，而“治愈性”治疗是指消除病症或与病症相关联的一种或多种症状，降低病症或病症的一种或多种症状的严重程度，或其一些组合。
如本文所用，“受试者”是指任何动物，非人哺乳动物，或人。在此情境中的“动物”可包括宠物，农场动物，经济动物，运动动物，或实验动物，包括例如，猫，狗，马，母牛，公牛，猪，驴，绵羊，羔羊，山羊，鼠，兔，鸡，鸭，鹅，或灵长类，包括猴子或黑猩猩。术语“患者”和“受试者”在本文中可互换使用。
如本文使用，关于病症的治疗的“有需要的受试者”是指已被诊断患有，怀疑患有，和/或表现出与病症相关联的一种或多种症状的受试者。
如本文所用，“KD”是指抗体-抗原相互作用的解离常数。
如本文所用，关于抗体或其抗原结合片段的术语“特异性结合(specificbinding)”或“特异性结合(specifically binds)”是指抗体或其抗原结合片段与特定抗原或其表位的反应或结合，比其与替代抗原或表位反应或结合更频繁，更迅速，持续时间更长，和/或具有更大的亲和力。例如，与人CEACAM1 IgV结构域特异性结合的抗体或其抗原结合片段以比其与其他CEACAM1结构域或表位或非CEACAM1结构域或表位结合更大的亲和力，更大的活动性(avidity)，更容易，和/或更长的持续时间与该结构域或其中的表位结合。特异性结合并不排除全部与第二抗原或表位的结合，但在某些实施例中，与抗原或表位特异性结合的抗体或其抗原结合片段可排他性地结合该抗原或表位。
如本文所用，关于第一抗体或其抗原结合片段和第二抗体或其抗原结合片段的术语“竞争”是指第一抗体或其抗原结合片段以与第二抗体或其抗原结合片段的结合充分相似的方式与抗原或表位结合，第一抗体或其抗原结合片段与抗原或表位的结合可检测地降低第二抗体或其抗原结合片段与抗原或表位的结合。在某些实施例中，反之亦然，即第二抗体或其抗原结合片段与抗原或表位的结合可检测地降低第一抗体或其抗原结合片段与抗原或表位的结合，并且在这些实施例中，第一和第二抗体或其抗原结合片段被称为“交叉竞争”。无论竞争或交叉竞争发生的机制如何(例如，空间位阻，构象变化，或与共同表位或其部分结合)，本领域技术人员将理解，基于本文提供的教导，此类竞争和/或交叉竞争抗体被涵盖并且可用于本文公开的方法。
抗体的“可变区”或“可变结构域”是指抗体重链或轻链的氨基末端结构域。重链的可变结构域可称作“VH”。轻链的可变结构域可称作“VL”。这些结构域大体上是抗体最可变的部分，包含抗原结合位点。术语“可变的”是指以下事实：可变结构域的某些部分在抗体之间在序列上差异很大，并用于每个特定抗体与其特定抗原的结合及特异性。然而，可变性并不是均匀分布在整个抗体的可变结构域内。它集中在轻链和重链可变结构域中三个被称为高变区(HVR)或互补决定区(CDR)的片段中。可变结构域的更高度保守的部分称为框架区(FR)。天然重链和轻链的可变结构域各包含四个FR区，主要采用β-片层构型，通过三个CDR连接，形成环连接，并在某些情况下形成β-片层结构的一部分。每条链中的CDR通过FR区紧密相邻地保持在一起，并与来自另一条链的CDR一起，有助于形成抗体的抗原结合位点(参见Kabat等，《免疫学相关蛋白质序列》，第5版，国立卫生研究院，Bethesda，Md.(1991))。恒定结构域不直接参与抗体与抗原的结合，但表现出多种效应器功能，如参与抗体在抗体依赖性细胞毒性中的功能。
来自任何脊椎动物物种的抗体(免疫球蛋白)的“轻链”可以根据其恒定结构域的氨基酸序列被分为两种明显不同类型(即kappa(κ)和lambda(λ))中的一种。
“框架”或“FR”残基是除了如本文所定义的HVR残基之外的那些可变结构域残基。
术语“高变区”或“HVR”在本文使用时指抗体可变结构域的序列高变和/或形成结构上限定的环的区域。大体上，抗体包含六个HVR；三个在VH(H1，H2，H3)，三个在VL(L1，L2，L3)。在天然抗体中，H3和L3在六个HVR中表现出最具多样性，尤其是H3被认为在使抗体精密的特异性中发挥着独特的作用。参见，例如，Xu等，《免疫》13:37–45(2000)；Johnson和Wu，《分子生物学方法》248:1–25(Lo编辑，Human出版社，Totowa，N.J.，2003)。事实上，天然存在的仅由重链组成的骆驼(camelid)抗体在没有轻链的情况下是有功能性且稳定的(参见，例如，Hamers-Casterman 1993；Sheriff 1996)。许多HVR描述处于使用中并且包含在本文中。Kabat互补决定区(CDR)基于序列可变性且是最常用的(Kabat等，《免疫学相关蛋白质序列》，第5版，国立卫生研究院，Bethesda，Md.(1991)，通过引用整体并入本文)。每个重链和轻链均有CDR 1，2，和3。而Chothia&Lesk指的是结构环的位置。AbM HVR代表Kabat HVR和Chothia结构环之间的折衷，由Oxford Molecular的AbM抗体建模软件使用。“接触”HVR基于对可用复杂晶体结构的分析。HVR可包含如下“扩展的HVR”：VL中的24–36或24–34(L1)，46–56或50–56(L2)，和89–97或89–96(L3)，和VH中的26–35(H1)，50–65或49–65(H2)，和93–102，94–102，或95–102(H3)。对于这些定义中的每一个，可变结构域残基根据上述Kabat等编号。
本文的术语“Fc区”用于定义免疫球蛋白重链的C-末端区，其包括天然序列Fc区和变体Fc区。尽管免疫球蛋白重链Fc区的边界可能有所不同，但人IgG重链Fc区通常被定义为从位置Cys226的氨基酸残基，或从Pro230延伸至其羧基末端。例如，在抗体的产生或纯化过程中，或通过重组加工编码抗体重链的核酸，可去除Fc区的C-末端赖氨酸。因此，如本文所用，全抗体可以是具有或不具有C-末端赖氨酸的抗体。
抗体及其抗原结合片段
本文提供了与CEACAM1特异性结合的分离的抗体或其抗原结合片段，包括GenBank登录号AAH14473.1中所列的CEACAM1和/或具有SEQ ID NO:31中所列的氨基酸序列。在某些实施例中，抗体或其抗原结合片段与IgV结构域结合。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段与完全位于IgV结构域内的表位结合，而在其他实施例中，抗体或其抗原结合片段与部分位于IgV结构域内的表位结合，即跨IgV结构域的边界重叠到相邻结构域。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段以小于1μM，小于1nM，或小于10pM的KD结合CEACAM1。在某些实施例中，本文提供的抗体或抗原结合片段以约1x10-9M至约1x10-12M的KD结合CEACAM1。在某些实施例中，抗体或其抗原结合片段以至少10nM KD，7.5nMKD，5nM KD，2.5nM KD，1.5nM KD，至少1.0nM KD，至少0.75nM KD，至少0.5nM KD，至少0.25nMKD，或至少0.1nM KD的结合亲和力结合CEACAM1。
在某些实施例中，CEACAM1抗体或其抗原结合片段的KD可通过测量单功能Fab片段的结合亲和力来确定。在某些实施例中，结合亲和力可通过表面等离子体共振(SPR)测量，例如，使用BIAcore3000TM SPR系统(BIAcore Inc.，Piscataway N.J.)。CM5芯片可根据供应商的说明用N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化。抗原可稀释至pH 4.0的10mM醋酸钠中，并以0.005mg/mL的浓度注入活化的芯片。使用跨各芯片通道的可变流时间，可以实现两个抗原密度范围：用于详细的动力学研究的100–200响应单位(RU)和用于筛选试验的500–600RU。纯化的Fab样品的连续稀释(0.1–10×估计的KD)以100微升/分钟的速度注入1分钟，并允许解离时间长达2小时。通过ELISA和/或SDS-PAGE电泳使用已知浓度的Fab(由氨基酸分析确定)作为标准确定Fab蛋白质的浓度。通过使用BIA评估程序将数据拟合到1:1Langmuir结合模型(Karlsson,R.Roos,H.Fagerstam,L.Petersson,B.(1994).《酶学方法》6.99–110，其内容整体并入本文)，同时获得动力学结合速率(kon)和解离速率(koff)。平衡解离常数(Kd)值计算为koff/kon。该方案适用于确定抗体或片段对任何抗原的结合亲和力。也可以使用本领域已知的其他方案。例如，ELISA是本领域已知的方案。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)，和
RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)；
(b)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16)，
ATSSLDS(SEQ ID NO:17)，和
LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)；
(c)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)，和
DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)；
(d)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:23)，和
QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)；
(e)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)，
VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)，和
SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)；或
(f)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:29)，和
QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)，和
RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)；
和包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16)，
ATSSLDS(SEQ ID NO:17)，和
LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)；
(b)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)，和
DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)；
和包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:23)，和
QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)；或
(c)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)，
VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)，和
SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)；
和包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:29)，和
QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含SEQ ID NO:2的重链可变区；
(b)包含SEQ ID NO:4的轻链可变区；
(c)包含SEQ ID NO:6的重链可变区；
(d)包含SEQ ID NO:8的轻链可变区；
(e)包含SEQ ID NO:10的重链可变区；或
(f)包含SEQ ID NO:12的轻链可变区。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含SEQ ID NO:2的重链可变区和包含SEQ ID NO:4的轻链可变区；
(b)包含SEQ ID NO:6的重链可变区和包含SEQ ID NO:8的轻链可变区；或
(c)包含SEQ ID NO:10的重链可变区和包含SEQ ID NO:12的轻链可变区。
本文提供的抗体包括天然存在的抗体，重组抗体，嵌合抗体，人源化抗体，单克隆抗体，和多克隆抗体。本文提供的抗原结合片段包括但不限于，sdAb，Fv，二硫键连接的Fv，scFv，双抗体，Fd，Fab，Fab’，或F(ab’)2。在某些实施例中，本文提供的其抗原结合片段的长度为至少5，6，8，或10个氨基酸。在这些实施例的某些中，片段的长度为至少14，至少20，至少50，或至少70，80，90，100，150，或200个氨基酸。
在某些实施例中，本文提供的抗体或抗原结合片段是重组产生的。在这些实施例的某些中，抗体或其片段在真核表达系统中产生并且在对应于Asn297的Fc部分上的残基处包含糖基化。
本文提供的抗体及其抗原结合片段可以并入融合蛋白。本领域普通技术人员将容易理解，本文提供的制剂和方法可利用此类融合蛋白。例如，本文提供的利用抗体或其抗原结合片段的治疗方法可以利用包含抗体或其抗原结合片段的融合蛋白。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段抑制人成熟树突细胞或人T细胞产生CEACAM1调节的细胞因子。在某些实施例中，细胞因子产生是IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α产生中的一种或多种。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包括轻链和/或重链的框架区的全部或部分。在这些实施例的某些中，框架区是人框架区。在其他实施例中，框架区包含与人框架区或其部分具有至少85％同一性，包括至少90％，至少95％，至少98％，或至少99％同一性的氨基酸序列。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含人Fc区的全部或部分。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含(i)重链框架区，其包含人种系框架序列IGHV1-2*02，IGHV1-2*03，IGHV1-2*04，IGHV1-2*05，IGHV1-2*06，IGHV1-18*04，IGHV1-69-2*01，IGHV1-46*01，IGHV7-4-1*01，IGHV7-4-1*02，IGHV7-4-1*01，IGHV7-81*01，IGHD2-8*02，IGHD3-10*01，IGHD3-10*02，IGHD3-22*01，IGHD5-18*01，IGHD5-5*01，IGHD5-12*01，IGHD5-24*01，IGHD6-25*01，IGHJ3*01，IGHJ4*01，IGHJ4*02，IGHJ4*03，IGHJ6*01，或IGHJ6*02，和/或(ii)轻链框架区，其包含人种系框架序列IGKV1-17*01，IGKV1-6*01，IGKV1-6*02，IGKV1-13*02，IGKV1-27*01，IGKV1-33*01，IGKV3-7*02，IGKV4-1*01，IGKV1D-13*02，IGKV1D-33*01，IGKV3D-7*01，IGKJ1*01，IGKJ2*01，IGKJ3*01，IGKJ4*01，或IGKJ4*02。
当本文提供的抗原结合片段是scFv时，它可以包含具有与人可变结构域FR1，FR2，FR3，或FR4序列相同的可变结构域框架序列。scFv中的肽接头的长度可在约5至约30个氨基酸的范围内，并且可包含一个或多个甘氨酸，丝氨酸，和/或苏氨酸残基(参见，例如，Bird1988；Huston 1988；各自通过引用整体并入本文)。
从N-末端到C-末端，成熟的轻链和重链可变区包含区FR1，CDR1，FR2，CDR2，FR3，CDR3，和FR4。每个结构域的氨基酸分配均符合Kabat，《免疫学相关蛋白质序列》(国立卫生研究院，Bethesda，Md.(1987和1991))；Chothia&Lesk，1987；或Chothia 1989的定义，各自通过引用整体并入本文。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段是人源化的，即它们包含衍生自非人免疫球蛋白的最少序列的嵌合抗体。在这些实施例的某些中，人源化抗体是人免疫球蛋白(受体抗体)，其中来自受体HVR或CDR的残基被来自非人物种(如小鼠，大鼠，兔，或非人灵长类动物)(供体抗体)的具有想要的特异性，亲和力，和/或能力的HVR或CDR的残基取代。人源化抗体可包含非人(例如，鼠)抗体的重链和轻链的1，2，3，4，5，或全部6个CDR。在一个优选的实施例中，鼠mAb的框架(FR)残基被相应的人免疫球蛋白可变结构域框架残基取代。可以在实施例中进一步修饰这些，以进一步改善抗体性能。此外，在特定的实施例中，人源化抗体可包含未在受体抗体或供体抗体中发现的残基。在一个实施例中，人源化抗体不包含未在受体抗体或供体抗体中发现的残基。一般而言，人源化抗体将包含基本上全部的至少一个且通常两个可变结构域，其中全部或在实施例中基本上全部的高变环对应于非人免疫球蛋白的高变环，以及全部或在实施例中基本上全部的FR是人免疫球蛋白序列的FR。人源化抗体任选地还将包含免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的恒定区(参见，例如，Jones 1986；Riechmann 1988；Presta 1992；Vaswani&Hamilton1998；Harris 1995；Hurle&Gross 1994；和美国专利号6,982,321和7,087,409，其各自内容通过引用整体并入本文)。在一个实施例中，其中人源化抗体包含未在受体抗体或供体抗体中发现的残基，抗体的Fc区如PCT公开号WO99/58572中所述进行修饰，其内容通过引用整体并入本文。
人源化单克隆抗体的技术是所周知的，并且描述于例如，美国专利号4,816,567；5,807,715；5,866,692；6,331,415；5,530,101；5,693,761；5,693,762；5,585,089；和6,180,370，其内容各自通过引用整体并入本文。已经描述了许多包含衍生自非人免疫球蛋白的抗原结合位点的“人源化”抗体分子，包括具有与人恒定结构域融合的啮齿动物或经修饰的啮齿动物V区及其相关互补决定区(CDR)的抗体(参见，例如，Winter&Milstein 1991；Lobuglio 1989；Shaw 1987；和Brown 1987，其内容各自通过引用整体并入本文)。其他参考文献描述了啮齿动物高变区或CDR在与合适的人抗体恒定结构域融合之前移植(grafted)入人支持框架区(FR)。参见，例如，Riechmann 1988；Verhoeyen 1988；Jones 1986，其各自内容通过引用整体并入本文。另一参考文献描述了由经重组改造的(veneered)啮齿动物框架区所支持的啮齿动物CDR(参见欧洲专利公开号519596，通过引用整体并入本文)。这些“人源化”分子被设计为最小化对啮齿动物抗人抗体分子的不必要的免疫反应，该不必要的免疫反应限制了那些部分在人受体中的治疗应用的持续时间和有效性。抗体恒定区可进行加工，使其呈免疫学惰性(例如，不会触发补体溶解)(参见，例如，PCT公开号WO99/58572；英国专利申请号9809951.8)。也可以使用的人源化抗体的其他方法公开于Daugherty 1991；美国专利号6,180,377；6,054,297；5,997,867；5,866,692；6,210,671；和6,350,861；以及PCT公开号WO01/27160，各自通过引用整体并入本文。
其他形式的人源化抗体具有一个或多个CDR，包括全部六个CDR，其相对于原始抗体发生改变。因此，本文在某些实施例中提供了抗体或其抗原结合片段，其为人源化抗体，其中一个或多个或全部CDR相对于原始抗体发生改变。在其他实施例中，本文提供的人源化抗体或其抗原结合片段不具有相对于原始抗体已改变的任何CDR。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段可以重组产生，例如，使用转染至宿主细胞的重组表达载体表达，从重组组合的人抗体文库(library)分离，或从人免疫球蛋白基因的转基因动物(例如，小鼠)分离。
根据其重链恒定结构域的氨基酸序列，抗体(免疫球蛋白)可分为不同的类别。本文提供的抗体或其抗原结合片段可以分别是例如，IgG，IgD，IgE，IgA，或IgM抗体或其片段中的任何一种。在某些实施例中，抗体或抗原结合片段是IgG或IgG的片段，并且在某些实施例中，抗体或其抗原结合片段是IgG1，IgG2，IgG2a，IgG2b，IgG3，或IgG4。在某些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含来自人IgG1，人IgG2，人IgG2a，人IgG2b，人IgG3，或人IgG4的序列。也可以使用这些抗体亚型的任何组合。选择要使用的抗体类型时的一个考虑因素是想要的抗体血清半衰期。例如，IgG的血清半衰期大体上为23天，IgA为6天，IgM为5天，IgD为3天，IgE为2天。(Abbas AK,Lichtman AH,Pober JS.《细胞与分子免疫学》，第4版，W.B.Saunders Co.，费城，2000，通过引用整体并入本文)。
在某些实施例中，本文提供的抗体或抗原结合片段包含对本文公开的可变区的一种或多种修饰。例如，本文提供的抗体或抗原结合片段可包含不显著影响其性质的功能上等效的可变区和CDR，以及具有增强或降低的活性和/或亲和力的变体。例如，可以突变氨基酸序列以获得对人CEACAM1 IgV具有想要的结合亲和力的抗体或其抗原结合片段。多肽的修饰是本领域的常规实践，无需在本文详细描述。经修饰的多肽的示例包括具有氨基酸残基的保守取代，一个或多个氨基酸缺失或添加(其不显著有害地改变功能活性，或其使多肽与其配体的亲和力成熟(增强))，或使用化学类似物的多肽。
氨基酸序列插入包括长度从一个残基到含有一百个或更多个残基的多肽的氨基和/或羧基末端融合，以及单个或多个氨基酸残基的序列内插入。末端插入的示例包括具有N-末端甲硫氨酰残基的抗体或与表位标签融合的抗体。抗体分子的其他插入变体包括酶或多肽与抗体的N-或C-末端的融合，从而增加抗体在血液循环中的半衰期。
取代变体是抗体分子中至少一个氨基酸残基被去除并在其位置插入不同的残基。取代诱变最感兴趣的位点包括高变区，但也考虑框架改变。保守取代示于表1中“保守取代”的标题下。如果此类取代导致生物学活性的变化，则可以引入表1中命名为“示例性取代”，或如下文参考氨基酸类别进一步描述的更实质性的变化，并筛选产物。
表1：氨基酸取代
Figure BDA0003222588610000241
Figure BDA0003222588610000251
抗体生物学性质的实质性修饰通过选择在维持以下方面效果显著不同的取代来实现：(a)取代区域中多肽骨架的结构，例如，作为β-片层或螺旋构象，(b)分子在靶位点的电荷或疏水性，或(c)侧链的体积(bulk)。天然存在的残基根据常见的侧链性质分为以下几组：
(1)非极性：正亮氨酸，Met，Ala，Val，Leu，Ile；
(2)无电荷极性：Cys，Ser，Thr，Asn，Gln；
(3)酸性(带负电)：Asp，Glu；
(4)碱性(带正电)：Lys，Arg；
(5)影响链取向的残基：Gly，Pro；和
(6)芳香族：Trp，Tyr，Phe，His。
通过将这些类别之一的成员交换为另一类别来进行非保守取代。
例如，可能进行的一种类型的取代是将抗体中的一个或多个可能具有化学反应性的半胱氨酸改变为另一残基，例如但不限于，丙氨酸或丝氨酸。例如，可以存在非规范(non-canonical)半胱氨酸的取代。可以在可变结构域的CDR或框架区或抗体的恒定区中进行取代。在一些实施例中，半胱氨酸是规范的。任何不参与维持抗体正确构象的半胱氨酸残基也可以被取代，一般被丝氨酸取代，以提高分子的氧化稳定性并防止异常交联。相反，可以将一个或多个半胱氨酸键添加至抗体以提高其稳定性，特别是在抗体是抗体片段(如Fv片段)时。
本文提供的抗体或其抗原结合片段可例如，在重链和/或轻链的可变结构域中进行修饰，例如，以改变抗体或片段的结合性质。可变区的变化可以改变结合亲和力和/或特异性。在一些实施例中，在CDR结构域内进行的保守氨基酸取代不超过一到五个。在其他实施例中，在CDR结构域内进行的保守氨基酸取代不超过一到三个。例如，可以在一个或多个CDR区中进行突变以增加或减少抗体或其片段对人CEACAM1的KD，增加或减少koff，或改变抗体或其片段的结合特异性。定点诱变技术为本领域所周知。
还可以在框架区或恒定区中进行修饰或突变以增加本文提供的CEACAM1抗体或其抗原结合片段的半衰期(参见，例如，PCT公开号WO00/09560)。还可以在框架区或恒定区中进行突变以改变抗体的免疫原性，为与另一分子的共价或非共价结合提供位点，或改变补体固定，FcR结合，和抗体依赖性细胞介导的细胞毒性等性质。根据该技术，单个抗体可在可变结构域的CDR或框架区或恒定区的任何一个或多个中具有突变。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段与治疗剂连接或缀合。在这些实施例的某些中，治疗剂是细胞毒性药物，放射性同位素，免疫调节剂，或第二抗体。
本文在某些实施例中提供了分离的抗CEACAM1抗体或其抗原结合片段，其：
a)与CEACAM1的IgV结构域特异性结合，抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NOs:13–15，SEQ ID NOs:19–21，或SEQ ID NOs:25–27中所列的CDR序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NOs:16–18，SEQ ID NOs:22–24，或SEQ ID NOs:28–30中所列的CDR序列；或
b)与参考抗体或抗体片段特异性结合至CEACAM1上的相同表位，或与参考抗体或抗体片段交叉竞争特异性结合至CEACAM1或CEACAM1的IgV结构域，所述参考抗体或抗体片段包含重链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NOs:13–15，SEQ ID NOs:19–21，或SEQ IDNOs:25–27中所列的CDR序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NOs:16–18，SEQID NOs:22–24，或SEQ ID NOs:28–30中所列的CDR序列。
在某些实施例中，本文提供的抗体或抗原结合片段抑制或减少多个CEACAM1蛋白的IgV结构域之间或之中的相互作用或抑制或减少受试者中成熟树突细胞或T细胞产生CEACAM1调节的细胞因子。
在某些实施例中，如本文提供的抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，该重链可变区包含与SEQ ID NO:2具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:2具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:2中所列的氨基酸序列。
在某些实施例中，如本文提供的抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，该重链可变区包含与SEQ ID NO:6具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:6具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:6中所列的氨基酸序列。
在某些实施例中，如本文提供的抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，该重链可变区包含与SEQ ID NO:10具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:10具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:10中所列的氨基酸序列。
在某些实施例中，如本文提供的抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区，该轻链可变区包含与SEQ ID NO:4具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:4具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NO:4中所列的氨基酸序列。
在某些实施例中，如本文提供的抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区，该轻链可变区包含与SEQ ID NO:8具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:8具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NO:8中所列的氨基酸序列。
在某些实施例中，如本文提供的抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区，该轻链可变区包含与SEQ ID NO:12具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:12具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。在这些实施例的某些中，抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NO:12中所列的氨基酸序列。
本文的术语“Fc结构域”用于定义免疫球蛋白重链的C-末端区，其包括天然序列Fc区和变体Fc区。尽管免疫球蛋白重链Fc结构域的边界可能有所不同，但人IgG重链Fc结构域通常被定义为从位置Cys226的氨基酸残基，或从Pro230延伸至其羧基末端。例如，通过重组加工编码其的核酸，可去除Fc结构域的C-末端赖氨酸。在实施例中，抗体包含Fc结构域。在一个实施例中，Fc结构域与人IgG1 Fc结构域具有相同的序列或99％或更高的序列相似性。在一个实施例中，Fc结构域与人IgG2 Fc结构域具有相同的序列或99％或更高的序列相似性。在一个实施例中，Fc结构域与人IgG3 Fc结构域具有相同的序列或99％或更高的序列相似性。在一个实施例中，Fc结构域与人IgG4 Fc结构域具有相同的序列或99％或更高的序列相似性。在一个实施例中，Fc结构域没有突变。在一个实施例中，Fc结构域在CH2-CH3结构域界面发生突变以增加IgG在酸性而非中性pH下对FcRn的亲和力(Dall’Acqua等，2006；Yeung等，2009)。在一个实施例中，Fc结构域具有与人IgG1 Fc结构域相同的序列。
在某些实施例中，本文提供的抗体或其抗原结合片段被冻干和/或冷冻干燥并且被重构以供使用。
制剂
本文在某些实施例中提供了包含如本文提供的抗体或其抗原结合片段的制剂，包括药学制剂。在某些实施例中，这些制剂包含载体和/或赋形剂。
在某些实施例中，本文提供的制剂包含稳定剂以防止蛋白质在使用前的储存和运输期间由于变性，氧化，或聚集的影响而导致活性或结构完整性的丧失。制剂可包含盐，表面活性剂，或pH和张力剂(如糖)的任意组合。在本技术的制剂用于注射的情况下，想要具有在近似中性pH范围内的pH值，并且将表面活性剂水平降至最低也有利于避免制剂中对注射入受试者有害的气泡。在一个实施例中，制剂为液体形式并且稳定地支持溶液中的高浓度生物活性抗体，且适于吸入或肠胃外施用。在某些实施例中，制剂适于静脉内，肌内，腹膜内，皮内，和/或皮下注射。在某些实施例中，制剂为液体形式并且已最小化气泡形成和过敏反应副作用的风险。在某些实施例中，制剂是等渗的。在某些实施例中，制剂的pH值为6.8至7.4。
药学上可接受的载体的示例包括但不限于，磷酸盐缓冲盐溶液，无菌水(包括注射用水USP)，乳剂(如油/水乳剂)，和多种类型的润湿剂。用于气溶胶或肠胃外施用的优选稀释剂是磷酸盐缓冲盐水或生理盐水(0.9％)，例如，0.9％氯化钠溶液，USP。包含此类载体的组合物通过所周知的常规方法配制(参见，例如，Remington，《药学的科学与实践》，第22版，药学出版社(2012)，其内容通过引用整体并入本文)。在非限制性示例中，载体可包含磷酸氢二钠，氯化钾，磷酸二氢钾，聚山梨酯80(例如，2-[2-[3,5-双(2-羟基乙氧基)氧杂环戊-2-基]-2-(2-羟基乙氧基)乙氧基]乙基(E)-十八碳-9-烯酸酯)，脱水乙二胺四乙酸二钠，蔗糖，磷酸二氢钠一水合物，和磷酸氢二钠二水合物中的一种或多种。
在某些实施例中，本文提供的制剂可被冻干或以任何合适的形式提供，包括但不限于，可注射溶液或可吸入溶液，凝胶形式，和片剂形式。
在某些实施例中，本文提供的制剂就抗体或其抗原结合片段而言是基本上纯的，这意味着至少60％至75％的制剂样品表现出单一种类的抗体或片段。在这些实施例中的某些中，超过60％，超过70％，超过80％，超过90％，超过95％，超过99％，超过99.5％，超过99.9％，或100％抗体或其抗原结合片段是单一种类。纯度可以通过本领域所周知的多种方法测试，包括例如，聚丙烯酰胺凝胶电泳或HPLC。
试剂盒
本文在某些实施例中提供了包含如本文提供的抗体或其抗原结合片段的试剂盒。在某些实施例中，这些试剂盒还包含使用说明。例如，这些试剂盒可用于抑制细胞或受试者中的CEACAM1活性，检测细胞，受试者，或生物学样品中的CEACAM1，治疗与CEACAM1活性或表达相关联的病症(包括癌症)，或抑制有需要的受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制。
使用方法
本文在某些实施例中提供了抑制CEACAM1活性的方法，包括使CEACAM1与足以抑制CEACAM1活性的量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂接触，使得所述接触导致CEACAM1活性降低。活性的降低可能是部分的或完全的，并且在某些实施例中，抑制的程度可基于抗体或抗原结合片段的量而变化。
本文在某些实施例中提供了使用如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含这些抗体或片段的制剂或试剂盒以抑制CEACAM1活性。
本文在某些实施例中提供了抑制细胞中CEACAM1活性的方法，包括使细胞与足以抑制细胞中CEACAM1活性的量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其片段的制剂接触，使得所述接触导致细胞中CEACAM1活性降低。活性的降低可能是部分的或完全的，并且在某些实施例中，抑制的程度可基于抗体或抗原结合片段的量而变化。在某些实施例中，抑制导致细胞产生的CEACAM1调节的一种或多种细胞因子的减少，并且在这些实施例的某些中，细胞因子选自IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α。因此，本文还提供了降低细胞中CEACAM1调节的一种或多种细胞因子的产生的方法，包括使细胞与足以抑制CEACAM1活性的量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂接触。在这些实施例的某些中，细胞因子选自IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α。
本文在某些实施例中提供了使用如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含这些抗体或片段的制剂或试剂盒以抑制细胞中CEACAM1活性和/或抑制CEACAM1调节的一种或多种细胞因子的产生，包括但不限于IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α。
本文在某些实施例中提供了抑制受试者中CEACAM1活性的方法，包括向受试者施用足以抑制受试者中CEACAM1活性的量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂。活性的降低可能是部分的或完全的，并且在某些实施例中，抑制的程度可基于所施用的抗体或抗原结合片段的量而变化。在某些实施例中，抑制可能是局部的，例如区域，器官，或细胞特异性的。在其他实施例中，抑制可能是全身性的。在某些实施例中，受试者已被诊断患有，怀疑患有，或被视为已具有发展与CEACAM1活性或表达相关联的病症的风险，包括例如，癌症或肿瘤(neoplasm)。在某些实施例中，抗体或其抗原结合片段或制剂的施用导致受试者中CEACAM1调节的一种或多种细胞因子的产生减少，并且在这些实施例的某些中，细胞因子选自IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α。因此，本文还提供了降低受试者中CEACAM1调节的一种或多种细胞因子的产生的方法，包括向受试者施用如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂。在这些实施例的某些中，细胞因子选自IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α。
本文在某些实施例中提供了如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含这些抗体或片段的制剂或试剂盒在抑制受试者中CEACAM1活性，或在制备用于在受试者中抑制CEACAM1活性和/或抑制CEACAM1调节的一种或多种细胞因子(包括但不限于IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α)的产生的药物中的用途。
本文在某些实施例中提供了抑制受试者中成熟树突细胞或T细胞产生CEACAM1调节的细胞因子的方法，包括向受试者施用治疗有效量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂。
本文在某些实施例中提供了如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含这些抗体或片段的制剂或试剂盒，在抑制受试者中成熟树突细胞或T细胞产生CEACAM1调节的细胞因子，或在制备用于抑制受试者中成熟树突细胞或T细胞产生CEACAM1调节的细胞因子的药物中的用途。
本文在某些实施例中提供了在有需要的受试者中抑制CEACAM1介导的T细胞抑制的方法，包括向受试者施用治疗有效量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂。CEACAM1介导的T细胞抑制的抑制可能是部分的或完全的，并且在某些实施例中，抑制的程度可基于所施用的抗体或抗原结合片段的量而变化。
本文在某些实施例中提供了如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含这些抗体或片段的制剂或试剂盒，在有需要的受试者中抑制CEACAM1介导的T细胞抑制，或在制备用于抑制有需要的受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制的药物中的用途。
本文在某些实施例中提供了治疗有需要的受试者中与CEACAM1活性或表达相关联的病症的方法，包括向受试者施用治疗有效量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂。在这些实施例的某些中，与CEACAM1活性或表达相关联的病症是癌症。
本文在某些实施例中提供了如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含这些抗体或片段的制剂或试剂盒，在治疗有需要的受试者中与CEACAM1活性或表达相关联的病症，或在制备用于治疗有需要的受试者中与CEACAM1活性或表达相关联的病症的药物中的用途。
本文在某些实施例中提供了治疗有需要的受试者的癌症的方法，包括向受试者施用治疗有效量的如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂。在这些实施例的某些中，癌症是实体恶性肿瘤，并且在某些实施例中，癌症包括实体瘤。在某些实施例中，癌症是头颈部鳞状细胞癌，肾脏肾透明细胞癌，肾脏肾乳头状细胞癌，或脑低级别胶质瘤。在某些实施例中，癌症是胰腺癌，结直肠癌，胃癌，黑色素瘤，肝癌，胆管癌，泌尿道癌，肺癌，淋巴瘤，上呼吸消化道癌，乳腺癌，甲状腺癌，食道癌，或卵巢癌。在某些实施例中，癌症是白血病或成神经管细胞瘤。在某些实施例中，受试者当前正在接受或之前已经接受抗PD-1，抗PD-L1，或抗CTLA4疗法。在这些实施例的某些中，用如本文提供的抗体或其抗原结合片段或药学制剂与抗PD-1，抗PD-L1，或抗CTLA4疗法的组合治疗受试者。在这些实施例中，可同时或顺序施用药剂(agents)，并且以相同或不同的剂量期间施用。
本文在某些实施例中提供了如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含这些抗体或片段的制剂或试剂盒，在治疗有需要的受试者的癌症，或在制备用于治疗有需要的受试者的癌症的药物中的用途。
本文在某些实施例中提供了干扰多个CEACAM1蛋白的IgV结构域之间或之中的相互作用的方法，包括使包含多个CEACAM1蛋白的样品与如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂接触。
本文在某些实施例中提供了如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含这些抗体或片段的制剂或试剂盒，在干扰多个CEACAM1蛋白的IgV结构域之间或之中的相互作用，或在制备用于干扰多个CEACAM1蛋白的IgV结构域之间或之中的相互作用的药物中的用途。
本文在某些实施例中提供了检测细胞中CEACAM1表达的方法，包括使细胞与如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂接触，其中该抗体或其抗原结合片段与可检测标志物连接或缀合，然后检测该标志物以确定该抗体或抗原结合片段是否与细胞结合，所述结合表示CEACAM1表达的存在。
本文在某些实施例中提供了检测受试者中CEACAM1表达的方法，包括向受试者施用如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含该抗体或其抗原结合片段的制剂，其中该抗体或其抗原结合片段与可检测标志物连接或缀合，然后检测该标志物以确定是否存在CEACAM1表达。在某些实施例中，这些方法用于检测表达CEACAM1的癌细胞的存在。因此，本文在某些实施例中提供了诊断受试者中表达CEACAM1的癌症的方法。
本文在某些实施例中提供了使用如本文提供的抗体或其抗原结合片段，或包含这些抗体或片段的制剂或试剂盒，以检测受试者中CEACAM1表达，包括检测CEACAM1表达以检测表达CEACAM1的癌症。
本文在某些实施例中提供了标记CEACAM1的方法，包括使CEACAM1同与可检测标志物连接或缀合的抗体或其抗原结合片段接触。
核酸，载体，和宿主细胞
本文提供了包含编码本文提供的抗体或其抗原结合片段的核酸序列的核酸分子。本文还提供了包含本文提供的一种或多种核酸分子的载体，以及包含本文提供的一种或多种核酸分子或载体的宿主细胞。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子包含编码抗体或其抗原结合片段的核酸序列，其包括：
(a)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)，和
RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)；
(b)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16)，
ATSSLDS(SEQ ID NO:17)，和
LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)；
(c)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)，和
DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)；
(d)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:23)，和
QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)；
(e)包含以下一个或多个的重链可变区：
GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)，
VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)，和
SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)；或
(f)包含以下一个或多个的轻链可变区：
RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:29)，和
QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子包含编码抗体或其抗原结合片段的核酸序列，其包括：
(a)包含以下一个或多个的抗体重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)，和
RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)；和
包含以下一个或多个的抗体重链可变区：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)，和
DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)；
(b)包含以下一个或多个的抗体重链可变区：
GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)，
VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)，和
SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)；和
包含以下一个或多个的抗体轻链可变区：
RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16)，
ATSSLDS(SEQ ID NO:17)，和
LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)；
(c)包含以下一个或多个的抗体轻链可变区：
RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:23)，和
QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)；和
包含以下一个或多个的抗体轻链可变区：
RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:29)，和
QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子包含编码以下的核酸序列：
(a)包含SEQ ID NO:2的重链可变区；
(b)包含SEQ ID NO:4的轻链可变区；
(c)包含SEQ ID NO:6的重链可变区；
(d)包含SEQ ID NO:8的轻链可变区；
(e)包含SEQ ID NO:10的重链可变区；或
(f)包含SEQ ID NO:12的轻链可变区。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子包含编码以下的核酸序列：
(a)包含SEQ ID NO:2的重链可变区和包含SEQ ID NO:4的轻链可变区；
(b)包含SEQ ID NO:6的重链可变区和包含SEQ ID NO:8的轻链可变区；或
(c)包含SEQ ID NO:10的重链可变区和包含SEQ ID NO:12的轻链可变区。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子包含具有SEQ ID NOs:1，3，5，7，9，或11中任一个所列序列的核酸序列。
在某些实施例中，本文提供的核酸分子是DNA分子，并且在这些实施例的某些中，DNA分子是cDNA分子。在其他实施例中，本文提供的核酸分子是RNA分子。
本文在某些实施例中提供了产生如本文提供的抗体或其抗原结合片段的方法，包括在表达抗体或其抗原结合片段的条件下培养如本文提供的宿主细胞。
融合蛋白
本文在某些实施例中提供了包含本文提供的一种或多种抗体或抗原结合片段的融合蛋白，以及编码这些融合蛋白的核酸，包含这些核酸的载体，包含这些载体的宿主细胞，以及从这些宿主细胞表达融合蛋白的方法。本文还提供了包含编码本文提供的抗体或其抗原结合片段的核酸序列的核酸分子的使用方法。本文还提供了包含本文提供的一种或多种核酸分子的载体，以及包含本文提供的一种或多种核酸分子或载体的宿主细胞。
除非本文另有说明或与上下文明显矛盾，否则本文描述的多种要素的全部组合均在本技术的范围内。
在介绍本技术或其一个或多个优选的实施例的要素时，冠词“一(a)”，“一(an)”，“该”，和“所述”旨在表示存在一个或多个要素。
贯穿本公开，以范围格式呈现本技术的多个方面。应当理解，范围格式的描述仅仅是为了方便和简洁，并且不应理解为对技术范围的僵化限制。因此，应该认为对范围的描述已经具体公开了全部可能的子范围以及该范围内的各个数值。例如，范围的描述如从1至6应该被认为已经具体公开了子范围，如从1至3，从1至4，从1至5，从2至4，从2至6，从3至6等，以及该范围内的各个数字，例如，1，2，3，4，5，和6。无论范围的宽度如何，这都适用。
本技术的其他目的，优点，和特征将从结合附图的以下说明书中变得明显。
本文提及的全部出版物，专利，专利申请公开，和书籍的公开通过引用整体并入本主题申请以更全面地描述本主题技术所属的领域。
从下面的实验细节可以更好地理解本技术。
示例
示例1：人癌症中CEACAM1表达的识别
通过对微阵列和RNA测序数据集的分析，确定CEACAM1在胰腺，结直肠，胃，黑色素瘤，肝，胆管，泌尿道，肺，淋巴瘤，上呼吸消化道，乳腺，甲状腺，食道，白血病，卵巢，和成神经管细胞瘤的许多人癌细胞系中广泛表达(图1)。还发现较高水平的CEACAM1与HNSC(头颈部鳞状细胞癌)，KIRC(肾脏肾透明细胞癌)，KIRP(肾脏肾乳头状细胞癌)，或LGG(脑低级别胶质瘤)患者的总体生存率较低显著相关联(图2)。不受任何理论的束缚，这些发现表明人癌症使用CEACAM1作为免疫检查点以抑制抗肿瘤免疫。
示例2：与人CEACAM1的IgV结构域特异性结合的单克隆抗体的生成
由于IgV结构域是CEACAM1的功能结构域，因此生成了与该结构域特异性结合的单克隆抗体。如前所述(Zhao 2013)，通过将CEACAM1 IgV编码区(L36-S150)与质粒pMT/BiP的人IgG1 Fc标签融合生成人CEACAM1 IgV-Ig融合蛋白。融合蛋白在S2系统中表达，然后纯化。用融合蛋白免疫小鼠，并通过标准技术从与NSO骨髓瘤细胞融合的脾细胞生成杂交瘤。
示例3：CEACAM1单克隆抗体的表征
使用表面等离子体共振评估具有如示例2所述生成的κ链的10个IgG1抗体的CEACAM1结合。10个抗体表现出范围为0.589至93.1nM KD的结合亲和力(图3)。发现3个抗体36B11，38B5，和25C8识别在人T细胞或人树突细胞上表达的内源性CEACAM1(图4)。使用混合淋巴细胞反应评估这三个抗体的阻断功能。将来自一个供体的PBMC的单核细胞分化的成熟树突细胞与来自另一个供体的PBMC的纯化T细胞温育四天。评估了36B11，38B5，和25C8的混合淋巴细胞反应，小鼠IgG1作为阴性对照，抗PD-L1作为阳性对照。全部三个CEACAM1抗体在48小时或96小时显著增加了多种细胞因子的产生，包括IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，和TNF-α(图5)。
总之，这些结果表明单克隆抗体36B11，38B5，和25C8是针对人CEACAM1的拮抗剂抗体。
示例4：抗体测序
对抗体38B5，36B11，和25C8杂交瘤进行测序，并发现全部三个都是具有独特VH和VL序列的不同克隆(图6)。这些抗体中的每一个的重链和轻链的DNA和氨基酸序列如下所列。前导序列用斜体表示，CDR序列用下划线表示。非斜体和非下划线部分是框架序列。
38B5重链DNA编码序列(420bp)：
ATGGATTGGGTGTGGACCTTGCCATTCCTGATGGCAGCTGCCCAAAGTGCCCAAGCACAGATCCAGTTGGTGCAGTCTGGACCTGAGCTGAAGAAGCCTGGAGAGACAGTCAAGATCTCCTGCAAGGCTTCTGGGTATATCTTC AGAAACTATGGAATGAACTGGGTGAAGCAGGCTCCAGGAAAGGGTTTAAAGTGGATGGGCTGGATAAACACCTACA CTGGAGAGCCAACATATGCTGATGACTTCAAGGGACGGTTTGCCTTCTCTTTGGAAACCTCTGCCAGCACTGCCTATTTGCAGATCAACAACCTCAAAAATGAGGACATGGCTACATATTTCTGTGCAAGACGGGGATGGTTACTTACTGGG GGTGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCTCAG(SEQ ID NO:1)。
38B5重链氨基酸序列(140AA)：
MDWVWTLPFLMAAAQSAQAQIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYIFRNYGMNWVKQAPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKGRFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDMATYFCARRGWLLTGGAMDYWGQGTSVTVSQ(SEQID NO:2)。
38B5重链CDR1：GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)。
38B5重链CDR2：WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)。
38B5重链CDR3：RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)。
38B5轻链编码序列(389bp)：
ATGAGGGCCCCTGCTCAGATTTTTGGGTTCTTGTTGCTCTTGTTTCCAGGTACCAGATGTGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCTTATCTGCCTCTCTGGGAGAAAGAGTCAGTCTCACTTGTCGGGCAAGTCAGGAC ATTGGTAGTAGCTTAAACTGGCTTCAGCAGGAACCAGATGGAACTATTAAACGCCTGATCTACGCCACATCCAGTT TAGATTCTGGTGTCCCCAAAAGGTTCAGTGGCAGTAGGTCTGGGTCAGATTATTCTCTCACCATCAGCAGCCTTGAGTCTGAAGATTTTGTAGACTATTACTGTCTACAATATGTTAGTTCTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAACGGGCTGA(SEQ ID NO:3)。
38B5轻链氨基酸序列(129AA)：
MRAPAQIFGFLLLLFPGTRCDIQMTQSPSSLSASLGERVSLTCRASQDIGSSLNWLQQEPDGTIKRLIYATSSLDSGVPKRFSGSRSGSDYSLTISSLESEDFVDYYCLQYVSSPWTFGGGTKLEIKRA(SEQ ID NO:4)。
38B5轻链CDR1：RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16)。
38B5轻链CDR2：ATSSLDS(SEQ ID NO:17)。
38B5轻链CDR3：LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)。
36B11重链DNA编码序列(404bp)：
ATGGATTGGGTGTGGACCTTGCCATTCCTGATGGCAGCTGCCCAAAGTGCCCAAGCACAGATCCAGTTGGTGCAGTCTGGACCTGACCTGAAGAAGCCTGGAGAGACAGTCAAGATCTCCTGCAAGGCTTCTGGGTATATCTTC AGAAACTATGGAATGAACTGGGTGAAGCAGGCTCCAGGAAAGGGTTTAAAGTGGATGGGCTGGATAAACACCTACA CTGGAGAGCCAACATATGCTGATGACTTCAAGGGACGGTTTGCCTTCTCTTTGGAAACCTCTGCCAGCACTGCCTATTTGCAGATCAACAACCTCAAAAATGAGGACATGGCTACATATTTCTGTGCAAGAGACTGCGGTACTAGCCATTAC TATGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTC(SEQ ID NO:5)。
36B11重链氨基酸序列(134AA)：
MDWVWTLPFLMAAAQSAQAQIQLVQSGPDLKKPGETVKISCKASGYIFRNYGMNWVKQAPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKGRFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDMATYFCARDCGTSHYYAMDYWGQGT(SEQ ID NO:6)。
36B11重链CDR1：GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)。
36B11重链CDR2：WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)。
36B11重链CDR3：DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)。
36B11轻链DNA编码序列(395bp)：
ATGGTGTCCTCACCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTCAAGGTACCAGATGTGATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGAC ATTAGCAATTATTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGAT TACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTATTCTCTCTCCATTAGCAACCTGGAGCAAGAAGATATTGCCACTTACTTTTGCCAACAGGGTAATACGTTTCCGCTCACGTTCGGTGCTGGGACCAAGCTGGATCTGAAACGGGCTGATGCTGC(SEQ ID NO:7)。
36B11轻链氨基酸序列(131AA)：
MVSSPQFLGLLLLCFQGTRCDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLSISNLEQEDIATYFCQQGNTFPLTFGAGTKLDLKRADA(SEQ ID NO:8)。
36B11轻链CDR1：RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)。
36B11轻链CDR2：YTSRLHS(SEQ ID NO:23)。
36B11轻链CDR3：QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)。
25C8重链DNA编码序列(417bp)：
ATGGAATGGAGCTGGGTTTTTCTCTTTCTCCTGTCAGTAACTGCAGGTGTTCACTCCCAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGAGCTGAGCTGGTAAGGCCTGGGACTTCAGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCTTCTGGATACGCCTTC ACTATTTACTTGATAGAGTGGGTAAAGCAGAGGCCTGGACAGGGCCTTGAGTGGATTGGAGTGATTAATCCTGGAA GTGGTGGTACTAACTACAATGAGAAGTTCAAGGGCAAGGCAACACTGACTGCAGACAAATCCTCCAGCACTGCCTTCATGCAGCTCAGCAGCCTGACATCTGATGACTCTGCGGTTTATTTCTGTGCAAGATCTTATTACTACGGTTCCTTT GCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCTCAG(SEQ ID NO:9)。
25C8重链氨基酸序列(139AA)：
MEWSWVFLFLLSVTAGVHSQVQLQQSGAELVRPGTSVKVSCKASGYAFTIYLIEWVKQRPGQGLEWIGVINPGSGGTNYNEKFKGKATLTADKSSSTAFMQLSSLTSDDSAVYFCARSYYYGSFAMDYWGQGTSVTVSQ(SEQID NO:10)。
25C8重链CDR1：GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)。
25C8重链CDR2：VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)。
25C8重链CDR3：SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)。
25C8轻链DNA编码序列(392bp)：
ATGGTGTCCTCAGCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTCAAGGTACCAGATGTGATGTCCAGATGACACAGACTATATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGAC ATTGGCAATTATTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGAT TACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAGCAAGAAGATATTGCCACTTACTTTTGCCAACAGGGTAATACGCTTCGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAACGGGCTGAATGCTG(SEQ ID NO:11)。
25C8轻链氨基酸序列(130AA)：
MVSSAQFLGLLLLCFQGTRCDVQMTQTISSLSASLGDRVTISCRASQDIGNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLRTFGGGTKLEIKRAEC(SEQ ID NO:12)。
25C8轻链CDR1：RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)。
25C8轻链CDR2：YTSRLHS(SEQ ID NO:29)。
25C8轻链CDR3：QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
此外，以下示例说明了本技术的几个实施例。
1.一种抗体或其抗原结合片段，包括
a)重链，其包含SEQ ID NO:13，SEQ ID NO:14，和SEQ ID NO:15中的一个或多个；和/或
轻链，其包含SEQ ID NO:16，SEQ ID NO:17，和SEQ ID NO:18中的一个或多个；
b)重链，其包含SEQ ID NO:19，SEQ ID NO:20，和SEQ ID NO:21中的一个或多个；和/或
轻链，其包含SEQ ID NO:22，SEQ ID NO:23，和SEQ ID NO:24中的一个或多个；或
c)重链，其包含SEQ ID NO:25，SEQ ID NO:26，和SEQ ID NO:27中的一个或多个；和/或
轻链，其包含SEQ ID NO:28，SEQ ID NO:29，和SEQ ID NO:30中的一个或多个。
2.一种抗体或其抗原结合片段，其与CEACAM1结合并包括：
a)重链，其包含SEQ ID NOs:13，14，和15；和/或
轻链，其包含SEQ ID NOs:16，17，和18；
3.一种抗体或其抗原结合片段，其与CEACAM1结合并包括：
a)重链，其包含SEQ ID NOs:19，20，和21；和/或
轻链，其包含SEQ ID NOs:22，23，和24；
4.一种抗体或其抗原结合片段，其与CEACAM1结合并包括：
a)重链，其包含SEQ ID NOs:25，26，和27；和/或
轻链，其包含SEQ ID NOs:28，29，和30；
5.根据示例1–4中任一项所述的抗体或其片段，其中，轻链和/或重链的框架区是人框架区，或与其具有85％或更多同一性。
6.根据示例5所述的抗体或其片段，其中，轻链和/或重链的框架区是人框架区。
7.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其以1.5nM KD或更强的亲和力与人CEACAM1，或人CEACAM1的IgV结构域结合。
8.根据示例7所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其以0.75nM KD或更强的亲和力与人CEACAM1，或人CEACAM1的IgV结构域结合。
9.根据示例1–8中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其具有人序列Fc区。
10.根据示例7，8，或9中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其抑制多个CEACAM1蛋白的IgV结构域之间或之中的相互作用或抑制人成熟树突细胞或人T细胞产生CEACAM1调节的细胞因子。
11.根据示例10所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中，细胞因子产生是IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α产生中的一种或多种。
12.根据示例1–11中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其片段是嵌合的或人源化的。
13.根据示例1–12中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其片段选自单克隆抗体，scFv，Fab片段，Fab’片段，F(ab)’2片段，和双特异性抗体。
14.一种编码抗体重链的核酸，其包含SEQ ID NO:13，SEQ ID NO:14，或SEQ IDNO:15中的一个或多个。
15.一种编码抗体重链的核酸，其包含SEQ ID NO:19，SEQ ID NO:20，或SEQ IDNO:21中的一个或多个。
16.一种编码抗体重链的核酸，其包含SEQ ID NO:25，SEQ ID NO:26，或SEQ IDNO:27中的一个或多个。
17.一种编码抗体轻链的核酸，其包含SEQ ID NO:16，SEQ ID NO:17，或SEQ IDNO:18中的一个或多个。
18.一种编码抗体轻链的核酸，其包含SEQ ID NO:22，SEQ ID NO:23，或SEQ IDNO:24中的一个或多个。
19.一种编码抗体轻链的核酸，其包含SEQ ID NO:28，SEQ ID NO:29，或SEQ IDNO:30中的一个或多个。
20.一种宿主细胞，其包含一种或多种如示例14–19中任一项所述的核酸。
21.根据示例1–13中任一项所述的抗体或其片段，与治疗剂，显像剂，或可检测标志物连接或缀合。
22.根据示例21所述的抗体或其片段，其中，所述治疗剂是细胞毒性药物，放射性同位素，免疫调节剂，或第二抗体。
23.一种抑制受试者中人CEACAM1活性的方法，包括施用一定量的如示例1–13，21，或22中任一项所述的抗体或其片段，或其人CEACAM1结合片段，有效抑制所述受试者中人CEACAM1活性。
24.根据示例23所述的方法，其中，所述受试者患有癌症或肿瘤或怀疑患有癌症或肿瘤。
25.一种抑制受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制的方法，包括施用一定量的如示例1–13，21，或22中任一项所述的抗体或其片段，有效抑制所述受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制。
26.一种治疗和/或预防受试者的癌症或肿瘤的方法，包括施用一定量的如示例1–13，21，或22中任一项所述的抗体或其片段，有效治疗所述受试者的癌症或肿瘤。
27.根据示例26所述的方法，其中，所述癌症是人CEACAM1阳性癌症或肿瘤。
28.根据示例24，26，或27所述的方法，其中，所述癌症是血液系统恶性肿瘤。
29.根据示例24，26，或27所述的方法，其中，所述癌症包括实体瘤。
30.根据示例29所述的方法，其中，所述癌症是头颈部鳞状细胞癌，肾脏肾透明细胞癌，肾脏肾乳头状细胞癌，或脑低级别胶质瘤。
31.根据示例29所述的方法，其中，所述癌症是胰腺癌，结直肠癌，胃癌，黑色素瘤，肝癌，胆管癌，泌尿道癌，肺癌，淋巴瘤，上呼吸消化道癌，乳腺癌，甲状腺癌，食道癌，或卵巢癌，或者是白血病或成神经管细胞瘤。
32.根据示例24，或26至31所述的方法，其中，所述受试者正在接受或已经接受抗PD-1或抗PD-L1或抗CTLA4疗法。
33.一种检测受试者中人CEACAM1阳性细胞的方法，包括以有效标记人CEACAM1阳性细胞的量施用一定量的具有与其缀合的可检测标志物的如示例1–13中任一项所述的抗体或其片段，然后检测受试者中标记的存在和/或量化标记的水平，从而检测受试者中人CEACAM1阳性细胞。
34.根据示例33所述的方法，其中，通过成像检测所述标记。
35.根据示例33或34所述的方法，其中，所述细胞是癌细胞或肿瘤细胞。
36.一种分离的抗CEACAM1抗体或抗体片段，其：
(a)与CEACAM1的IgV结构域特异性结合，所述抗体或抗体片段包含重链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NOs:13–15，SEQ ID NOs:19–21，或SEQ ID NOs:25–27中所列的CDR序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NOs:16–18，SEQ ID NOs:22–24，或SEQID NOs:28–30中所列的CDR序列；或
(b)与参考抗体或抗体片段特异性结合至CEACAM1上的相同表位，或与参考抗体或抗体片段交叉竞争特异性结合至CEACAM1或CEACAM1的IgV结构域，所述参考抗体或抗体片段包含重链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NOs:13–15，SEQ ID NOs:19–21，或SEQ IDNOs:25–27中所列的CDR序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NOs:16–18，SEQID NOs:22–24，或SEQ ID NOs:28–30中所列的CDR序列。
37.根据示例36所述的分离的抗CEACAM1抗体或抗体片段，其中，所述抗体或抗体片段抑制或减少多个CEACAM1蛋白的IgV结构域之间或之中的相互作用或抑制或减少受试者中成熟树突细胞或T细胞产生CEACAM1调节的细胞因子。
38.根据示例36或37所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:2具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:2具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。
39.根据示例38所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述重链可变区包含SEQ IDNO:2中所列的氨基酸序列。
40.根据示例36或37所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:6具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:6具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。
41.根据示例40所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述重链可变区包含SEQ IDNO:6中所列的氨基酸序列。
42.根据示例36或37所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:10具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:10具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。
43.根据示例42所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述重链可变区包含SEQ IDNO:10中所列的氨基酸序列。
44.根据示例36或37所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:4具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:4具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。
45.根据示例44所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述轻链可变区包含SEQ IDNO:4中所列的氨基酸序列。
46.根据示例36或37所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:8具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:8具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。
47.根据示例46所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述轻链可变区包含SEQ IDNO:8中所列的氨基酸序列。
48.根据示例36或37所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:12具有至少85％序列同一性，任选地与SEQ ID NO:12具有至少90％，95％，或99％序列同一性的氨基酸序列。
49.根据示例48所述的分离的抗体或抗体片段，其中，所述轻链可变区包含SEQ IDNO:12中所列的氨基酸序列。
50.一种药学组合物，其包含有效量的如示例1–6中任一项所述的抗体或抗体片段，或如示例7–13和36–49中任一项所述的分离的抗体或抗体片段，以及药学上可接受的载体或赋形剂。
51.一种干扰多个CEACAM1蛋白的IgV结构域之间或之中的相互作用的方法，包括使包含多个CEACAM1蛋白的样品与根据示例36–49中任一项所述的分离的抗体或抗体片段接触，从而干扰多个CEACAM1蛋白的IgV结构域之间或之中的相互作用。
52.一种抑制或降低受试者中CEACAM1活性的方法，包括施用一定量的如示例36–49中任一项所述的抗体或其片段或如示例50所述的药学组合物，有效抑制或降低所述受试者中CEACAM1活性。
53.根据示例52所述的方法，其用于抑制或减少受试者中多个CEACAM1蛋白的IgV结构域之间或之中的相互作用。
54.根据示例52或53所述的方法，其用于抑制或减少受试者中成熟树突细胞或T细胞产生CEACAM1调节的细胞因子。
55.根据示例52–54中任一项所述的方法，其用于预防或治疗受试者中与异常升高的CEACAM1水平相关联的疾病或病症。
56.根据示例55所述的方法，其中，所述疾病或病症是癌症或肿瘤。
57.根据示例56所述的方法，其中，所述受试者正在接受或已经接受抗PD-1或抗PD-L1或抗CTLA4疗法。
58.一种抑制受试者中人CEACAM1活性的方法，包括施用一定量的如示例1–13，21，或22中任一项所述的抗体或其片段，有效抑制受试者中人CEACAM1活性。
59.根据示例58所述的方法，其中，所述受试者患有癌症或肿瘤或怀疑患有癌症或肿瘤。
60.一种抑制受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制的方法，包括施用一定量的如示例1–13，21，或22中任一项所述的抗体或其片段，有效抑制受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制。
61.一种治疗受试者的癌症或肿瘤的方法，包括施用一定量的如示例1–13，21，或22中任一项所述的抗体或其片段，有效治疗受试者的癌症或肿瘤。
62.根据示例61所述的方法，其中，所述癌症是人CEACAM1阳性癌症或肿瘤。
63.根据示例52–62中任一项所述的方法，其中，所述受试者是哺乳动物。
64.根据示例63所述的方法，其中，所述哺乳动物是人。
65.有效量的如示例1–13和36–49中任一项所述的抗体或其片段在制备用于治疗或预防受试者中与异常升高的CEACAM1水平相关联的疾病或病症的药物中的用途。
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<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (58)..(132)
<223> FR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (133)..(162)
<223> 重链CDR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (163)..(204)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (205)..(255)
<223> 重链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (256)..(351)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (352)..(368)
<223> 重链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (369)..(420)
<223> FR4
<400> 1
atggattggg tgtggacctt gccattcctg atggcagctg cccaaagtgc ccaagcacag 60
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gatgacttca agggacggtt tgccttctct ttggaaacct ctgccagcac tgcctatttg 300
cagatcaaca acctcaaaaa tgaggacatg gctacatatt tctgtgcaag acggggatgg 360
ttacttactg ggggtgctat ggactactgg ggtcaaggaa cctcagtcac cgtctctcag 420
<210> 2
<211> 140
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(19)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(44)
<223> FR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(54)
<223> 重链CDR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(68)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (69)..(85)
<223> 重链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (86)..(117)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(129)
<223> 重链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(140)
<223> FR4
<400> 2
Met Asp Trp Val Trp Thr Leu Pro Phe Leu Met Ala Ala Ala Gln Ser
1 5 10 15
Ala Gln Ala Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe
35 40 45
Arg Asn Tyr Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr
100 105 110
Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Gly Trp Leu Leu Thr Gly Gly Ala Met Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Gln
130 135 140
<210> 3
<211> 389
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链可变区编码序列
<220>
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<223> 前导序列
<220>
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<220>
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<220>
<221> misc_feature
<222> (163)..(207)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (208)..(228)
<223> 轻链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (229)..(324)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (325)..(351)
<223> 轻链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (352)..(389)
<223> FR4
<400> 3
atgagggccc ctgctcagat ttttgggttc ttgttgctct tgtttccagg taccagatgt 60
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ttatctgcct ctctgggaga aagagtcagt 120
ctcacttgtc gggcaagtca ggacattggt agtagcttaa actggcttca gcaggaacca 180
gatggaacta ttaaacgcct gatctacgcc acatccagtt tagattctgg tgtccccaaa 240
aggttcagtg gcagtaggtc tgggtcagat tattctctca ccatcagcag ccttgagtct 300
gaagattttg tagactatta ctgtctacaa tatgttagtt ctccgtggac gttcggtgga 360
ggcaccaagc tggaaatcaa acgggctga 389
<210> 4
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(20)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (21)..(43)
<223> FR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (44)..(54)
<223> 轻链CDR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(69)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (70)..(76)
<223> 轻链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (77)..(108)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(117)
<223> 轻链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(129)
<223> FR4
<400> 4
Met Arg Ala Pro Ala Gln Ile Phe Gly Phe Leu Leu Leu Leu Phe Pro
1 5 10 15
Gly Thr Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Glu Arg Val Ser Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp
35 40 45
Ile Gly Ser Ser Leu Asn Trp Leu Gln Gln Glu Pro Asp Gly Thr Ile
50 55 60
Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Thr Ser Ser Leu Asp Ser Gly Val Pro Lys
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Ser Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Glu Ser Glu Asp Phe Val Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Val
100 105 110
Ser Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Ala
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(57)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
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<223> FR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (133)..(162)
<223> 重链CDR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (163)..(204)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (205)..(255)
<223> 重链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (256)..(351)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (352)..(387)
<223> 重链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (388)..(404)
<223> FR4
<400> 5
atggattggg tgtggacctt gccattcctg atggcagctg cccaaagtgc ccaagcacag 60
atccagttgg tgcagtctgg acctgacctg aagaagcctg gagagacagt caagatctcc 120
tgcaaggctt ctgggtatat cttcagaaac tatggaatga actgggtgaa gcaggctcca 180
ggaaagggtt taaagtggat gggctggata aacacctaca ctggagagcc aacatatgct 240
gatgacttca agggacggtt tgccttctct ttggaaacct ctgccagcac tgcctatttg 300
cagatcaaca acctcaaaaa tgaggacatg gctacatatt tctgtgcaag agactgcggt 360
actagccatt actatgctat ggactactgg ggtcaaggaa cctc 404
<210> 6
<211> 134
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(19)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(54)
<223> 重链CDR1
<220>
<221> misc_feature
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<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (69)..(85)
<223> 重链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (86)..(117)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(129)
<223> 重链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(134)
<223> FR4
<400> 6
Met Asp Trp Val Trp Thr Leu Pro Phe Leu Met Ala Ala Ala Gln Ser
1 5 10 15
Ala Gln Ala Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Asp Leu Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe
35 40 45
Arg Asn Tyr Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr
100 105 110
Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Cys Gly Thr Ser His Tyr Tyr Ala Met Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
130
<210> 7
<211> 395
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(60)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (61)..(129)
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<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(162)
<223> 轻链CDR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (163)..(207)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (208)..(228)
<223> 轻链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (229)..(324)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (325)..(351)
<223> 轻链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (352)..(395)
<223> FR4
<400> 7
atggtgtcct cacctcagtt ccttggtctc ctgttgctct gttttcaagg taccagatgt 60
gatatccaga tgacacagac tacatcctcc ctgtctgcct ctctgggaga cagagtcacc 120
atcagttgca gggcaagtca ggacattagc aattatttaa actggtatca gcagaaacca 180
gatggaactg ttaaactcct gatctactac acatcaagat tacactcagg agtcccatca 240
aggttcagtg gcagtgggtc tggaacagat tattctctct ccattagcaa cctggagcaa 300
gaagatattg ccacttactt ttgccaacag ggtaatacgt ttccgctcac gttcggtgct 360
gggaccaagc tggatctgaa acgggctgat gctgc 395
<210> 8
<211> 131
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(20)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
<222> (44)..(54)
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(117)
<223> 轻链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(131)
<223> FR4
<400> 8
Met Val Ser Ser Pro Gln Phe Leu Gly Leu Leu Leu Leu Cys Phe Gln
1 5 10 15
Gly Thr Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp
35 40 45
Ile Ser Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Ser Ile Ser
85 90 95
Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn
100 105 110
Thr Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Asp Leu Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Ala
130
<210> 9
<211> 417
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(57)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (58)..(132)
<223> FR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (133)..(162)
<223> 重链CDR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (163)..(204)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (205)..(255)
<223> 重链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (256)..(351)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (352)..(384)
<223> 重链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (385)..(417)
<223> FR4
<400> 9
atggaatgga gctgggtttt tctctttctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt tcactcccag 60
gtccagctgc agcagtctgg agctgagctg gtaaggcctg ggacttcagt gaaggtgtcc 120
tgcaaggctt ctggatacgc cttcactatt tacttgatag agtgggtaaa gcagaggcct 180
ggacagggcc ttgagtggat tggagtgatt aatcctggaa gtggtggtac taactacaat 240
gagaagttca agggcaaggc aacactgact gcagacaaat cctccagcac tgccttcatg 300
cagctcagca gcctgacatc tgatgactct gcggtttatt tctgtgcaag atcttattac 360
tacggttcct ttgctatgga ctactggggt caaggaacct cagtcaccgt ctctcag 417
<210> 10
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(19)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(44)
<223> FR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(54)
<223> 重链CDR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(68)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (69)..(85)
<223> 重链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (86)..(117)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(128)
<223> 重链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (129)..(139)
<223> FR4
<400> 10
Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg
20 25 30
Pro Gly Thr Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe
35 40 45
Thr Ile Tyr Leu Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn
65 70 75 80
Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Phe Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Phe Cys Ala Arg Ser Tyr Tyr Tyr Gly Ser Phe Ala Met Asp Tyr
115 120 125
Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Gln
130 135
<210> 11
<211> 392
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(60)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (61)..(129)
<223> FR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(162)
<223> 轻链CDR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (163)..(207)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (208)..(228)
<223> 轻链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (229)..(324)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (349)..(392)
<223> FR4
<400> 11
atggtgtcct cagctcagtt ccttggtctc ctgttgctct gttttcaagg taccagatgt 60
gatgtccaga tgacacagac tatatcctcc ctgtctgcct ctctgggaga cagagtcacc 120
atcagttgca gggcaagtca ggacattggc aattatttaa actggtatca gcagaaacca 180
gatggaactg ttaaactcct gatctactac acatcaagat tacactcagg agtcccatca 240
aggttcagtg gcagtgggtc tggaacagat tattctctca ccattagcaa cctggagcaa 300
gaagatattg ccacttactt ttgccaacag ggtaatacgc ttcggacgtt cggtggaggc 360
accaagctgg aaatcaaacg ggctgaatgc tg 392
<210> 12
<211> 130
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链可变区编码序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(20)
<223> 前导序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (21)..(43)
<223> FR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (44)..(54)
<223> 轻链CDR1
<220>
<221> misc_feature
<222> (55)..(69)
<223> FR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (70)..(76)
<223> 轻链CDR2
<220>
<221> misc_feature
<222> (77)..(108)
<223> FR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(116)
<223> 轻链CDR3
<220>
<221> misc_feature
<222> (117)..(130)
<223> FR4
<400> 12
Met Val Ser Ser Ala Gln Phe Leu Gly Leu Leu Leu Leu Cys Phe Gln
1 5 10 15
Gly Thr Arg Cys Asp Val Gln Met Thr Gln Thr Ile Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp
35 40 45
Ile Gly Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn
100 105 110
Thr Leu Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ala
115 120 125
Glu Cys
130
<210> 13
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链CDR1
<400> 13
Gly Tyr Ile Phe Arg Asn Tyr Gly Met Asn
1 5 10
<210> 14
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链CDR2
<400> 14
Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 15
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链CDR3
<400> 15
Arg Gly Trp Leu Leu Thr Gly Gly Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 16
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链CDR1
<400> 16
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Gly Ser Ser Leu Asn
1 5 10
<210> 17
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链CDR2
<400> 17
Ala Thr Ser Ser Leu Asp Ser
1 5
<210> 18
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链CDR3
<400> 18
Leu Gln Tyr Val Ser Ser Pro Trp Thr
1 5
<210> 19
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链CDR1
<400> 19
Gly Tyr Ile Phe Arg Asn Tyr Gly Met Asn
1 5 10
<210> 20
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链CDR2
<400> 20
Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 21
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链CDR3
<400> 21
Asp Cys Gly Thr Ser His Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 22
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链CDR1
<400> 22
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 23
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链CDR2
<400> 23
Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser
1 5
<210> 24
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链CDR3
<400> 24
Gln Gln Gly Asn Thr Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 25
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链CDR1
<400> 25
Gly Tyr Ala Phe Thr Ile Tyr Leu Ile Glu
1 5 10
<210> 26
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链CDR2
<400> 26
Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 27
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 重链CDR3
<400> 27
Ser Tyr Tyr Tyr Gly Ser Phe Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 28
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链CDR1
<400> 28
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Gly Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 29
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链CDR2
<400> 29
Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser
1 5
<210> 30
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 轻链CDR3
<400> 30
Gln Gln Gly Asn Thr Leu Arg Thr
1 5
<210> 31
<211> 468
<212> PRT
<213> 智人（Homo sapiens）
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(34)
<223> 信号肽结构域
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (40)..(141)
<223> IgV结构域
<400> 31
Met Gly His Leu Ser Ala Pro Leu His Arg Val Arg Val Pro Trp Gln
1 5 10 15
Gly Leu Leu Leu Thr Ala Ser Leu Leu Thr Phe Trp Asn Pro Pro Thr
20 25 30
Thr Ala Gln Leu Thr Thr Glu Ser Met Pro Phe Asn Val Ala Glu Gly
35 40 45
Lys Glu Val Leu Leu Leu Val His Asn Leu Pro Gln Gln Leu Phe Gly
50 55 60
Tyr Ser Trp Tyr Lys Gly Glu Arg Val Asp Gly Asn Arg Gln Ile Val
65 70 75 80
Gly Tyr Ala Ile Gly Thr Gln Gln Ala Thr Pro Gly Pro Ala Asn Ser
85 90 95
Gly Arg Glu Thr Ile Tyr Pro Asn Ala Ser Leu Leu Ile Gln Asn Val
100 105 110
Thr Gln Asn Asp Thr Gly Phe Tyr Thr Leu Gln Val Ile Lys Ser Asp
115 120 125
Leu Val Asn Glu Glu Ala Thr Gly Gln Phe His Val Tyr Pro Glu Leu
130 135 140
Pro Lys Pro Ser Ile Ser Ser Asn Asn Ser Asn Pro Val Glu Asp Lys
145 150 155 160
Asp Ala Val Ala Phe Thr Cys Glu Pro Glu Thr Gln Asp Thr Thr Tyr
165 170 175
Leu Trp Trp Ile Asn Asn Gln Ser Leu Pro Val Ser Pro Arg Leu Gln
180 185 190
Leu Ser Asn Gly Asn Arg Thr Leu Thr Leu Leu Ser Val Thr Arg Asn
195 200 205
Asp Thr Gly Pro Tyr Glu Cys Glu Ile Gln Asn Pro Val Ser Ala Asn
210 215 220
Arg Ser Asp Pro Val Thr Leu Asn Val Thr Tyr Gly Pro Asp Thr Pro
225 230 235 240
Thr Ile Ser Pro Ser Asp Thr Tyr Tyr Arg Pro Gly Ala Asn Leu Ser
245 250 255
Leu Ser Cys Tyr Ala Ala Ser Asn Pro Pro Ala Gln Tyr Ser Trp Leu
260 265 270
Ile Asn Gly Thr Phe Gln Gln Ser Thr Gln Glu Leu Phe Ile Pro Asn
275 280 285
Ile Thr Val Asn Asn Ser Gly Ser Tyr Thr Cys His Ala Asn Asn Ser
290 295 300
Val Thr Gly Cys Asn Arg Thr Thr Val Lys Thr Ile Ile Val Thr Glu
305 310 315 320
Leu Ser Pro Val Val Ala Lys Pro Gln Ile Lys Ala Ser Lys Thr Thr
325 330 335
Val Thr Gly Asp Lys Asp Ser Val Asn Leu Thr Cys Ser Thr Asn Asp
340 345 350
Thr Gly Ile Ser Ile Arg Trp Phe Phe Lys Asn Gln Ser Leu Pro Ser
355 360 365
Ser Glu Arg Met Lys Leu Ser Gln Gly Asn Thr Thr Leu Ser Ile Asn
370 375 380
Pro Val Lys Arg Glu Asp Ala Gly Thr Tyr Trp Cys Glu Val Phe Asn
385 390 395 400
Pro Ile Ser Lys Asn Gln Ser Asp Pro Ile Met Leu Asn Val Asn Tyr
405 410 415
Asn Ala Leu Pro Gln Glu Asn Gly Leu Ser Pro Gly Ala Ile Ala Gly
420 425 430
Ile Val Ile Gly Val Val Ala Leu Val Ala Leu Ile Ala Val Ala Leu
435 440 445
Ala Cys Phe Leu His Phe Gly Lys Thr Gly Arg Thr Thr Pro Met Thr
450 455 460
His Leu Thr Arg
465

Claims (36)

1.一种与人CEACAM1特异性结合的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：
(a)重链可变区，其包含：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:13)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:14)，和
RGWLLTGGAMDY(SEQ ID NO:15)；和
轻链可变区，其包含：
RASQDIGSSLN(SEQ ID NO:16)，
ATSSLDS(SEQ ID NO:17)，和
LQYVSSPWT(SEQ ID NO:18)；
(b)重链可变区，其包含：
GYIFRNYGMN(SEQ ID NO:19)，
WINTYTGEPTYADDFKG(SEQ ID NO:20)，和
DCGTSHYYAMDY(SEQ ID NO:21)；和
轻链可变区，其包含：
RASQDISNYLN(SEQ ID NO:22)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:23)，和
QQGNTFPLT(SEQ ID NO:24)；或
(c)重链可变区，其包含：
GYAFTIYLIE(SEQ ID NO:25)，
VINPGSGGTNYNEKFKG(SEQ ID NO:26)，和
SYYYGSFAMDY(SEQ ID NO:27)；
轻链可变区，其包含：
RASQDIGNYLN(SEQ ID NO:28)，
YTSRLHS(SEQ ID NO:29)，和
QQGNTLRT(SEQ ID NO:30)。
2.根据权利要求1所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含SEQ ID NO:2的重链可变区；
(b)包含SEQ ID NO:4的轻链可变区；
(c)包含SEQ ID NO:6的重链可变区；
(d)包含SEQ ID NO:8的轻链可变区；
(e)包含SEQ ID NO:10的重链可变区；或
(f)包含SEQ ID NO:12的轻链可变区。
3.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段以1.5nM KD或更强的亲和力与CEACAM1结合。
4.根据权利要求3所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段以0.75nM KD或更强的亲和力与CEACAM1结合。
5.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段与CEACAM1的IgV结构域结合。
6.根据权利要求5所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段与CEACAM1的IgV结构域的结合抑制结合后的IgV结构域与其他CEACAM1蛋白的IgV结构域的相互作用。
7.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包含与人框架区具有至少85％序列同一性的框架区。
8.根据权利要求7所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述框架区与人框架区具有100％的序列同一性。
9.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包含Fc区。
10.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或抗原结合片段选自嵌合的，人源化的，和单克隆的。
11.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗原结合片段选自sdAb，Fv，二硫键连接的Fv，scFv，双抗体，Fd，Fab，Fab’，或F(ab’)2。
12.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段抑制人成熟树突细胞或人T细胞产生CEACAM1调节的一种或多种细胞因子。
13.根据权利要求12所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述一种或多种细胞因子选自IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α。
14.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段与治疗剂，显像剂，或可检测标志物连接或缀合。
15.根据权利要求14所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述治疗剂选自细胞毒性药物，放射性同位素，免疫调节剂，和第二抗体。
16.一种核酸分子，其包含编码如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段的核苷酸序列。
17.根据权利要求16所述的核酸分子，其中，所述核酸分子包含选自SEQ ID NOs:1，3，5，7，9，和11的核苷酸序列。
18.一种宿主细胞，其包含如权利要求16所述的核酸分子。
19.一种抑制人CEACAM1活性的方法，包括使所述人CEACAM1与如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段接触。
20.一种抑制细胞中人CEACAM1活性的方法，包括使所述细胞与如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段接触。
21.根据权利要求20所述的方法，其中，人CEACAM1活性的所述抑制导致所述细胞产生的CEACAM1调节的一种或多种细胞因子的减少。
22.根据权利要求21所述的方法，其中，所述细胞因子选自IFN-γ，IL-2，IL-17A，IL-17F，IL-6，IL-9，或TNF-α。
23.一种抑制受试者中人CEACAM1活性的方法，包括向所述受试者施用足以抑制CEACAM1活性的量的如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段。
24.一种治疗有需要的受试者中与人CEACAM1表达或活性相关联的病症的方法，包括向所述受试者施用治疗有效量的如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段。
25.根据权利要求24所述的方法，其中，所述病症是癌症。
26.根据权利要求25所述的方法，其中，所述癌症是血液系统恶性肿瘤。
27.根据权利要求25所述的方法，其中，所述癌症是实体瘤。
28.根据权利要求27所述的方法，其中，所述癌症选自头颈部鳞状细胞癌，肾脏肾透明细胞癌，肾脏肾乳头状细胞癌，或脑低级别胶质瘤。
29.根据权利要求27所述的方法，其中，所述癌症选自胰腺癌，结直肠癌，胃癌，黑色素瘤，肝癌，胆管癌，泌尿道癌，肺癌，淋巴瘤，上呼吸消化道癌，乳腺癌，甲状腺癌，食道癌，和卵巢癌。
30.根据权利要求25所述的方法，其中，所述受试者正在接受或已经接受抗PD-1或抗PD-L1或抗CTLA4疗法。
31.一种抑制有需要的受试者中CEACAM1介导的T细胞抑制的方法，包括向所述受试者施用治疗有效量的如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段。
32.一种检测细胞中CEACAM1表达的方法，包括使所述细胞与连接或缀合至可检测标志物的如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段接触，并通过检测所述标志物以确定所述抗体或其抗原结合片段是否与所述细胞结合。
33.一种检测受试者中CEACAM1阳性细胞的方法，包括向所述受试者施用与可检测标志物连接或缀合的如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，并检测所述标志物。
34.一种药学制剂，其包含如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段。
35.根据权利要求34所述的药学制剂，其中，所述制剂包含载体和/或赋形剂。
36.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其与如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段特异性结合至人CEACAM1上的相同表位。
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