JP6834747B2 - 肺癌を検出する方法及び検出用キット - Google Patents
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Description
血中のRNase 1は、主に膵臓で生産され血流に分泌されるタンパク質と考えられているが、膵臓以外の組織での発現を示唆する報告がある。しかしながら、肺組織におけるRNase 1の発現については、これまでに詳しく調べられていない。特許文献1には、膵臓癌の患者から得られた血液中のRNase 1の特定のアスパラギン残基において、健常者には見られない糖鎖修飾が増加していることが示され、膵臓癌の検出ができる方法が示されている。特許文献2には、前述のRNase 1の88番目のアスパラギン残基(以下、「Asn88」と称することもある)における糖鎖付加量を正確に測定するための測定方法が記載され、膵臓癌、胃癌、胆管癌での測定結果が記載されている。しかしながら、これらの特許文献には、肺癌でのRNase 1の発現、さらにいえば、肺癌でのRNase 1のAsn88における糖鎖付加の検出については記載されていない。以上のことから、これまでに肺癌を検出する目的で、血液中のRNase 1の測定や、特定のアスパラギン残基においての糖鎖付加変化を測定することはなかった。
(2)健常者に比べてN型糖鎖が結合している部位の量が増加する、(1)に記載の方法。
(3)下記A,Bにおいて、AとBとの比を求めることを特徴とする、肺癌を検出する方法。
A=RNase 1のN型糖鎖修飾可能部位であって、N型糖鎖が結合している部位又は結合していない部位の量
B=RNase 1のN型糖鎖修飾可能部位の量
(4)(3)に記載の方法において、A=N型糖鎖が結合していない部位の量、であり、健常者と比べて、A/Bの値が小さくなる方法。
(5)(3)に記載の方法において、A=N型糖鎖が結合している部位の量、であり、健常者と比べて、A/Bの値が大きくなる方法。
(6)(3)〜(5)いずれかに記載の方法において、RNase 1の量を求め、その値を換算してBの値とする方法。
(7)N型糖鎖修飾可能部位が、配列番号1に示された配列の88番目のアスパラギン残基である、(1)〜(6)いずれか1項に記載の方法。
(8)RNase 1のN型糖鎖修飾可能部位を抗原認識部位の一部とするモノクローナル抗体またはその断片を含有することを特徴とする、肺癌の検出用キット。
A=RNase 1のN型糖鎖修飾可能部位であって、N型糖鎖が結合している部位又は結合していない部位の量
B=RNase 1のN型糖鎖修飾可能部位の量
また、A=N型糖鎖が結合していない部位の量、であり、健常人と比べて、A/Bの値が小さくなる方法であることが好ましい。またA=N型糖鎖が結合している部位の量、であり、健常人と比べて、A/Bの値が大きくなる方法であることも好ましい。
測定対象のN型糖鎖修飾可能部位をAsn88とし、N型糖鎖が付加しているAsn88量(G3)の測定と、Asn88量(t)の測定を特許文献2の実施例3および4に記載の免疫学的測定試薬および方法で実施した。上述の免疫学的測定試薬を使用して、健常人から得られた血清35検体と、肺癌患者から得られた血清40検体を測定した。なお、本実施例においては、N型糖鎖修飾可能部位であるAsn88量は、総RNase 1量の1倍と換算することができる。結果を表1、図1に示す。
正常ヒト肺組織のホモジネートと、正常ヒト膵臓組織の組織抽出物、正常ヒト胃組織の組織抽出物をBioChain社から入手して、前述の免疫学的測定法により、それらの抽出物中の総RNase 1量を測定した。図2に示した通り、正常ヒト肺組織においても、RNase 1が発現していることが確認できた。よって、肺組織の癌性変化によって血流中のRNase 1のAsn88におけるN型糖鎖の付加程度が変化する理由は、肺癌細胞で発現するRNase 1の新規生合成過程で、Asn88におけるN型糖鎖の付加が亢進している結果であると考えられる。
実施例1に記載の免疫学的測定試薬及び方法を使用して、肺癌患者から得られた血清40検体(組織学的に診断がついたもの)を測定し、組織型別にプロットした。結果を図3に示す。図3から明らかなように、4つの組織型はいずれもカットオフ値0.184を超える値を示している。この結果は、図1の結果と併せて、上述の免疫学的測定試薬及び方法による肺癌の検出は、4つの組織型に偏りがなく全ての組織型の肺癌を検出できることを示し、肺癌を幅広く検出するという意味では、優れた肺癌検出試薬及び方法であることを示している。
Claims (8)
- 膵臓リボヌクレアーゼ1のN型糖鎖修飾可能部位であって、N型糖鎖が結合している部位又は結合していない部位の量を測定することを特徴とする、肺癌を検出するための方法。
- 健常者に比べてN型糖鎖が結合している部位の量が増加する、請求項1に記載の方法。
- 下記A,Bにおいて、AとBとの比を求めることを特徴とする、肺癌を検出するための方法。
A=膵臓リボヌクレアーゼ1のN型糖鎖修飾可能部位であって、N型糖鎖が結合している部位又は結合していない部位の量
B=膵臓リボヌクレアーゼ1のN型糖鎖修飾可能部位の量 - 請求項3に記載の方法において、A=N型糖鎖が結合していない部位の量、であり、健常者と比べて、A/Bの値が小さくなる方法。
- 請求項3に記載の方法において、A=N型糖鎖が結合している部位の量、であり、健常者と比べて、A/Bの値が大きくなる方法。
- 請求項3〜5いずれかに記載の方法において、膵臓リボヌクレアーゼ1の量を求め、その値を換算してBの値とする方法。
- N型糖鎖修飾可能部位が、配列番号1に示された配列の88番目のアスパラギン残基である、請求項1〜6に記載の方法。
- 膵臓リボヌクレアーゼ1のN型糖鎖修飾可能部位を抗原認識部位の一部とするモノクローナル抗体またはその断片を含有することを特徴とする、肺癌の検出用キット。
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