JP6807535B2 - 線維芽細胞増殖剤 - Google Patents
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Description
ここで、前記蛋白質分解酵素は、アルカリ性プロテアーゼ及び/又は中性プロテアーゼであることが望ましく、更には、アルカリ性プロテアーゼであることがより望ましい。
なお、前記蛋白質分解酵素は、アルカリ性プロテアーゼ及び/又は中性プロテアーゼであることが望ましく、アルカリ性プロテアーゼであることがさらに望ましい。
かかる効果は、本発明の線維芽細胞増殖剤を皮膚に塗布又は接触させること、或は、経口的に摂取又は投与することによって顕著に発現される。
したがって、本発明の線維芽細胞増殖剤はとりわけ皮膚外用剤、飲食品、医薬品、医薬部外品、飼料等の分野において、前記剤の態様のままで又は前記分野の従来の各種製品に配合した形態で、皮膚改善のために有効利用することが可能となる。
鹿児島県指宿産オクラの完熟種子をミルで粗粉砕し、この100部に蒸留水300部を加えて撹拌しながら58℃に加熱して分散液(pH7.5)を調製し、これに蛋白質分解酵素として「オリエンターゼ22BF」(エイチビィアイ(株)製、商品名、アルカリ性プロテアーゼ)1部を添加して5時間ゆるやかに撹拌を続けた。この後、酵素を失活させ(80℃で30分間)、不溶物を遠心分離で除去し、凍結乾燥して水溶性成分(試料1)を得た。
製造例1において、完熟種子を未熟種子に代えたことを除き同様に処理して水溶性成分(比較試料1)を得た。
製造例1において、酵素を失活させた後、更に、90℃で1時間加熱処理を行ったことを除いて同様に処理して水溶性成分(比較試料2)を得た。
製造例1において、蛋白質分解酵素として「アロアーゼXA−10」(ヤクルト薬品工業(株)製、商品名、アルカリ性プロテアーゼ)を使用したこと以外は同様に処理して水溶性成分(試料2)を得た。
製造例1において、55℃に加熱して分散液を調製したこと及び蛋白質分解酵素として「オリエンターゼ90N」(エイチビィアイ(株)製、商品名、中性プロテアーゼ)を使用したこと以外は同様に処理して水溶性成分(試料3)を得た。
製造例1において、55℃に加熱して分散液を調製したこと及び蛋白質分解酵素として「アロアーゼNP−10」(ヤクルト薬品工業(株)製、商品名、中性プロテアーゼ)を使用したこと以外は同様に処理して水溶性成分(試料4)を得た。
製造例1において、55℃に加熱して分散液を調製したこと及び蛋白質分解酵素として「パパインW40」(天野エンザイム(株)製、商品名、中性プロテアーゼ)を使用したこと以外は同様に処理して水溶性成分(試料5)を得た。
製造例1において、50℃に加熱して分散液を調製したこと及び蛋白質分解酵素として「プロテアーゼA「アマノ」G」(天野エンザイム(株)製、商品名、中性プロテアーゼ)を使用したこと以外は同様に処理して水溶性成分(試料6)を得た。
製造例1において、45℃に加熱して分散液を調製したこと及び蛋白質分解酵素として「パンチダーゼP」(ヤクルト薬品工業(株)製、商品名、中性プロテアーゼ)を使用したこと以外は同様に処理して水溶性成分(試料7)を得た。
前記製造例で得た各試料が皮膚線維芽細胞の増殖作用に及ぼす影響を以下に述べる方法で調べた。
ペトリディッシュ(φ10cm)で、正常ヒト成人皮膚線維芽細胞(クラボウ(株)製、NHDF(NB)。以下、単に細胞という。)を10%ウシ胎児血清(第一化学薬品(株)製)添加D−MEM培地(シグマ社製、低グルコース)に2×105個播き、サブコンフルエント(約80%密度)になるまで4日間培養した。次いで、培地を除去し、細胞をPBS5mLで2回洗浄し、更に0.02%EDTA溶液5mLで洗浄した後、0.25%トリプシン溶液(ナカライテスク(株)製)5mLを用いて細胞を回収し、遠心分離(4℃、1,000rpm、5分)して上清を除き、PBSで2回洗浄して細胞を得た。この細胞を前記条件下で繰り返し培養して継代培養した。
本試験例では、種々の蛋白質分解酵素で処理して得られた水溶性成分が皮膚線維芽細胞の増殖作用に及ぼす影響を調べた。ここで、線維芽細胞の増殖度合いの評価は試験例1と同じ方法で実施した。また、試験試料は前記製造例に記載の試料1、試料2〜7とし、比較試料3としてオクラ種子由来の市販品(商品名:「MYOXINOL LS9736」、山川貿易(株)製)を用いた。
前記水溶性成分(試料1)70部とデキストリン30部を常法により十分に撹拌混合し、均一な粉末状の線維芽細胞増殖剤を作成した。この剤は、経口摂取することにより、肌荒れ改善、肌のハリ、ツヤ等の向上のために使用することができる。
前記水溶性成分(試料4)5部を精製水20部に溶解して液体状の線維芽細胞増殖剤を作成した。この剤とスクワラン5部、セチルアルコール2部、グリセリン5部、ソルビタンモノステアラート2部、ポリオキシレン(20)ソルビタンモノオレアート4部及び精製水57部を常法により均一に乳化してクリーム状組成物を作成した。この組成物は、皮膚に塗布することにより、乾燥肌の改善、肌の弾力性や柔軟性の向上等のために使用することができる。
Claims (7)
- オクラ(Abelmoschus esculentus)の完熟した種子の蛋白質分解酵素による加水分解物から得た水溶性成分を有効成分として含有してなる線維芽細胞増殖剤。
- 蛋白質分解酵素がアルカリ性プロテアーゼ及び/又は中性プロテアーゼである請求項1に記載の線維芽細胞増殖剤。
- 蛋白質分解酵素がアルカリ性プロテアーゼである請求項1に記載の線維芽細胞増殖剤。
- オクラ(Abelmoschus esculentus)の完熟した種子を蛋白質分解酵素で加水分解し、該加水分解物から採取した水溶性成分を含有せしめることを特徴とする線維芽細胞増殖剤の製造方法。
- 蛋白質分解酵素がアルカリ性プロテアーゼ及び/又は中性プロテアーゼである請求項4に記載の製造方法。
- 蛋白質分解酵素がアルカリ性プロテアーゼである請求項4に記載の製造方法。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の線維芽細胞増殖剤を皮膚に塗布又は経口で摂取することを特徴とする、皮膚のトラブル改善、老化症状回復及び/又は美肌促進のための美容方法。
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