JP6759199B2

JP6759199B2 - 血圧降下剤

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Publication number: JP6759199B2
Application number: JP2017523711A
Authority: JP
Inventors: 光保牛島; 美由希高嶋; 幸広小寺; 直明森原
Original assignee: Wakunaga Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Wakunaga Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-06-12
Filing date: 2016-06-10
Publication date: 2020-09-23
Anticipated expiration: 2036-06-10
Also published as: MX2017016096A; CA2989291C; NZ738197A; PT3308781T; SG11201710015UA; EP3308781B1; EP3308781A4; CA2989291A1; IL255763A; US10363234B2; WO2016199885A1; ES2904562T3; US20180147170A1; DK3308781T3; SI3308781T1; IL255763B; JPWO2016199885A1; EP3308781A1; AU2016275642A1; SG10201911876WA

Description

本発明は、血圧降下剤に関する。

近年、生活スタイルの変化（食生活における脂質摂取量の増加、飲酒・喫煙機会の増加、運動不足など）により、脂肪やストレスの蓄積、肝機能の低下などに起因する、糖尿病、高脂血症、高血圧、痛風等のいわゆる生活習慣病が急激に増加し、社会的な問題になっている。これらの疾病は病状の進行とともに合併症を併発し、心臓病や脳卒中など死因の上位に位置づけられる疾患へと移行する。最近の調査では、これらの生活習慣病において、高血圧が最大のリスクであることがわかってきており、例えばβ遮断薬、α遮断薬、Ｃａ拮抗剤或いはＡＣＥ阻害剤等の多くの高血圧治療薬が開発されてきた。

しかし、β遮断薬の場合は心不全や心室ブロック、α遮断薬の場合は失神やめまい、Ｃａ拮抗剤の場合は肝障害、ＡＣＥ阻害剤の場合は腎不全など、重篤な副作用が報告されている（非特許文献１）。また、これらの治療薬では、高血圧予備軍といった軽度の高血圧患者（例えば、最高血圧１３０〜１３９／最低血圧８５〜８９の正常高血圧患者）に対する血圧のコントロールが難しいことから、軽度の高血圧患者に対しても有用な副作用の少ない医薬品の開発が望まれている。

一方、ニンニクは古くより食品としてだけでなく、様々な疾病の治療に利用されてきた。ニンニクの特徴的な成分としては、γ−グルタミル−Ｓ−アリルシステインがある。該成分はニンニクを切ったり、つぶしたり、すりおろしたり、又は熟成することにより、ニンニク中に含まれるγ−グルタミルトランスペプチダーゼという酵素により、水溶性のＳ−アリルシステイン（以下、ＳＡＣと略す）に変換される。このような酵素反応により生成される水溶性化合物として、ＳＡＣの他にＳ−メチルシステイン、Ｓ−１−プロペニルシステインなどがある（非特許文献２）。

ＳＡＣは、肝障害予防効果（非特許文献３、特許文献２）、大腸がんの予防効果（非特許文献４）等、多くの薬理作用が報告され、また、Ｓ−メチルシステインについても、肝障害予防効果（特許文献２）や脳疾患改善効果（特許文献１）などが報告されている。

しかしながら、Ｓ−１−プロペニルシステインが血圧降下作用を有することについては全く知られていない。

特許第４２５５１３８号公報特公平０５−０６０４４７号公報

今日の治療薬，2012年度版,539-580,2012 ニンニクの化学,初版,93-122,2000 Phytother.Res.,3,50-53,1989 J.Ocul.Phermacol.,9,201-209,1993

本発明は、副作用の少ない、作用が緩和な血圧降下剤を提供することに関する。

本発者らは、Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩の有用性について種々検討したところ、Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩に優れた降圧作用が有り、血圧降下剤として有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、以下の１）〜１１）に係るものである。
１）Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩を有効成分とする血圧降下剤。
２）Ｓ−１−プロペニルシステインにおけるトランス体の割合が、トランス体とシス体の合計を１００％とした場合に、５０〜１００％である上記１）の血圧降下剤。
３）Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩が、ニンニク、タマネギ、エレファントガーリック、ニラ及びネギから選ばれる１種以上のアリウム属植物に由来するものである上記１）又は２）の血圧降下剤。
４）Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩が、アリウム属植物を１０〜５０％のエタノール水溶液中、０〜８０℃で、１ヶ月以上抽出し、得られた抽出物を陽イオン交換樹脂に吸着させた後、０．１〜３Ｎのアンモニア水で溶出し、該溶出物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー及び／又は逆相カラムクロマトグラフィーに付し、回収することにより取得される、上記３）の血圧降下剤。
５）医薬である、上記１）〜４）のいずれかの血圧降下剤。
６）食品である、上記１）〜４）のいずれかの血圧降下剤。
７）Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩を有効成分とする血圧降下用食品。
８）Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩を有効成分とする血圧降下用食品組成物。
９）血圧降下剤を製造するための、Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩の使用。
１０）血圧降下のために使用される、Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩。
１１）Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩を投与することを特徴とする血圧降下方法。

本発明の血圧降下剤の有効成分であるＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩には優れた降圧効果が認められる。当該血圧降下剤の降圧機能は、高血圧患者に用いた場合に有効に機能し、正常血圧の人には機能しないと云う性質を持つ。そして、当該有効成分は、長年食されている植物中に含まれる化合物であることから、それ自体の安全性が高い。したがって、本発明によれば、長期間投与しても安全性の高い高血圧の治療や予防が可能となる。

Ｓ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）の収縮期における血圧降下作用。Ｓ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）とＳ-アリルシステイン（ＳＡＣ）の血圧降下作用。Ｓ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）の反復経口投与による血圧降下作用。Ｓ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）の正常血圧ラット（ＷＫＹ）の血圧への影響。

本発明において、Ｓ−１−プロペニルシステインは、下記式（１）で示されるシステイン誘導体である。

この化合物は、式（１）中の波線で示されるように、シス又はトランスの立体配置が存在するが、トランス体の割合が多いのが好ましく、トランス体の割合がトランス体とシス体の合計を１００％とした場合に、５０〜１００％であるのがより好ましく、７５〜１００％であるのがより好ましく、８０〜１００％であるのがより好ましく、９０〜１００％であるのがさらに好ましい。
また、システイン由来の不斉炭素を有することから光学異性体が存在するが、Ｄ体、Ｌ体はあるいはラセミ体のいずれであってもよい。

Ｓ−１−プロペニルシステインの塩は、酸付加塩又は塩基付加塩の何れでもよい。酸付加塩としては、たとえば、（イ）塩酸、硫酸、硝酸、リン酸などの鉱酸との塩、（ロ）ギ酸、酢酸、クエン酸、フマル酸、グルコン酸、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸などの有機カルボン酸との塩、（ハ）メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メシチレンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸などのスルホン酸類との塩を、また、塩基付加塩としては、たとえば、（イ）ナトリウム、カリウム、カルシクム、マグネシウムなどのアルカリ金属との塩、（ロ）カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属との塩、（ハ）アンモニウム塩、（ニ）トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−ベンジル−β−フェネチルアミン、１−エフェナミン、Ｎ，Ｎ′−ジベンジルエチレンジアミンなどの含窒素有機塩基との塩を挙げることができる。

更に、Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩は、未溶媒和型のみならず、水和物や溶媒和物としても存在することができ、斯かる水和物又は溶媒和物は製造条件により任意の結晶形として存在することができる。従って、本発明におけるＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩は、全ての立体異性体、水和物、溶媒和物、及び全ての多形結晶形態もしくは非晶形を包含するものである。

本発明におけるＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩は、有機合成手法〔１〕H Nishimura, A Mizuguchi, J Mizutani, Stereoselective synthesis of S-(trans-prop-1-enyl)-cysteine sulphoxide. Tetrahedron Letter, 1975, 37, 3201-3202；２〕JC Namyslo, C Stanitzek, A palladium-catalyzed synthesis of isoalliin, the main cysteine sulfoxide in Onion(Allium cepa). Synthesis, 2006, 20, 3367-3369；３〕S Lee, JN Kim, DH Choung, HK Lee, Facile synthesis of trans-S-1-propenyl- L-cysteine sulfoxide (isoalliin) in onions(Allium cepa). Bull. Korean Chem. Soc. 2011, 32(1), 319-320〕、酵素若しくは微生物を用いた生化学的手法、又はこれらを組み合わせた方法によって取得することができる。また、この他、当該化合物を含有する植物、例えばアリウム属植物あるいはその加工物から抽出・精製することにより取得できる。
したがって、本発明のＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩としては、単離・精製されたもののみならず、粗生成物、上記植物からの抽出操作によりＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩の含有量が高められた画分を用いることができる。

ここで、Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩を含有するアリウム属植物としては、ニンニク（Allium sativum L.）、タマネギ（Allium cepa L.）、エレファントガーリック（Allium ampeloprazum L.）、（Allium tuberosum. Rottl. Ex K. Spreng.）及びネギ（Allium fistulosum L.）等が挙げられる。これらの植物は、単独あるいは組み合わせて用いてもよい。また、上記アリウム属植物は生のものをそのまま、あるいは必要に応じて外皮を取り除き、切断又は細断したものを使用することもできる。更に、凍結乾燥や熱風乾燥などにより乾燥したもの、あるいはこれらを粉末化したものを用いることもできる。

本発明におけるＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩として、アリウム属植物からの抽出画分を用いる場合、当該画分は、例えば１）アリウム属植物を１０〜５０％のエタノール水溶液中、０〜８０℃で、１ヶ月以上抽出し、２）得られた抽出物を固液分離後、エタノール溶出画分を回収する、ことにより取得することができる。

工程１）で使用するエタノール水溶液は、１０〜５０％のエタノール水溶液を使用することができるが、好ましく２０〜４０％のエタノール濃度に調製されたものである。また、処理温度は０〜８０℃の範囲に設定することができるが、好ましくは１０〜６０℃、更に好ましくは２０〜４０℃である。処理期間は上記条件下で少なくとも１ヶ月以上抽出に付すことができるが、好ましくは１〜２０ヶ月、更に好ましくは１〜１０ヶ月である。また、本工程は衛生面やエタノールの揮発等を考慮し、気密、密封あるいは密閉容器内で行うことができるが、密閉容器を使用するのが好ましい。

工程２）では、工程１）で得られた抽出物を固液分離後、エタノール溶出画分が回収される。回収物を適宜濃縮することにより、Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩を含む抽出画分を得ることができる。当該抽出画分は、そのまま使用することができるが、適宜、スプレードライなどにより乾燥させて使用することもできる。

更に、上記Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩を含む抽出画分からのＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩の単離は、必要に応じて分子排除サイズ３０００〜４０００の透析膜を用いて透析に付し、次いで陽イオン交換樹脂を用いた吸着・分離、順相クロマトグラフィー又は逆相クロマトグラフィーによる分離精製手段を適宜組み合わせることにより行うことができる。
ここで、陽イオン交換樹脂を用いた吸着・分離は、陽イオン交換樹脂（例えば、アンバーライト（ダウ・ケミカル社）、ＤＯＷＥＸ（ダウ・ケミカル社製）、ＤＩＡＩＯＮ（三菱化学製）等）に吸着させ、０．１〜３Ｎのアンモニア水で溶出させる方法が挙げられる。
順相クロマトグラフィーとしては、例えばシリカゲルカラムを用いて、クロロフォルム／メタノール／水混合物等で溶出させる方法が挙げられる。
逆相クロマトグラフィーとしては、例えばオクタデシルシリルカラムを用いて、０．０１〜３％ギ酸水溶液等で溶出させる方法が挙げられる。

好ましくは、上記エタノール抽出画分を透析（透析膜：分子排除サイズ３０００〜４０００）し、次いで陽イオン交換樹脂に吸着させた後、０．５〜２Ｎのアンモニア水で溶出し、溶出物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶媒：クロロフォルム／メタノール／水混合物）に付して目的物を含む画分を回収し、さらに分取用逆相カラムクロマトグラフィー（溶媒：０．１〜０．５％ギ酸水溶液）に付して目的物を回収する方法が挙げられる。
斯くして得られたＳ−１−プロペニルシステインは、トランス体の割合が、トランス体とシス体の合計を１００％とした場合に、５０〜１００％であるのがより好ましく、６０〜１００％であるのがより好ましく、７０〜１００％であるのがより好ましい。

本発明におけるＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩類は、例えば原料の一つであるニンニクの希エタノール抽出液（エキス分１４．５％，アルコール数１．１８）のＬＤ₅₀値が、経口、腹腔および皮下のいずれの投与経路においても、５０ｍｌ／Ｋｇ以上であること（The Journal of Toxicological Sciences,9,57（1984））およびニンニクやタマネギ等のアリウム属植物が食品として常用されていること、等により一般に低毒性である。

後記実施例に示すように、Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩は、自然発症高血圧に対しては優れた降圧作用を有し、正常血圧は下げない効果を有する。すなわち、Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩は、高血圧患者に有効に機能し、正常血圧或いは正常血圧以下の人には機能しない、安心して服用可能な血圧降下剤となり得る。

高血圧には、腎臓、心臓、血管、内分泌系の異常などが原因として考えられる二次性高血圧（腎性抗血圧）や原因のはっきりしない本態性高血圧があるが、本発明で云う血圧降下剤は、いずれの高血圧に対しても有効である。

本発明の血圧降下剤は、降圧効果を発揮する医薬又は食品であってもよく、或いはこれらに配合して使用される素材又は製剤であってもよい。

また、当該食品には、血圧降下用をコンセプトとし、必要に応じてその旨を表示した食品、機能性食品、病者用食品、特定保健用食品、サプリメント等が包含される。

本発明のＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩を含有する医薬の投与形態は、特に限定されるものではなく、種々の形態をとることができるが、経口に適した形態であることが好ましい。経口投与製剤の具体的な形態として、例えば、固形剤としては錠剤、カプセル剤、細粒剤、丸剤、顆粒剤、液剤としては乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤等の形態が挙げられる。斯かる医薬製剤は、本発明のＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩に、必要に応じて賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色料、矯味矯臭剤、ｐＨ調整剤等を適宜配合し、常法に従って調製することができる。

本発明のＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩を含有する食品の形態は、特に限定されるものではなく、例えば、固形食品、半流動食品、ゲル状食品、錠剤、キャプレット、カプセル剤等、種々の食品組成物の形態をとることができ、更に具体的には、菓子、飲料、調味料、水産加工食品、食肉加工食品、パン、健康食品等の種々の食品の態様であり得る。
斯かる食品は、これらの食品を通常製造する場合に用いられる食品素材と、本発明のＳ−１−プロペニルシステイン又はその塩を適宜配合し、常法により製造することができる。

上記医薬又は食品には、更に、血圧降下作用のある他の物質、例えば、γ−グルタミル−Ｓ−アリルシステインやＳＡＣなどの含硫アミノ酸類、サザン、丹参、田七等の生薬類、グルタミン酸やＧＡＢＡなどのアミノ酸類、ラクトペプチドやサーモンペプチドなどのペプチド類を含有することができる。

上記医薬又は食品の、一日当たりの好ましい摂取量は、摂取する対象、摂取の形態、同時に摂取する素材や添加剤等の種類、摂取の間隔等の要因に依存して変動するものであるが、通常Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩類として、一日当たり０．１〜２．７ｍｇ／ｋｇ摂取することが好ましく、０．３〜０．９ｍｇ／ｋｇ摂取することがより好ましい。また、所望により、この一日量を２〜４回に分割して摂取することもできる。

製造例１Ｓ−１−プロペニルシステイン含有植物抽出画分の製造
（１）ニンニクのエタノール抽出画分
外皮を取り除いたニンニク鱗茎約１ｋｇと約１０００ｍＬの３０％エタノールを容器に入れ密閉した。この容器を室温で１〜１０ヶ月放置し、適宜攪拌した。この混合物から固体と液体を分離し、液体をスプレードライによって乾燥させ、黄褐色の粉末を得た。

（２）タマネギのエタノール抽出画分
外皮を取り除いたタマネギ球を２〜４分割し、その約５ｋｇと約５０００ｍＬの３４％エタノールを容器に入れ密閉した。この容器を室温で１〜１０ヶ月放置し、適宜攪拌した。この混合物から固体と液体を分離し、液体を減圧濃縮した。

（３）ニラのエタノール抽出画分
洗浄したニラを約５〜１０ｃｍの長さに切り、その約５ｋｇと約５０００ｍＬの３４％エタノールを容器に入れ密閉した。この容器を室温で１〜１０ヶ月放置し、適宜攪拌した。この混合物から固体と液体を分離し、液体を減圧濃縮した。

製造例２ニンニクのエタノール抽出画分からのＳ−１−プロペニルシステインの単離
（１）製造例１（１）で得られたニンニクのエタノール抽出画分をポアサイズ３５００の透析チューブに入れ、精製水に対して透析を行った。透析外液を陽イオン交換樹脂Ｄｏｗｅｘ５０Ｗｘ８（Ｈ＋）に通じ、精製水で樹脂を良く洗浄した。樹脂に吸着したアミノ酸類を２Ｎのアンモニアで溶出させ、減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムに付し、クロロフォルム／メタノール／水混合物を溶媒としてカラムクロマトグラフーを行った。目的物（Ｓ−１−プロペニルシステイン）を含む画分を回収し、濃縮した。濃縮物を水に溶解し、分取用逆相カラム（オクタデシルシリルカラム）を用いて、０．１％ギ酸を溶媒としてクロマトグラフを行い、目的物を回収し溶媒を凍結乾燥によって取り除いた。得られた凍結乾燥物は、ＮＭＲ（溶媒：重水）及び質量分析装置にて、構造を以下に示す標準物質から得られたスペクトルと比較し、トランス−Ｓ−１−プロペニルシステインとシス−Ｓ−１−プロペニルシステイン（トランス体：シス体＝８：２）の混合物であることを確認した。

trans-S-1-propenylcysteine
¹H-NMR (500 MHz, in D₂O-NaOD, δ): 1.76 (d, 3H, J = 7.0 Hz), 2.98 (dd, 1H, J = 7.5, 14.5 Hz), 3.14 (dd, 1H, J = 4.5, 14.5 Hz), 3.69 (dd, 1H, J = 4.5, 7.5Hz), 5.10-5.14 (m, 1H), 6.02(d, 1H, J = 15.5 Hz);
¹³C-NMR (125 MHz, in D₂O-NaOD, δ): 17.61, 33.53, 53.70, 119.92, 132.12, 172.73.
HRMS: observed [M+H]⁺ = 162.0583, calculated [M+H]⁺ = 162.0581

cis-S-1-propenylcysteine
¹H-NMR (500 MHz, in D₂O, δ): 1.74 (d, 3H, J = 7.0 Hz), 3.21 (dd, 1H, J = 7.5, 15.0 Hz), 3.31 (dd, 1H, J = 4.5, 15.0 Hz), 3.95 (dd, 1H, J = 4.5, 7.5 Hz), 5.82-5.86 (m, 1H), 6.01(d, 1H, J = 9.5 Hz);
¹³C-NMR (125 MHz, in D₂O-NaOD, δ): 13.89, 33.88, 54.16, 122.58, 127.78, 172.63.
HRMS: observed [M+H]⁺ = 162.0580, calculated [M+H]⁺ = 162.0581

（２）ニンニクのエタノール抽出画分中のＳ−１−プロペニルシステインの測定
製造例１（１）で得られたニンニクのエタノール抽出画分を５００ｍｇから１ｇ容器に取り、内部標準としてＳ−ｎ−３−ブテニルシステインの２０ｍＭ塩酸溶液を加え、２０ｍＭ塩酸にて２０ｍＬとした。良く攪拌した後、一部を取り１７５０Ｇにて遠心分離を約１０分間行った。得られた上清を一部取り、遠心式ろ過ユニット（Amicon Ultra、cutoff：3000）を用いて遠心ろ過を行った（15000ｒｐｍ、10分）。得られたろ過物２０μＬを取り、ＡｃｃＱ・ＴａｇＤｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎＫｉｔ（Ｗａｔｅｒｓ）を用いて誘導体化をおこなった。別途、標準化合物を２０ｍＭ塩酸に溶解し、試料と同様の操作を行い検量線用標準液を調製した。試料溶液及び標準液をＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣシステム（Ｗａｔｅｒｓ）にてクロマトグラフを行い、含量を求めた。その結果、Ｓ−１−プロペニルシステインは、３．７±０．３ｍｇ／ｇ乾燥物であった。

試験例１
Ｓ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）の自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）への投与効果
１．方法
１）使用動物
日本ＳＬＣ社（浜松市）より購入した８週齢の雄性ＳＨＲ／Ｉｚｍを８匹１群として２週間の予備飼育を行った。予備飼育期間中はハンドリングを施し、温度２３±１℃、湿度５０±１０％、明暗周期１２時間（明期７−１９時）の一定環境下で飼育し、人工飼料（ＣＥ−２；日本クレア）、及び滅菌水道水は自由摂取とした。

２）投与実験
投与は、ディスポ経口ゾンデを用いた強制経口投与とし、投与液量はＳＨＲの体重１ｋｇあたり１０ｍＬとした。投与試料は製造例２で製造したＳ−１−プロペニルシステイン（シス／トランス混合物）を約１５ｍｇ精密に量り取り、精製水１５ｍＬに溶解した。この液を原液とし、投与量が６.５ｍｇ/ｋｇ（ＳＨＲ体重）になるよう適宜希釈してラットに単回経口投与した。対照群としてラットに溶媒（精製水）を同様に経口投与した。

３）血圧の測定
血圧は、投与開始前（０時間）、投与後１．５、３、６、及び２４時間に、非加温式型非観血式血圧計（室町機械、ＭＫ−２０００ＳＴ）を用いて無麻酔下で尾部付け根の収縮期血圧を測定した。なお、１個体当り５回測定を行い、上限値および下限値を削除し、残りの測定値の平均を、その個体の収縮期血圧値とした。

２.結果
結果を図１に示す。図1中、○は対照群（精製水）であり、●はＳ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）を６.５ｍｇ/ｋｇ投与した群である。図1中の＊、＊＊は各測定時間におけるS−１−プロペニルシステイン群と対照群との比較を行なった結果、対照群に比べ有意差（＊；ｐ<０．０５、＊＊；ｐ<０．０１）があることを示している。検定はｔ検定を用いた。
Ｓ−１−プロペニルシステインの単回経口投与は、投与して１．５時間後から６時間後まで対照群と比較して有意な血圧降下作用を示した。

試験例２
Ｓ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）及びＳ-アリルシステイン（ＳＡＣ）の自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）への投与効果
１．方法
１）使用動物
日本ＳＬＣ社（浜松市）より購入した８週齢の雄性ＳＨＲ／Ｉｚｍを８匹１群として３週間の予備飼育を行った。予備飼育期間中はハンドリングを施し、温度２３±１℃、湿度５０±１０％、明暗周期１２時間（明期７−１９時）の一定環境下で飼育し、人工飼料（ＣＥ−２；日本クレア）、及び滅菌水道水は自由摂取とした。

２）投与実験
投与は、ディスポ経口ゾンデを用いた強制経口投与とし、投与液量はＳＨＲの体重１ｋｇあたり１０ｍＬとした。投与試料は製造例２で製造したＳ−１−プロペニルシステイン（シス／トランス混合物）およびＳ−アリルシステインを約２ｍｇずつ精密に量り取り、精製水２ｍＬにそれぞれ溶解した。この液を原液とし、投与量が１ｍｇ/ｋｇ（ＳＨＲ体重）になるよう適宜希釈してラットに単回経口投与した。対照群としてラットに溶媒（精製水）を同様に経口投与した。

３）血圧の測定
血圧は、投与開始前（０時間）、投与後３、６、及び２４時間に、非加温式型非観血式血圧計（室町機械、ＭＫ−２０００ＳＴ）を用いて無麻酔下で尾部付け根の収縮期血圧を測定した。なお、１個体当り５回測定を行い、上限値および下限値を削除し、残りの測定値の平均を、その個体の収縮期血圧値とした。

２.結果
結果を図２に示す。図２中、○は対照群（精製水）であり、●はＳ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）を、▲はＳ−アリルシステイン（ＳＡＣ）を１ｍｇ/ｋｇ投与した群である。図２中の＊＊は各測定時間におけるＳ１ＰＣ群と対照群との比較を行った結果、対照群に比べ有意差（＊＊；ｐ<０．０１）があることを示している。検定はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定を用いた。
Ｓ１ＰＣの単回経口投与は、投与して３時間後にて対照群と比較して有意な血圧降下作用を示した。一方、同用量のＳＡＣの単回経口投与は、有意な血圧降下作用を示さなかった。

試験例３
Ｓ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）の自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）への反復経口投与効果
１．方法
１）使用動物
日本ＳＬＣ社（浜松市）より購入した８週齢の雄性ＳＨＲ／Ｉｚｍを１０匹１群として２週間の予備飼育を行った。予備飼育期間中はハンドリングを施し、温度２３±１℃、湿度５０±１０％、明暗周期１２時間（明期７−１９時）の一定環境下で飼育し、人工飼料（ＣＥ−２；日本クレア）、及び滅菌水道水は自由摂取とした。

２）投与実験
投与は、ディスポ経口ゾンデを用いた強制経口投与とし、投与液量はＳＨＲの体重１ｋｇあたり１０ｍＬとした。投与試料は製造例２で製造したＳ−１−プロペニルシステイン（シス／トランス混合物）を約１５ｍｇ精密に量り取り、精製水１５ｍＬに溶解した。この液を原液とし、投与量が６.５ｍｇ/ｋｇ（ＳＨＲ体重）になるよう適宜希釈してラットに経口投与した。対照群としてラットに溶媒（精製水）を同様に経口投与した。投与は一日一回、１０週間の反復経口投与を行った。

３）血圧の測定
血圧は、反復経口投与前（０週）、投与後１週間おきに１０週間まで、非加温式型非観血式血圧計（室町機械、ＭＫ−２０００ＳＴ）を用いて無麻酔下で尾部付け根の収縮期血圧を測定した。なお、１個体当り５回測定を行い、上限値および下限値を削除し、残りの測定値の平均を、その個体の収縮期血圧値とした。

２.結果
結果を図３に示す。図３中、○は対照群（精製水）であり、●はＳ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）を６.５ｍｇ/ｋｇ投与した群である。
Ｓ１ＰＣの１０週間反復経口投与は、対照群と比較して有意な血圧上昇抑制作用を示した。検定はｔｗｏ−ｗａｙＡＮＯＶＡを用いた。

試験例４
Ｓ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）の正常血圧ラット（ＷＫＹ）への投与効果
１．方法
１）使用動物
日本ＳＬＣ社（浜松市）より購入した８週齢の雄性ＷＫＹ／Ｉｚｍを４匹１群として２週間の予備飼育を行った。予備飼育期間中はハンドリングを施し、温度２３±１℃、湿度５０±１０％、明暗周期１２時間（明期７−１９時）の一定環境下で飼育し、人工飼料（ＣＥ−２；日本クレア）、及び滅菌水道水は自由摂取とした。

２）投与実験
投与は、ディスポ経口ゾンデを用いた強制経口投与とし、投与液量はＷＫＹの体重１ｋｇあたり１０ｍＬとした。投与試料は製造例２で製造したＳ−１−プロペニルシステイン（シス／トランス混合物）を約１５ｍｇ精密に量り取り、精製水１５ｍＬに溶解した。この液を原液とし、投与量が６．５ｍｇ/ｋｇ（ＷＫＹ体重）になるよう適宜希釈してラットに単回経口投与した。対照群としてラットに溶媒（精製水）を同様に経口投与した。

２.結果
結果を図４に示す。図４中、○は対照群（精製水）であり、●はＳ−１−プロペニルシステイン（Ｓ１ＰＣ）を６．５ｍｇ/ｋｇ投与した群である。
Ｓ１ＰＣの単回経口投与は、ＷＫＹに対して有意な血圧降下作用を示さなかった。

Claims

Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩を有効成分とする血圧降下剤であって、Ｓ−１−プロペニルシステインにおけるトランス体の割合が、トランス体とシス体の合計を１００％とした場合に、５０〜１００％である、血圧降下剤。
Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩が、ニンニク、タマネギ、エレファントガーリック、ニラ及びネギから選ばれる１種以上のアリウム属植物に由来するものである請求項１記載の血圧降下剤。
医薬である、請求項１又は２記載の血圧降下剤。
食品である、請求項１又は２記載の血圧降下剤。
Ｓ−１−プロペニルシステイン又はその塩を有効成分とする血圧降下用食品であって、Ｓ−１−プロペニルシステインにおけるトランス体の割合が、トランス体とシス体の合計を１００％とした場合に、５０〜１００％である、食品。