JP6567629B2 - 低汚染透析液 - Google Patents

Description

本発明は、低汚染透析液と、透析液を分析する方法とに関する。本発明は、さらに、透析液バッチのバリデーションを行う方法、一次包装材のバリデーションを行う方法、および殺菌処理の最適化に関する。

プラスチック製の包装材は、一方では、例えば液剤の成分から気体を抜くことにより液剤の組成の変化から透析液等の液剤を保護し、他方では、湿気や酸素のような外的要因から液剤を保護することが多い。従って、プラスチック包装材を用いれば、品質保持期間が長くなり、保存中のこれらの製品の安定性が向上する。さらに、プラスチック包装材は、例えば、ガラスびんよりも重量が軽く且つ取扱いが容易であるという利点を有する。また、安定性や、伸縮性や、気体透過性などのプラスチック包装材の特性は、広範な可能性のある要件のうちの特定の要件と適合し得る。一方、プラスチックは、単量体、オリゴマー、可塑剤、触媒成分などの低分子量物質が包装材から薬剤に流出する危険性をはらみ、このように患者に対して安全性の問題を引き起こす。これらの問題点は、包装材が製品と直接接触し、包装材由来の可溶性物質が液剤に急速に拡散している可能性があるという理由のため、液剤にとって特に問題となる。

プラスチック材料における一般的な溶出物（ｌｅａｃｈａｂｌｅ）は、フタレートすなわちフタル酸エステル類である。フタレートすなわちフタル酸エステル類は、フタル酸のエステル類であり、主に可塑剤として使用されることによりポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）を軟化させる。特定のフタレートに曝露された齧歯類についての研究では、曝露量が高いと、ホルモン濃度が変化し、先天性異常が起こることが分かっている。フタレートとしては、例えば、フタル酸ジエチル（ＤＥＰ）と、フタル酸ジイソブチルと、フタル酸ジブチル（ＤＢＰ）と、フタル酸ジシクロヘキシル（ＤＣＨＰ）とがある。

脂肪酸誘導体であるオレアミドおよびエルカ酸アミドは、ポリエチレン膜に使用される最も一般的なスリップ剤である。他のスリップ剤としては、デカンアミドと、ドデカンアミドと、ヘキサデカンアミドと、ステアルアミドとがある。

２−ｔ−ブチルフェノール、４−ｔ−ブチルフェノール、および２，４−ジ−ｔ−ブチルフェノールは、ターシャリーブチルフェノールホルムアルデヒドレジンの単量体であり、アレルギー反応を引き起こす可能性がある。

ジビニルベンゼン（ＤＶＢ）は、１，３−ジビニルベンゼンと１，４−ジビニルベンゼンとの混合物である。ジビニルベンゼンは、スチレン系重合体中の架橋剤として用いられる。ジビニルベンゼンは、強い刺激物であり、わずかな遺伝毒性を有することが知られている。

結果的に、欧州医薬品庁（European Medicines Agency（ＥＭＥＡ））は、２００５年末より、プラスチック直接包装素材に関するガイドライン（Guideline on Plastic Immediate Packaging Materials（ＣＰＭＰ／ＱＷＰ／４３５９／０３））を遵守すべく、移動物質の正確な識別表示および定量化を要求している。このガイドラインでは、すべての流出物質の毒性評価がこれら物質の量に関わらず要求される。物質の濃度が特定の濃度未満であれば、人の安全に対する危険がないと見なすのが妥当であると思われるので、製品品質研究所（Product Quality Research Institute（ＰＱＲＩ）、米国バージニア州アーリントン）は、このガイドラインに応じて安全性閾値（ＳＣＴ）を提案した。経口吸入投与および経鼻投与製剤（orally inhaled and nasal drug products（ＯＩＮＤＰ））についての科学的論拠に基づいて、一日当たり１５０ｎｇのＳＣＴ値が閾値として推奨され、これを下回る場合には溶出物についての毒性認定が不要であるとされた。ＰＱＲＩの非経口投与および経眼投与製剤（parenteral and ophthalmic drug products（ＰＯＤＰ））溶出物および抽出物作業部会は、液剤にこの値を採用するよう推奨した。この液剤は、腹膜透析（ＰＤ）および血液透析（ＨＤ）用の透析液も含むものである。ＰＤおよびＨＤは、急性または慢性腎不全の患者のための治療法である。

腹膜透析用の溶液の場合、溶出物の定量化に対して最も厳しい要求がなされる。通常、患者の腹腔には２リットルの量の透析液が導入される。この透析液は、腹部に約５時間とどまり、最終的には新しい液と取り替えられる。これにより、一日当たりの合計量は約１０リットルになる。自動液チェンジャーを使用する場合には、この合計量は２倍になる。このため、ＳＣＴを一日当たり１５０ｎｇとすると、１５ｎｇ／Ｌ（一日当たり１０Ｌの透析液）の検出限界（ＬＯＤ）または７.５ｎｇ／Ｌ（一日当たり２０Ｌ）もの検出限界（ＬＯＤ）を持つ分析手法が必要とされる。血液透析液、すなわち、より厳密に言えば血液濾過液の場合、３５ｎｇ／ＬのＬＯＤが要求される。この値は、週３回４時間の血液濾過治療で１回の治療につき１０Ｌの量が最終的に交換されることを想定して算出した。

液剤中の溶出物がＳＣＴ未満であることを判定する分析手法は、少なくとも２つの要件を満たす必要がある。第一に、これら手法は、混合物中のできるだけ多数の化合物を同時に定量化できなければならない。第二に、これら手法には、これらの検出限界（ＬＯＤ）および定量限界（ＬＯＱ）のそれぞれに関して微量成分分析を行うだけの高い感度が必要である。

この目的のために使用される非常に一般的な技術は液液抽出（ＬＬＥ）であり、この抽出の後には、抽出された試料のガスクロマトグラフィ（ＧＣ）による分離が続くことになる。有機溶剤を用いて水性試料を抽出することが、溶出物を濃縮し、ＧＣカラムへの注入を可能にするために特に必要である。典型的には、１００ｇの水性試料が、１時間、４ｇのクロロホルムと混合される。ＬＬＥの主な欠点は、時間がかかることと、コストがかかることと、環境だけではなく健康にも有害な、毒性になり得る溶媒を大量に使用することである。ＬＬＥの定量限界は、特定の化合物に依存するものであり、１０μｇ／ｋｇと２５０μｇ／ｋｇとの間にある。この値は、ＳＣＴの要件を満たすには十分ではない。

国際公開第９１／１５７４５号は、定量限界が向上した固相マイクロ抽出（ＳＰＭＥ）方法を開示している。この方法は、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）で被覆されたファイバーを用いる。これらファイバーは、シリンジ状の機構の針の中に配置されることにより、水性試料から無極性化合物を抽出し且つ濃縮する。このファイバーは、検査対象の物質についての吸収能力が非常に限られたものしかなく、さらに、拡散された分散媒に短時間浸されるだけなので、被覆されたファイバーを振動させた場合には、分析自体の感度が十分なものとは言えない。

欧州特許第１０３９２８８号明細書は、改良されたＳＰＭＥ装置を開示している。この方法は、ＰＤＭＳで被覆されたスターラーバーを用いる。このため、この方法はスターラーバー吸着抽出法（ＳＢＳＥ）と呼ばれる。

医療用溶液（例えば透析液）内の溶出物および汚染物質を検出する分析手法であって、ＳＣＴの要件を満たす手法が依然として求められている。

本発明の目的の１つは、医療用溶液中の包装材由来の物質に対する感度が著しく向上した分析手法を提供することである。

本発明の方法は、ポリマー容器内の透析液（例えば複室バッグ内の透析液）の分配用のバッチのバリデーションを行う際に有用であり得る。バリデーション処理では、透析液を包装材中に充填し、熱殺菌する。１つのバッチの複数の容器を試料として抽出し、本発明の方法を用いて透析液を分析する。この試料中の汚染物質または溶出物の総量を求める。バッチの試料に含有される汚染物質または溶出物が重量で１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、バッチを開放して分配を行う。

本発明のある実施形態では、溶液にオレアミドおよびエルカ酸アミドが含まれていないかを分析する。バッチの試料に含有されるオレアミドまたはエルカ酸アミドが１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、バッチを開放して分配を行う。

本発明のある実施形態では、溶液に１，３−ジビニルベンゼンおよび１，４−ジビニルベンゼンが含まれていないかを分析する。バッチの試料に含有されるジビニルベンゼンが１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、バッチを開放して分配を行う。

本発明のある実施形態では、溶液に、フタル酸ジエチル（ＤＥＰ）と、フタル酸ジイソブチルと、フタル酸ジブチル（ＤＢＰ）と、フタル酸ジシクロヘキシル（ＤＣＨＰ）とが含まれていないかを分析する。バッチの試料に含有される前述のフタレートが１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、バッチを開放して分配を行う。

本発明の方法は、医薬品（例えば透析液）用の包装材のバリデーションを行うのにも有用であり得る。バリデーション処理では、透析液を包装材中に充填し、量産時の熱殺菌の条件と同じ条件下で熱殺菌する。本発明のある実施形態では、当該バリデーション処理における殺菌条件は、量産時の熱殺菌の条件を上回る。温度は、少なくとも１０％、好ましくは２０％を超える割合上昇させ、保持時間も、少なくとも２０％、好ましくは５０パーセント延長する。例えば、産業用熱殺菌処理が、１２１℃で最短１５分の保持時間を含む場合、本発明の方法は、１３１℃で最短６０分の保持時間を含む。

殺菌後、本発明の方法を用いて、透析液を分析する。この試料中の汚染物質または溶出物の合計量を求める。バッチの試料に含有される汚染物質または溶出物が重量で１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、包装材を承認して生産に使用する。

本発明のある実施形態では、溶液にオレアミドおよびエルカ酸アミドが含まれていないかを分析する。バッチの試料に含有されるオレアミドまたはエルカ酸アミドが１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、包装材を承認して生産に使用する。

本発明のある実施形態では、溶液に１，３−ジビニルベンゼンおよび１，４−ジビニルベンゼンが含まれていないかを分析する。バッチの試料に含有される前述のジビニルベンゼンが１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、包装材を承認して生産に使用する。

本発明のある実施形態では、溶液に、フタル酸ジエチル（ＤＥＰ）と、フタル酸ジイソブチルと、フタル酸ジブチル（ＤＢＰ）と、フタル酸ジシクロヘキシル（ＤＣＨＰ）とが含まれていないかを分析する。バッチの試料に含有される前述のフタレートが１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、包装材を承認して生産に使用する。

本発明の方法は、包装材から溶液中に溶出した汚染物質の量を制限するために殺菌処理を最適化する際にも有用であり得る。医療用溶液は、典型的には、熱殺菌によって殺菌される。無菌性を実現するためには、１２１℃で最短１５分または１３４℃で最短３分の保持時間が必要とされる。通常、液体には、追加の殺菌時間が必要である。

包装材から溶液中への溶出物および汚染物質の流出に影響を与える要因となるものは時間および温度である。温度を上昇させると拡散率が上がるので、包装材から溶液中への溶出物および汚染物質の流出量が多くなる。殺菌時間が必要以上に長くなると、汚染物質の初期量が多くなる一方、溶液の微生物的品質はこれ以上向上しなくなる。

殺菌処理を最適化するための実験装置においては、数個の試料を様々な温度および／または様々な時間で殺菌する。殺菌後、本発明の方法を用いて、透析液を分析する。この試料中の汚染物質または溶出物の総量を求める。バッチの試料に含有される汚染物質または溶出物が重量で１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、殺菌方法を承認して生産に使用する。

従って、本発明の方法は、包装材から溶液中に溶出した汚染物質の初期量を制限するために殺菌処理を最適化し、同時に十分な殺菌を保証する際に有用である。

本発明のある実施形態では、溶液にオレアミドおよびエルカ酸アミドが含まれていないかを分析する。バッチの試料に含有されるオレアミドまたはエルカ酸アミドが１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、この殺菌方法を承認して生産に使用する。

本発明のある実施形態では、溶液に１，３−ジビニルベンゼンおよび１，４−ジビニルベンゼンが含まれていないかを分析する。バッチの試料に含有される前述のジビニルベンゼンが１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、この殺菌方法を承認して生産に使用する。

本発明のある実施形態では、溶液に、フタル酸ジエチル（ＤＥＰ）と、フタル酸ジイソブチルと、フタル酸ジブチル（ＤＢＰ）と、フタル酸ジシクロヘキシル（ＤＣＨＰ）とが含まれていないかを分析する。バッチの試料に含有される前述のフタレートが１５０ｎｇ／Ｌ未満の場合に限り、この殺菌方法を承認して生産に使用する。

以上、本発明の好ましい実施形態について説明したが、本明細書に記載された範囲を逸脱することなく、本発明の多数の変形例および改変例を作成し得ることは、当業者には明らかであろう。本発明の方法によって分析し得る他の汚染物質または溶出物としては、フェノール、２′−ヒドロキシアセトフェノン、２−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、ビスフェノールＡ（ＢＰＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、シクロヘキサノール、２−エチルヘキサノール、ベンジルアルコール、ドデカノール、オクタデカノール、ウンデカン、酢酸２−（２−ブトキシエトキシ）エチル、メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）、シクロヘキサノン、トルエン、エチルベンゼン、スチレン、ベンズアルデヒド、１，２−ジシアノベンゼン並びにクロロベンゼン、４−ｔｅｒｔ−アミルフェノール、１，４−ジアセチルベンゼン、デカンアミド、ドデカンアミド、ヘキサデカンアミド、ステアルアミド並びに４−メチル−２−ヘプタノン、テトラデカンアミド、５，５−ジメチル−２，４−ヘキサンジオン、１，３−ジアセチルベンゼン並びに２−エチルヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、デカン酸, ドデカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデカン酸、ドコサン酸、および３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシフェニル）−プロピオン酸がある。

ｎｇ／ｋｇ範囲内での化合物の検出の場合、スターラーバーにバックグラウンド汚染があってはならない。このため、スターラーバーのコンディショニングが極めて重要なパラメータとなる。当該技術分野で公知の方法には、３００℃までの温度で特定の時間スターラーバーを加熱するような単純なコンディショニング工程が含まれている。この処理は不十分であることが確認された。

バックグラウンド汚染を最小化するために、２つの異なる方法を用いてもよい。どちらのコンディショニング方法にも、メタノールとジクロロメタンの１：１の混合物中での少なくとも１回の洗浄工程が含まれる。必要な場合には、スターラーバーをメタノールとジクロロメタンの１：１の混合物６ｍＬの中に入れた後、１５分間超音波処理してもよい。この工程は、必要な場合には、洗浄溶液を新しくして、もう４回繰り返してもよい。その後、スターラーバーは、純粋窒素中で、３０℃で３０分間乾燥した後、３００℃で４時間脱着した。次に、スターラーバーは、窒素下で常温まで冷却させられた。

第２のコンディショニング処理は、メタノールとジクロロメタンとの混合物を含む６ｍＬの洗浄溶液内でスターラーバーを４時間揺り動かす工程と、既述のように、洗浄溶液とスターラーバーとを乾燥させる工程とを備える。洗浄溶液は、３：１〜１：３、好ましくは２：１〜１：２、最も好ましくは１：１の体積比で、メタノールとジクロロメタンとを含む。

必要な場合には、この処理を変更して、洗浄溶液を２時間後に交換し、さらに乾燥工程を２回繰り返してもよい。

上述の第２のコンディショニング処理は、残留汚染が最も低いことを示した。従って、この処理は、好ましいコンディショニング方法である。

抽出中の攪拌または抽出時間は、主に試料分析時間に影響を及ぼす。従って、短時間が好ましいと思われる。この要求とは反対に、攪拌時間が長くなると、溶質の水−ＰＤＭＳ間の分配については平衡条件に確実に到達するので、好適である。典型的な抽出時間は、６０分と２４時間との間である。平衡に到達するまでの正確な時間は、例えば、溶質の拡散率と、相比と、攪拌速度と、温度とに依存する。

抽出時間は、３０分や、６０分や、１２０分や、２４０分や、３６０分や、９６０分や、１４４０分であってもよい。好ましい抽出時間は約２４０分である。この時間の経過後、ＰＤＭＳと水との間が平衡に到達する。抽出時間を長くしても吸着物質の量は増えないばかりか、全体の分析時間が長くなる。

意外にも、抽出時間が長くなると、抽出された化合物が脱着するので、難点にもなり得ることが確認された。このことは、例えば脂肪酸に当てはまる。ＰＤＭＳ中の濃度は、２４０分よりもはるかに長い抽出時間の間に、大幅に低下する場合がある。興味深いことに、時間とともに酸の抽出量が減少することは、炭素原子数と逆相関にあり、よって、疎水性およびＫＯ／Ｗ値ともそれぞれ逆相関にある。４時間から２４時間までの濃度の低下は、ドデカン酸の場合により顕著になり、一方、オクタデカン酸の場合、対象イオンのピーク面積にほぼ変化は見られなかった。

スターラーバーの寸法と、ＰＤＭＳの体積と、試料の体積とが、抽出効率を直接的に左右する。周知の数式（１）に示すように、分配係数によって２つの変数が結合されている。

ＰＤＭＳおよび水中の溶質分布の場合の分配係数ＫＰＤＭＳ／Ｗは、ＰＤＭＳ中の溶質濃度（ＣＰＤＭＳ）と水の中の溶質濃度（Ｃｗａｔｅｒ）との比として定義される。この比は、質量比（ｍＰＤＭＳ／ｍｗａｔｅｒ）×相比βと等しい。市販のスターラーバーには、ＰＤＭＳの体積が２３．５μＬあるもの（０.５ｍｍ厚のＰＤＭＳコーティングがされた、長さが１０ｍｍのスターラーバー、これ以降は「１０×０．５」と呼ぶ）と、ＰＤＭＳの体積が４７μＬあるもの（「２０×０．５」スターラーバー）と、ＰＤＭＳの体積が６３μＬあるもの（「１０×１」スターラーバー）と、ＰＤＭＳの体積が１２６μＬあるもの（「２０×１」スターラーバー）まである。ＰＤＭＳの体積が大きくなるほど抽出値が高くなるので、２０×１スターラーバーが好ましい。

さらに、ＰＤＭＳ層の厚さは、吸収の速度論に影響を及ぼすので、抽出に作用し得る。

極性溶質の抽出効率は、塩析によって向上する。塩（好ましくは塩化ナトリウム）の添加によって、イオン強度が高くなる。これにより、有機化合物の溶解度が低下し、ＰＤＭＳと水との間の有機化合物の分配係数が高くなる。その結果、抽出率が高くなる。

標準の透析液は、高極性領域（解離型エチルヘキサン酸の場合、ｌｏｇ ＫＯ／Ｗ＝−２．９）から無極性領域（エルカ酸アミドの場合、ｌｏｇ ＫＯ／Ｗ＝８．４）までの様々な異なる物質を含んでいるので、塩析は、抽出に大きく影響し得る。

塩化ナトリウム濃度が１２０ｇ／Ｌ、２４０ｇ／Ｌ、３２０ｇ／Ｌ、３４０ｇ／Ｌ、または３６０ｇ／Ｌになる量の塩化ナトリウムを透析液試料に添加してもよい。２５ｍＬの透析液試料に対して９ｇの塩化ナトリウムを添加すると、３６０ｇ／Ｌの塩濃度になる。この塩濃度は、塩化ナトリウムの水溶解度限界（２０℃で３５９ｇ／Ｌ）を上回る。こうして、飽和溶液が得られる。このため、塩化ナトリウム濃度を、９０〜９９％の飽和度、より好ましくは９５〜９９％の飽和度に調整することが好ましい。この飽和度は、約３２３ｇ／Ｌ、約３４１ｇ／Ｌ、または約３５５ｇ／Ｌの塩化ナトリウム濃度に相当する。

塩の添加は、溶質の分配係数に影響を及ぼし、従って熱力学的因子であるが、攪拌速度は、抽出の速度論に影響を及ぼす。典型的な攪拌速度は、６００ｒｐｍと１２００ｒｐｍとの間であるが、攪拌速度が高くなると、水溶液からＰＤＭＳへの移動係数が大きくなる。なぜなら、攪拌速度が高くなると、拡散層の厚さが最小化されるからである。この薄い層（濃度境界層とも呼ばれる）は、ＰＤＭＳ表面に近い領域であり、この領域では、分析物の濃度が、バルク溶液中の濃度よりも低い。これにより、ＰＤＭＳとＰＤＭＳを直接取り囲んでいるものとの間の濃度勾配が小さくなる。拡散速度を高くすることにより、この境界層の厚さが最小化されるので、ＰＤＭＳ中への溶質の移動に対する抵抗が最小化される。１０００〜１２００ｒｐｍまたは１１００〜１２００ｒｐｍの攪拌速度が好ましい。

ＧＣによる分析のために、ＰＤＭＳから分析物を熱脱着した。ここでは、２つのパラメータ（すなわち時間および温度）が、脱着効率に大きな影響を及ぼす。

２５０℃と２８０℃との間に大差はないが、化合物の大部分について、脱着温度を２８０℃にする方が、信号が若干強くなった。物質の熱劣化は見られなかった。温度を高くすれば持ち越し効果も最小化されるので、２８０℃の温度が好ましい。

脱着時間は、２８０℃の一定脱着温度で２．５分、５分、７．５分、１０分のいずれかにできる。この時間を２．５分から１０分に延長すると、対象イオンのピーク面積の５０％拡大が見られた。このため、脱着時間は、１０分が好ましい。

試料加熱速度は、１２℃／秒と１６℃／秒との間であってもよい。加熱速度が高くなると脱着が速くなるが、加熱速度が低くなると信号強度が約２倍になる。従って、この方法にとっては、加熱速度が低い方が好ましかった。

以下の５２種類の化合物を分析物として用いた。これら化合物は、フェノール、２′−ヒドロキシアセトフェノン、２−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、ビスフェノールＡ（ＢＰＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、シクロヘキサノール、２−エチルヘキサノール、ベンジルアルコール、ドデカノール、オクタデカノール、フタル酸ジエチル（ＤＥＰ）、フタル酸ジイソブチル、フタル酸ジブチル（ＤＢＰ）、フタル酸ジシクロヘキシル（ＤＣＨＰ）、ウンデカン、酢酸２−（２−ブトキシエトキシ）エチル、メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）、シクロヘキサノン、トルエン、エチルベンゼン、スチレン、ジビニルベンゼン（ＤＶＢ）、ベンズアルデヒド、１，２−ジシアノベンゼン並びにクロロベンゼン、４−ｔｅｒｔ−アミルフェノール、オレアミド、エルカ酸アミド並びに１，４−ジアセチルベンゼン、デカンアミド、ドデカンアミド、ヘキサデカンアミド、ステアルアミド並びに４−メチル−２−ヘプタノン、テトラデカンアミド、５，５−ジメチル−２，４−ヘキサンジオン、および１，３−ジアセチルベンゼンである。

各分析物の最終的な濃度が３ｍｇ／ｋｇになるように、これらの物質をエタノールに溶解することにより、標準保存溶液を調製した。

１０のカルボン酸（２−エチルヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデカン酸、ドコサン酸、および３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシフェニル）−プロピオン酸）の濃度が約６ｍｇ／ｋｇになるように、エタノールを溶媒とする第２の標準保存溶液を調製した。

両方の保存溶液を常温で暗所に保存した。

２ｍｇ／ｋｇのフェナントレン−Ｄ１０（シグマアルドリッチ）のエタノール (ピーエイ（ｐ．ａ．）、メルク（Ｍｅｒｃｋ ＫＧａ）溶液を、内部標準として用いた。すべての試料をこの標準でスパイクして、フェナントレン−Ｄ１０濃度を最終的には７５μｇ／ｋｇになるようにした。

ＰＤＭＳで被覆されたツイスター（Ｔｗｉｓｔｅｒ（登録商標））スターラーバーをゲステル株式会社（Ｇｅｒｓｔｅｌ ＧｍｂＨ）（独国ミュールハイム）から購入した。どの測定の前にも、メタノールとジクロロメタンの５０：５０混合物６ｍＬの中でこれらスターラーバーを４時間揺り動かし、２時間後に溶媒を交換することにより、スターラーバーを洗浄およびコンディショニングした。その後、スターラーバーは、純粋窒素中で、３０℃で３０分間乾燥した後、３００℃で４時間コンディショニングした。これらスターラーバーを、窒素中で４時間、常温まで冷却した。常温まで冷却する工程をさらに含む熱コンディショニング処理をもう一度繰り返した。

ある腹膜透析液を分析した。この透析液を、５Ｌの二室バッグに供給した。分析に先立って、対応する使用説明書に記載のように、測定直前に、両室の中身を十分に混合した。その後、４種類の試料を２５ｍＬずつ以下に記載のように抽出した。

体積が２５ｍＬの試料を、呼び容積が２５ｍＬであるガラス製のヘッドスペースバイアルに投入した。この後、８．５ｇの塩化ナトリウムと、１００μＬのフェナントレン−Ｄ１０溶液とを添加し、１ｍｍ厚のＰＤＭＳ塗膜（＝１２６μＬのＰＤＭＳ位相体積）が設けられた２ｃｍの長さのＰＤＭＳスターラーバーをバイアル中に配置した。続いて、バイアルをクリンプキャップで密封した。２５℃で４時間の抽出を１１００ｒｐｍの攪拌速度で行った。その後、スターラーバーを、磁気スターラーバーリトリーバーにより取り外し、水洗いし、短時間窒素でパージして、表面から水を除去した。分析物はＰＤＭＳに吸収され、スターラーバー表面にはないので、水洗いは分析物に影響を及ぼさない。最終的には、スターラーバーを脱着管内に移動させ、自動試料採取トレイに載置した。これらの脱着管を、３回の測定の終了毎に、まず水洗いし、続いてアセトンで洗うことにより、洗浄した。次に、これら脱着管を一晩７０℃で乾燥した。

スターラーバーの取り扱い全般は、直接接触することにより起こり得る汚染を回避するために、ピンセットによって実施された。

フェナントレン−Ｄ１０は、試料すべてをスパイクするために使用した。従って、フェナントレン−Ｄ１０は、正確な、エラーのない試料抽出処理を確実に実現するべく、制御化合物として機能した。フェナントレン−Ｄ１０の場合の通常得られる対象イオンのピーク面積からのずれは、抽出中の攪拌プロセスが適正ではない可能性が高いこと、または、スターラーバーの経年劣化が進行していることを示唆するものである。

熱脱着装置「ＴＤＵ」（ゲステル）と、コールドインジェクションシステム（ｃｏｌｄ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ）「ＣＩＳ」（ゲステル）とを装備したアジレントのＧＣ７８９０システムを用いて、ＧＣ／ＭＳ測定を行った。さらに、多目的自動試料採取器「ＭＰＳ」（ゲステル）を用いて、スターラーバーをＴＤＵに導入した。２８０℃で１０分間の脱着を溶媒排出モードで行った。ヘリウム５．０を用いて、分析物をＣＩＳ内に移動させた。ＣＩＳでは、分析物を−１２０℃で低温濃縮した。最終的には、１２℃／秒の速度で、ＣＩＳを２８０℃まで加熱し、分析物をＧＣカラム中に注入した。ヘリウムキャリアガスの一定流速は、１ｍＬ／分であった。クロマトグラフィによる分離に用いた温度プログラムは、前記注入後、５０℃での１分の待機時間が必要であった。その後、１０℃／分の速度で、温度を５０℃から１５０℃に上昇させた後、５．５分間このレベルに維持し、その後、５０℃／分の速度で、温度をさらに３００℃に上昇させた後、温度をこのレベルに１０分間維持した。２７０℃の温度でイオン源を維持した。検出器は、電子衝撃（ＥＩ）イオン源を有するアジレント５９７３の四重極型質量分析計（ＭＳ）であり、スキャンモードで使用した。質量電荷比（ｍ／ｚ）は、２５と７００との間の値で記録された。使用されたカラムは、フェノメネックス社（独国アシャッフェンブルク）から購入したゼブロン（ＺＢ−５０）キャピラリーカラム（長さ３０ｍ、直径０．２５ｍｍ、膜厚０．５０μｍ、固定相：５０％ジフェニルポリシロキサン、５０％ジメチルポリシロキサン）であった。

腹膜透析液の試料は、溶出物の広いスペクトラムを示した。このスペクトラムは、標準保存溶液に用いた成分の約７５％に相当した。この知見により、標準溶液組成が実質的に関連していることが分かった。ＧＣ−ＭＳ分析の間には、溶液のうちいずれにも、未確認の物質は検出されなかった。溶出物のほとんどは、１μｇ／ｋｇと１０μｇ／ｋｇとの間の濃度で確認された。溶出物の一部（フタル酸ジエチル、フタル酸ジブチル、オレアミド、 およびエルカ酸アミド）は、０．１μｇ／ｋｇまでの範囲内で確認された。フタル酸ジシクロヘキシルおよびＢＰＡは検出されなかった。

Claims (12)

1. スターラーバー吸着抽出法により透析液中の汚染物質および溶出物を検出する方法であって、
   吸着材料で被覆されたスターラーバーをコンディショニングする工程ａと、
   透析液中の塩化ナトリウム濃度が少なくとも９０％の飽和度になるように塩化ナトリウムを透析液に添加する工程ｅと、
   被覆された前記スターラーバーにより前記透析液を攪拌する工程ｂと、
   被覆された前記スターラーバーから汚染物質および溶出物を脱着する工程ｃと、
   を備える方法。
2. ＧＣ−ＭＳによって前記汚染物質および前記溶出物を分析する工程ｄをさらに備える、請求項１に記載の方法。
3. 前記コンディショニング工程ａは、メタノールとジクロロメタンとを含む混合物中で洗浄する工程を備える、
   請求項１または２に記載の方法。
4. 前記コンディショニング工程ａは、超音波処理をさらに備える、
   請求項３に記載の方法。
5. スターラーバーの吸着材料はポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）である、
   請求項１〜４のうちいずれか一項に記載の方法。
6. ポリマー容器中の透析液のバッチのバリデーションを行うプロセスであって、
   請求項１〜５のいずれか１項記載の方法によって、熱殺菌後に、前記バッチの試料中のフタル酸ジエチルまたはフタル酸ジブチルの総量を求める工程ａと、
   前記工程ａにおいて、前記バッチの前記試料に含有される溶出物または汚染物質が、１５０ｎｇ／Ｌ未満であることが判明した場合に限り、前記バッチのバリデーションを行ってから分配する工程ｂと、
   を備えるプロセス。
7. 前記工程ａにおいて、前記バッチの前記試料に含有されるフタル酸ジエチルまたはフタル酸ジブチルが、１５０ｎｇ／Ｌ未満であることが判明した場合に限り、前記バッチのバリデーションを行ってから分配する、
   請求項６に記載のプロセス。
8. 前記工程ａにおいて、前記バッチの前記試料に含有されるフタル酸ジエチルまたはフタル酸ジブチルが、１００ｎｇ／Ｌ未満であることが判明した場合に限り、前記バッチのバリデーションを行ってから分配する、
   請求項７に記載のプロセス。
9. 透析液用一次包装材のバリデーションを行うプロセスであって、
   一次包装材に透析液を充填する工程ａと、
   少なくとも１５分間１２１℃の温度で、または、少なくとも３分間１３４℃の温度で、充填された前記包装材を熱殺菌する工程ｂと、
   請求項１〜５のうちいずれか一項に記載の方法を用いて前記透析液を分析する工程ｃと、
   前記工程ｃにおいて、前記バッチの前記試料に含有される溶出物または汚染物質が、１５０ｎｇ／Ｌ未満であることが判明した場合に限り、一次包装材のバリデーションを行う工程ｄと、
   を備えるプロセス。
10. 前記工程ｃにおいて、前記バッチの前記試料に含有されるフタル酸ジエチルまたはフタル酸ジブチルが、１５０ｎｇ／Ｌ未満であることが判明した場合に限り、前記一次包装材のバリデーションを行ってから分配する、
    請求項９に記載のプロセス。
11. 透析液用の殺菌処理のバリデーションを行うプロセスであって、
    一次包装材に透析液を充填する工程ａと、
    充填された前記包装材を熱殺菌する工程ｂと、
    請求項１〜５のうちのいずれか一項に記載の方法を用いて前記透析液を分析する工程ｃと、
    前記工程ｃにおいて、前記バッチの前記試料に含有される溶出物または汚染物質が、１５０ｎｇ／Ｌ未満であることが判明した場合に限り、前記殺菌処理のバリデーションを行う工程ｄと、
    を備えるプロセス。
12. 前記溶出物または前記汚染物質は、フェノール、２′−ヒドロキシアセトフェノン、２−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール、ビスフェノールＡ（ＢＰＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、シクロヘキサノール、２−エチルヘキサノール、ベンジルアルコール、ドデカノール、オクタデカノール、フタル酸ジエチル（ＤＥＰ）、フタル酸ジイソブチル、フタル酸ジブチル（ＤＢＰ）、フタル酸ジシクロヘキシル（ＤＣＨＰ）、ウンデカン、酢酸２−（２−ブトキシエトキシ）エチル、メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）、シクロヘキサノン、トルエン、エチルベンゼン、スチレン、ジビニルベンゼン（ＤＶＢ）、ベンズアルデヒド、１，２−ジシアノベンゼン並びにクロロベンゼン、４−ｔｅｒｔ−アミルフェノール、オレアミド、エルカ酸アミド並びに１，４−ジアセチルベンゼン、デカンアミド、ドデカンアミド、ヘキサデカンアミド、ステアルアミド並びに４−メチル−２−ヘプタノン、テトラデカンアミド、５，５−ジメチル−２，４−ヘキサンジオン、１，３−ジアセチルベンゼン、２−エチルヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデカン酸、ドコサン酸、および３−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシフェニル）−プロピオン酸からなる群から選択される、
    請求項６、９、または１１のいずれか一項に記載のプロセス。