JP6502507B2 - スルホンアミド系医薬組成物の調製方法 - Google Patents

Description

本発明は、医薬技術分野に属する。具体的には、スルホンアミド系医薬組成物、その調製方法、およびその用途に関する。

癌は、現在世界的に発症数の多い疾病であって、大半は発見が遅く、治癒率が比較的低い。現在の抗癌剤は、一般に、例えば脱毛、嘔吐、白血球の減少、骨髄抑制、免疫機能の低下などの毒性作用／副作用が大きいという特徴を有するが、その主な原因は、抗癌剤は細胞の新陳代謝のある段階に作用するものの、正常な細胞と腫瘍細胞に対する選択性が低く、腫瘍細胞に対して殺滅作用を有すると同時に、正常な細胞、特に新陳代謝が早い正常な細胞に対する破壊性も大きいことにある。

スルホンアミド系化合物は、抗菌薬として臨床で数十年間使用されている。抗菌スペクトルが広く、性質が安定しており、使用が簡単でかつ安価であり、現在も依然として抗生物質に次ぐ常用の抗菌薬である。スルホンアミド系化合物に対する研究の進展にともなって、スルホンアミド系化合物が、例えば利尿、抗甲状腺、抗糖尿病、抗低血糖、白内障の治療などに関するより広い生物活性を有していることが発見された。近年、抗腫瘍活性を有するスルホンアミド系化合物が数多く報告されており、そのうちの一部の化合物は既に臨床試験段階に入っている。これらの化合物は様々な分子標的に作用して、顕著な生物活性を呈する。また、ある化合物はさらに、様々な作用標的に対し、高い選択性と特異性を示す。

スルホンアミド系医薬の作用メカニズムは、例えば、チューブリン重合の阻害、細胞周期の正常な進行の阻害、炭酸脱水酵素、葉酸依存性酵素、メチオニルアミノペプチダーゼおよびヒストンデアセチラーゼの抑制、血管内皮細胞増殖因子の抑制などの多様性を示す。

中国特許ＺＬ９７１０８９８８．４は、スルホンアミド系化合物の注射剤の調製処方およびプロセスを開示している。

前記化合物は、下記の化合物を含む。

式中、ＲはＨ、Ｃ_２Ｈ_５または下記基：

である。

好ましくは、スルホンアミド系化合物は、下記式：

で表される化合物から選ばれ、
その配合の組成は以下の通りである。
前記スルホンアミド系医薬 １０％〜８０％
ポリエチレングリコールＰＥＧ−４００ １０％〜６０％
１，２−プロパンジオール ５％〜３０％
スベリン酸 １％〜２０％
ｐ−トルエンスルホン酸 １％〜１５％
ジメチルスルホキシド ０〜２０％
エタノール ０〜２０％

本発明において、ｐ−トルエンスルホンアミド注射液の研究のために、上述の配合を採用して調製を行ったところ、意外にも、上述の配合によって調製されたｐ−トルエンスルホンアミド注射液は安定性が低く、長時間放置すると容易に結晶化し、また注射部位への刺激性も非常に強いということが分かった。

そこで、本発明においては、配合と調製方法について研究を行い、上述の欠陥がスベリン酸およびｐ−トルエンスルホン酸によるものであるということを発見した。このため、本発明は、スベリン酸をセバシン酸に置き換え、ｐ−トルエンスルホン酸を２−エチル−１，３−ヘキサンジオールに置き換えることにより、上述の問題を効果的に解決している。

本願は、スルホンアミド系化合物注射製剤の処方および調製プロセスに対して改良を行うことにより、元の注射剤における、溶解性が低く、結晶化しやすいという問題をより効果的に解決している。また毒性比較試験、臨床試験により、本製剤の毒性はより低く、臨床応用においてより安全であるということが分かった。

本発明の目的は、以下の原料を加工して調製された、スルホンアミド系化合物を含有する注射製剤を提供することである。

ポリエチレングリコール−４００（ＰＥＧ−４００）、１，２−プロパンジオール、セバシン酸、２−エチル−１，３−ヘキサンジオール、ジメチルスルホキシドおよびエタノールのうち、ジメチルスルホキシド、エタノールは添加してもしなくてもよく、他のものは必ず添加しなければならない。

ここで、前記スルホンアミド系化合物は、下記式：

で表される化合物から選ばれる１種類または任意の割合の２種類以上の化合物の組合せである。

式中、ＲはＨ、Ｃ_２Ｈ_５または下記基：

である。

好ましくは、スルホンアミド系化合物は、下記式：

で表される化合物から選ばれる。

好ましくは、本発明に係る注射剤は、以下の原料を加工して調製される。

より好ましくは、本発明の注射剤は、以下の原料を加工して調製される。

本発明は、従来の注射剤を基礎として改良を行って、ｐ−トルエンスルホン酸を除去し、可溶化剤である２−エチル−１，３−ヘキサンジオールを添加している。処方においてポリエチレングリコール−４００、２−エチル−１，３−ヘキサンジオール、１，２−プロパンジオールを配合することにより、注射液中の１，２−プロパンジオールの使用量を減らし、注射部位に対する刺激性を低減させることができる。

本発明の他の目的は、当該注射剤の調製方法を提供することである。

本発明に係る注射剤の調製方法は、
１）処方量のスルホンアミド系化合物、ポリエチレングリコール−４００および２−エチル−１，３−ヘキサンジオールを容器に入れ、８５℃〜９５℃でゆっくりと攪拌して混合溶液とし、後に使用するための溶液Ａを得るステップ、
２）処方量のセバシン酸および１，２−プロパンジオールを取って別の容器に入れ、同様に８５℃〜９５℃でゆっくりと攪拌して混合溶液とし、後に使用するための溶液Ｂを得るステップ、
３）上記のように得られた溶液Ａと溶液Ｂとを８５℃〜９５℃の温度を維持しながら均一に混合、攪拌するステップ、
４）処方量のジメチルスルホキシドおよび少量の無水エタノールを容器に入れ、後に使用するために均一に攪拌、混合して溶液Ｃを得るステップ、
５）溶液Ａと溶液Ｂの混合溶液を６０℃まで冷却し、溶液Ｃを注入して均一になるように十分に攪拌、混合し、室温まで冷却してから、１００重量％になるまで無水エタノールを補充して均一に攪拌するステップ、
６）０．４５ｕｍのミリポアフィルターで濾過し、５ｍｌのアンプル瓶に充填して封止するステップ、
７）１２１℃で３０分間滅菌するステップを含む。

以下の実験結果により、本発明の有益な効果をさらに説明する。

本発明は、従来技術（ＣＮ１０７３４１５Ｃ）を基礎として改良を行った。上の表に示すように、本発明に係る処方と中国特許ＣＮ１０７３４１５Ｃの実施例２に開示された処方とを比較すると、以下の改良を行っている。
１．スベリン酸に替えてセバシン酸を使用する。
２．ｐ−トルエンスルホン酸に替えて２−エチル−１，３−ヘキサンジオールを使用する。

上述の改良を行った結果、元の処方における安定性の低さなどの一連の問題が効果的に解決されている。

以下のデータにより、本発明の有益な効果をさらに説明する。

実験一、中国特許ＣＮ１０７３４１５Ｃに対する研究
当該特許文献内の実施例に基づき、対応する薬物を調合して、比較研究を行った。

結果から分かるように、当該薬物は、冷蔵条件で一定時間置かれると結晶が析出し、薬物の安定性に深刻な影響を及ぼす。本発明者は、上述の問題を発見した後に配合について研究を行い、薬物の安定性が悪化する原因が、処方中のスベリン酸およびｐ−トルエンスルホン酸にある可能性を見出した。その理由は、以下の通りである。

配合中のポリエチレングリコール−４００は、水溶性溶媒であって、製剤と体内組織との親和性を高めるように作用する。

配合中の１，２−プロパンジオールは、水溶性溶媒であって、製剤と体内組織との親和性を高め、結晶化を抑制するように作用する。

配合中のスベリン酸は、二価脂肪酸であり、脂溶性溶媒であって、原料薬であるｐ−トルエンスルホンアミドの混合溶媒に対するの溶解性を高め、結晶化を抑制するように作用する。

配合中のｐ−トルエンスルホン酸は、芳香族スルホン酸化合物であって、原料薬であるｐ−トルエンスルホンアミドの混合溶媒に対する溶解性を高め、結晶化を抑制するように作用する。

配合中のジメチルスルホキシドは、両親媒性溶媒であって、原料薬であるｐ−トルエンスルホンアミドの混合溶媒に対する溶解性を高め、結晶化を抑制するように作用する。

配合中のエタノールは、両親媒性溶媒であって、原料薬であるｐ−トルエンスルホンアミドの混合溶媒に対する溶解性を高めるように作用すると共に、すぐれた流動性から、製剤全体の体積の調整にも用いられる。

上述の結論をさらに検証するため、発明者は以下の実験を行った。

スベリン酸およびｐ−トルエンスルホン酸の使用量は変更せず、他の試薬を調整したところ、上述の問題が依然として存在した。

実験結果から分かるように、上述の配合を調整した後、スベリン酸およびｐ−トルエンスルホン酸の使用量を変更しなかった場合には依然として問題があり、このため、スベリン酸およびｐ−トルエンスルホン酸が問題の原因であることがさらに特定された。

次いで、スベリン酸およびｐ−トルエンスルホン酸について置き換えを行った。

実験二、配合スクリーニングテスト
他の条件は変更せずに、スベリン酸およびｐ−トルエンスルホン酸について置き換えを行い、様々な材料を選別した。スクリーニング過程は、以下の通りである。

実験結果から分かるように、スベリン酸に替えてセバシン酸を使用するか、或いはｐ−トルエンスルホン酸に替えて２−エチル−１，３−ヘキサンジオールを使用することにより従来技術に存在する問題を解決できるが、従来技術の配合における使用量が非科学的であり、調製過程で溶解時間が過度に長くなっていたため、２種類の配合成分を組み合わせ、かつ配合中の各成分の使用量についてスクリーニングを行った。

実験三、配合中の補助剤のスクリーニングテスト

テストの結果から分かるように、処方Ｉと処方ＩＩでは、最終的に原料薬を全て溶解できるものの、所要時間が長く、処方ＩＩＩ〜ＶＩでは、溶解が容易になり、得られる溶液は清澄・透明であった。

一方、本発明は、従来の薬品についてさらなる比較を行った。

本発明に係る実施例１、実施例５、実施例６および実施例７（即ち処方ＩＩＩ−ＶＩ）のサンプル（それぞれ番号Ａ〜Ｄとする）と、自己調製したＣＮ１０７３４１５Ｃの実施例２のサンプル（番号Ｅとする）とをそれぞれ３つ用意し、４℃±２℃で１０日間冷蔵し、それぞれ０日目、５日目、１０日目に、サンプルに結晶が析出しているか否かを確認した。実験結果は、表２に示す通りである。

上記の表に示す比較結果の通り、自己調製したＣＮ１０７３４１５Ｃの実施例２に比べ、本発明の処方ＩＩＩ〜ＶＩにおいては、４℃で冷蔵した場合の安定性が明らかに向上している。具体的には、１０日間保存した後でも溶液は依然として清澄・透明であり、結晶は析出しなかった。

加速安定性実験
本発明に係る実施例１、実施例５、実施例６および実施例７（即ち処方ＩＩＩ〜ＶＩ）のサンプル（それぞれ番号Ａ〜Ｄとする）と、自己調製したＣＮ１０７３４１５Ｃの実施例２のサンプル（番号Ｅとする）とを用意し、適量のサンプルをそれぞれ４０℃±２℃、７５％±５％ＲＨで保存し、関連の特性を測定したところ、下表に示す関連データを得た。

上記の表に示すように、本発明に係る処方ＩＩＩ〜ＩＶとＣＮ１０７３４１５Ｃの実施例２のサンプルを比較すると、４０℃±２℃、７５％±５％ＲＨで６か月間保存したとき、本発明に係る処方ＩＩＩ〜ＩＶの安定性は、ＣＮ１０７３４１５Ｃの実施例２のサンプルよりも明らかに高い。具体的には、最大の単一不純物および全不純物は増加速度が遅く、増加量も少ないが、含有される原料薬は分解速度が遅く、分解量も少なかった。

以下の具体的な実施例により、本発明についてさらに説明を行う。ただし、本発明はこれに制限されるものではない。

注射剤

調製方法
１）処方量のｐ−トルエンスルホンアミド、ポリエチレングリコール−４００および２−エチル−１，３−ヘキサンジオールを適切な容器に入れ、８５℃〜９５℃でゆっくりと攪拌して混合溶液とし、後に使用するための溶液Ａを得る。
２）処方量のセバシン酸および１，２−プロパンジオールを別の容器に入れ、同様に８５℃〜９５℃でゆっくりと攪拌して混合溶液とし、後に使用するための溶液Ｂを得る。
３）上記のようにして得られた溶液Ａと溶液Ｂとを、後の使用のために８５℃〜９５℃の温度を維持しながら均一に混合、攪拌する。
４）処方量のジメチルスルホキシドおよび少量の無水エタノールを適切な容器に入れ、後に使用するために均一に攪拌、混合して溶液Ｃを得る。
５）溶液Ａと溶液Ｂの混合溶液を６０℃まで冷却し、溶液Ｃを注入して均一になるように十分に攪拌、混合し、室温まで冷却してから、１００重量％になるまで無水エタノールを補充して均一に攪拌する。
６）０．４５ｕｍのミリポアフィルターで濾過して、５ｍｌのアンプル瓶に充填して封止する。
７）１２１℃で３０分間滅菌する。

本処方において、無水エタノールを添加する目的は、溶液の総体積を調整するとともに、原料薬の含有量をさらに調整することにある。従って、ステップ４）に記載された少量の無水エタノールの使用量は処方量より若干少なければよい。

安全性比較実験
ＣＮ１０７３４１５Ｃの実施例２に示されたスルホンアミド系化合物の注射剤の調製処方およびプロセスに従って調製されたｐ−トルエンスルホンアミド注射液と、実施例１のサンプルとを比較し、マウスを実験用動物として、尾静脈に単回投与して、毒性比較実験を行った。結果は以下の通りである。

実施例１のサンプルでは動物死亡率が低下した。ＣＮ１０７３４１５Ｃの実施例２のサンプル群のＬＤ５０は、１１．３０ｍｇ／ｋｇ（９５％信頼区間は９．４７〜１３．１３ｍｇ／ｋｇ）であり、実施例１のサンプルのＬＤ５０は、１８．１０ｍｇ／ｋｇ（９５％信頼区間は１５．２〜２１．０ｍｇ／ｋｇ）である。本願のようにプロセスを改良した後、即ち原特許の製剤補助剤中のｐ−トルエンスルホン酸を２−エチル−１，３−ヘキサンジオールに置き換えた後の薬物のＬＤ５０は６０％（Ｐ＜０．０１）も大きくなり、薬物の毒性が顕著に低下した。

治療効果実験
本発明の実施例１について動物実験を行った。下記表２は、実施例１の筋肉内注射がマウスの肺癌の成長に与える影響を示す。

実験の結果から以下のことが分かる。
１．実施例１は、注射液が０．５ｍｌ、１．０ｍｌ、２．０ｍｌ、および２．０ｍｌ／ｋｇ／ｄ×ｌ０ｄの投与量である場合に、移植されたマウス肺癌において異なるレベルの抗腫瘍効果を有する。抗腫瘍効果は、投与量が増加するにつれて増大する。
２．溶媒が２．０ｍｌ／ｋｇ／ｄ×ｌ０ｄの投与量である場合、マウス肝癌およびマウス肉腫Ｓ−１８０に対して抗腫瘍効果を持たない。
３．本実験で選択された投与量の場合、実施例１は、マウス肺癌に対して顕著な抗腫瘍効果を有することが認められる。
４．実施例１の注射液は、マウス癌に対する治療指数が高い。

臨床試験研究
中心型肺癌による重度の気道閉塞患者に対する、実施例１の注射液（ＰＴＳ注射液）の腫瘍内局所注射による治療に関する単一群臨床試験研究
広州呼吸器疾患研究所と、中国衛生局により承認されたその他２１か所の臨床研究機関とが実施したＰＴＳ注射液に関する臨床研究では、以下の結論が得られた。

ＰＴＳ臨床試験で患者８９例の分析を行った。そのうちの脱落した１０例と、除外された７例（被験者が選択基準を満たさなかったか、または研究者が臨床プロトコールに違反したため）については安全性評価のみを行い、合計７２例が治療効果分析に進んだ。

年齢の範囲が２３〜７９歳の７２例の被験者のうち、男性は５９例、女性は１３例であった。肺癌のステージ別では、ＩＶ期が４６例、ＩＩＩｂ期が２２例、ＩＩＩａ期が４例であった。腫瘍の位置別では、気管が６例、左主気管支が２８例、右主気管支が３０例、右中間気管支が８例であった。

有効性の結果：
中心型肺癌被験者７２例への２〜４週間のＰＴＳ局所標的腫瘍内注射による治療の後、以下の結果が得られた。

主な治療効果指標：ＲＥＣＩＳＴ基準評価による管腔内標的病変に対する客観的奏功率：ＣＴ評価を採用。最終投与後７日以内および終了後３０日時点における管腔内標的病変に対する客観的奏功率は、それぞれ６８．０６％および４８．６１％であった。

主な治療効果指標：ＷＨＯ基準による管腔内標的病変に対する客観的奏功率：ＣＴ評価を採用。最終投与後７日以内および終了後３０日時点において、それぞれ７７．７８％および５４．１７％であった。

主な治療効果指標：管腔内の腫瘍閉塞の改善率は、ＣＴ評価を採用。最終投与後７日以内と終了後３０日時点において、それぞれ７０．４５％および７０．４７％であった。

臨床効果指標：ベースラインに比べ、肺機能指標ＦＥＶ１は、最終投与後７日以内に統計的に有意な改善を示し、改善率は３４．７２％であった。終了後３０日時点においては１８．０６％であった。発症した各肺区域の無気肺患者の総再膨張率は４４．４４％（２０／４５）であり、部位別に統計した再膨張率は、高い順に、右肺中葉５０．００％、左肺に固有の区域４３．７５％、左肺下葉４２．１１％、右肺下葉３８．４６％、左肺舌葉３５．００％、右肺上葉２５．００％であった。

全体的な治療効果を分析したところ、ＰＴＳの腫瘍内注射後に標的病変の明らかな縮小が見られ、客観的奏功率および管腔内の腫瘍閉塞の改善率はいずれも７０％近くに達し、臨床効果指標ＦＥＶ１の改善率は３０％を超え、肺再拡張率は４０％を超えていた。上記の指標は、ＰＴＳによる治療後に患者の標的病変が縮小し、気道閉塞状態が改善されたことを直接的に示すものであり、ＰＴＳによる治療後に、呼吸機能に顕著でかつ測定可能な程度の改善が見られ、ＱＯＬが向上したことを表している。

安全性の結果：
本研究における８９例の被験者の全治療期間中、全身化学療法の薬物で一般的に見られる骨髄抑制、消化管の反応などの副作用は見られなかった。

試験の全過程において、患者のバイタルサイン、身体状況、血液学的検査、血液生化学検査、免疫学的検査および心電図など多方面にわたるモニタリングを実施したところ、統計的に有意な変化はいずれにおいても見られなかった。

これは、ＰＴＳの腫瘍内局所注射による患者の全身への影響が極めて小さいということを示している。

注射剤

調製方法は、実施例１と同様である。

注射剤

調製方法は、実施例１と同様である。

注射剤

調製方法は、実施例１と同様である。

Claims (5)

1. スルホンアミド系医薬組成物の調製方法において、
   １）芳香族スルホンアミド系化合物、ポリエチレングリコール−４００および２−エチル−１，３−ヘキサンジオールを容器に入れ、８５℃〜９５℃でゆっくりと攪拌して混合溶液とし、後に使用するための溶液Ａを得るステップ、
   ２）セバシン酸および１，２−プロパンジオールを取って別の容器に入れ、同様に８５℃〜９５℃でゆっくりと攪拌して混合溶液とし、後に使用するための溶液Ｂを得るステップ、
   ３）上記のように得られた溶液Ａと溶液Ｂとを、後に使用するために８５℃〜９５℃の温度を維持しながら均一に混合、攪拌するステップ、
   ４）ジメチルスルホキシドおよび無水エタノールを容器に入れ、後に使用するために均一に攪拌、混合して溶液Ｃを得るステップ、
   ５）溶液Ａと溶液Ｂの混合溶液を６０℃まで冷却し、溶液Ｃを注入して均一になるように十分に攪拌、混合し、室温まで冷却してから、１００重量％になるまで無水エタノールを補充して均一に攪拌するステップ、
   ６）０．４５μｍのミリポアフィルターで濾過し、５ｍｌのアンプル瓶に充填して封止するステップ、
   ７）１２１℃で３０分間滅菌するステップ
   を含むことを特徴とする、調製方法。
2. 前記芳香族スルホンアミド系化合物は、下記式：
   

   

   で表される化合物から選ばれる１種類または任意の割合の２種類以上の化合物の組合せであり、
   式中、ＲはＨ、Ｃ_２Ｈ_５または下記基：
   

   

   であることを特徴とする、請求項１に記載の調製方法。
3. 前記芳香族スルホンアミド系化合物は、下記式：
   

   

   で表される化合物から選ばれることを特徴とする、請求項１に記載の調製方法。
4. 以下の原料を使用することを特徴とする、請求項１に記載の調製方法。
   

   
5. 前記医薬組成物は、注射製剤であることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の調製方法。