JP6483059B2 - ヒト白血病阻害因子(lif)を認識する抗体および望ましくない細胞増殖に関連する疾患の治療における抗lif抗体の使用 - Google Patents
ヒト白血病阻害因子(lif)を認識する抗体および望ましくない細胞増殖に関連する疾患の治療における抗lif抗体の使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6483059B2 JP6483059B2 JP2016131179A JP2016131179A JP6483059B2 JP 6483059 B2 JP6483059 B2 JP 6483059B2 JP 2016131179 A JP2016131179 A JP 2016131179A JP 2016131179 A JP2016131179 A JP 2016131179A JP 6483059 B2 JP6483059 B2 JP 6483059B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lif
- cancer
- antibody
- cell
- antibodies
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/244—Interleukins [IL]
- C07K16/248—IL-6
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/10—Organic compounds
- A61K49/14—Peptides, e.g. proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
- G01N33/57488—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving compounds identifable in body fluids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6863—Cytokines, i.e. immune system proteins modifying a biological response such as cell growth proliferation or differentiation, e.g. TNF, CNF, GM-CSF, lymphotoxin, MIF or their receptors
- G01N33/6869—Interleukin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/52—Assays involving cytokines
- G01N2333/54—Interleukins [IL]
- G01N2333/5415—Leukaemia inhibitory factor [LIF]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
Description
本発明者らはヒト白血病阻害因子(LIF)に対する新規のモノクローナル抗体を作製した。
・“Handbook of Therapeutic Antibodies”, by S. Duebel. Editor: Wiley-VCH, 2007, Vol: I to III (ISBN 978-3527314539);
・“Antibodies: Volume 1: Production and Purification” by G. Subramanian Ed., Editor: Springer, 1st Ed, 2004 (ISBN 978-0306482458);
・“Antibodies: Volume 2: Novel Technologies and Therapeutic Use”, by G. Subramanian Ed., Editor: Springer, first edition, 2004 (ISBN 978-0306483158);
・“Molecular Cloning: a Laboratory manual”, by J. Sambrook and D.W. Russel Eds., Publisher: Cold Spring Harbor Laboratory Press, third edition, 2001 (ISBN 978-0879695774)
特別な実施形態において、本発明は、全長ヒトLIFを認識するがアミノ酸1〜72に対応するLIF断片を認識しない、そして、より好ましくは、アミノ酸1〜127に対応するLIF断片を認識しない、そしてさらにより好ましくはアミノ酸1〜160に対応するLIF断片を認識しない抗体に関する。
本発明は、望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患うヒト患者における抗LIF抗体、好ましくは、本発明による抗LIF抗体の効果の基礎となる分子機構を明確にするものである。
タキサン化合物、例えば、パクリタキセル、ドセタキセルなど;トポイソメラーゼ阻害剤、例えば、エトポシド、テニポシド、ツリポシド、イリノテカンなど;ヌクレオチド類似体、例えば、アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、シタラビン、ドキシフルリジン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、メルカプトプリン、メトトレキサート、チオグアニン、フトラフルなど;白金に基づく薬剤、例えば、カルボプラチン、シスプラチン、オキサリプラチンなど;抗新生物剤、例えば、ビンクリスチン、ロイコボリン、ロムスチン、プロカルバジンなど;ホルモン調節剤、例えば、タモキシフェン、フィナステリド、5-α-リダクターゼ阻害剤など;ビンカアルカロイド、例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンなどが挙げられる。好適な化学療法剤は、The Merck Index in CD-ROM、第13版などの文献にさらに詳細に記載されている。
本発明者らは、LIFがそのJAK/STATカスケードにおける関与により、腫瘍幹細胞(癌幹細胞)の細胞増殖プロセスおよび増加を誘導することを見出した。さらに特に、本発明者らはCD44およびId1がグリオーマの新規のマーカーであるという確証を提供する。さらに、本発明者らは、Id1が、CD44の高レベルの発現を特徴とするGICが濃縮された細胞亜集団において優先的に発現されること、およびID1およびID3は抗体が介在するLIF阻害のサインに含まれる遺伝子であることを示した。それ故に、LIF、CD44、Id1、Id3またはこれらのいずれかの組み合わせは、望ましくない細胞増殖に関連する疾患を診断する診断方法に用いることができる。その診断方法は、LIFのもしくはその機能的に等価な変異体の、またはCD44のもしくはその機能的に等価な変異体の、またはId1のもしくはその機能的に等価な変異体の、またはId3のもしくはその機能的に等価な変異体のまたはこれらの分子のいずれかの組み合わせのレベルを決定することに基づく。好ましくは、診断方法はLIFのもしくはその機能的に等価な変異体のレベルを決定することに基づく。
前記望ましくない細胞増殖に関連する疾患をもつ被験者に投与した治療法の効果をモニタリングするための前記キットに関するものであり、ここで、もし試薬が対照サンプルと比較して前記遺伝子または前記タンパク質もしくはその機能的に等価な変異体の発現の増加を検出すれば、前記被験者は望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う可能性があるか、または望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患うさらに大きい素因を提示するか、または前記疾患のさらに高い重症度を示すか、または投与した治療法は有効でないことを示す。その好ましい実施形態において、キットはLIFのもしくはその機能的に等価な変異体の発現レベルを定量するための試薬を含むことにより特徴付けられる。
他の態様において、本発明は、望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う患者に対する特注の治療法を設計するin vitro方法であって、
(a)前記患者におけるLIFの発現レベルを定量するステップ、および
(b)前記発現レベルを対照レベルと比較するステップを含み、
ここで、もし前記患者におけるLIFの発現レベルが対照値より大きいと、LIFに対する抗体を前記患者に投与する前記方法に関するものである。
a)前記患者におけるLIFの発現レベルを定量するステップ、および
b)前記発現レベルを対照レベルと比較するステップを含み、
ここで、もし前記患者におけるLIFの発現レベルが対照値より大きいと、前記患者はLIFに対する抗体を用いる治療を受けることが選択される前記方法に関する。
他の態様において、本発明は、望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う患者の平均余命を予測する予後判定のin vitro方法に関する。この方法は、例えば、グリオーマの場合、対照患者より高いLIF発現レベルを示す患者の平均余命は短いという観察に基づく。本発明者らはCD44およびId1はGICのマーカーであるという確証を提供する。これらのマーカーはGBM患者に芳しくない予後判定を与える。望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う被験者における、LIFの高いレベルとId1およびCD44、それぞれの高いレベルとの間の上記の関係は、予後判定の信頼しうる新規マーカーを提供する。
a)前記患者におけるLIFまたはCD44またはId1またはId3の発現レベルを定量するステップ、および
b)前記発現レベルと対照レベルとを比較するステップ、に基づく方法であって、
もし前記患者におけるLIFまたはCD44またはId1またはId3の発現レベルが、同疾患の対照患者の値より高い場合、前記患者はおそらく対照群より短い平均余命を有するとする前記方法である。
a)前記疾患を患う全ての患者、
b)有意にアップレギュレーションされたLIFのレベルを示さない同じ疾患に罹患する全ての患者、
c)有意にダウンレギュレーションされたLIFのレベルを示す同じ疾患に罹患する全ての患者。
細胞株および一次細胞培養
PCTCおよびGBMニューロスフェアを先に記載の通り作製した(Bruna et al., Cancer Cell, 11:147-160, 2007; Gunther et al., Oncogene, 2007)。概要を述べると、腫瘍サンプルを外科切除後30分以内に処理した。細かく切り刻んだヒトGBMサンプルを、PBS中で2時間、37℃にて絶えず激しく撹拌しながら、200U/mlコラゲナーゼI(Sigma)および500U/ml DNase I(Sigma)を用いて消化した。単一細胞懸濁液を70μm細胞ストレーナー(BD Falcon(登録商標))を通して濾過し、PBSを用いて洗浄した。最後に、細胞を、10%FBS(PCTC培養用)を含むDMEMにまたはニューロスフェア培地(GBMニューロスフェア用)に再懸濁し次いで培養した。ニューロスフェア培地は、B27(GIBCO)、Lグルタミン(GIBCO)、ペニシリン/ストレプトマイシン、および成長因子(20ng/ml EGFおよび20ng/ml FGF-2[PeproTech])を補充した神経基礎培地(GIBCO)から成った。ヒトGBM標本はVall d’Hebron Hospitalから得たものである。
全てのマウス実験は欧州連合および国家の指導に一致した、Vall d’Hebron Research Instituteの研究所動物愛護委員会(the Institutional Animal Care Committee)ガイドラインの認可を得てそれに従って実施した。細胞を、9週齢のNOD/SCIDマウス(Charles River Laboratories)の右脳半球の線条体(ブレグマに関して1mm前方、1.8mm側方、および2.5mm実質内)中に定位的に接種した。マウスが神経症候を示すか、または有意な体重減少を示した時にはマウスを安楽死させた。腹腔内にガドリニウムジエチレントリアミン五酢酸を0.25mmolガドリニウム/kg体重の用量で注射したマウスにおいて、磁気共鳴画像化(MRI)を実施した。AVANCE 400システム(Bruker)と接続した9.4Tの垂直ボア磁石において、先に記載されたスピン-エコー系列(Penuelas et al., Cancer Cell, 15:315-327, 2009)を用いて、全脳からのT1W磁気共鳴画像を得た。製造業者(Bruker)から与えられたソフトウエアを用いて各画像における腫瘍組織に対応するピクセル数を測定することにより、腫瘍体積を定量した。
統計解析についてはスチューデントt検定を実施した。グラフ中のデータは平均±SDを表す。
TGFβ1(R&D)、TβRI阻害剤LY2109761(Eli Lilly)およびSB431542(Tocris)を示した濃度で用いた。p-Smad2、Smad2(細胞シグナル伝達);α-チューブリン(Sigma)およびId1(C20、Santa Cruz Biotechnology)に対する特異的抗体を免疫ブロットに用いた。レンチウイルス構築物を作製し先に記載の通り充填した(Zufferey et al., Nat. Biotechnol., 15:871-875, 1997)。ニューロスフェアを増殖培地で解離し、ウイルスを混合し、そしてプレーティングした。ポリブレン(Sigma)を8μg/mlの濃度で加えた。細胞をウイルスと共に12時間インキュベートし、PBSで洗浄し、そして先に記載された新鮮培地(Zufferey et al., Nat. Biotechnol., 15:871-875, 1997)でインキュベートした。
ニューロスフェアを解離し、個々の細胞を15分間、10μg/mlヒトIgGを含有する遮断溶液中でインキュベートし、次いで、両方共にFITCと結合した抗CD44抗体または対照IgG2bアイソタイプ(BD Pharmingen)とインキュベートした。細胞を20分間光から保護された氷上でインキュベートし、PBSで洗浄し、そしてヨウ化プロピジウム(Sigma)で染色して瀕死の細胞を識別した。細胞を次いでCD44-FITCで染色後、フローサイトメトリー(FACSCalibur; Beckton Dickinson)により分析するかまたはソートした(MoFlo; DAKO)。
ニューロスフェアを接種したマウスからの脳を切除し、pan-MHCクラスI特異的mAbHP-1F7(Santa Cruz Biotechnology)で、次に二次PE結合したmAb(Dako Cytomation)で染色し、その後、ヒトMHC-Iポジティブ細胞(MoFlo-DAKO)の細胞ソーティングを行った。得た細胞を洗浄し、直接、その後の実験に用いた。
同じ数の細胞を低い細胞密度(4細胞/μl)にて96ウエルプレートのウエル中に播種した。細胞を示した化合物で処理し、新しく形成したニューロスフェアの培養中の総数を7日後に数えた(Lee, et al. Cancer Cell, 13:69-80, 2008;Reynolds and Weiss, Dev. Biol. 175:1-13, 1996)。
100細胞/μlでプレーティングした、示したGBMニューロスフェアからの細胞を、示した化合物で7日間処理した。ニューロスフェアを次いで解離し、処理を行わずに再プレーティングし、さらに7日間インキュベートした。新しく形成されたニューロスフェアの総数を数えた。
定量リアルタイムPCR(qRT-PCR)をApplied Biosystemから得たTaqmanプローブを用いて、製造業者の推奨に従って実施した。反応はABI 7900 系列検出器(Perkin Elmer)において行い、そして結果をΔΔCt方法により計算した対照サンプルに対する倍数変化として表した。GAPDHを内部規準化対照として用いた。
組織マイクロアレイ作製については、3つの0.6mmコアを別々の領域から取得し、それぞれの1つを1mm間隔の格子の受給ブロック中に行列配置した。次の抗体をタンパク質検出のために用いた:抗Id1(BioCheck)、抗CD44(Ab-4、Neomarkers)、抗CD31(クローンJC70A、DAKO)。Id1の定量分析については、染色した腫瘍細胞のパーセントおよび染色の強度を、光学顕微鏡を用いて組織切片上の代表的な高パワーフィールド(x400)において評価した。その結果をH-スコアまたはポジティブ細胞のパーセントとして表した。
壊死巣から離れた代表的な腫瘍の領域を、凍結サンプルの10μmヘマオキシリネオシン染色切片上で特定した。腫瘍細胞をMicrodisector Leica LMD6000を用いて顕微解剖し、RNAeasy Microキット(Qiagen)を用いて製造業者の推奨により処理してRNAを得た。
GBMニューロスフェア細胞を、異なるID1プロモーターレポーター構築物とpRL-TKウミシイタケルシフェラーゼプラスミド(Promega)により、規準化対照としてリポフェクタミン2000(Invitrogen)を用いて一過的に形質転換した。
ヒトLIFに対する抗体を産生する目的でハイブリドーマ細胞株を当業者に周知の方法により作製した。これらのハイブリドーマ細胞株から1つの細胞株を選択し、2010年4月1日、Vall d’Hebron Institute of Oncologyによってthe Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbHに預けられた。これは受託番号DSM ACC3054が割り当てられた。従ってまた、前記細胞株が産生する抗体の均一集団を選択した。ハイブリドーマ細胞株DSM ACC3054(2010年4月1日、Vall d’Hebron Institute of Oncologyによってthe Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbHに預けられたもの)により産生される抗ヒトLIFモノクローナル抗体(α-LIF)の結合特異性を、その後、免疫沈降により決定した。この目的で、ヒトLIFタンパク質のC末端EGFPタグ付きバージョンを用いて形質転換しておいた293T細胞を溶解し、モノクローナル抗LIF抗体による免疫沈降で処理し、引き続いてプロテインA/Gを溶菌液に加えそして免疫沈降物を溶出した。LIF断片を、抗EGFP抗体を用いて免疫ブロットにより検出した。この分析は、アミノ酸160〜202から成るヒトLIFタンパク質のC末端ドメインが存在する限り、前記抗体がLIFとその変異体を認識することを示した。EGFPタグ付き全長LIFはモノクローナル抗体により認識されたが、アミノ酸1〜72、1〜127または1〜160に対応するEGFPタグ付きLIFは認識されなかった(図1B)。従って、アミノ酸160〜202から成るヒトLIFタンパク質のC末端ドメインが、抗LIF抗体による認識に必要である(図1C)。
2010年4月1日、Vall d’Hebron Institute of Oncologyによってthe Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbHに預けられたハイブリドーマ細胞株が産生するモノクローナル抗LIF抗体のLIF下流を遮断する効果を試験するために、U373細胞を、ヒト組換えLIFの存在または非存在のもとで、示したモノクローナル抗体の存在または非存在のもとでまたは対照とアイソタイプが整合したIgGの存在のもとで処理した。引き続いてのウェスタンブロットによるホスホ-Stat3レベルの定量は、LIF介在性誘導がモノクローナル抗LIF抗体の投与により効果的に遮断されることを示した(図2A)。
CD44はある特定の腫瘍のCICにおいて高度に発現されることが記載されている(Visvader and Lindeman, Nat. Rev. Cancer, 8:755-768, 2008)。一致して、本発明者らはGBMニューロスフェアにおいて異なるレベルのCD44を発現する2つの別の集団が存在することを観察した(図3A)。しかし、CD44highコンパートメントはいままでグリオーマにおいて徹底的に研究されていない。患者ニューロスフェア由来の細胞においてCD44の発現がID1の発現と相関があるかどうかを試験するために、4名の異なる患者からのニューロスフェアのCD44high集団を、「材料と方法」の項で記載した細胞染色時のフローサイトメトリーによりソートした。次いで、ID1発現レベルをCD44highおよびtheCD44low集団においてそれぞれ測定した。興味深いことに、ID1タンパク質とRNAがCD44highにおいてCD44lowコンパートメントにおけるよりはるかに高いレベルで検出された(図3Bおよび3C)。興味深いことに、Id3もCD44high集団において高レベルで存在した、しかし、これはId2(転写因子のIdファミリーの他のメンバー)についてはそうでなかった(図 3B)。従って、CD44の高レベルはID1およびId3の高レベルと相関がある。
本発明者らは、血清による処理を介する患者由来のニューロスフェアの分化を誘導すると、CD44highコンパートメントが消滅することを観察した(図4A)。次に、CD44highとCD44low細胞をソートし、低密度でプレーティングした。CD44high細胞はCD44lowコンパートメントより多いニューロスフェアを作製し(図4B)、CD44high細胞がCD44low細胞より高いニューロスフェア形成能力を有することを示した。次に、CD44lowコンパートメントと比較したCD44highの腫瘍発症能力を分析した。腫瘍細胞をCD44の発現に基づいてソートし、本発明者らは、減少する量の細胞のin vivo制限希釈移植をNOD-SCIDマウスの右線条体において実施した。腫瘍進行を磁気共鳴イメージング(MRI)によってモニターした。高いCD44のレベルを発現する細胞はCD44を低く発現する細胞よりはるかに腫瘍化した。100.000 CD44low細胞を接種した7マウスのうちのわずか1マウスが腫瘍を発症したが、同じ数のCD44high細胞を接種した9マウスのうち9マウスが腫瘍を生じた(図4Cおよび4D)。さらに、10.000または1.000 CD44high細胞を接種したマウスは腫瘍を生じたが、同じ数のCD44lowを接種したマウスは決して腫瘍を生じなかった。類似した結果は他の患者、GMB2からの細胞によって得られた(図4D)。CD44highコンパートメントにより生じた腫瘍は、同じ細胞の不均一性を含む患者の腫瘍の組織病理学的特徴を再現した(図 4E)。例えば、マウスで生じた腫瘍は、患者の腫瘍と同じパーセント(ほぼ70%)のSox2ポジティブおよびネガティブ細胞を含有した(図4E)。全ての結果はCD44highコンパートメントが、他の腫瘍型に示されたように、GICについて濃縮されていることを示した。
GBMニューロスフェアを解離し、細胞株DSM ACC3054からの抗LIFモノクローナル抗体またはアイソタイプに整合した対照IgGの存在のもとで7日間、EGFおよびFGFの存在(A)または非存在(B)のもとで培養した。注目すべきは、抗LIF抗体で処理されたニューロスフェアはCD44highコンパートメントが減少した。従ってTGFβはCD44highコンパートメント(高レベルのId1を発現しかつGICの濃縮されているコンパートメント)を調節する。
GBMニューロスフェアを解離しそして抗LIFモノクローナル抗体またはアイソタイプ対照IgGの存在のもとで7日間、EGFおよびFGFの非存在で培養し、そして示した遺伝子のmRNAレベルをqRT-PCRにより分析した。アイソタイプ整合した対照IgGと比較して、Id1 mRNAレベルならびにCD44 mRNAレベルは、患者由来のGBMニューロスフェアの抗LIF抗体を施用すると有意に低下した。
モノクローナル抗LIF抗体の施用に応答した腫瘍中のGIC集団の減少は腫瘍再発に影響を及ぼすかを試験するために、本発明者らは最初にGBM1ニューロスフェアの接種を介してマウスの腫瘍を生じさせた。細胞の接種1か月後に、マウスに腫瘍が生じていることをMRIにより検出した。その時点で、マウスをモノクローナル抗LIF抗体またはアイソタイプ整合したIgGで10日間処理しそして犠牲にした。ヒト腫瘍細胞を、マウス脳からヒトMHC-Iポジティブ細胞のソーティングを介して単離した(図7A)。
全グリオーマ患者の一サブセットにおいて、LIFレベルは2倍以上アップレギュレーションされている。ある設定期間にわたって、これらの患者は対照患者と比較して有意に低い生存の確率を有する。例えば、1000日後の生存確率は全グリオーマ患者と比較しておよそ50%に低下し、2倍以下しかアップレギュレーションしてないLIFレベルをもつグリオーマ患者と比較しておよそ35%に低下する(図8)。データは、REpository for Molecular BRAin Neoplasia DaTa (REMBRANDT) program form the National Cancer Instituteから得たものである。
以下は本発明の好ましい実施形態である。しかしながら、本発明がこれらの好ましい実施形態に限定されると理解すべきではない。
1. 全長ヒトLIFを認識するが、アミノ酸1〜72に対応するLIF断片を認識しない、そして、より好ましくは、アミノ酸1〜127に対応するLIF断片を認識しない、そしてさらにより好ましくはアミノ酸1〜160に対応するLIF断片を認識しないモノクローナル抗体またはその断片。
2. 前記抗体がヒトLIFのアミノ酸160〜202に対応する領域に含まれるヒトLIFのエピトープを認識する、上記実施形態1のモノクローナル抗体。
3. 前記抗体が次の領域:ヒトLIFのアミノ酸160〜180に対応する領域、アミノ酸170〜190に対応する領域、アミノ酸180〜200に対応する領域、アミノ酸182〜202に対応する領域から選択される領域に含まれるエピトープを認識する、上記実施形態1のモノクローナル抗体。
4. 前記抗体はヒトLIFとのその結合が2010年4月1日にVall d'Hebron Institute of Oncologyによってthe Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbHに預けられたハイブリドーマにより産生されるモノクローナル抗体により競合阻害される、上記実施形態1〜3のいずれかのモノクローナル抗体。
5. IgG1アイソタイプの、上記実施形態1〜4のいずれかのモノクローナル抗体。
6. 2010年4月1日にVall d'Hebron Institute of Oncologyによってthe Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbHに預けられたハイブリドーマ細胞株DSM ACC3054により産生される、上記実施形態1〜5のいずれかのモノクローナル抗体。
7. 2010年4月1日にVall d'Hebron Institute of Oncologyによってthe Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbHに預けられたハイブリドーマ細胞株。8. 上記実施形態1〜6のいずれかのモノクローナル抗体またはその断片を含む、ヒトLIFの測定に用いられる免疫分析試薬。
9. 腫瘍幹細胞の自己再生の阻害を介して作用する、上記実施形態1〜6のいずれかのモノクローナル抗体または断片。
10. 望ましくない細胞増殖に関連する疾患を治療するための、ヒトLIFに対する抗体またはその断片。
11. 望ましくない細胞増殖に関連する疾患を治療するための、上記実施形態1〜6または上記実施形態9のいずれかの抗体または断片。
12. 上記実施形態1〜6または上記実施形態9〜11のいずれかの抗体またはその断片の治療上有効量と製薬上許容しうる担体を一緒に含む医薬組成物。
13. 被験者における望ましくない細胞増殖に関連する疾患を診断する、または前記望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う被験者の素因を確認する、または前記被験者の望ましくない細胞増殖に関連する疾患の段階もしくは重症度を決定する、または前記望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う被験者に投与した治療法の効果をモニタリングするin vitro方法であって、前記被験者からの生体サンプル中の、LIFのまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、CD44のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id1のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id3のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいはこれら分子のいずれかの組み合わせの、発現レベルを定量するステップを含み、ここで、対照サンプル中のLIFをコードする遺伝子のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、CD44のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id1のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id3のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいはこれら分子のいずれかの組み合わせの、発現と比較した、前記LIFをコードする遺伝子のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、CD44のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id1のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id3のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいはこれら分子のいずれかの組み合わせの、発現の増加は、望ましくない細胞増殖に関連する疾患の、または前記望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う被験者のより大きい素因の、または前記被験者に投与した治療法に対する非応答を示すものである前記in vitro方法。
14. LIFのもしくはその機能的に等価な変異体の、あるいは、CD44のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id1のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id3のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいはこれら分子のいずれかの組み合わせの、発現レベルを定量するための試薬を含むキットの使用であって、被験者における望ましくない細胞増殖に関連する疾患を診断するための、または、前記望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う被験者の素因を確認するための、または前記被験者の望ましくない細胞増殖に関連する疾患の段階もしくは重症度を決定するための、または前記望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う被験者に投与した治療法の効果をモニタリングするための前記キットの使用であり、ここで、もし試薬が対照サンプルと比較して前記遺伝子または前記タンパク質もしくはその機能的に等価な変異体の発現の増加を検出すれば、前記被験者は望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う可能性があるか、または望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患うさらに大きい素因を提示するか、または前記疾患のさらに高い重症度を示すか、または投与した治療法は有効でないことを示す前記キットの使用。
15. LIFレベルの増加に関連する疾患を患う患者に対する特注の治療法を設計するためのin vitro方法であって、
(a)前記患者におけるLIFの発現レベルを定量するステップ、および
(b)前記発現レベルを対照レベルと比較するステップを含み、
ここで、前記患者におけるLIFの発現レベルが対照値より大きい場合、LIFに対する抗体を前記患者に投与する前記方法。
16. LIFに対する抗体を用いて治療する、望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う患者を選択するin vitro方法であって、
a)前記患者におけるLIFの発現レベルを定量するステップ、および
b)前記発現レベルを対照レベルと比較するステップを含み、
ここで、前記患者におけるLIFの発現レベルが対照値より大きい場合、前記患者を上記実施形態1〜6または上記実施形態9〜12の抗体またはその断片を用いる治療を受けるものとして選択する前記方法。
17. 望ましくない細胞増殖に関連する疾患を患う被験者の平均余命のまたは生存確率の予後判定をするin vitro方法であって、前記被験者由来の生体サンプル中のLIFまたはその機能的等価体の発現レベルを定量するステップを含み、ここで、対照サンプル中のLIFまたはその機能的等価体の発現の増加と比較して、LIFまたはその機能的等価体の発現の増加は平均余命が短いことを示す前記in vitro方法。
18. 望ましくない細胞増殖を示す疾患が高レベルのLIFを提示することにより特徴付けられる、上記実施形態10〜14のいずれかの抗体もしくはその断片または医薬組成物または方法またはキット。
19. 望ましくない細胞増殖を示す疾患が高レベルのCD44およびId1を発現する細胞集団により特徴付けられる、上記実施形態10〜17のいずれか一項に記載の抗体もしくはその断片または医薬組成物または方法またはキット。
20. 望ましくない細胞増殖を示す疾患が癌である、上記実施形態10〜19のいずれかの抗体もしくはその断片または医薬組成物または方法またはキット。
21. 癌が次の癌:グリオーマ、プレB細胞急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、肺腺癌、前立腺腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、乳管癌または乳癌の一つである、上記実施形態18〜21のいずれかの抗体もしくはその断片または医薬組成物または方法またはキット。
22. 前記グリオーマがグレードIVグリオーマである、上記実施形態21の抗体もしくはその断片または医薬組成物または方法またはキット。
23. LIFのレベルの定量をウェスタンブロット、免疫組織化学またはELISAを用いて実施する、上記実施形態13〜22のいずれかの方法またはキット。
24. LIFの発現レベルを測定する方法またはキットが上記実施形態1〜6または上記実施形態9のモノクローナル抗体またはその断片を含む、上記実施形態13〜23のいずれかの方法またはキット。
25. 前記抗体またはその断片が高レベルのCD44およびId1により特徴付けられる細胞集団を減少させることができる、上記実施形態1〜6または上記実施形態9〜12または上記実施形態20〜22のいずれかの抗体もしくはその断片または医薬組成物。
26. 前記抗体が腫瘍幹細胞の自己再生の阻害を介して作用する、上記実施形態1〜6、上記実施形態9〜12または上記実施形態20〜22のいずれかの抗体もしくはその断片または医薬組成物。
27. “LIFのまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、CD44のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id1のまたはその機能的に等価な変異体の、あるいは、Id3のまたはその機能的に等価な変異体の”なる用語が、“LIFのまたはその機能的に等価な変異体の”に限定される、上記実施形態の抗体もしくはその断片または医薬組成物またはキットまたは方法。
Claims (11)
- 2010年4月1日にVall d'Hebron Institute of Oncologyによってthe Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbHに預けられたハイブリドーマ細胞株DSM ACC3054により産生されるモノクローナル抗体を含む、癌を治療するための組成物。
- 前記抗体が腫瘍幹細胞の自己再生の阻害を介して作用する、請求項1に記載の組成物。
- 前記癌が高レベルのLIFを提示することにより特徴付けられる、請求項1または2に記載の組成物。
- 前記癌が高レベルのCD44およびId1を発現する細胞集団により特徴付けられる、請求項1〜3のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記抗体が高レベルのCD44を特徴とする細胞集団を減少させることができる、請求項1〜4のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記抗体がIgG1アイソタイプのものである、請求項1〜5のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記抗体がヒト化抗体である、請求項1〜6のいずれか一項に記載の組成物。
- 製薬上許容しうる賦形剤を含む、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組成物。
- 癌が次の癌:グリオーマ、プレB細胞急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、肺腺癌、前立腺腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、乳管癌または乳癌の一つである、請求項1〜8のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記癌がグリオーマである、請求項9に記載の組成物。
- 前記グリオーマがグレードIVグリオーマである、請求項10に記載の組成物。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP10380049A EP2371860A1 (en) | 2010-04-05 | 2010-04-05 | Antibody recognising human leukemia inhibitory factor (LIF) and use of anti-LIF antibodies in the treatment of diseases associated with unwanted cell proliferation |
EP10380049.6 | 2010-04-05 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013503084A Division JP6289906B2 (ja) | 2010-04-05 | 2011-04-05 | ヒト白血病阻害因子(lif)を認識する抗体および望ましくない細胞増殖に関連する疾患の治療における抗lif抗体の使用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017019775A JP2017019775A (ja) | 2017-01-26 |
JP6483059B2 true JP6483059B2 (ja) | 2019-03-13 |
Family
ID=42338260
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013503084A Active JP6289906B2 (ja) | 2010-04-05 | 2011-04-05 | ヒト白血病阻害因子(lif)を認識する抗体および望ましくない細胞増殖に関連する疾患の治療における抗lif抗体の使用 |
JP2016131179A Active JP6483059B2 (ja) | 2010-04-05 | 2016-07-01 | ヒト白血病阻害因子(lif)を認識する抗体および望ましくない細胞増殖に関連する疾患の治療における抗lif抗体の使用 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013503084A Active JP6289906B2 (ja) | 2010-04-05 | 2011-04-05 | ヒト白血病阻害因子(lif)を認識する抗体および望ましくない細胞増殖に関連する疾患の治療における抗lif抗体の使用 |
Country Status (25)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US8926956B2 (ja) |
EP (3) | EP2371860A1 (ja) |
JP (2) | JP6289906B2 (ja) |
KR (5) | KR20170125137A (ja) |
CN (2) | CN103797031A (ja) |
AU (1) | AU2011237922B2 (ja) |
BR (1) | BR112012025517B1 (ja) |
CA (1) | CA2797257A1 (ja) |
CY (1) | CY1119451T1 (ja) |
DK (1) | DK2556091T3 (ja) |
EA (2) | EA036698B9 (ja) |
ES (1) | ES2608699T3 (ja) |
HK (3) | HK1180702A1 (ja) |
HR (1) | HRP20161736T1 (ja) |
HU (1) | HUE030578T2 (ja) |
IL (3) | IL222270A (ja) |
LT (1) | LT2556091T (ja) |
MX (2) | MX2012011636A (ja) |
PL (1) | PL2556091T3 (ja) |
PT (1) | PT2556091T (ja) |
RS (1) | RS55539B1 (ja) |
SG (1) | SG184429A1 (ja) |
SI (1) | SI2556091T1 (ja) |
SM (1) | SMT201600468T1 (ja) |
WO (1) | WO2011124566A1 (ja) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NZ598031A (en) * | 2005-07-19 | 2013-11-29 | Stemgen S P A | Inhibition of the tumorigenic potential of tumor stem cells by lif and bmps |
ES2363358B1 (es) * | 2009-04-03 | 2012-06-21 | FUNDACIÓ INSTITUT DE RECERCA HOSPITAL UNIVERSITARI VALL D'HEBRON (Titular al | Agentes terapéuticos para el tratamiento de enfermedades asociadas con una proliferación celular indeseable. |
EP2371860A1 (en) * | 2010-04-05 | 2011-10-05 | Fundació Privada Institut d'Investigació Oncològica de Vall d'Hebron | Antibody recognising human leukemia inhibitory factor (LIF) and use of anti-LIF antibodies in the treatment of diseases associated with unwanted cell proliferation |
WO2015040243A2 (en) * | 2013-09-23 | 2015-03-26 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and compositions for targeting tumor microenvironment and for preventing metastasis |
TWI486172B (zh) * | 2013-11-08 | 2015-06-01 | Univ Chang Gung | 鼻咽癌治療的醫藥 |
CN106687134A (zh) * | 2014-09-10 | 2017-05-17 | 加利福尼亚大学董事会 | 通过抗hLIF抗体靶向K‑RAS介导的信号转导通路和恶性肿瘤 |
WO2016154203A1 (en) | 2015-03-23 | 2016-09-29 | Evestra, Inc. | Novel cytotoxic agents that preferentially target leukemia inhibitory factor (lif) for the treatment of malignancies and as new contraceptive agents |
EP3173483A1 (en) * | 2015-11-27 | 2017-05-31 | Fundació Privada Institut d'Investigació Oncològica de Vall-Hebron | Agents for the treatment of diseases associated with undesired cell proliferation |
EP3555132B1 (en) * | 2016-12-19 | 2023-11-15 | Medimmune Limited | Antibodies against lif and uses thereof |
WO2018115960A1 (en) * | 2016-12-19 | 2018-06-28 | Mosaic Biomedicals, S.L. | Antibodies against lif and uses thereof |
WO2018167283A1 (en) | 2017-03-17 | 2018-09-20 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods for the diagnosis and treatment of pancreatic ductal adenocarcinoma associated neural remodeling |
SG11202009966SA (en) * | 2018-04-12 | 2020-11-27 | Medimmune Ltd | Combination of lif inhibitors and pd-1 axis inhibitors for use in treating cancer |
SG11202011170YA (en) * | 2018-05-14 | 2020-12-30 | Medimmune Ltd | Antibodies against lif and dosage forms thereof |
KR20210024007A (ko) * | 2018-06-18 | 2021-03-04 | 메디뮨 리미티드 | 암이 있는 개체에서 항-lif 항체 치료에 대한 반응을 개선하기 위한 방법 |
CN112955178A (zh) * | 2018-06-18 | 2021-06-11 | 免疫医疗有限公司 | 用于治疗癌症的、lif抑制剂和基于铂的抗肿瘤剂的组合 |
WO2021057991A1 (zh) * | 2019-09-29 | 2021-04-01 | 北京加科思新药研发有限公司 | 对lif具有特异性的结合分子及其用途 |
CN111020030A (zh) * | 2019-12-03 | 2020-04-17 | 中山大学 | 一种骨肉瘤干细胞标志物及其应用、试剂盒 |
CN111378036B (zh) * | 2020-01-09 | 2021-08-10 | 北京浩古元方生物医药科技有限公司 | 一种抗人白血病抑制因子单克隆抗体的制备方法及其应用 |
CN112294812B (zh) * | 2020-11-18 | 2022-08-16 | 新乡医学院 | 一种小分子抑制剂在制备抗肿瘤药物方面的应用 |
CN114672460B (zh) * | 2021-12-21 | 2023-06-23 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种靶向cd44的异质型cic细胞模型的制备方法及应用 |
Family Cites Families (27)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
DE3883899T3 (de) | 1987-03-18 | 1999-04-22 | Sb2, Inc., Danville, Calif. | Geänderte antikörper. |
GB9004890D0 (en) | 1990-03-05 | 1990-05-02 | Heath John K | Leukaemia inhibitory factor |
AU675916B2 (en) | 1991-06-14 | 1997-02-27 | Genentech Inc. | Method for making humanized antibodies |
JPH05304986A (ja) | 1992-04-28 | 1993-11-19 | Tosoh Corp | gp130蛋白質に対するモノクロ−ナル抗体 |
WO1993023556A1 (en) | 1992-05-08 | 1993-11-25 | Genentech, Inc. | Antibodies to leukemia inhibitory factor |
AU4241693A (en) | 1992-05-15 | 1993-12-13 | Re/Map Incorporated | Electromagnetic shielding for a liquid conditioning device |
WO1994029351A2 (en) | 1993-06-16 | 1994-12-22 | Celltech Limited | Antibodies |
MX9707939A (es) * | 1995-04-24 | 1997-12-31 | Genentech Inc | Uso de antagonistas del factor inhibidor de la leucemia y la endotelina. |
US20050147609A1 (en) | 1998-05-15 | 2005-07-07 | Genentech, Inc. | Use of anti-IL-17 antibody for the treatment of cartilage damaged by osteoarthritis |
PL209786B1 (pl) | 1999-01-15 | 2011-10-31 | Genentech Inc | Przeciwciało zawierające wariant regionu Fc ludzkiej IgG1, przeciwciało wiążące czynnik wzrostu śródbłonka naczyń oraz immunoadhezyna |
US7084257B2 (en) | 2001-10-05 | 2006-08-01 | Amgen Inc. | Fully human antibody Fab fragments with human interferon-gamma neutralizing activity |
EP1497445A2 (en) | 2002-04-01 | 2005-01-19 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that specifically bind to gmad |
US20060127902A1 (en) * | 2002-08-15 | 2006-06-15 | Genzyme Corporation | Brain endothelial cell expression patterns |
US7361740B2 (en) | 2002-10-15 | 2008-04-22 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
WO2005030803A1 (en) | 2003-09-29 | 2005-04-07 | The Walter And Eliza Hall Institute Of Medical Research | Therapeutic molecules |
JPWO2005116204A1 (ja) | 2004-05-11 | 2008-06-19 | 株式会社アルファジェン | Rna干渉を生じさせるポリヌクレオチド、および、これを用いた遺伝子発現抑制方法 |
EP1612558A1 (en) | 2004-06-30 | 2006-01-04 | Academisch Ziekenhuis Leiden | Method for detecting gluten |
US8768629B2 (en) | 2009-02-11 | 2014-07-01 | Caris Mpi, Inc. | Molecular profiling of tumors |
US20110135645A1 (en) | 2006-10-04 | 2011-06-09 | The Scripps Research Institute | Human antibodies neutralizing human metapneumovirus |
CN101440128A (zh) * | 2007-11-21 | 2009-05-27 | 中国人民解放军第二军医大学 | 人脑胶质瘤中差异表达的蛋白及其用途 |
WO2010054499A1 (en) * | 2008-11-11 | 2010-05-20 | Telefonaktiebolaget L M Ericsson (Publ) | A dpd system with multiple transmitter paths |
ES2363358B1 (es) | 2009-04-03 | 2012-06-21 | FUNDACIÓ INSTITUT DE RECERCA HOSPITAL UNIVERSITARI VALL D'HEBRON (Titular al | Agentes terapéuticos para el tratamiento de enfermedades asociadas con una proliferación celular indeseable. |
WO2011057144A2 (en) | 2009-11-06 | 2011-05-12 | La Jolla Institute For Allergy And Immunology | Methods for modulating lif activity, treating immune disorders and diseases, and stimulatings immune responses |
CN102167742B (zh) | 2010-02-25 | 2014-05-14 | 上海百迈博制药有限公司 | 一种全人源抗her2单克隆抗体、其制备方法及用途 |
EP2371860A1 (en) * | 2010-04-05 | 2011-10-05 | Fundació Privada Institut d'Investigació Oncològica de Vall d'Hebron | Antibody recognising human leukemia inhibitory factor (LIF) and use of anti-LIF antibodies in the treatment of diseases associated with unwanted cell proliferation |
TWI486172B (zh) | 2013-11-08 | 2015-06-01 | Univ Chang Gung | 鼻咽癌治療的醫藥 |
-
2010
- 2010-04-05 EP EP10380049A patent/EP2371860A1/en not_active Withdrawn
-
2011
- 2011-04-05 WO PCT/EP2011/055253 patent/WO2011124566A1/en active Application Filing
- 2011-04-05 BR BR112012025517-7A patent/BR112012025517B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2011-04-05 KR KR1020177031786A patent/KR20170125137A/ko not_active Application Discontinuation
- 2011-04-05 KR KR1020197015171A patent/KR20190061098A/ko not_active Application Discontinuation
- 2011-04-05 CA CA2797257A patent/CA2797257A1/en not_active Abandoned
- 2011-04-05 CN CN201180027552.6A patent/CN103797031A/zh active Pending
- 2011-04-05 EP EP11715676.0A patent/EP2556091B1/en active Active
- 2011-04-05 HU HUE11715676A patent/HUE030578T2/en unknown
- 2011-04-05 SI SI201131028A patent/SI2556091T1/sl unknown
- 2011-04-05 MX MX2012011636A patent/MX2012011636A/es active IP Right Grant
- 2011-04-05 ES ES11715676.0T patent/ES2608699T3/es active Active
- 2011-04-05 PT PT117156760T patent/PT2556091T/pt unknown
- 2011-04-05 JP JP2013503084A patent/JP6289906B2/ja active Active
- 2011-04-05 KR KR1020187018882A patent/KR20180078352A/ko active Application Filing
- 2011-04-05 CN CN201810679717.1A patent/CN109320609A/zh active Pending
- 2011-04-05 SG SG2012073557A patent/SG184429A1/en unknown
- 2011-04-05 EA EA201201373A patent/EA036698B9/ru not_active IP Right Cessation
- 2011-04-05 KR KR1020127028860A patent/KR20130121679A/ko not_active Application Discontinuation
- 2011-04-05 DK DK11715676.0T patent/DK2556091T3/en active
- 2011-04-05 LT LTEP11715676.0T patent/LT2556091T/lt unknown
- 2011-04-05 MX MX2015008974A patent/MX365054B/es unknown
- 2011-04-05 EA EA202092276A patent/EA202092276A3/ru unknown
- 2011-04-05 KR KR1020207028482A patent/KR102294207B1/ko active IP Right Grant
- 2011-04-05 US US13/261,464 patent/US8926956B2/en active Active
- 2011-04-05 EP EP16154907.6A patent/EP3045473A1/en not_active Withdrawn
- 2011-04-05 AU AU2011237922A patent/AU2011237922B2/en not_active Ceased
- 2011-04-05 RS RS20161123A patent/RS55539B1/sr unknown
- 2011-04-05 PL PL11715676T patent/PL2556091T3/pl unknown
-
2012
- 2012-10-09 IL IL222270A patent/IL222270A/en active IP Right Grant
-
2013
- 2013-07-10 HK HK13108092.5A patent/HK1180702A1/zh not_active IP Right Cessation
- 2013-07-10 HK HK16111721.5A patent/HK1223384A1/zh unknown
-
2014
- 2014-11-04 HK HK14111011.6A patent/HK1208469A1/xx unknown
-
2015
- 2015-01-05 US US14/589,033 patent/US20150139989A1/en not_active Abandoned
- 2015-10-07 IL IL241952A patent/IL241952A/en active IP Right Grant
-
2016
- 2016-07-01 JP JP2016131179A patent/JP6483059B2/ja active Active
- 2016-12-16 HR HRP20161736TT patent/HRP20161736T1/hr unknown
- 2016-12-22 SM SM201600468T patent/SMT201600468T1/it unknown
- 2016-12-22 CY CY20161101328T patent/CY1119451T1/el unknown
-
2017
- 2017-09-25 IL IL254664A patent/IL254664B/en unknown
-
2018
- 2018-05-14 US US15/978,362 patent/US10968273B2/en active Active
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6483059B2 (ja) | ヒト白血病阻害因子(lif)を認識する抗体および望ましくない細胞増殖に関連する疾患の治療における抗lif抗体の使用 | |
US20220323478A1 (en) | Agents for the treatment of diseases associated with undesired cell proliferation | |
KR20190093691A (ko) | 바람직하지 않은 세포 증식과 관련된 질환의 치료를 위한 치료제 | |
WO2012133914A1 (ja) | Ranklアンタゴニストを含む癌免疫増強剤 | |
KR20240137027A (ko) | 항인간 cxcl1 항체 | |
JP2011519819A (ja) | 転移を処置するためのpm−2抗体および方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170627 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170915 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20171226 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A132 Effective date: 20180605 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20180821 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181205 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190115 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190213 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6483059 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |