JP6347468B2 - 組換えフォンウィルブランド因子の投与による凝固疾患の治療 - Google Patents
組換えフォンウィルブランド因子の投与による凝固疾患の治療 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6347468B2 JP6347468B2 JP2014514934A JP2014514934A JP6347468B2 JP 6347468 B2 JP6347468 B2 JP 6347468B2 JP 2014514934 A JP2014514934 A JP 2014514934A JP 2014514934 A JP2014514934 A JP 2014514934A JP 6347468 B2 JP6347468 B2 JP 6347468B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- rvwf
- fviii
- composition
- subject
- administered
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 title claims description 373
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 title claims description 337
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 title claims description 315
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 48
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title description 19
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title description 16
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 title description 11
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 title description 9
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims description 862
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims description 862
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 claims description 848
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 617
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 347
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 305
- 208000027276 Von Willebrand disease Diseases 0.000 claims description 123
- 208000012137 von Willebrand disease (hereditary or acquired) Diseases 0.000 claims description 123
- 208000010287 Type 3 von Willebrand Disease Diseases 0.000 claims description 86
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 claims description 51
- 230000002947 procoagulating effect Effects 0.000 claims description 49
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 claims description 40
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 claims description 38
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 37
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 27
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 claims description 26
- 102000004961 Furin Human genes 0.000 claims description 21
- 108090001126 Furin Proteins 0.000 claims description 21
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 18
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 claims description 12
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 claims description 9
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 claims description 5
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims 27
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 100
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 100
- 208000015316 von Willebrand disease 3 Diseases 0.000 description 85
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 53
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 31
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 31
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 27
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 25
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 19
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 17
- 102000043853 ADAMTS13 Human genes 0.000 description 16
- 108091005670 ADAMTS13 Proteins 0.000 description 16
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 16
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 15
- -1 means that the cell Chemical class 0.000 description 15
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 12
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 12
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 10
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 10
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 10
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 9
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 9
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 9
- 229940031675 advate Drugs 0.000 description 9
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 9
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 9
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 9
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 9
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 9
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 9
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 8
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 8
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 7
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108010074864 Factor XI Proteins 0.000 description 6
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 6
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 6
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 5
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 5
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 5
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 208000009429 hemophilia B Diseases 0.000 description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 4
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 4
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 4
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 4
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 208000011664 congenital factor XI deficiency Diseases 0.000 description 4
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 201000007219 factor XI deficiency Diseases 0.000 description 4
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 4
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 208000026552 Severe hemophilia A Diseases 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 208000035474 group of disease Diseases 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 206010061623 Adverse drug reaction Diseases 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- 108010000437 Deamino Arginine Vasopressin Proteins 0.000 description 2
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GKWTZACONBQTNK-IVIZKJKWSA-N N-benzyl-7H-purin-6-amine (1R,2R,5R,8R,9S,10R,12S)-12-hydroxy-11-methyl-6-methylidene-16-oxo-15-oxapentacyclo[9.3.2.15,8.01,10.02,8]heptadecane-9-carboxylic acid (1R,2R,5R,8R,9S,10R,12S)-12-hydroxy-11-methyl-6-methylidene-16-oxo-15-oxapentacyclo[9.3.2.15,8.01,10.02,8]heptadec-13-ene-9-carboxylic acid Chemical compound C(Nc1ncnc2nc[nH]c12)c1ccccc1.CC12[C@H]3[C@H](C(O)=O)[C@@]45C[C@@H](CC[C@H]4[C@@]3(CC[C@@H]1O)OC2=O)C(=C)C5.CC12[C@H]3[C@H](C(O)=O)[C@@]45C[C@@H](CC[C@H]4[C@]3(OC1=O)C=C[C@@H]2O)C(=C)C5 GKWTZACONBQTNK-IVIZKJKWSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 108010081391 Ristocetin Proteins 0.000 description 2
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 2
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 208000019291 X-linked disease Diseases 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 108010018823 anti-inhibitor coagulant complex Proteins 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 229940004970 bebulin Drugs 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- VYLDEYYOISNGST-UHFFFAOYSA-N bissulfosuccinimidyl suberate Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)CCCCCCC(=O)ON1C(=O)C(S(O)(=O)=O)CC1=O VYLDEYYOISNGST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 2
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N chembl1095986 Chemical compound C1[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]1C(N[C@H](C2=CC(O)=CC(O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)=C2C=2C(O)=CC=C(C=2)[C@@H](NC(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3C=4C=C(C(=C(O)C=4)C)OC=4C(O)=CC=C(C=4)[C@@H](N)C(=O)N[C@@H](C(=O)N3)[C@H](O)C=3C=CC(O4)=CC=3)C(=O)N1)C(O)=O)=O)C(C=C1)=CC=C1OC1=C(O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO[C@@H]5[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O5)O)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C4=CC2=C1 BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N 0.000 description 2
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 2
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000007859 condensation product Substances 0.000 description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 229960004281 desmopressin Drugs 0.000 description 2
- NFLWUMRGJYTJIN-NXBWRCJVSA-N desmopressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSCCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(N)=O)=O)CCC(=O)N)C1=CC=CC=C1 NFLWUMRGJYTJIN-NXBWRCJVSA-N 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 2
- 230000020764 fibrinolysis Effects 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 229920001002 functional polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 2
- 102000057593 human F8 Human genes 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 2
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 229950004257 ristocetin Drugs 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 208000020294 von Willebrand disease 1 Diseases 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- NXLNNXIXOYSCMB-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) carbonochloridate Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(OC(Cl)=O)C=C1 NXLNNXIXOYSCMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 1,1-difluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)CCCCC1 ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BGPJLYIFDLICMR-UHFFFAOYSA-N 1,4,2,3-dioxadithiolan-5-one Chemical class O=C1OSSO1 BGPJLYIFDLICMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- LILXDMFJXYAKMK-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-1,1-diethoxyethane Chemical compound CCOC(CBr)OCC LILXDMFJXYAKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MQDJYAHPJDFMGI-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzaldehyde;phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1.OC1=CC=C(C=O)C=C1 MQDJYAHPJDFMGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-M 4-hydroxybenzoate Chemical compound OC1=CC=C(C([O-])=O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 102100036826 Aldehyde oxidase Human genes 0.000 description 1
- 101100437118 Arabidopsis thaliana AUG1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 1
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 1
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 description 1
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 101150094690 GAL1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100028501 Galanin peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 241000699694 Gerbillinae Species 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 101000928314 Homo sapiens Aldehyde oxidase Proteins 0.000 description 1
- 101100121078 Homo sapiens GAL gene Proteins 0.000 description 1
- 101000782195 Homo sapiens von Willebrand factor Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 101710141347 Major envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 1
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000235346 Schizosaccharomyces Species 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 101150045640 VWF gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- WERKSKAQRVDLDW-ANOHMWSOSA-N [(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO WERKSKAQRVDLDW-ANOHMWSOSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 150000004703 alkoxides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000009614 chemical analysis method Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002038 chemiluminescence detection Methods 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000004023 fresh frozen plasma Substances 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 229940027029 hemofil Drugs 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-UHFFFAOYSA-N hexane-1,2,3,4,5,6-hexol Chemical compound OCC(O)C(O)C(O)C(O)CO FBPFZTCFMRRESA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940034998 human von willebrand factor Drugs 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012931 lyophilized formulation Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000012913 medium supplement Substances 0.000 description 1
- 210000003593 megakaryocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000013546 non-drug therapy Methods 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000020978 protein processing Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 229940047431 recombinate Drugs 0.000 description 1
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000001593 sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000011069 sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035049 sorbitan monooleate Drugs 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- A61K38/37—Factors VIII
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
フォンウィルブランド病（ＶＷＤ）および血友病等の凝固疾患は、概して、凝固カスケードの欠陥に由来する。「フォンウィルブランド病」は、フォンウィルブランド因子の欠乏によって生じる疾患群を指す。フォンウィルブランド因子は、正常な血液凝固に必要な、血小板が凝集して血液壁に付着すること助長する。血友病Ａが第ＶＩＩＩ因子の活性の欠乏を意味する一方で、血友病Ｂは、第ＩＸ因子の欠乏を意味する。これらの凝固障害の現在の治療には、正常な凝固因子を含む薬学的調製物を用いた補充療法が含まれる。
ＶＷＤおよび血友病Ａ患者における補充療法は、静脈内注入による正常な凝固因子を含有する調製物の反復投与を伴い、特に、静脈アクセスを達成するのが困難である場合、これらの患者の生活において重い負担となり得る。注入の回数を減少させることができれば、それは有利となろう。１つの潜在的に実行可能な療法は、フォンウィルブランド因子（ＶＷＦ）等の第２の分子との会合を介して第ＶＩＩＩ因子を安定化させることであり、その結果、第ＶＩＩＩ因子の血漿半減期が増加する。
ＶＷＦは、約５００〜２０，０００ｋＤの範囲の大きさの一連の多量体として血漿中を循環する糖タンパク質である。ＶＷＦの完全長のｃＤＮＡがクローン化され、プロポリペプチドは、完全長プレプロＶＷＦのアミノ酸残基２３〜７６４に対応する（Ｅｉｋｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ（１９９５）Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉａ １，７７ ９０（非特許文献１））。ＶＷＦの多量体形態は、ジスルフィド結合によってともに連結される２５０ｋＤのポリペプチドサブユニットで構成される。ＶＷＦは、損傷した血管壁の内皮下層への初期の血小板粘着を媒介し、より大きな多量体は止血活性を増強する。多量体化されたＶＷＦは、ＶＷＦのＡ１ドメインにおける相互作用を介して血小板表面糖タンパク質Ｇｐ１ｂαに結合し、血小板粘着を促進する。ＶＷＦ上の他の部位は、血管壁への結合を媒介する。したがって、ＶＷＦは、高せん断応力条件下で血小板と血管壁との間に血小板粘着および一次止血に不可欠な架け橋を形成する。通常、内皮細胞は大きいポリマー形態のＶＷＦを分泌し、低分子量を有するＶＷＦのこれらの形態は、タンパク質分解による切断から生じる。非常に大きい分子量の多量体は、内皮細胞のバイベル−パラーデ小体内に貯蔵され、トロンビンおよびヒスタミン等のアゴニストによって刺激されると放出される。
ＦＶＩＩＩの薬物動態がＶＷＦレベルと相関することは、幾つかの過去の観察によって支援される。ＶＷＦタンパク質レベルの減少またはＦＶＩＩＩ結合親和性の低下によってフォンウィルブランド病（ＶＷＤ）においてＦＶＩＩＩ結合活性が減少すると、内因性ＦＶＩＩＩの定常状態のレベルの減少がもたらされる（Ｃａｓｔａｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ｏｆ Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ ８８（１）：９４−１０８（２００３）（非特許文献２）に要約されている）ことから、ＶＷＦの存続期間の改善が、ＦＶＩＩＩ安定性の改善のための実行可能な戦略として提案されている（Ｄｅｎｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ．２００８ Ｆｅｂ；９９（２）：２７１−８（非特許文献３）、Ｔｕｒｅｃｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００６，１０８（１１）：Ａｂｓｔｒａｃｔ １００２（非特許文献４））。重度の血友病Ａ患者の間で、注入前のＶＷＦレベルと注入されたＦＶＩＩＩの半減期との相関関係が、Ｆｉｊｎｖａｎｄｒａａｔおよび同僚によって実証されている（Ｆｉｊｎｖａｎｄｒａａｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ Ｊ Ｈａｅｍａｔｏｌ．１９９５ Ｏｃｔ；９１（２）：４７４−６（非特許文献５））。その研究では、正常なＶＷＦレベルを有する患者では平均値が１２．５時間であったのに比べ、２００〜３００％の平均ＶＷＦレベルを有する患者では、ＦＶＩＩＩの半減期が１５〜２９時間であることが認められた。別の研究では、血液型Ｏを有する患者は、血液型Ａを有する患者（１９．７時間）と比較して、著しく低いＶＷＦレベルおよび短いＦＶＩＩＩ半減期（１５．３時間）を有することが実証された（Ｖｌｏｔ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ．２０００ Ｊａｎ；８３（１）：６５−９（非特許文献６））。化学的に修飾されたＶＷＦは、ｒＦＶＩＩＩの存続期間を延長することが示されている（Ｔｕｒｅｃｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．２００７ Ｊｕｌ ９；５（２）（非特許文献７）ｈｔｔｐ／ｗｗｗ．ｂｌａｃｋｗｅｌｌｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ．ｃｏｍ／ｉｓｔｈ２００７／ａｂｓｔｒａｃｔ．ａｓｐ？ｉｄ＝６４８９８から要約入手可能）。したがって、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの同時投与は、フォンウィルブランド病および血友病Ａ等の凝固疾患の治療に実行可能な戦略である。
Ｅｉｋｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ（１９９５）Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉａ １，７７ ９０
Ｃａｓｔａｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ｏｆ Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ ８８（１）：９４−１０８（２００３）
Ｄｅｎｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ．２００８ Ｆｅｂ；９９（２）：２７１−８
Ｔｕｒｅｃｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００６，１０８（１１）：Ａｂｓｔｒａｃｔ １００２
Ｆｉｊｎｖａｎｄｒａａｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ Ｊ Ｈａｅｍａｔｏｌ．１９９５ Ｏｃｔ；９１（２）：４７４−６
Ｖｌｏｔ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ．２０００ Ｊａｎ；８３（１）：６５−９
Ｔｕｒｅｃｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．２００７ Ｊｕｌ ９；５（２）
したがって、本発明は、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を、単独で、または組換え第ＶＩＩＩ因子（ｒＦＶＩＩＩ）と組み合わせて、それを必要とする対象に投与することによって凝固疾患を治療するための方法および組み合わせを提供し、その結果、第ＶＩＩＩ因子のインビボ半減期が増加する。
一態様において、本発明は、治療を必要とする対象におけるフォンウィルブランド病または血友病Ａを治療するための方法であって、血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象と比較して、第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、該対象に組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含む方法を提供し、ここで該ｒＶＷＦは、少なくとも２０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物であり、該ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有する。
さらなる実施形態において、かつ上述に従って、本発明の方法は、対象に、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）および組換え第ＶＩＩＩ因子（ｒＦＶＩＩＩ）を同時投与する段階を含む。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩは、単一組成物中で一緒に投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、１投与量当たり１．０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜１５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、１投与量当たり２ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、１投与量当たり５ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜４０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、１投与量当たり１０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜２０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、本発明の方法で使用されるｒＶＷＦは、フーリン（Ｆｕｒｉｎ）での処理によってインビトロで成熟する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＶＷＦは、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞培養物）における発現を介して産生される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＦＶＩＩＩおよびｒＶＷＦは、同一の細胞培養物における発現を介して産生される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、ｒＶＷＦが１日おきに１回を超えない頻度で投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、ｒＶＷＦが週に２回を超えない頻度で投与される。
さらなる態様において、かつ上述のいずれかに従って、高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、投与後少なくとも３時間、少なくとも２０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を維持する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、第ＶＩＩＩ因子の半減期は、約５時間延長される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも１２時間延長される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも２４時間延長される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも３６時間延長される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも４８時間延長される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも７２時間延長される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：１〜１：４である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：２〜１：３である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、１：１〜１：２である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、２３、対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、約３：４である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＶＷＦは、約２０〜１５０ｍＵ／μｇの比活性を有する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも３０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも４０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも５０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも６０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも７０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む。
さらなる態様において、かつ上述のいずれかに従って、本発明は、治療を必要とする対象における血友病Ａまたはフォンウィルブランド病を治療するための方法であって、血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象と比較して、第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、該対象に組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含む方法を提供し、ここで（ａ）ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有し、ｒＶＷＦの比活性は、約２０〜１５０ｍＵ／μｇであり、かつ（ｂ）ＦＶＩＩＩの半減期は、血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、少なくとも１．５倍高い。
さらなる態様において、かつ上述のいずれかに従って、本発明は、治療を必要とする対象における血友病Ａまたはフォンウィルブランド病を治療するための方法であって、血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象と比較して、第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、該対象に組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含む方法を提供し、ここで（ａ）ｒＶＷＦは、少なくとも２０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物であり、（ｂ）ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有し、ｒＶＷＦの比活性は、少なくとも約２０〜１５０ｍＵ／μｇであり、かつ（ｃ）ＦＶＩＩＩの半減期は、血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、少なくとも１．５倍高い。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＶＷＦの投与から２４時間後の対象の血漿中の第ＶＩＩＩ因子凝固促進活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）のレベルは、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性のレベルの少なくとも９０％である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、投与から２４時間後の対象の血漿中の第ＶＩＩＩ因子凝固促進活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）のレベルは、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性のレベルの少なくとも１００％である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、投与から３６時間後の対象の血漿中の第ＶＩＩＩ因子凝固促進活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）のレベルは、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性のレベルの少なくとも８０％である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、投与から４８時間後の対象の血漿中の第ＶＩＩＩ因子凝固促進活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）のレベルは、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性のレベルの少なくとも５０％である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも６時間安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも１２時間安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも１８時間安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも２４時間安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも３６時間安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも４８時間安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも７２時間安定している。
さらなる態様において、かつ上述のいずれかに従って、本発明は、対象に、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含む、治療を必要とする対象における血友病Ａまたはフォンウィルブランド病を治療するための方法を提供する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、本発明は、対象に、組換え第ＶＩＩＩ因子（ｒＦＶＩＩＩ）および組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を同時投与する段階を含む。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＦＶＩＩＩおよびｒＶＷＦは、単一組成物中で一緒に投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：１〜１：４である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：２〜１：３である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、１：１〜１：２である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、約３：４である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＶＷＦは、フーリンでの処理によってインビトロで成熟する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＶＷＦは、哺乳動物細胞培養物において発現される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＦＶＩＩＩは、哺乳動物細胞培養物において発現される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、哺乳動物培養物は、ＣＨＯ細胞を含む。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＦＶＩＩＩおよびｒＶＷＦは、同一の培養物において共発現される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＦＶＩＩＩおよびｒＶＷＦは、同時精製される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＦＶＩＩＩおよびｒＶＷＦは、別々に精製される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＦＶＩＩＩ／ｒＶＷＦ複合体は、投与前に再構成される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＶＷＦは、ｒＦＶＩＩＩ／ｒＶＷＦ複合体を再構成する前に、フーリンで処理される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、再構成ｒＦＶＩＩＩ／ｒＶＷＦ複合体は、フーリンで処理される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、フーリンは、組換えフーリンである。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、ｒＶＷＦが１日１回を超えない頻度で投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、ｒＶＷＦが１日おきに１回を超えない頻度で投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、ｒＶＷＦが２日おきに１回を超えない頻度で同時投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、ｒＶＷＦが３日おきに１回を超えない頻度で投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、１投与量当たり１．５ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ：Ｃ〜１５０ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ：Ｃが投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、１投与量当たり１０ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ：Ｃ〜１００ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ：Ｃが投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、１投与量当たり２５ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ：Ｃ〜７５ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ：Ｃが投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に、１投与量当たり４０ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ：Ｃ〜６０ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ：Ｃが投与される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、投与から２４時間後の対象の血漿中の第ＶＩＩＩ因子凝固促進活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）のレベルは、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性のレベルの少なくとも９０％である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、投与から２４時間後の対象の血漿中の第ＶＩＩＩ因子凝固促進活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）のレベルは、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性のレベルの少なくとも１００％である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、投与から３６時間後の対象の血漿中の第ＶＩＩＩ因子凝固促進活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）のレベルは、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性のレベルの少なくとも８０％である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、投与から４８時間後の対象の血漿中の第ＶＩＩＩ因子凝固促進活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）のレベルは、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性のレベルの少なくとも５０％である。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＶＷＦは、少なくとも１０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物を有する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＶＷＦは、少なくとも２０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物を有する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＶＷＦは、少なくとも３０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物を有する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＶＷＦは、少なくとも４０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物を有する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＶＷＦは、少なくとも５０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物を有する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも３時間インビトロで安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも６時間インビトロで安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも１２時間インビトロで安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも１８時間インビトロで安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも２４時間インビトロで安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも３６時間インビトロで安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも４８時間インビトロで安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも７２時間インビトロで安定している。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、内因性ＦＶＩＩＩ活性は、少なくとも１２時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、内因性ＦＶＩＩＩ活性は、少なくとも２４時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、内因性ＦＶＩＩＩ活性は、少なくとも３６時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、内因性ＦＶＩＩＩ活性は、少なくとも４８時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、内因性ＦＶＩＩＩ活性は、少なくとも７２時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、少なくとも１２時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、少なくとも２４時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、少なくとも３６時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、少なくとも４８時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、少なくとも７２時間安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、インビボでのｒＦＶＩＩＩの半減期を延長することによって安定化される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ＦＶＩＩＩの半減期は、ｐｄＦＶＩＩＩを投与した患者と比較して、約５時間延長される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、少なくとも１％の同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、該ｒＦＶＩＩＩを投与した患者において、少なくとも３６時間維持される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、少なくとも１％の同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、該ｒＦＶＩＩＩを投与した患者において、少なくとも４８時間維持される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、少なくとも１％の同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、該ｒＦＶＩＩＩを投与した患者において、少なくとも７２時間維持される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、少なくとも１％の同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、該ｒＦＶＩＩＩを投与した患者において、少なくとも９０時間維持される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、少なくとも１％の同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、該ｒＦＶＩＩＩを投与した患者において、少なくとも１２０時間維持される。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、少なくとも１％の同時投与されたｒＦＶＩＩＩの活性は、該ｒＦＶＩＩＩを投与した患者において、少なくとも１６８時間維持される。
[本発明1001]
それを必要とする対象におけるフォンウィルブランド病または血友病Ａを治療するための方法であって、
血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象と比較して、第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、前記対象に組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含み、前記ｒＶＷＦは、少なくとも20％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物であり、かつ前記ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有する、方法。
[本発明1002]
前記対象に、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）および組換え第ＶＩＩＩ因子（ｒＦＶＩＩＩ）を同時投与する段階を含む、本発明1001の方法。
[本発明1003]
前記ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩは、単一組成物中で一緒に投与される、本発明1002の方法。
[本発明1004]
前記対象に、1投与量当たり1．0ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜150ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される、本発明1001〜1003のいずれかの方法。
[本発明1005]
前記対象に、1投与量当たり2ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜50ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される、本発明1004の方法。
[本発明1006]
前記対象に、1投与量当たり5ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜40ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される、本発明1004の方法。
[本発明1007]
前記対象に、1投与量当たり10ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜20ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される、本発明1004の方法。
[本発明1008]
前記ｒＶＷＦは、フーリン（Ｆｕｒｉｎ）での処理によってインビトロで成熟する、本発明1001〜1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
前記ｒＶＷＦは、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞培養物）における発現を介して産生される、本発明1001〜1008のいずれかの方法。
[本発明1010]
前記ｒＦＶＩＩＩおよびｒＶＷＦは、同一の細胞培養物における発現を介して産生される、本発明1001〜1009のいずれかの方法。
[本発明1011]
前記対象に、ｒＶＷＦが1日おきに1回を超えない頻度で投与される、本発明1001〜1010のいずれかの方法。
[本発明1012]
前記対象に、ｒＶＷＦが週に2回を超えない頻度で投与される、本発明1011の方法。
[本発明1013]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、投与後少なくとも3時間、前記少なくとも20％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を維持する、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1014]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも5時間延長される、本発明1001〜1013のいずれかの方法。
[本発明1015]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも12時間延長される、本発明1014の方法。
[本発明1016]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも24時間延長される、本発明1014の方法。
[本発明1017]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも36時間延長される、本発明1014の方法。
[本発明1018]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも48時間または72時間延長される、本発明1014の方法。
[本発明1019]
前記対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、2：1〜1：4である、本発明1002〜1018の方法。
[本発明1020]
前記対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、3：2〜1：3である、本発明1019の方法。
[本発明1021]
前記対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、1：1〜1：2である、本発明1019の方法。
[本発明1022]
前記対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、約3：4である、本発明1019の方法。
[本発明1023]
前記ｒＶＷＦは、約20〜150ｍＵ／μｇの比活性を有する、本発明1001〜1022の方法。
[本発明1024]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも30％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1023の方法。
[本発明1025]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも40％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1024の方法。
[本発明1026]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも50％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1025の方法。
[本発明1027]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも60％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1026の方法。
[本発明1028]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも70％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1027の方法。
[本発明1029]
それを必要とする対象における血友病Ａまたはフォンウィルブランド病を治療するための方法であって、
血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象と比較して、第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、前記対象に組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含み、
（ａ）前記ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有し、前記ｒＶＷＦの比活性は、約20〜150ｍＵ／μｇであり、かつ
（ｂ）前記ＦＶＩＩＩの半減期は、血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、少なくとも1．5倍高い、方法。
[本発明1030]
それを必要とする対象における血友病Ａまたはフォンウィルブランド病を治療するための方法であって、
血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象と比較して、第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、前記対象に組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含み、
（ａ）前記ｒＶＷＦは、少なくとも20％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む高分子量のＶＷＦ多量体組成物であり、
（ｂ）前記ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有し、前記ｒＶＷＦの比活性は、少なくとも約20〜150ｍＵ／μｇであり、かつ
（ｃ）前記ＦＶＩＩＩの半減期は、血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、少なくとも1．5倍高い、方法。
[本発明1031]
3型フォンウィルブランド病を治療するための方法である、本発明1001〜1030の方法。
[本発明1001]
それを必要とする対象におけるフォンウィルブランド病または血友病Ａを治療するための方法であって、
血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象と比較して、第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、前記対象に組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含み、前記ｒＶＷＦは、少なくとも20％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物であり、かつ前記ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有する、方法。
[本発明1002]
前記対象に、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）および組換え第ＶＩＩＩ因子（ｒＦＶＩＩＩ）を同時投与する段階を含む、本発明1001の方法。
[本発明1003]
前記ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩは、単一組成物中で一緒に投与される、本発明1002の方法。
[本発明1004]
前記対象に、1投与量当たり1．0ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜150ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される、本発明1001〜1003のいずれかの方法。
[本発明1005]
前記対象に、1投与量当たり2ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜50ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される、本発明1004の方法。
[本発明1006]
前記対象に、1投与量当たり5ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜40ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される、本発明1004の方法。
[本発明1007]
前記対象に、1投与量当たり10ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜20ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与される、本発明1004の方法。
[本発明1008]
前記ｒＶＷＦは、フーリン（Ｆｕｒｉｎ）での処理によってインビトロで成熟する、本発明1001〜1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
前記ｒＶＷＦは、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞培養物）における発現を介して産生される、本発明1001〜1008のいずれかの方法。
[本発明1010]
前記ｒＦＶＩＩＩおよびｒＶＷＦは、同一の細胞培養物における発現を介して産生される、本発明1001〜1009のいずれかの方法。
[本発明1011]
前記対象に、ｒＶＷＦが1日おきに1回を超えない頻度で投与される、本発明1001〜1010のいずれかの方法。
[本発明1012]
前記対象に、ｒＶＷＦが週に2回を超えない頻度で投与される、本発明1011の方法。
[本発明1013]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、投与後少なくとも3時間、前記少なくとも20％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を維持する、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1014]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも5時間延長される、本発明1001〜1013のいずれかの方法。
[本発明1015]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも12時間延長される、本発明1014の方法。
[本発明1016]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも24時間延長される、本発明1014の方法。
[本発明1017]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも36時間延長される、本発明1014の方法。
[本発明1018]
前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも48時間または72時間延長される、本発明1014の方法。
[本発明1019]
前記対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、2：1〜1：4である、本発明1002〜1018の方法。
[本発明1020]
前記対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、3：2〜1：3である、本発明1019の方法。
[本発明1021]
前記対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、1：1〜1：2である、本発明1019の方法。
[本発明1022]
前記対象に投与されるＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、約3：4である、本発明1019の方法。
[本発明1023]
前記ｒＶＷＦは、約20〜150ｍＵ／μｇの比活性を有する、本発明1001〜1022の方法。
[本発明1024]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも30％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1023の方法。
[本発明1025]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも40％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1024の方法。
[本発明1026]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも50％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1025の方法。
[本発明1027]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも60％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1026の方法。
[本発明1028]
前記高分子量のＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも70％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、本発明1001〜1027の方法。
[本発明1029]
それを必要とする対象における血友病Ａまたはフォンウィルブランド病を治療するための方法であって、
血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象と比較して、第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、前記対象に組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含み、
（ａ）前記ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有し、前記ｒＶＷＦの比活性は、約20〜150ｍＵ／μｇであり、かつ
（ｂ）前記ＦＶＩＩＩの半減期は、血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、少なくとも1．5倍高い、方法。
[本発明1030]
それを必要とする対象における血友病Ａまたはフォンウィルブランド病を治療するための方法であって、
血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象と比較して、第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、前記対象に組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を投与する段階を含み、
（ａ）前記ｒＶＷＦは、少なくとも20％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む高分子量のＶＷＦ多量体組成物であり、
（ｂ）前記ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有し、前記ｒＶＷＦの比活性は、少なくとも約20〜150ｍＵ／μｇであり、かつ
（ｃ）前記ＦＶＩＩＩの半減期は、血漿由来フォンウィルブランド因子を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、少なくとも1．5倍高い、方法。
[本発明1031]
3型フォンウィルブランド病を治療するための方法である、本発明1001〜1030の方法。
概要
本発明は、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を、単独で、または第ＶＩＩＩ因子（組換えであるか、または血漿由来であり得る）と組み合わせて投与することによって、対象における凝固疾患を治療するための組成物および方法を提供する。幾つかの態様において、本発明の組成物および方法は、フォンウィルブランド病（ＶＷＤ）または血友病Ａ等の凝固疾患を治療するために使用される。
本発明は、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を、単独で、または第ＶＩＩＩ因子（組換えであるか、または血漿由来であり得る）と組み合わせて投与することによって、対象における凝固疾患を治療するための組成物および方法を提供する。幾つかの態様において、本発明の組成物および方法は、フォンウィルブランド病（ＶＷＤ）または血友病Ａ等の凝固疾患を治療するために使用される。
一態様において、対象に投与されるｒＶＷＦは、投与される血漿由来ＶＷＦによるＦＶＩＩＩの安定性と比較して、インビボでの第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）活性に関して増大した安定性を提供し、凝固疾患のための従来の治療よりもより低い用量および／または治療頻度を可能にする。ＦＶＩＩＩ活性の安定性およびＦＶＩＩＩレベルの増大は、標準的アッセイ、例えば、一段階凝固アッセイ、色素基質アッセイ、およびイムノアッセイ等を含む、当技術分野で公知であり、本明細書に記載される方法を用いて測定することができる（例えば、Ｌｉｐｐｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ＆Ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ，２００９，２０（１）：１−３およびＣｈａｎｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．，２００３，１２０：３４−３９を参照されたく、これらのそれぞれは、あらゆる目的のために、具体的には、ＦＶＩＩＩレベルおよび活性のアッセイに関連するあらゆる教示のために参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）。図２０に示されるように、ｒＶＷＦにより、ｐｄＶＷＦを受容する患者における半減期に比べ、ＦＶＩＩＩの平均半減期が５．２時間以上増加した。図２および７はまた、ｐｄＶＷＦを投与した患者と比較して、ｒＶＷＦを投与した患者におけるＦＶＩＩＩ活性の増大も示す。図２は、ｒＶＷＦを投与した患者については、ｐｄＶＷＦを投与した患者と比較して、ＦＶＩＩＩの平均半減期が、４．７時間増加したことを示し、図７中のコホート４Ａからのデータは、ｒＶＷＦを投与した患者については、ｐｄＶＷＦを投与した患者と比較して、５．３時間のＦＶＩＩＩ半減期の増加を示す。加えて、図２１に示されるように、血漿ＦＶＩＩＩの半減期は、ＦＶＩＩＩ（すなわち、Ａｄｖａｔｅ）のみを受容する患者と比較して、ｒＦＶＩＩＩと組み合わせてｒＶＷＦを受容するＶＷＤ患者において１２．２７時間増加する。
さらなる態様において、ｒＶＷＦの投与は、内因性および／または同時投与されたＦＶＩＩＩ活性を安定化させ、その結果、ＦＶＩＩＩのインビボ半減期および／または活性が増加する。ｒＶＷＦおよびＦＶＩＩＩが同時投与される実施形態において、ｒＶＷＦおよびＦＶＩＩＩは、対象に、単一組成物中で一緒に投与することができる。さらなる実施形態において、ｒＶＷＦまたはＦＶＩＩＩはいずれも水溶性ポリマーで修飾されない。他の実施形態において、ｒＶＷＦもしくはＦＶＩＩＩのいずれか、またはその両方とも、水溶性ポリマーで修飾される。ｒＶＷＦがＦＶＩＩＩと同時投与される実施形態において理解されるように、ＦＶＩＩＩは、組換えであっても、血漿由来であってもよい。
さらなる態様において、かつ上述のいずれかに従って、対象に投与されるｒＶＷＦは、ｒＶＷＦの十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量の多量体組成物である。上で論じられるように、本発明のｒＶＷＦ組成物の使用は、ＦＶＩＩＩ（組換えまたは血漿由来）を用いるかまたは用いない投与（または再投与）について治療の柔軟性を提供する。さらなる実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦは、少なくとも２０％のＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物である。特定の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦは、水溶性ポリマーで修飾されない。
なおさらなる態様において、対象に投与されるｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦよりも高い比活性を有する。
なおさらなる態様において、ｒＶＷＦは、単独で、またはｐｄＦＶＩＩＩもしくはｒＦＶＩＩＩと組み合わせて、対象に、週に２回を超えない頻度で投与される。
なおさらなる態様において、ｒＶＷＦは、対象に投与される前にフーリンで処理される。ある特定の実施形態において、ｒＶＷＦは、組換えフーリンで処理される。
さらなる態様において、本発明で用いるｒＶＷＦは、当技術分野で公知の方法、ならびに例えば、２０１１年７月８日に出願された米国特許出願公開第２０１２／００３５１１０号および２０１２年５月８日に発行された米国特許第８，１７３，５９７号に記載される方法に従って産生され、これらのそれぞれは、あらゆる目的のために、具体的には、ｒＶＷＦ組成物およびこれらの組成物を産生するための方法に関連するあらゆる教示のために参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
上述のいずれかに従って、ｒＶＷＦは、単独でまたはＦＶＩＩＩと組み合わせて、ＶＷＤおよび血友病Ａ等の凝固疾患に罹患している患者を治療するために使用される。ＶＷＤに罹患している患者は、あるレベルのＦＶＩＩＩを有するが、これらの患者はＶＷＦを欠くため、そのＦＶＩＩＩの安定性は、概して損なわれる。幾つかの実施形態において、ＶＷＤ患者の治療は、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの両方による初回治療、続いて、単独でｒＶＷＦの反復投与を含み得る。他の実施形態において、初回治療は、ｒＶＷＦのみによるものであり得るが、その後の反復投与は、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの両方を用いたものである、または初回もしくはその後の反復投与はすべて、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの両方の同時投与を含み得る。同様に、血友病Ａ患者（ＦＶＩＩＩを欠いている）は、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの両方の初回治療を受けてもよく、その後の反復治療は、ｒＦＶＩＩＩのみまたはｒＶＷＦのみの投与を含んでもよい。他の実施形態において、初回治療は、ｒＦＶＩＩＩのみであってもよいが、その後の反復治療は、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの同時投与を含む。
定義
本明細書で使用される、「ｒＶＷＦ」は、組換えＶＷＦを指す。
本明細書で使用される、「ｒＶＷＦ」は、組換えＶＷＦを指す。
本明細書で使用される、「ｒＦＶＩＩＩ」は、組換えＦＶＩＩＩを指す。
例えば、細胞、または核酸、タンパク質、またはベクターに関して使用される場合の「組換え」という用語は、その細胞、核酸、タンパク質、またはベクターが異種核酸もしくはタンパク質の導入、またはネイティブ核酸もしくはタンパク質の変化によって修飾されることを示すか、またはその細胞がそのように修飾された細胞に由来するものであることを示す。したがって、例えば、組換え細胞は、ネイティブ（非組換え）の形態の細胞内では見られない遺伝子を発現するか、あるいは、異常発現されたネイティブ遺伝子もしくは過小発現されたネイティブ遺伝子を発現するか、またはネイティブ遺伝子を全く発現しない。
本明細書で使用される、「組換えＶＷＦ」は、組換えＤＮＡ技術によって得られたＶＷＦを含む。ある特定の実施形態において、本発明のＶＷＦタンパク質は、例えば、１９８６年１０月２３日に公開された国際公開第１９８６／０６０９６号、およびＧｉｎｓｂｕｒｇらの名において、１９９０年７月２３日に出願された米国特許出願第０７／５５９，５０９号（組換えＶＷＦの産生方法に関して参照によって本明細書に組み込まれる）等におけるように調製された構築体を含むことができる。本発明のＶＷＦは、単量体および多量体の形態を含むすべての可能な形態を含むことができる。本発明は、組み合わせに使用されるべきＶＷＦの異なる形態を包含することも理解されるべきである。例えば、本発明のＶＷＦは、異なる多量体、異なる誘導体、ならびに生物学的に活性な誘導体および生物学的に活性でない誘導体の両方を含み得る。
本発明の文脈において、組換えＶＷＦは、例えば、霊長類、ヒト、サル、ウサギ、ブタ、齧歯動物、マウス、ラット、ハムスター、スナネズミ、犬科動物、猫科動物等の哺乳動物、およびその生物学的に活性な誘導体からのＶＷＦファミリーのいかなるメンバーをも包含する。また、ＶＷＦタンパク質の機能的断片および融合タンパク質であるような、活性を有する突然変異体および変異体ＶＷＦタンパク質も包含する。さらに、本発明のＶＷＦは、精製、検出、またはその両方を促進するタグをさらに含み得る。本明細書に記載されるＶＷＦは、治療用部分、またはインビトロもしくはインビボで画像化するのに好適な部分でさらに修飾され得る。
本明細書で使用される「血漿由来ＶＷＦ（ｐｄＶＷＦ）」は、少なくとも１つのＦＶＩＩＩ分子をインビボで安定化させる、例えば、この分子と結合するという特性を有する、哺乳動物から得られた成熟ＶＷＦを含む血液中に見られるタンパク質のすべての形態を含む。
「高度に多量体形成したＶＷＦ」または「高分子量のＶＷＦ」という用語は、少なくとも１０個のサブユニット、または１２、１４、もしくは１６個のサブユニットから約２０、２２、２４、もしくは２６個もしくはそれ以上のサブユニットを含むＶＷＦを指す。「サブユニット」という用語は、ＶＷＦの単量体を指す。当技術分野で公知であるように、それは、通常、重合してより高次の多量体を形成する、ＶＷＦの二量体である（Ｔｕｒｅｃｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｍｉｎ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈｅｍｏｓｔ．２０１０，３６（５）：５１０−５２１を参照されたく、これはあらゆる目的のために、具体的には、ＶＷＦの多量体分析に関するあらゆる教示のために参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
本明細書で使用される、「第ＶＩＩＩ因子」または「ＦＶＩＩＩ」という用語は、患者に対して内因性であるか、血漿由来であるか、または組換えＤＮＡ技術の使用を通して産生されたかどうかにかかわらず、血液凝固第ＶＩＩＩ因子の典型的な特徴を有する第ＶＩＩＩ因子分子のあらゆる形態を指し、これには第ＶＩＩＩ因子のすべての修飾された形態が含まれる。第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）は、天然におよび治療用調製物中に、単一遺伝子産物から生じるポリペプチドの不均一な分布として存在する（例えば、Ａｎｄｅｒｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８３：２９７９−２９８３（１９８６）を参照のこと）。第ＶＩＩＩ因子を含有する市販の治療用調製物の例には、ＨＥＭＯＦＩＬ Ｍ、ＡＤＶＡＴＥ、およびＲＥＣＯＭＢＩＮＡＴＥ（Ｂａｘｔｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ，Ｉｌｌ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．から入手可能）の商標名で販売されているものを含む。
本明細書で使用される、「血漿ＦＶＩＩＩ活性」および「インビボでのＦＶＩＩＩ活性」は、相互交換可能に使用される。標準的アッセイを用いて測定されるインビボでのＦＶＩＩＩ活性は、内因性ＦＶＩＩＩ活性、治療的に投与されたＦＶＩＩＩ（組換えもしくは血漿由来）活性、または内因性および投与されたＦＶＩＩＩ活性の両方であり得る。同様に、「血漿ＦＶＩＩＩ」は、内因性ＦＶＩＩＩまたは投与された組換えもしくは血漿由来ＦＶＩＩＩを指す。
本明細書で使用される、「フォンウィルブランド病」は、フォンウィルブランド因子の欠乏によって生じる疾患群を指す。フォンウィルブランド因子は、正常な血液凝固に必要である、血小板が凝集しかつ血液壁に粘着するのを助長する。本明細書にさらに詳述されるように、数種類のフォンウィルブランド病がある。
本明細書で使用される、「血友病（ｈｅｍｏｐｈｉｌｉａ）」または「血友病（ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉａ）」という用語は、血液の凝固（ｃｌｏｔｔｉｎｇ）または凝固（ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ）の減少によって広く特徴付けられる病態群を指す。血友病は、Ａ型、Ｂ型、またはＣ型血友病、または３つすべての疾患型の複合型を指し得る。Ａ型血友病（血友病Ａ）は、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）活性の減少または損失により引き起こされ、血友病サブタイプのうちで最も顕著なものである。Ｂ型血友病（血友病Ｂ）は、第ＩＸ因子（ＦＩＸ）凝固機能の損失または減少によって起こる。Ｃ型血友病（血友病Ｃ）は、第ＸＩ因子（ＦＸＩ）凝固活性の損失または減少の結果である。血友病ＡおよびＢは、Ｘ連鎖疾患であるが、血友病Ｃは、常染色体疾患である。血友病の一般的な治療は、Ｂｅｂｕｌｉｎ（登録商標）ＶＨ、およびＦＸＩを含むＦＶＩＩＩ、ＦＩＸ等の凝固因子、ならびにＦＥＩＢＡ−ＶＨ、デスモプレシンの予防的およびオンデマンド投与の両方、および血漿注入を含む。
「単離された」、「精製された」、または「生物学的に純粋な」という用語は、ネイティブな状態において見られるような通常それに付随する成分を、実質的にまたは本質的に含まない物質を指す。純度および均質性は、一般的には、ポリアクリルアミドゲル電気泳動または高性能液体クロマトグラフィー等の分析化学技術を使用して決定される。調製物に存在する優勢種であるＶＷＦが、実質的に精製される。幾つかの実施形態において、「精製された」という用語は、核酸またはタンパク質が、電気泳動ゲルにおいて本質的に１つのバンドを生じることを示す。他の実施形態において、核酸またはタンパク質は、少なくとも純度５０％、より好ましくは、少なくとも純度６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上であることを意味する。他の実施形態において、「精製する」または「精製」は、精製されるべき組成物から少なくとも１つの不純物を除去することを意味する。この意味において、精製は、精製された化合物が均質、例えば、純度１００％であることを必要としない。
本明細書で使用される、「投与」（およびすべての文法的等価語）は、対象への静脈投与、皮下投与、経口投与、坐剤としての投与、局所接触、腹腔内、病巣内、もしくは鼻腔内投与、または徐放デバイス、例えば、ミニ浸透圧ポンプの埋め込みを含む。投与は、非経口、および経粘膜（例えば、経口、経鼻、経膣、経直腸、または経皮）を含む任意の経路によるものである。非経口投与は、例えば、静脈内、筋肉内、動脈内、皮内、皮下、腹腔内、脳室内、および頭蓋内を含む。別の送達様式としては、リポソーム製剤、静脈内注入、経皮パッチ等の使用が挙げられるが、これらに限定されない。
「治療上有効な量もしくは用量」または「治療的に十分な量もしくは用量」または「有効なもしくは十分な量もしくは用量」という用語は、投与目的の治療効果を生じさせる用量を指す。例えば、血友病を治療するのに有用である治療上有効な量の薬物は、血友病と関連する１つ以上の症状を予防または緩和することができる量であり得る。正確な用量は、治療の目的に依存し、既知の技術を使用することで当業者によって確認されよう（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ（ｖｏｌｓ．１−３，１９９２）、Ｌｌｏｙｄ，Ｔｈｅ Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）、Ｐｉｃｋａｒ，Ｄｏｓａｇｅ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９）、およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００３，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓを参照のこと）。
本明細書で使用される、「患者」および「対象」という用語は、相互交換可能に使用され、疾患を有する、または疾患に罹患する可能性を有する哺乳動物（好ましくはヒト）を指す。
本明細書で使用される、「約」という用語は、指定された値のプラスまたはマイナス１０％のおよその範囲を示す。例えば、「約２０％」という用語は、１８〜２２％の範囲を包含する。
本明細書で使用される、「半減期」という用語は、減衰中の物質の量が半分に減少するのに（またはサンプルからもしくは患者からのクリアランスに）要する期間を指す。
本発明の組成物
本発明は、ＶＷＤおよび血友病Ａ等の凝固疾患の治療のために組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を含む組成物を利用する。幾つかの実施形態において、本発明は、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）と組み合わせてｒＶＷＦを利用する。同時投与されるＦＶＩＩＩは、組換え（ｒＦＶＩＩＩ）または血漿由来（ｐｄＦＶＩＩＩ）であり得る。好ましい態様において、本発明の組成物は、第ＶＩＩＩ因子のインビボ半減期が、ｒＶＷＦを投与されなかった対象またはｐｄＶＷＦを投与された対象におけるものと比較して延長されるように、インビボでの第ＶＩＩＩ因子活性（本明細書では、血漿第ＶＩＩＩ因子活性とも称される）を安定化させる。ｒＶＷＦがＦＶＩＩＩ活性を安定化させる程度（ＦＶＩＩＩ半減期の延長を含む）の測定は、当技術分野で公知の方法を用いて行うことができる。ＦＶＩＩＩ活性レベルは、例えば、一段階凝固アッセイ、色素基質アッセイ、およびイムノアッセイによって測定することができる（例えば、Ｌｉｐｐｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ＆ Ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ，２００９，２０（１）：１−３，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ（Ｐｈ．Ｅｕｒ．，３．ｓｕｐ．ｒｄ Ｅｄ．１９９７：２．７．４）、およびＣｈａｎｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．，２００３，１２０：３４−３９を参照されたく、これらのそれぞれは、あらゆる目的のために、具体的には、ＦＶＩＩＩレベルおよび活性のアッセイに関連するすべての教示のために参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）。
本発明は、ＶＷＤおよび血友病Ａ等の凝固疾患の治療のために組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を含む組成物を利用する。幾つかの実施形態において、本発明は、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）と組み合わせてｒＶＷＦを利用する。同時投与されるＦＶＩＩＩは、組換え（ｒＦＶＩＩＩ）または血漿由来（ｐｄＦＶＩＩＩ）であり得る。好ましい態様において、本発明の組成物は、第ＶＩＩＩ因子のインビボ半減期が、ｒＶＷＦを投与されなかった対象またはｐｄＶＷＦを投与された対象におけるものと比較して延長されるように、インビボでの第ＶＩＩＩ因子活性（本明細書では、血漿第ＶＩＩＩ因子活性とも称される）を安定化させる。ｒＶＷＦがＦＶＩＩＩ活性を安定化させる程度（ＦＶＩＩＩ半減期の延長を含む）の測定は、当技術分野で公知の方法を用いて行うことができる。ＦＶＩＩＩ活性レベルは、例えば、一段階凝固アッセイ、色素基質アッセイ、およびイムノアッセイによって測定することができる（例えば、Ｌｉｐｐｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ＆ Ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ，２００９，２０（１）：１−３，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ（Ｐｈ．Ｅｕｒ．，３．ｓｕｐ．ｒｄ Ｅｄ．１９９７：２．７．４）、およびＣｈａｎｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．，２００３，１２０：３４−３９を参照されたく、これらのそれぞれは、あらゆる目的のために、具体的には、ＦＶＩＩＩレベルおよび活性のアッセイに関連するすべての教示のために参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）。
ある特定の実施形態において、本発明のＶＷＦタンパク質は、例えば、１９８６年１０月２３日に公開された国際公開第１９８６／０６０９６号、およびＧｉｎｓｂｕｒｇらの名において、１９９０年７月２３日に出願された米国特許出願第０７／５５９，５０９号（組換えＶＷＦの産生方法に関しては参照によって本明細書に組み込まれる）におけるように調製された構築体を含むことができる。本発明に有用なＶＷＦは、単量体および多量体の形態を含むすべての可能な形態を含む。ＶＷＦのある特定の有用な形態は、少なくとも２つのＶＷＦのホモ多量体である。ＶＷＦタンパク質は、生物学的に活性な誘導体であり得るか、またはＦＶＩＩＩに対する安定剤として単に使用される場合、ＶＷＦは、生物学的に活性でない形態のものであり得る。本発明は、組み合わせに使用されるべきＶＷＦの異なる形態を包含することも理解されるべきである。例えば、本発明に有用な組成物は、異なる多量体、異なる誘導体、ならびに生物学的に活性な誘導体および生物学的に活性でない誘導体の両方を含み得る。
一次止血において、ＶＷＦは、血小板とコラーゲン等の細胞外マトリックスの特定成分との間の架け橋としての役割を果たす。このプロセスにおけるＶＷＦの生物学的活性は、異なるインビトロアッセイによって測定することができる（Ｔｕｒｅｃｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｍｉｎ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈｅｍｏｓｔ．２８：１４９−１６０，２００２）。リストセチン補因子アッセイは、ＶＷＦの存在下で、抗生物質リストセチンによって誘導される、新鮮なまたはホルマリン固定された血小板の凝集に基づく。血小板凝集度は、ＶＷＦ濃度に依存し、比濁法によって、例えば、アグリゴメーターの使用によって測定することができる（Ｗｅｉｓｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．５２：２７０８−２７１６，１９７３、Ｍａｃｆａｒｌａｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｒｏｍｂ．Ｄｉａｔｈ．Ｈａｅｍｏｒｒｈ．３４：３０６−３０８，１９７５）。２つ目の方法は、ＥＬＩＳＡ技術に基づくコラーゲン結合アッセイである（Ｂｒｏｗｎ ｅｔ Ｂｏｓａｋ，Ｔｈｒｏｍｂ．Ｒｅｓ．４３：３０３−３１１，１９８６、Ｆａｖａｌｏｒｏ，Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．８３：１２７−１３５，２０００）。マイクロタイタープレートを、ＩまたはＩＩＩ型コラーゲンでコーティングする。次いで、ＶＷＦをコラーゲン表面に結合させ、その後、酵素標識されたポリクローナル抗体を検出する。最終ステップは、基質反応であり、これはＥＬＩＳＡリーダーを用いて光度測定によってモニターすることができる。本明細書に提供されるように、本発明のＶＷＦの特定のリストセチン補因子活性（ＶＷＦ：ＲＣｏ）は、概して、インビトロアッセイを用いて測定して、ＶＷＦ 1μｇあたりのｍＵ（ｍＵ／μｇ）を単位として記載される。
ｐｄＶＷＦと比べた本発明のｒＶＷＦ組成物の利点は、ｒＶＷＦがｐｄＶＷＦよりも高い比活性を示すことである。幾つかの実施形態において、本発明のｒＶＷＦは、少なくとも約２０、２２．５、２５、２７．５、３０、３２．５、３５、３７．５、４０、４２．５、４５、４７．５、５０、５２．５、５５、５７．５、６０、６２．５、６５、６７．５、７０、７２．５、７５、７７．５、８０、８２．５、８５、８７．５、９０、９２．５、９５、９７．５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０ｍＵ／μｇ、またはそれより高い比活性を有する。一実施形態において、本明細書に記載される方法に使用されるｒＶＷＦは、２０ｍＵ／μｇ〜１５０ｍＵ／μｇの比活性を有する。別の実施形態において、ＶＷＦは、３０ｍＵ／μｇ〜１２０ｍＵ／μｇの比活性を有する。別の実施形態において、ｒＶＷＦは、４０ｍＵ／μｇ〜９０ｍＵ／μｇの比活性を有する。さらに別の実施形態において、ｒＶＷＦは、表１中に見られる変形形態１〜１３３から選択される比活性を有する。
（表１）組成物中に見出され、本明細書に提供される方法において使用されるｒＶＷＦの比活性に関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
本発明のｒＶＷＦは、約１０〜約４０個のサブユニットを含む高度な多量体である。さらなる実施形態において、本発明の方法を用いて産生された多量体ｒＶＷＦは、約１０〜３０、１２〜２８、１４〜２６、１６〜２４、１８〜２２、２０〜２１個のサブユニットを含む。さらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、大きさが二量体から４０個を超えるサブユニット（１０００万ダルトンを超える）の多量体に変化する多量体の状態で存在する。最大の多量体は、血小板受容体および内皮細胞下マトリックスの損傷部位の両方と相互に作用することができる複数の結合部位を提供し、ＶＷＦの最も止血活性が高い形態である。図２（下のパネル）中の多量体分析に示されるように、ＡＤＡＭＴＳ１３の適用は、時間が経過すると巨大ｒＶＷＦ多量体を切断するが、産生中（概して、細胞培養物における発現を通して）、本発明のｒＶＷＦ組成物は、概して、ＡＤＡＭＴＳ１３に曝露されず、その高度な多量体構造を保持する。
一実施形態において、本明細書に記載される方法において使用されるｒＶＷＦ組成物は、オリゴマーの９５％が、６個のサブユニットから２０個のサブユニットを有することを特徴とするｒＶＷＦオリゴマーの分布を有する。他の実施形態において、ｒＶＷＦ組成物は、９５％のオリゴマーが、表２中に見られる変形形態４５８〜６４１から選択される一連のサブユニットを有することを特徴とするｒＶＷＦオリゴマーの分布を有する。
（表２）組成物中に見出され、本明細書に提供される方法において使用されるｒＶＷＦオリゴマーの分布に関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
一実施形態において、ｒＶＷＦ組成物は、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在するｒＶＷＦ分子のパーセンテージに従って特徴付けることができる。例えば、一実施形態において、本明細書に記載される方法において使用されるｒＶＷＦ組成物中の少なくとも２０％のｒＶＷＦ分子は、少なくとも１０個のサブユニットのオリゴマー複合体の状態で存在する。別の実施形態において、本明細書に記載される方法において使用されるｒＶＷＦ組成物中の少なくとも２０％のｒＶＷＦ分子は、少なくとも１２個のサブユニットのオリゴマー複合体の状態で存在する。なお他の実施形態において、本明細書に提供される方法において使用されるｒＶＷＦ組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体（例えば、少なくともＹ個のサブユニットの多量体）の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する（例えば、少なくともＸ％を有する）。
（表３）組成物中に見出され、本明細書に提供される方法において使用される特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在するｒＶＷＦ分子のパーセンテージに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表４）組成物中に見出され、本明細書に提供される方法において使用される特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在するｒＶＷＦ分子のパーセンテージに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表５）組成物中に見出され、本明細書に提供される方法において使用される特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在するｒＶＷＦ分子のパーセンテージに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
上述に従って、対象に投与されたｒＶＷＦ組成物（ＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）は、概して、かなりのパーセンテージの高分子量（ＨＭＷ）のｒＶＷＦ多量体を含む。さらなる実施形態において、高分子量のｒＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも１０％〜８０％のｒＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む。さらなる実施形態において、組成物は、約１０〜９５％、２０〜９０％、３０〜８５％、４０〜８０％、５０〜７５％、６０〜７０％ の十量体またはより高次の多量体を含む。さらなる実施形態において、高分子量のｒＶＷＦ多量体組成物は、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％ の十量体またはより高次の多量体を含む。
ｒＶＷＦ多量体の数およびパーセンテージの評価は、例えば、Ｃｕｍｍｉｎｇ ｅｔ ａｌ（Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐａｔｈｏｌ．１９９３ Ｍａｙ；４６（５）：４７０−４７３、これはあらゆる目的のために、具体的には、ＶＷＦ多量体の評価に関連するあらゆる教示のために参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）によって論じられるような、サイズによってＶＷＦ多量体を分離するために電気泳動法およびサイズ排除クロマトグラフィー法を用いる方法等であるが、これに限定されない当技術分野で公知の方法を用いて行うことができる。そのような技術は、免疫ブロット法（ウェスタンブロット等）をさらに含むことができ、ゲルがＶＷＦに対する放射性標識抗体で免疫ブロットされ、それに続き化学発光により検出される（例えば、Ｗｅｎ ｅｔ ａｌ．，（１９９３），Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ．Ａｎａｌ．，７：３１７−３２３を参照されたく、これはあらゆる目的のために、具体的には、ＶＷＦ多量体の評価に関連するあらゆる教示のために参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。ＶＷＦに対するさらなるアッセイには、ＶＷＦ：抗原（ＶＷＦ：Ａｇ）、ＶＷＦ：リストセチン補因子（ＶＷＦ：ＲＣｏｆ）、およびＶＷＦ：コラーゲン結合活性アッセイ（ＶＷＦ：ＣＢＡ）が含まれ、これらは、しばしば、フォンウィルブランド病の診断および分類のために使用される（例えば、Ｆａｖａｌｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，１９９７，２９（４）：３４１−４５６を参照されたく、これはあらゆる目的のために、具体的には、ＶＷＦに対するアッセイに関連するあらゆる教示のために参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
さらなる実施形態において、本発明のより高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後約１〜約９０時間安定している。なおさらなる実施形態において、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後約５〜８０、１０〜７０、１５〜６０、２０〜５０、２５〜４０、３０〜３５時間安定している。なおさらなる実施形態において、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも３、６、１２、１８、２４、３６、４８、７２時間安定している。ある特定の実施形態において、ｒＶＷＦ多量体の安定性は、インビトロで評価される。
一実施形態において、本明細書に提供される組成物および方法において使用されるより高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも１２時間の半減期を有する。別の実施形態において、より高次のｒＶＷＦ多量体は、投与後少なくとも２４時間の半減期を有する。なお他の実施形態において、より高次のｒＶＷＦ多量体は、表６中に見られる変形形態６４２〜１０４５から選択される半減期を有する。
（表６）組成物中に見出され、本明細書に提供される方法において使用されるより高次のｒＶＷＦ多量体の半減期に関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
さらなる態様において、本発明で用いるｒＶＷＦは、血漿ＦＶＩＩＩの安定性を増大させ、これは、理解されるように、患者に投与されたｐｄＦＶＩＩまたはｒＦＶＩＩＩを含み得、または、患者に対して内因性であるＦＶＩＩＩを含み得、またはそのあらゆる組み合わせを含み得る。例えば、図２２に示されるように、血漿ＦＶＩＩＩの半減期は、ＦＶＩＩＩ（すなわち、Ａｄｖａｔｅ）を単独で受容する患者と比較して、ｒＦＶＩＩＩと組み合わせてｒＶＷＦを受容するＶＷＤ患者において増加する。さらなる実施形態において、ＦＶＩＩＩを単独で受容する患者により見られる半減期と比較して、ｒＶＷＦはＦＶＩＩＩの半減期を約１．５〜５倍増加させる。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ＦＶＩＩＩの半減期を約１．０〜４．５、１．５〜４．０、２．０〜３．５、２．５〜３．０倍増加させる。一実施形態において、ｒＶＷＦの投与は、表７中に見られる変形形態１０４６〜１０８９から選択される量で、血漿由来ＶＷＦの投与と比較して、血漿ＦＶＩＩＩの安定性を増大させる。特定の実施形態において、ｒＶＷＦ／ＦＶＩＩＩ複合体の投与は、表７中に見られる変形形態１０４６〜１０８９から選択される量で、血漿由来ＶＷＦの投与と比較して、血漿ＦＶＩＩＩの安定性を増大させる。
（表７）血漿由来ＶＷＦおよび血漿由来ＶＷＦ／ＦＶＩＩＩ複合体の投与後と比較して、ｒＶＷＦおよびｒＶＷＦ／ＦＶＩＩＩ複合体の投与後の血漿ＦＶＩＩＩで認められる半減期の増加に関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
なおさらなる実施形態において、ＦＶＩＩＩの半減期の増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００時間維持される。なおさらなる実施形態において、ＦＶＩＩＩの半減期の増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも５〜１２５、１０〜１１５、１５〜１０５、２０〜９５、２５〜８５、３０〜７５、３５〜６５、４０〜５５時間維持される。
一実施形態において、血漿ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）の増加は、ｒＶＷＦの投与後、表８中に見られる変形形態１０９０〜１２９９から選択される時間維持される。特定の実施形態において、血漿ＦＶＩＩＩの半減期の増加は、ｒＶＷＦ／ＦＶＩＩＩ複合体の投与後、表８中に見られる変形形態１０９０〜１２９９から選択される時間維持される。
（表８）ｒＶＷＦおよびｒＶＷＦ／ＦＶＩＩＩ複合体の投与後、血漿ＦＶＩＩＩの安定性が維持される時間に関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
さらなる態様において、本発明のｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦの効果と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性に対する増加した効果を示す。例えば、図２０に示されるように、ｒＶＷＦにより、ｐｄＶＷＦを受容する患者における半減期に比べ、ＦＶＩＩＩの平均半減期が５．２時間以上増加した。さらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ＦＶＩＩＩの平均半減期を約１〜１５、２〜１４、３〜１３、４〜１２、５〜１１、６〜１０、５〜９、６〜８時間増加させる。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＦＶＩＩＩの半減期を約１０％〜約７５％増加させる。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＦＶＩＩＩの半減期を約１０〜８０％、１５〜６５％、２０〜６０％、２５〜５５％、３０〜５０％、３５〜４５％増加させる。ある特定の実施形態において、ｒＶＷＦの投与は、血漿由来ＶＷＦの投与と比較して、表９中に見られる変形形態１３００〜１６４３から選択される量で、ＦＶＩＩＩの半減期を増加させる。なおさらなる実施形態において、ＦＶＩＩＩの半減期の平均またはパーセンテージの増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００時間維持される。なおさらなる実施形態において、ＦＶＩＩＩの半減期の増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも５〜１２５、１０〜１１５、１５〜１０５、２０〜９５、２５〜８５、３０〜７５、３５〜６５、４０〜５５時間維持される。
（表９）ｒＶＷＦおよびｒＶＷＦ／ＦＶＩＩＩ複合体の投与後の血漿ＦＶＩＩＩで認められる半減期の増加に関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
なおさらなる態様において、かつ上述のいずれかに従って、ｐｄＶＷＦと比較した、ｒＶＷＦによるＦＶＩＩＩ活性の安定化は、ＦＶＩＩＩ半減期に加えて、平均滞留時間（ＭＲＴ）および曲線下面積（ＡＵＣ）を含む、評価指標によって測定することができる。例示的実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＭＲＴを約１〜１５時間増加させる。さらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＭＲＴを約１〜２５、２〜２０、３〜１５、４〜１０、５〜９、６〜８時間増加させる。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＦＶＩＩＩのＭＲＴを約１０〜８０％、１５〜６５％、２０〜６０％、２５〜５５％、３０〜５０％、３５〜４５％増加させる。なおさらなる実施形態において、ＦＶＩＩＩの半減期の平均またはパーセンテージの増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００時間維持される。ある特定の実施形態において、ｒＶＷＦの投与は、血漿由来ＶＷＦの投与と比較して、表１０中に見られる変形形態１６４４〜１９８７から選択される量で、ＦＶＩＩＩのＭＲＴを増加させる。
なおさらなる実施形態において、ＭＲＴの増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも５〜１２５、１０〜１１５、１５〜１０５、２０〜９５、２５〜８５、３０〜７５、３５〜６５、４０〜５５時間維持される。ある特定の実施形態において、ｒＶＷＦの投与によって生じるＦＶＩＩＩのＭＲＴの増加は、表８中に見られる変形形態１０９０〜１２９９から選択される時間維持される。
（表１０）血漿由来ＶＷＦおよび血漿由来ＶＷＦ／ＦＶＩＩＩ複合体の投与後と比較して、ｒＶＷＦおよびｒＶＷＦ／ＦＶＩＩＩ複合体の投与後のＦＶＩＩＩの平均滞留時間の増加に関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
ｐｄＶＷＦとｒＶＷＦとのさらなる例示的な違いが、以下の表に提供される。
幾つかの実施形態において、ｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：１〜１：５である。さらなる実施形態において、この比率は、２：１〜１：４である。なおさらなる実施形態において、この比率は、５：２〜１：４である。さらなる実施形態において、この比率は、３：２〜１：３である。なおさらなる実施形態において、この比率は、約１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、２：１、２：３、２：４、２：５、３：１、３：２、３：４、または３：５である。さらなる実施形態において、この比率は、１：１〜１：２である。なおさらなる実施形態において、この比率は、１．１：１、１．２：１、１．３：１、１．４：１、１．５：１、１．６：１、１．７：１、１．８：１、１．９：１、または２：１である。ある特定の実施形態において、本明細書に記載される方法に有用な組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、表１１中に見られる変形形態１９８８〜２１４０から選択される。
（表１１）組成物中でのおよび本明細書に提供される方法において使用されるｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率に関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
特定の態様において、本発明に従って使用されるｒＶＷＦおよび／またはＦＶＩＩＩ（組換えまたは血漿由来）は、いかなる複合体化、翻訳後修飾、または共有結合修飾でも修飾されない。特定の実施形態において、本発明のｒＶＷＦおよび／またはＦＶＩＩＩは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、ポリオキシアルキレン、ポリシアル酸、ヒドロキシルエチルデンプン、ポリ炭水化物部分等を含むが、これらに限定されない、水溶性ポリマーで修飾されない。
他の態様において、本発明に従って使用されるｒＶＷＦおよび／またはＦＶＩＩＩ（組換えまたは血漿由来）は、ＮもしくはＣ末端残基の修飾、ならびに選択された側鎖、例えば、遊離スルフヒドリル基、第１級アミン、およびヒドロキシル基での修飾を含む、複合体化、翻訳後修飾、または共有結合修飾を通して修飾される。一実施形態において、水溶性ポリマーが、リジン基または他の第１級アミンによって（直接またはリンカーによって）タンパク質に結合される。一実施形態において、本発明のｒＶＷＦおよび／またはＦＶＩＩＩタンパク質は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、ポリオキシアルキレン、ポリシアル酸、ヒドロキシルエチルデンプン、ポリ炭水化物部分等を含むが、これらに限定されない、水溶性ポリマーとの複合体化によって修飾され得る。
ｒＶＷＦおよび／またはＦＶＩＩＩを修飾するために使用してもよい水溶性ポリマーには、直鎖および分岐構造が含まれる。複合体化ポリマーは、本発明の凝固タンパク質に直接結合されてもよく、または代替として結合部分を通して結合されてもよい。水溶性ポリマーによるタンパク質複合体化の非限定的な例は、米国特許第４，６４０，８３５号、第４，４９６，６８９号、第４，３０１，１４４号、第４，６７０，４１７号、第４，７９１，１９２号、および第４，１７９，３３７、ならびにＡｂｕｃｈｏｗｓｋｉ ａｎｄ Ｄａｖｉｓ"Ｅｎｚｙｍｅｓ ａｓ Ｄｒｕｇｓ，"Ｈｏｌｃｅｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ｅｄｓ．，ｐｐ．３６７ ３８３，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８１）、およびＨｅｒｍａｎｓｏｎ Ｇ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２ｎｄ Ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．２００８において見出され得る。
タンパク質複合体化は、当技術分野で多くの公知の技術によって行うことができ、例えば、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ Ｇ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２ｎｄ Ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．２００８を参照されたい。事例には、凝固タンパク質もしくは水溶性ポリマー部分のうちの一方のカルボキシル基と他方のアミン基の間のペプチド結合、または一方のカルボキシル基と他方のヒドロキシル基の間のエステル結合による結合が含まれる。本発明の凝固タンパク質を水溶性ポリマー化合物と複合体化し得る別の結合は、シッフ塩基を介する、過ヨウ素酸塩酸化によりポリマーの非還元末端で形成されるアルデヒド基と反応するポリマー部分の遊離アミノ基間の結合である（Ｊｅｎｎｉｎｇｓ ａｎｄ Ｌｕｇｏｗｓｋｉ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８１；１２７：１０１１−８、Ｆｅｍａｎｄｅｓ ａｎｄ Ｇｒｅｇｏｎｒａｄｉｓ，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ．１９９７；１３４１；２６−３４）。生成したシッフ塩基を、ＮａＣＮＢＨ３による特異的還元によって安定化し、第２級アミンを形成することができる。代替のアプローチは、事前酸化後のＮＨ４Ｃｌを用いた還元的アミン化による、ポリマー上での末端遊離アミノ基の生成である。２つのアミノ基または２つのヒドロキシル基を結合するために、二官能性試薬を使用することができる。例えば、アミノ基を含有するポリマーを、ＢＳ３（ビス（スルホスクシンイミジル）スベレート／Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ．）のような試薬を用いて凝固タンパク質のアミノ基に結合することができる。加えて、アミン基およびチオール基を結合するために、スルホ−ＥＭＣＳ（Ｎ−ε−マレインイミドカプロイルオキシ）スルホスクシンイミドエステル／Ｐｉｅｒｃｅ）等のヘテロ二官能性架橋結合試薬を使用することができる。他の実施形態において、ＰＥＧアルコキシド＋ブロモアセトアルデヒドのジエチルアセタール；ＰＥＧ＋ＤＭＳＯおよび無水酢酸、およびＰＥＧクロリド＋４−ヒドロキシベンズアルデヒドのフェノキシド、スクシンイミジル活性エステル、活性化ジチオカーボネートＰＥＧ、２，４，５−トリクロロフェニルクロロホルメートおよびＰ−ニトロフェニルクロロホルメート活性化ＰＥＧ等のアルデヒド反応基が、凝固タンパク質の共役において使用されてもよい。
幾つかの態様において、本発明の方法において使用されるｒＶＷＦは、フーリンによってインビトロで成熟されている。さらなる実施形態において、フーリンは、組換えフーリンである。
さらなる態様において、本発明の方法において使用されるｒＶＷＦおよび／またはｒＦＶＩＩＩは、当技術分野で周知の方法を用いて哺乳動物細胞培養物における発現を介して産生される。特定の実施形態において、哺乳動物の培養物は、ＣＨＯ細胞を含む。さらなる実施形態において、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩは、同じ培養物において共発現される。そのような実施形態において、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩは、当技術分野で周知の方法を用いて一緒に精製される（同時精製される）か、または別々に精製される。他の実施形態において、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩは、異なる培養物において発現される。
例示的実施形態において、本発明のｒＶＷＦは、ＣＨＯ細胞発現系から単離されたｒＶＷＦタンパク質を含む。さらなる実施形態において、プロペプチド除去は、フーリンへのプロＶＷＦの曝露によってインビトロで媒介され、なおさらなる実施形態において、プロペプチド除去のために使用されるフーリンは、組換えフーリンである。なおさらなる実施形態において、完全にグリコシル化された／ＡＢＯ血液型グリカンが不在である。
なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、好適な真核宿主系での発現によって本発明の方法および組成物において使用される。真核細胞の例としては、ＣＨＯ、ＣＯＳ、ＨＥＫ２９３、ＢＨＫ、ＳＫ−Ｈｅｐ、およびＨｅｐＧ２等の哺乳動物細胞、ＳＦ９細胞、ＳＦ２１細胞、Ｓ２細胞、およびＨｉｇｈ Ｆｉｖｅ細胞等の昆虫細胞、ならびにサッカロミセス（Saccharomyces）属もしくはシゾサッカロミセス(Schizosaccharomyces)細胞等の酵母細胞が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態において、ＶＷＦは、酵母細胞、昆虫細胞、鳥類細胞、哺乳動物細胞等において発現され得る。例えば、ヒト細胞株、ハムスター細胞株、またはマウス細胞株において発現され得る。ある特定の実施形態において、この細胞株は、ＣＨＯ、ＢＨＫ、またはＨＥＫ細胞株である。典型的には、哺乳動物細胞、例えば、連続細胞株からのＣＨＯ細胞を、本発明のＶＷＦを発現するために使用することができる。
ある特定の実施形態において、ＶＷＦをコードする配列を含む核酸配列はベクターであり得る。ベクターは、ウイルスによって送達され得るか、またはプラスミドであり得る。タンパク質をコードする核酸配列は、特異的遺伝子またはその生物学的な機能を持つ一部であり得る。一実施形態において、タンパク質は、ＶＷＦの少なくとも生物学的に活性な部分である。
広範な範囲のベクターが、ＶＷＦの発現のために使用可能であり、真核生物発現ベクターから選択することができる。真核生物発現のためのベクターの例としては、（ｉ）酵母における発現では、ＡＯＸ１、ＧＡＰ、ＧＡＬ１、ＡＵＧ１等のプロモーターを用いた、ｐＡＯ、ｐＰＩＣ、ｐＹＥＳ、ｐＭＥＴ等のベクター、（ｉｉ）昆虫細胞における発現では、ＰＨ、ｐ１０、ＭＴ、Ａｃ５、ＯｐＩＥ２、ｇｐ６４、ｐｏｌｈ等のプロモーターを用いたｐＭＴ、ｐＡｃ５、ｐＩＢ、ｐＭＩＢ、ｐＢＡＣ等のベクター、および（ｉｉｉ）哺乳動物細胞における発現では、ｐＳＶＬ、ｐＣＭＶ、ｐＲｃ／ＲＳＶ、ｐｃＤＮＡ３、ｐＢＰＶ等のベクター、ならびにＣＭＶ、ＳＶ４０、ＥＦ−１、ＵｂＣ、ＲＳＶ、ＡＤＶ、ＢＰＶ、およびβ−アクチン等のプロモーターを用いた、ワクシニアウイルス、アデノ関連ウイルス、ヘルペスウイルス、レトロウイルス等のウイルス系由来のベクターを含む。
本発明の幾つかの実施形態において、核酸配列は、プロモーター配列、エンハンサー、ＴＡＴＡボックス、転写開始部位、ポリリンカー、制限部位、ポリ−Ａ−配列、タンパク質のプロセシング配列、選択マーカー等、通常、当業者に周知であるタンパク質の制御された発現に適する、他の配列をさらに含む。
ある特定の実施形態において、本発明の細胞培養法は、マイクロキャリアの使用を含み得る。幾つかの実施形態において、実施形態の細胞培養は、高い細胞密度およびタンパク質発現を達成するために、高容量の特定の培養表面積を提供するのに適した条件下で、大型のバイオリアクター中で実施され得る。そのような増殖条件を提供するための一手段は、撹拌タンク型バイオリアクターにおいて、細胞培養用のマイクロキャリアを使用することである。マイクロキャリア上での細胞増殖の概念は、最初にｖａｎ Ｗｅｚｅｌ（ｖａｎ Ｗｅｚｅｌ，Ａ．Ｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ２１６：６４−５（１９６７））によって説明され、増殖培地中に懸濁した固形小粒子の表面上への細胞付着が可能である。これらの方法は、高い表面対体積比を提供し、それ故に、効率的な栄養利用を可能にする。さらに、真核細胞系における分泌タンパク質の発現において、増加した表面対体積比は、高レベルの分泌を可能にし、ひいては、培養物上清中のタンパク質の高収率を可能にする。最終的に、これらの方法は、真核生物発現培養の容易なスケールアップを可能にする。
ＶＷＦを発現する細胞は、細胞培養で増殖中に、球形または多孔質のマイクロキャリアに結合され得る。マイクロキャリアは、デキストラン、コラーゲン、プラスチック、ゼラチン、およびセルロース、ならびにＢｕｔｌｅｒ（１９８８．Ｉｎ：Ｓｐｉｅｒ＆Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ３：２８３−３０３）に記載される他のものに基づくマイクロキャリアの群から選択されるマイクロキャリアであり得る。球形マイクロキャリア上で細胞をバイオマスに増殖させることができ、それらが最終の発酵槽レベルのバイオマスに達した時、かつ多孔質マイクロキャリア上で発現タンパク質を産生する前に、細胞を継代培養することも可能であり、またはその逆も可能である。好適な球形マイクロキャリアは、Ｃｙｔｏｄｅｘ（商標）１、Ｃｙｔｏｄｅｘ（商標）２、およびＣｙｔｏｄｅｘ（商標）３（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）等の平滑表面のマイクロキャリア、ならびにＣｙｔｏｐｏｒｅ（商標）１、Ｃｙｔｏｐｏｒｅ（商標）２、Ｃｙｔｏｌｉｎｅ（商標）１、およびＣｙｔｏｌｉｎｅ（商標）２（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）等のマクロ多孔質マイクロキャリアを含み得る。
ある特定の実施形態において、ｒＶＷＦは、高分子量のｒＶＷＦを産生する細胞培養培地において培養された細胞中で発現する。「細胞培養液」、「細胞培養培地または培地」、および「細胞培養上清」という用語は、当技術分野で一般的に公知の細胞培養プロセスの側面を指す。本発明の文脈において、細胞培養液は、細胞培養用の培養培地および細胞培養上清を含むことができる。細胞培養培地を、外部から細胞培養液に、任意で補充物質と一緒に添加して、ＶＷＦを発現する細胞を培養するための栄養物質および他の成分を提供する。細胞培養上清は、細胞培養培地からの栄養物質および他の成分、ならびに培養中に細胞から放出、代謝、および／または排出される産物を含む、細胞培養液を指す。さらなる実施形態において、培地は、動物性タンパク質を含まない、既知組成であり得る。動物性タンパク質を含まない既知組成の培養培地を調製する方法は、例えば、米国特許出願公開第２００８／０００９０４０号および同第２００７／０２１２７７０号等、当技術分野で周知であり、これらは共に、あらゆる目的のために、具体的には、細胞培養培地に関連するあらゆる教示のために本明細書に組み込まれる。「タンパク質を含まない」および関連用語は、培養物中の細胞に対して外因性であるか、またはその細胞以外の供給源由来のタンパク質について、増殖中にそもそもそのタンパク質が除かれていることを指す。別の実施形態において、培養培地は、ポリペプチドを含まない。別の実施形態において、培養培地は、血清を含まない。別の実施形態において、培養培地は、動物性タンパク質を含まない。別の実施形態において、培養培地は、動物性成分を含まない。別の実施形態において、培養培地は、タンパク質、例えば、ウシ胎仔血清等の血清からの動物性タンパク質を含有する。別の実施形態において、培地は、外因的に追加された組換えタンパク質を有する。別の実施形態において、タンパク質は、認定された病原菌を含まない動物由来である。本明細書で使用される、「既知組成」という用語は、培地が、例えば、動物成分、器官、腺、植物、または酵母の抽出物のようないかなる規定されない補充物質も含まないことを意味する。したがって、既知組成培地のそれぞれの成分は、厳密に規定される。好ましい実施形態において、培地は、動物成分を含まず、タンパク質を含まない。
ある特定の実施形態において、ＶＷＦを発現する細胞の培養物は、少なくとも約７日間、または少なくとも約１４日間、２１日間、２８日間、または少なくとも約５週間、６週間、７週間、または少なくとも約２ヶ月間、もしくは３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８ヶ月もしくはそれ以上維持され得る。組換えＶＷＦタンパク質の産生のために細胞培養物が維持される細胞密度は、タンパク質発現に使用される培養条件および培地に依存する。当業者は、ＶＷＦを産生する細胞培養物の最適な細胞密度を容易に決定することができるだろう。一実施形態において、培養物は、長期間、約０．５×１０６〜４×１０７細胞／ｍＬの密度で維持される。他の実施形態において、細胞密度は、長期間、約１．０×１０６〜約１．０×１０７細胞／ｍＬの濃度で維持される。他の実施形態において、細胞密度は、長期間、約１．０×１０６〜約４．０×１０６細胞／ｍＬの濃度で維持される。他の実施形態において、細胞密度は、長期間、約１．０×１０６〜約４．０×１０６細胞／ｍＬの濃度で維持される。なお他の実施形態において、細胞密度は、長期間、約２．０×１０６〜約４．０×１０６、または約１．０×１０６〜約２．５×１０６、または約１．５×１０６〜約３．５×１０６、またはあらゆる他の類似する範囲の濃度で維持される。細胞培養における適切な時間後、ｒＶＷＦは、当技術分野で周知の方法を用いて発現系から単離され得る。
特定の実施形態において、ｒＶＷＦの産生のための連続細胞培養の細胞密度は、長期間、２．５×１０６細胞／ｍＬを超えない濃度で維持される。他の特定の実施形態において、細胞密度は、２．０×１０６細胞／ｍＬを超えない、１．５×１０６細胞／ｍＬを超えない、１．０×１０６細胞／ｍＬを超えない、０．５×１０６細胞／ｍＬを超えない、もしくはそれ未満を超えない密度で維持される。一実施形態において、細胞密度は、１．５×１０６細胞／ｍＬ〜２．５×１０６細胞／ｍＬで維持される。
上述の細胞培養物の特定の一実施形態において、細胞培養液は、銅を含む培地補充物質を含む。そのような細胞培養液は、例えば、２０１１年７月８日に出願された米国特許出願公開第２０１２／００３５１１０号に記載され、これはあらゆる目的のために、具体的には、組換えＶＷＦを産生するための細胞培養法および組成物に関連するあらゆる教示のために参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
さらなる実施形態において、哺乳動物細胞培養物から（別々にまたは一緒に）精製した後、ｒＦＶＩＩＩ／ｒＶＷＦ複合体は、投与前に再構成される。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ｒＦＶＩＩＩ／ｒＶＷＦ複合体の再構成前またはその後、フーリンで処理される。さらなる実施形態において、フーリンは、組換えフーリンである。
なおさらなる実施形態において、本発明のｒＶＷＦは、ＡＤＡＭＴＳ１３に曝露されず、その結果、巨大な（すなわち、１０個以上のサブユニットを含む）ｒＶＷＦが、本発明のｒＶＷＦ組成物中に存在する。
特定の態様において、本発明の方法において使用されるｒＶＷＦおよび／またはｒＦＶＩＩＩは、緩衝液、糖および／または糖アルコール（トレハロースおよびマンニトールを含むが、これらに限定されない）、安定剤（グリシン等）、および界面活性剤（ポリソルベート８０等）を含有する製剤中に含有される。ｒＦＶＩＩＩを含有する製剤のためのさらなる実施形態において、製剤は、ナトリウム、ヒスチジン、カルシウム、およびグルタチオンをさらに含み得る。
一態様において、ｒＶＷＦおよび／またはｒＦＶＩＩＩを含む製剤は、投与前に凍結乾燥される。凍結乾燥は、当技術分野で一般的な技術を用いて行われ、開発される組成物向けに最適化されるべきである［Ｔａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ．２１：１９１−２００，（２００４）およびＣｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ．１３：２４３−９（１９９６）］。
薬学的製剤を調製する方法は、凍結乾燥前に、該混合物に本明細書に記載される安定剤を添加する段階、増量剤、浸透圧調整剤、および界面活性剤（これらのそれぞれは本明細書に記載される）から選択される少なくとも１つの薬剤を凍結乾燥前に該混合物に添加する段階の１つまたはそれ以上の段階を含み得る。一態様において、凍結乾燥された製剤は、少なくとも緩衝液、増量剤、および安定剤のうちの１つ以上からなる。この態様において、凍結乾燥ステップ中または再構成中に凝集が問題になる場合に、界面活性剤の有用性を評価し、選択する。凍結乾燥中に、製剤をｐＨの安定領域内に維持するために、適切な緩衝剤が含まれる。
凍結乾燥された物質の標準的な再構成の実施は、純水または注射用滅菌水（ＷＦＩ）の一定量（典型的には凍結乾燥中に除去した量と同等量）を戻し加えるものであるが、非経口投与用の調合薬の作製では抗菌剤の希薄溶液を使用する場合もある［Ｃｈｅｎ，Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ，１８：１３１１−１３５４（１９９２）］。したがって、希釈剤を本発明の凍結乾燥された再構成されたＶＷＦ組成物に添加するステップを含む、再構成された組換えＶＷＦ（組換え第ＶＩＩＩ因子を伴うかまたは伴わない）組成物を調製するための方法が提供される。
凍結乾燥された物質は、水溶液として再構成され得る。様々な水性担体、例えば、注射用滅菌水、複数回投与で使用するための保存剤を含む水、または適切な量の界面活性剤を含む水（例えば、水性懸濁液の製造に適した賦形剤との混合で、活性な化合物を含む水性懸濁液）。様々な態様において、そのような賦形剤は、懸濁剤、例えば、限定されないが、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、およびアラビアゴムであり、分散剤または湿潤剤は、天然に存在するホスファチド、例えば、限定されないが、レシチン、またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合物、例えば、限定されないが、ステアリン酸ポリオキシエチレン、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合物、例えば、限定されないが、ヘプタデカエチル−エネオキシセタノール、またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールから得られた部分エステルとの縮合物、例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート、またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物から得られた部分エステルとの縮合物、例えば、限定されないが、ポリエチレンソルビタンモノオレエートである。様々な態様において、水性懸濁液は、１つ以上の保存剤、例えば、限定されないが、エチル、またはｎ−プロピル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸塩も含む。
ある特定の実施形態において、本発明の組成物は、注射器または他の保存容器を用いた投与のための液体製剤である。さらなる実施形態において、これらの液体製剤は、水溶液として再構成された本明細書に記載される凍結乾燥された物質から生成される。
さらなる態様において、本発明の組成物は、１つ以上の薬学的に許容される担体をさらに含む。「薬学的」または「薬理学的に」許容されるという表現は、安定しており、凝集および切断生成物等のタンパク質分解を阻害し、さらに以下に説明される、当技術分野で公知の経路を用いて投与されるときに、アレルギー反応または他の有害反応をもたらさない、分子の実体および組成物を指す。「薬学的に許容される担体」としては、上で開示された薬剤を含む、任意およびすべての臨床的に有用な溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤等が含まれる。
疾患を治療する方法のための本発明の組成物の投与
凝固疾患を治療するために対象にｒＶＷＦを投与する利点の１つは、ｐｄＶＷＦと比較してｒＶＷＦのより高い比活性が、投与されるｒＶＷＦの量および対象にｒＶＷＦ（同時投与のＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）を再投与する回数に柔軟性を持たせることである。加えて、ｒＶＷＦ組成物は、ＦＶＩＩＩを含むさらなる投与を必要とすることなく、ｒＶＷＦおよびＦＶＩＩＩの初回同時投与後、ｒＶＷＦを単独で再投与するさらなる柔軟性を提供する。本明細書で理解されるように、そして本明細書でさらに詳述されるように、同時投与されるＦＶＩＩＩは、組換えまたは血漿由来であり得る。
凝固疾患を治療するために対象にｒＶＷＦを投与する利点の１つは、ｐｄＶＷＦと比較してｒＶＷＦのより高い比活性が、投与されるｒＶＷＦの量および対象にｒＶＷＦ（同時投与のＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）を再投与する回数に柔軟性を持たせることである。加えて、ｒＶＷＦ組成物は、ＦＶＩＩＩを含むさらなる投与を必要とすることなく、ｒＶＷＦおよびＦＶＩＩＩの初回同時投与後、ｒＶＷＦを単独で再投与するさらなる柔軟性を提供する。本明細書で理解されるように、そして本明細書でさらに詳述されるように、同時投与されるＦＶＩＩＩは、組換えまたは血漿由来であり得る。
一態様において、本発明に従って、ｒＶＷＦの投与は、ｐｄＶＷＦを投与される対象で見られるものよりも対象においてより高い血漿ＦＶＩＩＩレベルおよび／または活性をもたらす。上述のように、ＦＶＩＩＩレベルおよび活性の増加は、当技術分野で標準的な方法を用いて測定することができ、そのため、ＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わないｒＶＷＦに関する適切な投与量の決定を可能にする。
ｒＶＷＦ（ＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）の単回または複数回投与は、治療する医師によって選択される用量レベルまたはパターンで実行される。疾患の予防または治療では、適切な投与量は、治療すべき疾患（例えば、フォンウィルブランド病）の型、疾患の重症度および経過、薬物が予防または治療目的のために投与されているか、治療歴、患者の病歴および薬物への応答、ならびに担当医の裁量に依存する。
さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ＶＷＤまたは血友病Ａ等の凝固疾患の治療は、単独でまたはＦＶＩＩＩと組み合わせたｒＶＷＦの初回治療、続いて、ｒＶＷＦを単独で、ｒＶＷＦとＦＶＩＩＩを一緒に、またはＦＶＩＩＩを単独で１つ以上の反復投与を含み得る。初回投与、次いで、その後の反復投与の性質は、治療すべき疾患にある程度依存するであろう。例えば、ＶＷＤに罹患している患者は、あるレベルのＦＶＩＩＩを有するが、これらの患者がＶＷＦを欠乏しているため、そのＦＶＩＩＩの安定性は、概して、損なわれる。したがって、ＶＷＤ患者の治療は、幾つかの実施形態において、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの両方による初回治療、続いて、単独でのｒＶＷＦの反復投与を含み得る。他の実施形態において、初回治療は、単独でｒＶＷＦを用いて行われ得るが、その後の反復投与は、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの両方を用いて行われる。さらに他の実施形態において、初回およびその後の反復投与はすべて、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの両方の同時投与を含み得る。同様に、血友病Ａ患者（ＦＶＩＩＩを欠いている）は、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの両方の初回治療を受けてもよく、その後の反復治療は、単独でｒＦＶＩＩＩまたは単独でｒＶＷＦの投与を含んでもよい。他の実施形態において、初回治療は、単独でのｒＦＶＩＩＩであってもよいが、その後の反復治療は、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩの同時投与を含む。
さらなる態様において、ｒＶＷＦは、対象に、０．５ＩＵ／ｋｇ〜２００ＩＵ／ｋｇの範囲の用量で投与される。幾つかの実施形態において、ｒＶＷＦは、１〜１９０、５〜１８０、１０〜１７０、１５〜１６０、２０〜１５０、２５〜１４０、３０〜１３０、３５〜１２０、４０〜１１０、４５〜１００、５０〜９０、５５〜８０、または６０〜７０ＩＵ／ｋｇの範囲の用量で投与される。さらなる実施形態において、かつ上述のいずれかに従って、ｒＶＷＦ（ＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）は、対象に、約１ＩＵ／ｋｇ〜約１５０ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦの用量で投与される。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩは、１．５ＩＵ／ｋｇ〜１５０ＩＵ／ｋｇ、２ＩＵ／ｋｇ〜５０ＩＵ／ｋｇ、５ＩＵ／ｋｇ〜４０ＩＵ／ｋｇ、１０ＩＵ／ｋｇ〜２０ＩＵ／ｋｇ、１０ＩＵ／ｋｇ〜１００ＩＵ／ｋｇ、２５ＩＵ／ｋｇ〜７５ＩＵ／ｋｇ、および４０ＩＵ／ｋｇ〜７５ＩＵ／ｋｇの用量で投与される。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、２、５、７．５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０ＩＵ／ｋｇで投与される。本明細書で理解されように、そしてさらに論じられるように、ｒＶＷＦ（またはＦＶＩＩＩを伴うｒＶＷＦ）の適切な投与量は、適切な用量反応データに従って血液レベルの投与量を決定するために構築されたアッセイの使用によって確認され得る。一実施形態において、ｒＶＷＦは、対象に、表１２中の変形形態２１４１〜２３３８から選択される用量で投与される。
（表１２）本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるｒＶＷＦの投与量に関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、血漿ＦＶＩＩＩの半減期を約１．０〜４．５、１．５〜４．０、２．０〜３．５、２．５〜３．０倍増加させるような用量で投与される。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦ投与の用量および／または頻度は、ＦＶＩＩＩの半減期の増加が、ｒＶＷＦの投与後少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００時間維持されるものである。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦ投与の用量および／または頻度は、ＦＶＩＩＩの半減期の増加が、ｒＶＷＦの投与後少なくとも５〜１２５、１０〜１１５、１５〜１０５、２０〜９５、２５〜８５、３０〜７５、３５〜６５、４０〜５５時間維持されるものである。一実施形態において、ｒＶＷＦは、表７中に見られる変形形態１０４６〜１０８９から選択される値で、血漿ＦＶＩＩＩの半減期を増加させるような用量で投与される。
上述のように、本発明のｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦの効果と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性に対する増加した効果を示す。ある特定の態様において、ｒＶＷＦは、ＦＶＩＩＩの平均半減期を約１〜１５、２〜１４、３〜１３、４〜１２、５〜１１、６〜１０、５〜９、６〜８時間増加させるような用量および／または頻度で投与される。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＦＶＩＩＩの半減期を約１０％〜約７５％増加させるような用量および／または頻度で投与される。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＦＶＩＩＩの半減期を約１０〜８０％、１５〜６５％、２０〜６０％、２５〜５５％、３０〜５０％、３５〜４５％増加させる。なおさらなる実施形態において、ＦＶＩＩＩの半減期の平均またはパーセンテージの増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００時間維持される。なおさらなる実施形態において、ＦＶＩＩＩの半減期の増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも５〜１２５、１０〜１１５、１５〜１０５、２０〜９５、２５〜８５、３０〜７５、３５〜６５、４０〜５５時間維持される。理解されるように、ＦＶＩＩＩの安定性、半減期、および／または活性の増加は、凝固アッセイを含むが、これに限定されない、当技術分野で周知の方法を用いて評価することができる。他の実施形態において、ｒＶＷＦの投与は、血漿由来ＶＷＦの投与と比較して、表９中に見られる変形形態１３００〜１６４３から選択される量で、ＦＶＩＩＩの半減期を増加させる。
本明細書で論じられるように、ｐｄＶＷＦと比較して、ｒＶＷＦによるＦＶＩＩＩ活性の安定化は、ＦＶＩＩＩの半減期に加えて、平均滞留時間（ＭＲＴ）および曲線下面積（ＡＵＣ）を含む、評価指標によって測定することができる。例示的実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＭＲＴを約１〜１５時間増加させるような用量および／または頻度で投与される。さらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＭＲＴを約１〜２５、２〜２０、３〜１５、４〜１０、５〜９、６〜８時間増加させる。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦと比較して、ＦＶＩＩＩのＭＲＴを約１０〜８０％、１５〜６５％、２０〜６０％、２５〜５５％、３０〜５０％、３５〜４５％増加させる。なおさらなる実施形態において、ＦＶＩＩＩの半減期の平均またはパーセンテージの増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００時間維持される。なおさらなる実施形態において、ＭＲＴの増加は、ｒＶＷＦの投与後少なくとも５〜１２５、１０〜１１５、１５〜１０５、２０〜９５、２５〜８５、３０〜７５、３５〜６５、４０〜５５時間維持される。他の実施形態において、ｒＶＷＦの投与は、血漿由来ＶＷＦの投与と比較して、表９中に見られる変形形態１３００〜１６４３から選択される量で、ＦＶＩＩＩのＭＲＴを増加させる。
さらなる態様において、患者に投与されるｒＶＷＦの用量は、ｐｄＶＷＦ／ｐｄＦＶＩＩＩの投与において使用される用量と同程度である。
ＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わないｒＶＷＦの組成物は、本明細書に記載されるように、薬学的製剤中に含有され得る。そのような製剤は、経口的、局所的、経皮的、非経口的、吸引スプレーによって、経膣的、経直腸的、または頭蓋内注射によって、投与され得る。本明細書で使用される非経口という用語には、皮下注射、静脈注射、筋肉内注射、胸骨内注射、または注入技法が含まれる。静脈内、皮下、筋肉内、乳房内、腹腔内、髄腔内、眼球後、肺内注射、およびまたは特定の部位での外科的移植による投与も企図される。一般に、組成物は、発熱物質、ならびに受容者に有害である可能性がある他の不純物を本質的に含んでいない。
一態様において、本発明の製剤は、初回ボーラス投与によって投与され、その後に薬物生成物の治療的循環レベルを維持するための持続注入が続く。別の例として、本発明の化合物は、単回投与として投与される。当業者は、良好な医療行為および個々の患者の臨床状態によって決定される有効量および投与計画を容易に最適化するであろう。投与経路は、静脈内、腹腔内、皮下、または筋肉内投与によるものであり得るが、これらに限定されない。投与の頻度は、薬剤の薬物動態パラメータおよび投与経路に依存する。最適な薬学的製剤は、投与経路および所望の投与量に応じて当業者によって決定される。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ Ｅｄ．，１９９０，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．１８０４２ ｐａｇｅｓ １４３５〜１７１２を参照されたく、この開示は、あらゆる目的のために、具体的には、製剤、投与経路、および薬学的生成物の投与量に関連するあらゆる教示のために参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。そのような製剤は、投与される薬剤の物理的状態、安定性、インビボでの放出速度、およびインビボでのクリアランス速度に影響し得る。投与経路に応じて、体重、体表面積、または器官の大きさによって好適な用量が、算出される。適切な投与量は、適切な用量反応データに併せて血液レベルの投与量を決定するために構築されたアッセイの使用により確認され得る。最終的な投与計画は、薬剤の作用を変える様々な要因、例えば、薬剤の比活性、損傷の重症度、患者の応答性、患者の年齢、状態、体重、性別、および食事、任意の感染の重症度、投与時間、ならびに他の臨床学的因子を考慮して、担当医によって決定される。例として、本発明の組換えＶＷＦの一般的な用量は、約５０Ｕ／ｋｇであり、５００μｇ／ｋｇに等しい。研究が行われると、様々な疾患および状態に対する適切な投与量レベルおよび治療期間に関するさらなる情報が浮上するであろう。
幾つかの実施形態において、ｒＶＷＦは、単独で、対象に投与される。幾つかの実施形態において、ｒＶＷＦは、１つ以上の凝固因子と組み合わせて、対象に投与される。さらなる実施形態において、ｒＶＷＦと共に投与される凝固因子は、ＦＶＩＩＩである。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦは、ＦＶＩＩＩ等の凝固因子より前、その後、または同時に投与される。ある特定の実施形態において、ｒＶＷＦおよびＦＶＩＩＩは、単一組成物中で一緒に投与される。理解されるように、ｒＶＷＦと同時投与されるＦＶＩＩＩは、組換えＦＶＩＩＩまたは血漿由来のいずれかであり得る。
さらなる実施形態において、ｒＶＷＦ（ＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）が、対象に、１日１回を超えない頻度で投与される。さらなる実施形態において、ｒＶＷＦ（ＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）が、対象に、１日おきに１回を超えない頻度、２日おきに１回を超えない頻度、３日おきに１回を超えない頻度、４日おきに１回を超えない頻度、週に１回を超えない頻度、隔週１回を超えない頻度、１ヶ月に１回を超えない頻度で投与される。なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦ（ＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）が、対象に、１日２回を超えない頻度で投与される。
さらなる実施形態において、ｒＶＷＦおよびＦＶＩＩＩは、初回投与において、対象に一緒に投与され、次いで、その後のｒＶＷＦによる再投与が単独で行われる。他の実施形態において、ｒＶＷＦおよびＦＶＩＩＩの両方による再投与が行われる。
なおさらなる実施形態において、ｒＶＷＦ（ｒＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）が、血漿ＦＶＩＩＩ活性を約１０〜約９０時間安定化させるような用量で投与される。さらなる実施形態において、血漿ＦＶＩＩＩ活性は、少なくとも１２、２４、３６、４８、または７２時間安定化される。理解されるように、安定化された血漿ＦＶＩＩＩ活性は、内因性ＦＶＩＩＩ、同時投与されたＦＶＩＩＩ（血漿由来もしくは組換え）、または内因性ＦＶＩＩＩと同時投与されたＦＶＩＩＩの両方の組み合わせのものであり得る。
幾つかの実施形態において、ｒＶＷＦおよびＦＶＩＩＩは、血漿ＦＶＩＩＩ活性のインビボ半減期の延長を少なくとも１２、２４、３６、４８、または７２時間安定するような用量で一緒に投与される。さらなる実施形態において、血漿ＦＶＩＩＩ活性は、約１０〜約９０時間安定する。なおさらなる実施形態において、血漿ＦＶＩＩＩの半減期の増加は、患者において、少なくとも２４、３６、４８、７２、９０、１２０、または１６８時間維持される。同時投与されるＦＶＩＩＩは、ｒＦＶＩＩＩまたはｐｄＦＶＩＩＩであり得る。幾つかの実施形態において、血漿ＦＶＩＩＩ活性は、ｒＶＷＦおよびＦＶＩＩＩの同時投与後、表８中に見られる変形形態１０９０〜１２９９から選択される時間安定している。
好ましい態様において、本発明は、血友病およびフォンウィルブランド病（ＶＷＤ）を含む、凝固疾患を治療するための方法を提供する。
本明細書で使用される、「血友病（ｈｅｍｏｐｈｉｌｉａ）」または「血友病（ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉａ）」という用語は、血液の凝固（ｃｌｏｔｔｉｎｇ）または凝固（ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ）の減少によって広く特徴付けられる病態群を指す。血友病は、Ａ型、Ｂ型、またはＣ型血友病、または３つすべての疾患型の複合型を指し得る。Ａ型血友病（血友病Ａ）は、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）活性の減少または損失により引き起こされ、血友病サブタイプのうちで最も顕著なものである。Ｂ型血友病（血友病Ｂ）は、第ＩＸ因子（ＦＩＸ）凝固機能の損失または減少によって起こる。Ｃ型血友病（血友病Ｃ）は、第ＸＩ因子（ＦＸＩ）凝固活性の損失または減少の結果である。血友病ＡおよびＢは、Ｘ連鎖疾患であるが、血友病Ｃは、常染色体性である。血友病の一般的な治療は、Ｂｅｂｕｌｉｎ（登録商標）ＶＨ、およびＦＸＩを含むＦＶＩＩＩ、ＦＩＸ等の凝固因子、ならびにＦＥＩＢＡ−ＶＨ、デスモプレシンの予防的およびオンデマンド投与の両方、および血漿注入を含む。
本明細書で使用される、「フォンヴィレブランド病」は、フォンヴィレブランド因子の欠乏によって生じる疾患群を指す。フォンヴィレブランド因子は、血小板が凝集し、正常な血液凝固に必要な血液壁に付着するのを助長する。幾つかの型のフォンヴィレブランド病がある。以下の表は、異なる型のＶＷＤの特徴を要約する。
Ｓａｄｌｅｒ，Ｊ Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ ２００６；４，２１０３から採用された。
凝固疾患を治療するための方法は、本明細書に記載される、および当技術分野で周知の投与方法のいずれかに従って、治療を必要とする対象にｒＶＷＦまたはｒＶＷＦとｒＦＶＩＩＩの組み合わせを投与することを含む。そのような対象は、フォンウィルブランド病または血友病等であるが、これらに限定されない、あらゆる凝固疾患に罹患し得る。理解されるように、上表に列記されるいずれの型をも含む、いずれの型のフォンウィルブランド病も、本明細書に記載される方法および組成物のいずれかに従って治療することができる。
幾つかの実施形態において、投与から２４、３６、４８時間またはそれより長い期間後の対象の血漿中の第ＶＩＩＩ因子凝固促進活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）レベルが、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性レベルの少なくとも９０％であるように、ｒＶＷＦ（ｒＦＶＩＩＩを伴うかまたは伴わない）が対象に投与される。さらなる実施形態において、投与から２４、３６、４８時間またはそれより長い期間後の対象の血漿中のＦＶＩＩＩ：Ｃレベルが、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性レベルの少なくとも５０％〜１００％である。なおさらなる実施形態において、投与から２４、３６、４８時間またはそれより長い期間後の対象の血漿中のＦＶＩＩＩ：Ｃレベルは、投与から１時間後に血漿中に存在するＦＶＩＩＩ：Ｃ活性レベルの少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％である。
ｒＶＷＦの投与
一態様において、本開示は、治療を必要とする対象におけるフォンウィルブランド病（ＶＷＤ）または血友病Ａを治療するための方法であって、血漿由来フォンウィルブランド因子（ｐｄＶＷＦ）の組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）の安定性が増大するように、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）の組成物を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一態様において、本開示は、治療を必要とする対象におけるフォンウィルブランド病（ＶＷＤ）または血友病Ａを治療するための方法であって、血漿由来フォンウィルブランド因子（ｐｄＶＷＦ）の組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）の安定性が増大するように、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）の組成物を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性が、少なくとも１０％、２０％、３０％、２時間、４時間、６時間、または表９中に見られる変形形態１３００〜１６４３から選択される量で延長されるように、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含む。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性が少なくとも１０％延長されるように、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性が少なくとも２０％延長されるように、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性が少なくとも３０％延長されるように、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
（表１３）本明細書で使用される組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表１４）本明細書で使用される組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表１５）本明細書で使用される組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表１６）本明細書で使用される組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表１７）本明細書で使用される組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表１８）本明細書で使用される組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表１９）本明細書で使用される組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも３０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも５０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも７０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、１０ＩＵ／ｋｇ〜４０ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有するｒＶＷＦ組成物の投与量を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。特定の実施形態において、本組成物は、２０ＩＵ／ｋｇ〜３０ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、２５ＩＵ／ｋｇ〜７５ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有するｒＶＷＦ組成物の投与量を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。特定の実施形態において、本組成物は、４０ＩＵ／ｋｇ〜６０ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、７５ＩＵ／ｋｇ〜１２５ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有するｒＶＷＦ組成物の投与量を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。特定の実施形態において、本組成物は、７５ＩＵ／ｋｇ〜１００ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に表１２中の変形形態２１４１〜２３３８から選択されるｒＶＷＦの用量が投与され、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、ｒＶＷＦの用量およびｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
（表２０）ｒＶＷＦの投与量と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表２１）ｒＶＷＦの投与量と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表２２）ｒＶＷＦの投与量と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表２３）ｒＶＷＦの投与量と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表２４）ｒＶＷＦの投与量と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表２５）ｒＶＷＦの投与量と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表２６）ｒＶＷＦの投与量と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表２７）ｒＶＷＦの投与量と、ｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して達成されたＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも３０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量およびｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも５０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量およびｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも７０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量およびｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦは、４０ｍＵ／μｇ〜６０ｍＵ／μｇの比活性を有し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦは、少なくとも６０ｍＵ／μｇの比活性を有し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦは、少なくとも８０ｍＵ／μｇの比活性を有し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦは、表１中に見られる変形形態１〜１３３から選択される比活性を有し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
（表２８）本明細書に記載される方法において有用であるｒＶＷＦの投与量とｒＶＷＦの比活性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表２９）本明細書に記載される方法において有用であるｒＶＷＦの投与量とｒＶＷＦの比活性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表３０）本明細書に記載される方法において有用であるｒＶＷＦの投与量とｒＶＷＦの比活性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表３１）本明細書に記載される方法において有用であるｒＶＷＦの投与量とｒＶＷＦの比活性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表３２）本明細書に記載される方法において有用であるｒＶＷＦの投与量とｒＶＷＦの比活性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表３３）本明細書に記載される方法において有用であるｒＶＷＦの投与量とｒＶＷＦの比活性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
（表３４）本明細書に記載される方法において有用であるｒＶＷＦの投与量とｒＶＷＦの比活性との組み合わせに関する、例示的実施形態
Ｖａｒ．＝変形形態
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも３０％のｒＶＷＦ分子は、少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも５０％のｒＶＷＦ分子は、少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも７０％のｒＶＷＦ分子は、少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象におけるＦＶＩＩＩを、投与後少なくとも１８時間安定化させ、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象におけるＦＶＩＩＩを、投与後少なくとも２４時間安定化させ、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦの組成物を投与することを含み、対象におけるＦＶＩＩＩを、投与後少なくとも３０時間安定化させ、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの投与
一態様において、本開示は、治療を必要とする対象におけるフォンウィルブランド病（ＶＷＤ）または血友病Ａを治療するための方法であって、血漿由来フォンウィルブランド因子（ｐｄＶＷＦ）の組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）の安定性が増大するように、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）および組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）の組成物を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一態様において、本開示は、治療を必要とする対象におけるフォンウィルブランド病（ＶＷＤ）または血友病Ａを治療するための方法であって、血漿由来フォンウィルブランド因子（ｐｄＶＷＦ）の組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）の安定性が増大するように、組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）および組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）の組成物を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性が、少なくとも１０％、２０％、３０％、２時間、４時間、６時間、または表９中に見られる変形形態１３００〜１６４３から選択される量で延長されるように、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含む。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性が少なくとも１０％延長されるように、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性が少なくとも２０％延長されるように、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較して、ＦＶＩＩＩの安定性が少なくとも３０％延長されるように、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも３０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも５０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも７０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与したｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中に見られる変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、１０ＩＵ／ｋｇ〜４０ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有するｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物の投与量を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。特定の実施形態において、本組成物は、２０ＩＵ／ｋｇ〜３０ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、２５ＩＵ／ｋｇ〜７５ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有するｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物の投与量を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。特定の実施形態において、本組成物は、４０ＩＵ／ｋｇ〜６０ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、７５ＩＵ／ｋｇ〜１２５ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有するｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物の投与量を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。特定の実施形態において、本組成物は、７５ＩＵ／ｋｇ〜１００ＩＵ／ｋｇのｒＶＷＦ：ＲＣｏ活性を含有する。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に表１２中の変形形態２１４１〜２３３８から選択されるｒＶＷＦの用量が投与され、この組成物中でのｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦの組成物よりも高い比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも３０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも５０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも７０％のｒＶＷＦ分子が少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦは、４０ｍＵ／μｇ〜６０ｍＵ／μｇの比活性を有し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦは、少なくとも６０ｍＵ／μｇの比活性を有し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦは、少なくとも８０ｍＵ／μｇの比活性を有し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＶＷＦは、表１中に見られる変形形態１〜１３３から選択される比活性を有し、ｒＶＷＦの用量、およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。さらに別の実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも３０％のｒＶＷＦ分子は、少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも５０％のｒＶＷＦ分子は、少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、この組成物中の少なくとも７０％のｒＶＷＦ分子は、少なくとも１０個のサブユニットの多量体の状態で存在し、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物であり、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象におけるＦＶＩＩＩを、投与後少なくとも１８時間安定化させ、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象におけるＦＶＩＩＩを、投与後少なくとも２４時間安定化させ、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、対象におけるＦＶＩＩＩを、投与後少なくとも３０時間安定化させ、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、４：１〜３：２であり、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：１〜３：２である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：１〜１：２であり、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：２〜２：３である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：３〜１：６であり、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：３〜１：５である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、表１１中に見られる変形形態１９８８〜２１４０から選択され、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、表３〜表５中に見られる変形形態１３４〜４５７のうちのいずれか１つに従って、特定のより高次のｒＶＷＦ多量体またはより大きい多量体の状態で存在する最小パーセンテージのｒＶＷＦ分子を有する、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、表１１中に見られる変形形態１９８８〜２１４０から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、４：１〜３：２であり、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：１〜３：２である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：１〜１：２であり、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：２〜２：３である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：３〜１：６であり、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：３〜１：５である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、表１１中に見られる変形形態１９８８〜２１４０から選択され、この組成物中のｒＶＷＦの比活性と、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性との組み合わせは、表１３〜表１９中の変形形態２３３９〜４８６８から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、高分子量のｒＶＷＦ多量体の組成物である。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、４：１〜３：２であり、ｒＶＷＦの用量およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：１〜３：２である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：１〜１：２であり、ｒＶＷＦの用量およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：２〜２：３である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：３〜１：６であり、ｒＶＷＦの用量およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：３〜１：５である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、表１１中に見られる変形形態１９８８〜２１４０から選択され、ｒＶＷＦの用量およびｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物を投与した対象におけるＦＶＩＩＩの安定性と比較したＦＶＩＩＩの増大した安定性は、表２０〜表２７中の変形形態４８６９〜８００３から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高い比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、４：１〜３：２であり、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：１〜３：２である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：１〜１：２であり、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：２〜２：３である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：３〜１：６であり、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。特定の実施形態において、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：３〜１：５である。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
一実施形態において、本方法は、ｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物を投与することを含み、この組成物中のｒＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ｒＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、表１１中に見られる変形形態１９８８〜２１４０から選択され、ｒＶＷＦの用量およびこの組成物中のｒＶＷＦの比活性は、表２８〜表３４中の変形形態８００４〜１０６２５から選択される。一実施形態において、対象に投与されるｒＶＷＦ／ｒＦＶＩＩＩの組成物は、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩの組成物よりも高いＶＷＦの比活性を有する。一実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの半減期によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＦＶＩＩＩの安定性は、ＦＶＩＩＩの平均滞留時間（ＭＲＴ）によって特徴付けられる。さらなる実施形態において、本方法は、あらゆる型のＶＷＤを治療するためのものである。特定の実施形態において、本方法は、３型ＶＷＤを治療するためのものである。
本発明の実施は、別に示されない限り、有機化学、ポリマー技術、分子生物学（組換え技術を含む）、細胞生物学、生化学、および免疫学の従来技術および説明を利用することができ、これらは当技術分野の範囲内である。そのような従来技術には、ポリマーアレイ合成、ハイブリダイゼーション、およびライゲーション、標識を用いたハイブリダイゼーションの検出が含まれる。好適な技術の具体的な説明は、以下の本明細書中の実施例を参照することにより得ることができる。しかしながら、当然、他の等価な従来手順を用いることもできる。そのような従来技術および説明は、標準的な実験マニュアル、例えば、Ｇｅｎｏｍｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ Ｓｅｒｉｅｓ（Ｉ〜ＩＶ巻）、Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｅｌｌｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、ＰＣＲ Ｐｒｉｍｅｒ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、およびＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（すべてＣｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓより）、Ｓｔｒｙｅｒ，Ｌ．（１９９５）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（４ｔｈ Ｅｄ．）Ｆｒｅｅｍａｎ，Ｈｉｇｈｌｙ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｙｏｒｋ，Ｇａｉｔ，"Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ"１９８４、ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ，Ｎｅｌｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｘ（２０００）、Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３ｒｄ Ｅｄ．、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ Ｐｕｂ．，Ｈｉｇｈｌｙ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．、およびＢｅｒｇ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ Ｐｕｂ．，Ｈｉｇｈｌｙ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．に見出すことができ、これらのすべては、あらゆる目的のために、参照によってそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書および添付の特許請求の範囲に使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別に指示しない限りは、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「ポリメラーゼ（ａ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ）」への言及は、１つの薬剤またはそのような薬剤の混合物を指し、「方法（ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ）」への言及は、当業者に周知の同等のステップおよび方法等への言及が含まれる。
別に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する当業者により一般に理解されるものと同一の意味を有する。本明細書に言及されるすべての刊行物は、その刊行物に説明され、現在説明されている発明に関連して使用され得る機器、組成物、製剤、および方法を説明および開示する目的のために参照によって本明細書に組み込まれる。
値の範囲が提供される場合には、文脈が明確に別に指示しない限りは、その範囲の上限と下限の間で、下限の単位の１／１０までの介在する値のそれぞれ、およびその言及された範囲の他の言及された値もしくは介在する値が、本発明において包含されると理解される。これらのより小さい範囲の上限および下限は、独立して、そのより小さい範囲に含まれることができ、また、明記された範囲内の任意の具体的に除外される限界を条件として、本発明に包含される。明記された範囲が限界の片方または両方を含む場合、これらの含まれた限界のいずれかまたは両方を除外した範囲も、本発明に含まれる。
上の説明では、本発明がより完全に理解されるように、数多くの具体的な詳細を示す。しかしながら、本発明が、これらの具体的な詳細事項の１つ以上を用いることなく実施可能であることは、当業者に理解されるであろう。他の例では、当業者によく知られている公知の特性および手順は、本発明を不明瞭にすることを避けるために説明されていない。
本発明は、主に、特定の実施形態に関して説明されているが、本開示を読めば、他の実施形態は、当業者には理解されるであろうことも企図され、そのような実施形態が本発明の方法に含まれることが意図される。
ｒＶＷＦ：ｒＦＶＩＩＩの同時投与試験
２ＩＵ／ｋｇ、７．５ＩＵ／ｋｇ、２０ＩＵ／ｋｇ、および５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏによるｒＶＷＦ：ｒＦＶＩＩＩの単回投与後の即時の耐容性および安全性を試験の主要評価項目として評価した。副次的評価項目には、ＶＷＦ：ＲＣｏ、ＶＷＦ：ＣＢ、ＶＷＦ：Ａｇ、ＦＶＩＩＩ、およびＶＷＦの多量体組成物についての薬物動態が含まれる。さらなる副次的評価項目は、ｐｄＶＷＦ／／ｐｄＦＶＩＩＩ［コホート４（５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ）］との薬物動態の比較であった。試験設計の略図については、図１を参照のこと。
２ＩＵ／ｋｇ、７．５ＩＵ／ｋｇ、２０ＩＵ／ｋｇ、および５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏによるｒＶＷＦ：ｒＦＶＩＩＩの単回投与後の即時の耐容性および安全性を試験の主要評価項目として評価した。副次的評価項目には、ＶＷＦ：ＲＣｏ、ＶＷＦ：ＣＢ、ＶＷＦ：Ａｇ、ＦＶＩＩＩ、およびＶＷＦの多量体組成物についての薬物動態が含まれる。さらなる副次的評価項目は、ｐｄＶＷＦ／／ｐｄＦＶＩＩＩ［コホート４（５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ）］との薬物動態の比較であった。試験設計の略図については、図１を参照のこと。
組換えヒトフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）が、ＣＨＯ細胞内で発現された。プロペプチド除去は、組換えフーリンへのプロＶＷＦの曝露を通してインビトロで媒介された。完全にグリコシル化された／ＡＢＯ血液型グリカンが不在であった。組換えＶＷＦは、血漿由来ＶＷＦ（ｐｄＶＷＦ）よりも高い比活性を有し、ｒＦＶＩＩＩを用いてまたは用いることなく投与への治療の柔軟性を提供する。この試験に使用されるｒＶＷＦは、ＡＤＡＭＴＳ１３に曝露されなかったため、巨大ＶＷＦ多量体および無傷のＶＷＦサブユニットが存在した。ＡＤＡＭＴＳ１３は、ＴＹＲ１６０５−ＭＥＴ１６０６でサブユニットの切断をもたらす。
ＶＷＦ：ＲＣｏの薬物動態／ＶＷＦ多量体の動態は、ｒＶＷＦとＨｕｍａｔｅ Ｐとの間のＶＷＦ：ＲＣｏ（ＶＷＦ活性）に対して極めて類似性の高い薬物動態を示した（図２Ａ）。Ｈｕｍａｔｅ Ｐは、ＶＷＦに複合体化したヒト由来の中間純度第ＶＩＩＩ因子の濃縮物である。有効性および投与の提案のために、代用マーカーが使用された。図２Ａ中のデータは、ｒＶＷＦが血漿由来ＶＷの活性に類似した活性を示す。高分子量のｒＶＷＦの漸進性消失は、ＡＤＡＭＴＳ１３への曝露時に見られ（図２Ｂ）、これは、ｒＶＷＦがＡＤＡＭＴＳ１３曝露前に高分子量の多量体の状態で存在することを示す。
Ｈｕｍａｔｅと比較して、より高いＦＶＩＩＩレベルが、ｒＶＷＦ患者において観察された（図３）。これらのデータは、ｒＶＷＦがインビボで内因性ＦＶＩＩＩを安定化することを示す。異なるＶＷＦ：ＦＶＩＩＩの比率（１．３：１対約２．１のＶＷＦ／ＦＶＩＩＩ）で見られる効果の違いがあった。これらの異なる比率は、血漿由来ＶＷＦを使用する場合に必要とされるよりも少ないｒＶＷＦを使用して、ＦＶＩＩＩを安定化することができることを示唆している。試験設計により、初回投与後、ｒＶＷＦのみ（ｒＦＶＩＩＩなし）で再投与する柔軟性が提供された。
巨大分子量の多量体が、ｒＶＷＦと共に存在し、これらの巨大分子量の多量体は、注入後、急速に消失する。ＡＤＡＭＴＳ１３媒介の切断断片が、すべての対象において見られた。ＶＷＦ：ＲＣｏの薬物動態プロファイルは、ｐｄＶＷＦのプロファイルと同様であった。ｒＶＷＦを伴う内因性ＦＶＩＩＩには、ｐｄＶＷＦで観察されるものと同等の持続的な安定があった。ｒＶＷＦによる薬物有害反応プロファイルは、ｐｄＶＷＦ／ｐｄＦＶＩＩＩのプロファイルと同様であり、すべての関連有害事象（ＡＥ）は軽度であった。
全体の安全性および薬物動態プロファイルは、ｒＶＷＦが、ｐｄＶＷＦの使用による効果と比較して、ＦＶＩＩＩのレベルを増強すると同時に、ｐｄＶＷＦ／ｐｄＦＶＩＩＩと同等の用量で出血症状の治療および予防のために使用可能であることを示唆している。理論に拘束されることなく、ｒＶＷＦの集団内の高比率の巨大多量体（十量体以上）が、血漿由来ＶＷＦによるものと比較して、ｒＶＷＦで見られるＦＶＩＩＩの増強した安定性をもたらす可能性がある。
重度のフォンウィルブランド病（ＶＷＤ）における安全性および耐容性を示す薬物動態を評価するヒトでの試験
この試験は、３型ＶＷＤまたは重度の１型ＶＷＤに罹患している患者におけるｐｄＶＷＦおよびｒＶＷＦの効果を比較した。
この試験は、３型ＶＷＤまたは重度の１型ＶＷＤに罹患している患者におけるｐｄＶＷＦおよびｒＶＷＦの効果を比較した。
この試験において使用されたｐｄＶＷＦは、内皮細胞および巨核球内で合成された。翻訳後修飾のプロペプチド除去は、ゴルジおよびポストゴルジの区画へのタンパク質の通過中、細胞内で生じた。グリコシル化／ＡＢＯ血液型グリカンが存在した。ｐｄＶＷＦは、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３に曝露されているＶＷＦサブユニットからなった。ｐｄＶＷＦ集団内には巨大ＶＷＦ多量体がなく、サブユニットはＴＹＲ１６０５−ＭＥＴ１６０６で切断された。ｐｄＶＷＦ濃縮物は、ＡＤＡＭＴＳ１３および血球凝集素を含む、他のタンパク質を含有した。
この試験に使用されたｒＶＷＦは、ＣＨＯ細胞内で発現された。プロペプチド除去は、組換えフーリンへのプロＶＷＦの曝露を通してインビトロで媒介された。完全にグリコシル化された／ＡＢＯ血液型グリカンはなかった。ｒＶＷＦは、ＡＤＡＭＴＳ１３に曝露されなかった。ｒＶＷＦのサブユニットは無傷であり、巨大ＶＷＦ多量体が存在した。サブユニットの切断がＡＤＡＭＴＳ１３曝露時に生じた。ｒＶＷＦは、ｐｄＶＷＦより高い比活性を示した。
この試験に対する組み入れ基準は以下とした：
・３型ＶＷＤ（３ＩＵ／ｄＬ以下のＶＷＦ：Ａｇ）
・重度の１型ＶＷＤ（１０ＩＵ／ｄＬ以下のＶＷＦ：ＲＣｏおよび２０ＩＵ／ｄＬ未満のＦＶＩＩＩ：Ｃ
・１８〜６０歳
・凝固因子の補充療法（２５ＥＤ以上）を受けたことがある
・出血状態がない。
・３型ＶＷＤ（３ＩＵ／ｄＬ以下のＶＷＦ：Ａｇ）
・重度の１型ＶＷＤ（１０ＩＵ／ｄＬ以下のＶＷＦ：ＲＣｏおよび２０ＩＵ／ｄＬ未満のＦＶＩＩＩ：Ｃ
・１８〜６０歳
・凝固因子の補充療法（２５ＥＤ以上）を受けたことがある
・出血状態がない。
この試験に対する除外基準は以下とした：
・他の凝固障害
・ＶＷＦおよび／またはＦＶＩＩＩ阻害剤の経歴
・心臓血管疾患
・血栓塞栓事象の病歴
・他の免疫障害の病歴。
・他の凝固障害
・ＶＷＦおよび／またはＦＶＩＩＩ阻害剤の経歴
・心臓血管疾患
・血栓塞栓事象の病歴
・他の免疫障害の病歴。
２ＩＵ／ｋｇ、７．５ＩＵ／ｋｇ、２０ＩＵ／ｋｇ、および５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏでのｒＶＷＦ：ｒＦＶＩＩＩの単回投与後の即時の耐容性および安全性をこの試験の主要評価項目として評価した。副次的評価項目には、ＶＷＦ：ＲＣｏ、ＶＷＦ：ＣＢ、ＶＷＦ：Ａｇ、ＦＶＩＩＩ、およびＶＷＦの多量体組成物についての薬物動態を含んだ。さらなる副次的評価項目は、ｐｄＶＷＦ／／ｐｄＦＶＩＩＩ［コホート４（５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ）］との薬物動態の比較であった。この試験に関する患者の個体群統計を図４に示す。コホート４Ａ（３型ＶＷＤ）のＶＷＦ：ＲＣｏ／ＶＷＦ：Ａｇの薬物動態分析を図５に示す。これらのデータは、ｒＶＷＦの全活性が、ｐｄＶＷＦのものと同等であったことを示す。高分子量のｒＶＷＦの漸進性消失は、ＡＤＡＭＴＳ１３への曝露時に見られた（図６）。コホート４Ａ（３型ＶＷＤ）のＦＶＩＩＩ：Ｃのさらなる薬物動態分析を図７に示す。図７中のデータは、ＦＶＩＩＩのインビボ活性を安定化させるときにはｐｄＶＷＦよりもｒＶＷＦがより有効であり、ｐｄＶＷＦ／ｐｄＦＶＩＩＩによる治療と比較して、ｒＶＷＦ／ｒＶＷＦによる治療後にＦＶＩＩＩの凝固促進活性の増大を得たことを示唆している。
巨大分子量の多量体がｒＶＷＦ中に存在し、注入後、急速に消失した。ＡＤＡＭＴＳ１３媒介の切断断片がすべての対象において見られた。ＶＷＦ：ＲＣｏの薬物動態プロファイルは、ｐｄＶＷＦのプロファイルと同様であった。内因性ＦＶＩＩＩには、ｐｄＶＷＦで観察されるものと同等の持続的な安定があった。薬物有害反応プロファイルは、ｐｄＶＷＦ／ｐｄＦＶＩＩＩのプロファイルと同様であり、すべての関連有害事象は軽度であった。
全体の安全性および薬物動態プロファイルは、ｒＶＷＦが、ｐｄＶＷＦ／ｐｄＦＶＩＩＩと同等の用量で出血症状の治療および予防のために使用可能であることを示唆している。
ｒＶＷＦ：ｒＦＶＩＩＩ複合体の臨床試験
この試験は、先天性の３型フォンウィルブランド病における薬物動態、即時の安全性および耐容性試験であった。図９は、本試験における３人の患者に対するｒＶＷＦの薬物動態パラメータを示す。
この試験は、先天性の３型フォンウィルブランド病における薬物動態、即時の安全性および耐容性試験であった。図９は、本試験における３人の患者に対するｒＶＷＦの薬物動態パラメータを示す。
図１０は、患者１に関する薬物動態データを示す。ＶＷＦ：ＲＣｏとＶＷＦ：ＣＢＡとの間に良好な相関関係があった。活性は、１２時間まで測定可能であった（両方とも、２４時間時点で定量限界を下回った）。ＶＷＦ：Ａｇは、９６時間時点でも依然として測定可能であった。内因性ＦＶＩＩＩ活性は、０．１３ＩＵ／ｍＬの最大限界まで増大した。
図１１は、患者２に関する薬物動態データを示す。患者１と同様に、ＶＷＦ：ＲＣｏとＶＷＦ：ＣＢＡとの間に良好な相関関係があった。活性は共に、（定量限界であっても）１２時間まで測定可能であった。ＶＷＦ：Ａｇは、７２時間時点でも依然として測定可能であった（９６時間のサンプルは試験されなかった）。内因性ＦＶＩＩＩ活性は、この患者については、０．１８ＩＵ／ｍＬの最大限界まで増大した。
図１２は、患者３に関する薬物動態データを示す。ＶＷＦ：ＲＣｏの活性は、（定量限界であっても）最大２４時間まで測定可能であったが、ＶＷＦ：ＣＢＡが、２４時間時点で定量限界を下回った。ＶＷＦ：Ａｇは、４８時間時点でも依然として測定可能であった。内因性ＦＶＩＩＩ活性は、この患者については、０．１３ＩＵ／ｍＬの最大限界まで増大した。
図１３は、３人の患者に関するＶＷＦのパラメータおよびＦＶＩＩＩ活性を比較するデータを示す。試験したすべてのパラメータ（ＶＷＦ：ＲＣｏ、ＶＷＦ：ＣＢＡ、ＶＷＦ：Ａｇ、およびＦＶＩＩ：Ｃｈｒ活性）については、３人すべての患者において見られる良好な相関関係があった。
ｒＶＷＦは、すべての患者においてほぼ１００％の回復があった。３人の患者は、やや異なるｒＶＷＦの薬物動態を示した。ＶＷＦ抗原については、２ＩＵのＶＷＦ：ＲＣｏ／ｋｇの適用から３０分後、０．０６ＩＵ／ｍＬの最大限界があり、続いて、着実な減少があった。ＦＶＩＩＩ活性については、ベースラインＦＶＩＩＩ活性は、ｒＶＷＦ＋ｒＦＶＩＩＩの適用から１５分後、約０．１ＩＵ／ｍＬ増大した。その後、活性は、０．１６ＩＵ／ｍＬまでさらに増大し、３〜６時間時点で安定期に達し、最大２８時間まで停滞した後、着実に減少した。ＦＶＩＩＩの遅延した増大は、二次上昇がｒＶＷＦによって誘発されたことを示す。
ｒＶＷＦ試験−ＦＶＩＩの薬物動態評価およびＴＡ評価
図１４は、すべてのコホートに関するＦＶＩＩＩ活性のデータを示す。図１５は、コホート１（２ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ／１．５ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ）からのデータを示す。試験したすべてのパラメータについては、このコホートの３人すべての患者について良好な相関関係があった。
図１４は、すべてのコホートに関するＦＶＩＩＩ活性のデータを示す。図１５は、コホート１（２ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ／１．５ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ）からのデータを示す。試験したすべてのパラメータについては、このコホートの３人すべての患者について良好な相関関係があった。
図１５は、コホート２（７．５ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ／５．８ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ）からのデータを示す。図１６は、ＦＶＩＩＩ：Ｃに対するこのコホートについての薬物動態データを示す。
図１７は、コホート３（２０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ／１５．４ＩＵ／ｋｇのＦＶＩＩＩ）についてのデータを示す。これらのデータは、ＶＷＦおよびＦＶＩＩＩに対する血漿パラメータの比較を示す。図１８は、ＦＶＩＩＩ：Ｃに対するこのコホートについての薬物動態データを示す。
図１９は、コホート４（５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ）についてのデータを示す。ＦＶＩＩＩの投与は、３８．５ＩＵ／ｋｇのｒＦＶＩＩＩまたは２５ＩＵ／ｋｇのｐｄＦＶＩＩＩであった。これらのデータは、ｒＶＷＦについてのパラメータがｐｄＶＷＦ（Ｈａｅｍａｔｅ）についてのものと同様であるが、ＦＶＩＩＩ活性を安定化させるときにはｒＶＷＦがより有効であり、ｐｄＶＷＦを用いて見られる活性と比較して、ＦＶＩＩＩ活性において見られる増大を生じることを示す。図２０は、ＦＶＩＩＩ：Ｃに関するこのコホートについての薬物動態データの要約を示す。これらのデータに見られるように、ｐｄＶＷＦ／ＦＶＩＩＩと比較して、ｒＶＷＦ／ＦＶＩＩＩについてのＴ１／２の中央値および平均が増大しており、ｒＶＷＦが、ｐｄＶＷＦより、インビボでＦＶＩＩＩを安定化させるのにより有効であり、結果的に半減期が増加することが示唆される。
血友病Ａの治療におけるｒＦＶＩＩＩの半減期へのｒＶＷＦの影響の臨床試験
この試験は、５０ＩＵ／ｋｇのｒＦＶＩＩＩ（Ａｄｖａｔｅ）を、単独で、または１０もしくは５０ＩＵ／ｋｇのフォンウィルブランド因子：リストセチン補因子活性（ＶＷＦ：ＲＣｏ）でｒＶＷＦと組み合わせて、単回投与した後のｒＶＷＦの即時の耐容性および安全性を評価する。この試験はまた、５０ＩＵ／ｋｇのｒＦＶＩＩＩ（Ａｄｖａｔｅ）を、単独で、または１０もしくは５０ＩＵ／ｋｇ（ＶＷＦ：ＲＣｏ）でｒＶＷＦと組み合わせて、単回投与した後の薬物動態も評価する。
この試験は、５０ＩＵ／ｋｇのｒＦＶＩＩＩ（Ａｄｖａｔｅ）を、単独で、または１０もしくは５０ＩＵ／ｋｇのフォンウィルブランド因子：リストセチン補因子活性（ＶＷＦ：ＲＣｏ）でｒＶＷＦと組み合わせて、単回投与した後のｒＶＷＦの即時の耐容性および安全性を評価する。この試験はまた、５０ＩＵ／ｋｇのｒＦＶＩＩＩ（Ａｄｖａｔｅ）を、単独で、または１０もしくは５０ＩＵ／ｋｇ（ＶＷＦ：ＲＣｏ）でｒＶＷＦと組み合わせて、単回投与した後の薬物動態も評価する。
本試験のための集団は、以下の基準を用いて選択される。
組み入れ基準：
・重度の血友病Ａ（１ＩＵ／ｄＬ未満のＦＶＩＩＩ：Ｃ）
・１８〜６０歳
・凝固因子の補充療法（１５０ＥＤ以上）を受けたことがある
・出血状態がない。
・重度の血友病Ａ（１ＩＵ／ｄＬ未満のＦＶＩＩＩ：Ｃ）
・１８〜６０歳
・凝固因子の補充療法（１５０ＥＤ以上）を受けたことがある
・出血状態がない。
除外基準：
・他の凝固障害
・ＶＷＦおよび／またはＦＶＩＩＩ阻害剤の経歴
・心臓血管疾患
・血栓塞栓事象の病歴
・他の免疫障害の病歴（例外）。
・他の凝固障害
・ＶＷＦおよび／またはＦＶＩＩＩ阻害剤の経歴
・心臓血管疾患
・血栓塞栓事象の病歴
・他の免疫障害の病歴（例外）。
対象の参加は１６週間であり、全試験期間は７ヶ月間である。
本試験の設計は、遺伝性の重度の血友病Ａに罹患している対象（１％未満のＦＶＩＩＩ：Ｃ）におけるｒＦＶＩＩＩ：ｒＶＷＦの安全性、即時の耐容性、および薬物動態を評価するための多施設無対照非無作為化非盲検臨床試験である。
三重期間の薬物動態分析に参加しているそれぞれの対象（Ｎ＝１４）は、非無作為化様式で、５０ＩＵ／ｋｇのｒＦＶＩＩＩ（Ａｄｖａｔｅ）と、ＶＷＦ：ＲＣｏなし、１０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ、または５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏのｒＶＷＦとを受容し、約１６週間参加することが期待される。
個々の薬物動態は、５〜１４日間の間隔を置き、少なくとも５日間の「ウォッシュアウト」期間および適時の試験の完了を確立した。安全性分析は、６人の対象に、１０ＩＵ／ＫＧのＶＷＦ：ＲＣｏのｒＶＷＦが投与された時点および６人の対象に、５０ＩＵ／ＫＧのＶＷＦ：ＲＣｏのｒＶＷＦが投与された時点で、別々に行われる。
対象は、いずれかの注入前の少なくとも５日間、寒冷沈降物、新鮮凍結血漿、またはＶＷＦもしくはＦＶＩＩＩの薬物動態に干渉する他の薬物を受容していてはならない。
最少６人の対象が１０ＩＵのＶＷＦ：ＲＣｏのｒＶＷＦで処置された後、即時の耐容性および安全性を示す場合には、ｒＶＷＦの投薬量が増量される。バイタルサイン、血液学、および臨床化学パラメータにおける被験物の効果が、短期間の安全性を決定する。
ＦＶＩＩＩ活性（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）、ＶＷＦ抗原（ＶＷＦ：Ａｇ）、ＶＷＦ活性（ＶＷＦ：ＲＣｏ）、ＶＷＦ：ＣＢのレベル、（およびＶＷＦ多量体の分布）を決定するためのサンプルは、注入前（注入開始前の３０分以内）、ならびに注入を終了してから１５分間（±５分間）、３０分間（±５分間）、１時間（±５分間）、３時間（±１０分間）、６時間（±１０分間）、９時間（±１５分間）、２４時間（±２時間）、および４８時間（±２時間）、７２時間（±２時間）、９６時間（±２時間）、および１２０時間（±２時間）（またはＦＶＩＩＩが１％未満まで下落するまで少なくとも２４時間おき）後に採取される。ＦＶＩＩＩ活性は、現地および中央検査室で行われる、発色アッセイ法および一段階ａＰＴＴベースのアッセイ法の両方を用いて決定される。
バイタルサイン、および有害事象（ＡＥ）を示す他の症状、血液学、および臨床化学パラメータにおけるそれぞれの注入における効果が、短期間の安全性の指標として使用される。バイタルサイン、臨床化学、および血液学パラメータは、注入する前および注入してから１２０時間後まで評価される。有害事象の発生は、注入してから２時間後までおよび追跡期間の様々な時点で（ｒＶＷＦで治療された対象）について継続的にモニターされる。
ＦＶＩＩＩおよびＶＷＦへの阻害剤の存在は、被験物の注入前および試験の完了の来院時に評価される。
いかなる時点でも、被験物に関連する重度の有害事象が生じる場合、独立したデータモニタリング委員会（ＤＭＣ）が本試験を続行するかどうかを勧告するであろう。
本試験に対する薬物動態の主要評価項目には、ＡＵＣ０〜∞／用量（時間０から無限までの血漿濃度／時間曲線下面積）、ＡＵＣ０〜９６時間／用量（時間０から９６時間までの血漿濃度／時間曲線下面積）、平均滞留時間（ＭＲＴ）、クリアランス（ＣＬ）、Ｔ１／２（排泄相半減期）、ＶＷＦ：ＲＣｏ、ＶＷＦ：Ａｇ、ＶＷＦ：ＣＢ、およびＦＶＩＩＩの定常状態での分布体積（Ｖｓｓ）が含まれる。
薬物動態の主要評価項目の分析には、治療群（５０ＩＵ／ｋｇのｒＦＶＩＩＩ（Ａｄｖａｔｅ）を単独で、１０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏでｒＶＷＦと予混合した５０ＩＵ／ｋｇのｒＦＶＩＩＩ（Ａｄｖａｔｅ）、５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏでｒＶＷＦと予混合した５０ＩＵ／ｋｇのｒＦＶＩＩＩ（Ａｄｖａｔｅ））ごとに、中央値、その中央値に対する両側９５％信頼区間、平均、標準偏差、変動係数、および幾何平均によって、要約された、ＡＵＣ０〜９６時間／用量、ＡＵＣ０〜∞／用量、ＭＲＴ、ＣＬ、Ｔ１／２、およびＶｓｓが含まれる。既述統計（中央値および範囲）を用いて、経時的にＶＷＦ：ＲＣｏ、ＶＷＦ：Ａｇ、ＶＷＦ：ＣＢ、およびＦＶＩＩＩのレベルを要約する。
安全性の主要評価項目には、治療に関連した有害事象の発生が含まれる。安全性の主要評価項目の分析には、治療に関連した有害事象を経験する対象の数およびパーセンテージが含まれる。治療に関連した有害事象の数および割合を表に集計する。
薬物動態の副次的評価項目には、ＦＶＩＩＩ、ＶＷＦ：ＲＣｏ、ＶＷＦ：Ａｇ、およびＶＷＦ：ＣＢのインビボでの回復（ＩＶＲ）および増分回復（ＩＲ）が含まれる。薬物動態の副次的評価項目の分析には、対象ごとにＦＶＩＩＩ、ＶＷＦ：ＲＣｏ、ＶＷＦ：Ａｇ、およびＶＷＦ：ＣＢのＩＶＲおよびＩＲを決定することと、中央値および範囲によって要約することと、が含まれる。
安全性の副次的評価項目には、阻害性かつ全結合抗ＶＷＦ抗体の発生、ＦＶＩＩＩに対する阻害性抗体の発生、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）タンパク質、マウス免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）、およびｒフーリンに対する抗体の発生、血栓事象の発生が含まれる。
安全性の副次的評価項目は、重篤有害事象を経験する対象の数および重篤有害事象の数を表に集計することによって分析される。さらに、治療に関連した有害事象を経験する対象の数、ならびに治療に関連した有害事象の数および割合が、血栓事象、阻害性かつ全結合抗ＶＷＦ抗体、ＦＶＩＩＩに対する阻害性抗体、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）タンパク質に対する抗体、マウス免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）に対する抗体、およびｒフーリンに対する抗体について副分類される。
すべての有害事象の一覧が、対象の識別、年齢、性別、有害事象の好ましい用語および報告された用語、持続期間、重症度、重篤性、取られた行為、結果、因果関係評価、開始日、終了日、および有害事象を治療するための薬物または非薬物療法によって表される。有害事象に対する要約表が提供され、これは有害事象の数、有害事象を有する対象の数、対象全体における対応する割合を、重篤性および治療との関係別に表す。さらなる要約表は、器官系分類および治療との関係を用いた好ましい用語によって、（軽度、中等度、重度の）有害事象の総数を表す。
この試験では、公式のサンプルサイズの計算は実施していない。
本明細書に記載される実施例および実施形態は、単なる例証的目的のためであって、それを考慮して、様々な修正または変更が、当業者に示唆され、本出願の趣旨および範囲、ならびに添付された特許請求の範囲内に含まれるべきであることが理解される。本明細書に引用されるすべての刊行物、特許、および特許出願は、あらゆる目的のために参照によってそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
Claims (25)
- 組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を含む、それを必要とする対象におけるフォンウィルブランド病または血友病Ａの治療剤であって、
血漿由来フォンウィルブランド因子を静脈内投与した対象と比較して、内因性の第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、前記対象に静脈内投与されることを特徴とし、
前記ｒＶＷＦは、水溶性ポリマーで修飾されておらず；前記ｒＶＷＦは、ＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物であり；前記ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有し；前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも５時間延長され；かつ前記高次のｒＶＷＦ多量体は、静脈内投与後少なくとも３時間安定である、治療剤。 - 組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）および組換え第ＶＩＩＩ因子（ｒＦＶＩＩＩ）を同時投与するための、請求項１に記載の治療剤。
- 前記ｒＶＷＦおよびｒＦＶＩＩＩは、単一組成物中に含まれる、請求項２に記載の治療剤。
- 前記対象に、１投与量当たり１．０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜１５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与されるように用いられることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の治療剤。
- 前記対象に、１投与量当たり２ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜５０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与されるように用いられることを特徴とする、請求項４に記載の治療剤。
- 前記対象に、１投与量当たり５ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜４０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与されるように用いられることを特徴とする、請求項４に記載の治療剤。
- 前記対象に、１投与量当たり１０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏ〜２０ＩＵ／ｋｇのＶＷＦ：ＲＣｏが投与されるように用いられることを特徴とする、請求項４に記載の治療剤。
- 前記ｒＶＷＦは、フーリン（Ｆｕｒｉｎ）での処理によってインビトロで成熟する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の治療剤。
- 前記ｒＶＷＦは、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞培養物）における発現を介して産生される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の治療剤。
- 前記ｒＦＶＩＩＩおよびｒＶＷＦは、同一の細胞培養物における発現を介して産生される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の治療剤。
- 前記対象に、ｒＶＷＦが１日おきに１回を超えない頻度で投与されるように用いられることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の治療剤。
- 前記対象に、ｒＶＷＦが週に２回を超えない頻度で投与されるように用いられることを特徴とする、請求項１１に記載の治療剤。
- 前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも１２時間延長される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の治療剤。
- 前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも２４時間延長される、請求項１３に記載の治療剤。
- 前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも３６時間延長される、請求項１３に記載の治療剤。
- 前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも４８時間または７２時間延長される、請求項１３に記載の治療剤。
- ＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、２：１〜１：４である、請求項２〜１６のいずれか１項に記載の治療剤。
- ＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、３：２〜１：３である、請求項１７に記載の治療剤。
- ＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、１：１〜１：２である、請求項１７に記載の治療剤。
- ＦＶＩＩＩ凝固促進活性（ＩＵ ＦＶＩＩＩ：Ｃ）対ｒＶＷＦリストセチン補因子活性（ＩＵ ｒＶＷＦ：ＲＣｏ）の比率は、約３：４である、請求項１７に記載の治療剤。
- 前記ｒＶＷＦは、約２０〜１５０ｍＵ／μｇの比活性を有する、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の治療剤。
- 組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を含む、それを必要とする対象における血友病Ａまたはフォンウィルブランド病の治療剤であって、
血漿由来フォンウィルブランド因子を静脈内投与した対象と比較して、内因性の第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、前記対象に静脈内投与されることを特徴とし、
（ａ）前記ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有し、前記ｒＶＷＦの比活性は、約２０〜１５０ｍＵ／μｇであり；
（ｂ）前記ＦＶＩＩＩの半減期は、血漿由来フォンウィルブランド因子を静脈内投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、少なくとも１．５倍高く；
（ｃ）前記ｒＶＷＦは、水溶性ポリマーで修飾されておらず；
（ｄ）前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも５時間延長され；かつ
（ｅ）前記ｒＶＷＦは、ＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む、高分子量のＶＷＦ多量体組成物であり、前記高次のｒＶＷＦ多量体は、静脈内投与後少なくとも３時間安定である、
治療剤。 - 組換えフォンウィルブランド因子（ｒＶＷＦ）を含む、それを必要とする対象における血友病Ａまたはフォンウィルブランド病の治療剤であって、
血漿由来フォンウィルブランド因子を静脈内投与した対象と比較して、内因性の第ＶＩＩＩ因子の半減期が延長されるように、前記対象に静脈内投与されることを特徴とし、
（ａ）前記ｒＶＷＦは、ＶＷＦ十量体またはより高次の多量体を含む高分子量のＶＷＦ多量体組成物であり、前記高次のｒＶＷＦ多量体は、静脈内投与後少なくとも３時間安定であり；
（ｂ）前記ｒＶＷＦは、血漿由来フォンウィルブランド因子よりも高い比活性を有し、前記ｒＶＷＦの比活性は、少なくとも約２０〜１５０ｍＵ／μｇであり；
（ｃ）前記ＦＶＩＩＩの半減期は、血漿由来フォンウィルブランド因子を静脈内投与した対象におけるＦＶＩＩＩの半減期と比較して、少なくとも１．５倍高く；
（ｄ）前記第ＶＩＩＩ因子の半減期は、少なくとも５時間延長され；かつ
（ｅ）前記ｒＶＷＦは、水溶性ポリマーで修飾されていない、
治療剤。 - ３型フォンウィルブランド病を治療するための、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の治療剤。
- 前記水溶性ポリマーはＰＥＧである、請求項１、２２、または２３に記載の治療剤。
Applications Claiming Priority (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201161495884P | 2011-06-10 | 2011-06-10 | |
| US61/495,884 | 2011-06-10 | ||
| US201161511901P | 2011-07-26 | 2011-07-26 | |
| US61/511,901 | 2011-07-26 | ||
| US201161523790P | 2011-08-15 | 2011-08-15 | |
| US61/523,790 | 2011-08-15 | ||
| PCT/US2012/041957 WO2012171031A1 (en) | 2011-06-10 | 2012-06-11 | Treatment of coagulation disease by administration of recombinant vwf |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2016137381A Division JP6527114B2 (ja) | 2011-06-10 | 2016-07-12 | 組換えフォンウィルブランド因子の投与による凝固疾患の治療 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2014516088A JP2014516088A (ja) | 2014-07-07 |
| JP2014516088A5 JP2014516088A5 (ja) | 2015-07-30 |
| JP6347468B2 true JP6347468B2 (ja) | 2018-06-27 |
Family
ID=46321496
Family Applications (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2014514934A Active JP6347468B2 (ja) | 2011-06-10 | 2012-06-11 | 組換えフォンウィルブランド因子の投与による凝固疾患の治療 |
| JP2016137381A Active JP6527114B2 (ja) | 2011-06-10 | 2016-07-12 | 組換えフォンウィルブランド因子の投与による凝固疾患の治療 |
| JP2018246475A Pending JP2019048892A (ja) | 2011-06-10 | 2018-12-28 | 組換えフォンウィルブランド因子の投与による凝固疾患の治療 |
Family Applications After (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2016137381A Active JP6527114B2 (ja) | 2011-06-10 | 2016-07-12 | 組換えフォンウィルブランド因子の投与による凝固疾患の治療 |
| JP2018246475A Pending JP2019048892A (ja) | 2011-06-10 | 2018-12-28 | 組換えフォンウィルブランド因子の投与による凝固疾患の治療 |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9272021B2 (ja) |
| EP (3) | EP3858375B1 (ja) |
| JP (3) | JP6347468B2 (ja) |
| KR (3) | KR20190041032A (ja) |
| CN (3) | CN108210889A (ja) |
| AR (1) | AR086904A1 (ja) |
| AU (5) | AU2012267458A1 (ja) |
| BR (1) | BR112013031795A2 (ja) |
| CA (1) | CA2838845C (ja) |
| DK (3) | DK3412305T3 (ja) |
| ES (3) | ES2682249T3 (ja) |
| FI (1) | FI3858375T3 (ja) |
| HK (1) | HK1257436A1 (ja) |
| HR (1) | HRP20180962T1 (ja) |
| HU (1) | HUE039317T2 (ja) |
| LT (1) | LT2717905T (ja) |
| MX (2) | MX350582B (ja) |
| PL (3) | PL2717905T3 (ja) |
| PT (3) | PT3412305T (ja) |
| RU (2) | RU2680402C2 (ja) |
| SG (2) | SG10201604684WA (ja) |
| SI (1) | SI2717905T1 (ja) |
| TR (1) | TR201808823T4 (ja) |
| WO (1) | WO2012171031A1 (ja) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012171031A1 (en) * | 2011-06-10 | 2012-12-13 | Baxter International Inc. | Treatment of coagulation disease by administration of recombinant vwf |
| CN102776260B (zh) * | 2012-07-26 | 2015-04-29 | 上海泰龙生物医药科技有限公司 | 一种高效表达重组人凝血八因子的方法 |
| EP2796145B1 (en) | 2013-04-22 | 2017-11-01 | CSL Ltd. | A covalent complex of von willebrand factor and faktor viii linked by a disulphide bridge |
| NL2013007B1 (en) | 2014-06-16 | 2016-07-05 | Ablynx Nv | Methods of treating TTP with immunoglobulin single variable domains and uses thereof. |
| FR3034669B1 (fr) * | 2015-04-07 | 2020-02-14 | Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Nouvelle utilisation du facteur von willebrand |
| JP6942721B2 (ja) | 2016-04-15 | 2021-09-29 | バクスアルタ インコーポレイティッド | 薬物動態学的薬物投与計画を提供する方法及び装置 |
| US10896749B2 (en) | 2017-01-27 | 2021-01-19 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Drug monitoring tool |
| PT3648788T (pt) | 2017-07-07 | 2024-08-23 | Takeda Pharmaceuticals Co | Tratamento de hemorragia gastrointestinal em pacientes com doença de von willebrand grave por administração de fvw recombinante |
| RU2766118C2 (ru) | 2017-07-07 | 2022-02-08 | Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед | Лечение пациентов с тяжелой формой болезни фон виллебранда, подвергающихся плановому хирургическому вмешательству, путем введения рекомбинантного ффв |
| BR112020015991A2 (pt) | 2018-02-06 | 2020-12-15 | Ablynx N.V. | Métodos de tratamento de episódio inicial de ttp com domínios variáveis únicos de imunoglobulina |
| EP3768697A1 (en) * | 2018-03-21 | 2021-01-27 | Baxalta Incorporated | Separation of vwf and vwf propeptide by chromatographic methods |
| CN113645993A (zh) * | 2019-02-01 | 2021-11-12 | 武田药品工业株式会社 | 使用重组VWF(rVWF)进行预防性治疗的方法 |
| EP4028046B1 (en) | 2019-09-11 | 2024-02-14 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Methods of treatment related to complexes of von willebrand factor and complement c1q |
| JP2023514541A (ja) | 2020-02-04 | 2023-04-06 | 武田薬品工業株式会社 | 組換えｖｗｆの投与による重症のフォンヴィレブランド病患者における過多月経の治療 |
| WO2024124136A1 (en) * | 2022-12-09 | 2024-06-13 | Vega Therapeutics, Inc. | Von willebrand disease animal models |
Family Cites Families (32)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4179337A (en) | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
| JPS6023084B2 (ja) | 1979-07-11 | 1985-06-05 | 味の素株式会社 | 代用血液 |
| US4640835A (en) | 1981-10-30 | 1987-02-03 | Nippon Chemiphar Company, Ltd. | Plasminogen activator derivatives |
| US4496689A (en) | 1983-12-27 | 1985-01-29 | Miles Laboratories, Inc. | Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer |
| US4638028A (en) | 1985-04-08 | 1987-01-20 | Goodyear Tire & Rubber Company | Rubber polymerases and methods for their production and use |
| EP0218692A4 (en) | 1985-04-11 | 1988-03-22 | Childrens Medical Center | VON WILLEBRAND FACTOR. |
| EP0206448B1 (en) | 1985-06-19 | 1990-11-14 | Ajinomoto Co., Inc. | Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide) |
| US4791192A (en) | 1986-06-26 | 1988-12-13 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Chemically modified protein with polyethyleneglycol |
| SE504074C2 (sv) * | 1993-07-05 | 1996-11-04 | Pharmacia Ab | Proteinberedning för subkutan, intramuskulär eller intradermal administrering |
| DE4435485C1 (de) * | 1994-10-04 | 1996-03-21 | Immuno Ag | Verfahren zur Gewinnung von hochreinem von Willebrand-Faktor |
| AT403764B (de) * | 1996-03-15 | 1998-05-25 | Immuno Ag | Stabiler faktor viii/vwf-komplex |
| AT405403B (de) * | 1997-02-27 | 1999-08-25 | Immuno Ag | Reinigung von von willebrand-faktor durch kationenaustauscherchromatographie |
| AT406373B (de) * | 1997-02-27 | 2000-04-25 | Immuno Ag | Verfahren zur reinigung von faktor viii/vwf-komplex mittels kationenaustauscherchromatographie |
| US6531577B1 (en) | 1997-12-15 | 2003-03-11 | Hemasure Denmark A/S | von Willebrand factor (vWF)-containing preparation, process for preparing vWF-containing preparations, and use of such preparations |
| US6864403B1 (en) | 1998-10-15 | 2005-03-08 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Plant protein disulfide isomerases |
| US20040014657A1 (en) * | 2001-11-05 | 2004-01-22 | Jan Ohrstrom | Use of blood coagulation factor XIII for treating haemophilia A |
| WO2005012354A1 (en) * | 2003-07-31 | 2005-02-10 | Zlb Behring Gmbh | Method for extending the half-life of fviii |
| EP1593388A1 (en) * | 2004-05-05 | 2005-11-09 | ZLB Behring GmbH | Therapeutic plasma protein-concentrates containing von willebrand factor as high molecular weight multimers |
| US20060094104A1 (en) | 2004-10-29 | 2006-05-04 | Leopold Grillberger | Animal protein-free media for cultivation of cells |
| US7884075B2 (en) * | 2004-12-27 | 2011-02-08 | Baxter International Inc. | Polymer-factor VIII-von Willebrand factor-conjugates |
| PL3121266T3 (pl) | 2006-01-04 | 2020-07-13 | Baxalta Incorporated | Wolne od oligopeptydów pożywki do hodowli komórkowej |
| AU2008261261B2 (en) * | 2007-06-13 | 2013-06-27 | Csl Behring Gmbh | Use of VWF stabilized FVIII preparations and of VWF preparations without FVIII for extravascular administration in the therapy and prophylactic treatment of bleeding disorders |
| EP2222329A1 (en) | 2007-11-09 | 2010-09-01 | Baxter International Inc. | Modified recombinant factor viii and von willebrand factor and methods of use |
| JP2009127455A (ja) | 2007-11-20 | 2009-06-11 | Bando Kiko Co Ltd | 往復動エンジン |
| EP3936116A1 (en) * | 2007-12-28 | 2022-01-12 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Rrecombinant vwf containing formulations |
| ES2298096B1 (es) * | 2008-01-08 | 2009-01-01 | Grifols, S.A. | Procedimiento para la obtencion de un concentrado de factor von willebrand o del complejo de factor viii/factor von willebrand y utilizacionde los mismos. |
| KR101507718B1 (ko) * | 2008-06-24 | 2015-04-10 | 체에스엘 베링 게엠베하 | 연장된 생체내 반감기를 갖는 인자 ｖｉｉｉ, 폰 빌레브란트 인자 또는 이들의 복합체 |
| PT2349314E (pt) | 2008-10-21 | 2013-05-28 | Baxter Int | Formulações de vwf recombinante liofilizado |
| US20110072524A1 (en) * | 2009-08-04 | 2011-03-24 | Baxter International Inc. | Transgenic Mouse Lacking Endogenous FVIII and VWF - A Model of Hemophilia A |
| TWI670073B (zh) * | 2010-07-08 | 2019-09-01 | 美商巴克斯歐塔公司 | 在細胞培養物中生產重組高分子量ｖＷＦ的方法 |
| US20120006800A1 (en) | 2010-07-09 | 2012-01-12 | Illinois Tool Works Inc. | Weld bead feature communication systems and devices |
| WO2012171031A1 (en) * | 2011-06-10 | 2012-12-13 | Baxter International Inc. | Treatment of coagulation disease by administration of recombinant vwf |
-
2012
- 2012-06-11 WO PCT/US2012/041957 patent/WO2012171031A1/en active Application Filing
- 2012-06-11 PT PT181731795T patent/PT3412305T/pt unknown
- 2012-06-11 CN CN201810079423.5A patent/CN108210889A/zh active Pending
- 2012-06-11 PL PL12728919T patent/PL2717905T3/pl unknown
- 2012-06-11 EP EP20216368.9A patent/EP3858375B1/en active Active
- 2012-06-11 CN CN201611071108.5A patent/CN107412743B/zh active Active
- 2012-06-11 US US13/493,926 patent/US9272021B2/en active Active
- 2012-06-11 DK DK18173179.5T patent/DK3412305T3/da active
- 2012-06-11 AU AU2012267458A patent/AU2012267458A1/en not_active Abandoned
- 2012-06-11 SG SG10201604684WA patent/SG10201604684WA/en unknown
- 2012-06-11 KR KR1020197010327A patent/KR20190041032A/ko not_active IP Right Cessation
- 2012-06-11 PL PL20216368.9T patent/PL3858375T3/pl unknown
- 2012-06-11 SG SG10202002591QA patent/SG10202002591QA/en unknown
- 2012-06-11 AR ARP120102073A patent/AR086904A1/es not_active Application Discontinuation
- 2012-06-11 PL PL18173179T patent/PL3412305T3/pl unknown
- 2012-06-11 ES ES12728919.7T patent/ES2682249T3/es active Active
- 2012-06-11 LT LTEP12728919.7T patent/LT2717905T/lt unknown
- 2012-06-11 ES ES18173179T patent/ES2860450T3/es active Active
- 2012-06-11 PT PT202163689T patent/PT3858375T/pt unknown
- 2012-06-11 DK DK20216368.9T patent/DK3858375T3/da active
- 2012-06-11 CA CA2838845A patent/CA2838845C/en active Active
- 2012-06-11 SI SI201231321T patent/SI2717905T1/sl unknown
- 2012-06-11 RU RU2017102679A patent/RU2680402C2/ru active
- 2012-06-11 RU RU2014100107A patent/RU2628537C2/ru active
- 2012-06-11 MX MX2013014543A patent/MX350582B/es active IP Right Grant
- 2012-06-11 BR BR112013031795A patent/BR112013031795A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2012-06-11 TR TR2018/08823T patent/TR201808823T4/tr unknown
- 2012-06-11 PT PT127289197T patent/PT2717905T/pt unknown
- 2012-06-11 KR KR1020207020667A patent/KR102319868B1/ko active IP Right Grant
- 2012-06-11 ES ES20216368T patent/ES2976169T3/es active Active
- 2012-06-11 HU HUE12728919A patent/HUE039317T2/hu unknown
- 2012-06-11 KR KR1020147000709A patent/KR101969515B1/ko active IP Right Grant
- 2012-06-11 EP EP18173179.5A patent/EP3412305B1/en active Active
- 2012-06-11 EP EP12728919.7A patent/EP2717905B1/en active Active
- 2012-06-11 CN CN201280038870.7A patent/CN103732244A/zh active Pending
- 2012-06-11 FI FIEP20216368.9T patent/FI3858375T3/fi active
- 2012-06-11 JP JP2014514934A patent/JP6347468B2/ja active Active
- 2012-06-11 DK DK12728919.7T patent/DK2717905T3/en active
-
2013
- 2013-12-10 MX MX2020000083A patent/MX2020000083A/es unknown
-
2015
- 2015-12-30 US US14/985,212 patent/US20160184403A1/en active Pending
-
2016
- 2016-04-13 AU AU2016202299A patent/AU2016202299B2/en active Active
- 2016-07-12 JP JP2016137381A patent/JP6527114B2/ja active Active
-
2017
- 2017-07-20 AU AU2017206235A patent/AU2017206235B2/en active Active
-
2018
- 2018-06-26 HR HRP20180962TT patent/HRP20180962T1/hr unknown
- 2018-12-27 HK HK18116648.2A patent/HK1257436A1/zh unknown
- 2018-12-28 JP JP2018246475A patent/JP2019048892A/ja active Pending
-
2020
- 2020-01-02 AU AU2020200026A patent/AU2020200026A1/en not_active Abandoned
-
2022
- 2022-03-04 AU AU2022201518A patent/AU2022201518A1/en active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6347468B2 (ja) | 組換えフォンウィルブランド因子の投与による凝固疾患の治療 | |
| Stennicke et al. | A novel B-domain O-glycoPEGylated FVIII (N8-GP) demonstrates full efficacy and prolonged effect in hemophilic mice models | |
| KR20100095441A (ko) | 변형된 재조합 인자 ⅷ 및 폰 빌레브란트 인자 및 사용 방법 | |
| KR20110071012A (ko) | 낮은 수준의 수용성 중합체를 포함하는 개질된 혈액 인자 | |
| JP2023123738A (ja) | 組換えｖｗｆの投与による重度のフォンヴィレブランド病を患う患者における消化管出血の治療 | |
| JP2023085513A (ja) | 待機手術を受ける、重度のフォンヴィレブランド病を患う患者の、組換えｖｗｆの投与による治療法 | |
| EP3917557A1 (en) | Methods of prophylactic treatment using recombinant vwf (rvwf) | |
| WO2023246680A1 (en) | Activators of coagulation factor x and formulations thereof for treating bleeding disorders | |
| JP2023514541A (ja) | 組換えｖｗｆの投与による重症のフォンヴィレブランド病患者における過多月経の治療 | |
| FVIII | A novel B-domain O-glycoPEGylated FVIII (N8-GP) demonstrates full efficacy and prolonged effect in hemophilic mice models |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20150407 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150609 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20150609 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160413 |
|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20160511 |
|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20160608 |
|
| RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20160610 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160712 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20161222 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170321 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170518 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20171023 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180223 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180403 |
|
| A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20180406 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20180404 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20180425 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20180523 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6347468 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R3D02 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R153 | Grant of patent term extension |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R153 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |