JP6282969B2 - フロー解析装置、フローサイトメータ、及びフロー解析方法 - Google Patents

Description

本発明はフロー解析装置、フローサイトメータ、及びフロー解析方法に関する。

細胞等を分析する場合、フローサイトメータと呼ばれる装置が用いられる。フローサイトメータは、フローセルと呼ばれる流路に細胞や粒子が含まれた試料液を流し、画像処理技術を用いて細胞の分析を行う。このフローサイトメータの利用時には、流路系（フローセル内におけるサンプルフローの位置や幅等）の異常を正確に把握し、異常時には流路系を修正することが重要である。

例えば特許文献１には、光学系や流路系の異常検知の容易化を図った粒子画像解析装置が開示されている。当該粒子画像解析装置は、フローセル内の観察対象領域に光を照射し、照射により得られた粒子画像の光強度分布を求めて異常状態を検知する。特許文献２には、特許文献１と同様にフローセルに対してフラッシュランプを発光し、フローセルを撮像した粒子画像を解析することにより、サンプル流（サンプルフロー）の流れを解析するフロー式粒子画像解析装置が開示されている。特許文献３も同様に、サンプルフローにフラッシュランプを発光して粒子画像を撮像し、粒子画像を解析することによりサンプルフローの形状を推定できるフロー式粒子画像解析装置が開示されている。

特開平８−２１９９７５号公報 特開平１１−９４７２７号公報 特開２００２−６２２５１号公報 特開平８−１２８９４４号公報

上述した特許文献１〜３の手法では、フラッシュランプを照射したフローセルを撮像する撮像系を用いて流路系の異常を解析している。しかしながら撮像系に異常が生じた場合、正確に流路系の評価を行うことができない。例えば振動や意図しない撮像カメラへの接触により、撮像カメラとフローセルとの距離や撮像箇所の位置（奥行方向、左右方向）が微妙に変化してしまうことが考えられる。このように撮像系に異常が生じた場合、フローセル内で粒子が通過している位置を正確に把握できないといった問題や、サンプルフローがフローセルの中心線付近を通過しているか否かが正確に評価できないといった問題がある。またこの問題に対応するために、撮像系を微調整することも考えられるが（例えば特許文献３段落００９１等）、微調整の手間がかかっていた。

すなわち特許文献１〜３の技術では、撮像系の異常（ズレ）が生じた場合に精度良くサンプルフローの評価ができないという問題があった。

本発明は上述の課題に鑑みてなされたものであり、精度良くサンプルフローを評価することが出来るフロー解析装置、フローサイトメータ、及びフロー解析方法を提供することを主たる目的とする。

本発明にかかるフロー解析装置の一態様は、
所定幅の流路を持つフローセルに対して閃光を照射するフラッシュランプと、
前記所定幅が撮像範囲に含まれるように、前記フラッシュランプによって照射された前記フローセルを撮像する撮像部と、
前記撮像部が撮像した流体画像から前記フローセルの端部を示すエッジを検出し、検出したエッジと前記所定幅の関係に基づいて、前記フローセルを流れる流体の評価を行う評価部と、
前記評価部の評価結果を出力する出力部と、
を備える、ものである。

上述のフローセル解析装置は、フローセルの幅という不変の情報と、フローセルの端部を示すエッジと、の関係を用いてフローセル内の流体の大きさや位置を評価している。これにより、撮像部の撮像位置が変わったような場合であってもフローセル内での粒子位置や大きさを正確に評価することが出来る。

本発明では、精度良くサンプルフローを評価することができるフロー解析装置、フローサイトメータ、及びフロー解析方法を提供することが出来る。

実施の形態１にかかるフロー解析装置１０及びフローサイトメータ２０の構成を示すブロック図である。 フローセル内を流れるシース流及びサンプル液を示す概念図である。 実施の形態１にかかる評価部１５のサンプルフローの評価手法を示す概念図である。 実施の形態１にかかる評価部１５のサンプルフローの評価手法を示す概念図である。 実施の形態１にかかる出力部１６による出力例を示す概念図である。 実施の形態１にかかる出力部１６による出力例を示す概念図である。 実施の形態１にかかる出力部１６による出力例を示す概念図である。 実施の形態１にかかる出力部１６による出力例を示す概念図である。 実施の形態２にかかるフローサイトメータ２０の構成を示すブロック図である。

＜実施の形態１＞
以下、図面を参照して本発明の実施の形態について説明する。図１は、本実施の形態にかかるフロー解析装置１０及びフローサイトメータ２０の構成を示すブロック図である。

はじめにフローサイトメータ２０について説明する。フローサイトメータ２０は、フローセル２１と呼ばれる小さな角穴状の穴に細胞や粒子（以下、細胞も含む概念として単に粒子と記載する。）が含まれた試料液（以下、サンプルフローとも記載する。）を流し、当該流体を評価する。フローサイトメータ２０は、レーザ照射装置（図示せず）を内蔵し、サンプルフローを流しているフローセル２１にレーザ光を照射する。そしてフローサイトメータ２０は、レーザ照射により得られた散乱光や蛍光を評価することによりサンプルフローに含まれている粒子の形状や粒径等を検出する。なおフローサイトメータ２０の内部構成の記載は省略しているが、例えば特許文献４等と同様の構成を有していればよい。

フローサイトメータ２０内で使用されるレーザ光は、いわゆるガウシアン形状（中心が強く裾野が弱い形状）を持つ。レーザ光がガウシアン形状を有することにより、フローセル２１内を同じ粒子が通過した場合であっても、フローセル２１の中心線を外れて通過した粒子の信号強度は小さくなる。つまり、粒子のフローセル２１内での通過位置は、測定精度に影響を与える。図２を参照して、この問題の詳細について説明する。

図２は、フローセル２１内を流れるシースフロー及びサンプルフローを示す概念図である。なお図２はあくまでも概念図であり、その大きさ等については簡略化して記載したものである。フローセル２１は、所定幅を持つ流路であり、以下の例では当該幅は２５０μｍであるものとする。フローサイトメータ２０内では、図示しない試料容器に試料が格納され、当該試料は染色された後にサンプルフローとしてフローセル２１内を流される。またサンプルフローを包み込むようにしてシースフローがフローセル２１を流される。

ここで上述するようにフローサイトメータ２０において使用されるレーザ光は、ガウシアン形状を有するため、サンプルフロー内に含まれる粒子がフローセル２１の中心線を通過することが好ましい。また粒子がフローセル２１の中心線付近を通過するために、サンプルフローがフローセル２１の中心線付近に位置することが望ましい。サンプルフローがフローセル２１の中心線付近を通過していない場合、すなわち粒子がフローセル２１の中心線付近を通過していない場合、レーザ光の照射により得られる散乱光や蛍光が意図しない状態となり、結果として粒子分類結果の精度が悪くなってしまう。この精度悪化につながる状況を事前に判断するために、フロー解析装置１０が用いられる。具体的にはフロー解析装置１０は、フローセル２１内における流体（サンプルフローの位置、サンプルフローの幅、粒子の通過位置、粒子の大きさ（粒径）等）を評価するものである。

再び図１を参照する。フロー解析装置１０は、フラッシュランプ１１、撮像部１２、Ａ／Ｄ（Analog/Digital）変換器１３、メモリ１４、評価部１５、及び出力部１６を有する。フロー解析装置１０は、例えばフローサイトメータ２０に着脱可能な装置である。例えばフローサイトメータ２０の設置やメンテナンスを行うサービスマンは、フローサイトメータ２０の使用前にロー解析装置１０をフローサイトメータ２０に取り付けて使用する。なおフロー解析装置１０がフローサイトメータ２０に内蔵された形態は実施の形態２において後述する。

フラッシュランプ１１は、フローセル２１に対して閃光（ストロボ）を照射するランプである。フラッシュランプ１１は、フローセル２１内のサンプルフロー及びシースフローに対して閃光を照射する。なおフラッシュランプ１１は、１秒間に１５回以上の点灯を行うことが好ましく、好適には３０回以上の点灯を行うと良い。

撮像部１２は、フラッシュランプ１１の点灯により得られる粒子光学像を撮像する。撮像部１２は、図示しないレンズや撮像処理に使用する回路系等を備える。撮像部１２は、フラッシュランプ１１の点灯毎に得られる粒子光学像を撮像する。例えばフラッシュランプ１１が１秒間に３０回点灯する場合、撮像部１２は３０枚の流体画像（静止画像）を取得する。ここで撮像部１２は、上述のフローセル２１の幅（２５０μｍ）がすべて含まれるように撮像処理を行う。撮像部１２は、取得した流体画像をＡ／Ｄ変換器１３に供給する。

Ａ／Ｄ変換器１３は、アナログデータの流体画像をデジタルデータに変換してメモリ１４に格納する。この際に各流体画像は、撮像タイミング（解析開始からの経過時間）と関連付けられてメモリ１４に格納される。

メモリ１４は、Ａ／Ｄ変換処理により得られた画像データをはじめとする各種データを記憶する。メモリ１４は、例えばＨＤＤ（Hard Disk Drive）等の記憶装置である。メモリ１４は、フロー解析装置１０に内蔵されたものであっても、フロー解析装置１０に着脱可能なもの（例えばＵＳＢ（Universal Serial Bus）メモリ等）であってもよい。

評価部１５は、メモリ１４から順次流体画像を読み出し、当該流体画像を解析することによりフローセル２１内の流体を評価する。具体的には評価部１５は、流体画像のエッジを検出し、検出したエッジとフローセル２１の幅（２５０μｍ）の関係に基づいてフローセル２１内の流体を評価する。当該評価方法の詳細を、図３を参照して説明する。

前提として撮像部１２は、フローセル２１の幅がすべて含まれるように撮像範囲を定めて撮像処理を行い（例えば図３の一点破線で示す領域を撮像領域とする。）、流体画像を取得する。評価部１５は、流体画像からフローセル２１の両端のエッジ（図３における（ア）及び（イ））を検出する。すなわち評価部１５は、流体画像の輝度変化からフローセル２１の両端を検出し、これによりフローセル２１の幅に相当する部分を検出する。なおエッジの検出方法は、一般的な画像解析の分野で行われている手法（輝度等の変化率を用いて検出する手法）を用いればよい。

評価部１５は、当該部分（フローセル２１の幅）のピクセル数を算出する。ここでは、フローセル２１の幅が１０００ピクセルであるものとする。そして評価部１５は、メモリ１４に格納されたフローセル２１の幅の情報（以下の説明では直径２５０μｍ）を読み出す。評価部１５は、このフローセル２１の幅の情報（２５０μｍ）を基に、１ピクセルがどの大きさであるかを決定する。本例では評価部１５は、１ピクセルが０．２５μｍに相当することを算出する（“１ピクセル＝０．２５μｍ”という換算系を算出する）。

評価部１５は、このピクセル換算系（１ピクセル＝０．２５μｍ）を基に、流体の評価を行う。はじめに図４（Ａ）を参照して、サンプルフローの幅と位置の評価方法を説明する。なお図４（Ａ）及び図４（Ｂ）においては、説明の明確化のため、サンプルフロー及び粒子の粒径は、一般的なサイズよりも大きく記載している。

図４（Ａ）の例において評価部１５は、上述のように１ピクセルが０．２５μｍに相当すること（４ピクセルが１μｍに相当すること）を算出する。そして評価部１５は、サンプルフローのエッジを検出する。評価部１５は、サンプルフローの一方のエッジがフローセル２１の一方のエッジから６００ピクセルの位置にあり、サンプルフローの他方のエッジがフローセル２１の他方のエッジから２５０ピクセルの位置にあることを検出する。これにより評価部１５は、サンプルフローの幅が１５０ピクセル、すなわち３７．５μｍであると算出する。また評価部１５は、サンプルフローの中心がフローセル２１の一方のエッジから６７５ピクセル（６００＋（１５０／２））の位置、すなわちフローセル２１の中心から１７５ピクセルずれた位置（中心から４３．７５μｍずれた位置）にあることを算出する。

評価部１５は、サンプルフローと同様の手法により粒子の通過位置や粒径等を算出する。図４（Ｂ）を参照して粒子の通過位置及び粒径の算出方法について説明する。図４（Ｂ）の例において評価部１５は、１ピクセルが０．２５μｍに相当すること（４ピクセルが１μｍに相当すること）を算出する。評価部１５は、通過粒子の輪郭をエッジ検出により特定する。評価部１５は、通過粒子の一端がフローセル２１の一方のエッジから６６０ピクセルの位置にあり、通過粒子の他端がフローセル２１の他方のエッジから２６０ピクセルの位置にあることを検出する。これにより評価部１５は、通過粒子の粒径が８０ピクセル（１０００ピクセル−６６０ピクセル−２６０ピクセル）、すなわち２０μｍであると算出する。また評価部１５は、粒子の通過位置がフローセル２１の一方から７００ピクセル（６６０＋（８０／２））の位置、すなわちフローセル２１の中心から２００ピクセルずれた位置（中心から５０μｍずれた位置）にあることを算出する。

評価部１５は、この評価処理を各流体画像に対して行うことにより、各時間におけるサンプルフローの位置や幅、粒子の通過位置、通過した粒子粒径等を算出する。評価部１５の評価結果は、出力部１６に供給される。

再び図１を参照する。出力部１６は、評価部１５によるフローセル２１内の流体の評価結果を出力する。ここで出力とは、フロー解析装置１０に備えられた表示用のディスプレイ（図示せず）に結果を表示すること、評価結果を印刷用紙に印刷して出力すること、表示用のディスプレイを持つ他の装置に評価結果を送信すること、等を含む概念である。

以下、出力部１６による出力例を図５〜図８を参照して説明する。はじめに粒子の通過位置をヒストグラムで表示する例を図５を参照して説明する。評価部１５は、各流体画像を上述の方法（図４（Ｂ））で解析し、各粒子の通過位置を算出する。そして出力部１６は、横軸をフローセル２１の位置（フローセル２１の中心を０μｍとし、左方向をマイナス方向とし、右方向をプラス方向とする。）とし、縦軸を通過粒子の個数（頻度）としたヒストグラムを生成して表示する（図５）。ユーザは、このヒストグラムを参照することにより、粒子が中心線を通過しているかを容易に把握することができる。図５の例では、フローセル２１の中心位置付近の頻度が高くなっているため、ユーザはサンプルフローの流れが概ね問題ない状態であることを把握することができる。なお出力部１６は、ヒストグラムを画面上に表示するのではなく印刷するなど他の出力を行ってもよい。

また出力部１６は、各単位時間での粒子の通過位置も把握できるヒストグラムを生成してもよい。以下、詳細を説明する。

図６は、各単位時間における粒子の通過位置を示すヒストグラムの例である。撮像部１２は、フラッシュランプ１１の照射毎に流体画像を撮像する。各流体画像は、撮影タイミング（サンプルフローの分析開始からの経過時間）と関連付けられている。本例（図６）では、３秒間の解析を行ったものとし、各単位時間（サンプルフローの分析開始から０〜１秒、１〜２秒、２〜３秒）での粒子の通過位置を表示するものである。

評価部１５は、各単位時間（０〜１秒、１〜２秒、２〜３秒）の流体画像を評価して通過粒子の個数をカウントする。出力部１６は、通過粒子のカウント結果を単位時間毎にヒストグラムとして出力する（図６）。また出力部１６は、分析開始から終了までの間（０〜３秒）の通過粒子の個数を示すヒストグラムも合わせて出力してもよい（図６）。

図６を参照したユーザは、実線部分を参照することにより、全体時間ではフローセル２１の中心線付近を多くの粒子が通過していることを把握できる。しかしながらユーザは、各単位時間のヒストグラム（点線、一点破線、二点破線）を参照することにより粒子の通過位置がマイナス位置からプラス位置方向へ徐々に移動していることを把握できる。このためユーザは、フローサイトメータ２０が好ましくない状況（例えばフローサイトメータ２０が緩やかな傾きのある状況）でサイトメトリーを行っていると把握できる。

なお図６のように、静止画像を用いて各単位時間のヒストグラムを表示するのではなく、図７に示すようにヒストグラムが移動するようなアニメーション（動画）を表示してもよい。

続いて図８を参照して、出力部１６による第２の出力例について説明する。第２の出力例は、サンプルフローの位置及び幅と、粒子の通過位置及び粒径と、をアニメーション（動画）で表示するものである。なお図８において、フローセル２１の中心位置を０μｍとし、左方向をマイナス方向とし、右方向をプラス方向とする。

評価部１５は、上述の手法により各経過時間におけるサンプルフローの位置、サンプルフローの幅、粒子の通過位置、及び粒子の粒径を算出する。出力部１６は、これらの情報を用いて、サンプルフロー及び粒子の遷移をアニメーションで表示する。図８は、当該アニメーションの表示例である。図８は、画面上から下へサンプルフロー及び粒子が流れているアニメーションを示す概念図である。

当該アニメーションを参照することにより、ユーザはサンプルフロー及び粒子の流れを直感的に把握することが出来る。例えば図８の例では、ユーザは、サンプルフローの位置が徐々にマイナス方向に移動していることをアニメーション形式で把握することができる。

なお、アニメーションに限らず、出力部１６はユーザに指定された時点（例えば０〜０．６秒）のサンプルフロー及び粒子の遷移を静止画（すなわち図８の左図）で出力してもよい。また図８の例ではサンプルフローと通過粒子の双方を表示していたが、必ずしもこれに限られず、モード切替によってサンプルフローと通過粒子の一方のみを表示するようにしてもよい。

続いて本実施の形態にかかるフロー解析装置１０の効果について説明する。フロー解析装置１０内の評価部１５は、フローセル２１の幅（上述の例では２５０μｍ）という一定の値を基準とする。フローセル２１の幅は、撮像部１２に異常（例えばカメラ位置のズレ、カメラへの接触）等が起こった場合であっても変化することがない絶対値である。評価部１５は、このフローセル２１の幅とサンプルフローや粒子に起因するエッジの相対的関係を基にフローセル内の流体評価（サンプルフローの幅や位置、粒子の通過位置や粒径等）を行っている。すなわち評価部１５は、撮像系に異常が生じた場合であっても変化することのないフローセル２１の幅の情報を用いてサンプルフローを評価している。これにより、撮像系に異常（ズレ）が生じたような場合であっても正確なフローセル２１内の流体評価を実現することができる。

また出力部１６は、評価部１５による流体の評価結果を様々な形式で出力する。例えば出力部１６は、図５に示すようにフローセル２１内において粒子が通過した位置をヒストグラムとして表示する。ユーザは、このヒストグラム（図５）を参照することにより、フローセル２１内の粒子の通過位置と通過数の関係を容易に把握することができる。

また出力部１６は、解析時間を各単位時間（例えば図６のように０〜１秒、１〜２秒、２〜３秒）に分割し、各単位時間におけるフローセル２１内の粒子の通過位置と通過数を示すヒストグラムを複数生成し、複数のヒストグラムを重畳的に表示する（図６）。ユーザは、このヒストグラム（図６）を参照することにより時間経過と粒子の通過位置の関係を直感的に把握することができる。また生成した複数のヒストグラムをアニメーション表示（図７）することによっても、時間経過と粒子の通過位置の関係を直感的に把握することができる。

出力部１６は、フローセル２１内を流れるサンプルフローの端部を示すエッジを検出し、エッジの検出位置の経時的変化を表示してもよい（図８）。図８の例において出力部１６は、縦軸を経過時間とし、横軸をフローセル２１内における位置として、サンプルフローのエッジの経時的変化を表示している。同様に出力部１６は、縦軸を経過時間とし、横軸をフローセル２１内における位置として、粒子の通過位置の経時的変化を表示している。ユーザは、この経時的変化の表示を参照することにより、サンプルフローや粒子の通過位置が時間経過に伴ってどのように変化したかを容易に把握することができる。

なお、上述のようにフラッシュランプ１１は１秒間に最低１５回、好適には３０回以上の照射を行う。これにより、アニメーション表示等を行う際に自然な表示を実現することが出来る。

＜実施の形態２＞
本実施の形態にかかるフローサイトメータ２０は、上述のフロー解析装置１０の機能を内蔵していることを特徴とする。以下、本実施の形態にかかるフローサイトメータ２０について説明する。

図９は、本実施の形態にかかるフローサイトメータ２０の構成を示すブロック図である。なお、以下の説明において実施の形態１と同様の名称及び符号を付した処理部は、特に言及しない限り実施の形態１と同様の処理を行うものとする。

図９では、図１において記載を省略したフローサイトメータ２０の流路系の各処理部を示している。すなわちフローサイトメータ２０は、試料容器２２、サンプリングノズル２３、染色液２４、染色槽２５、シース液容器２６、及びシース液送出用シリンジ２７を有する。

試料容器２２は、分析対象の試料が格納された容器である。サンプリングノズル２３は、試料容器２２から試料を吸い出して染色槽２５に格納する。また染色槽２５には、染色液２４が供給される。染色槽２５の内部では、試料内の粒子が染色される。

シース液容器２６には、試料を包み込むようにして流されるシース液が格納されている。シース液送出用シリンジ２７は、シース液容器２６からシース液を吸い出してフローセル２１内部に供給する。なおシース液送出用シリンジ２７に代わりシース液を吸い出してフローセル２１に供給する定状送液型の部材を用いてもよい。染色槽２５内で染色された試料（すなわちサンプルフロー）は、シース液に包み込まれるようにしてフローセル２１内を流れる。なお上述の説明ではフローサイトメータ２０は染色液２４や染色槽２５を有するものとしたが必ずしもこれに限られず、染色液２４や染色槽２５を持たないフローサイトメータ２０内にフロー解析装置１０が内蔵される構成であってもよい。

本実施の形態にかかる上述の流路系は、評価部１５による評価結果によってサンプルフローの流量調整や流入位置の調整を行う。以下、詳細を説明する。

フロー解析装置１０内の各処理部は、フローサイトメータ２０の分析中に上述のサンプルフロー分析（サンプルフローの位置の評価、サンプルフローの幅の評価、粒子の通過位置の評価、通過した粒子の粒径の評価）を行う。本実施の形態にかかる評価部１５は、当該評価結果に応じて流路系にフィードバックを行う。例えば評価部１５は、サンプルフローの幅が所定値以上であった場合、染色槽２５の流出系に対して、流量を減少させる制御指示を送出する。また評価部１５は、サンプルフローの通過位置がフローセル２１の中心線からずれていた場合、染色槽２５の流出系に対して、流出位置の調整指示を送出する。

同様に評価部１５は、通過粒子の位置や個数に応じて染色槽２５の流出系に対する調整指示を行ってもよい。また評価部１５は、サンプルフロー分析の結果に応じてシース液の送出系（シース液送出用シリンジ２７等）の調整指示を行ってもよい。

以上が本実施の形態にかかるフローサイトメータ２０の動作である。続いて本実施の形態にかかるフローサイトメータ２０の効果について説明する。本実施の形態では、フローサイトメータ２０による粒子分析（散乱光や蛍光を用いた分析）の最中に、フロー解析装置１０がサンプルフロー分析（サンプルフローの位置の評価、サンプルフローの幅の評価、粒子の通過位置の評価、通過した粒径の評価）を行い、サンプルフロー分析結果に応じてサンプルフローの流量調整や流入位置の調整を行う。すなわち本実施の形態にかかるフローサイトメータ２０は、サンプルフローの自動補正機能を有する。これにより、精度の良い粒子解析を行うことができる。

以上、本発明者によってなされた発明を実施の形態に基づき具体的に説明したが、本発明は既に述べた実施の形態に限定されるものではなく、その要旨を逸脱しない範囲において種々の変更が可能であることはいうまでもない。

１０ フロー解析装置
１１ フラッシュランプ
１２ 撮像部
１３ Ａ／Ｄ変換器
１４ メモリ
１５ 評価部
１６ 出力部
２０ フローサイトメータ
２１ フローセル
２２ 試料容器
２３ サンプリングノズル
２４ 染色液
２５ 染色槽
２６ シース液容器
２７ シース液送出用シリンジ

Claims (10)

1. 所定幅の流路を持つフローセルに対して閃光を照射するフラッシュランプと、
   前記所定幅が撮像範囲に含まれるように、前記フラッシュランプによって照射された前記フローセルを撮像する撮像部と、
   前記撮像部が撮像した流体画像から前記フローセルの両端を示すエッジを検出し、両端のエッジ間のピクセル数と前記所定幅の大きさを基にピクセルと実際の大きさの換算系を算出し、当該換算系を用いて、前記フローセルを流れるサンプルフローの幅、前記サンプルフローの流れる位置、前記フローセルを流れる粒子の通過位置、及び前記フローセルを流れる粒子の粒径、の少なくとも一つを評価結果として算出する評価部と、
   前記評価部の評価結果を出力する出力部と、を備えるフロー解析装置。
2. 前記評価部は、粒子の輪郭を示すエッジの検出に基づいて前記フローセル内を流れる粒子の通過位置を検出し、
   前記出力部は、前記評価部の粒子の通過位置の検出に基づいて、前記フローセル内での粒子の通過位置と通過数の関係を示すヒストグラムを生成し、作成したヒストグラムを出力する、ことを特徴とする請求項１に記載のフロー解析装置。
3. 前記出力部は、各単位時間における前記フローセル内での粒子の通過位置と通過数の関係を示すヒストグラムをそれぞれ生成し、作成した複数のヒストグラムを重畳的に表示する、ことを特徴とする請求項２に記載のフロー解析装置。
4. 前記出力部は、各単位時間における前記フローセル内での粒子の通過位置と通過数の関係を示すヒストグラムをそれぞれ生成し、作成した複数のヒストグラムをアニメーションで表示する、ことを特徴とする請求項２に記載のフロー解析装置。
5. 前記評価部は、前記フローセル内での前記サンプルフローのエッジの位置を検出し、
   前記出力部は、前記評価部が検出した前記サンプルフローのエッジの位置の経時的変化を表示する、ことを特徴とする請求項１に記載のフロー解析装置。
6. 前記評価部は、粒子の輪郭を示すエッジの検出に基づいて前記フローセル内を流れる粒子の通過位置を検出し、
   前記出力部は、前記評価部が検出した前記フローセル内を流れる粒子の通過位置の経時的変化を表示する、ことを特徴とする請求項１に記載のフロー解析装置。
7. 前記フラッシュランプは、１秒間に少なくとも１５回の閃光の照射を行う、ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載のフロー解析装置。
8. 試料液を含むサンプルフロー及びシースフローが流される所定幅の流路を持つフローセルと、
   前記フローセルに対して閃光を照射するフラッシュランプと、
   前記所定幅が撮像範囲に含まれるように、前記フラッシュランプによって照射された前記フローセルを撮像する撮像部と、
   前記撮像部が撮像した流体画像から前記フローセルの両端を示すエッジを検出し、両端のエッジ間のピクセル数と前記所定幅の大きさを基にピクセルと実際の大きさの換算系を算出し、当該換算系を用いて、前記フローセルを流れる前記サンプルフローの幅、前記サンプルフローの流れる位置、前記フローセルを流れる粒子の通過位置、及び前記フローセルを流れる粒子の粒径、の少なくとも一つを評価結果として算出する評価部と、
   前記評価部の評価結果を出力する出力部と、を備えるフローサイトメータ。
9. 前記評価部の流体評価に基づいて、前記サンプルフローまたは前記シースフローの流入調整を行う、請求項８に記載のフローサイトメータ。
10. 所定幅の流路を持つフローセルに対して閃光を照射し、
    前記所定幅が撮像範囲に含まれるように、照射された前記フローセルを撮像し、
    撮像処理により得られた流体画像から前記フローセルの両端を示すエッジを検出し、両端のエッジ間のピクセル数と前記所定幅の大きさを基にピクセルと実際の大きさの換算系を算出し、当該換算系を用いて、前記フローセルを流れるサンプルフローの幅、前記サンプルフローの流れる位置、前記フローセルを流れる粒子の通過位置、及び前記フローセルを流れる粒子の粒径、の少なくとも一つを評価結果として算出し、当該評価結果を出力する、フロー解析方法。