JP6244912B2 - 癌の検出方法 - Google Patents
癌の検出方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6244912B2 JP6244912B2 JP2013535985A JP2013535985A JP6244912B2 JP 6244912 B2 JP6244912 B2 JP 6244912B2 JP 2013535985 A JP2013535985 A JP 2013535985A JP 2013535985 A JP2013535985 A JP 2013535985A JP 6244912 B2 JP6244912 B2 JP 6244912B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cancer
- caprin
- antibody
- seq
- amino acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
- G01N33/57496—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving intracellular compounds
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4738—Cell cycle regulated proteins, e.g. cyclin, CDC, INK-CCR
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4748—Tumour specific antigens; Tumour rejection antigen precursors [TRAP], e.g. MAGE
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
- G01N33/57492—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving compounds localized on the membrane of tumor or cancer cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/4703—Regulators; Modulating activity
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
このスコア値の基準においては、スコア2及び3の場合に、CAPRIN−1を発現している癌組織が生体試料に含まれていると判定することができる。
CAPRIN−1遺伝子のイヌ及びヒトの正常組織、並びに各種癌組織及び癌細胞株における発現をWO2010/016526の実施例1(4)に従ってRT−PCR法により調べた。その結果、健常なイヌ正常組織では精巣に強い発現が見られ、またイヌ乳癌(図1)及び腺癌組織で発現が見られた。さらに、ヒト組織での発現を併せて確認したところ、イヌCAPRIN−1遺伝子と同様、正常組織で発現が確認できたのは精巣のみだったが、癌細胞ではヒト乳癌細胞株8種(ZR75−1、MCF7、T47D、SK−BR−3、MDA−MB−157、BT−20、MDA−MB−231V、MRK−nu−1)の他、脳腫瘍細胞株、白血病由来細胞株、肺癌細胞株、食道癌細胞株など、多種類の癌細胞株で発現が検出された(図1)。この結果から、CAPRIN−1は精巣以外の正常組織では発現が見られず、一方、乳癌細胞をはじめとする多くの癌細胞に発現していることが確認された。
(1)マウス抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体の作製
WO2010/016526の実施例3で調製した配列番号2のアミノ酸配列を有するヒトCAPRIN−1 100μgを等量のMPL+TDMアジュバント(シグマ社製)と混合し、これをマウス1匹当たりの抗原溶液とした。この抗原溶液を6週齢のBalb/cマウス(日本SLC社製)の腹腔内に投与後、1週間毎にさらに3回投与を行った。最後の免疫から3日後に摘出した脾臓を滅菌した2枚のスライドガラスに挟んで擦り潰し、PBS(−)(日水社製)を用いて洗浄し1500rpmで10分間遠心して上清を除去する操作を3回繰り返して脾臓細胞を得た。得られた脾臓細胞とマウスミエローマ細胞SP2/0(ATCCから購入)とを10:1の比率にて混和し、そこに37℃に加温した10%FBSを含むRPMI1640培地200μLとPEG1500(ベーリンガー社製)800μLを混和して調製したPEG溶液を加えて5分間静置して細胞融合を行った。1700rpmで5分間遠心し、上清を除去後、ギブコ社製のHAT溶液を2%当量加えた15% FBSを含むRPMI1640培地(HAT選択培地)150mlで細胞を懸濁し、96穴プレート(ヌンク社製)の1ウェル当たり100μLずつ、プレート15枚に播種した。7日間、37℃、5%CO2の条件で培養することで、脾臓細胞とミエローマ細胞が融合したハイブリドーマを得た。
上記で取得した、癌細胞の細胞表面に反応する#1〜#10のマウス抗CAPRIN−1モノクローナル抗体を用いて、それらが認識するCAPRIN−1中の部分配列の同定を行った。
WO2010/016526の実施例3で調製した配列番号2のアミノ酸配列を有するヒトCAPRIN−1 300μgを等量のフロイントの完全アジュバントと混合し、これをニワトリ1羽当たりの抗原溶液とした。抗原溶液を7週齢のニワトリの腹腔内に投与後、4週間毎に7回投与を行い免疫を完了した。最後の免疫から4日後に摘出したそれぞれの脾臓を滅菌した2枚のスライドガラスに挟んで擦り潰し、PBS(−)(日水社製)を用いて洗浄し1500rpmで10分間遠心して上清を除去する操作を3回繰り返して脾臓細胞を得た。得られた脾臓細胞と鳥類細網内皮症ウイルスを用いてニワトリから形質転換法により樹立した、軽鎖が欠損しているニワトリミエローマ細胞とを5:1の比率にて混和し、そこに37℃に加温した10% FBSを含むIMDM培地200μLとPEG1500(ベーリンガー社製)800μLを混和して調製したPEG溶液を加えて5分間静置して細胞融合を行った。1700rpmで5分間遠心し、上清を除去後、Gibco社製のHAT溶液を2%当量加えた10% FBSを含むIMDM培地(HAT選択培地)300mlで細胞を懸濁し、96穴プレート(ヌンク社製)の1ウェル当たり100μLずつ、プレート30枚に播種した。7日間、37℃、5% CO2の条件で培養することで、脾臓細胞とニワトリミエローマ細胞が融合したハイブリドーマを得た。
上記(3)で得られた、配列番号64で示されるニワトリ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#11の重鎖可変領域の遺伝子増幅断片の両端を制限酵素処理した後精製し、ニワトリ抗体由来のリーダー配列とマウスIgG1のH鎖定常領域を既に挿入済みのpcDNA4/myc−His(Life technologies社製)ベクターへ常法に従って挿入した。また、配列番号65で示されるニワトリ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#11の軽鎖可変領域の遺伝子増幅断片の両端を制限酵素処理した後精製し、ニワトリ抗体由来のリーダー配列とマウスIgG1のL鎖定常領域を既に挿入済みのpcDNA3.1/myc−His(Life technologies社製)ベクターへ常法に従って挿入した。
(4)で取得した、癌細胞の細胞表面に反応するマウス−ニワトリキメラ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#12を用いて、認識するCAPRIN−1エピトープ領域の同定を行った。CAPRIN−1組換えタンパク質100μgをタンパク質阻害剤を含まない溶解バッファーに溶解し、マウス−ニワトリキメラ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#12と反応させた。その溶液に、トリプシン又はキモトリプシン消化酵素を加え、適正温度にて消化反応を行った。反応後プロテインGセファロース担体を加えて反応させて遠心操作により担体を沈殿させた。上清を除去した後、溶解バッファーとPBSで洗浄して0.1%の蟻酸に溶解させ、その上清を回収した。回収した上清サンプルを逆相カラム(HLB Extraction Cartridge(OASIS社))にかけて、抗体を除去したサンプル溶液を得た。得られたサンプルを逆相液体クロマトグラフィー(クロマトグラフィーナノシステム(KYA社))を用いてペプチドのみが含まれた溶液を回収し、タンデム型質量分析計quadrupole−TOF mass spectrometer(Waters−Micromass社)に導入してMS/MS解析を行い、サンプル内に含まれるペプチドを検出した。その結果、マウス−ニワトリキメラ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#12が認識するCAPRIN−1の部分配列として、配列番号66のアミノ酸配列からなるペプチドが同定された。ニワトリ抗CAPRIN−1モノクローナル抗体#11も、マウス−ニワトリキメラ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#12と同じ重鎖及び軽鎖可変領域を有するため、配列番号66のアミノ酸配列からなるペプチドを、CAPRIN−1の部分配列として認識する。
上記(3)で得られた、配列番号64で示されるニワトリ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#11の重鎖可変領域の遺伝子増幅断片の両端を制限酵素処理した後精製し、配列番号67を含むニワトリ抗体由来のリーダー配列と配列番号68を含むヒトIgG1のH鎖定常領域を既に挿入済みのpcDNA4/myc−His(Life technologies社製)ベクターへ常法に従って挿入した。また、配列番号65で示されるニワトリ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#11の軽鎖可変領域の遺伝子増幅断片の両端を制限酵素処理した後精製し、配列番号68を含むニワトリ抗体由来のリーダー配列と配列番号69を含むヒトIgG1のL鎖定常領域を既に挿入済みのpcDNA3.1/myc−His(Life technologies社製)ベクターへ常法に従って挿入した。
(1)と同様の方法で、(5)で同定した配列番号66のアミノ酸配列とキャリアタンパク質のKLH(Keyhole limpet haemocyanin)との融合タンパク質を免疫原として、等量のアジュバント剤TiterMax Gold(登録商標)(CytRx社)と混合して7日間隔でマウスの皮下に1回あたり20μg投与した。合計4回の投与を行った後、最終免疫から3日後のマウスから脾臓細胞を得て、上記(1)と同様の方法にてマウスミエローマ細胞と融合してハイブリドーマを作製した。その後、作製したハイブリドーマの培養上清中に含まれる各抗体とWO2010/016526の実施例3で調製したCAPRIN−1タンパク溶液1μg/ml又は免疫原として用いた配列番号66のアミノ酸配列とキャリアタンパク質のKLHとの融合タンパク質との反応性を指標に抗体を選抜した。WO2010/016526の実施例3で調製したCAPRIN−1タンパク溶液1μg/mlと配列番号66のアミノ酸配列とキャリアタンパク質のKLHとの融合タンパク質30μg/mlをそれぞれ96穴プレート1ウェル当たりに100μL添加して4℃にて18時間静置した。各ウェルをPBS−Tで洗浄後、ブロックエース(DSファーマバイオメディカル社)溶液を1ウェル当たり400μL添加して室温にて3時間静置した。溶液を除いて、PBS−Tでウェルを洗浄後、上記で得られたハイブリドーマの各培養上清を1ウェル当たり100μL添加し、室温で2時間静置した。PBS−Tで各ウェルを洗浄した後、PBSで5000倍に希釈したHRP標識抗マウスIgG(H+L)抗体(Life technologies社製)を1ウェル当たり100μL添加して室温にて1時間静置した。PBS−Tでウェルを洗浄した後、TMB基質溶液(Thermo社製)を1ウェル当たり100μL添加して5〜30分間静置して発色反応を行った。発色後、1規定硫酸を1ウェル当たり100μL添加して反応を停止させ、吸光度計を用いて450nmと595nmの吸光度値を測定した。その結果、吸光度値が高かった抗体を産生するハイブリドーマを選抜した。
次にCAPRIN−1遺伝子の発現が多く確認されたヒト乳癌細胞株8種(ZR75−1、MCF7、T47D、SK−BR−3、MDA−MB−157、BT−20、MDA−MB−231V、及びMRK−nu−1)について、その細胞表面上にCAPRIN−1タンパク質が発現しているかどうかを調べた。各ヒト乳癌細胞株についてそれぞれ5×105細胞を1.5mlのミクロ遠心チューブにて遠心分離した。これに実施例2の(4)で調製したマウス−ニワトリ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体(#12)2μg(5μl)を添加し、さらに95μlの0.1%牛胎児血清を含むPBSを添加して混ぜ、氷上で1時間静置した。PBSで洗浄した後、2μlのAlexa488標識ヤギ抗マウスIgG抗体(life technologies社製)及び98μlの0.1% 牛胎児血清(FBS)を含むPBSを添加して混ぜ、氷上で30時間静置した。PBSで洗浄後、ベクトンディッキンソン株式会社のFACSキャリバーにて蛍光強度を測定した。一方、上記と同様の操作を、マウス−ニワトリ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体(#12)の代わりにマウスIgG1を用いて行い、コントロールとした。その結果、マウス−ニワトリ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体(#12)を添加された細胞は、コントロールに比べて、いずれの癌細胞も蛍光強度が35%以上強かった。このことから、上記ヒト癌細胞株の細胞膜表面上にCAPRIN−1タンパクが発現していることが確認された。なお、上記蛍光強度の増強率は、各細胞における平均蛍光強度(MFI値)の増加率にて表され、以下の計算式により算出した。
(1)ヒト乳癌組織を用いた抗体の選抜
パラフィン包埋されたヒト乳癌組織アレイ(MBL社製)の乳癌組織31検体を用いて免疫組織化学染色を行った。ヒト乳癌組織アレイを60℃で3時間処理後、キシレンを満たした染色瓶に入れて5分ごとにキシレンを入れ替える操作を3回行った。続いて、エタノール及びPBS−Tを用いてキシレンと同様の操作を行った。0.05% Tween20を含む10mM クエン酸緩衝液(pH6.0)を満たした染色瓶にヒト乳癌組織アレイを入れ、125℃で5分間処理後、室温で40分以上静置した。切片周囲の余分な水分をキムワイプでふき取り、DAKOPEN(DAKO社製)で囲み、Peroxidase Block(DAKO社製)を適量滴下した。室温で5分間静置後、PBS−Tを満たした染色瓶に入れて5分ごとにPBS−Tを入れ替える操作を3回行った。ブロッキング液として、10% FBSを含むPBS−T溶液を載せ、モイストチャンバー内で室温で1時間静置した。次に実施例2で作製したマウス抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#8又は#14をそれぞれ5% FBSを含むPBS−T溶液で10μg/mlに調製した溶液を載せ、モイストチャンバー内にて4℃で一晩静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、Peroxidase Labelled Polymer Conjugated(DAKO社製)適量滴下し、モイストチャンバー内で室温で30分間静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、DAB発色液(DAKO社製)を載せ、室温で10分程度静置した後、発色液を捨て、PBS−Tで10分間3回洗浄を行った。蒸留水でリンスした後、70%、80%、90%、95%、100%の各エタノール溶液に順番に1分間ずつ入れ、最後にキシレン中で一晩静置した。スライドガラスを取り出し、Glycergel Mounting Medium(DAKO社製)で封入後、観察を行った。組織におけるCAPRIN−1の発現量は、以下の基準に従って判定した。陽性所見を示すスライドを選択し、CAPRIN−1染色像を確認した。まず、光学顕微鏡の4倍対物レンズを使用して、組織内の癌細胞のCAPRIN−1染色像、陽性染色の強度、陽性細胞率を観察した。次に、対物レンズを10倍又は20倍に切り替え、陽性所見が細胞膜か細胞質に局在しているかを検索した。以上の方法により検出結果を判定し、スコア0〜3に分類した。スコアの詳細は以下の通りである。
ヒト正常組織アレイ(BIOMAX社製)(脳、甲状腺、肺、脾臓、腎臓、食道、胃、大腸、膵臓、筋肉、皮膚、唾液腺、卵巣、子宮、乳腺、胎盤、骨髄、精巣、及び前立腺の組織を含む)を用いて、免疫組織化学染色を行った。切片周囲の余分な水分をキムワイプでふき取り、DAKOPEN(DAKO社製)で囲み、Peroxidase Block(DAKO社製)を適量滴下した。室温で5分間静置後、PBS−Tを満たした染色瓶に入れて5分ごとにPBS−Tを入れ替える操作を3回行った。ブロッキング液として、10% FBSを含むPBS−T溶液を載せ、モイストチャンバー内で室温で1時間静置した。次に実施例2で作製したマウス抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#14を5% FBSを含むPBS−T溶液で10μg/mlに調製した溶液を載せ、モイストチャンバー内に4℃で一晩静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、Peroxidase Labelled Polymer Conjugated(DAKO社製)適量滴下し、モイストチャンバー内で室温で30分間静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、DAB発色液(DAKO社製)を載せ、室温で10分程度静置した後、発色液を捨て、PBS−Tで10分間3回洗浄を行った。蒸留水でリンスした後、70%、80%、90%、95%、100%の各エタノール溶液に順番に1分間ずつ入れ、最後にキシレン中で一晩静置した。スライドガラスを取り出し、Glycergel Mounting Medium(DAKO社製)で封入後、観察を行った。
パラフィン包埋されたヒト癌組織アレイ(BIOMAX社製)の各種癌組織を用いて、免疫組織化学染色を行った。ヒト癌組織アレイを60℃で3時間処理後、キシレンを満たした染色瓶に入れて5分ごとにキシレンを入れ替える操作を3回行った。続いてエタノール及びPBS−Tでキシレンと同様の操作を行った。0.05% Tween20を含む10mM クエン酸緩衝液(pH6.0)を満たした染色瓶にヒト癌組織アレイを入れ、125℃で5分間処理後、室温で40分以上静置した。切片周囲の余分な水分をキムワイプでふき取り、DAKOPEN(DAKO社製)で囲み、Peroxidase Block(DAKO社製)を適量滴下した。室温で5分間静置後、PBS−Tを満たした染色瓶に入れて5分ごとにPBS−Tを入れ替える操作を3回行った。ブロッキング液として、10% FBSを含むPBS−T溶液を載せ、モイストチャンバー内で室温で1時間静置した。次に実施例2で作製したマウス抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#14を5% FBSを含むPBS−T溶液で10μg/mlに調製した溶液を載せ、モイストチャンバー内に4℃で一晩静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、Peroxidase Labelled Polymer Conjugated(DAKO社製)適量滴下し、モイストチャンバー内で室温で30分間静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、DAB発色液(DAKO社製)を載せ、室温で10分程度静置した後、発色液を捨て、PBS−Tで10分間3回洗浄を行った。蒸留水でリンスし、70%、80%、90%、95%、100%の各エタノール溶液に順番に1分間ずつ入れ、最後にキシレン中で一晩静置した。スライドガラスを取り出し、Glycergel Mounting Medium(DAKO社製)で封入後、観察を行った。
病理診断で悪性乳癌と診断されたイヌの凍結された乳癌組織100検体を用いて、免疫組織化学染色を行った。凍結イヌ乳癌組織をクライオスタット(LEICA社製)を用いて10〜20μmに薄切し、スライドガラスに載せ、スライドガラスごとヘアードライアーで30分間風乾し、薄切組織が載ったスライドガラス作製した。次にPBS−T(0.05% Tween20を含む生理食塩水)を満たした染色瓶に入れて5分ごとにPBS−Tを入れ替える操作を3回行った。切片周囲の余分な水分をキムワイプでふき取り、DAKOPEN(DAKO社製)で囲んだ後、ブロッキング液として、10%牛胎児血清を含むPBS−T溶液を載せ、モイストチャンバー内で室温で1時間静置した。次に実施例2で作製したマウス抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#8又は#14をぞれぞれブロッキング液で10μg/mlに調製した溶液を載せ、モイストチャンバー内で4℃下で一晩静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、ブロッキング液で250倍に希釈したMOMビオチン標識抗IgG抗体(VECTASTAIN社製)を載せ、モイストチャンバー内に室温で1時間静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、アビジンービオチンABC試薬(VECTASTAIN社製)を載せ、モイストチャンバー内で室温で5分間静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、DAB発色液(DAB 10mg+30% H2O2 10μL/0.05M Tris−HCl(pH7.6)50ml)を載せ、モイストチャンバー内に室温で30分間静置した。蒸留水でリンスし、ヘマトキシリン試薬(DAKO社製)を載せて室温で1分間静置後、蒸留水でリンスした。70%、80%、90%、95%、100%の各エタノール溶液に順番に1分間ずつ入れた後、キシレン中で一晩静置した。スライドガラスを取り出し、Glycergel Mounting Medium(DAKO社製)で封入後、観察を行った。組織におけるCAPRIN−1の発現量は、以下の基準に従って判定した。陽性所見を示すスライドを選択し、CAPRIN−1染色像を確認した。まず、光学顕微鏡の4倍対物レンズを使用して、組織内の癌細胞のCAPRIN−1染色像、陽性染色の強度、陽性細胞率を観察した。次に、対物レンズを10倍又は20倍に切り替え、陽性所見が細胞膜か細胞質に局在しているかを検索した。以上の方法により検出結果を判定し、スコア0〜3に分類した。スコアの詳細は以下の通りである。
病理診断で悪性乳癌と診断されたネコの凍結された乳癌組織30検体を用いて、免疫組織化学染色を行った。凍結ネコ癌組織をクライオスタット(LEICA社製)を用いて10〜20μmに薄切し、スライドガラスに載せ、スライドガラスごとヘアードライアーで30分間風乾し、薄切組織がのったスライドガラス作製した。次にPBS−T(0.05% Tween20を含む生理食塩水)を満たした染色瓶に入れて5分ごとにPBS−Tを入れ替える操作を3回行った。切片周囲の余分な水分をキムワイプでふき取り、DAKOPEN(DAKO社製)で囲んだ後、ブロッキング液として、10%牛胎児血清を含むPBS−T溶液を載せ、モイストチャンバー内で室温で1時間静置した。次に実施例2で作製したマウス抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#8又は#14をそれぞれブロッキング液で10μg/mlに調製した溶液をのせ、モイストチャンバー内で4℃下で一晩静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、ブロッキング液で250倍に希釈したMOMビオチン標識抗IgG抗体(VECTASTAIN社製)を載せ、モイストチャンバー内に室温で1時間静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、アビジンービオチンABC試薬(VECTASTAIN社製)を載せ、モイストチャンバー内で室温で5分間静置した。PBS−Tで10分間3回洗浄を行った後、DAB発色液(DAB 10mg+30% H2O2 10μL/0.05M Tris−HCl(pH7.6)50ml)を載せ、モイストチャンバー内に室温で30分間静置した。蒸留水でリンスし、ヘマトキシリン試薬(DAKO社製)を載せて室温で1分間静置後、蒸留水でリンスした。70%、80%、90%、95%、100%の各エタノール溶液に順番に1分間ずつ入れた後、キシレン中で一晩静置した。スライドガラスを取り出し、Glycergel Mounting Medium(DAKO社製)で封入後、観察を行った。組織におけるCAPRIN−1の発現量は、以下の基準に従って判定した。陽性所見を示すスライドを選択し、CAPRIN−1染色像を確認した。まず、光学顕微鏡の4倍対物レンズを使用して、組織内の癌細胞のCAPRIN−1染色像、陽性染色の強度、陽性細胞率を観察した。次に、対物レンズを10倍又は20倍に切り替え、陽性所見が細胞膜か細胞質に局在しているかを検索した。以上の方法により検出結果を判定し、スコア0〜3に分類した。スコアの詳細は以下の通りである。
(1)免疫組織化学染色法によるマウス癌細胞を移植した担癌マウス由来癌組織を用いたCAPRIN−1の検出
26匹のBalb/cマウス(日本SLC社製)の背部皮下に、マウス由来の癌細胞2種(B16F10及びEMT−6)をそれぞれ5匹ずつ移植し、腫瘍が直径7mm程度の大きさになるまで成長させた。癌細胞2種を移植したマウスの2つの群から各3匹ずつ選抜し、腫瘍塊を切り出して、PBS中で腫瘍塊を切り開き、4% paraformaldehyde(PFA)を含む0.1M リン酸緩衝液(pH7.4)で一晩還流固定した。還流液を捨て、PBSで各臓器の組織表面をすすぎ、10%ショ糖を含むPBS溶液を50ml容の遠心チューブに入れ、その中に癌組織を入れて4℃で2時間ローターを用いて振とうした。20%ショ糖を含むPBS溶液に入れ替え、4℃で癌組織が沈むまで静置後、30%ショ糖を含むPBS溶液に入れ替え、4℃で癌組織が沈むまで静置した。癌組織を取り出し、必要な部分を手術用メスで切り出した。次に、OCTコンパウンド(Tissue Tek社製)をかけて組織表面になじませた後、クライオモルドに組織を配置した。ドライアイスの上にクライオモルドを置いて急速凍結させた後、クライオスタット(LEICA社製)を用いて10〜20μmに薄切し、スライドガラスに載せ、スライドガラスごとヘアードライアーで30分間風乾し、薄切組織がのったスライドガラスを作製した。翌日、PBS(−)で3回洗浄した。ブロッキング液として、5% ヤギ血清を含むPBS(−)を載せ、モイストチャンバー内で室温で1時間静置した。次に実施例2で作製したマウス抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#8又はモノクローナル抗体#14を含むPBS(−)溶液で10μg/mlに調製した溶液を載せ、モイストチャンバー内に4℃で一晩静置した。PBS(−)で5分間5回洗浄を行った後、Peroxidase Labelled Polymer Conjugated(DAKO社製)を適量滴下し、モイストチャンバー内で室温で30分間静置した。PBS−Tで5分間6回洗浄を行った後、DAB発色液(DAKO社製)を載せ、室温で10分程度静置した後、発色液を捨て、PBS(−)で5分間3回洗浄を行った後、Glycergel Mounting Medium(DAKO社製)で封入後、観察を行った。実施例4に記載の通り、スコア分類したところ、抗体#8を用いた免疫組織化学染色の結果、メラノーマ由来細胞B16F10及び乳癌由来細胞EMT−6ともにスコア1であり、CAPRIN−1発現は検出されなかった。一方、抗体#14を用いた結果では、癌細胞B16F10に対してはスコア1であったが、癌細胞EMT−6に対してはスコア3であった。
ヒト−ニワトリキメラ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#13を用いて、上記(1)で作製した担癌マウスを用いた抗腫瘍効果を検討した。B16F10及びEMT−6の各癌細胞を移植した担癌マウスのうち、各5匹の担癌マウスに対して、抗体#13を1匹あたり200μg(200μL)ずつ腹腔内投与した。その後、2日間計3回、同量の抗体を各担癌マウスの腹腔に投与し、毎日腫瘍の大きさを計測し、#13抗体の抗腫瘍効果を観察した(検討群)。一方、残り5匹の担癌マウスに対して、抗体の代わりにPBS(−)を投与し、これをコントロール群とした。
(1)免疫組織化学染色法によるマウス癌細胞を移植した担癌マウス由来癌組織を用いたCAPRIN−1の検出
26匹のBalb/cマウス(日本SLC社製)の背部皮下に、マウス由来の癌細胞2種(B16、及びCT26)をそれぞれ5匹ずつ移植し、腫瘍が直径7mm程度の大きさになるまで成長させた。癌細胞2種を移植したマウスの2つの群から各3匹ずつ選抜し、腫瘍塊を切り出して、PBS中で腫瘍塊を切り開き、4% paraformaldehyde(PFA)を含む0.1M リン酸緩衝液(pH7.4)で一晩還流固定した。還流液を捨て、PBSで各臓器の組織表面をすすぎ、10%ショ糖を含むPBS溶液を50ml容の遠心チューブに入れ、その中に癌組織を入れて4℃で2時間ローターを用いて振とうした。20%ショ糖を含むPBS溶液に入れ替え、4℃で癌組織が沈むまで静置後、30%ショ糖を含むPBS溶液に入れ替え、4℃で癌組織が沈むまで静置した。癌組織を取り出し、必要な部分を手術用メスで切り出した。次に、OCTコンパウンド(Tissue Tek社製)をかけて組織表面になじませた後、クライオモルドに組織を配置した。ドライアイスの上にクライオモルドを置いて急速凍結させた後、クライオスタット(LEICA社製)を用いて10〜20μmに薄切し、スライドガラスに載せ、スライドガラスごとヘアードライアーで30分間風乾し、薄切組織がのったスライドガラスを作製した。翌日、PBS(−)で3回洗浄した。ブロッキング液として、5% ヤギ血清を含むPBS(−)を載せ、モイストチャンバー内で室温で1時間静置した。次に実施例2で作製したマウス抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#8又はモノクローナル抗体#14を含むPBS(−)溶液で10μg/mlに調製した溶液を載せ、モイストチャンバー内に4℃で一晩静置した。PBS(−)で5分間5回洗浄を行った後、Peroxidase Labelled Polymer Conjugated(DAKO社製)を適量滴下し、モイストチャンバー内で室温で30分間静置した。PBS−Tで5分間6回洗浄を行った後、DAB発色液(DAKO社製)を載せ、室温で10分程度静置した後、発色液を捨て、PBS(−)で5分間3回洗浄を行った後、Glycergel Mounting Medium(DAKO社製)で封入後、観察を行った。実施例4に記載の通り、スコア分類したところ、抗体#8を用いた免疫組織化学染色の結果、メラノーマ細胞B16はスコア0,大腸癌細胞CT26はスコア1であり、CAPRIN−1発現は検出されなかった。一方、抗体#14を用いた結果では、癌細胞B16に対してはスコア0であったが、癌細胞CT26に対してはスコア2であり陽性であった。
ヒト−ニワトリキメラ抗ヒトCAPRIN−1モノクローナル抗体#13を用いて、上記(1)で作製した担癌マウスを用いた抗腫瘍効果を検討した。B16及びCT26の各癌細胞を移植した担癌マウスのうち、各5匹の担癌マウスに対して、抗体#13を1匹あたり200μg(200μL)ずつ腹腔内投与した。その後、2日間計3回、同量の抗体を各担癌マウスの腹腔に投与し、毎日腫瘍の大きさを計測し、#13抗体の抗腫瘍効果を観察した(検討群)。一方、残り5匹の担癌マウスに対して、抗体の代わりにPBS(−)を投与し、これをコントロール群とした。
Claims (15)
- 配列番号66に示されるアミノ酸配列を有するポリペプチドに対して免疫学的反応性を有する抗体又はその抗原結合性断片を用いて、抗原抗体反応により、生体試料中のCAPRIN−1の発現量を測定することを含む、癌の検出方法。
- 測定すべき前記CAPRIN−1が
(a)配列表の配列番号2〜30のうち偶数の配列番号に示されるいずれかのアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
(b)配列表の配列番号2〜30のうち偶数の配列番号に示されるいずれかのアミノ酸配列を有するポリペプチドと85%以上の配列同一性を有するポリペプチド
である、請求項1に記載の癌の検出方法。 - 前記生体試料が、ヒト、イヌ又はネコ由来である、請求項1又は2に記載の癌の検出方法。
- 前記生体試料がイヌ由来であり、測定すべき前記CAPRIN−1は配列番号6、8、10、12又は14に示されるアミノ酸配列を有する、請求項1〜3のいずれか1項に記載の癌の検出方法。
- 前記生体試料がヒト由来であり、測定すべき前記CAPRIN−1は配列番号2又は4に示されるアミノ酸配列を有する、請求項1〜3のいずれか1項に記載の癌の検出方法。
- 測定されたCAPRIN−1発現量が健常個体と比較して高い場合に、癌治療薬としての前記抗体の標的となる癌の存在が示される、請求項1〜5のいずれか1項に記載の癌の検出方法。
- 前記CAPRIN−1の発現量の測定は、免疫学的アッセイ法を用いて行う、請求項1〜6のいずれか1項に記載の癌の検出方法。
- 前記免疫学的アッセイ法が、ELISA及び/又は免疫組織化学染色法である、請求項7に記載の癌の検出方法。
- 前記生体試料が体液、組織又は細胞である、請求項1〜8のいずれか1項に記載の癌の検出方法。
- 前記癌が、乳癌、脳腫瘍、食道癌、胃癌、肺癌、肝臓癌、腎臓癌、甲状腺癌、脾臓癌、膵臓癌、大腸癌、皮膚癌、卵巣癌、子宮癌、前立腺癌、膀胱癌、精巣癌、骨肉腫、及び線維肉腫からなる群より選ばれる少なくとも1つの癌である、請求項1〜9のいずれか1項に記載の癌の検出方法。
- 前記抗体又はその抗原結合性断片が、配列番号70に示されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域及び配列番号71に示されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を有するモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片である、請求項1〜10のいずれか1項に記載の癌の検出方法。
- 配列番号66に示されるアミノ酸配列を有するポリペプチドに対して免疫学的反応性を有する抗体又はその抗原結合性断片を含むことを特徴とする、癌診断薬又はキット。
- 前記抗体又はその抗原結合性断片が、配列番号70に示されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域及び配列番号71に示されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を有するモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片である、請求項12に記載の癌診断薬又はキット。
- 配列番号66に示されるアミノ酸配列を有するポリペプチドに対して免疫学的反応性を有する抗体又はその抗原結合性断片を用いて生体試料中のCAPRIN−1の発現量を測定し、その発現量が健常個体と比較して統計学的に有意に高い場合に、CAPRIN−1標的薬を該生体試料が由来する個体に投与するのに適した癌治療薬であることが示される、個体別癌治療薬の選択を補助する方法。
- 前記CAPRIN−1標的薬が、CAPRIN−1と免疫学的反応性を有する抗体又はその抗原結合性断片であることを特徴とする、請求項14に記載の個体別癌治療薬の選択を補助する方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2012160763 | 2012-07-19 | ||
JP2012160763 | 2012-07-19 | ||
PCT/JP2013/069649 WO2014014086A1 (ja) | 2012-07-19 | 2013-07-19 | 癌の検出方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2014014086A1 JPWO2014014086A1 (ja) | 2016-07-07 |
JP6244912B2 true JP6244912B2 (ja) | 2017-12-13 |
Family
ID=49948906
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013535985A Active JP6244912B2 (ja) | 2012-07-19 | 2013-07-19 | 癌の検出方法 |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9753038B2 (ja) |
EP (1) | EP2876447B1 (ja) |
JP (1) | JP6244912B2 (ja) |
KR (1) | KR102056137B1 (ja) |
CN (1) | CN104471404B (ja) |
AU (1) | AU2013291051C1 (ja) |
BR (1) | BR112015001100A2 (ja) |
CA (1) | CA2879185C (ja) |
DK (1) | DK2876447T3 (ja) |
ES (1) | ES2769831T3 (ja) |
MX (1) | MX358772B (ja) |
PL (1) | PL2876447T3 (ja) |
PT (1) | PT2876447T (ja) |
RU (1) | RU2646464C2 (ja) |
WO (1) | WO2014014086A1 (ja) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102170907A (zh) * | 2008-08-05 | 2011-08-31 | 东丽株式会社 | 用于治疗和预防癌症的药物组合物 |
DK2733492T3 (en) | 2008-08-05 | 2016-04-25 | Toray Industries | Method for detection of cancer |
JP6447130B2 (ja) | 2013-08-09 | 2019-01-09 | 東レ株式会社 | 癌の治療及び/又は予防用医薬組成物 |
RU2607954C1 (ru) * | 2015-10-01 | 2017-01-11 | Юрий Евгеньевич Никольский | Способ оценки состояния почки пациента на наличие рака |
JP7146424B2 (ja) | 2018-03-19 | 2022-10-04 | キヤノン株式会社 | 光電変換装置及び撮像システム |
MX2021015221A (es) | 2019-06-13 | 2022-03-17 | Bolt Biotherapeutics Inc | Compuestos de aminobenzazepina, inmunoconjugados y usos de estos. |
EP4038053A1 (en) | 2019-09-30 | 2022-08-10 | Bolt Biotherapeutics, Inc. | Amide-linked, aminobenzazepine immunoconjugates, and uses thereof |
AU2020369652A1 (en) | 2019-10-25 | 2022-05-12 | Bolt Biotherapeutics, Inc. | Thienoazepine immunoconjugates, and uses thereof |
JP2023524271A (ja) | 2020-05-08 | 2023-06-09 | ボルト バイオセラピューティクス、インコーポレーテッド | エラスターゼ-基質ペプチドリンカーイムノコンジュゲート、及びそれらの使用 |
US20230263903A1 (en) | 2020-08-13 | 2023-08-24 | Bolt Biotherapeutics, Inc. | Pyrazoloazepine immunoconjugates, and uses thereof |
WO2023076599A1 (en) | 2021-10-29 | 2023-05-04 | Bolt Biotherapeutics, Inc. | Tlr agonist immunoconjugates with cysteine-mutant antibodies, and uses thereof |
Family Cites Families (78)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5698396A (en) | 1995-06-07 | 1997-12-16 | Ludwig Institute For Cancer Research | Method for identifying auto-immunoreactive substances from a subject |
US20030118599A1 (en) | 1999-04-02 | 2003-06-26 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of lung cancer |
RU2234942C2 (ru) | 1998-07-14 | 2004-08-27 | Корикса Корпорейшн | Выделенный опухолевый полипептид предстательной железы и кодирующий его полинуклеотид |
CZ2001149A3 (cs) | 1998-07-14 | 2002-02-13 | Corixa Corporation | Prostředky a způsoby pro terapii a diagnostiku karcinomu prostaty |
GB9815909D0 (en) | 1998-07-21 | 1998-09-16 | Btg Int Ltd | Antibody preparation |
US6969518B2 (en) | 1998-12-28 | 2005-11-29 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of breast cancer |
WO2000052204A2 (en) | 1999-02-22 | 2000-09-08 | Orntoft Torben F | Gene expression in bladder tumors |
US6444425B1 (en) | 1999-04-02 | 2002-09-03 | Corixa Corporation | Compounds for therapy and diagnosis of lung cancer and methods for their use |
EP1187915A2 (en) | 1999-04-02 | 2002-03-20 | Corixa Corporation | Compounds for therapy and diagnosis of lung cancer and methods for their use |
US6949245B1 (en) | 1999-06-25 | 2005-09-27 | Genentech, Inc. | Humanized anti-ErbB2 antibodies and treatment with anti-ErbB2 antibodies |
CA2388822A1 (en) | 1999-10-29 | 2001-05-10 | Human Genome Sciences, Inc. | 27 human secreted proteins |
US20020006404A1 (en) | 1999-11-08 | 2002-01-17 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Treatment of cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications |
PL366626A1 (en) | 2000-03-29 | 2005-02-07 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of lung cancer |
US7919467B2 (en) | 2000-12-04 | 2011-04-05 | Immunotope, Inc. | Cytotoxic T-lymphocyte-inducing immunogens for prevention, treatment, and diagnosis of cancer |
US20040029114A1 (en) | 2001-01-24 | 2004-02-12 | Eos Technology, Inc. | Methods of diagnosis of breast cancer, compositions and methods of screening for modulators of breast cancer |
RU2306952C2 (ru) | 2001-01-31 | 2007-09-27 | Байоджен Айдек Инк. | Лечение в-клеточных злокачественных опухолей с использованием комбинации применений, связанных с антителами, уменьшающими количество b-клеток, и с иммуномодулирующими антителами |
AU2002311787A1 (en) | 2001-03-28 | 2002-10-15 | Zycos Inc. | Translational profiling |
WO2002083070A2 (en) | 2001-04-10 | 2002-10-24 | Corixa Corporation | Compounds for immunotherapy and diagnosis of colon cancer and methods for their use |
AU2002311909A1 (en) | 2001-05-11 | 2002-11-25 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of lung cancer |
US20030190640A1 (en) | 2001-05-31 | 2003-10-09 | Mary Faris | Genes expressed in prostate cancer |
JP2004535202A (ja) | 2001-07-17 | 2004-11-25 | リサーチ ディベロップメント ファンデーション | アポトーシス促進性蛋白質を含む治療剤 |
RU2319709C2 (ru) | 2001-07-17 | 2008-03-20 | Рисерч Дивелопмент Фаундейшн | Терапевтические агенты, содержащие проапоптозные белки |
US20040142325A1 (en) | 2001-09-14 | 2004-07-22 | Liat Mintz | Methods and systems for annotating biomolecular sequences |
US20040258678A1 (en) | 2002-02-22 | 2004-12-23 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for the treatment of immune related diseases |
US20050003390A1 (en) * | 2002-05-17 | 2005-01-06 | Axenovich Sergey A. | Targets for controlling cellular growth and for diagnostic methods |
US20040126379A1 (en) | 2002-08-21 | 2004-07-01 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Compositions and methods for treating cancer using cytotoxic CD44 antibody immunoconjugates and chemotherapeutic agents |
AU2003302386B2 (en) | 2002-11-26 | 2010-04-01 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for the treatment of immune related diseases |
WO2004076682A2 (en) | 2003-02-26 | 2004-09-10 | Surromed, Inc. | Targets for controlling cellular growth and for diagnostic methods |
US20050202451A1 (en) | 2003-04-29 | 2005-09-15 | Burczynski Michael E. | Methods and apparatuses for diagnosing AML and MDS |
CA2528669A1 (en) | 2003-06-09 | 2005-01-20 | The Regents Of The University Of Michigan | Compositions and methods for treating and diagnosing cancer |
WO2005007830A2 (en) | 2003-07-14 | 2005-01-27 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Methods and compositions for diagnosis, staging and prognosis of prostate cancer |
US20050032113A1 (en) | 2003-07-17 | 2005-02-10 | Mitsubishi Pharma Corporation | Membrane protein library for proteome analysis and method for preparing same |
EP2361929A1 (en) | 2004-01-26 | 2011-08-31 | Debiovision Inc. | Neoplasm-specific polypeptides and their use |
ES2387809T3 (es) | 2004-03-19 | 2012-10-02 | Imclone Llc | Anticuerpo frente al receptor del factor de crecimiento epidérmico humano |
WO2005100998A2 (en) | 2004-04-16 | 2005-10-27 | Europroteome Ag | Membrane markers for use in cancer diagnosis and therapy |
WO2006002378A2 (en) | 2004-06-23 | 2006-01-05 | Avalon Pharmaceuticals | Determining cancer-linked genes and therapeutic targets using molecular cytogenetic methods |
PL1846030T3 (pl) | 2005-01-21 | 2019-05-31 | Genentech Inc | Ustalone dawkowanie przeciwciał her |
US7858324B2 (en) | 2005-02-18 | 2010-12-28 | Children's Medical Center Corporation | Cyr61 as a biomarker for diagnosis and prognosis of cancers of epithelial origin |
CA2602088C (en) | 2005-03-11 | 2021-07-27 | Ciphergen Biosystems, Inc. | Biomarkers for ovarian cancer and endometrial cancer |
JP2006316040A (ja) | 2005-05-13 | 2006-11-24 | Genentech Inc | Herceptin(登録商標)補助療法 |
US8014957B2 (en) | 2005-12-15 | 2011-09-06 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Genes associated with progression and response in chronic myeloid leukemia and uses thereof |
AU2007205257B2 (en) | 2006-01-05 | 2013-07-25 | The Ohio State University Research Foundation | MicroRNA expression abnormalities in pancreatic endocrine and acinar tumors |
EP1991701A4 (en) | 2006-02-14 | 2010-03-17 | Dana Farber Cancer Inst Inc | COMPOSITIONS, KITS, AND METHODS FOR IDENTIFYING, EVALUATING, PREVENTING, AND TREATING CANCER |
WO2008073161A2 (en) | 2006-08-14 | 2008-06-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Hemagglutinin polypeptides, and reagents and methods relating thereto |
US20080107668A1 (en) | 2006-08-30 | 2008-05-08 | Immunotope, Inc. | Cytotoxic t-lymphocyte-inducing immunogens for prevention, treatment, and diagnosis of cancer |
WO2008031041A2 (en) | 2006-09-07 | 2008-03-13 | H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. | Melanoma gene signature |
WO2008059252A2 (en) | 2006-11-15 | 2008-05-22 | Oxford Biomedica (Uk) Limited | Methods and composition fro t cell receptors which recognize 5t4 antigen |
EP3106875B1 (en) | 2007-10-25 | 2020-04-29 | Toray Industries, Inc. | Method for detection of cancer |
JP5663834B2 (ja) | 2008-03-14 | 2015-02-04 | 東ソー株式会社 | 遺伝子組換え抗体の製造方法 |
TWI675668B (zh) | 2008-03-18 | 2019-11-01 | 美商建南德克公司 | 抗her2抗體-藥物結合物及化療劑之組合及使用方法 |
WO2010013527A1 (ja) | 2008-07-29 | 2010-02-04 | 株式会社明電舎 | 芳香族化合物製造方法 |
CN102170907A (zh) | 2008-08-05 | 2011-08-31 | 东丽株式会社 | 用于治疗和预防癌症的药物组合物 |
DK2733492T3 (en) * | 2008-08-05 | 2016-04-25 | Toray Industries | Method for detection of cancer |
KR102009241B1 (ko) | 2008-08-05 | 2019-08-09 | 도레이 카부시키가이샤 | 면역 유도제 |
PT2467401T (pt) | 2009-08-19 | 2017-04-26 | Merck Patent Gmbh | Anticorpos para a deteção de complexos de integrina em material ffpe |
MX2012003404A (es) | 2009-09-22 | 2012-09-12 | Volker Sandig | Procedimiento para producir moleculas que contienen estructuras de glicano especializadas. |
BR112012018948B1 (pt) | 2010-02-04 | 2021-12-14 | Toray Industries, Inc | Composições farmacêuticas, anticorpos, combinação farmacêutica, usos de uma composição farmacêutica, uso de um anticorpo e uso de uma combinação farmacêutica |
MX340015B (es) | 2010-02-04 | 2016-06-22 | Toray Industries | Composicion farmaceutica para el tratamiento y/o prevencion del cancer. |
US9115200B2 (en) | 2010-02-04 | 2015-08-25 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treating cancer using a monoclonal antibody having immunological reactivity with CAPRIN-1 |
CA2788547C (en) | 2010-02-04 | 2018-06-05 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treating and/or preventing cancer |
CA2788716C (en) | 2010-02-04 | 2019-06-18 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treating and/or preventing cancer |
PT2532367T (pt) | 2010-02-04 | 2018-11-09 | Toray Industries | Agente farmacêutico para o tratamento e/ou prevenção do cancro |
KR101271964B1 (ko) | 2010-07-08 | 2013-06-07 | 강원대학교산학협력단 | 담낭암 치료용 약제학적 조성물 및 이를 이용한 담낭암의 성장, 전이 억제 및 치료 방법 |
BR112013002012A2 (pt) | 2010-07-26 | 2019-08-27 | Centre Nat Rech Scient | métodos e composições para terapia de câncer de fígado |
KR101968498B1 (ko) | 2011-08-04 | 2019-04-12 | 도레이 카부시키가이샤 | 암의 치료 및/또는 예방용 의약 조성물 |
PT2740798T (pt) | 2011-08-04 | 2017-03-13 | Toray Industries | Composição de fármaco para o tratamento e/ou a prevenção de cancro |
JP6065590B2 (ja) | 2011-08-04 | 2017-01-25 | 東レ株式会社 | 癌の治療及び/又は予防用医薬組成物 |
PT2740489T (pt) | 2011-08-04 | 2017-01-10 | Toray Industries | Composição farmacêutica para o tratamento e/ou a prevenção do cancro pancreático |
CA2844033C (en) | 2011-08-04 | 2021-07-27 | Toray Industries, Inc. | Method for detecting pancreatic cancer |
PL2740796T3 (pl) | 2011-08-04 | 2017-10-31 | Toray Industries | Kompozycja farmaceutyczna do leczenia nowotworu i/lub zapobiegania nowotworowi |
PL2740795T3 (pl) | 2011-08-04 | 2017-04-28 | Toray Industries, Inc. | Kompozycja lekowa do leczenia nowotworu i/lub zapobiegania nowotworowi |
DK2818483T3 (en) | 2012-02-21 | 2017-10-23 | Toray Industries | Medical composition for the treatment and / or prevention of cancer |
US9273130B2 (en) | 2012-02-21 | 2016-03-01 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treatment and/or prevention of cancer |
BR112014021099A2 (pt) | 2012-02-21 | 2020-12-01 | Toray Industries, Inc | anticorpo, composição farmacêutica, dna e método de tratamento e/ou prevenção de câncer e uso de um anticorpo |
IN2014KN01716A (ja) | 2012-02-21 | 2015-10-23 | Toray Industries | |
PT2832365T (pt) | 2012-03-30 | 2018-01-24 | Toray Industries | Composição farmacêutica para o tratamento e/ou prevenção do cancro hepático |
US9428581B2 (en) | 2012-03-30 | 2016-08-30 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treatment and/or prevention of gallbladder cancer |
JP5412552B2 (ja) | 2012-05-28 | 2014-02-12 | ルネサスエレクトロニクス株式会社 | 半導体装置 |
-
2013
- 2013-07-19 WO PCT/JP2013/069649 patent/WO2014014086A1/ja active Application Filing
- 2013-07-19 DK DK13820574.5T patent/DK2876447T3/da active
- 2013-07-19 BR BR112015001100-4A patent/BR112015001100A2/ja not_active Application Discontinuation
- 2013-07-19 ES ES13820574T patent/ES2769831T3/es active Active
- 2013-07-19 PT PT138205745T patent/PT2876447T/pt unknown
- 2013-07-19 MX MX2015000684A patent/MX358772B/es active IP Right Grant
- 2013-07-19 JP JP2013535985A patent/JP6244912B2/ja active Active
- 2013-07-19 EP EP13820574.5A patent/EP2876447B1/en active Active
- 2013-07-19 RU RU2015105168A patent/RU2646464C2/ru active
- 2013-07-19 CA CA2879185A patent/CA2879185C/en active Active
- 2013-07-19 CN CN201380038386.9A patent/CN104471404B/zh active Active
- 2013-07-19 US US14/415,090 patent/US9753038B2/en active Active
- 2013-07-19 PL PL13820574T patent/PL2876447T3/pl unknown
- 2013-07-19 KR KR1020147034435A patent/KR102056137B1/ko active IP Right Grant
- 2013-07-19 AU AU2013291051A patent/AU2013291051C1/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104471404A (zh) | 2015-03-25 |
EP2876447B1 (en) | 2019-11-20 |
CA2879185C (en) | 2021-08-24 |
US20150185222A1 (en) | 2015-07-02 |
EP2876447A4 (en) | 2016-02-10 |
BR112015001100A2 (ja) | 2018-03-27 |
AU2013291051A1 (en) | 2015-02-26 |
ES2769831T3 (es) | 2020-06-29 |
MX2015000684A (es) | 2015-04-08 |
EP2876447A1 (en) | 2015-05-27 |
RU2015105168A (ru) | 2016-09-10 |
CN104471404B (zh) | 2017-03-01 |
KR20150037752A (ko) | 2015-04-08 |
AU2013291051C1 (en) | 2019-07-04 |
AU2013291051B2 (en) | 2018-12-06 |
PL2876447T3 (pl) | 2020-05-18 |
JPWO2014014086A1 (ja) | 2016-07-07 |
MX358772B (es) | 2018-09-04 |
PT2876447T (pt) | 2020-02-03 |
DK2876447T3 (da) | 2020-02-24 |
WO2014014086A1 (ja) | 2014-01-23 |
CA2879185A1 (en) | 2014-01-23 |
US9753038B2 (en) | 2017-09-05 |
RU2646464C2 (ru) | 2018-03-05 |
KR102056137B1 (ko) | 2019-12-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6244912B2 (ja) | 癌の検出方法 | |
JP6244911B2 (ja) | 癌の検出方法 | |
JP5825386B2 (ja) | 癌の検出方法 | |
RU2624040C2 (ru) | Способ обнаружения рака поджелудочной железы | |
JP5713036B2 (ja) | 癌の検出方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160707 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170801 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170928 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20171017 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20171030 |
|
R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 6244912 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |