JP6199310B2 - 水酸化酸化アルミニウムへ吸着可能な少なくとも2種類の抗原を含有するワクチンの調製方法 - Google Patents
水酸化酸化アルミニウムへ吸着可能な少なくとも2種類の抗原を含有するワクチンの調製方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6199310B2 JP6199310B2 JP2014552680A JP2014552680A JP6199310B2 JP 6199310 B2 JP6199310 B2 JP 6199310B2 JP 2014552680 A JP2014552680 A JP 2014552680A JP 2014552680 A JP2014552680 A JP 2014552680A JP 6199310 B2 JP6199310 B2 JP 6199310B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antigen
- alooh
- hbsag
- hib
- adsorbed
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/05—Actinobacteria, e.g. Actinomyces, Streptomyces, Nocardia, Bifidobacterium, Gardnerella, Corynebacterium; Propionibacterium
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/08—Clostridium, e.g. Clostridium tetani
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/099—Bordetella
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/29—Hepatitis virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/00034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
- C12N2730/00011—Details
- C12N2730/10011—Hepadnaviridae
- C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
- C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/32011—Picornaviridae
- C12N2770/32611—Poliovirus
- C12N2770/32634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
− 1つのB型肝炎表面抗原(HBsAg)、
− キャリアータンパク質とコンジュゲートした莢膜多糖類からなる、1つのヘモフィルスインフルエンザ菌b型(Hib)抗原、
− 水酸化酸化アルミニウム(AlOOH)
を含む液体混合ワクチンであって、該B型肝炎表面抗原はAlOOHに吸着されたままであるが、該Hib抗原は吸着されないままである、液体混合ワクチンの調製方法であって、
− 該B型肝炎表面抗原をAlOOHに吸着させて、AlOOH/HBsAg複合体を得ること、
− 少なくとも100mg/Lの濃度の陽イオンアミノ酸および35〜45mMol/Lの濃度のリン酸イオンの存在下で、該AlOOH/HBsAg複合体をHib抗原と混合すること
を含む、方法である。
− B型肝炎表面抗原、
− ジフテリア毒素Dの形態のジフテリア抗原、
− 破傷風毒素Tの形態の破傷風抗原、
− 精製毒素(PTxd)の形態の百日咳抗原および糸状ヘマグルチニン(FHA)の形態の百日咳抗原、
− 破傷風タンパク質とコンジュゲートしたポリリボシルリビトールリン酸の形態のヘモフィルスインフルエンザ菌b型抗原(PRP−T)、
− 1型、2型および3型の不活化ウイルスの形態のポリオ抗原
を含む混合ワクチンである。
(i)当該組成物中に含まれるB型肝炎表面抗原の総量の少なくとも60%または80%、好ましくは少なくとも85%が、5±3℃の温度で貯蔵された当該組成物の製造日から少なくとも3か月間、AlOOHに吸着されており;
(ii)該組成物中に含まれるHib抗原の総量の少なくとも65%、70%または75%が、AlOOHに吸着されていない、
ワクチン組成物を得ることができる。
− 1用量あたり5〜15μgのHBsAg;好ましくは1用量あたり10μgのHBsAg、
− 1用量あたり20〜40LfのD;好ましくは1用量あたり25〜35LfのD;好ましくは1用量あたり30LfのD(Lf=フロキュレーションの限界)(別の方法で表現すると、Dの量は、1用量あたり20IU以上である)、
− 1用量あたり5〜25LfのT;好ましくは1用量あたり10〜15LfのT;好ましくは1用量あたり10LfのT(別の方法で表現すると、Tの量は、1用量あたり40IU以上である)、
− 1用量あたり20〜30μgのFHA;好ましくは1用量あたり25μgのFHA、
− 1用量あたり20〜30μgのPTxd;好ましくは1用量あたり25μgのPTxd
を含むワクチン用量0.5mLを得るように各成分の量が選択された、AlOOH−HBsAg−D−T−PTxd−FHAを含む調製物を形成する。
− 1型については、20〜43DU(D抗原単位)、特に40DU、
− 2型については、5〜9DU、特に8DU、
− 3型については、17〜36DU、特に32DU
であり得る。
(i)(a)HBsAgとAlOOHを他の抗原の不在下で接触させ、HBsAgを少なくとも4時間、好ましくは少なくとも12時間、好ましくは約24時間AlOOHに吸着させ、その結果、AlOOH/HBsAg複合体を含有する調製物を得ること;
(i)(b)上記(i)(a)で得られる調製物に、AlOOHに予め吸着している、D抗原、T抗原、PTxd抗原およびFHA抗原を含んでおり、さらにパータクチンおよび凝集原のような百日咳菌抗原を含んでいてもよい、調製物を加えること;
(ii)上記(i)(b)で得られる調製物にリン酸イオンを加えて、40mMol/Lのワクチン中最終濃度を得ること;
(iii)上記(ii)で得られる調製物に、ポリオ抗原を加えてもよいこと;
(iv)上記(ii)または(iii)で得られる調製物に、Hib抗原を含有する調製物を加えること;
(v)pHを7.1±0.1に調整すること;および
(vi)(a)Hib抗原の添加前に、少なくとも1種類の陽イオンアミノ酸を加えて、上記(ii)または(iii)で得られる調製物を完成すること、または
(b)Hib抗原に少なくとも1種類の陽イオンアミノ酸を加えること
を含む方法であって、該陽イオンアミノ酸が、少なくとも100mg/Lのワクチン中最終濃度を得るのに十分な量で添加される、方法である。
(i)当該組成物中に含まれるHBsAgの総量の少なくとも85%、好ましくは少なくとも90%が、5±3℃の温度で貯蔵された当該組成物の製造日から少なくとも3か月間、AlOOHに吸着されたままであり;
(ii)当該組成物中に含まれるHib抗原の総量の少なくとも65%、70%または好ましくは75%が、AlOOHに吸着されておらず、この量は経時的に相対的に安定なままである、
組成物である。
− HBsAg 10〜30μg/mL;好ましくは、20μg/mL;
− D 40〜80Lf/mL、好ましくは50〜70Lf/mL;
− T 10〜50Lf/mL、好ましくは10〜30Lf/mL;
− FHA 40〜60μg/mL;好ましくは50μg/mL;
− PTxd 40〜60μg/mL;好ましくは50μg/mL;
− PRP 2〜60μg/mL;好ましくは20〜24μg/mL;
− AlOOH 1〜2mg/mL;好ましくはAlOOH 1.2mg/mL;
− 35〜45mMol/Lの濃度のリン酸イオン、好ましくは38〜42mMol/Lのリン酸イオン;
− 100〜1000μg/mLの陽イオンアミノ酸、好ましくは400〜800μg/mL;および任意に
− それぞれ80、16および64DU/mLの1型、2型および3型の不活化ウイルスの形態のポリオウイルス
を含むことができる。
この製造は、滅菌条件下で連続的に撹拌しながら行われる。
Brenntag AGによって販売されている水酸化酸化アルミニウム(AlOOH)ゲルの均質懸濁液(アルミニウム8g/L)を50Lタンクに無菌的に導入する。
最終ワクチン中20μg/mLの濃度を得るために必要な量のHBsAgを、0.22μmフィルターで濾過した後、すでにAlOOHを含有している上記タンクに加える。
混合物を周囲温度で20〜24時間撹拌して、均質懸濁液を得る。
並行して、アルミニウムゲル、ジフテリアトキソイド(D)、破傷風トキソイド(T)、百日咳菌トキソイド(PTxd)および百日咳菌糸状ヘマグルチニン(FHA)の混合物を下記の方法で調製する:
Brenntag AGによって販売されているAlOOHゲルの均質懸濁液(アルミニウム8g/L)を250Lタンクに無菌的に導入する。
Dの溶液、次いで、均質化後にTの溶液を、0.22μmフィルターで濾過した後、すでにAlOOHを入れた上記250Lタンクに連続的に加えて、それぞれ最終ワクチン中60Lf(フロキュレーションの限界)/mLおよび20Lf/mLのD濃度およびT濃度を得る。
均質混合物が得られたらすぐに、このタンクに、AlOOHに予め吸着されたPTxdの懸濁液、次いで、AlOOHに予め吸着されたFHAの懸濁液を連続して無菌的に添加して、最終ワクチン中25μg/mLのPTxd濃度およびFHA濃度を得る。
最後に、20〜30mMol/Lのリン酸イオン濃度を得るために必要な量の500mMリン酸緩衝液を、0.22μmフィルターで濾過した後に加える。
得られたD−T−PTxd−FHA−AlOOH懸濁液を5±3℃の温度で少なくとも14時間撹拌する。
上記Aで得られた調製物を上記Bで得られた調製物に無菌的に加える。
この混合物を撹拌して、均質懸濁液を得る。
次いで、最終組成物中40mMol/Lのリン酸イオン濃度を得るために必要な量の500mMリン酸緩衝液を、0.22μmフィルターで濾過した後に加える。
下記の組成を有する、12種類の必須アミノ酸を含有するアミノ酸溶液を調製する:
2.5N水酸化ナトリウム(NaOH)450mlを添加する(0.5L/分)。10分間撹拌しながら均質化を続ける。
このアミノ酸溶液を0.22μmフィルターで濾過し、これを上記Cで得られた混合物に引き続き加えて、最終組成物中572μg/mLの濃度の陽イオンアミノ酸を得る。
上記Dで得られた懸濁液のpHを、2.5Nの水酸化ナトリウム濾過貯蔵溶液を使用してpH7.1(7.0〜7.2)に調整する。
不活化形態のポリオウイルス血清型1、2および3を含有する調製物(それぞれMahoney株、MEF−1株およびSaukett株)を0.22μmフィルターで濾過し、これを、次いで、上記Eで得られた懸濁液を入れたタンク中に導入する。
まず、PRP−Tの中間溶液を以下の方法で調製する: 予め0.22μmフィルターで濾過したトリス−シュークロース緩衝液を、0.22μmフィルターで濾過したPRP−T調製物に添加して、中間混合物を調製する。
この混合物を、上記Fで得られた混合物に無菌的に導入する。
上記Gで得られた懸濁液を均質化した後、目標体積250Lに達するために十分な量の予め濾過した注射用水を添加する。次いで、必要に応じて、予め濾過した2.5N水酸化ナトリウムまたは10%酢酸溶液を添加して該混合物のpHをpH7.1±0.1に調整する。
該混合物を5±3℃で貯蔵し、次いで1用量あたり0.5mlの割合で注射器またはビンに分注する。
かくして、1用量0.5mlは、Al3+ 600μg、HBsAg 10μg、D 20IU以上、T 40IU以上、Pt 25μg、FHA 25μg、1型ポリオ20〜43DU(D抗原単位)、2型ポリオ5〜9DU、3型ポリオ17〜36DU、PRP(PRP−Tの形態)12μg、40mMol/Lの濃度のリン酸イオン、トリスの濃度2.5mMol/Lおよびシュークロースの濃度2.125%のトリス−シュークロース緩衝液、ならびに陽イオンアミノ酸(His−Arg−Lys)286μgを含有する。
上記実施例に従って調製されたワクチン組成物を、Infanrix HexaTMと称されているすでに市販されている六価ワクチンと比較して、臨床試験した。この市販の六価ワクチンは、本発明に従って調製されたワクチンと同一の疾患(ジフテリア、破傷風、百日咳、ポリオ、Hib感染およびB型肝炎)に対して小児にワクチン接種することができるが、その一部が凍結乾燥されているので投与前に凍結乾燥品を溶解する操作を要するという欠点を有する。
臨床試験の間、2か月目、4か月目および6か月目に投与する3回投与からなるワクチン計画で、2種類のワクチン組成物を小児に投与した。本発明の方法に従って調製された液体ワクチンは、非常に十分な忍容性を示し、かつ、市販のワクチンと同程度の免疫原性を示すことが判明した。
HBsAgの吸着率/吸着していないPRP−Tの量
最終バルク生成物の3つのバッチ(PFV39−41−42)およびビンに分注した3つのバッチ(S12−13−14)[これらのバッチは全て上記実施例に従って得られた]を+5℃で貯蔵し、それぞれ、9か月間および22か月間にわたって様々な時点で分析した。分析は、HBsAgの吸着率および吸着していないPRP−Tの量に関するものであった。
HBsAgの吸着率は、上記のように、HBsAgの総含有量および吸着していないHBsAgの含有量から決定され、HBsAgの決定は、欧州薬局方2.7.1によって定められた規則に従って、サンドイッチELISA法を用いて行われた。すなわち、96ウェルプレート中にてHBsAgをIgM型の抗HBsAg一次モノクローナル抗体によって捕捉した。このようにして結合したHBsAgを、自身がペルオキシダーゼ結合抗IgGポリクローナル抗体によって検出されるIgG型の抗HBsAg二次モノクローナル抗体でコーティングした。ペルオキシダーゼに対する発色基質であるテトラメチルベンジジン(TMB)を現像主薬として用いた。この現像主薬を添加すると発色し、その強度は、ウェル中で捕捉されているHBsAgの量に比例した。この結果を、欧州薬局方5.3.3に記載の平行線法に従って分析した。
HBsAgの吸着率を決定するために、該ワクチンを遠心分離し(8800g;5分;20℃)、吸着していないHBsAgを含有する上清を回収することができた。試験しようとする上清のサンプルを、脱着緩衝液を含むELISA緩衝液で、2倍段階希釈法で、例えば1/400〜1/12800の範囲で、希釈した。
全ワクチンおよび標準レンジサンプルを、脱着緩衝液を含むELISA緩衝液で、2倍段階希釈法で、1/8〜1/25600の範囲で、希釈した。
一次モノクローナル抗体でコーティングした96ウェルプレートを5℃で12時間インキュベートし、次いで、PBS−Tween20溶液で洗浄した。全ワクチンおよび標準レンジの上清の希釈液をウェルに分配した。次いで、二次抗体を添加し、ペルオキシダーゼ結合抗体およびTMB(テトラメチルベンジジン)で現像を行った。1N HClの添加によって、この反応を停止した。各工程の後に、プレートを25℃で30分間インキュベートし、次いで、PBS−Tween20溶液で洗浄した。利用可能なウェルにブランク(希釈緩衝液)を添加し、同じ処理を行った。プレートをOD 450nmおよび630nmで読み取った。
吸着していないPRP−Tの量は、下記の方法で、HPAEC−PAD(高速アニオン交換クロマトグラフィー−アンペロメトリック電気化学検出法)によって評価した:
まず、0.5〜12.5μg/mLの標準レンジの参照PRP−Tを調製した。
試験しようとしているサンプルおよび標準レンジサンプルを周囲温度にて5000gで5分間遠心分離した。上清を回収し、次いで、内部標準としてグルコサミン−1−リン酸を含有する1.5N NaCl溶液で加水分解した。ブランク(0.9%NaCl;1.5N NaOH+内部標準)を添加した。
35mM NaOHおよび114mM酢酸ナトリウムからなる移動相をカラムに1.2ml/分の速度で注入して用いてクロマトグラフィー処理を行った。
吸着していないPRPの濃度(μg/mL)を下記の式を用いて算出した:
(PRPピークの表面積/内部標準ピークの表面積)=a×[PRP濃度]+b
式中、「a」は傾きであり、「b」はy軸の切片であり、aおよびbは回帰線から決定される。
最後に、上記の実施例で行われた実験プロトコールから直接得られた本発明の組成物と、3種類の陽イオンアミノ酸(Arg−Lys−His)だけを含有する組成物の代わりに12種類の必須アミノ酸の組成物を用いる点で変更されたプロトコールによって得られた組成物を、吸着していないPRP−Tの量に関して比較した。吸着していないPRP−Tの量に違いは見られず、それによって、陽イオンアミノ酸だけが重要であることが示された。
Claims (14)
- 少なくとも、
− 水酸化酸化アルミニウム(AlOOH)、
− 1つのB型肝炎表面抗原(HBsAg)、
− キャリアータンパク質とコンジュゲートした莢膜多糖類からなる、1つのヘモフィルスインフルエンザ菌b型(Hib)抗原
を含む液体混合ワクチンであって、該B型肝炎表面抗原はAlOOHに吸着されたままであるが、該Hib抗原は吸着されないままである、液体混合ワクチンの調製方法であって、
− 該B型肝炎表面抗原をAlOOHに吸着させて、AlOOH/HBsAg複合体を得ること、
− 少なくとも100mg/Lの濃度の陽イオンアミノ酸および35〜45mMol/Lの濃度のリン酸イオンの存在下で、該AlOOH/HBsAg複合体をHib抗原と混合すること
を含む、方法。 - AlOOHの懸濁液とHBsAgの懸濁液を撹拌しながら少なくとも4時間混合することによって、HBsAg抗原をアルミニウムに吸着させる、請求項1記載の方法。
- Hib抗原との混合の前にAlOOH/HBsAg複合体に陽イオンアミノ酸を添加することを特徴とする、請求項1または2記載の方法。
- AlOOH/HBsAg複合体との混合の前にHib抗原に陽イオンアミノ酸を添加することを特徴とする、請求項1または2記載の方法。
- Hib抗原との混合の前にAlOOH/HBsAg複合体にリン酸イオンを添加することを特徴とする、請求項1〜4いずれか1項記載の方法。
- Hib抗原との混合の前に、AlOOH/HBsAg複合体を含む調製物のpHを7.1±0.1に調整する、請求項1〜5いずれか1項記載の方法。
- さらに、
− ジフテリア、破傷風、ポリオおよび百日咳抗原から選択される少なくとも1つの抗原、ならびに水酸化酸化アルミニウムを含む組成物を調製すること、および
− Hib抗原との混合の前に、該組成物とAlOOH/HBsAg複合体を混合すること
を含むことを特徴とする、請求項1記載の方法。 - 水酸化酸化アルミニウムの懸濁液に各抗原を連続的に添加し、抗原の添加と添加の間で撹拌することによって組成物を調製することを含むことを特徴とする、請求項7記載の方法。
- − 最終組成物中に含まれる総AlOOHの3分の1である部分量のAlOOHにHBsAgを20〜24時間吸着させて、AlOOH/HBsAg複合体を形成すること、
− 並行して、ジフテリア毒素D、破傷風毒素T、AlOOHに予め吸着された百日咳菌精製毒素PTxd、およびAlOOHに予め吸着された百日咳菌糸状ヘマグルチニンFHAを、AlOOHの総量に達するためのさらなる量のAlOOHに連続して吸着させ、次いで、それにリン酸イオンを添加し、次いで、それに上記AlOOH/HBsAg複合体を添加すること、
− 最終組成物中40mMol/Lの濃度を達成することができる量のリン酸イオンを再度添加すること、
− 最終組成物中少なくとも100mg/Lの濃度を達成することができる量の少なくとも1つの陽イオンアミノ酸を添加すること、
− pHを7.1±0.1に調整すること、
− 1型および/または2型および/または3型の不活化ウイルス形態のポリオ抗原を添加すること、
− Hib抗原を添加すること、
− pHを7.1±0.1に調整すること、
− 得られた組成物を注射器またはビンに分注すること
を特徴とする、請求項1記載の方法。 - 少なくとも250Lのワクチン組成物を工業規模で調製することを特徴とする、請求項1〜9いずれか1項記載の方法。
- 少なくとも、
− B型肝炎表面抗原、HBsAg、
− ジフテリア毒素Dの形態のジフテリア抗原、
− 破傷風毒素Tの形態の破傷風抗原、
− 精製毒素(PTxd)の形態の百日咳抗原および糸状ヘマグルチニン(FHA)の形態の百日咳抗原、
− 破傷風タンパク質とコンジュゲートしたポリリボシルリビトールリン酸の形態のヘモフィルスインフルエンザ菌b型(Hib)抗原(PRP−T)、
− 1型、2型および3型から選択される不活化ウイルスの形態のポリオ抗原、
− AlOOH 1〜2mg/mL、
− リン酸イオン 35〜45mMol/L、
− 陽イオンアミノ酸 100〜1000mg/L
を含むことを特徴とするワクチン組成物であって、該B型肝炎表面抗原はAlOOHに吸着されており、該Hib抗原は吸着されないままである、ワクチン組成物。 - リン酸イオン 38〜42mMol/Lを含む、請求項11記載のワクチン組成物。
- 陽イオンアミノ酸 400〜800mg/Lを含む、請求項11記載のワクチン組成物。
- HBsAg 10〜30μg/mL、
ジフテリア毒素Dの形態のジフテリア抗原 40〜80Lf/mL、
破傷風毒素Tの形態の破傷風抗原 10〜50Lf/mL、
FHA 40〜60μg/mL、
PTxd 40〜60μg/mL、
PRP−Tコンジュゲート形態で、PRP 2〜60μg/mL、
不活化形態の1型、2型および3型ポリオウイルス
を含む、請求項11記載のワクチン組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR1250464A FR2985663B1 (fr) | 2012-01-17 | 2012-01-17 | Procede de formulation d'un vaccin contenant au moins deux antigenes susceptibles de s'adsorber sur de l'oxy hydroxyde d'aluminium |
FR1250464 | 2012-01-17 | ||
PCT/FR2013/050106 WO2013107988A1 (fr) | 2012-01-17 | 2013-01-17 | Procédé de formulation d'un vaccin contenant au moins deux antigènes susceptibles de s'adsorber sur de l'oxyhydroxyde d'aluminium |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017160109A Division JP6356886B2 (ja) | 2012-01-17 | 2017-08-23 | 水酸化酸化アルミニウムへ吸着可能な少なくとも2種類の抗原を含有するワクチンの調製方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015504085A JP2015504085A (ja) | 2015-02-05 |
JP6199310B2 true JP6199310B2 (ja) | 2017-09-20 |
Family
ID=47714410
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014552680A Active JP6199310B2 (ja) | 2012-01-17 | 2013-01-17 | 水酸化酸化アルミニウムへ吸着可能な少なくとも2種類の抗原を含有するワクチンの調製方法 |
JP2017160109A Active JP6356886B2 (ja) | 2012-01-17 | 2017-08-23 | 水酸化酸化アルミニウムへ吸着可能な少なくとも2種類の抗原を含有するワクチンの調製方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017160109A Active JP6356886B2 (ja) | 2012-01-17 | 2017-08-23 | 水酸化酸化アルミニウムへ吸着可能な少なくとも2種類の抗原を含有するワクチンの調製方法 |
Country Status (34)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9358294B2 (ja) |
EP (1) | EP2804628B1 (ja) |
JP (2) | JP6199310B2 (ja) |
KR (1) | KR102019848B1 (ja) |
CN (1) | CN104039348B (ja) |
AP (1) | AP2014007848A0 (ja) |
AR (1) | AR089737A1 (ja) |
AU (1) | AU2013210927B2 (ja) |
BR (1) | BR112014017416B1 (ja) |
CA (1) | CA2861304C (ja) |
CR (1) | CR20140356A (ja) |
CY (1) | CY1119206T1 (ja) |
DK (1) | DK2804628T3 (ja) |
EA (1) | EA026058B1 (ja) |
ES (1) | ES2625011T3 (ja) |
FR (1) | FR2985663B1 (ja) |
GE (1) | GEP201706642B (ja) |
GT (1) | GT201400120A (ja) |
HK (1) | HK1204293A1 (ja) |
HR (1) | HRP20170692T1 (ja) |
HU (1) | HUE032539T2 (ja) |
IL (1) | IL233643A (ja) |
LT (1) | LT2804628T (ja) |
MX (1) | MX349411B (ja) |
NZ (1) | NZ627345A (ja) |
PE (1) | PE20141515A1 (ja) |
PH (1) | PH12014501546A1 (ja) |
PL (1) | PL2804628T3 (ja) |
PT (1) | PT2804628T (ja) |
RS (1) | RS55962B1 (ja) |
SI (1) | SI2804628T1 (ja) |
UA (1) | UA113000C2 (ja) |
WO (1) | WO2013107988A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201405431B (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106075428A (zh) * | 2015-07-01 | 2016-11-09 | 北京科兴中维生物技术有限公司 | 一种免疫原性组合物及其制备方法 |
WO2021176409A1 (en) | 2020-03-05 | 2021-09-10 | Sanofi Healthcare India Private Limited | Preservative combination for vaccine composition |
KR20230173114A (ko) | 2021-04-20 | 2023-12-26 | 케이엠 바이올로직스 가부시키가이샤 | 6종 혼합 액상 백신 조성물 |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CZ283910B6 (cs) * | 1992-05-23 | 1998-07-15 | Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) | Kombinovaný očkovací prostředek, způsob jeho výroby a použití fosforečnanu hlinitého jako pomocného prostředku |
US6790445B1 (en) * | 1997-02-06 | 2004-09-14 | Merck & Co., Inc. | Preservatives for vaccines |
ATE470434T1 (de) * | 1997-02-06 | 2010-06-15 | Merck Sharp & Dohme | Thimerosal-freie konservierungsmittel für impfstoffe |
AU4707097A (en) * | 1997-09-15 | 1999-04-05 | Pasteur Merieux Serums Et Vaccins | Multivalent vaccines |
WO2003009869A1 (en) * | 2001-07-26 | 2003-02-06 | Chiron Srl. | Vaccines comprising aluminium adjuvants and histidine |
GB0118249D0 (en) * | 2001-07-26 | 2001-09-19 | Chiron Spa | Histidine vaccines |
EP1414433B1 (en) | 2001-08-07 | 2006-04-12 | Laboratoires SMB SA | Improved pharmaceutical composition containing a ppar alpha agent and a process for preparing it |
FR2828406B1 (fr) | 2001-08-08 | 2005-06-24 | Aventis Pasteur | Composition vaccinale bivalente havi |
GB0610140D0 (en) * | 2006-05-22 | 2006-06-28 | Insense Ltd | Protein stability |
PE20100366A1 (es) * | 2008-10-24 | 2010-05-21 | Panacea Biotec Ltd | Novedosas composiciones de vacuna con tos ferina acelular asi como el metodo para su elaboracion |
-
2012
- 2012-01-17 FR FR1250464A patent/FR2985663B1/fr active Active
-
2013
- 2013-01-16 AR ARP130100131A patent/AR089737A1/es not_active Application Discontinuation
- 2013-01-17 SI SI201330643A patent/SI2804628T1/sl unknown
- 2013-01-17 BR BR112014017416-4A patent/BR112014017416B1/pt active IP Right Grant
- 2013-01-17 CA CA2861304A patent/CA2861304C/fr active Active
- 2013-01-17 LT LTEP13704171.1T patent/LT2804628T/lt unknown
- 2013-01-17 HU HUE13704171A patent/HUE032539T2/hu unknown
- 2013-01-17 KR KR1020147022200A patent/KR102019848B1/ko active IP Right Grant
- 2013-01-17 EA EA201491387A patent/EA026058B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-01-17 RS RS20170449A patent/RS55962B1/sr unknown
- 2013-01-17 US US14/372,695 patent/US9358294B2/en active Active
- 2013-01-17 AU AU2013210927A patent/AU2013210927B2/en active Active
- 2013-01-17 PT PT137041711T patent/PT2804628T/pt unknown
- 2013-01-17 EP EP13704171.1A patent/EP2804628B1/fr active Active
- 2013-01-17 UA UAA201409180A patent/UA113000C2/uk unknown
- 2013-01-17 DK DK13704171.1T patent/DK2804628T3/en active
- 2013-01-17 CN CN201380005797.8A patent/CN104039348B/zh active Active
- 2013-01-17 AP AP2014007848A patent/AP2014007848A0/xx unknown
- 2013-01-17 PE PE2014001091A patent/PE20141515A1/es active IP Right Grant
- 2013-01-17 PL PL13704171T patent/PL2804628T3/pl unknown
- 2013-01-17 ES ES13704171.1T patent/ES2625011T3/es active Active
- 2013-01-17 NZ NZ627345A patent/NZ627345A/en unknown
- 2013-01-17 JP JP2014552680A patent/JP6199310B2/ja active Active
- 2013-01-17 GE GEAP201313552A patent/GEP201706642B/en unknown
- 2013-01-17 WO PCT/FR2013/050106 patent/WO2013107988A1/fr active Application Filing
- 2013-01-17 MX MX2014007850A patent/MX349411B/es active IP Right Grant
-
2014
- 2014-06-19 GT GT201400120A patent/GT201400120A/es unknown
- 2014-07-03 PH PH12014501546A patent/PH12014501546A1/en unknown
- 2014-07-14 IL IL233643A patent/IL233643A/en active IP Right Grant
- 2014-07-23 CR CR20140356A patent/CR20140356A/es unknown
- 2014-07-23 ZA ZA2014/05431A patent/ZA201405431B/en unknown
-
2015
- 2015-05-26 HK HK15104967.4A patent/HK1204293A1/xx unknown
-
2017
- 2017-05-10 HR HRP20170692TT patent/HRP20170692T1/hr unknown
- 2017-05-31 CY CY20171100571T patent/CY1119206T1/el unknown
- 2017-08-23 JP JP2017160109A patent/JP6356886B2/ja active Active
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2641969C2 (ru) | Множественная вакцинация, включающая менингококки серогруппы с | |
RU2444374C2 (ru) | Получение вакцин, содержащих поверхностный антиген вируса гепатита в и поверхностно-активное вещество | |
US9040058B2 (en) | Fermentation media free of animal-derived components for production of diphtheria toxoids suitable for human vaccine use | |
US20100226937A1 (en) | Combination vaccines with 1-hydroxy-2-phenoxyethane preservative | |
JP6356886B2 (ja) | 水酸化酸化アルミニウムへ吸着可能な少なくとも2種類の抗原を含有するワクチンの調製方法 | |
JP2021181445A (ja) | 多価ワクチン組成物 | |
JP2012506420A (ja) | 全細胞百日咳を含む混合ワクチン | |
JP2022502469A (ja) | 低減用量の不活化ポリオウイルスを含む混合ワクチン組成物およびそれを調製するための方法 | |
EP2592137A1 (en) | Fermentation media free of animal-derived components for production of diphtheria toxoids suitable for human vaccine use | |
WO2022224966A1 (ja) | 6種混合液状ワクチン組成物 | |
OA16951A (en) | Method for formulating a vaccine containing at least two antigens capable of adsorbing onto aluminium oxyhydroxide. | |
RU2287344C2 (ru) | Комбинированная вакцина на основе поверхностного антигена вируса гепатита в, способ ее получения и способ предупреждения инфекции гепатита в у человека | |
EA043682B1 (ru) | Комбинированная вакцина и способ её производства (варианты) | |
AU2013203663B2 (en) | Fermentation media free of animal-derived components for production of diphtheria toxoids suitable for human vaccine use | |
GB2498112A (en) | Preparation of a diphtheria toxoid by incubating toxin concentrate with an amino acid and formaldehyde |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20151009 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160816 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20161115 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170307 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170331 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170725 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170823 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6199310 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |