JP6165897B2 - アルドース還元酵素阻害剤および同使用方法 - Google Patents

Description

本願は、２０１０年７月１６日出願の米国仮特許出願第６１／３６５，０９８号の優先権の利益を主張するものであり、その開示の全体は参照により本明細書に組み込まれる。

本明細書に引用した特許、特許出願および刊行物はすべてその全体を参照により本明細書に組み込む。本明細書に記載し主張する本発明の日付において当業者に知られた技術水準を十分に理解するために、これらの刊行物の開示全体を参照により本明細書に組み込む。

本特許の開示には、著作権保護を受ける資料が含まれる。この著作権保有者は、本特許文献または特許開示の複製に関して、それが米国特許商標局のファイルまたは記録の中に現れるものである限り、いかなる者によるものであっても異議を唱えない。但し、それ以外の形ではあらゆる著作権を保持する。

本発明は、皮膚の健康な老化の促進、皮膚障害の治療、心血管系障害の治療、腎障害の治療、血管形成障害（例えば、癌）の治療、組織障害（例えば、心臓以外の組織障害）の治療、進行性心筋梗塞の治療およびその他の種々の障害（例えば、糖尿病に起因する合併症）の治療のための、新規な化合物およびその医薬組成物、ならびに本発明の化合物および組成物を用いた方法に関する。その他の障害には、限定するものではないが、アテローム性動脈硬化症、冠動脈疾患、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、皮膚感染症、末梢血管疾患、脳卒中等が挙げられる。

糖尿病は最もよくみられる慢性疾患であり、インスリン産生および／またはインスリン感受性の欠如から高血糖値が生じる。高血糖のヒトはインスリン感受性細胞（例えば、水晶体、末梢神経および糸球体）においてグルコース‐ソルビトール‐果糖経路を介して多くのグルコースを代謝する。これによりその細胞ではソルビトールが過剰になり、細胞膜を通して容易には拡散されない。ソルビトールの濃度が高くなると細胞内へ水が流れ込み、膨潤および潜在的な損傷を引き起こす。

米国特許第５，６７７，３４２号 米国特許第５，１５５，２５９号 米国特許第４，９３９，１４０号 米国特許第１１／２１０，２８３号

Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｖｏｌ．１０，Ｉｓｓｕｅ １，９１‐９７

アルドース還元酵素は身体の多くの器官に存在する酵素であり、グルコースからソルビトールへの還元を触媒し、これはグルコースからの果糖形成の役割を担うソルビトール経路の工程の１つである。もはや組織にインスリン感受性がない糖尿病状態でグルコース濃度が上昇すると、アルドース還元酵素活性が増大する。このような組織には、例えば、水晶体、末梢神経および腎糸球体がある。ソルビトールは容易には細胞膜を通って拡散しないため、蓄積して浸透圧の障害を引き起こし、続いて、網膜症、神経障害および腎障害をきたす。したがって、アルドース還元酵素を阻害すれば、糖尿病のインスリン感受性細胞におけるソルビトールの蓄積が阻止され、糖尿病患者における大血管および微小血管の合併症を防止するための新規な方法が提供される。また、アルドース還元酵素阻害剤（例えば、ゾポルレスタット）はそういった作用を治療または軽減するのに有用であり得、糖尿病動物モデルの角膜上皮の創傷治癒に有効性を示している。

一態様では、本発明は式（Ｉ）の化合物に関する

［式中、Ｒ^１は、Ｈ、（Ｃ_１〜Ｃ_６）‐アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）‐ヒドロキシアルキルまたは（Ｃ_１〜Ｃ_６）‐アミノアルキル；Ｘ^１はＮまたはＣＲ^３；Ｘ^２はＮまたはＣＲ^４；Ｘ^３はＮまたはＣＲ^５；Ｘ^４はＮまたはＣＲ^６；但し、Ｘ^１，Ｘ^２，Ｘ^３またはＸ^４のうちの２または３個はＮである；Ｙは結合Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＨまたはＣ＝Ｎ（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキル；Ｚは

Ａ^１はＮＲ^１１、Ｏ、ＳまたはＣＨ_２；Ａ^２はＮまたはＣＨ；Ａ^３はＮＲ^１１、ＯまたはＳ；
Ｒ^３〜Ｒ^１０は独立して水素、ハロゲン，シアノ、アシル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ハロアルキルチオ，トリフルオロアセチル，（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルコキシ、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルチオ、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルスルフィニルまたは（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルスルホニル；あるいはＲ^３〜Ｒ^６のうちの２つまたはＲ^７〜Ｒ^１０のうちの２つはともに（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキレンジオキシ；およびＲ^１１は水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルまたはＣ（Ｏ）Ｏ‐（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキル；または薬学的に許容され得るその塩または溶媒和物である］。

別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物、または薬学的に許容され得るその塩または溶媒にも関する。

さらに別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容され得るその塩または溶媒、あるいは式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物または薬学的に許容され得るその塩または溶媒を、それを必要とする対象に投与するステップを含む治療方法にも関する。本発明の化合物および／または組成物は、例えば、皮膚の健康な老化の促進、皮膚疾患の治療、血管形成障害（例えば、癌）の治療、組織障害の治療、心血管系障害の治療、腎障害の治療、進行性心筋梗塞の治療、その他の種々の疾患（例えば、糖尿病に起因する合併症）の治療に有用であり得る。そういった疾患には、限定するものではないが、アテローム性動脈硬化症、冠動脈疾患、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、皮膚感染症、末梢血管疾患、脳卒中等を含み得る。

さらに別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物の調製法に関する。

本発明は、一部には、本願の実施例のセクションにより完全に記載されているある発見に基づくものである。例えば、本発明は、一部には、式（Ｉ）の化合物の発見および係る化合物が呈するアルドース還元酵素の阻害に基づくものである。

本発明のこれらおよび他の実施形態は、発明を実施するための形態、実施例および添付の特許請求の範囲を含む本願の以下のセクションでさらに記載されている。本発明のさらに他の目的および利点は、本明細書の開示から当業者によって明白となろう。それらは単なる例示であって限定するものではない。したがって、本発明の精神および範囲から逸脱しなければ、当業者には他の実施形態が認識されよう。

水溶液中の化合物Ａおよびゾポルレスタットの溶解度曲線を示すグラフである。 化合物Ａおよびゾポルレスタットのアルドース還元酵素阻害活性を示すグラフである。

アルドース還元酵素阻害剤は、例えば、米国特許第５，６７７，３４２号；同第５，１５５，２５９号；同第４，９３９，１４０号；米国特許出願第１１／２１０，２８３号；ならびにＲｏｙらのＤｉａｂｅｔｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｖｏｌ．１０，Ｉｓｓｕｅ １，９１‐９７；およびそれらに引用されている参照物に記載されており、それらの各々全体を参照により本明細書に組み込む。アルドース還元酵素阻害剤には、例えば、ゾポルレスタット、エパルレスタット、ラニレスタット、ベルベリンおよびソルビニルが挙げられる。新規なアルドース還元酵素阻害剤のファミリーを見出したので、本明細書に記載する。驚くべきことに、この新規なファミリーは、例えばゾポルレスタットなどの他のアルドース還元酵素阻害剤と比較して劇的に改善された性質（例えば、結合親和性、溶解性および極性）を呈する化合物を含む。ゾポルレスタットなどの化合物は、例えば、米国特許第４，９３９，１４０号；同第６，１５９，９７６号および同第６，５７０，０１３号に記載されており、その各々全体を参照により本明細書に組み込む。また、本発明者らは驚くべきことに、前記酵素の疎水性結合ポケットに存在することが多い各位置の官能性の変化がその酵素に対する化合物の結合性を打ち消さないということも見出した。例えば、極性部分（例えば、フタラジンのフェニル環の窒素原子）を組み込めば、結合親和性および溶解性は向上する。これは予想外のことであり、一部には、その酵素で疎水性ポケットを占めるフタラジンのフェニル環の性質によるものである。

本発明の化合物および／または組成物は、アルドース還元酵素活性に関連する合併症（例えば、糖尿病患者における神経障害、網膜症、腎障害および多くの合併症）の治療、低減および／または抑制に有効であり得る。また、本発明の化合物および／または組成物は、非糖尿病患者の新血管系障害および腎障害の治療、低減および／または抑制の他、皮膚の健康な老化または創傷治癒の促進にも有効であり得る。

（略語および定義）
用語「アルドース還元酵素阻害剤」とは、主にアルドースの代謝還元の調節を担い、アルドース還元酵素の活性を阻害することによって機能する化合物およびその塩または溶媒和物をいう。アルドースの例には、限定するものではないが、グルコースまたはガラクトースおよびそれらに対応するポリオール（例えば、ソルビトールおよびガラクチトール）が挙げられる。アルドース還元酵素阻害剤の例は、米国特許第４，９３９，１４０号、同第４，９５４，６２９号および同第５，３０４，５５７号に見出され、それら各々の全体を参照により本明細書に組み込む。

本明細書で用いる用語「本発明の化合物」とは、式（Ｉ）の化合物を意味する。また、この用語はその塩、水和物、プロドラッグおよび溶媒和物も包含することを意図している。

本明細書で用いる用語「本発明の（一種以上の）組成物」とは、本発明の化合物を含む組成物ならびにその塩、水和物、プロドラッグまたは溶媒和物を意味する。本発明の組成物は、その他の物質（例えば、賦形剤、安定化剤、潤滑剤、溶媒等）を含み得る。

本明細書で用いる用語「アルキル」とは、別途指示のない限り、直鎖、分枝鎖、単環式部分または多環式部分部分あるいはこれらの組み合わせを有する一価の脂肪族炭化水素基をいう（ここで、その基は場合によっては、直鎖、分枝鎖、単環式部分または多環式部分部分あるいはこれらの組み合わせの１個以上の炭素が１個以上の置換基で各炭素が置換されており、１個以上の置換基は独立してＣ_１〜Ｃ_１０アルキルである）。「アルキル」基の例には、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ‐ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、ノルボルニル基等が挙げられる。

本明細書で用いる用語「ハロゲン」は、塩素（Ｃｌ）、フッ素（Ｆ）、ヨウ素（Ｉ）または臭素（Ｂｒ）を意味する。

本明細書で用いる用語「本発明の方法」とは、本発明の化合物および／または組成物を用いた治療を含んだ方法を意味する。

本明細書で用いる用語「溶媒和物」とは、化合物あるいは薬学的に許容され得るその塩を意味し、適した溶媒の分子は結晶格子に組み込まれている。適した溶媒は、投与される用量で生理学的に許容できるものである。適した溶媒の例には、エタノール、水等がある。水を溶媒とする場合、その分子を「水和物」と呼ぶ。

「医薬組成物」とは、本明細書に記載の化合物または薬学的に許容され得るその塩、溶媒和物、プロドラッグまたは水和物の１以上と他の化学成分（例えば、生理学的に許容可能なキャリアおよび賦形剤）との混合物をいう。医薬組成物の目的は、器官または対象への化合物の投与を容易にすることにある。

「プロドラッグ」または「プロドラッグ」とはｉｎ ｖｉｖｏで親薬剤に転換される物質をいう。プロドラッグは多くの場合、状況によっては親薬剤よりも投与が容易であるので有用である。プロドラッグは、例えば経口投与によって生物学的に利用可能であるが、親薬剤は生物学的利用可能性が低いか、生物学的に利用することができない。また、プロドラッグは親薬剤よりも医薬組成物における溶解性が高くなっている。例えば、前記化合物は、体液（例えば、血流）中で加水分解によって分割され、ひいては活性化合物が放出される保護基を担持するか、体液中で酸化または還元されて前記化合物を放出する。用語「プロドラッグ」はそういった官能基（例えば、式Ｉの化合物の酸性官能基）にも適用されることもある。プロドラッグは、酸性基が例えばエステルまたはアミドとして保護された構造から成ることがある。プロドラッグのさらなる例をここで、および例えばＡｌｅｘａｎｄｅｒらのＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８８，３１，３１８（その全体を参照により本明細書に組み込む）によって考察する。

用語「薬学的に許容され得る塩」とは、無機酸または有機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、リン酸、ギ酸、酢酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、グリコール酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、マロン酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、ナフタレン‐２スルホン酸およびその他の酸）に由来する塩および無機塩基または有機塩基（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩またはテトラフルオロホウ酸塩）に由来する塩を含むことが意図される。薬学的に許容され得る塩の例は、例えば、Ｂｅｒｇｅら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１９７７，６６（１），１、米国特許第６，５７０，０１３号および同第４，９３９，１４０号、それら各々の全体を参照により本明細書に組み込む）に見出される。薬学的に許容され得る塩には、半塩も包含することが意図される（ここで、化合物／酸の比はそれぞれ２：１である）。半塩の例には２個のカルボン酸を含む酸（例えば、リンゴ酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、グルタル酸、シュウ酸、アジピン酸およびクエン酸）由来のものがある。その他の半塩の例としては、二陽子の鉱酸（例えば、硫酸）由来のものがある。好適な半塩の例には、限定するものではないが、ヘミマレイン酸塩、ヘミフマル酸塩およびヘミコハク酸塩が挙げられる。

用語「酸」には、薬学的に許容され得るあらゆる無機酸または有機酸を想定している。無機酸には、ハロゲン化水素酸のような鉱酸（例えば、臭化水素酸および塩酸、硫酸、リン酸および硝酸）が挙げられる。有機酸には、薬学的に許容され得るあらゆる脂肪族および脂環式および芳香族カルボン酸、ジカルボン酸、トリカルボン酸および脂肪酸が挙げられる。好適な酸は、直鎖または分枝鎖の飽和または不飽和Ｃ_１〜Ｃ_２０脂肪族カルボン酸（場合によってはハロゲン基またはヒドロキシル基で置換された）またはＣ_６〜Ｃ_１２芳香族カルボン酸である。そういった酸の例は、炭酸、ギ酸、フマル酸、酢酸、プロピオン酸、イソプロピオン酸、吉草酸、α−ヒドロキシ酸（例えば、グリコール酸および乳酸）、クロロ酢酸、安息香酸、メタンスルホン酸およびサリチル酸である。ジカルボン酸の例には、シュウ酸、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸およびマレイン酸が挙げられる。トリカルボン酸の一例はクエン酸である。脂肪酸には、炭素原子数４〜２４の薬学的に許容され得るあらゆる飽和または不飽和脂肪族カルボン酸または芳香族カルボン酸を含む。例としては、酪酸、イソ酪酸、ｓｅｃ‐ブチル酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノレン酸およびフェニルステリック酸（ｐｈｅｎｙｌｓｔｅｒｉｃ ａｃｉｄ）が挙げられる。その他の酸として、グルコン酸、グリコヘプトン酸およびラクトビオン酸が挙げられる。

本明細書で用いる用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、近似的（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）、大まかに（ｒｏｕｇｈｌｙ）、に近い（ａｒｏｕｎｄ）または、の辺り（ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ）を意味する。用語「約」を数値範囲と一緒に用いる場合、それは記載された数値より上および下に境界を広げることによってその範囲を変更する。一般に、用語「約」は本明細書では、２０％だけ上または下（高または低）に記載の値の数値を上下に変更するために用いられる。

本明細書で用いる「有効量」、「十分量」または「治療有効量」とは、有益なまたは所望の結果（臨床結果など）をもたらすのに十分な化合物の量をいう。したがって、有効量とは、例えば、アルドース還元酵素に関連する苦痛の重症度および／または持続期間または１以上のその症状を低減また軽減するか、アルドース還元酵素に関連する苦痛に関係する状態または症状の進行を阻止するか、あるいは別の療法の（１以上の）予防効果または治療効果を増強または改善するのに十分なものであり得る。また、有効量には望ましくない副作用を回避または実質的に減弱する、前記化合物の量を含む。

本明細書で用いられ周知でもある「治療」とは、有益なまたは所望の結果（臨床結果など）を得るためのアプローチである。有益なまたは所望の臨床結果には、限定するものではないが、検出できるか否かにかかわらず、１以上の症状または状態の軽減または寛解、疾患または苦痛の程度の減少、疾患または苦痛の状態の安定化（すなわち、悪化しない）、疾患または苦痛の拡大の阻止、疾患または苦痛の進行の遅延化または緩徐化、疾患または苦痛の状態の寛解または緩和および寛解（部分的でも全体的でも）を含み得る。また「治療」には、治療を行わない場合に想定される生存と比較して生存を引き延ばすことも含み得る。

語句「必要とする」とは、アルドース還元酵素活性に関連する状態または本発明の化合物および／または組成物によって緩和され得る状態からの症状緩和または無症状緩和のために必要であることをいう。

用語「キャリア」とは、化合物を投与するのに用いる希釈剤、アジュバント、賦形剤またはビヒクルをいう。そういった薬学的キャリアの非限定的な例には水および油のような液体（石油、動物、植物または合成起源のもの（例えば、ピーナッツ油、大豆油、鉱物油、ゴマ油等））が挙げられる。薬学的キャリアは、生食水、アカシアゴム、ゼラチン、デンプン糊、滑石、ケラチン、コロイド状シリカ、尿素等でもよい。また、補助剤、安定化剤、濃化剤、潤滑剤および着色剤を用いてもよい。その他の適した薬学的キャリアの例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ａｌｆｏｎｓｏ Ｇｅｎｎａｒｏ ｅｄ．，Ｋｒｉｅｇｅｒ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ（１９９７）；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄ．（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）；Ｍｏｄｅｒｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，ｖｏｌ．１２１（Ｇｉｌｂｅｒｔ Ｂａｎｋｅｒ ａｎｄ Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ Ｒｈｏｄｅｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２００２）に記載されており、それら各々の全体を本明細書に組み込む。

本明細書で用いる用語「動物」、「対象」および「患者」には、限定するものではないが、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ネコ、サル、イヌ、ウマ、ブタ等）およびヒトを含む動物界のあらゆる仲間を包含する。

一実施形態において、本明細書に記載のアルドース還元酵素阻害剤は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容され得るその塩、プロドラッグおよび溶媒和物を包含する

［式中、Ｒ^１はＨ、（Ｃ_１〜Ｃ_６）‐アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）‐ヒドロキシアルキルまたは（Ｃ_１〜Ｃ_６）‐アミノアルキル；Ｘ^１はＮまたはＣＲ^３；Ｘ^２はＮまたはＣＲ^４；Ｘ^３はＮまたはＣＲ^５；Ｘ^４はＮまたはＣＲ^６；但し、Ｘ^１，Ｘ^２，Ｘ^３またはＸ^４のうちの２または３個はＮである；Ｙは結合Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＨまたはＣ＝Ｎ（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキル；Ｚは、

Ａ^１はＮＲ^１１、Ｏ、ＳまたはＣＨ_２；Ａ^２はＮまたはＣＨ；Ａ^３はＮＲ^１１、ＯまたはＳ；
Ｒ^３〜Ｒ^１０は独立して水素、ハロゲン、シアノ、アシル、ハロアルキル，ハロアルコキシ、ハロアルキルチオ、トリフルオロアセチル、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルコキシ、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルチオ、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルスルフィニルまたは（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルスルホニル；あるいはＲ^３〜Ｒ^６のうちの２つまたはＲ^７〜Ｒ^１０のうちの２つはともに（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキレンジオキシ；およびＲ^１１は水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルまたはＣ（Ｏ）Ｏ‐（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルである］。

当業者には、
Ｚは、

またはＺは、

であるという指定は、Ｚが

である場合に、式（Ｉ）の化合物は

を包含するものと理解され、Ｚが

である場合、式（Ｉ）の化合物は、

を包含するものと理解されることを示すことが認識されよう。

ある実施形態において、Ｒ^１は水素または（Ｃ_１〜Ｃ_６）‐アルキルである。ある実施形態において、Ｒ^１は水素である。ある実施形態において、Ｒ^１は（Ｃ_１〜Ｃ_６）‐アルキルである。ある実施形態において、Ｒ^１はｔｅｒｔ‐ブチルである。

ある実施形態において、Ｒ^３〜Ｒ^１０は独立して水素、ハロゲンまたはハロアルキルである。ある実施形態において、Ｒ^３〜Ｒ^１０は独立して水素、ハロゲンまたはトリハロアルキルである。

ある実施形態において、Ｒ^３〜Ｒ^６は水素である。

ある実施形態において、Ｒ^７〜Ｒ^１０は独立して水素、ハロゲンまたはハロアルキルである。ある実施形態において、Ｒ^７〜Ｒ^１０は独立して水素、ハロゲンまたはトリハロアルキルである。

ある実施形態において、Ｒ^７およびＲ^１０は水素である。

ある実施形態において、Ｒ^８は水素、ハロゲンまたはハロアルキルである。ある実施形態において、Ｒ^８は水素である。ある実施形態において、Ｒ^８はハロゲンである。ある実施形態において、Ｒ^８はハロアルキルである。

ある実施形態において、Ｒ^９は水素、ハロゲンまたはハロアルキルである。ある実施形態において、Ｒ^９は水素である。ある実施形態において、Ｒ^９はハロゲンである。ある実施形態において、Ｒ^９はハロアルキルである。

ある実施形態において、ＹはＣ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＨまたはＣ＝Ｎ（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルである。ある実施形態において、ＹはＣ＝ＯまたはＣ＝Ｓである。ある実施形態において、ＹはＣ＝Ｏである。ある実施形態において、ＹはＣ＝Ｓである。ある実施形態において、ＹはＣ＝ＮＨまたはＣ＝Ｎ（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルである。

ある実施形態において、Ａ^１はＮＲ^１１、ＳまたはＣＨ_２である。ある実施形態において、Ａ^１はＮＲ^１１またはＯである。ある実施形態において、Ａ^１はＮＲ^１１またはＳである。ある実施形態において、Ａ^１はＮＲ^１１である。ある実施形態において、Ａ^１はＯである。ある実施形態において、Ａ^１はＳである。

ある実施形態において、Ａ^２はＮまたはＣＨである。ある実施形態において、Ａ^１はＮである。ある実施形態において、Ａ^１はＣＨである。

ある実施形態において、Ａ^３はＯまたはＳである。ある実施形態において、Ａ^３はＯである。ある実施形態において、Ａ^３はＳである。

ある実施形態において、Ｘ^１およびＸ^４は窒素である。

ある実施形態において、Ｘ^１およびＸ^２は窒素である。

ある実施形態において、Ｘ^１およびＸ^３は窒素である。

ある実施形態において、Ｘ^２およびＸ^３は窒素である。

ある実施形態において、Ｘ^２およびＸ^４は窒素である。

ある実施形態において、Ｘ^３およびＸ^４は窒素である。

ある実施形態において、Ｚは、

ある実施形態において、Ｚは、

である。

ある実施形態において、Ｒ^１は水素または（Ｃ_１〜Ｃ_６）‐アルキル；
Ｘ^１およびＸ^４はＮ；Ｘ^２はＣＲ^４；Ｘ^３はＣＲ^５；ＹはＣ＝Ｏ；Ｚは、

Ａ^１はＮＲ^１１、ＯまたはＳ；Ａ^２はＮ；Ａ^３はＯまたはＳ；Ｒ^４およびＲ^５は水素；Ｒ^７〜Ｒ^１０は独立して水素、ハロゲン、シアノ、アシル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ハロアルキルチオ、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルコキシ、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルチオ、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルスルフィニルまたは（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルスルホニル；およびＲ^１１は水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルまたはＣ（Ｏ）Ｏ‐（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルである。

ある実施形態において、Ｒ^１は水素またはｔｅｒｔ‐ブチル；Ｘ^１およびＸ^４はＮ；Ｘ^２はＣＲ^４；Ｘ^３はＣＲ^５；ＹはＣ＝Ｏ；Ｚは、

；Ａ^１はＮＲ^１１、ＯまたはＳ；Ａ^２はＮ；Ａ^３はＯまたはＳ；Ｒ^４およびＲ^５は水素；Ｒ^７〜Ｒ^１０は独立して水素、ハロゲンまたはハロアルキル；およびＲ^１１は水素、（Ｃ_１〜Ｃ_４）‐アルキルまたはＣ（Ｏ）Ｏ‐ｔｅｒｔ‐ブチルである。

ある実施形態において、Ｒ^１は水素またはｔｅｒｔ‐ブチル；
Ｘ^１およびＸ^４はＮ；Ｘ^２はＣＨ；Ｘ^３はＣＨ；ＹはＣ＝Ｏ；Ｚは、

；Ａ^１はＮＲ^１１、ＯまたはＳ；Ａ^２はＮ；Ａ^３はＯまたはＳ；Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^１０は独立して水素、ハロゲンまたはハロアルキル；Ｒ^９はハロゲンまたはハロアルキル；およびＲ^１１は水素またはメチルである。

ある実施形態において、Ｒ１は水素またはｔｅｒｔ‐ブチル；
Ｘ^１およびＸ^４はＮ；Ｘ^２はＣＨ；Ｘ^３はＣＨ；ＹはＣ＝Ｏ；
Ｚは、

；Ａ^１はＮＲ^１１、ＯまたはＳ；Ａ^２はＮ；Ａ^３はＯまたはＳ；Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^１０は独立して水素、ハロゲンまたはハロアルキル；Ｒ^９は塩素またはトリフルオロメチル；および
Ｒ^１１は水素またはメチルである。

ある実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ａまたは薬学的に許容され得るその塩（例えばそれらのモノ‐、ジ‐またはトリ‐エタノールアミン塩）を包含する。

ある実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ｂまたは薬学的に許容され得るその塩（例えば、モノ‐、ジ‐またはトリ‐エタノールアミン塩）を包含する。

式（Ｉ）の化合物は一般に、例えば、例えばスキーム１に従って調製することができる。

［式中、Ｘ^１，Ｘ^２，Ｘ^３，Ｘ^４，Ｒ^１，Ａ^１，Ａ^２，Ｒ^３〜Ｒ^１１は上記で定めたものであり、Ｑはハロゲン（例えば、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ等）あるいは他の脱離基（例えば、ＯＨ、ＯＳＯ_２Ｍｅ、ＯＭｓ、ＯＴｓ、ＯＴｆ等）である］。

ある実施形態において、前記反応は、塩基（例えば、カリウムｔ‐ブトキシド、水素化ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド等）の存在下で実施することができる。

ある実施形態において、前記反応は非プロトン溶媒（例えば、ＤＭＦ、ＴＨＦ、ＮＭＰ等）を用いて実施することができる。ある実施形態において、前記反応はアルコール溶媒（例えば、メタノール、エタノール等）を用いて実施することができる。

ある実施形態において、前記反応は約５℃〜約８０℃（例えば、２０℃〜３０℃）の温度で実施することができる。

ある実施形態において、前記反応の後には、さらなる分離工程および精製工程（例えば、クロマトグラフィ（例えば、フラッシュ、ＨＰＬＣ、ＭＰＬＣ等））、結晶化等が続き得る。

その他の適した反応（例えば、式（Ｉ）の化合物を加水分解して異なる形態の式（Ｉ）の化合物を得る）が可能である。例えば、ｔｅｒｔ‐ブトキシ、メトキシ、エトキシ等の基をＲ^１として有する化合物を適した試薬（例えば、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、ＨＣｌ、ＫＯＨ等）と反応させることによって加水分解して、水素をＲ^１として有する式（Ｉ）の化合物を得ることができる。

式（Ｉ）の化合物はスキーム２に従って調製することもできる。

例えば、以下の合成例はスキーム３に従って実施することができる。

その他のいくつかの実施形態（ＹはＣ＝Ｏである）において、次の反応を実施してＣ＝ＯをＣ＝ＳまたはＣ＝Ｎ等と置換することができる。

式（ＩＢ）の化合物

式（ＩＢ）の化合物を得るために、種々の可能性が存在する。例えば、商業的供給源（例えば、Ｓｉｇｍａ‐Ａｌｄｒｉｃｈ社）が利用できる。別法では、式（ＩＢ）の化合物は、種々の異なる反応（例えば、以下のスキーム４に概略的に示した縮合反応）によって合成することができる。前記反応は種々の溶媒（例えば、エタノール、メタノール、ＤＭＦ、ＡｃＯＨ等）を用いて実施することができる。前記反応は約５℃〜約８０℃（例えば、５５℃〜６５℃）の温度で実施することができる。

式（ＩＢ）のある種の化合物の合成に関する他の説明の例示は、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９９１），Ｖｏｌ．３４，ｐｐ．１０８‐１２２およびＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９９２），Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．３，ｐｐ．４５７‐４６５に記載されており、それらの各々の全体を参照により本明細書に組み込む。

式（ＩＡ）の化合物

式（ＩＡ）の化合物を得るために、種々の可能性が存在する。例えば、式（ＩＡ）の化合物はスキーム５に示すように合成することができる。例えば、式（ＩＡ）の化合物（ＹはＣ＝Ｏである）を得るために、以下に示すように、式（ＩＩＡ）で表される化合物と添加／環化反応（例えば、ヒドラジン等との反応）を生じさせる試薬との反応を実施することができる。前記反応は種々の溶媒（例えば、エタノール、メタノール、ＴＨＦ等）を用いて実施することができる。前記反応は約２０℃〜約１００℃（例えば、６０℃〜８０℃）で実施することができる。

式（ＩＩＡ）の化合物は、スキーム６に示すように、例えば、無水物とウィッティヒ反応を生じさせる試薬（例えば、（ｔｅｒｔ‐ブトキシカルボニルメチレン）‐トリフェニルホスホラン等）との反応によって得ることができる。前記反応は非プロトン溶媒（例えば、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＴＨＦ、１，４‐ジオキサン、トルエン等）を用いて実施することができる。前記反応は約２０℃〜約１１０℃（例えば、５５℃〜７０℃）の温度で実施することができる。

ある実施形態において、以下（スキーム７）に例示するように、無水物とウィッティヒ反応を生じさせる試薬との反応によって、式（ＩＩＡ）で表される特定の化合物の混合物を得ることができる。このような場合、必要に応じて、この混合物を分離および精製して対象とする式（ＩＩＡ）の特定の化合物を得ることができる。

式（ＩＩＩＡ）の化合物は一般に、商業的供給源（例えば、Ｓｉｇｍａ‐Ａｌｄｒｉｃｈ社）から入手できる。別法では、式（ＩＩＩＡ）の化合物は、以下（スキーム８）に概略的に示すように、式（ＩＶＡ）で表されるジカルボン酸誘導体と適した無水物形成試薬（例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）または無水酢酸）との反応によって得ることができる。前記反応は非求核性溶媒（例えば、無水酢酸、ＴＨＦ等）を用いて実施することができる。前記反応は約２０℃〜約１００℃（例えば、６０℃〜８０℃）の温度で実施することができる。

式（ＩＶＡ）の化合物は一般に、商業的供給源（例えば、Ｓｉｇｍａ‐Ａｌｄｒｉｃｈ社）から得ることができる。別法では、式（ＩＶＡ）の化合物は、以下（スキーム９）に概略的に示すように、式（ＶＡ）で表される適切な前駆物質と適切なジカルボン酸誘導体形成試薬（例えば、ＮａＭｎＯ_４および／またはＮａＯＨ）との反応によって得ることができる。前記反応は水性溶媒（例えば、水）を用いて実施することができる。前記反応は約５０℃〜約１００℃（例えば、８５℃〜９５℃）の温度で実施することができる。

式（Ｉ）の化合物のための他の合成スキーム

追加の反応を実施して、式（Ｉ）によって表される化合物の追加の実施形態を合成することができる。

式（Ｉ）の化合物（ここで、ＹはＣ＝Ｓである）を得るために、以下の合成を実施し得る（スキーム１０）。

式（Ｉ）の化合物（ここで、ＹはＣ＝ＮＲ^＊である。式中、Ｒ^＊は例えば水素またはアルキル置換基を表す）を得るに、次の合成を実行し得る（スキーム１１）。

代替の反応スキームも可能である。例えば、次の合成スキームを行って式（Ｉ）の化合物を得ることもできる（ここで、Ｙは共有結合である）（スキーム１２）。

ある他の実施形態において、他の種類の反応（例えば、パーキン反応）を実施して式（Ｉ）の化合物を得ることができる（スキーム１３）。ＫＯＡｃ／Ａｃ_２Ｏを用いたパーキン反応を以下に示す。しかし、他の温度および他の塩基（例えば、Ｋ_２ＣＯ_３等）を利用してよい。

当業者には明らかであるように、その他の置換基および修飾基も可能である。例えば、スキーム１３では、ＮａＯＨの代わりにＫＯＨを用いることができる。以下のスキーム１４では、ＮａＨの代わりにＫＯ^ｔＢｕを用いることができる。また、ＤＭＦの代わりに、ＮＭＰまたはＴＨＦを用いてもよい。パーキン反応のさらなる詳細はＷＯ０３／０６１６６０に記載されており、その内容全体を参照により本明細書に組み込む。

ある実施形態において、以下の代替の合法成を実施することができる（スキーム１５）。

式（Ｉ）の化合物の各種実施形態を生成するための反応スキームの例

ある実施形態のための特定の非限定的な例示の合成スキームを以下に示す。

式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ^１、Ｘ^２、Ｘ^３およびＸ^４のうちの３つは窒素、ＹはＣ＝Ｏである）は、例えば、一般スキーム１６に従って合成することができる。

式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ^１およびＸ^４は窒素であり、ＹはＣ＝Ｏである）は、例えば、一般スキーム１７に従って合成することができる。

式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ^２およびＸ^３は窒素であり、ＹはＣ＝Ｏである）は、例えば、一般スキーム１８に従って合成することができる。

式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ^１およびＸ^２またはＸ^３およびＸ^４は窒素であり、ＹはＣ＝Ｏである）は、例えば、一般スキーム１９に従って合成することができる。

式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ^１およびＸ^３またはＸ^２およびＸ^４は窒素であり、ＹはＣ＝Ｏである）は、例えば、一般スキーム２０に従って合成することができる。

上記実施例において、Ｑはハロゲンまたは脱離基、Ｒ^１およびＲ^２は独立して水素、ハロゲン（例えばＣｌまたはＦ）またはハロアルキル（例えば、ＣＦ_３）である。

式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ^１およびＸ^４は窒素、Ｙは共有結合である）は、例えば、一般スキーム２１に従って合成することができる。

上記実施例において、置換基は本明細書に先に記載したものである。

本発明の化合物または組成物は、アルドース還元酵素を阻害することから利益を受ける用途において有用であり得る。アルドース還元酵素阻害の利用例は、例えば、米国特許第５，６７７，３４２号；同第５，１５５，２５９号；同第４，９３９，１４０号；米国特許出願第１１／２１０，２８３号、ＲｏｙらのＤｉａｂｅｔｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｖｏｌ．１０，Ｉｓｓｕｅ １，９１‐９７、およびそれらに引用された参照物に見出すことができ、その全体を参照により本明細書に組み込む。アルドース還元酵素の阻害は、結腸癌の転移および結腸癌細胞の有糸分裂を阻止することも明らかとなっている（例えば、Ｔａｍｍａｌｉ，Ｒ．らのＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ａｌｄｏｓｅ Ｒｅｄｕｃｔａｓｅ Ｐｒｅｖｅｎｔｓ Ｃｏｌｏｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ，Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ２０１１，ｄｏｉ:１０．１０９３／ｃａｒｃｉｎ／ｂｇｒ１０２;ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｏｎｌｉｎｅ:Ｊｕｎｅ３，２０１１;Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ２０１１ Ｍａｙ;１４（２）:２０９‐２１;およびＭｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．２０１０，Ａｐｒ;９（４）:８１３‐８２４を参照されたい。それら全体を参照により本明細書に組み込む）。

ある実施形態において、本発明の化合物および／または組成物は、皮膚の健康な老化の促進、皮膚障害の治療、血管形成障害（例えば、結腸癌などの癌）の治療、心臓以外の組織障害の治療、心血管系障害の治療、腎障害の治療、進行性心筋梗塞の治療およびその他の種々の障害（例えば、糖尿病に起因する合併症）の治療に有用であり得る。そういった疾患には、限定するものではないが、アテローム性動脈硬化症、冠動脈疾患、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、皮膚感染症、末梢血管疾患、脳卒中等を含み得る。

ある実施形態において、本発明の化合物および／または組成物は、心血管用途に有用であり得る。例えば、本発明の化合物および／または組成物を用いて、心バイパス術を受けた患者を治療して術後の回復を改善することができる。別の例では、本発明の化合物および／または組成物を用いて、動脈硬化性プラークの蓄積または迅速な発生を抑制または低減することができる。

その他のいくつかの実施形態において、本発明の化合物および／または組成物は局所適用に有用であり得る。例えば、本発明の化合物および／または組成物を用いて皮膚の老化を遅延または低減することができる。

ある実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、治療を受ける対象の体重１ｋｇ当たり約０．５〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日（例えば、約１．０〜１０ｍｇ／ｋｇ）の範囲の用量で治療を必要とする対象に投与することができる。しかし、追加の変更例が本発明の範囲内にある。

式（Ｉ）の化合物は、単独で投与してもよいし、薬学的に許容され得るキャリア（例えば、希釈剤、フィラー、水溶液の他、有機溶媒も）と併用して投与することもできる。本発明の化合物および／または組成物は、錠剤、粉末剤、トローチ剤、シロップ、注射剤等として投与することができる。追加の成分（例えば、香味剤、結合剤、賦形剤等）が本発明の範囲内にある。

ある実施形態において、薬学的に許容され得る組成物は、約０．０１〜約２重量%（例えば、０．０１〜約１重量％または約０．０５〜約０．５重量％）の濃度で式（Ｉ）の化合物および／または薬学的に許容され得るその塩を含み得る。前記組成物は、溶液、懸濁剤、軟膏剤またはカプセル剤等として製剤化可能である。前記医薬組成物は水溶液として調製することができ、追加の成分（例えば、防腐剤、緩衝剤、等張化剤、抗酸化剤、安定化剤、粘度改変成分等）を含み得る。

その他の同等な投与形態が米国特許第４，９３９，１４０号に見出され、その全体を参照により本明細書に組み込む。

一実施形態において、本発明は、アルドース還元酵素によって引き起こされたか、またはアルドース還元酵素に関連する病態および／または病状を治療する方法において、式Ｉの化合物から成る医薬組成物および／または薬剤、あるいは薬学的に許容され得るその塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグの使用法を提供する。

別の実施形態において、前記治療方法は、（ｉ）係る治療を必要とする対象を同定するステップと、（ｉｉ）式Ｉの化合物あるいは薬学的に許容され得るその塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグまたは互変異性体を提供するステップと、（ｉｉｉ）前記式Ｉの化合物を治療有効量で投与して、係る治療を必要とする対象の病態または病状を治療、抑制および／または阻止するステップとを含む。

別の実施形態において、前記治療方法は、（ｉ）係る治療を必要とする対象を同定するステップと、（ｉｉ）式Ｉの化合物を含む組成物あるいは薬学的に許容され得るその塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグまたは互変異性体を提供するステップと、（ｉｉｉ）前記組成物を治療有効量で投与して、係る治療を必要とする対象の病態または病状を治療、抑制および／または阻止するステップとを含む。

一実施形態において、前記化合物または組成物は経口投与される。

一実施形態において、前記方法は、有効量の式Ｉの化合物あるいは薬学的に許容され得るその塩、溶媒和物、水和物またはプロドラッグ、もしくは式Ｉの化合物を含む組成物または薬学的に許容され得るその塩、溶媒和物、水和物またはプロドラッグおよび薬学的に許容され得るキャリアを対象に投与するステップを含む。前記薬学的に許容され得るキャリアは当業者には公知であり、例えば、アジュバント、希釈剤、賦形剤、フィラー、潤滑剤およびビヒクルが挙げられる。多くの場合、前記薬学的に許容され得るキャリアは当該活性化合物に対して化学的に不活性であり、使用条件下では無毒性である。薬学的に許容され得るキャリアの例には、例えば、水または生食水、ポリマー（例えば、ポリエチレングリコール）、糖質およびそれらの誘導体、油、脂肪酸またはアルコール類が挙げられる。

別の実施形態において、アルドース還元酵素に関連する状態の治療、阻止および／または抑制の方法は、（ｉ）係る治療を必要とする対象を同定するステップと、（ｉｉ）式Ｉの化合物または薬学的に許容され得るその塩、溶媒和物、水和物またはプロドラッグあるいは式Ｉの化合物を含む組成物または薬学的に許容され得るその塩、溶媒和物、水和物またはプロドラッグおよび薬学的に許容され得るキャリアを提供するステップと、（ｉｉｉ）前記化合物または組成物を治療有効量で投与して、係る治療を必要とする対象のアルドース還元酵素に関連する病態または病状を治療、阻止および／または抑制するステップとを含む。

一実施形態において、本発明は、式Ｉの化合物のプロドラッグおよび／またはその医薬組成物を含む方法も包含する。プロドラッグには、生物学的状態下（ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏ）で加水分解、酸化または反応して本発明の活性化合物を提供することができる化合物の誘導体を含む。プロドラッグの例には、限定するものではないが、生体加水分解性部分（例えば、生体加水分解性アミド、生体加水分解性エステル、生体加水分解性カルバミン酸塩、生体加水分解性炭酸塩および生体加水分解性リン酸塩の類似体）を含む本発明の化合物の誘導体および代謝産物が挙げられる。プロドラッグは、例えば、Ｔｈｅ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｃａｍｉｌｌｅ Ｗｅｒｍｕｔｈ，ｅｄ．，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；その全体を参照により本明細書に組み込む）にも記載されている。ある実施形態において、カルボキシル官能基を有する化合物のプロドラッグは、カルボン酸の低級アルキルエステルである。前記カルボン酸エステルは便宜上、その分子に存在するカルボン酸部分のいずれかをエステル化することによって形成される。プロドラッグは典型的には周知の方法（例えば、Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ６ｔｈ ｅｄ．（Ｄｏｎａｌｄ Ｊ．Ａｂｒａｈａｍ ｅｄ．，２００１，Ｗｉｌｅｙ）およびＤｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ ｅｄ．，１９８５，Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ Ｇｍｆｈ；それらの全体を参照により本明細書に組み込む）に記載された方法を用いて調製することができる。式Ｉの化合物の生体加水分解性部分は、１）前記化合物の生物学的活性には干渉しないが、ｉｎ ｖｉｖｏにおける有利な性質（例えば、取り込み、作用持続時間または作用の発現）を前記化合物に与えることができるか、２）生物学的に不活性な場合があるが、ｉｎ ｖｉｖｏにて生物学的に活性のある化合物に転換される。生体加水分解性エステルの例として、限定するものではないが、低級アルキルエステル、アルコキシアシルオキシエステル、アルキルアシルアミノアルキルエステルおよびコリンエステルが挙げられる。生体加水分解性アミドの例として、限定するものではないが、低級アルキルアミド、α‐アミノ酸アミド、アルコキシアシルアミドおよびアルキルアミノアルキルカルボニルアミドが挙げられる。生体加水分解性カルバミン酸塩の例には、限定するものではないが、低級アルキルアミン、置換エチレンジアミン、アミノ酸、ヒドロキシアルキルアミン、複素環アミンおよび複素環式芳香族アミンならびにポリエーテルアミンが挙げられる。

一実施形態において、本発明の化合物は、ｉｎ ｖｉｖｏ投与に適した生物学的に適合性のある形態で対象に投与するための医薬組成物として製剤化することができる。別の態様によれば、本発明は、薬学的に許容され得る希釈剤および／またはキャリアと混合して式Ｉの化合物を含む医薬組成物を提供する。薬学的に許容され得るキャリアは、前記組成物の他の成分と適合性があり、且つその被投与者に対して有害でないという意味において「許容され得る」。本明細書に用いた薬学的に許容され得るキャリアは、製剤処方用材料として使用され、且つ、鎮痛剤、緩衝剤、結合剤、錠剤分解物質、希釈剤、乳化剤、賦形剤、増量剤、流動促進剤、可溶化剤、安定化剤、懸濁剤、等張化剤、ビヒクル、および増粘剤として組み込まれる、種々の有機材料または無機材料から選択することができる。医薬品添加物（例えば、抗酸化剤、芳香剤、着色剤、香味改善剤、防腐剤および甘味料）を添加してもよい。許容され得る薬学的キャリアの例には、特に、カルボキシメチルセルロース、結晶セルロース、グリセリン、アラビアゴム、乳糖、ステアリン酸マグネシウム、メチルセルロース、粉末、生食水、アルギン酸ナトリウム、ショ糖、デンプン、滑石および水等が挙げられる。一実施形態において、用語「薬学的に許容され得る」とは、動物、さらに具体的にはヒトに使用するために、米国連邦または州政府の規制当局による認可を受けていることまたは米国薬局方または一般に承認されている他の薬局方に記載されていることを意味する。

界面活性剤（例えば、洗剤）は、前記製剤にも適している。界面活性剤の具体例として、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、酢酸ビニルとビニルピロリドンとの共重合体、ポリエチレングリコール、ベンジルアルコール、マンニトール、グリセロール、ソルビトール、またはソルビタンのポリオキシエチレン化エステル；レシチンまたはナトリウムカルボキシメチルセルロース；またはアクリル酸誘導体（例えば、メタクリレートおよびその他）、アニオン性界面活性剤（例えば、ステアリン酸アルカリ、特にステアリン酸ナトリウム、カリウムまたはアンモニウム）；ステアリン酸カルシウムまたはステアリン酸トリエタノールアミン；アルキル硫酸塩、特に、ラウリル硫酸ナトリウムおよびセチル硫酸ナトリウム；ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウムまたはジオクチルスルホコハク酸ナトリウム；または脂肪酸、特に、ココナッツオイル由来の脂肪酸、カチオン性界面活性剤、例えば、式Ｎ^＋Ｒ’Ｒ’’Ｒ’’’Ｒ’’’’Ｙ^‐の水溶性四級アンモニウム塩（式中、Ｒ基は、同一または異なる、場合によってヒドロキシル化された炭化水素基であり、Ｙ^‐は、強酸性アニオン（例えば、ハライドアニオン、硫酸アニオンおよびスルホン酸アニオン）である）；ここでは、臭化セチルトリメチルアンモニウムが、使用可能なカチオン性界面活性剤の一種であり、式Ｎ^＋Ｒ’Ｒ’’Ｒ’’’のアミン塩（式中、Ｒ基は、同一または異なる、場合によってヒドロキシル化された炭化水素基である）；ここでは、オクタデシルアミン塩酸塩が使用可能な前記カチオン性界面活性剤の一種であり、非イオン性界面活性剤（例えば、場合によってポリオキシエチレン化されているソルビタンエステル（特に、ポリソルベート８０（Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ８０）またはポリオキシエチレン化アルキルエーテル）；ステアリン酸ポリエチレングリコール、ヒマシ油のポリオキシエチレン化誘導体、ポリグリセロールエステル、ポリオキシエチレン化脂肪アルコール、ポリオキシエチレン化脂肪酸またはエチレンオキサイドとプロピレンオキサイドとの共重合体、両性界面活性剤（例えば、ベタインの置換ラウリル化合物）が挙げられる。

対象に投与する場合、式Ｉの化合物および薬学的に許容され得るキャリアは無菌性であり得る。適した薬学的キャリアは、賦形剤（例えば、デンプン、グルコース、乳糖、ショ糖、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、滑石、塩化ナトリウム、乾燥脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、ポリエチレングリコール３００、水、エタノール、ポリソルベート２０（ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ２０）等）が挙げられる。本組成物は必要に応じて、少量の湿潤剤または乳化剤、あるいはｐＨ緩衝剤を含んでもよい。

本発明の薬学的製剤は製薬分野では周知の方法によって調製される。場合によっては、１種以上の補助成分（例えば、緩衝剤、香味剤、界面活性剤等）も添加される。キャリアの選択は、前記化合物の溶解度および化学的性質、選択された投与経路および標準薬務によって決定される。

また、本発明の化合物および／または組成物は、経口投与、舌下投与または口腔投与などの既知の方法によってヒトまたは動物対象に投与される。一実施形態において、前記化合物および／または組成物は経口投与される。

経口投与の場合、本発明の化合物の製剤は、カプセル剤、錠剤、粉末剤、顆粒剤などの剤形で、あるいは懸濁剤または溶液として提供され得る。カプセル製剤は、ゼラチン、ソフトゲルまたは固体であり得る。錠剤およびカプセル製剤は、１以上のアジュバント、結合剤、希釈剤、錠剤分解物質、賦形剤、フィラーまたは潤滑剤（それぞれ当該分野で公知である）をさらに含んでもよい。これらの例には、糖質（例えば、乳糖またはショ糖）、無水リン酸水素カルシウム、コーンスターチ、マンニトール、キシリトール、セルロースまたはその誘導体、微結晶性セルロース、ゼラチン、ステアリン酸塩、二酸化ケイ素、滑石、デンプングリコール酸ナトリウム、アカシアゴム、香味剤、防腐剤、緩衝剤、錠剤分解物質および着色剤が挙げられる。経口投与される組成物は、薬学的に口当たりのよい調製物を提供するために、１種以上の任意の物質（例えば、甘味料（例えば、果糖、アスパルテームまたはサッカリン）；香味剤（例えば、ペパーミント、冬緑油、サクランボ）；着色剤；および防腐剤を含んでもよい。

実施形態によっては、前記組成物は、単位用量形態（例えば、錠剤、カプセル剤または単回用バイアル）である。適した単位用量（すなわち、治療有効量）は、選択された化合物の投与が示唆される状態の各々について適切にデザインされた臨床試験中に決定されてよもよく、当然、所望の臨床エンドポイントに応じて変わる。

本発明の方法によれば、本発明の化合物は、例えば対象におけるアルドース還元酵素活性に関連する症状を低減または軽減するために、治療有効量で対象に投与される。この量は、ｉｎ ｖｉｖｏで確立された滴定曲線ならびに本明細書に開示した方法およびアッセイなど公知の手順に基づいて当業者によって迅速に決定される。

一実施形態において、当該方法は、本発明の化合物の治療有効量を投与するステップを含む。実施形態によっては、前記治療有効量は、少なくとも約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約０．２５ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約０．３ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約０．７５ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約１ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約２ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約４ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約５ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約６ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約７ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約８ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約９ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約１０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約１５ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約２０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約２５ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約４０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約７５ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約１００ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約２００ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約２５０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約３００ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約３５０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約４００ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約４５０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約５００ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約５５０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約６００ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約６５０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約７００ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約７５０ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約８００ｍｇ／ｋｇ体重、少なくとも約９００ｍｇ／ｋｇ体重、または少なくとも約１０００ｍｇ／ｋｇ体重である。ここに記載の用量のいずれかは上限または下限の用量範囲を構成することがあり、他の用量と組み合わせて上限および下限を含んだ用量範囲を構成することもできることを認識されたい。

実施形態によっては、前記方法は、単回の投薬または投与（例えば、単回注射または沈着（ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ）として）を含む。別法では、前記方法は、１日１回、１日２回、１日３回または１日４回、約２〜約２８日間または約７〜約１０日間あるいは約７〜約１５日間以上、それを必要とする対象に投与するステップを含む。実施形態によっては、前記方法は慢性投与を含む。さらに他の実施形態において、前記方法は、数週間、数カ月、数年または数十年にわたって投与するステップを含む。また他の実施形態では、前記方法は、数週間にわたって投与するステップを含む。さらに他の実施形態では、前記方法は、数カ月にわたって投与するステップを含む。また他の実施形態では、前記方法は、数年間にわたって投与するステップを含む。さらに他の実施形態では、前記方法は、数十年間にわたって投与するステップを含む。

投与される用量は、周知の要因（例えば、活性成分の薬力学的特性、投与形態および投与経路；活性成分の投与時間；被投与者の年齢、性別、健康および体重；症状の性質および程度；併用治療の種類、治療頻度および所望される効果；および排泄率に応じて変化し得る。これらは投与量および／または投与計画を調整または漸増するために、当業者によっていずれも容易に決定され、使用され得る。

前記組成物に採用されるべき正確な用量は投与経路によっても左右され、投与実施者の判断および各患者の環境に従って決定されるべきである。本発明の具体的な実施形態において、本発明の化合物の適した経口投与量の範囲は一般に、約１ｍｇ／日〜約１０００ｍｇ／日である。一実施形態において、経口投与量は約１ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日である。一実施形態において、経口投与量は約１ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約１ｍｇ／日〜約２５０ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約１ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約５ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約５ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約１０ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約２０ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約３０ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約４０ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約５０ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約６０ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約７０ｍｇ／日である。別の実施形態において、経口投与量は約１００ｍｇ／日である。ここに記載の用量のいずれかは上限または下限の用量範囲を構成することがあり、他の用量と組み合わせて上限および下限を含んだ用量範囲を構成することもできることを認識されたい。

本発明の化合物および／または組成物のいずれも、前記化合物および／または組成物を含むキットとして提供され得る。したがって、一実施形態において、本発明の化合物および／または組成物はキットとして提供される。

当業者であれば、通常の実験を用いるだけで、本明細書に記載された本発明の具体的な実施形態との多くの同等物を認識するか、あるいは確認することができるであろう。そのような同等物は、本発明の範囲の範囲内にあることを意図している。

以下の非限定的な実施例によって本発明をさらに説明する。
実施例

本発明をさらに完全に理解するために実施例を以下に示す。以下の実施例は、本発明を製造および実施する例示的な形態を説明するためのものである。しかし、本発明の範囲はこれらの実施例に開示の具体的な実施形態に限定されものと解釈すべきではなく、実施例は単なる例示である。

実施例１：化合物Ａの調製
以下に概略的に示すように化合物Ａを調製した。

（Ｅ）／（Ｚ）‐ｔｅｒｔ‐ブチル２‐（７‐オキソフロ［３，４‐ｂ］ピラジン‐５（７Ｈ）‐イリデン）酢酸塩（化合物１）の調製

ＣＨＣｌ_３３００ｍＬ中の撹拌した５．０５ｇ（３３．６３ｍｍｏｌ）の市販の２，３‐ピラジンジカルボン酸無水物溶液に、１２．３４ｇ（３３．６３ｍｍｏｌ）の（ｔｅｒｔ‐ブトキシカルボニルメチレン）‐トリフェニルホスホランを加えた。得られた溶液を２日間で６２℃まで加熱した。この反応混合物を真空濃縮し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィにより残渣を精製し（薄層クロマトグラフィによってモニターした）、ヘキサン：酢酸エチル１：１（体積比）で溶離した。収集した画分を蒸発させ、分離されなかった幾何異性体（約１：１）の混合物として２．９９ｇ（収率３６％）の（Ｅ）／（Ｚ）‐ｔｅｒｔ‐ブチル２‐（７‐オキソフロ［３，４‐ｂ］ピラジン‐５（７Ｈ）‐イリデン）酢酸塩（化合物１）を得た：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０３（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．９６（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．９２（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．９０（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），１．５８（ｓ，１８Ｈ）。

ｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物２）の調製

エタノール６００ｍＬ中の撹拌した９．４２ｇ（３７．９９ｍｍｏｌ）の（Ｅ）／（Ｚ）‐ｔｅｒｔ‐ブチル２‐（７‐オキソフロ［３，４‐ｂ］ピラジン‐５（７Ｈ）‐イリデン）酢酸塩（化合物１）溶液に、１．２５ｍＬ（３９．９０ｍｍｏｌ）のヒドラジンを加えた。得られた溶液を３時間で８０℃にした。次いで、反応混合物を真空濃縮し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィにより残渣を精製し（薄層クロマトグラフィによってモニターした）、塩化メチレン：メタノール１９：１（体積比）で溶離した。収集した画分を蒸発させ、７．７８ｇ（収率７８％）のｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物２）を得た：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm１０．６７（ｂｒ ｓ，１Ｈ），９．０６（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．０４（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），４．０２（ｓ，２Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）。

ｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐d］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物４）の調製

ＤＭＦ３００ｍＬ中の撹拌した７．７８ｇ（２９．５８ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物２）溶液に、３．４９ｇ（３１．０６ｍｍｏｌ）のカリウムｔｅｒｔ‐ブトキシドを加えた。得られた反応混合物を室温で０．５時間撹拌した。次に、ＤＭＦ２０ｍＬ中の７．８０ｇ（３１．０６ｍｍｏｌ）の２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール（化合物３）溶液を加え、得られた反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、前記反応混合物を酢酸エチルと水との間で分離させ、層を分離し、酢酸エチル層を多量の水で洗浄した（３回）。有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィにより残渣を精製し（薄層クロマトグラフィによってモニターした）、ヘキサン：酢酸エチル３：１（体積比）〜ヘキサン：酢酸エチル１：１（体積比）の勾配で溶離した。次いで、得られた残渣を再びシリカゲルクロマトグラフィにかけ、塩化メチレン：メタノール４９：１（体積比）で溶離した。収集した画分を蒸発させ、６．８８ｇ（収率４８％）のｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物４）を得た：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０８（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．０４（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．２７（ｓ，１Ｈ），７．９４（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８９（ｓ，２Ｈ），４．０４（ｓ，２Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ）。

２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物Ａ）の調製

ＣＨ_２Ｃｌ_２４１ｍＬ中の撹拌した６．０ｇ（１２．５５ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ‐［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物４）溶液に８２ｍＬのＴＦＡを加えた。得られた反応混合物を室温で１時間撹拌した。次に、反応混合物を真空濃縮し、残渣を水中の酢酸エチルと１．０Ｍ ＫＯＨとの間で分離させた。この層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した（２回）。水層を濃塩酸でｐＨ約２に酸性化させ、次に酢酸エチルで抽出した（３回）。２回目の抽出からの有機物をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィにより残渣を精製し（薄層クロマトグラフィによってモニターした）、塩化メチレン：１％（体積比）の酢酸を含むメタノール１９：１（体積比）で溶離した。収集した画分を蒸発させ、２．３０ｇ（収率４４％）の２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物Ａ）を固体として得た：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ‐ｄ_６，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．２６（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．２２（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｓ，１Ｈ），８．３５（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７９（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８８（ｓ，２Ｈ），４．０３（ｓ，２Ｈ）；ｍ．ｐ．＝１９２〜１９３℃。

実施例２：化合物Ａの別の調製法

２‐（ヨードメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール（化合物５）の調製
アセトン８６ｍＬ中の撹拌した１０．７９ｇ（４２．９７ｍｍｏｌ）の２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール（化合物３）溶液に７．４０ｇ（４９．４２ｍｍｏｌ）のヨウ化ナトリウムを加えた。得られた反応混合物を１時間で５５℃まで加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、真空濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃと水との間に分割し、層を分離し、有機層を水で洗浄した（１回）。次いで、回収した有機層を１．０Ｍ Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３で処理し、１５分間激しく撹拌した。次いで、この層を分離し、有機層を順に水（１回）およびブライン（１回）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空濃縮し、１４．２８ｇ（粗収率９７％）の２‐（ヨードメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール（化合物５）を得、さらに精製せずに用いた：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm８．２６（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．８０（ｓ，２Ｈ）。

３‐（メトキシカルボニル）ピラジン‐２‐カルボン酸（化合物６）の調製

ＭｅＯＨ２８２ｍＬ中の１２．０ｇ（７９．９５ｍｍｏｌ）の２，３‐ピラジンジカルボン酸無水物溶液を一晩で６５℃まで加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、真空濃縮した。得られた残渣に水を加え、その後、固体ＮａＨＣＯ_３をゆっくりと添加した。ガス発生が収まった後、水層をＥｔＯＡｃ（１回）で抽出した。次いで、濃塩酸を加えることによって水層をｐＨ２に酸性化させた。水層をＥｔＯＡｃで抽出し（２回）２回目の抽出からの混ざり合った有機物をブラインで洗浄した（１回）。有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空濃縮し、１２．４１ｇ（粗収率８５％）の３‐（メトキシカルボニル）ピラジン‐２‐カルボン酸（化合物６）を白色粉末として得、さらに精製せずに用いた。：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ、３００ＭＨｚ）：δ_ppm８．９１（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．８９（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ）。

ｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物２）の調製

フラスコ＃１では、ＤＭＦ８８ｍＬ中の１２．２３ｇ（６７．２２ｍｍｏｌ）の３‐（メトキシカルボニル）ピラジン‐２‐カルボン酸（化合物６）溶液を１２．５３ｇ（７７．２８ｍｍｏｌ）のＣＤＩでゆっくりと処理した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。

別のフラスコ（フラスコ＃２）では、０℃に冷却した１４７ｍＬのＤＭＦに８．３２ｇ（８７．３９ｍｍｏｌ）のＭｇＣｌ_２を段階的に添加した。０℃で５分間撹拌した後、１３．５ｍＬ（８７．３９ｍｍｏｌ）のモノ‐ｔｅｒｔ‐ブチルマロン酸塩および３７．４ｍＬ（２６９ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを加え、得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。２時間後、フラスコ＃１の中身をフラスコ＃２に加え、併せた反応混合物を室温で一晩撹拌した。次に、反応混合物を０℃に冷却した１．０Ｍ ＨＣｌ水溶液に注ぎ、１５分間撹拌した。この混合物にＥｔ_２Ｏを加え、層を分離し、エーテル性の層を順に水（１回）、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１回）、水（１回）およびブライン（１回）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空濃縮し、粗メチル３‐（３‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシ）‐３‐オキソプロパノイル）ピラジン‐２‐カルボン酸塩（化合物７）を得、さらに精製せずに用いた。

粗メチル３‐（３‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシ）‐３‐オキソプロパノイル）ピラジン‐２‐カルボン酸塩（化合物７）を２５０ｍＬのＭｅＯＨに入れ、得られた溶液を０℃まで冷却した。次に、２．２ｍＬ（７０．５８ｍｍｏｌ）のヒドラジンを液滴状に加え、反応混合物を室温まで１時間加熱した。１時間後、反応混合物を真空濃縮し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィにより残渣を精製し（薄層クロマトグラフィによってモニターした）、塩化メチレン：メタノール１９：１（体積比）で溶離した。収集した画分を蒸発させ、黄色固体を得、ＥｔＯＡｃ中での再結晶化による精製を行って、１３．２３ｇ（収率７５％）のｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物２）を得た：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm１０．３（ｂｒ ｓ，１Ｈ），９．０６（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．０４（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），４．０２（ｓ，２Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）。

ｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物４）の調製

ＮＭＰ６７ｍＬ中の激しく撹拌した２．５ｇ（９．５４ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物２）溶液に、３．１２ｇ（９．０９ｍｍｏｌ）の２‐（ヨードメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール（化合物５）および１．５１ｇ（１０．９ｍｍｏｌ）のＫ_２ＣＯ_３。を加えた。得られた反応混合物を光から遮蔽し、室温で５時間撹拌した。次に、この反応混合物にＥｔ_２Ｏおよび水を加え、層を分離し、水層をＥｔ_２Ｏ（１回）で抽出した。次いで、混ざり合ったエーテル層を順にＨ_２Ｏ（１回）、１．０Ｍ ＫＯＨ（１回）、１．０Ｍ Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３（１回）、１．０Ｍ ＨＣｌ（１回）およびブライン（１回）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィにより残渣を精製し（薄層クロマトグラフィによってモニターした）、塩化メチレン：メタノール４９：１（体積比）で溶離した。収集した画分を蒸発させ、４．０３ｇ（収率９３％）のｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物４）を得た。

２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物Ａ）の調製
（化合物４の脱保護は別個の２つのフラスコで行ったが、検査および精製を行う前に、この２つの反応混合物を混ぜ合わせた）

一方のフラスコでは、３．０９ｇ（６．４９ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ‐ブチル２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物４）を３０ｍＬのギ酸（水中で８８％）および３．０ｍＬの水に溶解させた。別のフラスコでは、４．９５ｇ（１０．３７ｍｍｏｌ）の化合物４を４８ｍＬのギ酸（水中で８８％）および５．０ｍＬの水に溶解させた。反応混合物を室温で別個に２２時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、残渣を併せた。併せた残渣をＥｔ_２Ｏと飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液との間に分割し、層を分離し、水層をＥｔ_２Ｏで抽出した（１回）。濃塩酸を添加することにより水層をｐＨ２まで酸性化させ、ＥｔＯＡｃにより抽出した（３回）。第２の抽出からの有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィにより残渣を精製し（薄層クロマトグラフィによってモニターした）、塩化メチレン：１％ＡｃＯＨを含むメタノール９７：３（体積比）で溶離した。収集した画分を蒸発させ、５．２９ｇ（収率７５％）の２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物Ａ）を固体として得た。この固体をＭｅＯＨからの再結晶化によりさらに精製すると、オフホワイト色の固体が得られる：ｍ．ｐ．＝２１０〜２１１℃。

実施例３：化合物８の調製
以下に記載の化合物８を次の通り調製した：

上記と同じモル比を用い、化合物４について記載した調製法を繰り返したが、２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾールに代えて５‐クロロ‐２‐（クロロメチル）‐ベンゾ［ｄ］チアゾールを試薬として用いた。この場合、得られた最終産物はｔｅｒｔ‐ブチル２‐（７‐（（５‐クロロベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐d］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物８）であった（収率７５％）：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０８（ｓ，１Ｈ），９．０５（ｓ，１Ｈ），８．００（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），５．８７（ｓ，２Ｈ），４．０４（ｓ，２Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ）。

実施例４：化合物Ｂの調製
以下に示す化合物Ｂを次の通り調製した。

化合物８について記載した調製法を繰り返した。化合物４から化合物Ａを得るために実施例１に記載したスキームを実施したが、化合物４は化合物８に代えた。この場合、得られた最終産物は２‐（７‐（（５‐クロロベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物Ｂ）（収率５１％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ‐ｄ_６，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．２６（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．２１（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄｄ、Ｊ＝８．７，２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８３（ｓ，２Ｈ），４．０２（ｓ，２Ｈ）；ｍ．ｐ．＝１９６〜１９７℃。

実施例５：化合物９の調製

上記と同じモル比を用い、化合物４について記載した調製法を繰り返したが、２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾールに代えて２‐（ブロモメチル）‐５‐フルオロベンゾ［ｄ］チアゾールを試薬として用いた。この場合、得られた最終産物はｔｅｒｔ‐ブチル２‐（７‐（（５‐フルオロベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物９）（収率７３％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０９（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），９．０５（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７７（ｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｄｄ、Ｊ＝９．３Ｈｚ，２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，８．７Ｈｚ，２．７Ｈｚ，１Ｈ），５．８８（s，２Ｈ），４．０５（ｓ，２Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ）。

実施例６：化合物１０の調製

化合物４から化合物Ａを得るために実施例１に記載したスキームを実施したが、化合物４は化合物９に代えた。この場合、得られた最終産物は２‐（７‐（（５‐フリオロベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物１０）（収率６３％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ‐ｄ_６，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．２５（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．２１（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．１２（ｄｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ，５．７Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ、Ｊ＝９．９Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｄｄｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ，９．０Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８２（ｓ，２Ｈ），４．０２（ｓ，２Ｈ）。

実施例７：化合物１１の調製

上記と同じモル比を用い、化合物４について記載した調製法を繰り返したが、２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾールに代えて２‐（ブロモメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾールを試薬として用いた。この場合、得られた最終産物はｔｅｒｔ‐ブチル２‐（７‐（ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イルメチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物１１）（収率６３％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０７（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），９．０３（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０２（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｄｄｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｄｄｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．８９（ｓ，２Ｈ），４．０４（ｓ，２Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ）。

実施例８：化合物１２の調製

化合物４から化合物Ａを得るために実施例１に記載したスキームを用いたが、化合物４は化合物１１に代えた。この場合、得られた最終産物は２‐（７‐（ベンゾ［ｄ］チアゾール‐２‐イルメチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物１２）（収率６７％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ‐ｄ_６，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．２６（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．２２（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．０８（ｄｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ，１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ，１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄｄｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ，８．１Ｈｚ，１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｄｄｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．８３（ｓ，２Ｈ），４．０３（ｓ，２Ｈ）。

実施例９：化合物１３の調製

上記と同じモル比を用い、化合物４について記載した調製法を繰り返したが、２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾールに代えて２‐（クロロメチル）‐１‐メチル‐１Ｈ‐ベンゾ［ｄ］イミダゾールを試薬として用いた。この場合、得られた最終産物はｔｅｒｔ‐ブチル２‐（７‐（（１‐メチル‐１Ｈ‐ベンゾ［ｄ］イミダゾール‐２‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物１３）（収率５０％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０４（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．０２（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｄｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ，１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３５（ｄｄｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，７．２Ｈｚ，１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２９‐７．２２（ｍ，２Ｈ），５．７７（ｓ，２Ｈ），４．０５（ｓ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），１．４０（ｓ，９Ｈ）。

実施例１０：化合物１４の調製

化合物４から化合物Ａを得るために実施例１に記載したスキームを実施したが、化合物４は化合物１３に代えた。この場合、得られた最終産物は２‐（７‐（（１‐メチル‐１Ｈ‐ベンゾ［ｄ］イミダゾール‐２‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物１４）（収率８８％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ‐ｄ_６，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．２６（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．２１（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｄｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ，７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｄｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ，７．８Ｈｚ，１Ｈ），５．８１（ｓ，２Ｈ），４．００（ｓ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ）。

実施例１１：化合物１５の調製

ＣＨ_２Ｃｌ_２４．０ｍＬ中の０．１００ｇ（０．４２７ｍｍｏｌ）の２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）‐１Ｈ‐ベンゾ［ｄ］イミダゾール溶液に順に０．１０３ｇ（０．４７０ｍｍｏｌ）の（Ｂｏｃ）_２Ｏ、０．０１０ｇ（０．８５４μｍｏｌ）のＤＭＡＰおよび７１μＬ（０．５１２ｍｍｏｌ）のＴＥＡを加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物を真空濃縮し、残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液との間に分割した。層を分離し、有機物をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。粗残渣をさらに精製を行わずに用いた。

上記と同じモル比を用い、化合物４について記載した調製法を繰り返したが、２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾールに代えて上記からの粗残渣を試薬として用いた。この場合、得られた最終産物はｔｅｒｔ‐ブチル２‐（（８‐（２‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシ）‐２‐オキソエチル）‐５‐オキソピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐６（５Ｈ）‐イル）メチル）‐５‐（トリフルオロメチル）‐１Ｈ‐ベンゾ［ｄ］イミダゾール‐１‐カルボン酸塩（化合物１５）（収率４４％）の異性体の混合物であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０９‐９．０６（ｍ，４Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），８．０３（ｍ，１Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），７．６４‐７．５０（ｍ，３Ｈ），５．９６（ｓ，４Ｈ），４．０４（ｓ，４Ｈ），１．７６（ｓ，１８Ｈ），１．４２（ｓ，１８Ｈ）。

実施例１２：化合物１６の調製

化合物４から化合物Ａを得るための実施例１記載したスキームを実施したが、化合物４は化合物１５に代えた。この場合、得られた最終産物は２‐（８‐オキソ‐７‐（（５‐（トリフルオロメチル）‐１Ｈ‐ベンゾ［ｄ］イミダゾール‐２‐イル）メチル）‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物１６）（収率６８％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ‐ｄ_６，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．２６（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．２１（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ），７．６９（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．６７（ｓ，２Ｈ），４．００（ｓ，２Ｈ）。

実施例１３：化合物１７の調製

上記と同じモル比を用い、化合物４について記載した調製法を繰り返したが、２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾールに代えてｔｅｒｔ‐ブチル２‐（クロロメチル）‐１Ｈ‐ベンゾ［ｄ］イミダゾール‐１‐カルボン酸塩を試薬として用いた。この場合、得られた最終産物はｔｅｒｔ‐ブチル２‐（（８‐（２‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシ）‐２‐オキソエチル）‐５‐オキソピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐６（５Ｈ）‐イル）メチル）‐１Ｈ‐ベンゾ［ｄ］イミダゾール‐１‐カルボン酸（化合物１７）（収率８１％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０８（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．０４（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３３‐７．２２（ｍ，２Ｈ），５．９５（ｓ，２Ｈ），４．０４（ｓ，２Ｈ），１．７４（ｓ，９Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ）。

実施例１４：化合物１８の調製

化合物４から化合物Ａを得るための実施例１に記載のスキームを実施したが、化合物４は化合物１７に代えた。この場合、得られた最終産物は２‐（７‐（（１Ｈ‐ベンゾ［ｄ］イミダゾール‐２‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物１８）（収率６９％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ‐ｄ_６，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．２６（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．２１（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５６‐７．５３（ｍ，２Ｈ），７．２４‐７．２０（ｍ，２Ｈ），５．６６（ｓ，２Ｈ），４．００（ｓ，２Ｈ）。

実施例１５：化合物１９の調製

上記と同じモル比を用い、化合物４について記載した調製法を繰り返したが、２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾールに代えて３‐（ブロモメチル）‐５‐クロロベンゾ［ｂ］チオフェンを試薬として用いた。この場合、得られた最終産物はｔｅｒｔ‐ブチル２‐（７‐（（５‐クロロベンゾ［ｂ］チオフェン‐３‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物１９）（収率６９％）であった。：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０２（ｓ，１Ｈ），８．９８（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７３‐７．７０（ｍ，２Ｈ），７．３０‐７．２７（ｍ，１Ｈ），５．６３（ｓ，２Ｈ），４．０２（ｓ，２Ｈ），１．４０（ｓ，９Ｈ）。

実施例１６：化合物２０の調製

化合物４から化合物Ａを得るための実施例１に記載したスキームを実施したが、化合物４は化合物１９に代えた。この場合、得られた最終産物は２‐（７‐（（５‐クロロベンゾ［ｂ］チオフェン‐３‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物２０）（収率８０％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ‐ｄ_６，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．１９（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），９．１６（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７９（ｓ，１Ｈ），７．４１（ｄｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ，１．８Ｈｚ，１Ｈ），５．５９（ｓ，２Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ）。

実施例１７：化合物２１の調製

上記と同じモル比を用い、化合物４について記載した調製法を繰り返したが、２‐（クロロメチル）‐５‐（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾールに代えて５‐クロロ‐２‐（クロロメチル）ベンゾフランを試薬として用いた。この場合、得られた最終産物はｔｅｒｔ‐ブチル２‐（７‐（（５‐クロロベンゾフラン‐２‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐d］ピリダジン‐５‐イル）酢酸塩（化合物２１）（収率６０％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．０６（ｓ，１Ｈ），９．０２（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．１９（ｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，２．１Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），５．５９（ｓ，２Ｈ），４．０３（ｓ，２Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ）。

実施例１８：化合物２２の調製

化合物４から化合物Ａを得るための実施例１に記載したスキームを実施したが、化合物４は化合物２１に代えた。この場合、得られた最終産物は２‐（７‐（（５‐クロロベンゾフラン‐２‐イル）メチル）‐８‐オキソ‐７，８‐ジヒドロピラジノ［２，３‐ｄ］ピリダジン‐５‐イル）酢酸（化合物２２）（回収率７４％）であった：^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ‐ｄ_６，３００ＭＨｚ）：δ_ppm９．２２（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），９．１９（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５８（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３０（ｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ，２．１Ｈｚ，１Ｈ），６．９１（ｓ，１Ｈ），５．５６（ｓ，２Ｈ），３．９８（ｓ，２Ｈ）。

実施例１９：緩衝液中の化合物Ａ対ゾポルレスタットの可溶性試験
化合物Ａは、ＮａＣｌ１１８、ＫＣｌ４．７、ＣａＣｌ_２２．５、ＭｇＣｌ_２１．２、ＮａＨＣＯ_３２５、グルコース５、パルミチン酸０．４、ウシ血清アルブミン０．４（単位ｍＭ）およびインスリン７０ｍＵ／Ｌを含有するＫｒｅｂｓ‐Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ緩衝液に溶解したとき、ゾポルレスタット（以下に示す）よりも優れた溶解性を示した。

化合物ＡをＫｒｅｂｓ‐Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ緩衝液に加えると、沈殿または混濁することなく溶解した。ゾポルレスタットの場合、加熱してゾポルレスタットをＫｒｅｂｓ‐Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ緩衝液に溶解させた。これらの結果からは、ゾポルレスタットの溶解性よりも化合物Ａの溶解性が改善したことがわかる。

実施例２０：化合物Ａ対ゾポルレスタットの水への溶解度試験
化合物Ａおよびゾポルレスタットの各試料を別個に室温の水（ＭＱＷ ｕｌｔｒａ ｎａｎｏｐｕｒｅ）に入れ、３分間ボルテックスした。次いで、一定分量を緻密な綿栓（ピペットに設置）で濾過して残っている固体物を除去した。作製した化合物Ａおよびゾポルレスタットの個々の溶液の試みた濃度は、０．０５ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬ、５．０ｍｇ／ｍＬおよび１０．０ｍｇ／ｍＬであった。使用した水のｐＨは７．１であった（Ｏｒｉｏｎ ｐｅｒｐＨｅｃｔ ＬｏｇＲ Ｍｅｔｅｒ Ｍｏｄｅｌ＃３７０により電子的に測定）。

濾過した試料を二成分勾配（プログラム：５％‐１００％ＭｅＣＮ、３０分以上）でＬＣ‐ＭＳ（島津製作所ＬＣＭＳ‐２０１０Ａ液体クロマトグラフィ質量分析計、逆相カラム）にかけた。１回当たり各試料溶液５μＬを注入した。各トレースは、個々の親イオンの質量を観察した場合の波長２５４ｎｍで測定したピーク（化合物Ａでは、Ｔ_Ｒ約１４．０７０分；ゾポルレスタットでは、Ｔ_Ｒ約１６．６６６分）を含んでいた。

作製した各水溶液中の化合物Ａおよびゾポルレスタットに対応するピーク下の吸収面積（表１）を比較することによって、各化合物の溶解度曲線を生成した（図１）。測定データおよび生成した溶解度曲線から、化合物ＡはｐＨ７．１の水ではいずれの濃度でも室温ではゾポルレスタットよりも溶解度が有意に高いことがわかる。

実施例２１：化合物Ａ対ゾポルレスタットのｉｎ ｖｉｔｒｏ試験
Ｓａｔｏ，Ｓ．（１９９２）の「Ｒａｔ ｋｉｄｎｅｙ ａｌｄｏｓｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ａｎｄ ａｌｄｅｈｙｄｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ａｎｄ ｐｏｌｙｏｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔ ｋｉｄｎｅｙ」Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２６３，Ｆ７９９．Ｆ８０５（その全体を参照により本明細書に組み込む）に記載されているように、２５℃で４５分間ＮＡＤＰＨを減少させることに従って、化合物Ａおよびゾポルレスタットの還元酵素活性を分光光度法で試験した。

要約すると、反応混合物（全量１ｍｌ）は、ｐＨ６．２の０．１Ｍリン酸緩衝液中に０．１ｍＭ ＮＡＤＰＨ、１００ｍＭ の基質（ＤＬ‐グリセルアルデヒドまたはＬ‐キシロース）およびヒト組換えアルドース還元酵素（１００ｍＵ）を含んでいた。Ｄ‐グリセルアルデヒドおよびＮＡＤＰＨを用いて、ＡＲ阻害についてマイクロプレートアッセイで直接比較試験を行い、吸光度の変化を３４０ｎｍでモニターし、ＡＲＩについて０．１ｎＭ〜１００μＭの範囲の濃度で阻害率（％）を算出した（表２および図２）。データは平均±標準偏差として示し、別個の５回の操作の平均である。前記反応は基質（グリセルアルデヒドまたはキシロース）および同じ反応混合物を添加することにより開始し、脱イオン水によって置換された基質を対照として用いた。１酵素単位（Ｕ）を２５℃で１分間に１マイクロモルのＮＡＤＰＨを消費する活性として定義した。

結果から、化合物Ａの阻害能力はゾポルレスタットよりも有意に高いことがわかる。ｉｎ ｖｉｔｒｏでは化合物Ａはアルドース還元酵素に対してゾポルレスタットよりも活性が約１００倍高い。

実施例２２：化合物Ａのｅｘ ｖｉｖｏ試験．
いずれのラット試験もコロンビア大学動物実験委員会（ニューヨーク州）の認可を受けて実施した。本試験は米国国立衛生研究所（ＮＩＨ交付番号第８５‐２３号（１９９６年）（その全体を参照により本明細書に組み込む））発行の実験動物の管理と使用に関する指針（Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ）に従った。

Ｈｗａｎｇ ＹＣ，Ｓａｔｏ Ｓ，Ｔｓａｉ ＪＹ，Ｙａｎ Ｓ，Ｂａｋｒ Ｓ，Ｚｈａｎｇ Ｈ，Ｏａｔｅｓ ＰＪ，Ｒａｍａｓａｍｙ Ｒ（２００２）の「Ａｌｄｏｓｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｓ ａ ｋｅｙ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｏｆ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｉｓｃｈｅｍｉａ」，Ｆａｓｅｂ Ｊ．１６，２４３‐２４５およびＲａｍａｓａｍｙ Ｒ，Ｈｗａｎｇ ＹＣ，Ｗｈａｎｇ Ｊ，Ｂｅｒｇｍａｎｎ ＳＲ（２００１）の「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｈｅａｒｔｓ ｂｙ ｈｉｇｈ ｇｌｕｃｏｓｅ ｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ，ｉｎ ｐａｒｔ，ｂｙ ＧＬＵＴ‐４」Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．２８１，Ｈ２９０‐２９７（各々の全体を参照により本明細書に組み込む）に記載されているように、実験は同じ大きさの単離ラット心調製物を用いて行った。

雄ウィスター系ラット（３００．３５０ｇ、３〜４カ月齢）をケタミン（８０ｍｇ／ｋｇ）とキシラジン（１０ｍｇ／ｋｇ）との混合物により麻酔した。深麻酔が得られた後、心を迅速に切除し、氷冷生食水に入れ、１２．５ｍｌ／分の速度で動脈を介して非再循環モードで３７℃で逆行的に灌流した。ＮａＣｌ１１８、ＫＣｌ４．７、ＣａＣｌ_２２．５、ＭｇＣｌ_２１．２、ＮａＨＣＯ_３２５、グルコース５、パルミチン酸０．４、ウシ血清アルブミン０．４（単位ｍＭ）およびインスリン７０ｍＵ／Ｌを含む修正したＫｒｅｂｓ‐Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ緩衝液を用いて心を灌流した。灌流液を９５％Ｏ_２／５％ＣＯ_２の混合液で平衡化し（Ｐｏ_２＞６００ｍｍＨｇを維持し）た。ラテックス製の風船を左室に用いて最大左心室圧（ＬＶＤＰ）および左室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）を測定した。ＡＤＩレコーダーを用いてＬＶＤＰ、心拍数および冠灌流圧を継続的に監視した。全ラット心を２０分間の血流を完全に遮断した（ｚｅｒｏ ｆｌｏｗ）の虚血および６０分間の再灌流（I／Ｒ）に供した。

アルドース還元酵素阻害剤の使用を含む試験では、最終濃度１００ｎＭで化合物Ａ（以下に示す）を含む修正したＫｒｅｂｓ‐Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ緩衝液で心を虚血前に１０分間灌流し、灌流プロトコルを通して継続した。Ｈｗａｎｇ ＹＣ，Ｓａｔｏ Ｓ，Ｔｓａｉ ＪＹ，Ｙａｎ Ｓ，Ｂａｋｒ Ｓ，Ｚｈａｎｇ Ｈ，Ｏａｔｅｓ ＰＪ，Ｒａｍａｓａｍｙ Ｒ（２００２）の「Ａｌｄｏｓｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｓ ａ ｋｅｙ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｏｆ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｉｓｃｈｅｍｉａ」Ｆａｓｅｂ Ｊ．１６，２４３‐２４５およびＲａｍａｓａｍｙ Ｒ，Ｈｗａｎｇ ＹＣ，Ｗｈａｎｇ Ｊ，Ｂｅｒｇｍａｎｎ ＳＲ（２００１）の「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｈｅａｒｔｓ ｂｙ ｈｉｇｈ ｇｌｕｃｏｓｅ ｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ，ｉｎ ｐａｒｔ，ｂｙ ＧＬＵＴ‐４」Ａｍｅｒｉｃａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．２８１，Ｈ２９０‐２９７（各々の全体を参照により本明細書に組み込む）に記載されているように、心筋I／Ｒ損傷のマーカーであるクレアチンキナーゼ（ＣＫ）の放出を測定した

化合物Ａ
要約すると、単離した灌流後の心を虚血再灌流（Ｉ／Ｒ）障害に供し、心外傷および心機能の尺度を監視した。心虚血障害のマーカーである再灌流中のクレアチンキナーゼ（ＣＫ）放出量は治療していない心よりも化合物Ａで治療したラット心では低下した（表３Ａ）。Ｉ／Ｒ後、最大左心室圧（ＬＶＤＰ）は治療していない心と比較して化合物Ａで治療したラットの心では回復が大きかったことから（表３Ｂ）、化合物Ａで治療した心では機能回復が改善したことが示唆される。

本発明を上記実施形態において記載し説明してきたが、本開示内容は単なる例示として示したものであり、本発明の範囲および精神から逸脱しなければ、本発明の実施の詳細部には多数の変更が可能であり、これは添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることを理解されたい。開示の実施形態の特徴は、本発明の範囲および精神内であれば、種々の様式で組み合わせ可能であり、再構成可能である。

Claims (23)

1. 式（Ｉ）の化合物
   

   

   [式中、
   Ｒ^１は水素；
   Ｘ^１およびＸ^４はＮ；Ｘ^２はＣＲ^４；Ｘ^３はＣＲ^５；ＹはＣ＝Ｏ；
   Ｒ^４およびＲ^５は水素；
   Ｚは、
   

   

   Ａ^１はＳ；Ａ^２はＮ；Ｒ^７〜Ｒ^１０は独立して水素またはハロゲンである]、
   または薬学的に許容され得るその塩または溶媒和物。
2. Ｒ ^７ 、Ｒ ^８ 、およびＲ ¹⁰ が水素であり、Ｒ ^９ が水素またはハロゲンである、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ ^７ 、Ｒ ^８ 、およびＲ ¹⁰ が水素であり、Ｒ ^９ がハロゲンである、請求項１または２に記載の化合物。
4. 式
   

   

   によって表される請求項１または２に記載の化合物、または薬学的に許容され得るその塩または溶媒和物。
5. 式
   

   

   によって表される請求項１乃至３のいずれか１項に記載の化合物、または薬学的に許容され得るその塩または溶媒和物。
6. 式
   

   

   によって表される請求項１乃至３のいずれか１項に記載の化合物、または薬学的に許容され得るその塩または溶媒和物。
7. 請求項１乃至６のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に許容され得るキャリアを含む、医薬組成物。
8. 当該組成物の治療有効量を、それを必要とする対象に投与することにより、対象のアルドース還元酵素活性を阻害するための、請求項７に記載の医薬組成物。
9. 前記対象が糖尿病患者である、請求項８に記載の医薬組成物。
10. 前記対象がヒトである、請求項８または９に記載の医薬組成物。
11. 当該組成物の治療有効量を、それを必要とする対象に投与することにより、対象の疾患を治療するための、請求項７に記載の医薬組成物。
12. 前記疾患がアテローム性動脈硬化症である、請求項１１に記載の医薬組成物。
13. 前記疾患が糖尿病の合併症である、請求項１１に記載の医薬組成物。
14. 前記糖尿病の合併症が糖尿病性腎症である、請求項１３に記載の医薬組成物。
15. 前記糖尿病の合併症が糖尿病性神経障害である、請求項１３に記載の医薬組成物。
16. 前記糖尿病の合併症が糖尿病性網膜症である、請求項１３に記載の医薬組成物。
17. 前記疾患が循環器系疾患である、請求項１１に記載の医薬組成物。
18. 前記疾患が末梢血管疾患である、請求項１１に記載の医薬組成物。
19. 前記疾患が血管形成障害である、請求項１１に記載の医薬組成物。
20. 前記疾患が組織障害である、請求項１１に記載の医薬組成物。
21. 当該組成物の治療有効量を、それを必要とする対象の皮膚基質に塗布することにより、皮膚疾患を治療するか、皮膚の健康な老化を促進するための、請求項７に記載の医薬組成物。
22. 皮膚基質がヒト皮膚である、請求項２１に記載の医薬組成物。
23. 当該組成物の治療有効量を、それを必要とする対象に投与することにより、進行性心筋梗塞を有する対象を治療するための、請求項７に記載の医薬組成物。

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