JP6108944B2 - コルテキソロンの１７α−モノエステルおよび／またはその９，１１−デヒドロ誘導体を得るための酵素的方法 - Google Patents

Description

この出願は、特願２０１０−５１８６２８号の分割出願である。
Ｃ−１７α位のヒドロキシル基が短鎖脂肪族または芳香族の酸でエステル化されているコルテキソロン誘導体と、それに対応する９，１１−デヒドロ誘導体は、抗アンドロゲン性効果を有することが知られている。

特許文献１は、動物の「ｉｎ ｖｉｔｒｏ」および「ｉｎ ｖｉｖｏ」の両方で実証された高い抗アンドロゲン性生物活性に関し、コルテキソロン１７α−プロピオネートおよび９，１１−デヒドロ−コルテキソロン−１７−α−ブタノエートについて記述している。

上述の誘導体を得るための方法は、非特許文献１および特許文献２に記載されており、酸触媒（例えば、ＰＴＳＡ．Ｈ_２Ｏ）の存在下、シクロヘキサンやＤＭＦなどの非プロトン性溶媒の混合物として市場で入手可能なオルトエステルを使用した、中間体オルトエステルでのコルテキソロンの形質転換または９，１１−デヒドロコルテキソロンの形質転換を示している。このように得られた中間体オルトエステルは、そのままで、または不純物を溶解することが可能な溶媒、好ましくはアルコールに懸濁することにより精製して、使用することができる。その後に実施される、好ましくは酢酸緩衝液中でｐＨ４〜５に緩衝された含水アルコール溶液中での加水分解は、所望のモノエステルを提供する。

そのような合成を、以下のダイアグラム１に示す。

しかし、このように得られたモノエステルは、反応条件において不安定であり、その結果、取扱いおよび単離が難しかった（例えば、非特許文献２参照）。この不安定性は、とりわけ、１７位から２１位にエステル化アシル基が移行する二次反応に起因する。

このように、生物学的試験へと進めることができるよう化学的に純粋な上述のモノエステルを得るには、合成の終わりに、一般にカラムクロマトグラフィを用いて行われる精製プロセスを使用する必要があることが知られている。

さらに、特許文献２は、塩基性環境でのジエステルの加水分解が、初期の未反応生成物と平行して１７α，２１−ジオールと１７−および２１−モノエステルとの混合物が形成されることによって、どのように都合よくないのか記述している。

欧州特許第１４２１０９９号明細書 米国特許第３１５２１５４号明細書

Gardi et al. Gazz. Chim. It. 63, 43 1, 1963 R.Gardi et al Tetrahedron Letters, 448, 1961 B.Turner, Journal of American Chemical Society, 75, 3489, 1953

驚くべきことに、生体触媒としてカンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）からのリパーゼを使用したアルコーリシス反応は、コルテキソロンの１７αモノエステルまたはその９，１１−デヒドロ誘導体の調製中に有用に利用できることが発見されている。

事実、コルテキソロンの１７，２１−ジエステルまたはその９，１１−デヒドロ誘導体のそのような酵素的アルコーリシスは、以下のダイアグラム２に示されるように、２１位で選択的に生じ、１７位でそれに対応するモノエステルに移動することが発見されている。

本発明によれば、アルコーリシス条件での特殊な酵素反応の化学選択性は、文献に既に示されている方法に対し、１７α−モノエステルをより高い収率の工業的レベルで調製することに関し、新たな展望を開く。

本発明の反応の基質として提供されるジエステルは、従来技術により調製することができ、例えば、直鎖状カルボン酸を用いての、その無水物およびＰＴＳＡ一水和物の存在下でのコルチコステロイドのエステル化をもたらす非特許文献３に記述されている技術に従って、調製することができる。

コルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩのＤＲＸを示す図である。 コルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩのＤＳＣを示す図である。 コルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩのＩＲを示す図である。 コルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩのＤＲＸを示す図である。 コルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩのＤＳＣを示す図である。 コルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩのＩＲを示す図である。 ジクロロメタン／ｎ−ヘキサンから得られたコルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩのＤＲＸを示す図である。 ジクロロメタン／ｎ−ヘキサンから得られたコルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩのＤＳＣを示す図である。 ジクロロメタン／ｎ−ヘキサンから得られたコルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩのＩＲを示す図である。 アセトン／ｎ−ヘキサンから得られたコルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩのＤＲＸを示す図である。 アセトン／ｎ−ヘキサンから得られたコルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩのＤＳＣを示す図である。 アセトン／ｎ−ヘキサンから得られたコルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩのＩＲを示す図である。 エタノール／水から得られたコルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩのＤＲＸを示す図である。 エタノール／水から得られたコルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩのＤＳＣを示す図である。 エタノール／水から得られたコルテキソロン１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩのＩＲを示す図である。 ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＤＲＸを示す図である。 ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＤＳＣを示す図である。 ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＩＲを示す図である。 ジイソプロピルエーテルから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＤＲＸを示す図である。 ジイソプロピルエーテルから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＤＳＣを示す図である。 ジイソプロピルエーテルから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＩＲを示す図である。 ジクロロメタン／ｎ−ヘキサンから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＤＲＸを示す図である。 ジクロロメタン／ｎ−ヘキサンから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＤＳＣを示す図である。 ジクロロメタン／ｎ−ヘキサンから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＩＲを示す図である。 アセトン／ｎ−ヘキサンから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＤＲＸを示す図である。 アセトン／ｎ−ヘキサンから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＤＳＣを示す図である。 アセトン／ｎ−ヘキサンから得られた９−デヒドロコルテキソロン１７α−ブチレートの結晶形態ＩのＩＲを示す図である。 製剤（クリーム）中でのコルテキソロン１７α−プロピオネートのＤＲＸを示す図である。

したがって本発明の目的は、式Ｉの、コルテキソロンの１７αモノエステルとその９，１１−デヒドロ誘導体とを調製するための方法であって

（式中、Ｒは、１から１０個の炭素原子を含有する直鎖状または分岐鎖状の脂肪族または芳香族鎖である。）、
式ＩＩの化合物

（式中、Ｒは、上記にて示されたものと同じ意味を有する。）
と、
式ＩＩＩの化合物
Ｒ’ＯＨ （ＩＩＩ）
（式中、Ｒ’は１から１０個の炭素原子を含有する直鎖であり、好ましくはＣ₁〜Ｃ₈アルキルである。）
とを、カンジダからのリパーゼの存在下で反応させることを特徴とする方法である。

本発明によれば、Ｒは、好ましくはＣ₁〜Ｃ₄アルキルであり、さらにより好ましくは、ＣＨ₃、ＣＨ₃ＣＨ₂、ＣＨ₃（ＣＨ₂）₂、またはＣＨ₃（ＣＨ₂）₃の中から選択される。

上述の式ＩおよびＩＩにおける９、１１位での破線の記号は、以下に記述される式に示されるように、二重結合を存在しても（９，１１−デヒドロ誘導体）またはそのような位置に存在しなくてもよいことを意味する。

本発明の方法を触媒するのに使用されるカンジダからのリパーゼは、好ましくは、カンジダシリンドラセア（Ｃａｎｄｉｄａ ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）（ＣＣＬ）からのリパーゼと、Ｂ型カンジダアンタークチカ（Ｃａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）（ＣＡＬＢ）からのリパーゼとの間で選択される。

カンジダからのリパーゼ、特にカンジダシリンドラセアおよびカンジダアンタークチカからのリパーゼは、ほとんど不活性であることが証明されているブタ膵リパーゼ（ＰＰＬ）およびシュードモナスフルオレセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）（ＰＦＬ）とは対照的に、２１位のエステル官能基を選択的に加水分解可能であることが証明されている。

初期の基質に対して計算された前記酵素の量は、使用される酵素のタイプに応じて変えてもよい。特に前記酵素は、好ましくは、１００から１００００００Ｕ／ｍｍｏｌの範囲の量で；より好ましくは、ＣＣＬの場合は１０００から１００００００Ｕ／ｍｍｏｌの範囲、ＣＡＬＢの場合は１００から１０００００の量で使用される。さらにより好ましくは、前記酵素は、ＣＣＬの場合に約６００００Ｕ／ｍｍｏｌの量で、ＣＡＬＢの場合に約５０００Ｕ／ｍｍｏｌの量で存在する。

さらに、経済的／工業的な観点から、触媒活性を失うことなくそのような酵素を数サイクルにわたって再利用する可能性が、明らかにされた。

式ＩＩの初期ジエステルの濃度は、好ましくは約０．０１から０．１５モルの範囲内であり、より好ましくは約０．０２５モルである。

本発明の方法は、好ましくは有機溶媒、より好ましくは非プロトン性有機溶媒の存在下で行われる。

次いで前記溶媒は、好ましくはトルエン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、および／またはクロロホルムの中から選択される。

本発明によるＲ’ＯＨアルコールは、好ましくはメタノール、エタノール、ブタノール、および／またはオクタノールから選択される。

前記アルコールは、好ましくは、初期基質１モル当たり約０．５から約５０モルの範囲の量で、より好ましくは基質１モル当たり５モルの量で存在する。

本発明による方法は、好ましくは、式ＩＩの初期ジエステルが溶解するまで、常に攪拌した状態で行われる。その後、使用された酵素を、濾過、好ましくはセライトでの濾過により除去し、低圧下での溶媒蒸発によって式Ｉのモノエステルが得られる。

式ＩＩの化合物がコルテキソロンの１７α，２１−ジエステルである場合、この方法の反応時間は、通常２０から１５０時間の範囲内であり、好ましくは２４から７２時間の範囲内であり、反応温度は、好ましくは約１０から４８℃の範囲内であり、より好ましくは２０から３２℃の範囲内である。

以下の表１は、本発明による、反応条件および酵素的アルコーリシスの結果についてまとめたものである。

本発明による酵素的方法は、コルテキソロンの１７α−２１−ジエステルまたは９，１１−デヒドロ−コルテキソロンを変換する場合だけでなくその他の場合にも有用であることが証明され；特に、９，１１−デヒドロコルテキソロンの１７α−ブタノエートは、好ましくはＣＣＬ酵素とメタノールをアシル基のアクセプターアルコールとして使用して、対応するジブタノエートから出発することにより得られた。

初期９，１１−デヒドロ誘導体の濃度は、好ましくは０．０１から０．１５モルの範囲内であり、より好ましくは０．０２５モルである。

この場合、反応時間は、好ましくは４５から５５時間の範囲内であり、好ましくは５３時間である。

またこの場合、反応温度は、好ましくは１０から４８℃の範囲内であり、より好ましくは２０から３２℃の範囲内である。

以下の表２は、９，１１−デヒドロコルテキソロンの１７α，２１−ジブタノエートの酵素的アルコーリシスの反応条件と、これに関連したそれぞれのモノエステルの最終的な収率とを示す。

さらに、本発明による方法は、有機溶媒、水、緩衝水溶液、および／またはこれらの混合物から結晶化する最終ステップを、任意選択で含んでもよい。

前記結晶化ステップの有機溶媒は、好ましくは、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒブチルメチルエーテル、ジクロロメタン、酢酸エチル、ヘキサン、アセトン、エタノール、水、またはこれらの任意の割合の混合物の中から選択される。

このように本発明のその他の目的は、結晶形態の、コルテキソロンの１７α−モノエステルおよびそれに対応する９，１１−デヒドロ誘導体である。

詳細には、本発明の目的は、結晶形態の、コルテキソロン１７α−プロピオネートおよび９，１１−コルテキソロン−１７α−ブタノエートである。

１７α−プロピオネートの結晶形態Ｉは、好ましくはｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルからの結晶化によって得られる。前記溶媒中の１７α−プロピオネートの濃度は、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル９〜１１ｍｌ中、０．９から１．１ｇの範囲内であり、好ましくは１０ｍｌ中１ｇである。前記結晶形態Ｉは、約１３３から１３５℃の範囲内の融点、および／または図１に示されるＤＲＸ、および／または図２に示されるＤＳＣ、および／または図３に示されるＩＲを特徴とする。

１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩは、好ましくはジイソプロピルエーテルからの結晶化によって得られる。前記溶媒中の濃度は、好ましくは、ジイソプロピルエーテル５４〜６６ｍｌ中、０．９から１．１ｇの範囲内である。

前記結晶形態ＩＩは、約１１４から１１６℃の範囲内の融点、および／または図４に示されるＤＲＸ、および／または図５に示されるＤＳＣ、および／または図６に示されるＩＲを特徴とする。

１７α−プロピオネートの結晶形態ＩＩＩは、好ましくは約１／３０の比のジクロロメタン／ｎ−ヘキサン、好ましくは約１／８の比のアセトン／ｎ−ヘキサン、または好ましくは約１／２の比のエタノール／水の混合物からの結晶化によって得られることが好ましい。

前記結晶形態ＩＩＩの融点は、決定することができなかった。

ジクロロメタン／ｎ−ヘキサンから得られた結晶形態ＩＩＩは、図７に示されるＤＲＸおよび／または図８に示されるＤＳＣおよび／または図９に示されるＩＲを有する。

アセトン／ｎ−ヘキサンから得られた結晶形態ＩＩＩは、図１０に示されるＤＲＸおよび／または図１１に示されるＤＳＣおよび／または図１２に示されるＩＲを有する。

エタノール／水から得られた結晶形態ＩＩＩは、図１３に示されるＤＲＸおよび／または図１４に示されるＤＳＣおよび／または図１５に示されるＩＲを有する。

９，１１−デヒドロ−１７α−コルテキソロンの結晶形態Ｉは、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ジイソプロピルエーエル、好ましくは１／１５の比のジクロロメタン／ｎ−ヘキサン混合物、または好ましくは１／５の比のアセトン／ｎ−ヘキサン混合物から得られることが好ましい。

ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルから得られた結晶形態Ｉは、図１６に示されるＤＲＸおよび／または図１７に示されるＤＳＣおよび／または図１８に示されるＩＲを有する。

ジイソプロピルエーテルから得られた結晶形態Ｉは、図１９に示されるＤＲＸおよび／または図２０に示されるＤＳＣおよび／または図２１に示されるＩＲを有する。

ジクロロメタン／ｎ−ヘキサンから得られた結晶形態Ｉは、図２２に示されるＤＲＸおよび／または図２３に示されるＤＳＣおよび／または図２４に示されるＩＲを有する。

アセトン／ｎ−ヘキサンから得られた結晶形態Ｉは、図２５に示されるＤＲＸおよび／または図２６に示されるＤＳＣおよび／または図２７に示されるＩＲを有する。

形態ＩＩＩの１７α−プロピオネートに関するＤＲＸダイアグラムおよび形態Ｉの９，１１−デヒドロ誘導体に関するＤＲＸダイアグラムで観察可能な相違は、これらの相違が結晶の配向度の低下という現象に起因するという点から、関連はないと考えられる。

同様に、ＩＲおよびＤＳＣで観察される相違は、これらの相違がサンプル調製のときおよび／または分析を行うときのばらつきに起因するという点から、関連はないと考えられる。

表３は、いくつかの同定パラメータ、および上述の結晶形態を得るための条件を示す。

結晶化水分子の存在を特徴とし、かつ溶媒和物形態ＩＶと定義された、１７α−プロピオネートの擬似多型結晶形態の存在が、決定された。

１７α−プロピオネートの溶媒和物結晶形態ＩＶは、一般に１／２から２／１の範囲内にある比の有機／水溶媒混合物から、好ましくは１／１の比にあるプロピレングリコール／水から、または１／１の比にあるポリエチレングリコール／水からの結晶化によって得られることが好ましい。

プロピレングリコール／水 １／１から得られた溶媒和物結晶形態ＩＶは、図２８に示されるＤＲＸを有する。

溶媒和物形態の１７α−プロピオネートの結晶化は、最終的な医薬品形態の配合プロセス中に行ってもよく、この場合、医薬品形態の製造プロセスは、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、または短鎖脂肪族アルコールなどの有機溶媒に活性成分を溶解し、その後、活性成分の溶解に使用された有機溶媒に対して１／３から３／１の比で、水を添加するものである。

さらに本発明の目的は、少なくとも１種の生理学的に許容される賦形剤と共に上述の結晶形態の少なくとも１種を含有する医薬組成物である。

本発明の組成物は、固体、半固体、ペースト状、または液体形態のものにすることができ、好ましくは、どちらもすぐに使用することができまたは使用前に元に戻すことができる、錠剤、カプセル、粉末、ペレット、懸濁液、エマルジョン、溶液、クリーム、ゲル、軟膏、ローション、またはペーストの中から選択される。

最後に本発明の目的は、泌尿生殖器系、内分泌系、皮膚、および／または皮膚付属器に影響を及ぼす病状を治療する医薬品を調製するための、上述の結晶形態および／または溶媒和物の少なくとも１種の、好ましくは人間のための使用である。

具体的には本発明の目的は、泌尿生殖器系、内分泌系、皮膚、および／または皮膚付属器に影響を及ぼす病状を治療する医薬品を調製するための、溶液および結晶分散体状態にある、なお後者の場合は有機溶媒または有機溶媒の混合物中に結晶活性成分を含有する溶液に、水または水溶液を添加して同活性成分を沈殿させることによって、おそらくは即座に得られる状態にある、溶媒和物形態Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、またはＩＶの中から選択された結晶形態、好ましくは溶媒和物形態ＩＶ中に、０．１から２重量％の範囲内、好ましくは０．２から１％の範囲内でコルテキソロン−１７α−プロピオネートを含有する、例えばクリーム、ゲル、軟膏、エマルジョン、または分散体などの、局所施用のための液体または半液体製剤の使用である。

さらに本発明の目的は、泌尿生殖器系、内分泌系、皮膚、および／または皮膚付属器に影響を及ぼす病状を治療するための、溶媒和物形態ＩまたはＩＶの中から選択された結晶形態にある、全製剤が２００ｍｇの最終重量を有する場合には前記全製剤に対して４から６５重量％の範囲内、好ましくは５から５０％の範囲内、または前記全製剤が５００ｍｇの最終重量を有する場合には１から２５重量％の範囲内、好ましくは２から２０％の範囲内の投薬量で９，１１−デヒドロ−コルテキソロン−１７α−ブタノエートを含有する、例えば錠剤、カプセル、顆粒、または粉末などの経口または全身投与のための液体または固体製剤の使用である。

本発明による前記病状は、好ましくは、にきび、脂漏性皮膚炎、男性ホルモン性脱毛症、多毛症、良性前立腺過形成、前立腺癌の諸形態、男性避妊、多嚢胞性卵巣症候群、攻撃的または異常な性行動の制御、および性的早熟症候群の中から選択される。

以下の実施例は、本発明をいかなる方法によっても制限することなく、本発明の理解を高めるために含まれる。

コルテキソロン１７α，２１−ジプロピオネートのＣＣＬによるアルコーリシス
ブタノール（０．４ｇ、５．４５ｍｍｏｌ）およびＣＣＬ（１７．４ｇ、３．８６Ｕ／ｍｇ、ＦＬＵＫＡ）を、コルテキソロン−１７α，２１−ジプロピオネート（０．５ｇ、１．０９ｍｍｏｌ）をトルエン（５０ｍｌ）に溶かした溶液に添加する。混合物を攪拌しながら３０℃に維持し、その後、初期材料が溶解するまで（２４時間）反応をＴＬＣ（トルエン／酢酸エチル ６／４）中で進行させる。セライト層を使用した濾過を用いて、酵素を除去する。低圧下で蒸発させた後、コルテキソロン１７α−プロピオネート（０．４３７、９９％）を回収する。ジイソプロピルエーテルからの結晶化により、ＨＰＬＣで純度＞９９％の生成物が得られる。

¹H-NMR (500MHz, CDCl₃) 関連シグナルδ(ppm) 5.78 (br s, 1H, H-4)、4.32 (dd, 1H, H-21)、4.25 (dd, 1H, H-21)、1.22 (s, 3H, CH₃-19)、1.17 (t, 3H, CH₃)、0.72 (s, 3H, CH₃-18)。P.f. 114℃

実施例１に記述される方法により、コルテキソロン−１７α−ブタノエートを調製する。

¹H-NMR 関連シグナルδ(ppm) 5.78 (br s, 1H, H-4)、4.32 (dd, 1H, H-21)、4.26 (dd, 1H, H-21)、1.23 (s, 3H, CH₃-19)、0.97 (t, 3H, CH₃)、0.73 (s, 3H, CH₃-18)。P.F. 134〜136℃。

実施例に記述される方法により、コルテキソロン−１７α−バレレートを調製する。

¹H-NMR 関連シグナルδ(ppm) 5.77 (br s, 1H, H-4)、4.32 (dd, 1H, H-21)、4.26 (dd, 1H, H-21)、1.22 (s, 3H, CH₃-19)、0.95 (t, 3H, CH₃)、0.72 (s, 3H, CH₃-18)。P.f. 114℃ (ジイソプロピルエーテル)。

実施例に記述される方法により、９，１１−デヒドロ−コルテキソロン−１７α−ブタノエートを調製する。

¹H-NMR 関連シグナルδ(ppm) 5.77 (br s, 1H, H-4)、5.54 (m, 1H, H-9)、4.29 (dd, 1H, H-21)、4.24 (dd, 1H, H-21)、1.32 (s, 3H, CH₃-19)、0.94 (t, 3H, CH₃)、0.68 (s, 3H, CH₃-18)。P.f. 135〜136℃ (アセトン／ヘキサン)。

コルテキソロン−１７α−，２１−ジプロピオネートのＣＡＬＢによるアルコーリシス
コルテキソロン，１７α，２−ジプロピオネート（０．５ｇ、１．０９ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（４０ｍｌ）に溶解し、ＣＡＬＢ（２．３ｇ、２．５Ｕ／ｍｇ Ｆｌｕｋａ）およびオクタノール（０．８７５ｍｌ）を添加する。混合物を攪拌しながら３０℃に、７６時間維持する。濾紙を使用した濾過を用いて酵素を除去する。溶媒が蒸発したら、固体（０．４７５８）を回収するが、この固体は、分析¹Ｈ−ＮＭＲにより、９１％のコルテキソロン−１７α−プロピオネートで構成されたと見なされるものである。

結晶化
溶媒（ｔ−ブチルメチルエーテルまたはジイソプロピルエーテル）を、表３に示される比によりサンプルに添加する。混合物を、攪拌しながらサンプルが完全に溶解するまで、溶媒の沸騰温度に加熱する。室温に冷却し、攪拌しながら６時間、この温度のままにする。ブフナー漏斗を使用して濾過し、低圧下で得られた固体を室温で１５時間維持し、次いで４０℃で５時間維持する。

沈殿
サンプルを、表３に示される比に従って、適切な溶媒（ジクロロメタン、アセトン、酢酸エチル、またはエタノール）に溶解し、次いで溶媒、ヘキサン、または水を、表３に示される比に従って添加し、混合物を、攪拌しながら室温で維持する。ブフナー漏斗を使用した濾過によって沈殿物を回収し、実施例６の場合と同様に乾燥する。

画定された結晶形態で医薬品を含有する医薬品形態を得る。

２％のセチルアルコール、１６％のモノステアリン酸グリセリル、１０％のワセリン油、１３％のプロピレングリコール、１０％の低重合度のポリエチレングリコール、１．５％のポリソルベート８０、および４７．５％の精製水を含有する液状クリームを調製する。結晶形態ＩＩＩのコルテキソロン１７α−プロピオネート１ｇを、このクリーム１００ｇに添加し、混合物に均質性が得られるまで、混合物をタービン攪拌器によって均質化する。製剤ビヒクルに溶解した活性成分の画分と、結晶形態ＩＩＩの結晶として存在する溶解していない活性成分の画分とを含有するクリームが得られる。この調製物は、Ｆｒａｎｚセルでの皮膚浸透試験用の製剤ビヒクルとして使用するのに適しており、０．０４から０．０３ｃｍ／時の範囲内の浸透係数が、この調製物に関して観察される。

生薬配合手順中に溶媒を代え、溶媒和物形態ＩＶの医薬品を含有する医薬品形態を得る。

結晶形態ＩＩＩのコルテキソロン１７α−プロピオネート１００ｇを、室温で攪拌しながらプロピレングリコール２５００ｇに溶解する。これとは別に、約７０℃まで温度を上昇させるターボ乳化器（ｔｕｒｂｏｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒ）を使用することによって、セチルアルコール２５０ｇ、モノステアリン酸グリセリル１５００ｇ、液体パラフィン１０００ｇ、混合トコフェロール５ｇ、ポリソルベート８０ １００ｇ、および水４６５０ｇを含むエマルジョンを調製する。エマルジョンを約３０℃まで冷却した後、攪拌しながらかつ陰圧下で、コルテキソロン１７α−プロピオネートのプロピレングリコール溶液を添加する。エマルジョン化したクリームを、冷却剤を循環させることによって温度が確実に低く保持した状態で、均質性が得られるまで攪拌しながら維持する。

クリームは、活性成分が主に水性の製剤に添加されたときに、その活性成分を含有するグリコール溶液から活性成分そのものの沈殿によって形成された、溶媒和物結晶形態ＩＶの活性成分で構成される、分散した結晶画分を含有する。クリーム中に存在する結晶形態のＤＲＸスペクトルを、図２８に示す。

Claims (23)

1. 結晶形態Ｉのコルテキソロン−１７α−プロピオネートの結晶を調製するための方法であって、
   前記結晶形態Ｉは、図１に示されるＤＲＸスペクトル、および図２に示されるＤＳＣスペクトル、および図３に示されるＩＲスペクトルによって特徴付けられるものであり、
   前記方法が、
   カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）からのリパーゼの存在下で、式ＩＩの化合物を
   

   

   式ＩＩＩの化合物
   Ｒ’ＯＨ （ＩＩＩ）
   （式中、Ｒは、ＣＨ₃−ＣＨ₂であり、Ｒ’は１〜１０個の炭素原子を含有する直鎖状脂肪族鎖である。）
   と反応させることによって前記コルテキソロン−１７α−プロピオネートを調製する工程と、
   前記コルテキソロン−１７α−プロピオネートをｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルから結晶化して、結晶形態Ｉのコルテキソロン−１７α−プロピオネートの結晶を得る工程を含むことを特徴とする方法。
2. コルテキソロン−１７α−プロピオネートの結晶化が、９から１１ｍｌのｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル中、０．９から１１ｇのコルテキソロン−１７α−プロピオネートの濃度で行われることを特徴とする請求項１に記載の方法。
3. 前記Ｒ’が１〜８個の炭素原子を含有する脂肪族鎖であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
4. 前記式ＩＩの化合物を、有機溶媒の存在下で反応することを特徴とする請求項１に記載の方法。
5. 前記有機溶媒が非プロトン性であることを特徴とする請求項４に記載の方法。
6. 前記非プロトン性溶媒が、トルエン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン及び／又はクロロホルムの中から選択されることを特徴とする請求項５に記載の方法。
7. 前記式ＩＩの化合物が、０．０１から０．１５モルの範囲の量で存在することを特徴とする請求項１に記載の方法。
8. 前記式ＩＩの化合物が、０．０２５モルの量で存在することを特徴とする請求項７に記載の方法。
9. 前記式ＩＩＩの化合物が、メタノール、エタノール、ブタノール及び／又はオクタノールの中から選択されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
10. 前記式ＩＩＩの化合物が、式ＩＩの化合物のモル当たり、０．５から５０モルまで変化する量で存在することを特徴とする請求項１に記載の方法。
11. 前記式ＩＩＩの化合物が、式ＩＩの化合物のモル当たり、５モルの量で存在することを特徴とする請求項１０に記載の方法。
12. カンジダからの前記リパーゼが、カンジダシリンドラセア（Ｃａｎｄｉｄａ ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）（ＣＣＬ）からのリパーゼまたはＢ型カンジダアンタークチカ（Ｃａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）（ＣＡＬＢ）からのリパーゼであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
13. カンジダからの前記リパーゼが、１００から１００００００Ｕ／ｍｍｏｌまで変化する量で存在することを特徴とする請求項１に記載の方法。
14. カンジダからの前記リパーゼは、カンジダシリンドラセア（Ｃａｎｄｉｄａ ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）（ＣＣＬ）からのリパーゼに対しては１０００から１００００００Ｕ／ｍｍｏｌの範囲の量で存在し、Ｂ型カンジダアンタークチカ（Ｃａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）（ＣＡＬＢ）からのリパーゼに対しては１００から１０００００Ｕ／ｍｍｏｌの範囲で存在することを特徴とする請求項１３に記載の方法。
15. 式ＩＩの化合物と式ＩＩＩの化合物の反応が１０から４８℃の範囲の温度で行われることを特徴とする請求項１に記載の方法。
16. 前記反応温度が２０から３２℃の範囲であることを特徴とする請求項１５に記載の方法。
17. 図１に示されるＤＲＸスペクトル、および図２に示されるＤＳＣスペクトル、および図３に示されるＩＲスペクトルによって特徴付けられる結晶形態Ｉのコルテキソロン−１７α−プロピオネートの結晶。
18. １３３〜１３５℃の範囲の融点によって更に特徴付けられる請求項１７に記載の結晶形態Ｉのコルテキソロン−１７α−プロピオネートの結晶。
19. 請求項１７若しくは１８に記載の結晶形態Ｉのコルテキソロン−１７α−プロピオネートの結晶を、少なくとも１種の生理学的に許容される賦形剤と共に含有することを特徴とする医薬組成物。
20. 固体形態、半固体形態又はペースト状形態であることを特徴とする請求項１９に記載の医薬組成物。
21. 錠剤、カプセル、粉末、ペレット、懸濁物、分散物、エマルジョン、クリーム、ゲル、軟膏又はペーストの形態であることを特徴とする請求項１９に記載の医薬組成物。
22. 泌尿生殖器系、内分泌系、皮膚、および／または皮膚付属器に影響を及ぼす病状の治療に使用するための、請求項１９に記載の医薬組成物。
23. にきび、脂漏性皮膚炎、男性ホルモン性脱毛症、多毛症、良性前立腺過形成、前立腺癌の諸形態、男性避妊、多嚢胞性卵巣症候群、性的早熟症候群、および攻撃的または異常な性行動の制御の治療に使用するための、請求項１９に記載の医薬組成物。

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