JP6017110B2 - 粒子含有表面とその関連方法 - Google Patents
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Description
従って、表面に強固に且つ効果的に付着した表面保持粒子を有する複合構造に関する技術の必要性がある。表面上にそのような粒子を備え、構造外環境にさらされない部分には不必要な粒子を含まない構造の価値は高まるものと考えられる。さらにそのような構造の作製およびその他の関連デバイスが同時に必要とされる。
この出願の発明に関連する先行技術文献情報としては、以下のものがある(国際出願日以降国際段階で引用された文献及び他国に国内移行した際に引用された文献を含む)。
【先行技術文献】
【特許文献】
【特許文献2】 特開2007−039392号公報
【特許文献3】 韓国特許第10−1997−0701751号公報
【特許文献4】 韓国特許第10−2004−0012298号公報
画像化
本出願に記載されたようなプロセスは、MRI、X線イメージング、コンピュータ断層撮影(CT)、超音波、または他の画像手段における信号/雑音比を上昇させ得る、高コントラスト剤を有する任意のポリマー含有物の画質増強に有用である。処理を行うポリマーは手術中に使用される材料である医療デバイス、または画像化を必要とし身体に入る可能性のある任意のポリマー含有物であっても良い。
本発明はさらに癌、遺伝子疾患、その他の病気を検出するための診断的バイオセンサーを可能にする。例えば、特定のDNA、RNA、または他の核酸配列、または抗原および他の生体分子を検出するために、相補的核酸配列または対応する抗体がポリマー担体上に特定され、検出器側と抗体間が合致した場合には識別可能な変化が生じる。例えば、金ナノ粒子などの金属ナノ粒子が本請求方法に基づいてプラスチック担体に埋め込まれ、単鎖DNAまたは抗体がチオール基または他の表面接着法を介して当該ナノ粒子に結合する場合がある。さらに粒子は、埋め込まれる前に既に当該粒子上にある生体分子結合部位によっても埋め込まれる。
本明細書の別項に記載したように、カーボンナノチューブ、ナノワイヤー、およびナノ粒子は、ワイヤー、トランジスタ、レジスタ、コンデンサ、メモリスタ、および電子回路またはデバイスに関する他の成分(本プロセスによる発光ダイオード(LED)など)の製造に用いられる粒子の種類であるが、本明細書に記載された粒子はいずれも適用可能である。
多くのプラスチックで製品表面への電荷の蓄積を抑制するために帯電防止用添加剤が用いられている。プラスチックは通常本質的に絶縁性であるため、そのような電荷を蓄積する傾向がある。帯電防止剤はほこりやごみの集積を減らすことができ、家具、床、包装、家庭用電化製品、文房具などの製品に火花が生じる危険性を低下させる。いかなる理論運用に束縛されるものでもないが、これらの添加剤は処理された製品の総合的抵抗性を低下させることによって機能する。
この特許出願に記載されたプロセスを用いて多くの異なった方法によりRFIDタグを作製することができる。これらのタグは無線周波数に限らず、マイクロ波、赤外線、X線など、より高い(低い)周波数でも使用可能である。
本特許出願に記載されているプロセスを用いて認証またはトラッキング用のユニークな磁気IDを作製することができる。本特許出願に記載された磁性、常磁性、反磁性、強磁性、反強磁性、強磁性、メタ磁性、超常磁性粒子、および他の種類の粒子に関するプロセスを用いることにより、ユニークで複製不能な磁気サインを作製することができる。そのようなプロセスで埋め込まれた粒子は不規則な方向を向き不規則に分布しているため、各適用の構成はそれぞれ異なっている。
ボトル、容器、タンク、パイプ、ハイドレーションブラッダー、ハイドレーションパックのバルブおよびチューブ、フィルター、バルブ、および蛇口など水に接するポリマー表面は抗菌粒子に関して記載したプロセスによって処理可能であり、表面を保護しさらに水を処理して汚染微生物を不活性化する。そのような粒子の例として、イオン交換ゼオライト、銀担持不溶性リン酸塩、銀担持リン酸カルシウム、銀イオン修正ガラス、銀イオン交換チタン酸カリウム繊維、銀担持無機コロイド、銀ナノ粒子または銀微小粒子、および銅、亜鉛、または他の金属イオン、金属ナノ粒子、イオン担持ガラス、イオン交換リン酸ジルコニウムをベースとしてセラミックスおよび他のセラミックス、亜鉛ピリチオン粒子、銅ピリチオン粒子、などが挙げられる。
上記のプロセスは触媒表面の作製にも適用可能である。上記のプロセスは、酸化バナジウム、ニッケル、アルミナ、プラチナ、ロジウム、パラジウム、メソ多孔質シリカ、など従来の不均一触媒にも利用可能である。同様に、酵素、抗体酵素、リボザイム、デオキシリボザイム、など一部の均一触媒も利用可能である。白金ナノ粒子などの電解触媒も適している。有機触媒物質も表面への埋め込みに適している。
製品、包装材料、フィルムは本特許出願に記載されたプロセスによって芳香および風味を増すことができる。芳香または風味の提供が可能な化合物を放出制御粒子中に組み込むことができ、これは本出願に記載されたプロセスに対応する。臭気中和および芳香に関する適用にはゴミ箱および便座が含まれる。
以下は抗菌用途に適用される本発明の例示的、非限定的実施形態である。これらの実施形態は決して本発明の範囲を限定するものではなく、説明のみを目的としている。
繊維成形機およびホットプレスを含む数多くの方法を用いて、成形されたばかりのPVCパイプの条件をシミュレートした。次に銀粉を溶解したPVC表面に噴霧し、粒子を表面に均一に分散させた。用いたエアロゾル・ジェネレータはナノ粒子容器および細いピペット(銃身として作用)にエアーガンを一連のアダプタを介して連結することによって作製された。空気の破裂によってナノ粒子がエアロゾル化され、ピペットを通して標的方向に押し出された。
繊維押出機(DACA InstrumentsのSpineLine繊維押出機)を用いて、工業グレードのPVCペレットを直径1mmの開口部を通じて押し出した。PVCペレットを30分間加熱して温度を150〜185℃とし、繊維を1〜20mm/分の速度で押し出す。押し出された熱い表面上にナノ粒子を噴霧した。
平坦な工業グレードのPVCサンプルおよび押し出されたばかりのPVCサンプル(繊維押出機を用いて作製)を150〜185℃に加熱した二枚の鉄板の間に置き、1,000〜15,000ポンドの圧力で圧搾した。前記PVCサンプルを30秒〜30分後に取り出し、検討した。続いて銀微小粒子(粉末2.0〜3.5μm、99+%、Sigma−Aldrich、www.sigma−aldrich.com、Cat.No.327085)を出来ががった熱い柔らかいPVC表面に噴霧した。
2.1 担体の作製
平坦な工業グレードのPVCシートを抗菌銀処理沈殿用担体として使用した。ASTM E2190以外のすべての検査に対し、これらの大きなシートをPVCクランプカッター(Home Depot,www.homedepot.com)を用いて1.2x1.2cmに切断した。ASTM E2180検査用としては、PVCサンプル担体を3x3cmに切断した。PVC担体サンプルはすべて水と石鹸に続きメタノールとエタノールで洗浄した。
銀ナノ粒子を有機溶媒であるテトラヒドロフラン(THF)中に懸濁した。高分子量PVCパウダー(HMV PVCパウダー。Fluka www.sigma−aldrich.com,Cat.No.81387)および銀ナノ粉末(Nanopowder,<100nm、99.5%(金属ベース)Sigma−Aldrich www.sigma−aldrich.com,Cat.No.576832)を様々な重量パーセントでTHFに加えた。PVC粉末の溶解と銀粒子の懸濁を促進するため、出来上がった溶液を超音波で分解した。銀ナノ粉末を加える前にTHF中のPVCを超音波分解することにより懸濁液はよりうまく形成された。安定剤としてのPVCの効果を、単純な銀懸濁液とPVCで安定化した銀懸濁液を比較することにより評価した。PVC濃度は0.0〜3.0wt%、銀濃度は0.45〜4.0wt%であった。
銀ナノ粒子溶液のすべてのPVC担体上への適用はスピンコーターを用いて達成された。1.2x1.2cmのサンプルを1500rpmで33秒間スピンコートし、スピン開始後直ちに銀溶液10滴を連続して加えた。3x3cmのサンプルを3000rpmで33秒間スピンコートし、スピン開始後直ちに10滴相当量をサンプル上に噴射した。スピン速度、滴数、適用法に関する上記の値は、これらのパラメータの関数としての当該銀粒子の埋め込みを最適化するために大規模な試験を行った後に選択されたものである。
銀ナノ粒子および銀で処理したPVCサンプルの表面をラマン分光法(Renishaw RM1000 VIS Raman Microspectrometer,Drexel University<www.nano.drexel.edu/Facilities)を用いて特性解析を行った。銀処理PVCサンプルを光学顕微鏡にかけ、倍率50xで観察した。次に分光計の光学部分をオフにし、緑色のアルゴンイオン・レーザー(サンプルの燃焼を防ぐためλ=514.5nm、強度1%)をサンプルに当てた。次にラマン散乱反応を10パスで測定(各パス10秒間)し、標的領域の構造を決定した。散乱強度の全データを相対スケールで記録した。
銀処理PVC表面および対照サンプルの光学顕微鏡写真を撮影し、銀処理の特性を解析した。サンプルを光学顕微鏡下に置き、20倍で観察した。この倍率は広い視野と高い解像度を理由に選択したものである。ImageJソフトウエア(ImageJ;http//rsb.info.nih.gov/ij/)を用いて画像特性を改良し、さらに平均粒子サイズや粒子被覆の面積率などの粒子分散特性を測定した。
集束イオンビーム(FIB)SEM10(FEI Strata DB235,www.fei.com)を用いてナノスケールの表面特性解析を行った。銀処理PVCサンプルをまず金パラジウムで30秒間、30ミリアンペアでスパッターコートし、続いてFIBを用いて解析した。サンプル表面銀粒子の局所構造の観察に加え、FIBを用いて銀粒子を通してPVC表面内に入り込み、埋め込まれた粒子の断面像を明らかにした。
予備的耐久性試験を行い、銀強化PVC表面上への連続的水流の作用を評価した。単一銀溶液(2wt%銀および2.25wt%PVC粉末)で処理した四つのPVCサンプルを固定し、流速3.9ガロン/分in2の連続した流れにさらした。この水流はプラスチックシートを用いて普通の蛇口からの水流を変更することによって作製したものである。水輸送に用いられる業務用PVCパイプにおける推奨流速は0.4〜8.0ガロン/分in2であった。試験前および試験から2.5、8、26、および51時間後に光学顕微鏡を用いてサンプル表面の特性解析を行った。各サンプルの表面被覆率の面積率を、ImageJの所定の方法を用いて決定した。
ナノ粒子および銀強化サンプルの抗菌作用を質的、量的に解析するため、複数の試験を行った。Kirby−Bauer試験、濁り試験、成長解析試験、およびASTM E−2180試験を行った。すべての試験において適切な対照を設け、使用前に全サンプルをエタノールでリンスした。
銀ナノ粒子の既知の抗菌性を質的に検証するため、また銀強化サンプルの抗菌性を質的に観察するため、修正Kirby−Bauer試験を行った。無菌の10cmのLuria−Burtani(LB)プレート(1.0%Tryptone、0.5%酵母エキス、1.0%NaCll、1.5%寒天、Teknova、www.teknova.com、Cat.No.L1100)に大腸菌(S株、Fisher Scientific、www.fishersci.com、Cat.No.S20918)を接種した。銀ナノ粒子の抗菌性を検証するため、2.1.節に記載したエアロゾル生成機を用いて寒天表面の一部を銀ナノ粉末で被覆した。銀強化PVC材料の試験を行うため、1.2x1.2cmの銀強化PVCサンプルを置き、寒天面にコーティングを施した。プレートをさかさまにして実験用オーブンで37℃で24時間インキュベートし、抑制範囲を可能な限り測定した。
サンプルが水溶液中で抗菌性を示すか否かを定性的に知るため、濁度試験を行った。無菌のLuria−Burtani(LB)培地(ペンシルバニア大学生物学部から入手)に大腸菌を接種し、その溶液を5mLづつ試験管に入れた。1.2x1.2cmのPVCサンプルを直ちに試験管内の溶液に浸した(一試験管につき一サンプル)。蓋を緩めたサンプルを実験用オーブンに入れ37℃で10時間インキュベートし、1,2,3,4,5,6,8、および10時間後に目視により濁度を観察した。
経時的な抗菌性を成長解析試験によって評価した。本明細書の別項に記載したように、濁度試験にも同じ初期手順を使用したが、目視ではなく、1,2,3,4,5,6,8、および10時間後に溶液200μLを各試験管から取り出し、LBプレート(1.0%トリプトン、0.5%酵母エキス、1.0%NaCl、1.5%寒天(Teknova www.teknova.com,Cat.No.L1100))上に置いた。全プレートを直ちに4℃で冷蔵し、収集1時間後までそのまま保管した。次にプレートをいっしょに実験用オーブンに入れ37℃でインキュベートし、8時間後に観察した。全サンプルを相対密度スケール(1が最低の細菌繁殖、10が最高の細菌繁殖)を用いて比較した。ImageJを用いて、芝生が完全には発現しておらず(いずれも4wt%銀、2.25wtプレート)悪質な染料の適用によって破壊されていない(時間3、4、5、6、および8)プレートの細菌密度の定量を行った。染色は試験結果の解析を容易にすることが意図された。
FDA公認の独立微生物研究所(Accugen Laboratories,Inc. www.accugenlabs.com、IL)が契約によりポリマー材料または疎水性材料における組み込み抗菌剤の活性を調べるための標準試験である認定ASTM−E2180試験(ASTM International www.astm.org)を実施した。黄色ブドウ球菌および大腸菌を攻撃細菌、Dey Engley(DE)中和培地を中和剤として使用し、接触時間24時間、接触温度35℃とした。使用した培地および試薬は、大豆−カゼイン消化寒天、寒天スラリー、および滅菌脱イオン水、などであった。完全なプロトコルはASTM Internationalから入手できる。
3.1 エアロゾル処理法
現在のPVCパイプ製造プロセスに直接統合可能なプロセスを開発する目的でエアロゾル処理法が検討された。2.1節に記載した方法には、粒子が押し出されたばかりのパイプ表面に直接噴霧できるプロセスが含まれる。光学顕微鏡により、銀粒子が加熱されたPVC表面に接着することが確認された(図7参照)が、同銀ナノ粒子の著しい凝集も示された。エアロゾル処理法に対する研究努力により期待できる結果が示されたが、工業用2軸押出機へのアクセスおよびPVCに対する工業製造プロセスにおけるガイダンスの欠如がこの方法のさらなる発展を妨げている。
3.2.1 表面および粒子解析
3.2.1.1 ラマン分光法
精製PVCの予備スキャンに50%アルゴンイオンレーザー強度を用い、高反射性で白い表面に起因する強いラマン信号が記録された(図8)。暗色銀粒子の高吸収度に関連した燃焼を防ぐため、1%光強度が銀コーティングPVCサンプル(図8)のスキャンに用いられた。この燃焼は後に銀ナノ粒子上の有機コーティングの燃焼によるものと考えられた。ラマン分光法が純銀からの信号を拾わない一方、粒子上の有機コーティングに関連した分子結合はラマン散乱信号を生成した(図8)。銀処理PVC担体からのラマン信号は最初にコーティングされた銀ナノ粒子からの信号に一致し、PVC表面上の銀ナノ粒子の存在を裏付けた。3000cm−1までの相対散乱強度のピークはC−H結合に相当し、1580cm−1までの同ピークはC−C結合に相当した。銀処理PVC担体からのラマン信号が非処理PVCからの信号にわずかに合致したため、銀粒子は担体表面に曝露されPVCによって覆われていないと結論付けられ、したがって殺菌性銀イオンの放出を可能にした。
PVCサンプル表面の粒子を識別後、埋め込みプロセスを最適化するため光学顕微鏡を用いて当該粒子分散の特性(平均粒子サイズおよび表面被覆面積率)を研究した。平均粒子サイズおよび埋め込み面積率はTHF溶液中のPVC粉末と銀の濃度による影響を顕著に受けた。銀懸濁液を安定化(すなわち凝集を遅延させる)し、立体反発を増加させることによって銀粒子をより小さくするため、PVC粉末を溶液中に加えた。
3.2.2 耐久性解析
FIBを用いて半分にカットしたPVC表面上の銀粒子のSEM像(図12)は、当該粒子がPVC担体に埋め込まれていることを示している。図の銀粒子周辺の小ドットはパラジウム金コーティングであり、下にあるPVC担体のイオンおよび電子ビームによる焼却によって目視された。FIBによってカットされた溝の壁にある特徴は不明であるが、非コーティングPVCサンプルの断面にも見られた(図12)。いかなる一理論に束縛されるものではないが、これらの特徴はプロセスを促進するために工業用PVCに加えられるアルミニウムなどの安定剤であると考えられている。銀粒子をPVC内に埋め込むことは、THFが他のほとんどのプラスチックに加えてPVCを溶解することが知られているため、THFを分散媒として用いる場合の望ましい結果であった(ImageJ、http://rsb/info.nih.gov/ij/)。
3.2.3.1 銀ナノ粒子の抗菌性に関するKIRBY−BAUER試験の結果
実験の厳密性を検証するため、今回の研究において表面処理に用いられた銀ナノ粒子の抗菌性を定性的に検証した。修正Kirby−Bauer試験から、寒天プレート表面にエアロゾル化により散布されたナノ粒子粉末が大腸菌の繁殖を抑制することが示された(図14)。堆積技術の分散的性格のため、抑制帯の測定は不可能であった。しかし、銀粒子のない対照サンプルに生じた芝生(図14A、左プレート)が寒天表面の銀ナノ粒子の存在によって抑制された(図14A、右プレート)ことは明白である。表面に広がる銀ナノ粉末の量が増えることによって、抗菌性が高まり、遂には細菌繁殖が全く見られなくなった。
抗生剤の活性を調べるためにKirby−Bauer試験が日常的に用いられる。同試験では、標的抗生剤に浸したペーパーディスクを細菌繁殖プレートの寒天表面上に置く。抗生剤が寒天中に拡散し、ディスク周辺における細菌繁殖の抑制が観察される。次にこれらの抑制帯の直径を測定し、比較して相対的な抗生剤効果を調べる。今回の試験では、銀強化PVCサンプルを処理側を下に向けて接種した寒天プレート上に置いたため、コーティングから寒天中への銀イオンの拡散が抑制帯が形成される唯一の理論的メカニズムであった。
濁度は任意の溶液中の細菌数に直接関連する。時間4までに対照サンプルおよび2wt%銀、2.25wt%PVCサンプルの濁度は4wt%銀、2.25wt%PVCサンプルおよび滅菌LB培地の濁度に比べ高かった。4wt%Ag、2.25wt%PVCサンプルは滅菌LB培地と同様の透光性を示した。サンプルは時間5,6,8、および10で観察された(図16)が、いずれのサンプルでも目に見える濁度の変化は認められなかった。これらの結果から、処理されたPVCサンプルは重量%銀に相関した抗菌作用を示すと考えられる。
ASTM E2180試験は主に平坦な(2次元の)疎水性または高分子表面の中または上に組み込まれるか結合した薬剤の抗菌作用を(定量的に)評価するべくデザインされた標準検査である。この方法によりプラスチックまたは疎水性表面における抗菌作用の存在が確認でき、非処理プラスチックまたはポリマーと結合または組み込み低水溶性抗菌剤[1.0%トリプトン、0.5%酵母エキス、1.0%NaCl、1.5%寒天 Teknova、www.teknova.com、Cat.No.L1100]との間の抗菌作用における相違の定量的評価が可能になる。寒天スラリーを用いて表面上に疑バイオフィルムを形成し、表面張力を低減し接種材料と試験表面との間の接触を増やした。ASTM E2180試験の結果は、4wt%Ag、2.25wt%PVCサンプルへの曝露から24時間以内にすべての微生物の活性が100%削減されたことを示している。グラム陽性菌(黄色ブドウ球菌)とグラム陰性菌(大腸菌)のいずれもが影響を受けた。この決定的かつ定量的なデータは修正Kirby−Bauer、濁度、および成長解析試験によって収集された定性的データによって裏付けられる。繁殖削減率は以下のようにして得られた。
工業グレードの平らなPVCシートに銀粒子を埋め込み、得られた表面の抗菌性が確認された。銀ナノ粉末をTHFおよびPVC溶液中に懸濁し、平坦なPVC担体上に0.45〜4.0wt%でスピンコートした。PVC粉末を濃度0.0〜3.0wt%で安定剤として用いた。ラマン分光法により、埋め込まれた粒子は最初にコーティングされた銀ナノ粒子であることが確認された。光学顕微鏡およびImageJソフトウエアを用いて、全てのサンプルにつき埋め込まれた表面被覆の面積率および平均粒子サイズを測定した。埋め込まれた表面の面積率は0.1〜20%、粒子凝集半径は73〜400nmであった。埋め込まれた表面被覆の望ましい面積率および粒子サイズ分散を、溶液中の銀およびPVC粉末の濃度を変えることによって制御した。銀溶液中のPVC粉末の溶解により懸濁液が安定化し、凝集が遅延された。
Claims (16)
- 担体に金属粒子を埋め込む方法であって、
液体と、不均衡なアスペクト比および伝導性を有する金属粒子群とを、複数の金属粒子が少なくとも部分的に当該担体の軟化部分に埋め込まれる程度に当該担体が軟化されるように、少なくとも担体の一部に塗布する工程と、
前記複数の金属粒子が前記担体に確実に埋め込まれるように当該担体の少なくとも一部を硬化する工程とを有し、
前記担体に確実に埋め込まれた前記複数の金属粒子は、前記金属粒子が互いに接触するまたは近接することにより前記金属粒子を焼結することなく伝導路を形成するものであり、
前記液体を塗布する工程は前記担体を軟化させる工程を有し、
前記複数の金属粒子の少なくとも一つは前記担体の表面より下に完全に埋め込まれるものである、
方法。 - 請求項1記載の方法において、前記液体は前記担体を軟化する溶媒を有し、且つ前記液体を塗布する工程は、前記液体中に前記金属粒子群を配置する工程と、前記液体および前記配置された金属粒子群を前記担体に塗布する工程とを有するものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記液体は水溶液、イオン溶液、非極性溶媒、有機溶媒、極性溶媒、非プロトン性溶媒、無機溶媒、イオン液体、またはそれらの組合せを有するものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記液体は塩、界面活性剤、安定剤、またはそれらの組合せをさらに有するものである、方法。
- 請求項4記載の方法において、前記安定剤は粒子間凝集を少なくとも部分的に抑制することができる少なくとも一つの薬剤を有するものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記液体を塗布する工程は、噴霧、回転成形、浸漬、塗装、滴下、ブラッシング、またはそれらの組合せを有するものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記塗布する工程は少なくとも一つの金属粒子の埋め込みの程度を制御するために磁場または電場の適用をさらに有するものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記担体を軟化させる工程は前記液体のみで達成されるものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記金属粒子群は100nm未満の断面直径を有する銀粒子を有するものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記担体は、前記担体を軟化する前の一つ若しくはそれ以上の金属粒子よりも硬いものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記担体はポリマー、木材、またはそれらの組合せを有するものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記担体の硬化は前記担体の冷却、少なくとも液体の一部の蒸散、気流の適用、真空の適用、またはそれらの組合せを有するものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、担体内に確実に埋め込まれる多数の金属粒子は実質的に前記担体に均一に分配されるものである、方法。
- 担体に金属粒子を埋め込む方法であって、
金属粒子群が少なくとも部分的に前記担体内に埋め込まれる条件下において、前記担体に前記金属粒子群を塗布する工程を有し、
前記金属粒子群は不均衡なアスペクト比および伝導性を有するものであり、
前記担体に埋め込まれた前記金属粒子群は、前記金属粒子が互いに接触するまたは近接することによって前記金属粒子を焼結することなく伝導路を形成するものであり、
前記金属粒子群の金属粒子の少なくとも一つは前記担体の表面より下に完全に埋め込まれるものであり、
前記金属粒子群は液体中に配置され、さらに、この方法は、
前記液体を前記担体に塗布することにより前記担体を軟化させる工程を有する、
方法。 - 請求項14記載の方法において、前記担体を軟化させる工程は前記液体のみで達成されるものである、方法。
- 請求項14記載の方法において、前記塗布する工程は、少なくとも一つの金属粒子の埋め込みの程度を制御するために磁場または電場の適用をさらに含むものである、方法。
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