JP5993308B2 - 感覚改善剤 - Google Patents
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Description
(1)乳由来塩基性タンパク質画分を有効成分とする感覚改善剤。
(2)前記乳由来塩基性タンパク質画分が、そのアミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を15重量%以上含有している画分である(1)の感覚改善剤。
(3)前記乳由来塩基性タンパク質画分が、乳または乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出して得られる画分である(1)乃至(2)記載の感覚改善剤。
(4)(1)及至(3)のいずれかに記載の乳由来塩基性タンパク質画分にタンパク質分解酵素を作用させて得られる乳由来塩基性タンパク質画分分解物を有効成分とする感覚改善剤。
(5)前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン、キモトリプシン及びパンクレアチンよりなる群から選択される少なくとも1種のタンパク質分解酵素である(4)記載の感覚改善剤。
(6)(1)及至(5)のいずれかに記載の乳由来塩基性タンパク質画分または乳由来塩基性タンパク質画分分解物を配合した感覚改善用飲食品又は飼料、化粧品。
(7)乳由来塩基性タンパク質画分を含有する組成物を経口投与または皮膚への塗布により哺乳動物の感覚を改善する方法。
(8)前記乳由来塩基性タンパク質画分が、そのアミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を15重量%以上含有している画分である(7)の方法。
(9)前記乳由来塩基性タンパク質画分が、乳または乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出して得られる画分である(7)又は(8)記載の方法。
(10)(7)及至(9)のいずれかに記載の乳由来塩基性タンパク質画分にタンパク質分解酵素を作用させて得られる乳由来塩基性タンパク質画分分解物を含有する組成物を経口投与または皮膚への塗布により哺乳動物の感覚を改善する方法。
(11)前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン、キモトリプシン及びパンクレアチンよりなる群から選択される少なくとも1種のタンパク質分解酵素である(10)記載の感覚改善剤。
1) ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)によると分子量 3,000〜80,000範囲の数種のタンパク質よりなる。
2) 95重量%以上がタンパク質であって、その他少量の脂肪、灰分を含む。
3) タンパク質は主としてラクトフェリン及びラクトパーオキシダーゼよりなる。
4) タンパク質のアミノ酸組成は、リジン、ヒスチジン、アルギニン等の塩基性アミノ酸を15重量%以上含有する。
また、本発明の乳由来塩基性タンパク質画分を得る方法としては、乳または乳由来の原料を陽イオン交換体に接触させて塩基性タンパク質を吸着させた後、この陽イオン交換体に吸着した塩基性タンパク質画分を、pH5を越え、イオン強度0.5を越える溶出液で溶出して得る方法(特開平5−202098号公報)、アルギン酸ゲルを用いて得る方法(特開昭61−246198号公報)、無機の多孔性粒子を用いて乳清から得る方法(特開平 1−86839号公報)、硫酸化エステル化合物を用いて乳から得る方法(特開昭63−255300号公報)などが知られており、本発明では、このような方法で得られた塩基性タンパク質画分を用いることができる。また、乳由来塩基性タンパク質画分分解物は、乳由来塩基性タンパク質画分と同様のアミノ酸組成を有しており、例えば、上記の方法で得られた乳由来塩基性タンパク質画分にペプシン、トリプシン、キモトリプシンなどのタンパク質分解酵素を作用させ、さらに必要に応じ、パンクレアチンなどのタンパク質分解酵素を作用させることにより、平均分子量 4,000以下のペプチド組成物として得ることができる。
(細胞分化促進活性の確認)
皮膚に存在することが知られている繊維芽細胞の細胞株である3T3細胞を、実施例品1および実施例品3を0.03から1%の濃度で添加した状態で、2日間培養した(実施例品1:A群、実施例品3:B群)。また、対照として、3T3細胞を、実施例品1の乳由来塩基性タンパク質画分および実施例品3の乳由来塩基性ペプチド質画分を添加しないで2日間培養した(C群)。それら培養上清を用いて神経のモデル細胞であるPC−12細胞を培養し、PC−12細胞の形態的な分化を観察した。
(動物実験による感覚改善効果の確認)
Woolfe, MacDonaldらが開発した熱刺激に対する行動学的研究法であるホットプレート試験にて熱刺激による感覚改善効果を評価した。24週齢のヘアレスマウス(Hos:HR−1)を10匹ずつ3群に分けた。実施例品2の乳由来塩基性タンパク質画分をマウス体重1kgあたりそれぞれ0mg、10mg、20mgになるよう1日1回ゾンデで経口投与して4週間飼育した。投与終了時に54℃のホットプレートにマウスを置き、マウスがホットプレートから足を離す、立ち上がる、ジャンプするなどの逃避行動までの時間を測定した。その際、熱刺激から逃避行動に移るまでの時間(逃避行動陽性反応時間)の最長時間を30秒に設定し、逃避行動陽性反応時間が30秒以上の場合、当該時間は30秒とした。その結果を表4に示す。
(経口摂取による感覚改善効果の確認)
手の感覚の鈍化を感じている健康な高齢者(平均年齢75±3歳)を10名ずつ、5群に分けた。それぞれを、乳由来塩基性タンパク質画分および乳由来塩基性タンパク質画分を摂取しない群(A群)、実施例1の乳由来塩基性タンパク質画分を10mg摂取する群(B群)、20mg摂取する群(C群)、実施例3の乳由来塩基ペプチド画分を10mg摂取する群(D群)、20mg摂取する群(E群)とし、6週間摂取してもらった。摂取前と6週間の摂取終了後に表在知覚計アルゲジオメーター(インタークロス社製)を用い、上腕内側の痛覚を基準として手掌と足底土踏まずの痛覚を使用方法に基づき正常、低下I〜IIIの計4段階で測定した。また、6週間の摂取終了後に、それぞれの高齢者に、手の感覚の改善についてアンケート調査を実施した。その結果を表5、6、7、8に示す。
・5種類の太さの違うピンと5つの支点位置で痛覚を評価した。まず、最も細い1pinを上腕内側に転がし、正常な痛覚の度合いを被験者に確認した。
・次に、手掌と足底に1pinにてホルダを持つ支点の位置を順に変えて転がし、最初に感じた痛覚と同程度の痛みを感じる支点の位置を探した。
(評価方法)
アルゲジオメーターは上腕内側で1pin(支点50g)を転がした場合と、手掌での2pin(50g)で同じ痛みを生じる様に設計されており、使用方法に基づき、以下のように評価した。また、痛みの評価に点数をつけ、平均値を算出した。
2pin(50g)で同じ痛みであれば、正常(0点)
1pin(50g)で同じ痛みであれば、低下I(1点)
1pin(60g)で同じ痛みであれば、低下II(2点)
1pin(70g)で同じ痛みであれば、低下III(3点)
実施例3で得られた乳由来塩基性タンパク質画分分解物(実施例品3)を使用し、表9に記載される割合で原料を混合し、感覚改善用化粧品(クリーム)を製造した。
(皮膚への塗布による感覚改善効果試験)
手の感覚の鈍化を感じている健康な高齢者(平均年齢75±3歳)を15名ずつ、A群、B群の2群に分けた。A群では実施例品4と同様の方法で製造した、感覚改善剤を含まない化粧品(クリーム)を、B群では、実施例品4の感覚改善用化粧品(クリーム)を1日1回手と足の全体へ塗布した。塗布期間は6週間とし、塗布前と6週間の塗布終了後に表在知覚計アルゲジオメーター(インタークロス(株)社製)を用い、上腕内側の痛覚を基準として手掌と足底土踏まずの痛覚を使用方法に基づき正常、低下I〜IIIの計4段階で測定した。また、6週間の塗布終了後に、被験者それぞれに、手の感覚の改善についてアンケート調査を実施した。その結果を表10、11、12、13に示す。なお、測定方法については試験例3と同様に行った。
実施例品1の乳由来塩基性タンパク質画分5gを4995gの脱イオン水に溶解し、TKホモミクサー(TK ROBO MICS;特殊機化工業社製)にて、6000rpmで30分間撹拌混合して塩基性タンパク質画分100mg/100gの塩基性タンパク質画分溶液を得た。この乳由来塩基性タンパク質画分溶液5.0kgに、カゼイン4.0kg、大豆タンパク質5.0kg、魚油1.0kg、シソ油3.0kg、デキストリン18.0kg、ミネラル混合物6.0kg、ビタミン混合物1.95kg、乳化剤2.0kg、安定剤4.0kg、香料0.05kgを配合し、200mlのレトルトパウチに充填し、レトルト殺菌機(第1種圧力容器、TYPE:RCS−4CRTGN、日阪製作所社製)で121℃、20分間殺菌して、本発明の感覚改善用液状栄養組成物50kgを製造した。このようにして得られた感覚改善用液状栄養組成物には、すべて沈殿等は認められず、風味に異常は感じられなかった。なお、この感覚改善用液状栄養組成物には、100gあたり、乳由来塩基性タンパク質画分が10mg含まれていた。
実施例品2の乳由来塩基性タンパク質画分2gを708gの脱イオン水に溶解し、ウルトラディスパーサー(ULTRA−TURRAX T−25;IKAジャパン社製)にて、9500rpmで30分間撹拌混合した。この溶液に、ソルビトール40g、酸味料2g、香料2g、ペクチン5g、乳清タンパク質濃縮物5g、乳酸カルシウム1g、脱イオン水235gを添加して、撹拌混合した後、200mlのチアパックに充填し、85℃、20分間殺菌後、密栓し、本発明の感覚改善用ゲル状食品5袋(200g入り)を調製した。このようにして得られた感覚改善用ゲル状食品には、すべて沈殿等は認められず、風味に異常は感じられなかった。なお、この感覚改善用ゲル状食品には、100gあたり、乳由来塩基性タンパク質画分が200mg含まれていた。
酸味料2gを706gの脱イオン水に溶解した後、実施例品3の乳由来塩基性タンパク質画分分解物4gを溶解し、ウルトラディスパーサー(ULTRA−TURRAX T−25;IKAジャパン社製)にて、9500rpmで30分間撹拌混合した。マルチトール100g、還元水飴20g、香料2g、脱イオン水166gを添加した後、100mlのガラス瓶に充填し、95℃、15秒間殺菌後、密栓し、感覚改善用飲料10本(100ml入り)を調製した。このようにして得られた感覚改善用飲料には、すべて沈殿は認められず、風味に異常は感じられなかった。なお、この感覚改善用飲料には、100gあたり、乳由来塩基性タンパク質画分分解物が400mg含まれていた。
実施例品3の乳由来塩基性タンパク質画分分解物2kgを98kgの脱イオン水に溶解し、TKホモミクサー(MARKII 160型;特殊機化工業社製)にて、3600rpmで40分間撹拌混合して乳由来塩基性タンパク質画分分解物を2g/100g含有する乳由来塩基性タンパク質画分分解物溶液を得た。この乳由来塩基性タンパク質画分分解物溶液10kgに大豆粕12kg、脱脂粉乳14kg、大豆油4kg、コーン油2kg、パーム油23.2kg、トウモロコシ澱粉14kg、小麦粉9kg、ふすま2kg、ビタミン混合物5kg、セルロース2.8kg、ミネラル混合物2kgを配合し、120℃、4分間殺菌して、本発明の感覚改善用イヌ飼育飼料100kgを製造した。なお、この感覚改善用イヌ飼育飼料には、100gあたり、乳由来塩基性タンパク質画分分解物が200mg含まれていた。
表14に示す配合で原料を混合後、常法1gに成型、打錠して本発明の感覚改善剤を製造した。なお、この感覚改善剤1g中には、乳由来塩基性タンパク質画分が100mg含まれていた。
表15に記載される割合で原料を混合し、感覚改善用化粧品(ローション)を製造した。
Claims (9)
- 乳由来塩基性タンパク質画分を有効成分とし、
前記乳由来塩基性タンパク質画分が、そのアミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を15重量%以上含有している画分である末梢感覚改善剤。 - 前記乳由来塩基性タンパク質画分は、
前記乳由来塩基性タンパク質画分の全重量基準で、95重量%以上のタンパク質と、脂肪と、灰分とを含み、
前記タンパク質が、ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)換算分子量が3,000〜80,000範囲の数種のタンパク質よりなり、主としてラクトフェリン及びラクトパーオキシダーゼを含み、
前記タンパク質のアミノ酸組成が、塩基性アミノ酸を、前記タンパク質の全重量基準で15重量%以上含有することを特徴とする請求項1記載の末梢感覚改善剤。 - 請求項1または2に記載の乳由来塩基性タンパク質画分にタンパク質分解酵素を作用させて得られる乳由来塩基性タンパク質画分分解物を有効成分とする末梢感覚改善剤。
- 前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン、キモトリプシン及びパンクレアチンよりなる群から選択される少なくとも1種のタンパク質分解酵素である請求項3記載の末梢感覚改善剤。
- 前記末梢感覚改善剤が、温度感覚および痛覚の少なくともいずれか一方の改善効果を備える請求項1乃至4のいずれかに記載の末梢感覚改善剤。
- 乳または乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、
前記樹脂に吸着した画分を塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出して得られる乳由来塩基性タンパク質画分を有効成分とする末梢感覚改善剤の製造方法。 - 乳または乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、
前記樹脂に吸着した画分を塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出して得られる乳由来塩基性タンパク質画分を得て、
前記乳由来塩基性タンパク質画分にタンパク質分解酵素を作用させて得られる乳由来塩基性タンパク質画分分解物を有効成分とする末梢感覚改善剤の製造方法。 - 前記タンパク質分解酵素がペプシン、トリプシン、キモトリプシン及びパンクレアチンよりなる群から選択される少なくとも1種のタンパク質分解酵素である請求項7記載の末梢感覚改善剤の製造方法。
- 請求項1乃至5のいずれかに記載の乳由来塩基性タンパク質画分または乳由来塩基性タンパク質画分分解物を配合した末梢感覚改善用飼料。
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