JP5984795B2 - 膵疾患を検出するためのデータを収集する方法 - Google Patents
膵疾患を検出するためのデータを収集する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5984795B2 JP5984795B2 JP2013508905A JP2013508905A JP5984795B2 JP 5984795 B2 JP5984795 B2 JP 5984795B2 JP 2013508905 A JP2013508905 A JP 2013508905A JP 2013508905 A JP2013508905 A JP 2013508905A JP 5984795 B2 JP5984795 B2 JP 5984795B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- pancreatic
- juice
- pancreatic juice
- duodenal
- collected
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 208000016222 Pancreatic disease Diseases 0.000 title claims description 21
- 210000001819 pancreatic juice Anatomy 0.000 claims description 115
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 claims description 45
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 32
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 28
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims description 25
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 claims description 23
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 23
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 claims description 21
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 15
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 11
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 claims description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 9
- 208000024691 pancreas disease Diseases 0.000 claims description 6
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 4
- 230000000580 secretagogue effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000029142 excretion Effects 0.000 claims description 2
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 claims description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 33
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 15
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 15
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 14
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 14
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 13
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 10
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 10
- 208000006086 Pancreatic Intraductal Neoplasms Diseases 0.000 description 9
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 9
- 210000000277 pancreatic duct Anatomy 0.000 description 9
- 201000004754 pancreatic intraductal papillary-mucinous neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 9
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 8
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 7
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 210000002445 nipple Anatomy 0.000 description 5
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 4
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 4
- 208000000668 Chronic Pancreatitis Diseases 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 208000000407 Pancreatic Cyst Diseases 0.000 description 3
- 206010033649 Pancreatitis chronic Diseases 0.000 description 3
- 108010086019 Secretin Proteins 0.000 description 3
- 102100037505 Secretin Human genes 0.000 description 3
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 3
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 3
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229960002101 secretin Drugs 0.000 description 3
- OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N secretin human Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N 0.000 description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- 208000001976 Endocrine Gland Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- MGSKVZWGBWPBTF-UHFFFAOYSA-N aebsf Chemical compound NCCC1=CC=C(S(F)(=O)=O)C=C1 MGSKVZWGBWPBTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 201000011523 endocrine gland cancer Diseases 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 2
- 230000009996 pancreatic endocrine effect Effects 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- 238000001269 time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 108010026552 Proteome Proteins 0.000 description 1
- 102000013674 S-100 Human genes 0.000 description 1
- 108700021018 S100 Proteins 0.000 description 1
- 101150026420 S100P gene Proteins 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- VVBXXVAFSPEIJQ-CVIPOMFBSA-N [(2r)-3-[[(2r)-1-[[(2s,5r,8r,11r,12s,15s,18s,21s)-15-[3-(diaminomethylideneamino)propyl]-21-hydroxy-5-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-4,11-dimethyl-2-(2-methylpropyl)-3,6,9,13,16,22-hexaoxo-8-propan-2-yl-10-oxa-1,4,7,14,17-pentazabicyclo[16.3.1]docosan-12-yl]am Chemical compound C([C@@H]1C(=O)N[C@@H](C(=O)O[C@H](C)[C@@H](C(N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@H]2CC[C@H](O)N(C2=O)[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1C)=O)NC(=O)[C@H](NC(=O)[C@H](O)COS(O)(=O)=O)CC(C)C)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 VVBXXVAFSPEIJQ-CVIPOMFBSA-N 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000001839 endoscopy Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 208000022669 mucinous neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920006173 natural rubber latex Polymers 0.000 description 1
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 1
- 210000004923 pancreatic tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000010827 pathological analysis Methods 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000575 proteomic method Methods 0.000 description 1
- 239000000941 radioactive substance Substances 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
- G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57438—Specifically defined cancers of liver, pancreas or kidney
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B10/00—Other methods or instruments for diagnosis, e.g. instruments for taking a cell sample, for biopsy, for vaccination diagnosis; Sex determination; Ovulation-period determination; Throat striking implements
- A61B10/0045—Devices for taking samples of body liquids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B5/00—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
- A61B5/42—Detecting, measuring or recording for evaluating the gastrointestinal, the endocrine or the exocrine systems
- A61B5/4216—Diagnosing or evaluating gastrointestinal ulcers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/06—Gastro-intestinal diseases
- G01N2800/067—Pancreatitis or colitis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
本発明は、膵疾患を検出するためのデータを収集する方法に関するものである。
従来、膵管内乳頭粘液性腫瘍（ＩＰＭＮ）が膵癌の早期発見の手がかかりとして注目されている。膵癌やＩＰＭＮの診断は、内視鏡検査や生検によって行われている。しかし、早期の膵癌やＩＰＭＮを内視鏡画像から発見することは難しく、生検においては膵臓から組織を採取するという作業そのものが難しい。したがって、これらの方法では十分な検査精度が得られない。
一方、膵癌やＩＰＭＮにおいて、Ｓ１００蛋白質ファミリーの１つであるＳ１００Ｐが高い割合で過剰に発現することが知られている（例えば、非特許文献１，２参照。）。
一方、膵癌やＩＰＭＮにおいて、Ｓ１００蛋白質ファミリーの１つであるＳ１００Ｐが高い割合で過剰に発現することが知られている（例えば、非特許文献１，２参照。）。
Kenoki Ohuchida、外９名、"S100P Is an Early Developmental Marker of Pancreatic Carcinogenesis"、Clinical Cancer Research、2006年9月15日、第12巻、第18号、pp.5411-5416
Mads Gronborg、外８名、"Comprehensive Proteomic Analysis of Human Pancreatic Juice"、Journal of Proteome Research、2004年9月17日、第3巻、第5号、pp.1042-1055
非特許文献１では、膵臓の組織や膵液中に含まれる膵細胞からＲＮＡを抽出し、Ｓ１００Ｐ遺伝子のｍＲＮＡ発現レベルからＳ１００Ｐの発現量を測定している。この方法では膵癌およびＩＰＭＮを高精度で検出できる。しかしながら、煩雑な多段階の工程が必要であり、検査には高額な費用と長い時間とが必要となる。非特許文献２では、膵液をＴＯＦ−ＭＳ（飛行時間型質量分析法）で解析することよりＳ１００Ｐの発現量を測定しており、比較的大掛かりな設備が必要となる。すなわち、これらの方法で検査を実施できる施設は限られており、また、通常の臨床検査には不向きであるという不都合がある。
本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、簡略な設備と手順でありながら膵疾患を高感度で検査することができる膵疾患を検出するためのデータを収集する方法を提供することを目的とする。
上記目的を達成するため、本発明は以下の手段を提供する。
本発明の一態様は、十二指腸内から採取された体液であって、排出刺激を行わずに生理的に分泌された膵液を含む前記体液中に含まれるＳ１００Ｐの濃度を、固相化された抗体を用いて測定する膵疾患を検出するためのデータを収集する方法である。
上記態様においては、前記Ｓ１００Ｐの濃度を、前記固相化された抗体を用いた免疫クロマトグラフィ法によって測定してもよい。
本発明の一態様によれば、被検体内から採取した膵液および／または膵液を含む体液に含まれるＳ１００Ｐの濃度は、膵臓腫瘍、ＩＰＭＮ、慢性膵炎を含む膵疾患が存在する場合には高い確率で上昇するので、測定したＳ１００Ｐの濃度の値から膵疾患の有無を高感度で検査することができる。この場合に、Ｓ１００Ｐの濃度の測定に、操作が簡便で特別な設備を必要としない免疫クロマトグラフィ法を用いることにより、簡略な設備と手順でありながら膵疾患を高感度で検査することができる。
本発明の一態様は、十二指腸内から採取された体液であって、排出刺激を行わずに生理的に分泌された膵液を含む前記体液中に含まれるＳ１００Ｐの濃度を、固相化された抗体を用いて測定する膵疾患を検出するためのデータを収集する方法である。
上記態様においては、前記Ｓ１００Ｐの濃度を、前記固相化された抗体を用いた免疫クロマトグラフィ法によって測定してもよい。
本発明の一態様によれば、被検体内から採取した膵液および／または膵液を含む体液に含まれるＳ１００Ｐの濃度は、膵臓腫瘍、ＩＰＭＮ、慢性膵炎を含む膵疾患が存在する場合には高い確率で上昇するので、測定したＳ１００Ｐの濃度の値から膵疾患の有無を高感度で検査することができる。この場合に、Ｓ１００Ｐの濃度の測定に、操作が簡便で特別な設備を必要としない免疫クロマトグラフィ法を用いることにより、簡略な設備と手順でありながら膵疾患を高感度で検査することができる。
本発明の参考例においては、前記膵液が、膵管内から採取された膵液であってもよい。
このようにすることで、純度の高い膵液を用いることによって、被検体内において発現されたＳ１００Ｐの濃度をより正確に測定することができる。
本発明の上記態様においては、前記膵液を含む体液が、十二指腸液であってもよい。
十二指腸内において、膵液を胆汁や十二指腸の分泌液と混合された状態で十二指腸液として採取することができる。このようにすることで、膵液を採取する際の被検体への侵襲を低減することができる。
このようにすることで、純度の高い膵液を用いることによって、被検体内において発現されたＳ１００Ｐの濃度をより正確に測定することができる。
本発明の上記態様においては、前記膵液を含む体液が、十二指腸液であってもよい。
十二指腸内において、膵液を胆汁や十二指腸の分泌液と混合された状態で十二指腸液として採取することができる。このようにすることで、膵液を採取する際の被検体への侵襲を低減することができる。
上記態様においては、前記膵液が、膵液分泌促進剤の使用などの積極的な排出刺激をせずに、生理的に分泌された膵液であってもよい。
このようにすることで、検査に伴う被検体への負担を軽減することができる。
本発明の参考例においては、前記膵液および／または膵液を含む体液が、膵液分泌促進剤の投与により分泌させられた膵液および／または該膵液を含む体液であってもよい。
このようにすることで、十分な量の膵液および／または膵液を含む体液を検査に用いることができる。
このようにすることで、検査に伴う被検体への負担を軽減することができる。
本発明の参考例においては、前記膵液および／または膵液を含む体液が、膵液分泌促進剤の投与により分泌させられた膵液および／または該膵液を含む体液であってもよい。
このようにすることで、十分な量の膵液および／または膵液を含む体液を検査に用いることができる。
上記態様においては、前記膵液に含まれる蛋白質分解酵素（プロテアーゼ）の活性を阻害するプロテアーゼ阻害剤が収容された採取容器に採取された前記膵液を含む体液を使用してもよい。
このようにすることで、採取および検査の過程で膵液に含まれる蛋白質分解酵素によってＳ１００Ｐが分解されてしまうことを防ぎ、検査精度を向上することができる。
このようにすることで、採取および検査の過程で膵液に含まれる蛋白質分解酵素によってＳ１００Ｐが分解されてしまうことを防ぎ、検査精度を向上することができる。
本発明の参考例は、被検物質を標識物質によって標識する第１の抗体および該第１の抗体と複合体を形成した前記被検物質を吸着させる第２の抗体として、Ｓ１００Ｐの互いに異なるエピトープを認識する２つの抗Ｓ１００Ｐ抗体を保持する免疫クロマトグラフィ装置を備える膵臓検査キットである。
上記参考例においては、膵液に含まれるプロテアーゼの活性を阻害するプロテアーゼ阻害剤が収容された採取容器をさらに備えていてもよい。
上記参考例においては、膵液に含まれるプロテアーゼの活性を阻害するプロテアーゼ阻害剤が収容された採取容器をさらに備えていてもよい。
本発明によれば、簡略な設備と手順でありながら膵疾患を高感度で検査することができるという効果を奏する。
以下に、本発明の一実施形態に係る膵臓検査キットおよび該膵臓検査キットを使用した膵臓検査方法について図１から図５を参照して説明する。
本実施形態に係る膵臓検査キットは、図１に示されるように、シリンジの外筒２内にプロテアーゼ阻害剤Ａが収容されてなる採取容器１と、図２Ａおよび図２Ｂに示されるように、抗Ｓ１００Ｐ抗体を保持する免疫クロマトグラフィ装置２０とを備えている。
本実施形態に係る膵臓検査キットは、図１に示されるように、シリンジの外筒２内にプロテアーゼ阻害剤Ａが収容されてなる採取容器１と、図２Ａおよび図２Ｂに示されるように、抗Ｓ１００Ｐ抗体を保持する免疫クロマトグラフィ装置２０とを備えている。
採取容器１のシリンジは、外筒２と、該外筒２の内部空間を分画しつつ外筒２内において摺動可能に設けられたガスケット３と、該ガスケット３を押し引きするプランジャ４とを備えている。プロテアーゼ阻害剤Ａは、ガスケット３により吸引口２ａ側に分画された空間内に配置されている。吸引口２ａはキャップ５などによって密封されている。
プロテアーゼ阻害剤Ａは、水を主成分とする膵液および／または膵液を含む体液に容易に溶解する水溶性のものが用いられる。プロテアーゼ阻害剤Ａとしては、例えば、スルホニル系化合物であるフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）、アミジノファニルメタンスルフォニルフルオライト（ＡＰＭＳＦ）、４−（２−アミノエチル）−ベンゼンスルフォニルフルオライド（ＡＥＢＳＦ）、トシル系化合物である１−クロロ−３−トシルアミド−７−アミノ−２−ヘプタノン塩酸塩（ＴＬＣＫ―ＨＣＬ）、または、ペプチド系の阻害剤であるアプロチニン、ロイペプチン等が好適に用いられる。これらのプロテアーゼ阻害剤Ａは、主にセリンプロテアーゼを不可逆的に阻害するものであり、膵液に多く含まれるプロテアーゼであるアミラーゼ、トリプシン、エラスターゼなどを強力に阻害する。
プロテアーゼ阻害剤Ａは、１種類のみが外筒２内に収容されていてもよいし、２種類以上が外筒２内に収容されていてもよい。また、プロテアーゼ阻害剤Ａは、リパーゼなどの他の消化酵素の活性を阻害する阻害剤とともに収容されていてもよい。
プロテアーゼ阻害剤Ａは、凍結乾燥された粉体である。これにより、プロテアーゼ阻害剤Ａは、さらに容易に膵液および／または膵液を含む体液に溶解させられる。
プロテアーゼ阻害剤Ａは、凍結乾燥された粉体である。これにより、プロテアーゼ阻害剤Ａは、さらに容易に膵液および／または膵液を含む体液に溶解させられる。
採取容器１により採取される被検液の採取量は、採取容器１の内容量に応じて、または、検査に必要な被検液の量に応じて予め所定量に設定されている。外筒２内に収容されるプロテアーゼ阻害剤Ａの重量は、採取すべき所定量の被検液に溶解させられたときにプロテアーゼ阻害剤Ａの濃度が所望の数値になるように決定される。
免疫クロマトグラフィ装置２０は、図２Ａに示されるように、被検液が展開される担体２１と、担体２１の両端にそれぞれ配置されたサンプルパッド２２および吸収パッド２３とを備えている。
担体２１は、被検液を展開可能なものであればよく、例えば、ニトロセルロース製のメンブレンフィルターなどが好適に用いられる。担体２１には、第１の抗体が保持された帯状の標識領域２１ａと、該標識領域２１ａから間隔をあけた位置において第２の抗体が固相化された帯状の吸着領域２１ｂとが設けられている。第１の抗体および第２の抗体は、Ｓ１００Ｐの互いに異なるエピトープを認識する抗Ｓ１００Ｐ抗体である。
担体２１は、被検液を展開可能なものであればよく、例えば、ニトロセルロース製のメンブレンフィルターなどが好適に用いられる。担体２１には、第１の抗体が保持された帯状の標識領域２１ａと、該標識領域２１ａから間隔をあけた位置において第２の抗体が固相化された帯状の吸着領域２１ｂとが設けられている。第１の抗体および第２の抗体は、Ｓ１００Ｐの互いに異なるエピトープを認識する抗Ｓ１００Ｐ抗体である。
第１の抗体は、所定の色を呈する物質、例えば、金コロイドや白金コロイド等の金属コロイド、または、彩色されたポリスチレンラテックス等の合成ラテックスや天然ゴムラテックスなどからなるラテックスコロイド（標識物質）によって標識されている。
第１の抗体を標識する標識物質は、酵素や放射性物質などであってもよい。
第１の抗体を標識する標識物質は、酵素や放射性物質などであってもよい。
サンプルパッド２２は、吸水性に優れた材料、例えば、多孔質ポリエチレンや多孔質ポリプロピレン等の多孔質合成樹脂からなるシートまたはフィルム、もしくは、濾紙や綿布などのセルロース製の紙、織布または不織布等からなる。
吸収パッド２３は、液体を迅速に吸収して保持できる材質、例えば、綿布、濾紙や、ポリエチレンやポリプロピレン等からなる多孔質プラスチック不織布等からなる。
吸収パッド２３は、液体を迅速に吸収して保持できる材質、例えば、綿布、濾紙や、ポリエチレンやポリプロピレン等からなる多孔質プラスチック不織布等からなる。
これらの担体２１、サンプルパッド２２および吸収パッド２３は、図２Ｂに示されるように、プラスチック製のケース２４によって外装されている。ケース２４は、サンプルパッド２２に対応する位置において滴下窓２４ａが開口し、吸着領域２１ｂに対応する位置において観察窓２４ｂが開口している。
このように構成された免疫クロマトグラフィ装置２０を使用するには、操作者は、滴下窓２４ａからサンプルパッド２２に被検液を滴下する。滴下された被検液はサンプルパッド２２から吸収パッド２３に向かって担体２１を移動することにより展開される。展開の途中に、被検液に含まれるＳ１００Ｐは、標識領域２１ａにおいて第１の抗体と結合して複合体を形成する。その後、該複合体は吸着領域２１ｂにおいて第２の抗体と結合することにより吸着領域２１ｂに吸着される。そして、複合体が吸着領域２１ｂに集積することにより吸着領域２１ｂは所定の色を呈する。したがって、操作者は、観察窓２４ｂ内に所定の色のバンドが出現したか否か、または、バンドの色の濃さから、Ｓ１００Ｐの有無または濃度を測定することができる。
次に、このように構成された膵臓検査キットを使用した膵臓検査方法について説明する。
本実施形態に係る膵臓検査方法は、被検体の十二指腸内から膵液を含む十二指腸液を採取容器内に採取し、採取した膵液を含む十二指腸液中のＳ１００Ｐの濃度を免疫クロマトグラフィ装置２０を使用して測定することにより行われる。十二指腸液の採取方法および採取容器は例示するカテーテルおよびシリンジに限定されず、膵液および／または膵液を含む体液が採取できればよい。
本実施形態に係る膵臓検査方法は、被検体の十二指腸内から膵液を含む十二指腸液を採取容器内に採取し、採取した膵液を含む十二指腸液中のＳ１００Ｐの濃度を免疫クロマトグラフィ装置２０を使用して測定することにより行われる。十二指腸液の採取方法および採取容器は例示するカテーテルおよびシリンジに限定されず、膵液および／または膵液を含む体液が採取できればよい。
具体的には、まず、十二指腸内に挿入した内視鏡のチャネルを介してカテーテルを十二指腸内の乳頭部近傍に配置し、図３に示されるように、カテーテル６の基端を外筒２の吸引口２ａに接続し、プランジャ４を引っ張る。これにより、乳頭部から十二指腸内に分泌された膵液を胆汁や十二指腸分泌液とともに十二指腸液として吸引して外筒２内に採取することができる。
十二指腸液を吸引する前に、膵臓における膵液の分泌および乳頭部から十二指腸内への膵液の排出を促進する処置、例えば、セクレチンなどの膵液分泌促進剤の被検体への投与を行ってもよい。また、このような処置を行わずに、生理的な条件で十二指腸内に排出された膵液および／または該膵液を含む十二指腸液を採取してもよい。
外筒２内に所定量まで膵液と胆汁、十二指腸分泌液との混合液（以下、膵液・十二指腸液という。）を採取した後、吸引口２ａからカテーテル６を取り外し、外筒内２の膵液・十二指腸液を吸引口２ａから免疫クロマトグラフィ装置２０の滴下窓２４ａに滴下する。その後、膵液・十二指腸液が十分に担体２１上に展開されるまで、例えば、５分から１５分間待つ。以上の手順により、膵液・十二指腸液中のＳ１００Ｐの有無、つまり、膵癌またはＩＰＭＮなどの膵疾患の有無を、観察窓２４ｂ内のバンドの出現の有無として検査することができる。なお、膵臓検査キットに緩衝液などからなる希釈液が付属され、該希釈液によって膵液・十二指腸液を希釈した後に滴下窓２４ａに滴下してもよい。
観察窓２４ｂ内にバンドが観察された場合は、バンドの呈色の濃さを目視または免疫クロマトグラフィ用の読み取り機で測定することにより、Ｓ１００Ｐの濃度を測定する。健常な人の膵液・十二指腸液から予め得られたバンドの呈色の濃さを基準値とし、この基準値と測定されたバンドの呈色の濃さとを比較することにより被検体の膵疾患の有無を判定してもよい。この場合、基準値の設定は、膵管内から採取した純粋膵液と膵液・十二指腸液とのいずれを用いるかによって異なり、また、採取量や採取に要する時間、膵液分泌促進剤を用いるか否かによっても異なる。したがって、様々な条件の下で被検液である膵液および／または膵液を含む体液を採取した場合の基準値が必要となる。
この場合に、本実施形態によれば、膵液および／または膵液を含む体液中に含まれるＳ１００Ｐの濃度と膵疾患の有無との間には高い相関があり、膵疾患が存在する場合には高い割合で膵液および／または膵液を含む体液中のＳ１００Ｐの濃度が上昇する。したがって、膵疾患の有無を高い感度で検査することができる。
さらに、膵液・十二指腸液は、カテーテル６から外筒２内に流入させられた後に外筒２内において迅速にプロテアーゼ阻害剤Ａと混合させられる。これにより、膵液・十二指腸液中に含まれるＳ１００Ｐの分解が迅速に抑制されるので、正確なＳ１００Ｐの濃度を測定することができ、検査感度をさらに向上することができる。特に膵液は他の消化液に比べてプロテアーゼの活性が高いので、外筒２内に採取された膵液・十二指腸液中のプロテアーゼ阻害剤Ａの濃度が十分に高くなるようプロテアーゼ阻害剤Ａの収容量を設定することにより、検査精度を効果的に向上することができる。
また、十二指腸に排出された膵液を十二指腸液として採取して検査に用いることにより、膵管内にカテーテル６を挿入して膵管内の純粋膵液を採取する場合と比べて侵襲を低減しながら簡便に膵液を採取することができる。また、免疫クロマトグラフィ装置２０の操作に特別な設備や長い時間を必要としないので、例えば、比較的規模の小さいかかりつけの病院等でも、安価にかつ短時間で高感度な検査を実施することができる。
なお、本実施形態においては、乳頭部から十二指腸内に排出されて胆汁、十二指腸分泌液と混合された膵液を検査に使用することとしたが、これに代えて、膵管内から採取された純粋膵液を検査に使用してもよい。純粋膵液は、造影しながらカテーテルを乳頭部から膵管内に挿入して吸引したり、バルーンカテーテルやチューブを膵管内に一定時間留置したりすることにより採取することができる。
このようにすることで、膵管内から採取された純粋膵液は、十二指腸液によって希釈されることがないので、被検体内でのより正確なＳ１００Ｐの濃度を測定することができる。
このようにすることで、膵管内から採取された純粋膵液は、十二指腸液によって希釈されることがないので、被検体内でのより正確なＳ１００Ｐの濃度を測定することができる。
また、本実施形態においては、プロテアーゼ阻害剤Ａとして、凍結乾燥された粉体のものを用いることとしたが、これに代えて、緩衝液などに溶解された液体のものを用いてもよい。このようにすることで、膵液・十二指腸液の採取量が少量であっても、プロテアーゼ阻害剤Ａを容易に均一に膵液・十二指腸液と混合させることができる。
また、本実施形態においては、採取容器１としてシリンジを用いた構成のものを例示したが、採取容器１の構成はこれに限定されるものではなく、接続されたカテーテル内を介して膵液および／または膵液を含む体液を吸引可能であり、膵液および／または膵液を含む体液が接触させられ膵液に含まれるプロテアーゼの活性を阻害するプロテアーゼ阻害剤が収容されている構成であればよい。例えば、採取容器１として、図４に示されるように、トラップ型の容器を用いもよく、図５に示されるように、内部が真空状態の容器を用いてもよい。
また、採取容器は、採取されてきた膵液および／または膵液を含む体液が、容器内に予め収容されたプロテアーゼ阻害剤Ａと迅速に接触させられる構成であればよく図１、図４および図５に例示されている採取容器１以外の採取容器を採用することとしてもよい。また、例示したカテーテル以外の採取手段、例えば、吸引、吸収、回収などにより膵液および／または膵液を含む体液を採取する構成であってもよい。採取容器の構成は、採取手段に応じて選択することができる。
図４に示される採取容器１は、カテーテル６に接続される吸引口２ａと、排気ポンプ等に接続されたチューブ７に接続される排気口２ｂとを備え、排気口２ｂから排気することによって、吸引口２ｂから膵液・十二指腸液が流入して貯留するようになっている。
図５に示される採取容器１は、例えば、ゴムなどの弾性部材からなる栓８によって開口が塞がれ、カテーテル６に接続された中空針９を栓８に貫通させることにより、膵液・十二指腸液が内部に吸引されるようになっている。
このようにしても、膵液および／または膵液を含む体液に含まれるプロテアーゼの活性を、採取後迅速に阻害し、採取された膵液に含まれるＳ１００Ｐの検査精度を向上することができる。
図５に示される採取容器１は、例えば、ゴムなどの弾性部材からなる栓８によって開口が塞がれ、カテーテル６に接続された中空針９を栓８に貫通させることにより、膵液・十二指腸液が内部に吸引されるようになっている。
このようにしても、膵液および／または膵液を含む体液に含まれるプロテアーゼの活性を、採取後迅速に阻害し、採取された膵液に含まれるＳ１００Ｐの検査精度を向上することができる。
ここで、従来の体液の採取容器の場合、カテーテルの基端に採取容器を接続して膵液および／または膵液を含む体液を貯留しながら吸引し、吸引が終了した後に膵液および／または膵液を含む体液を分注してプロテアーゼ阻害剤を添加するため、吸引の最中にも採取容器内において蛋白質の分解が進行してしまい、採取した膵液および／または膵液を含む体液から正確な検査結果を得ることが難しいという問題があった。
これに対して、本実施形態に係る採取容器１によれば、採取した膵液および／または膵液を含む体液中に含まれるプロテアーゼの活性を迅速に抑制することにより、Ｓ１００Ｐのみならず膵液および／または膵液を含む体液中に含まれる他の蛋白質についても検出精度を向上することができ、他の蛋白質をマーカとした膵臓検査にも有効に用いることができる。
これに対して、本実施形態に係る採取容器１によれば、採取した膵液および／または膵液を含む体液中に含まれるプロテアーゼの活性を迅速に抑制することにより、Ｓ１００Ｐのみならず膵液および／または膵液を含む体液中に含まれる他の蛋白質についても検出精度を向上することができ、他の蛋白質をマーカとした膵臓検査にも有効に用いることができる。
また、本実施形態においては、Ｓ１００Ｐの濃度を免疫クロマトグラフィ法によって測定することとしたが、固相化された抗体を用いて簡便に測定できる方法であれば他の測定方法を使用してもよい。例えば、小型の表面プラズモン共鳴装置（ＳＰＲ）やマイクロフルイディクスなどを使用して測定してもよい。
次に、上述した実施形態に係る膵臓検査方法の実施例について説明する。
〔実施例１〕
本発明に係る膵臓検査方法の検査感度を以下の実験により評価した。
被検体として３１人の膵癌患者群および７人のＩＰＭＮ患者群からカテーテル吸引により被検液である膵液および膵液を含む体液を採取した。患者から採取した被検液を採取後迅速に凍結保存した後、各被検液中に含まれるＳ１００Ｐの濃度をサイクレックス社製のＥＬＩＳＡキットを使用して測定した。対照群として、６人の良性の膵のう胞患者（ＭＣＮ、ＳＣＮ）についても同様の方法で被検液の採取および測定を行った。各患者の疾患は病理診断によって診断した。
〔実施例１〕
本発明に係る膵臓検査方法の検査感度を以下の実験により評価した。
被検体として３１人の膵癌患者群および７人のＩＰＭＮ患者群からカテーテル吸引により被検液である膵液および膵液を含む体液を採取した。患者から採取した被検液を採取後迅速に凍結保存した後、各被検液中に含まれるＳ１００Ｐの濃度をサイクレックス社製のＥＬＩＳＡキットを使用して測定した。対照群として、６人の良性の膵のう胞患者（ＭＣＮ、ＳＣＮ）についても同様の方法で被検液の採取および測定を行った。各患者の疾患は病理診断によって診断した。
被検液としては、膵管内から採取した純粋膵液および膵液・十二指腸液を用いた。膵液・十二指腸液については、生理的に分泌および排出された膵液（以下、膵液・十二指腸液（−）という。）を含む十二指腸液およびセクレチン投与による膵液の分泌促進後に採取した十二指腸液（以下、膵液・十二指腸液（＋）という。）を用いた。さらに、膵液・十二指腸液（−），（＋）については、プロテアーゼ阻害剤が収容された採取容器（阻害剤（＋））および空の採取容器（阻害剤（−））を使用して採取したものを測定した。その測定結果を図６および図７に示す。
図６および図７において、横軸は患者の症例を示し、縦軸は純粋膵液中または十二指腸液中のＳ１００Ｐの濃度を示している。各ドットは、各患者から上記条件で採取された膵液または十二指腸液中のＳ１００Ｐの濃度を示している。
次に、対照群から得られたＳ１００Ｐの濃度の最も高い値をカットオフ値とし、膵癌患者およびＩＰＭＮ患者から得られたＳ１００Ｐの濃度がカットオフ値を超えた場合に、その患者が膵癌またはＩＰＭＮの検査に陽性であると判定した。そして、各検査条件において、３１人の膵癌患者群および７人のＩＰＭＮ患者群のうち正常に検査が済んだ患者の合計に対して陽性と判定された患者の割合を陽性率として算出した。その結果を表１に示す。上述の条件で正常に採取できなかった被検液のデータは、表１、図６および図７に示す統計から除外されている。
表１から分かるように、いずれの検査条件においても高い陽性率が得られた。すなわち、膵液・十二指腸液または純粋膵液に含まれるＳ１００Ｐの濃度を測定することにより膵癌またはＩＰＭＮの有無を高感度で検査することができ、本発明の膵臓検査方法は膵癌またはＩＰＭＮの検査に有用であることが確認された。
また、膵液・十二指腸液を用いた検査においては、プロテアーゼ阻害剤入りの本発明に係る採取容器を使用することにより検査感度を大幅に高めることができることが確認された。すなわち、プロテアーゼ阻害剤入りの採取容器は、膵液とともに分泌された豊富なプロテアーゼによるＳ１００Ｐの分解を阻害することにより、特に分泌促進を行う場合の検査に対して有効であることが確認された。
〔実施例２〕
次に、実施例１で用いたＥＬＩＳＡに使用されている２種類の抗Ｓ１００Ｐ抗体（ＭＢＬ社製）を第１の抗体および第２の抗体として用いて本実施例に係る免疫クロマトグラフィ装置を作成した。該免疫クロマトグラフィ装置によって実施例１に用いた被検液を検査することにより、ＥＬＩＳＡ法と免疫クロマトグラフィ法とからそれぞれ得られる検査結果の相関を確認した。
次に、実施例１で用いたＥＬＩＳＡに使用されている２種類の抗Ｓ１００Ｐ抗体（ＭＢＬ社製）を第１の抗体および第２の抗体として用いて本実施例に係る免疫クロマトグラフィ装置を作成した。該免疫クロマトグラフィ装置によって実施例１に用いた被検液を検査することにより、ＥＬＩＳＡ法と免疫クロマトグラフィ法とからそれぞれ得られる検査結果の相関を確認した。
担体をニトロセルロース膜で作成し、第１の抗体を金コロイドで標識し、本実施例に係る免疫クロマトグラフィ装置を作成した。そして、作成した免疫クロマトグラフィ装置を使用して実施例１の被検液を検査し、バンドの呈色の有無および呈色の濃さを測定した。
測定された免疫クロマトグラフィ装置の呈色の濃さを３つの階級に区分したところ、ＥＬＩＳＡ法で定量した濃度との間に相関があることが確認された。本実施例の検査に要した時間は約１５分であった。すなわち、免疫クロマトグラフィ法を用いることにより、短時間で十分に感度の高い検査結果を得られることが確認された。
〔実施例３〕
実施例１の結果を元に、セクレチン投与による分泌促進を行わず、プロテアーゼ阻害剤を採取容器内に予め収容しておく方法にて、膵癌患者４１例、ＩＰＭＮ患者１７例、良性膵のう胞（ＳＣＮ、ＭＣＮ）患者６例、慢性膵炎患者４例、膵内分泌腫瘍患者３例について、膵液・十二指腸液を採取し、Ｓ１００Ｐの濃度を測定した。膵液・十二指腸液の採取およびＳ１００Ｐ濃度の測定は実施例１と同様の方法で行った。その測定結果を図８に示す。図８において、縦軸は対数表示となっている。
実施例１の結果を元に、セクレチン投与による分泌促進を行わず、プロテアーゼ阻害剤を採取容器内に予め収容しておく方法にて、膵癌患者４１例、ＩＰＭＮ患者１７例、良性膵のう胞（ＳＣＮ、ＭＣＮ）患者６例、慢性膵炎患者４例、膵内分泌腫瘍患者３例について、膵液・十二指腸液を採取し、Ｓ１００Ｐの濃度を測定した。膵液・十二指腸液の採取およびＳ１００Ｐ濃度の測定は実施例１と同様の方法で行った。その測定結果を図８に示す。図８において、縦軸は対数表示となっている。
良性膵のう胞患者６例から得られたＳ１００Ｐの濃度の測定値のうち最も高い値をカットオフ値に設定し、各症例における陽性率を算出した。その結果、膵疾患の陽性率は、膵癌では９０％、ＩＰＭＮでは９０％、慢性膵炎では１００％、膵内分泌腫瘍では１００％であった。
以上の実験結果から、膵液を含む十二指腸液中のＳ１００Ｐ濃度を測定することにより上記の様々な膵疾患を高感度に検出できることが確認された。
以上の実験結果から、膵液を含む十二指腸液中のＳ１００Ｐ濃度を測定することにより上記の様々な膵疾患を高感度に検出できることが確認された。
１ 採取容器
２ 外筒
２ａ 吸引口
２ｂ 排気口
３ ガスケット
４ プランジャ
５ キャップ
６ カテーテル
７ チューブ
８ 栓
９ 中空針
２０ 免疫クロマトグラフィ装置
２１ 担体
２１ａ 標識領域（第１の抗体、抗Ｓ１００Ｐ抗体）
２２ｂ 吸着領域（第２の抗体、抗Ｓ１００Ｐ抗体）
２２ サンプルパッド
２３ 吸収パッド
２４ ケース
２４ａ 滴下窓
２４ｂ 観察窓
Ａ 蛋白質分解酵素阻害剤
Ｂ 膵液
２ 外筒
２ａ 吸引口
２ｂ 排気口
３ ガスケット
４ プランジャ
５ キャップ
６ カテーテル
７ チューブ
８ 栓
９ 中空針
２０ 免疫クロマトグラフィ装置
２１ 担体
２１ａ 標識領域（第１の抗体、抗Ｓ１００Ｐ抗体）
２２ｂ 吸着領域（第２の抗体、抗Ｓ１００Ｐ抗体）
２２ サンプルパッド
２３ 吸収パッド
２４ ケース
２４ａ 滴下窓
２４ｂ 観察窓
Ａ 蛋白質分解酵素阻害剤
Ｂ 膵液
Claims (5)
- 十二指腸内から採取された体液であって、排出刺激を行わずに生理的に分泌された膵液を含む前記体液中に含まれるＳ１００Ｐの濃度を、固相化された抗体を用いて測定する膵疾患を検出するためのデータを収集する方法。
- 前記Ｓ１００Ｐの濃度を、前記固相化された抗体を用いた免疫クロマトグラフィ法によって測定する請求項１に記載の膵疾患を検出するためのデータを収集する方法。
- 前記膵液を含む体液が、十二指腸液である請求項１に記載の膵疾患を検出するためのデータを収集する方法。
- 前記膵液に含まれる蛋白質分解酵素の活性を阻害する蛋白質分解酵素阻害剤が収容された採取容器に採取された前記膵液を含む体液を使用する請求項１から請求項３のいずれかに記載の膵疾患を検出するためのデータを収集する方法。
- 前記膵液が、膵液分泌促進剤を投与せずに生理的に分泌された膵液である請求項１に記載の膵疾患を検出するためのデータを収集する方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2011083910 | 2011-04-05 | ||
| JP2011083910 | 2011-04-05 | ||
| PCT/JP2012/059222 WO2012137832A1 (ja) | 2011-04-05 | 2012-04-04 | 膵臓検査方法および膵臓検査キット |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2012137832A1 JPWO2012137832A1 (ja) | 2014-07-28 |
| JP5984795B2 true JP5984795B2 (ja) | 2016-09-06 |
Family
ID=46969226
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2013508905A Active JP5984795B2 (ja) | 2011-04-05 | 2012-04-04 | 膵疾患を検出するためのデータを収集する方法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9034586B2 (ja) |
| EP (1) | EP2696202B1 (ja) |
| JP (1) | JP5984795B2 (ja) |
| CN (1) | CN103460045B (ja) |
| WO (1) | WO2012137832A1 (ja) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK2665746T3 (en) | 2011-01-17 | 2021-02-01 | Lykera Biomed S A | Antibodies against the s100p protein for the treatment and diagnosis of cancer |
| EP2757151B1 (en) * | 2011-09-13 | 2017-08-30 | Olympus Corporation | Method for inhibiting protease in biological sample containing pancreatic juice component |
| CN104395749B (zh) | 2012-06-22 | 2016-12-28 | 奥林巴斯株式会社 | 含胰液成分的试样的调制方法、以及含胰液成分的生物试样的室温储存用试剂盒 |
| JP6299063B2 (ja) * | 2012-11-27 | 2018-03-28 | 味の素株式会社 | 膵臓癌リスク疾患の評価のための方法、膵臓癌リスク疾患評価装置、膵臓癌リスク疾患評価方法、膵臓癌リスク疾患評価プログラムおよび膵臓癌リスク疾患評価システム |
| CA2902841A1 (en) * | 2013-03-13 | 2014-10-02 | Creatics Llc | Methods and compositions for detecting pancreatic cancer |
| CN105358987A (zh) * | 2013-07-02 | 2016-02-24 | 奥林巴斯株式会社 | 胰腺病标记物检测用十二指肠液试样的确定方法、以及胰腺病标记物的检测方法 |
| EP2933639A1 (en) * | 2014-04-16 | 2015-10-21 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des Öffentlichen Rechts | S100p and Hyaluronic acid as biomarkers for metastatic breast cancer |
| WO2015182218A1 (ja) * | 2014-05-26 | 2015-12-03 | オリンパス株式会社 | 膵癌判定方法 |
| WO2016013248A1 (ja) * | 2014-07-23 | 2016-01-28 | オリンパス株式会社 | 膵臓疾患判定方法 |
| JP6257857B2 (ja) * | 2015-10-26 | 2018-01-10 | オリンパス株式会社 | 膵癌の罹患可能性を評価するための方法 |
| WO2018181741A1 (ja) * | 2017-03-31 | 2018-10-04 | 東洋紡株式会社 | イムノクロマト試験片およびキットおよび測定方法 |
| CN109111519A (zh) * | 2018-10-16 | 2019-01-01 | 无锡傲锐东源生物科技有限公司 | 抗s100p蛋白单克隆抗体及其用途 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005518553A (ja) * | 2001-09-06 | 2005-06-23 | ジェノミック プロファイリング システムズ インコーポレイティッド | 細胞およびウイルスの迅速かつ高感度な検出方法 |
| JP2006308576A (ja) * | 2005-03-31 | 2006-11-09 | Eisai Co Ltd | 膵液による膵管内乳頭粘液性腺癌および膵臓癌の検出法及び検出キット |
| JP2009529920A (ja) * | 2006-03-21 | 2009-08-27 | ワイス | Ｒａｇｅの拮抗作用のための方法および組成物 |
| WO2010047448A1 (en) * | 2008-10-22 | 2010-04-29 | Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology | Diagnostic kit of colon cancer using colon cancer related marker,and diagnostic method thereof |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5651769A (en) | 1995-10-16 | 1997-07-29 | The Beth Israel Hospital Association | Method for retrieving pancreatic juice utilizing and endoscopically wire-guided catheter |
| JP2002501616A (ja) | 1997-05-19 | 2002-01-15 | リプリゲン コーポレーション | 自閉的症候群を鑑別診断および治療する際の助けとするための方法 |
| CA2263063C (en) * | 1999-02-26 | 2004-08-10 | Skye Pharmatech Incorporated | Method for diagnosing and distinguishing stroke and diagnostic devices for use therein |
| CN1297922A (zh) * | 1999-11-26 | 2001-06-06 | 上海博道基因技术有限公司 | 一种多肽－人钙结合s100蛋白21和编码该多肽的多核苷酸 |
| US6628388B2 (en) | 2000-11-06 | 2003-09-30 | The Regents Of The University Of California | Detection of birefringent microcrystals in bile |
| US7485418B2 (en) | 2003-03-17 | 2009-02-03 | The Johns Hopkins University | Aberrantly methylated genes in pancreatic cancer |
| KR100852841B1 (ko) | 2004-09-14 | 2008-08-18 | 올림푸스 가부시키가이샤 | 생체 조직 채취 기구, 내시경 시스템 및 생체 조직 채취방법 |
| CN101448857A (zh) * | 2006-03-21 | 2009-06-03 | 惠氏公司 | 预防和治疗淀粉样蛋白生成疾病的方法 |
| JP2011502244A (ja) * | 2007-10-19 | 2011-01-20 | エラック エイエス | Ｅｄｔａ耐性ｓ１００ａ１２複合体（ｅｒａｃ） |
| US8529547B2 (en) * | 2011-04-05 | 2013-09-10 | Olympus Corporation | Method of collecting specimen and method of diagnosing subject to detect upper digestive system disease |
| US8586384B2 (en) * | 2011-04-05 | 2013-11-19 | Olympus Corporation | Method of collecting duodenal specimen to detect upper digestive system disease without using pancreatic or bile stimulant |
-
2012
- 2012-04-04 WO PCT/JP2012/059222 patent/WO2012137832A1/ja active Application Filing
- 2012-04-04 JP JP2013508905A patent/JP5984795B2/ja active Active
- 2012-04-04 CN CN201280015866.9A patent/CN103460045B/zh active Active
- 2012-04-04 EP EP12767863.9A patent/EP2696202B1/en active Active
-
2013
- 2013-10-01 US US14/043,267 patent/US9034586B2/en active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005518553A (ja) * | 2001-09-06 | 2005-06-23 | ジェノミック プロファイリング システムズ インコーポレイティッド | 細胞およびウイルスの迅速かつ高感度な検出方法 |
| JP2006308576A (ja) * | 2005-03-31 | 2006-11-09 | Eisai Co Ltd | 膵液による膵管内乳頭粘液性腺癌および膵臓癌の検出法及び検出キット |
| JP2009529920A (ja) * | 2006-03-21 | 2009-08-27 | ワイス | Ｒａｇｅの拮抗作用のための方法および組成物 |
| WO2010047448A1 (en) * | 2008-10-22 | 2010-04-29 | Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology | Diagnostic kit of colon cancer using colon cancer related marker,and diagnostic method thereof |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| JPN6012022630; Ｊｏａｏ Ａ． ＰＡＵＬＯ， ｅｔ ａｌ．: 'Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｓａｍｐｌｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｆｌｕｉｄ ｆｏｒ ＳＤＳ-ＰＡＧＥ ａｎａｌｙｓｉｓ' Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ Ｖｏｌ．３１／Ｎｏ．１４, 201007, 第２３７７-２３８７頁, Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ Ｌｔｄ． * |
| JPN6015051645; Ｋｙｕｎｇ Ｗ． ＮＯＨ， ｅｔ ａｌ．: 'Ｄｏ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ Ｊｕｉｃｅ Ｐｒｅｄｉｃｔ ｔｈｅ Ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅｓ？' ＣＬＩＮＩＣＡＬ ＧＡＳＴＲＯＥＮＴＥＲＯＬＯＧＹ ＡＮＤ ＨＥＰＡＴＯＬＯＧＹ Ｖｏｌ．４, 20060322, 第７８２-７８９頁 * |
| JPN6015051646; Ｋｅｎｏｋｉ ＯＨＵＣＨＩＤＡ， ｅｔ ａｌ．: 'Ｓ１００Ｐ Ｉｓ ａｎ Ｅａｒｌｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｍａｒｋｅｒ ｏｆ Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ' Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｖｏｌ．１２， Ｎｏ．１８, 20060915, 第５４１１-５４１６頁 * |
| JPN6015051648; 大内田研宙ほか: 'Ｓ１００Ｐの膵癌診断における役割' 胆と膵 Ｖｏｌ．２７， Ｎｏ．３, 200603, 第１４１-１４５頁, 医学図書出版株式会社 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2696202A4 (en) | 2015-04-08 |
| CN103460045B (zh) | 2016-01-20 |
| EP2696202B1 (en) | 2017-09-06 |
| US9034586B2 (en) | 2015-05-19 |
| JPWO2012137832A1 (ja) | 2014-07-28 |
| EP2696202A1 (en) | 2014-02-12 |
| US20140030823A1 (en) | 2014-01-30 |
| WO2012137832A1 (ja) | 2012-10-11 |
| CN103460045A (zh) | 2013-12-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5984795B2 (ja) | 膵疾患を検出するためのデータを収集する方法 | |
| US8586384B2 (en) | Method of collecting duodenal specimen to detect upper digestive system disease without using pancreatic or bile stimulant | |
| US6071247A (en) | Skin blister biopsy apparatus and method | |
| US20190059860A1 (en) | Stool specimen collecting, sampling and diagnosing means and methods thereof | |
| US20150346212A1 (en) | System for detection of a component in a fluid | |
| JPWO2013038981A1 (ja) | 膵疾患マーカーの検出方法 | |
| US20210196246A1 (en) | Suction Based Saliva Treatment and Collector Device | |
| US20100256464A1 (en) | Device for determining risk of developing breast cancer and method thereof | |
| WO2022194033A1 (zh) | 一种弥漫大b细胞淋巴瘤的外周血tcr标志物及其检测试剂盒和应用 | |
| EP3959518A1 (en) | Nasal cavity sampling methods and apparatus | |
| US8529547B2 (en) | Method of collecting specimen and method of diagnosing subject to detect upper digestive system disease | |
| CN105675352A (zh) | 一种泪液采集器 | |
| KR102498295B1 (ko) | 밀폐식 일체형 표적검사키트 | |
| CN107949789B (zh) | 血液分析方法及血液检查试剂盒 | |
| CN107922964B (zh) | 血液分析方法及血液检查试剂盒 | |
| CN110114671A (zh) | 血液分析方法及血液检查试剂盒 | |
| US20220137041A1 (en) | Device for methods of detecting cancer | |
| WO2002080775A1 (en) | Method of collecting a gastrointestinal tract sample | |
| JP2005520616A (ja) | 乳腺液を分析するための方法および装置 | |
| JP2015011011A (ja) | 膵疾患マーカー検出用十二指腸液試料の選定方法、及び膵疾患マーカーの検出方法 | |
| Dhakshinya et al. | Use of Urinary Reagent Strips in Testing Cerebrospinal Fluid For Meningitis-A Review. | |
| Fabre | Diagnosis of cystic pancreatic lesions by endoscopic ultrasonography-guided fine-needle aspiration (EUS-FNA)—Which sampling and why? Utility of cyst wall microbiopsy and fluid analysis by monolayered processing | |
| Gross et al. | RELATIONSHIP OF SUSPECTED BLOOD INDICATOR AND BLOOD TRANSFUSIONS IN WIRELESS CAPSULE ENDOSCOPY: 866 | |
| RU2575826C2 (ru) | Способ неинвазивной диагностики тубулоинтерстициального фиброза при фокально-сегментарном гломерулосклерозе | |
| CN117741129A (zh) | 一种无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20150128 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20151222 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160219 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20160719 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160802 |
|
| R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 5984795 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |