JP5983601B2 - 栄養組成物 - Google Patents

Description

本発明は、特定のアミノ酸とｎ−３系脂肪酸とをそれぞれ特定量含有する、筋肉量の増加及び／又は筋肉量の低下抑制に有効な栄養組成物に関する。詳細には、遊離リジン、リジンを含むジペプチド及びリジン塩類よりなる群から選ばれる１種以上と、ｎ−３系脂肪酸とをそれぞれ特定量含むことを特徴とする、筋肉量の増加及び／又は筋肉量の低下抑制に有効な栄養組成物に関するものである。

高齢者において、サルコペニアと呼ばれる特有の骨格筋減少が起こる。骨格筋減少が高齢者の活動量を低下させ、この活動量低下が更なる筋力低下をもたらすという悪循環に陥る。活動量の低下は基礎エネルギー代謝をも低下させる。特に寝たきり状態において、この状態が顕著に現れる。

一方で高齢者では、低栄養状態になる危険性も高く、日本の社会保険研究所の調査によると、入院患者の約４割、在宅患者の約３割が低栄養状態であった。ただし、栄養状態の改善のために摂取エネルギーを多くしても、筋肉量の回復につながらず、反って脂肪蓄積を誘引し、インスリン抵抗性、糖尿病、高脂血症、骨粗鬆症などの代謝関連疾患に繋がることが言われている（非特許文献１）。

上記のような筋肉量低下に対して、タンパク質摂取が推奨されている。実際に、必須アミノ酸混合物１８ｇを摂取することで、骨格筋のタンパク質合成が増加したことが報告されている（非特許文献２）。しかしながら、高齢者においては加齢に伴い腎機能が低下している中に一回１８ｇもの大量のアミノ酸摂取は、摂取困難だけではなく、腎臓へ負荷をかける危険性もある。従って、高齢者の筋肉量の増加には、通常のタンパク質補給だけではない、より効率的な組成物の摂取が必要とされる。

一方で、とうもろこしや小麦を主食とする地域住民あるいは動物においては、リジンの摂取が成長や筋肉量の増加に働くことが知られている（特許文献１）。しかし、この場合は主食のタンパク質組成が偏り、リジンが制限アミノ酸となるためであって、摂取するタンパク質がとうもろこしや小麦に大きく偏らない大部分の地域においては、リジン単独の摂取による体全体の成長、その一例として現れる筋肉量の増加への明確な効果は認められてない。

特許文献２では、ｎ−３系脂肪酸に対するｎ−６系脂肪酸の重量比が０．１〜３．０である混合油と、分岐鎖アミノ酸を含むアミノ酸と、β−カロテン、ビタミンＣ、ビタミンＥ及びセレン等の抗酸化剤を含有する、悪液質及び／又は食欲不振の患者を対象とする組成物が開示されている。また、非特許文献３において、癌性悪液質のモデルマウスに、ｎ−３系脂肪酸と高ロイシン含有タンパク質食を摂取させると、体重低下および筋肉量の増加を示すことが報告されている。この対象患者においては、癌末期の悪液質による特有のサイトカイン（ＴＮＦ−α、ＩＬ−６など）が関与し、このサイトカインが起点となって筋タンパク質の崩壊を起こす。ｎ−３系脂肪酸はそのサイトカイン分泌を抑制し、ロイシンなどの分岐鎖アミノ酸は筋タンパク合成に補助的に働くことで、筋タンパク質の崩壊を防ぐと推測される。即ち、この組成の検討は癌性悪液質という、サイトカイン優位のタンパク質崩壊が極端に進んでいる状態における検討であって、寝たきりなどで活動量が低下した通常の高齢者の筋力量低下とは大きく異なり、効果は不明である。

他方、ｎ−３系脂肪酸は、高トリグリセリド血症改善剤として使用されているが、ｎ−３系脂肪酸を単独で使用した場合には、筋肉の重量増加への効果はないとの報告がある（非特許文献４、５）。

また、ｎ−３系脂肪酸は脂肪酸化に関与する酵素のｍＲＮＡ発現を上昇させるように働くことが報告されているが（非特許文献６）、これまで、エネルギー代謝が亢進し筋肉などのタンパク質合成促進が確認されたことはない。

上記のように、現状においては適切なアミノ酸比率かつｎ−３系脂肪酸を含有し、高齢者の筋肉量を維持あるいは上昇させる機能を持つような栄養組成物はこれまで提供されていない。

特表２００８−５３９７９３号公報 特表平１１−５０８２８２号公報

臨床栄養, 2008, 8: 38-43 Am J Clin Nutr, 2003, 78: 250-258 Br J Cancer, 2004, 91: 408-412 Drugs of the Future, 2010, 35: 41-52 J Nutr Biochem, 2006, 17: 1-13 J Nutr, 2005, 135: 2503-2508

本発明が解決しようとする課題は、筋肉量の低下予防及び／又は改善効果、特に活動量の低下に伴い筋肉量の低下した高齢者に対して前記効果を有する新規栄養組成物を提供することにある。

上記課題を解決するべく種々検討した結果、本発明者らは、特定量の遊離リジン、リジンを含むジペプチド及びリジン塩類からなる群より選ばれる１種以上と、特定量のｎ−３系脂肪酸を含む組成物が、筋肉量の低下を予防及び／又は改善しうること、さらに肥満抑制、内臓脂肪の蓄積抑制により、高血糖、高脂血症を改善しうること、特に高齢者に対してかかる改善効果が著しいことを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は次の［１］〜［１９］に関する。
［１］遊離リジン、リジンを含むジペプチド及びリジン塩類よりなる群から選ばれる１種以上と、ｎ−３系脂肪酸を含有する栄養組成物であって、
遊離リジン、リジンを含むジペプチド及びリジン塩類よりなる群から選ばれる１種以上の含有量が組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１ｇ〜１０．０ｇであり、
ｎ−３系脂肪酸の含有量が組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１７ｇ〜５．００ｇである、栄養組成物。
［２］さらにバリン、ロイシンおよびイソロシンよりなる群から選ばれる１種以上の分岐鎖アミノ酸を含有する、上記［１］記載の栄養組成物。
［３］バリン、ロイシンおよびイソロシンよりなる群から選ばれる１種以上の分岐鎖アミノ酸の含有量が、組成物１００ｋｃａｌあたり総量で１．０ｇ〜２０ｇである、上記［２］に記載の栄養組成物。
［４］バリン、ロイシンおよびイソロシンよりなる群から選ばれる１種以上の、遊離の形態の分岐鎖アミノ酸の含有量が、組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１ｇ〜１５ｇである、上記［２］又は［３］に記載の栄養組成物。
［５］ｎ−３系脂肪酸が、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸よりなる群から選ばれる１種以上を含有する、上記［１］〜［４］のいずれか１つに記載の栄養組成物。
［６］エイコサペンタエン酸を組成物１００ｋｃａｌあたり１０ｍｇ〜３０００ｍｇ含有する、上記［５］に記載の栄養組成物。
［７］組成物１００ｋｃａｌあたり０．２ｍｇ〜２０．０ｍｇのビタミンＢ１、
組成物１００ｋｃａｌあたり０．２５ｍｇ〜２０．０ｍｇのビタミンＢ２、
組成物１００ｋｃａｌあたり０．３ｍｇ〜２０．０ｍｇのビタミンＢ６、及び、
組成物１００ｋｃａｌあたり０．３μｇ〜２０．０μｇのビタミンＢ１２よりなる群から選ばれる１種以上を含有する、上記［１］〜［６］のいずれか１つに記載の栄養組成物。
［８］組成物１００ｋｃａｌあたり５０μｇレチノール当量〜２５００μｇレチノール当量のビタミンＡ、
組成物１００ｋｃａｌあたり１０ｍｇ〜７００ｍｇのビタミンＣ、及び、
組成物１００ｋｃａｌあたりα−トコフェロール換算量で１ｍｇ〜５０ｍｇのビタミンＥよりなる群から選ばれる１種以上を含有する、上記［１］〜［７］のいずれか１つに記載の栄養組成物。
［９］組成物１００ｋｃａｌあたり１ｍｇ〜５０ｍｇの亜鉛及び／又は組成物１００ｋｃａｌあたり１．０μｇ〜５０．０μｇのセレンを含有する、上記［１］〜［８］のいずれか１つに記載の栄養組成物。
［１０］中鎖脂肪酸油を含有し、中鎖脂肪酸油の含有量が、脂質の総量に対して１０重量％〜６５重量％である、上記［１］〜［９］のいずれか１つに記載の栄養組成物。
［１１］筋肉量の増加及び／又は筋肉量の低下抑制用である、上記［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の栄養組成物。
［１２］内臓脂肪低下用、又はエネルギー消費量増加用である、上記［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の栄養組成物。
［１３］筋力低下症の予防及び／又は改善、筋力回復のためのリハビリテーションの効果促進、内臓脂肪増加に伴う脂質代謝異常の予防及び／又は改善、内臓脂肪増加に伴う高血糖の予防及び／又は改善、内臓脂肪増加に伴う脂肪肝の予防及び／又は改善、内臓脂肪増加に伴う肝臓機能低下の予防及び／又は改善、基礎エネルギー消費量の低下の予防及び／又は改善、基礎体温の低下の予防及び／又は改善、炎症性サイトカインの上昇を伴わない筋肉量低下の予防及び／又は改善、低栄養状態の改善、運動器低下の改善、ロコモティブシンドロームの予防及び／又は改善、転倒の防止、並びにスポーツにおける筋肉量の増加からなる群より選ばれる少なくとも１種の用途用である、上記［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の栄養組成物。
［１４］上記［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の組成物を有効量投与することを特徴とする筋肉量の増加及び／又は筋肉量の低下抑制方法。
［１５］上記［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の組成物を有効量投与することを特徴とする内臓脂肪低下方法、又はエネルギー消費量増加方法。
［１６］上記［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の組成物を有効量投与することを特徴とする、筋力低下症の予防及び／又は改善方法、筋力回復のためのリハビリテーションの効果促進方法、内臓脂肪増加に伴う脂質代謝異常の予防及び／又は改善方法、内臓脂肪増加に伴う高血糖の予防及び／又は改善方法、内臓脂肪増加に伴う脂肪肝の予防及び／又は改善方法、内臓脂肪増加に伴う肝臓機能低下の予防及び／又は改善方法、基礎エネルギー消費量の低下の予防及び／又は改善方法、基礎体温の低下の予防及び／又は改善方法、炎症性サイトカインの上昇を伴わない筋肉量低下の予防及び／又は改善方法、低栄養状態の改善方法、運動器低下の改善方法、ロコモティブシンドロームの予防及び／又は改善方法、転倒の防止方法、並びに、スポーツにおける筋肉量の増加方法からなる群より選ばれる少なくとも１種の方法。
［１７］筋肉量の増加及び／又は筋肉量の低下抑制剤を製造するための上記［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の組成物の使用。
［１８］内臓脂肪低下剤、又はエネルギー消費量増加剤を製造するための上記［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の組成物の使用。
［１９］筋力低下症の予防及び／又は改善剤、筋力回復のためのリハビリテーションの効果促進剤、内臓脂肪増加に伴う脂質代謝異常の予防及び／又は改善剤、内臓脂肪増加に伴う高血糖の予防及び／又は改善剤、内臓脂肪増加に伴う脂肪肝の予防及び／又は改善剤、内臓脂肪増加に伴う肝臓機能低下の予防及び／又は改善剤、基礎エネルギー消費量の低下の予防及び／又は改善剤、基礎体温の低下の予防及び／又は改善剤、炎症性サイトカインの上昇を伴わない筋肉量低下の予防及び／又は改善剤、低栄養状態の改善剤、運動器低下の改善剤、ロコモティブシンドロームの予防及び／又は改善剤、転倒の防止剤、並びに、スポーツにおける筋肉量の増加剤からなる群より選ばれる少なくとも１種を製造するための上記［１］〜［１０］のいずれか１つに記載の組成物の使用。

本発明に係る栄養組成物は、筋肉量の増加及び／又は筋肉量の低下抑制に効果を奏する。また、本発明に係る栄養組成物は、エネルギー消費量増加に効果を奏する。また、本発明に係る栄養組成物は、脂肪利用亢進などによるエネルギー消費量を増加させる効果に起因して、特に内臓脂肪低下に有用であり、また内臓脂肪増加に伴う脂質代謝異常、高血糖、脂肪肝、肝機能低下の予防及び／又は改善に有用である。また、本発明に係る栄養組成物は、脂肪エネルギー供給などによる筋肉量の増加又は筋肉量の低下抑制によって、サルコペニア、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の予防及び／又は改善、筋力回復のためのリハビリテーションの効果促進、低栄養状態の改善、運動器低下の改善、ロコモティブシンドロームの予防及び／又は改善、転倒の防止、スポーツにおける筋肉量の増加などにも有用である。また、本発明の栄養組成物は、基礎エネルギー消費量の低下予防及び／又は改善、基礎体温の低下予防及び／又は改善にも有効である。さらに、本発明の栄養組成物は、安全性が高く、腎機能が減弱した高齢者においても、過剰なタンパク負荷をかけずに、長期にわたって使用することができる。

試験例１の１Ａ〜１Ｄ群の腸間膜脂肪重量及び被覆筋重量を示す。 試験例２の２Ａ〜２Ｄ群の腸間膜脂肪重量及び被覆筋重量を示す。 試験例３の３Ａ群及び３Ｂ群の呼吸商及びエネルギー消費量を示す。 試験例３の３Ａ群及び３Ｂ群の核内コード遺伝子のDNA量（chDNA）に対するミトコンドリア遺伝子のDNA量（mtDNA）の割合を示す。

本発明に係る栄養組成物は、遊離リジン、リジンを含むジペプチド及びリジン塩類よりなる群から選ばれる１種以上を組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１ｇ〜１０．０ｇ含有し、ｎ−３系脂肪酸を組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１７ｇ〜５．００ｇ含有してなる。

本発明で使用するリジンは、必須アミノ酸の一つであり、とうもろこし、小麦などを主食とする場合に制限アミノ酸となり、特に動物飼育用の試料に添加されて効率的な動物の成長に寄与するアミノ酸として有効利用されている。また、本発明で使用するリジンは、遊離形態、ジペプチド形態または塩の形態等であれば、いかなる形態であってもよい（以下、本明細書において「リジン」とは、遊離リジン、リジンを含むジペプチド、リジン塩類等を包含する概念を意味する）。本発明に係る栄養組成物は、含有するリジンの形態が、遊離形態、ジペプチド形態または塩の形態等であることにより、腎機能が減弱した高齢者においても、過剰なタンパク負荷をかけずに、長期にわたって使用することができる。また、本発明で使用するリジンは、Ｌ体、Ｄ体およびＤＬ体のいずれであっても良いが、Ｌ体が最も好適に用いられる。種々の形態のリジンは、単独で用いることができ、２種類以上を併用して用いることもできる。本発明のリジンの形態を制限するものではないが、例を挙げると、リジン塩類として、酸付加塩や塩基との塩等を挙げることができ、リジンに付加して塩を形成する酸としては、例えば、塩化水素、臭化水素、硫酸、リン酸等の無機酸；酢酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸、モノメチル硫酸等の有機酸；グルタミン酸塩、アスパラギン酸等の酸性アミノ酸等が挙げられ、また、リジンと塩を形成する塩基の例としては、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム等の金属の水酸化物または炭酸化物、あるいはアンモニア等の無機塩基；エチレンジアミン、プロピレンジアミン、エタノールアミン、モノアルキルエタノールアミン、ジアルキルエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン等の有機塩基が挙げられる。より具体的には、リジン塩類としては、例えば、リジン塩酸塩、リジン酢酸塩、リジングルタミン酸塩、リジンアスパラギン酸塩等が挙げられる。また、本発明において「ジペプチド」とは、アミノ酸２分子がペプチド結合してなるアミノ酸２量体をいい、「リジンを含むジペプチド」とは、ジペプチドを構成するアミノ酸２分子のうち、少なくとも１分子（好ましくは２分子）がリジンであるジペプチドをいう。リジンを含むジペプチドとして、例えば、リジルリジン等が挙げられる。これらのリジンのうち、食品としての使用経験の観点から、塩の形態のリジンを使用することが好ましく、Ｌ−リジン塩酸塩、Ｌ−リジン酢酸塩およびＬ−リジングルタミン酸塩を使用することが特に好ましい。また、形態により、風味、溶解させた場合のｐＨ等が異なるため、用途によってリジンの形態を適宜使い分けることができる。

上記リジンの含有量は、組成物１００ｋｃａｌあたり０．１ｇ〜１０．０ｇが好ましく、アミノ酸栄養バランスの観点から、より好ましくは０．２〜５．０ｇであり、さらに好ましくは０．２５〜４．５ｇである。リジンの含有量が組成物１００ｋｃａｌあたり０．１ｇ未満であると、体タンパクの構成やエネルギー源として利用されるため、所望の効果が期待できず、逆に、１０．０ｇを超えると、単一のアミノ酸を多量に摂取することになりアミノ酸バランスの点からあまり好ましくない。なお、本明細書において、リジンの量は遊離形態換算量である。
また、リジンの１日あたりの摂取量は、年齢、性別、体重、食事の状況などにより個別に定められるが、アミノ酸栄養バランスの観点から、ヒトの体重１ｋｇあたり２０ｍｇ〜４００ｍｇが好ましく、４０ｍｇ〜２００ｍｇがより好ましい。リジンの１日あたりの最大許容摂取量は明確になっていないが、ヒトの体重１ｋｇあたり２０ｇより多い場合、単一のアミノ酸を多量に摂取することになり、アミノ酸バランスの点からあまり好ましくない。

本発明に係る栄養組成物において用いるｎ−３系脂肪酸は、炭化水素鎖の末端のメチル基から３番目に二重結合を有する不飽和脂肪酸であり、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、α−リノレン酸及びドコサペンタエン酸等が例示される。これらは単独で用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。

上記ｎ−３系脂肪酸は、例えば、魚油、シソ油、アマニ油等の油脂類に豊富に含まれており、本発明においては、これら油脂類から抽出、精製して用いることができる。また、化学合成法、発酵法等により製造したものを用いることもでき、食品用に上市されている市販品を用いることもできる。さらに、脂質源として、前記したｎ−３系脂肪酸を豊富に含む油脂類をそのまま用いることもできる。

ｎ−３系脂肪酸の含有量は、組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１７ｇ〜５．００ｇが好ましく、０．１８ｇ〜４．００ｇがより好ましく、０．１９ｇ〜３．００ｇがさらに好ましい。かかる含有量が組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１７ｇより少ない場合には明確な効果は期待できない。逆に、組成物１００ｋｃａｌあたり総量で５．００ｇを超える場合には、風味の観点からあまり好ましくない。なお、日本においては、脂質所要量について、過去の脂質摂取状況をもとに、ｎ−３系脂肪酸は一日あたり２ｇ以上を摂取することが推奨されている。本発明においては、ｎ−３系脂肪酸の含有量が前記範囲内になりさえすれば、ｎ−３系脂肪酸を含有する油脂類をそのまま用いてもよく、また、ｎ−３系脂肪酸又はこれを豊富に含有する油脂類をその他の油と混合して用いてもよい。

本発明に係る栄養組成物において用いるｎ−３系脂肪酸は、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸よりなる群から選ばれる１種以上を含有することが好ましく、特にエイコサペンタエン酸を含有することが好ましい。ｎ−３系脂肪酸がエイコサペンタエン酸を含有する場合、該エイコサペンタエン酸の含有量は、組成物１００ｋｃａｌあたり１０ｍｇ〜３０００ｍｇが好ましい。より好ましくは２０ｍｇ〜２０００ｍｇ、さらに好ましくは５０ｍｇ〜１０００ｍｇである。また、ｎ−３系脂肪酸の総量に対するエイコサペンタエン酸の含有量は、通常１重量％〜６０重量％であり、好ましくは５重量％〜４０重量％である。なお、日本においては、脂質所要量について、過去の脂質摂取状況をもとに、エイコサペンタエン酸はドコサへキサエン酸とあわせて、一日あたり１ｇ以上を摂取することが推奨され、上限はついては特に定められていない

本発明に係る栄養組成物は、さらにバリン、ロイシンおよびイソロシンよりなる群から選ばれる１種以上の分岐鎖アミノ酸を組成物１００ｋｃａｌあたり総量で１．０ｇ〜２０ｇ含有することが好ましい。

本発明に係る栄養組成物において用いる分岐鎖アミノ酸は、バリン、ロイシン及びイソロイシンよりなる群から選ばれる１種以上を含む。これら分岐鎖アミノ酸の形態は特に制限されず、例えば、タンパク質の形態、ペプチドの形態、塩の形態、遊離の形態等のいずれの形態でも用いることもできるが、腎臓への負荷を考慮しタンパク質の全体量を増やさないためには、遊離の形態が最も好ましい。この場合、Ｌ体、Ｄ体、ＤＬ体のいずれをも用いることができるが、Ｌ体が最も好適に用いられる。また、前記分岐鎖アミノ酸としては、これらを含有する動植物等から抽出し精製したものや、化学合成法、発酵法、遺伝子組み換え法によって得られるもののいずれを使用してもよい。

上記の分岐鎖アミノ酸は、組成物１００ｋｃａｌあたり総量で１．０ｇ程度以上含有させた場合、より高い有効性が認められ、さらに強力な効果を期待する場合は分岐鎖アミノ酸を増量することができる。ただし、風味の悪化も勘案し、該組成物の１００ｋｃａｌあたりの含有量は、総量で１．０ｇ〜２０ｇとするのが好ましく、１．２ｇ〜１２ｇとするのがより好ましい。分岐鎖アミノ酸の含有量が組成物１００ｋｃａｌあたり総量で２０ｇを超えると、特定のアミノ酸を多量に摂取することになりアミノ酸バランスの点からあまり好ましくない。

上記の分岐鎖アミノ酸は、例えば、遊離の形態、ペプチドの形態、タンパク質の形態、塩の形態等のいずれの形態でもよい。本発明に係る栄養組成物において用いる分岐鎖アミノ酸は、全てが単一の形態であってもよいし、あるいは異なる２種以上の形態であってもよい。例えば、本発明に係る栄養組成物において用いる分岐鎖アミノ酸は、遊離の形態の分岐鎖アミノ酸のみからなるものであってもよいし、遊離の形態の分岐鎖アミノ酸とタンパク質の形態の分岐鎖アミノ酸とを含むもの等であってもよい。本発明に係る栄養組成物が遊離の形態の分岐鎖アミノ酸を含有する場合、その含有量は、組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１ｇ〜１５ｇが好ましく、０．２５〜１２ｇがより好ましい。
なお、本明細書において、分岐鎖アミノ酸の量は遊離形態換算量である。

本発明に係る栄養組成物において用いる分岐鎖アミノ酸は、バリン、ロイシン及びイソロイシンを含むことが好ましく、その場合、イソロイシン、ロイシン及びバリンの配合割合は、通常、重量比で、イソロイシン：ロイシン：バリン＝１．０：１．５〜３．０：０．５〜１．５である。特に、ロイシンの比率をバリンに対し、１．５〜３倍程度に高めることが好ましい。

本発明に係る栄養組成物には、ビタミンＢ群を含有させることができる。

ビタミンＢ群としては、例えば、チアミン等のビタミンＢ_１；リボフラビン等のビタミンＢ_２；ピリドキシン、ピリドキサール、ピリドキサミン等のビタミンＢ_６；シアノコバラミン等のビタミンＢ_１２が挙げられる。これらは単独で用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。ビタミンＢ群は糖質、タンパク質、脂質の代謝に重要な役割を果たす。ビタミンＢ群の含有量は、本発明に係る組成物１００ｋｃａｌあたり、ビタミンＢ_１は０．２ｍｇ〜２０．０ｍｇ、ビタミンＢ_２は０．２５ｍｇ〜２０．０ｍｇ、ビタミンＢ_６は０．３ｍｇ〜２０．０ｍｇ、ビタミンＢ_１２は０．２０μｇ〜１０．０μｇが好ましい。

また、本発明に係る栄養組成物には、抗酸化ビタミンや抗酸化ミネラルを添加することもできる。抗酸化ビタミンとしては、例えば、レチノール、レチナール、レチノイン酸等のビタミンＡ；アスコルビン酸等のビタミンＣ；β−カロテン等のカロテノイド；α−トコフェロール等のビタミンＥ等が挙げられ、抗酸化ミネラルとしては、例えば、亜鉛、セレン等が挙げられる。これらは単独で用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。筋タンパク合成のエネルギー源として脂肪を利用した場合にはラジカルを産生させ、過剰になると酸化ストレスを生じてしまうため、その予防及び／又は改善をするには抗酸化剤の添加が好ましい。抗酸化ビタミンおよび抗酸化ミネラルの含有量は、十分な抗酸化作用を得るためには、本発明に係る組成物１００ｋｃａｌあたり、ビタミンＡは５０μｇレチノール当量〜２５００μｇレチノール当量、ビタミンＣは１０ｍｇ〜７００ｍｇ、ビタミンＥはα−トコフェロール換算量で１ｍｇ〜５０ｍｇ、亜鉛は１ｍｇ〜５０ｍｇ、セレンは１．０μｇ〜５０．０μｇが好ましい。

本発明に係る栄養組成物には、上述のビタミンＢ群、抗酸化ビタミン以外のビタミン類（例、ビタミンＤ、ビタミンＫ、ナイアシン、葉酸、パントテン酸、ビオチン等）や、上述の抗酸化ミネラル以外のミネラル類（例、ナトリウム、カルシウム、鉄、リン、マグネシウム、カリウム、銅、ヨウ素、マンガン、クロム、モリブデン等）を含有させることもできる。これらは単独で用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。

本発明に係る栄養組成物には、脂質源として、中鎖脂肪酸油を含有させることができる。「中鎖脂肪酸」とは、カプリル酸、カプリン酸等の炭素数が好ましくは８〜１０の脂肪酸をいい、「中鎖脂肪酸油」とは、前記中鎖脂肪酸のトリグリセリド等を含む油脂類をいう。中鎖脂肪酸は、一般的に油脂類に存在する長鎖脂肪酸に比べて約４倍消化吸収が早く、吸収後はリンパ管を通らずに門脈を経て肝臓へ運ばれ、速やかに代謝されるという特性を有するため、エネルギー源として好適に利用され得る。本発明の目的には、中鎖脂肪酸油としては、例えば、ヤシ油、パーム油、パーム核油など、中鎖脂肪酸を多く含有する油脂類を用いることができる。ヤシ油やパーム油等としては、ヤシ等の天然植物より抽出し精製したものを用いてもよいが、市販品を用いるのが便利である。本発明においては、脂質の総量に対して中鎖脂肪酸油を１０重量％〜６５重量％含有させるのが適切である。

本発明に係る栄養組成物には、脂質源として、中鎖脂肪酸油の他に、例えば、綿実油、ひまわり油、落花生油、なたね油、大豆油、サフラワー油、オリーブ油、こめ油、コーン油、ごま油、カカオバター等の食用植物油、牛脂、豚脂、魚油、バター、バターオイル等の食用動物油、ショートニングに代表される加工油脂等を含有させることができる。これらは単独で用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。

本発明に係る栄養組成物には、炭水化物源として、例えば、糖質、食物繊維等を含有させることをできる。糖質としては、例えば、デキストリン、オリゴ糖、蔗糖、グルコース、果糖、でんぷん等が挙げられ、食物繊維としては、例えば、水溶性食物繊維（例、難消化性デキストリン、ペクチン、ガラクトマンナン等）、不溶性食物繊維（例、大豆や小麦に由来するフスマ、結晶セルロース等）等が挙げられる。これらは単独で用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。

本発明に係る栄養組成物には、タンパク源として、アミノ酸、ペプチド、タンパク質等を含有させることができるが、タンパク質としては、例えば、カゼイン、酸カゼイン、カゼインナトリウム、カゼインカルシウム、ホエータンパク質、乳清ホエータンパク質、魚肉タンパク質、卵タンパク質等やこれらの加水分解物を例とする動物性タンパク質、及び大豆タンパク質、小麦タンパク質、とうもろこしタンパク質等やこれらの加水分解物を例とする植物性タンパク質等を含有させることができる。これらのタンパク源の、本発明に係る栄養組成物における含有量は、本発明に係る組成物１００ｋｃａｌあたり総量で２〜２０ｇが好ましい。なお、これらのタンパク源が分岐鎖アミノ酸を含む場合、その分岐鎖アミノ酸の量も、前掲の本発明の組成物における分岐鎖アミノ酸の総含有量の算出において、算入されることは言うまでもない。
なお、本発明に係る栄養組成物が、タンパク質の形態の分岐鎖アミノ酸を含有する場合、当該タンパク質の量も含んだ、本発明に係る栄養組成物におけるタンパク源の総含有量は、本発明に係る組成物１００ｋｃａｌあたり２〜２０ｇであることが好ましいが、特に、本発明に係る栄養組成物において用いる分岐鎖アミノ酸が、遊離の形態の分岐鎖アミノ酸のみからなる場合には、本発明に係る栄養組成物におけるタンパク源の含有量は、本発明に係る組成物１００ｋｃａｌあたり総量で１．０〜１５ｇであることが好ましい。

本発明に係る栄養組成物は、経口摂取が不十分な患者に対しては、投与チューブを用いて直接腸や胃に給与し、経口摂取可能な場合には、飲食品として摂取することができる。本発明においては、リジンとｎ−３系脂肪酸、さらにバリン、ロイシン及びイソロイシンよりなる群から選ばれる１種以上の分岐鎖アミノ酸等を、そのまま混合して栄養組成物として摂取させることもできるが、薬学的に許容される医薬品担体とともに製剤化して医薬品として提供することもでき、又は飲食品用素材もしくは食品添加物を加えて特定保健用食品、栄養機能食品等の保健機能食品、栄養補助食品、その他の健康食品などの飲食品として提供することもできるし、通常の飲食品として提供することもできる。

本発明に係る栄養組成物を製剤化して提供する場合には、例えば、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、乳剤、アンプル剤等の液状製剤；ゲル剤、ガム剤、ドロップス剤、散剤、顆粒剤、丸剤、錠剤（糖衣錠、フィルムコーティング錠を含む）、カプセル剤、分包剤、粉末剤等の固形製剤などとすることができる。

本発明に係る栄養組成物を製剤化する際に用い得る薬学的に許容される医薬品担体としては、例えば、結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等のセルロース及びその誘導体；アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム等の天然高分子化合物などの賦形剤；グアーガム、ステアリン酸、高分子ポリビニルピロリドン等の結合剤；タルク、ポリエチレングリコール６０００等の滑沢剤；アジピン酸等の崩壊剤、ショ糖脂肪酸エステル、大豆レシチン、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンモノステアリン酸エステル等の界面活性剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシビニルポリマー、キサンタンガム、ゼラチン等の増粘剤；アクリル酸エチル・メタクリル酸メチルコポリマー分散液、カラメル、カルナウバロウ、セラック、プルラン等のコーティング剤；クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸、酢酸ナトリウム、水酸化ナトリウム等のｐＨ調整剤；エリソルビン酸、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロピル等の抗酸化剤；アスパルテーム、カンゾウエキス、サッカリン等の嬌味剤；安息香酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、ソルビン酸、ソルビン酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸ブチル等の防腐剤；ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、カルミン、食用青色１号、食用黄色４号、食用赤色２号等の着色剤などが挙げられる。

本発明に係る栄養組成物を飲食品として提供する場合には、例えば、飲料等の液状製品、牛乳、乳飲料、ヨーグルト等の乳状製品、ゼリー様飲料、ゼリー等のゼリー状製品、ガム状製品、粉末状製品、顆粒状製品、シート状製品、カプセル状製品、タブレット状製品、スナックバー、クッキー等の固形状製品などとすることができる。

本発明に係る栄養組成物を飲食品とする際に用い得る食品用素材又は食品添加物としては、例えば、甘味料、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、発色剤、漂白剤、防かび剤、ガムベース、苦味料、酵素、光沢剤、酸味料、調味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料、香辛料等が挙げられる。

なお、本発明に係る栄養組成物を飲食品とする場合、１食摂取量単位の包装形態とすることができる。「１食摂取量単位の包装形態」とは、１食あたりに摂取する飲食品の量があらかじめ定められた形態であり、例えば、飲料、ガム、ゼリー、ヨーグルト、クッキー等の場合にはパック、袋、瓶、箱等の容器により１回の摂取量を包装する形態が挙げられ、顆粒、粉末、スラリー状等の食品の場合には、パックや袋等により１回の摂取量を個別包装する形態が挙げられる。特に、飲食品が特定保健用食品、栄養機能食品等の保健機能食品、栄養補助食品、病者用食品等の特別用途食品、その他の健康食品などである場合には、本発明に係る組成物が１食あたりの摂取単位量の形態で包装された形態や、本発明に係る組成物が懸濁あるいは溶解した飲料が、１食あたりの飲み切りの形態で瓶等に充填された形態などが挙げられる。

本発明に係る栄養組成物の１日あたりの摂取量は、年齢、性別、体重、食事の状況などにより、個別に定められるが、本発明の栄養組成物により、成人１日あたり５０ｋｃａｌ〜２０００ｋｃａｌ程度を摂取するのが適切である。前記の量を、１日１回〜３回程度に分けて摂取するのが好ましい。本発明に係る栄養組成物を１食摂取量単位の包装形態の飲食品とする場合、前記により定められる１回あたりの摂取量ごとに個別包装する。

なお、本発明に係る栄養組成物は、一般的な製剤化技術及び食品製造技術により製造することができる。

本発明に係る栄養組成物は、筋肉量の増加及び／又は筋肉量の低下抑制用の医薬品、飲食品等として有用である。また、本発明に係る栄養組成物は、エネルギー消費量増加用の医薬品、飲食品等として有用である。また、本発明に係る栄養組成物は、炎症性サイトカインの上昇を伴わない筋肉量低下の予防及び／又は改善用の医薬品、飲食品等として有用である。

本発明に係る栄養組成物は、筋力低下症の予防及び／又は改善用の医薬品、飲食品等として有用である。筋力低下症は、サルコペニアとも呼ばれ、四肢筋力の低下に伴う活動量の低下さらには慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を引き起こし、本発明に係る栄養組成物はこれら筋力低下症を有効に予防及び／又は改善することができる。

本発明に係る栄養組成物は、筋力回復のためのリハビリテーションの効果促進用の医薬品、飲食品等として有用である。リハビリテーションによる筋力の回復には時間を要し、拘縮が進行する前に、筋肉機能を回復させる必要がある。本発明に係る組成は、筋肉量を増加することができ、リハビリテーションの効果促進に有用である。また、低栄養状態の改善、運動器低下の改善、ロコモティブシンドロームの予防及び／又は改善、転倒の防止など、またスポーツにおける筋肉量の増加などにも有用である。

本発明に係る栄養組成物は、内臓脂肪の低下用の医薬品、飲食品等として有用である。内臓脂肪の増加はインスリン抵抗性を来たし、インスリン抵抗性に関連する種々の疾患を発症又は進展させることになる。本発明に係る栄養組成物は内臓脂肪を有効に低下させることができる。

本発明に係る栄養組成物は、内臓脂肪増加に伴う脂質代謝異常の予防及び／又は改善用の医薬品、飲食品等として有用である。内臓脂肪が増加した際においては、高ＬＤＬコレステロール血症、高トリグリセリド血症、高レムナント血症、高小型高密度ＬＤＬ、低ＨＤＬコレステロール血症といった脂質代謝異常が見られる。かかる脂質代謝異常の結果、過酸化ＬＤＬコレステロール等の過酸化脂質の生成が増加し、アテローム性動脈硬化症が発症する危険性が高まる。本発明に係る栄養組成物は、内臓脂肪増加伴う血中ＬＤＬコレステロールの増加等の脂質代謝異常の発症を有効に抑制することができ、内臓脂肪増加に伴う脂質代謝異常の予防及び／又は改善に有用である。

本発明に係る栄養組成物は、内臓脂肪増加に伴う高血糖の予防及び／又は改善用の医薬品、飲食品等として有用である。内臓脂肪増加によるインスリン抵抗性は血液から細胞内へのグルコースの取り込み能を低下させ、高血糖を来たす。本発明に係る栄養組成物は、内臓脂肪増加伴う高血糖の予防及び／又は改善に有用である。

本発明に係る栄養組成物は、内臓脂肪増加に伴う脂肪肝及び肝機能低下の予防及び／又は改善用の医薬品、飲食品等として有用である。増加した代表的な内臓脂肪の腸間膜脂肪は、遊離脂肪酸を門脈血液に放出し、最も近い臓器である肝臓に脂肪を蓄積させる。一方で、インスリン抵抗性による高インスリン血症は肝臓での糖から脂肪への合成も盛んにさせる。更には、肝臓への脂肪蓄積は肝機能を悪化させる。本発明に係る栄養組成物は、内臓脂肪増加に伴う脂肪肝及び肝機能低下の予防及び／又は改善に有用である。

本発明に係る栄養組成物は、基礎エネルギー消費量の低下予防及び／又は改善用の医薬品、飲食品等として有用である。高齢者における基礎エネルギー消費量の低下は、体内のエネルギー利用が低下した状態を示し、エネルギー利用するタンパク質の合成などの代謝に大きな影響を及ぼす。また、摂取したエネルギーがエネルギー利用能低下の際には余分になり、その余ったエネルギーは脂肪として蓄えられてしまう。本発明に係る栄養組成物は、基礎エネルギー消費量の低下予防及び／又は改善に有用である。

本発明に係る栄養組成物は、基礎体温の低下予防及び／又は改善用の医薬品、飲食品等として有用である。低体温では代謝活動が弱まり、エネルギー産生や体タンパク質の合成が低下してしまう。特に、高齢者においては、体温調節能も減弱しており、低下した体温を上昇させることは容易ではない。本発明に係る栄養組成物は、基礎体温の低下予防及び／又は改善に有用である。

本発明に係る栄養組成物は、リジンとｎ−３系脂肪酸、さらにバリン、ロイシン及びイソロイシンよりなる群から選ばれる１種以上の分岐鎖アミノ酸を、粉体形などで汎用型の総合的な栄養組成物に添加することが可能である。

本発明に係る栄養組成物は、筋肉量が低下した人（例えば、高齢者、寝たきり者等）の筋肉量の増加及び／又は筋肉量の低下抑制に好ましく使用されるが、その筋タンパク合成のエネルギー源として、特に脂質代謝異常、高血糖、脂肪肝および肝機能低下に深く関与する内臓脂肪を利用した場合、特に有効である。これまで有効な栄養組成物がなかったこれらの人々には本発明の栄養組成物は大きな貢献をするものである。

次に実施例に基づいて本発明を説明する。

［実施例１］栄養組成物の調製
高齢者に対する最適栄養効果を熟考し、表１に示す栄養組成物を調製した。これを具現化するための液状物の原料配合量を表２に示す。各成分と乳化剤を水に添加して混合し、高圧乳化機にて、５００〜１，０００ｋｇ／ｃｍ^２の加圧下にて複数回乳化工程を繰り返し、乳化組成物を得た。アミノ酸組成は、組成物１００ｋｃａｌあたりＬ−ロイシン０．３８ｇ、Ｌ−バリン０．１９ｇ、Ｌ−イソロイシン０．２３ｇ、Ｌ−リジン０．３２ｇを添加した。この場合、タンパク質由来のものも含んだ分岐鎖アミノ酸（ロイシン、バリン、イソロイシン）の総量として組成物１００ｋｃａｌあたり１．４６ｇを含有することになる。この乳化組成物を、通常の充填機にてアルミ製の袋に充填し、レトルト殺菌機にて通常の条件下に滅菌した。本実施例に係る栄養組成物は、１年後においても全成分は安定に存在し、２５℃における粘度は９ｍＰａ・ｓであった。また、この調整液に増粘剤を添加し、とろみ調整栄養組成物（１，０００〜７，０００ｍＰａ・ｓ）あるいはゼリーを製造することができた。更に、添加するアミノ酸の量を２倍量にした場合も同様に製造することができた。この栄養組成物のカロリー密度は、１．０ｋｃａｌ／ｍｌであった。

［実施例２］総合栄養組成物の調製
実施例１と同様に、表３に示す栄養組成物を調製した。実施例１と同様に、各成分と乳化剤を水に添加して混合し、高圧乳化機にて５０〜５００ｋｇ／ｃｍ^２の加圧下、数回乳化工程を繰り返し、乳化組成物を得た。アミノ酸組成は、組成物１００ｋｃａｌあたりＬ−ロイシン０．２８ｇ、Ｌ−バリン０．１４ｇ、Ｌ−イソロイシン０．１４ｇ、Ｌ−リジン０．２８ｇを添加した。この場合、タンパク質由来のものも含んだ分岐鎖アミノ酸（ロイシン、バリン、イソロイシン）の総量として組成物１００ｋｃａｌあたり１．３０ｇを含有することになる。この乳化組成物を、通常の充填機にてアルミ製の袋に充填し、レトルト殺菌機にて通常の条件下に滅菌した。本実施例に係る栄養組成物は、１年後においても全成分は安定に存在し、２５℃における粘度は４，０００ｍＰａ・ｓであった。また、この調整液に適量の増粘剤を添加して更に粘度をつけ、とろみ調整栄養組成物（１，０００〜７，０００ｍＰａ・ｓ）あるいはゼリーを製造することができた。この栄養組成物のカロリー密度は、２．０ｋｃａｌ／ｍｌであった。

［実施例３］粉末栄養組成物の調製
表４に示す粉末タイプの栄養組成物を調製した。これを具現化するための液状物の原料配合量を表５に示す。各成分と乳化剤を適量の水に添加して混合し、乳化機にて２〜５０ｋｇ／ｃｍ^２の加圧下、数回乳化工程を繰り返し、乳化組成物を得た。この乳化組成物を噴霧乾燥し、粉末栄養組成物とした。アミノ酸組成は、組成物１００ｋｃａｌあたりＬ−ロイシン３．９ｇ、Ｌ−バリン２．４ｇ、Ｌ−イソロイシン２．０ｇ、Ｌ−リジン４．１ｇであった。この粉末栄養組成物を、通常の充填機にてアルミ製の袋に充填した。本実施例に係る粉末栄養組成物は、１年後においても全成分は安定に存在した。また、この粉末栄養組成物は、温水に溶解し栄養剤に混合しても、使用することができた。

［試験例１］内臓脂肪増加モデル動物におけるアミノ酸及びｎ−３系脂肪酸の強化効果の検討
本発明に係る栄養組成物において、アミノ酸とｎ−３系脂肪酸の内臓脂肪増加や筋肉量低下の改善効果を、以下の実験により検討した。すなわち、１０週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊ雄性マウスに表６に示す１Ｂ群と同じ高脂肪食を摂取させ、内臓脂肪増加モデルを作製後、３群に分け（各群Ｎ＝５−９）、それぞれ表６に示す組成の実験食を２週間摂取させた。１Ｂ群には飽和脂肪酸の豊富な牛脂を多く含む高脂肪食を継続して、摂取させた。１Ｃ群には標準的な組成の実験食を摂取させた。１Ｄ群には強化した組成として、タンパク、脂肪の総量を変えずにリジン、ＢＣＡＡ（ロイシン、バリン、イソロイシンからなる３種の分岐鎖アミノ酸）、魚油をそれぞれ実験食１００ｋｃａｌあたり０．３２ｇ、０．８ｇ、０．２４ｇ置換した実験食を摂取させた。この場合、１Ｄ群においてはタンパク質由来も含んだＢＣＡＡの総量として実験食１００ｋｃａｌあたり１．４６ｇ、ｎ−３系脂肪酸の総量として０．２４ｇ、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）として６７ｍｇを含有することになる。１Ａ群には正常対照群として、高脂肪食を摂取させずに、試験期間を通じて標準的な組成の実験食を摂取させた。実験食摂取２週後に１６時間絶食させ、腸間膜脂肪重量及び被覆筋重量を測定した。結果を図１に示す。

高脂肪食を摂取させた１Ｂ群の体重は通常食摂取の１Ａ群の１．２倍となった。その後、実験食を摂取させた評価期間をとおして、１Ｄ群ではカロリー摂取量が同じであるにもかかわらず、体重は１Ｃ群に比べ低値となった（１Ｄ：３１．７±３．３ｇ、１Ｃ：３４．４±１．７ｇ）。また、図１に示すように、１Ｂ群の腸間膜脂肪重量は、１Ａ群に比べ有意に上昇し、被覆筋重量においては逆に１Ａ群に比べ有意に低下した。一方で、１Ｄ群の腸間膜脂肪重量は１Ｃ群に比べ有意に低下し、被覆筋重量においては有意に上昇した。この高脂肪食摂取のモデルにおいて、血漿中ＣＲＰ（Ｃ反応性蛋白）は各群間で差は認められなかった（１Ａ群：７．７±２．４ｎｇ／ｍｌ、１Ｂ群：９．０±３．３ｎｇ／ｍｌ、１Ｃ群：７．０±５．３ｎｇ／ｍｌ、１Ｄ群：８．６±３．９ｎｇ／ｍｌ）。

上記の試験結果から、リジン、ＢＣＡＡ、エイコサペンタエン酸を強化した食事が、内臓脂肪重量である腸間膜脂肪重量を低下させ、被覆筋重量を増加させ得ることを見出した。

［試験例２］本発明で用いるアミノ酸（リジン、ＢＣＡＡ）とｎ−３系脂肪酸の単独効果と併用効果
試験例１の結果、腸間膜脂肪重量低下及び被覆筋重量増加作用を示すのに、本発明で用いるアミノ酸とｎ−３系脂肪酸の強化が必要であることが明らかとなったが、それぞれの成分が単独でこのような効果を示すかどうかは明確ではない。そこで、本発明で用いるアミノ酸及びｎ−３系脂肪酸をそれぞれ単独で強化および併用強化した、以下の検討を行った。すなわち、試験例１と同様に内臓脂肪増加モデルを作製後、４群に分け（各群Ｎ＝５〜９）、それぞれ表７に示す組成の実験食を２週間摂取させた。２Ａ群には標準的な組成の実験食を摂取させた。２Ｄ群には強化した組成として、タンパク質、脂肪の総量を変えずにリジン、ＢＣＡＡ、魚油をそれぞれ１００ｋｃａｌあたり０．３２ｇ、０．８ｇ、０．２４ｇ置換した実験食を摂取させた。この場合、２Ｄ群においてはタンパク質由来も含んだＢＣＡＡの総量として実験食１００ｋｃａｌあたり１．４６ｇ、ｎ−３系脂肪酸の総量として０．２４ｇ、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）として６７ｍｇを含有することになる。更に、本発明で用いるアミノ酸、ｎ−３系脂肪酸のそれぞれを単独で強化した実験食を摂取させた群として、２Ｂ群、２Ｃ群を設けた。各実験食を摂取２週後に１６時間絶食させ、腸間膜脂肪重量及び被覆筋重量を測定した。結果を図２に示す。

実験食摂取期間の総カロリー摂取量は各群間で差は認められなかった。図２に示すように２Ｄ群では内臓脂肪である腸間膜脂肪重量を有意に低下させ、被覆筋重量を有意に上昇させた。それに対し、２Ｂ群、２Ｃ群における腸間膜脂肪重量の低下および被覆筋重量の上昇は、２Ｄ群の効果に比べ、明らかに弱いものであり、２Ｂ群と２Ｃ群のそれぞれの効果を足しても２Ｄ群の効果には及ばないものであった。

上記の結果から、強化食による腸間膜脂肪低下作用および被覆筋上昇作用は本発明で用いるアミノ酸、ｎ−３系脂肪酸の単独の効果ではなく、アミノ酸とｎ−３系脂肪酸が合わさることで相乗効果を示したものと考えられた。すなわち本試験において、リジンとｎ−３系脂肪酸、さらに分岐鎖アミノ酸を併用することの有用性が示された。

［試験例３］本発明で用いるアミノ酸及びｎ−３系脂肪酸のエネルギー代謝促進効果及びミトコンドリア増加効果
次いで、本発明に係るアミノ酸及びｎ−３系脂肪酸を強化した栄養組成物が、呼気ガス代謝測定装置を用いたエネルギー代謝測定へ及ぼす影響を検討した。すなわち、試験例１と同様に作製した内臓脂肪増加モデルにおいて、表８に示すように標準的な組成の実験食（３Ａ群）または強化した組成の実験食（３Ｂ群）を摂取させ、評価を実施した。摂餌量安定のため１週間の実験食馴化期間を設け、その後２週間内に各ケージに一匹ずつ入れ、酸素消費量（ｍｌ／ｍｉｎ）および二酸化炭素産生量（ｍｌ／ｍｉｎ）を測定した（小動物用代謝計測システムＭＫ−５０００ ＲＱ、室町機械）。測定時の餌は実験食を給与し、摂餌量を測定した。呼吸商は二酸化炭素産生量÷酸素消費量で算出し、エネルギー消費量はWeirの式［エネルギー消費量（ｋｃａｌ／ｍｉｎ）＝３．９（ｋｃａｌ）×酸素消費量（ｍｌ／ｍｉｎ）＋１．１（ｋｃａｌ）×二酸化炭素産生量（ｍｌ／ｍｉｎ）］を用いて算出した。結果を図３に示す。

図３に示すように、３Ｂ群の呼吸商は食事摂取期間（９：００〜１６：００；食事）、食後の暗期期間（１６：００〜１９：００；暗期）において、３Ａ群よりも有意に低下し、食事による直接的な影響を受けない明期（１９：００〜９：００：明期）においても３Ａ群より有意に低下した。また、３Ｂ群のエネルギー消費量は、いずれの期間でも３Ａ群よりも有意な増加および増加傾向が認められた。

また、本発明の栄養組成物のミトコンドリア増加効果について検討した。すなわち、試験例１と同様に作製した内臓脂肪増加モデルにおいて、表８に示すように標準的な組成の実験食（３Ａ群）または強化した組成の実験食（３Ｂ群）を摂取させ、試験最終日に、肝臓、被覆筋肉を迅速に採取し、凍結保存した。凍結保存した肝臓（１００ｍｇ）および被覆筋肉（２００ｍｇ）のそれぞれから、ISOGEN（日本ジーン）を用いてDNAを抽出した。５０ｎｇのDNAに、表９に示したミトコンドリア上のd-loopのprimerと、SYBER GREEN Master Mix（ABI）を加え、ABI 7700 detectorで増幅及び定量解析を行った。DNA量の補正には、染色体上の遺伝子cyclophillin A（イントロンコード部分）を用いた。合成したプライマーについてはPCR反応後にアガロース電気泳動を行い、目的の産物ができていることを確認した。

ミトコンドリアは細胞の脂肪燃焼において重要な役割を担っていることから、細胞内のミトコンドリア数の解析を行った。細胞内には核内の染色体DNAは一つであるのに対し、ミトコンドリアの数は決まっていない。そのため、細胞内のミトコンドリア量を推定するのに、ミトコンドリアコード遺伝子のDNA量と核内コード遺伝子のDNA量の割合をとる方法を実施した。結果を図４に示す。

図４に示すように、３Ｂ群のミトコンドリアDNA量は、肝臓、被覆筋肉の両方において、３Ａ群に比べ有意に上昇した。

本試験により、リジンとｎ−３系脂肪酸、さらに分岐鎖アミノ酸を含有した栄養組成物が、脂肪利用する部位におけるミトコンドリア数を増加させて脂肪利用を高め、体温の上昇などに繋がるエネルギー消費量を増大させ得ることが示唆された。

本発明に係る栄養組成物は、筋肉量の増加及び／又は筋肉量の低下抑制に効果を奏する。また、本発明に係る栄養組成物は、エネルギー消費量増加に効果を奏する。また、本発明に係る栄養組成物は、脂肪利用亢進などによるエネルギー消費量増加によって、特に内臓脂肪低下に有用であり、また内臓脂肪増加に伴う脂質代謝異常、高血糖、脂肪肝、肝機能低下の予防及び／又は改善に有用である。また、本発明に係る栄養組成物は、脂肪エネルギー供給などによる筋肉量の増加又は筋肉量の低下抑制によって、サルコペニア、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の予防及び／又は改善、筋力回復のためのリハビリテーションの効果促進、低栄養状態の改善、運動器低下の改善、ロコモティブシンドロームの予防及び／又は改善、転倒の防止、スポーツにおける筋肉量の増加などにも有用である。また、本発明の栄養組成物は、基礎エネルギー消費量の低下予防及び／又は改善、基礎体温の低下予防及び／又は改善にも有効である。さらに、本発明の栄養組成物は、安全性が高く、腎機能が減弱した高齢者においても、過剰なタンパク負荷をかけずに、長期にわたって使用することができる。

本発明は、日本で出願された特願2011-089626を基礎としており、その内容は本明細書に全て包含されるものである。

Claims (10)

1. 遊離リジン、リジンを含むジペプチド及びリジン塩類よりなる群から選ばれる１種以上と、ｎ−３系脂肪酸と、バリン、ロイシンおよびイソロイシンよりなる群から選ばれる１種以上の分岐鎖アミノ酸とを含有する栄養組成物であって、
   遊離リジン、リジンを含むジペプチド及びリジン塩類よりなる群から選ばれる１種以上の含有量が組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１ｇ〜１０．０ｇであり、
   ｎ−３系脂肪酸の含有量が組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１７ｇ〜５．００ｇであり、
   分岐鎖アミノ酸が遊離又は塩の形態である、内臓脂肪低下用又はエネルギー消費量増加用栄養組成物。
2. バリン、ロイシンおよびイソロイシンよりなる群から選ばれる１種以上の分岐鎖アミノ酸の含有量が、組成物１００ｋｃａｌあたり総量で１．０ｇ〜２０ｇである、請求項１記載の栄養組成物。
3. バリン、ロイシンおよびイソロイシンよりなる群から選ばれる１種以上の、遊離の形態の分岐鎖アミノ酸の含有量が、組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１ｇ〜１５ｇである、請求項１又は２記載の栄養組成物。
4. ｎ−３系脂肪酸が、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸よりなる群から選ばれる１種以上を含有する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の栄養組成物。
5. エイコサペンタエン酸を組成物１００ｋｃａｌあたり１０ｍｇ〜３０００ｍｇ含有する、請求項４記載の栄養組成物。
6. 組成物１００ｋｃａｌあたり０．２ｍｇ〜２０．０ｍｇのビタミンＢ１、
   組成物１００ｋｃａｌあたり０．２５ｍｇ〜２０．０ｍｇのビタミンＢ２、
   組成物１００ｋｃａｌあたり０．３ｍｇ〜２０．０ｍｇのビタミンＢ６、及び、
   組成物１００ｋｃａｌあたり０．３μｇ〜２０．０μｇのビタミンＢ１２よりなる群から選ばれる１種以上を含有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の栄養組成物。
7. 組成物１００ｋｃａｌあたり５０μｇレチノール当量〜２５００μｇレチノール当量のビタミンＡ、
   組成物１００ｋｃａｌあたり１０ｍｇ〜７００ｍｇのビタミンＣ、及び、
   組成物１００ｋｃａｌあたりα−トコフェロール換算量で１ｍｇ〜５０ｍｇのビタミンＥよりなる群から選ばれる１種以上を含有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の栄養組成物。
8. 組成物１００ｋｃａｌあたり１ｍｇ〜５０ｍｇの亜鉛及び／又は組成物１００ｋｃａｌあたり１．０μｇ〜５０．０μｇのセレンを含有する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の栄養組成物。
9. 中鎖脂肪酸油を含有し、中鎖脂肪酸油の含有量が、脂質の総量に対して１０重量％〜６５重量％である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の栄養組成物。
10. 内臓脂肪低下剤、又はエネルギー消費量増加剤を製造するための、
    遊離リジン、リジンを含むジペプチド及びリジン塩類よりなる群から選ばれる１種以上と、ｎ−３系脂肪酸と、バリン、ロイシンおよびイソロイシンよりなる群から選ばれる１種以上の分岐鎖アミノ酸とを含有し、
    遊離リジン、リジンを含むジペプチド及びリジン塩類よりなる群から選ばれる１種以上の含有量が栄養組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１ｇ〜１０．０ｇであり、
    ｎ−３系脂肪酸の含有量が栄養組成物１００ｋｃａｌあたり総量で０．１７ｇ〜５．００ｇであり、
    分岐鎖アミノ酸が遊離又は塩の形態である栄養組成物の使用。