JP5890151B2 - チロシナーゼ活性促進剤及びその製造方法 - Google Patents
チロシナーゼ活性促進剤及びその製造方法 Download PDFInfo
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Description
本発明の第2の態様は、前記米発酵抽出物は、前記米発酵産物から分子量10,000Da以上の画分を抽出して得られたものであるチロシナーゼ活性促進剤を要旨とする。
本発明の第3の態様は、前記米発酵抽出物は、前記米発酵産物から分子量10,000〜100,000Daの画分を抽出して得られたものであるチロシナーゼ活性促進剤を要旨とする。
本発明の第4の態様は、前記チロシナーゼ活性促進剤は、白髪防止剤として用いられるチロシナーゼ活性促進剤を要旨とする。
本発明の第5の態様は、前記米発酵抽出物は、前記チロシナーゼ活性促進剤の全質量基準で、0.001質量%以上1質量%以下の範囲で配合されるチロシナーゼ活性促進剤を要旨とする。
本発明の第6の態様は、前記米発酵抽出物は、前記チロシナーゼ活性促進剤の全質量基準で、0.01質量%以上0.1質量%以下の範囲で配合されるチロシナーゼ活性促進剤を要旨とする。
本発明の第7の態様は、米発酵産物から分子量10,000Da以上の画分を抽出する工程を含むチロシナーゼ活性促進剤の製造方法を要旨とする。
本発明の第8の態様は、米発酵産物から分子量10,000〜100,000Daの画分を抽出するチロシナーゼ活性促進剤の製造方法を要旨とする。
実施形態に係るチロシナーゼ活性促進剤は、米発酵産物より抽出したチロシナーゼ活性促進作用を有する米発酵抽出物を有効成分とする。
[用途]
以下の方法に従って、清酒からチロシナーゼ活性促進成分含有抽出物を製造した。
(イ)まず、清酒(日本盛製、製品名「100%こしひかり純米酒」)36Lを、限外濾過膜(分画分子量10,000Da:中空糸UF膜モジュールSLP−3053、スペクトラム社製)を備えた膜濾過装置により高分子画分を短時間のうちに濃縮、脱塩した。膜濾過装置として東洋紡エンジニアリング社製SYLS−SB04型を用いた。
(ロ)得られたチロシナーゼ活性促進成分含有画分4Lに8Lの精製水を加え、これを再度、限外濾過膜(分画分子量10,000Da)によって濃縮して、濾過膜非透過の画分4Lを回収した。
(ハ)上述の(ロ)工程を繰り返し、(ロ)工程を合計で10回実施した。そして、最終的に4Lのチロシナーゼ活性促進成分含有抽出物を得た。
以下に述べる試験例や処方例においては、この抽出物を米発酵抽出物として用いた。
<チロシナーゼ活性の評価>
上述のようにして得られた米発酵抽出物を凍結乾燥し50%ジメチルスルホキシド(DMSO)に溶解し、この溶液を希釈して濃度を調整し、得られた希釈液を用いて次の試験を行った。
チロシナーゼ活性促進作用
(イ)製造例で得られた米発酵抽出物(0、0.01、0.05、0.10mL)を、それぞれ50質量%DMSO溶液(0.10、0.09、0.05、0mL)に添加して、それぞれの容量を0.1mLにそろえて試料溶液とした。
(ロ)各試料溶液にM/15リン酸緩衝液(pH6.8)1mL及びチロシン溶液(0.3mg/mL)を0.1mL加え、25℃で10分間プレインキュベーションした。
(ハ)各試料溶液に、チロシナーゼ溶液(シグマ製 255unit/mL マッシュルーム由来)0.1mLを加えて、25℃で10分間インキュベーションし反応終了後、分光光度計で475nmの吸光度を測定した。なお、ブランクとしてチロシナーゼ溶液の代わりにM/15リン酸緩衝液(pH6.8)を用いた。また、対照として試験液(0.1mL)の代わりに50%DMSO溶液を用いた。
(ニ)得られた吸光度からチロシナーゼ活性の促進率を算出し、チロシナーゼ活性促進成分含有抽出物を加えない場合を100%とした相対値で表示した。
結果を図1に示す。反応混液中の米発酵抽出物の最終濃度は乾燥質量に換算すると0.01、0.05、0.1mLはそれぞれ0.275、1.375、2.750mgに相当する。
上記反応混液を1晩、25℃に保った後、生じたメラニン色素沈殿物を同量の2N−NaOH水溶液を添加して溶解しメラニン色素の生成によって変調した呈色を再度上記と同様に475nmで測定した。吸光度からチロシナーゼ活性の促進率を算出し、チロシナーゼ活性促進成分含有抽出物を加えない場合を100%とした相対値で表示した。結果を図2に示す。
処方例1(ヘアエッセンス)
下記成分Aを混合溶解させA液とし、これとは別に下記成分Bを混合溶解させてB液とし、A液とB液を均等に混合し、ヘアエッセンスを調製した。
下記成分を加温均一に混合してシャンプーを調製した。
下記成分を加温均一に混合してコンディショナーを調製した。
下記成分を加温均一に混合してヘアワックスを調製した。
下記成分Aに成分Bを加え、攪拌溶解した後、成分Cを加えてさらに攪拌してヘアートニックを調製した。
Claims (2)
- 米発酵産物から分子量10,000Da以上の画分を抽出する工程を含むことを特徴とするチロシナーゼ活性促進剤の製造方法。
- 米発酵産物から分子量10,000〜100,000Daの画分を抽出することを特徴とする請求項1記載のチロシナーゼ活性促進剤の製造方法。
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