JP5818303B2 - 抗酸化剤の製造方法およびその用途 - Google Patents
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本発明の抗酸化剤の製造方法は、前述のように、活性炭処理を施していない清澄コメ発酵液を、抗酸化剤の有効成分として使用する工程を含むことを特徴とする。本発明は、活性炭処理を施さない清澄コメ発酵液を有効成分として使用する点が特徴であり、その他の工程および条件は、特に制限されない。前記活性炭処理を施していない清澄コメ発酵液は、前記活性炭処理を施した清澄コメ発酵液よりも、優れた抗酸化作用を示すことから、抗酸化剤の有効成分として有用である。
まず、コメと米麹を酵母菌で発酵させ、コメ発酵液を調製する。
つぎに、前記コメ発酵液から酒粕を除去して、清澄コメ発酵液を回収する。前記清澄コメ発酵液の回収方法は、特に制限されず、例えば、圧搾、ろ過等があげられ、中でも圧搾が好ましく、一般的に上槽と呼ばれる。前記上槽は、例えば、圧搾機により、前記コメ発酵液である醪(もろみ)から、酒粕を除去して、清澄コメ発酵液を搾る工程である。前記圧搾機は、特に制限されず、例えば、市販のろ過圧搾機等が使用できる。
前記清澄コメ発酵液は、例えば、さらに、加熱処理を行うことによって、殺菌処理を施してもよい。前記加熱による殺菌は、一般的に、火入れ(ひいれ)と呼ばれる。前記加熱処理の条件は、特に制限されず、加熱温度は、例えば、50〜90℃であり、好ましくは60〜80℃であり、より好ましくは60〜70℃であり、殺菌時間は、例えば、5〜60分であり、好ましくは5〜30分であり、より好ましくは5〜15分である。
つぎに、前記清澄コメ発酵液に、オリ除去処理を施す。前記清澄コメ発酵液は、例えば、加熱処理を施した加熱清澄コメ発酵液でもよいし、加熱処理を施していない非加熱清澄コメ発酵液でもよい。オリ除去処理は、例えば、前記清澄コメ発酵液においてオリを沈殿させるオリ下げ工程と、沈殿したオリを除去する除去工程を含むことが好ましい。
オリを除去した前記清澄コメ発酵液は、例えば、さらに、ろ過処理を行ってもよい。本発明において、前記ろ過処理を行う場合、前記ろ過処理は、活性炭を使用する活性炭ろ過を除く。前記ろ過処理によって、例えば、前記清澄コメ発酵液に残存するオリや夾雑物を、さらに除去できる。また、前記ろ過処理によって、例えば、前記清澄コメ液体の色を、黄金色から無色透明に近づけることができる。
本発明の抗酸化剤は、前記本発明の製造方法により得られることを特徴とする。本発明の抗酸化剤は、前記清澄コメ発酵液を有効成分として含んでいればよく、その他の構成は、何ら制限されない。
本発明の皮膚外用剤は、前述のように、前記本発明の抗酸化剤を含むことを特徴とする。本発明の皮膚外用剤は、前記本発明の抗酸化剤を含むことが特徴であって、その他の構成等は何ら制限されない。本発明の皮膚用化粧料は、特に示さない限り、前記本発明の抗酸化剤の説明を引用できる。本発明の皮膚用化粧料は、例えば、美白用、アンチエージング用、メラニン抑制用であることが好ましい。
本発明の皮膚用化粧料は、前述のように、前記本発明の抗酸化剤を含むことを特徴とする。本発明の皮膚用化粧料は、前記本発明の抗酸化剤を含むことが特徴であって、その他の構成等は何ら制限されない。本発明の皮膚用化粧料は、特に示さない限り、前記本発明の抗酸化剤の説明を引用できる。本発明の皮膚用化粧料は、例えば、美白用、アンチエージング用、メラニン抑制用であることが好ましい。
以下に示す方法により、清澄コメ発酵液を含む抗酸化剤サンプルを調製した。
掛米および麹米は、精米歩合70%の原料米(滋賀県産日本晴)、酵母は、清酒酵母協会7号酵母(日本醸造協会提供)を使用した。そして、下記表1に示す3段仕込みの仕込み配合とし、品温15℃(一定)、総米20kg、汲水150%の条件、18日間発酵させた。
前記実施例1と同様にして、加熱処理した前記清澄コメ発酵液に、室温で、柿シブ(岩本亀太郎商店製、ボーメ度12)を最終濃度0.04%(V/V)となるように均一に添加した後、さらに、1%アルギン酸ナトリウム水溶液(君津化学株式会社製、商品番号「I−1F」(1重量%水溶液の粘度:100cp))を、最終濃度0.005%(V/V)となるように添加した。そして、前記清澄コメ発酵液に、さらに、最終濃度5000ppmとなるように活性炭(武田薬品工業株式会社製、商品名特撰白鷺)を撹拌しながら添加し、オリのフロック形成を確認した後、撹拌を停止し、一晩放置した。そして、前記清澄コメ発酵液から、前記実施例1と同様にして、上澄みを回収した。回収した前記上澄み100mLに水36mLを添加し、国税庁所定分析法に基づいてアルコール度を14.7%に調整した。これを比較例1の抗酸化剤サンプル(オリ下げ処理(+):活性炭処理(+))とした。
前記実施例1および前記比較例1で調製した抗酸化剤サンプルについて、抗酸化活性を確認した。
ラジカル消去率(%)=100×(B−A)/B
そして、ラジカル消去率が50%となる前記サンプル水溶液の前記凍結乾燥物の濃度を、IC50(mg/ml)として算出した。IC50は、値が低いほど、抗酸化活性が高いことを意味する。これらの結果を下記表2に示す。下記表2に示すように、活性炭処理を施していない前記実施例1の2種類のサンプルは、活性炭処理を施した前記比較例1のサンプルと比較して、高い抗酸化活性を有することが明らかとなった。
コメ発酵液は、活性炭処理を行わない場合、品質劣化が著しいことが当業者の技術常識である。そこで、前記実施例1および前記比較例1で調製した抗酸化剤サンプルを40℃で保存し、抗酸化活性の経時的な変化を確認した。保存開始時(0日)の抗酸化活性を100%として、保存した前記抗酸化剤サンプルの残存活性(%)を求めた。これらの結果を、下記表3に示す。下記表3に示すように、前記実施例1−2の抗酸化剤サンプルは、前記比較例1の抗酸化剤サンプルと、同等の残存活性を示した。この結果から、活性炭処理を行わない清澄コメ発酵液を有効成分とする実施例1−2の抗酸化剤サンプルは、品質が安定していることがわかる。
以下に示す方法により、清澄コメ発酵液を含む抗酸化剤サンプルを調製した。
前記実施例1と同様にして、もろみ(コメ発酵液)から上槽により上清(清澄コメ発酵液a)を回収した。そして、前記実施例1と同様にして、前記清澄コメ発酵液aに、オリ下げ処理を行い、オリ下げ処理後の清澄コメ発酵液bから、前記実施例1と同様にして、上澄み(清澄コメ発酵液c)を回収した。前記清澄コメ発酵液cを実施例4−1の抗酸化剤サンプル(加熱処理(−):オリ下げ処理(+):活性炭処理(−))とした。前記抗酸化剤サンプルを凍結乾燥して、100mLあたりの固形分5.7gであることを確認した。ここで、前記固形分とは、前記抗酸化剤サンプルを凍結乾燥した際の乾燥物を意味する(以下、同様)。
加熱処理した前記清澄コメ発酵液dに対して、さらに、以下の処理を施した。前記清澄コメ発酵液dに、0.1%(W/V)となるように、塩化亜鉛炭(商品名:白鷺(登録商標)50W (G)R 活性炭(50%水分ウエット炭)、キリン協和フーズ社製)と、0.1%(W/V)となるように、水蒸気炭(商品名:金鶴活性炭(50%水分ウエット炭)、キリン協和フーズ社製)とを添加し、室温で15分間撹拌した。その後、さらに、撹拌しながら柿シブ(岩本亀太郎商店製、ボーメ度12)を最終濃度0.04%(V/V)となるように添加して、15分間撹拌し、さらに、撹拌しながら1%アルギン酸ナトリウム水溶液(君津化学株式会社製、商品番号「I−1F」(1重量%水溶液の粘度:100cp))を、最終濃度0.005%(V/V)となるように添加し、10分間撹拌した。オリのフロック形成を確認した後、撹拌を停止し、一晩放置した。このオリ下げ処理後の清澄コメ発酵液gから、前記実施例1と同様にして、上澄み(清澄コメ発酵液h)を回収した。前記清澄コメ発酵液h 100mLに水12mLを添加して、アルコール度を17.8%に調整した。これを比較例4の抗酸化剤サンプル(加熱処理(+):オリ下げ処理(+):活性炭処理(+))とした。前記抗酸化剤サンプルを凍結乾燥して、100mLあたりの固形分5.65gであることを確認した。
実施例4で調製した実施例4−1の抗酸化剤サンプルおよび比較例4の抗酸化剤サンプルについて、2,2−ジフェニル−1−ピクリルヒドラジル(DPPH)ラジカル消去活性を評価した。
前記実施例4で調製した抗酸化剤サンプルを用いて、in vitroでのメラニン生成の抑制効果を確認した。
(評価基準)
−:茶色
+:緑色
++:黄色
+++:培地と同じ赤色
メラニン抑制活性(%)=[1−((Ctest−D)/(Ccont−D))]×100
Ctest:抗酸化剤サンプルを使用した際の吸光度
Ccont:抗酸化剤サンプルに代えて水を使用した際の吸光度
D:未使用の培地の吸光度
前記実施例4で調製した抗酸化剤サンプルを用いて、チロシナーゼ阻害活性を評価した。
(分析条件)
装置:Waters Alliance 2695−2996−ZQ4000
(LC−フォトダイオードアレイ検出器−MS検出器)
カラム:Unison UK−C18(Imtakt社製)
カラムサイズ:Φ75×4.6mm
カラム温度:30℃
サンプル注入量:10μL
移動相:A液:水
B液:アセトニトリル(0〜30%/0〜6分、100%/6〜8分)
流速:1.0mL/min
イオン化法:MS エレクトロスプレーイオン(ESI)法
positive SIRモード +20V
チロシナーゼ阻害活性(%)=[(E−F)/(G−F)]×100
E:抗酸化剤の希釈液を使用した際のピーク面積/内部標準物質のピーク面積
F:コントロールのピーク面積/内部標準物質のピーク面積
G:ブランクのピーク面積/内部標準物質のピーク面積
前記実施例4で調製した抗酸化剤サンプルを用いて、in vitroでの一酸化窒素(NO)産生抑制活性を確認した。
NO抑制活性(%)=[(H−J)/(I−J)]×100
H:抗酸化剤サンプルを使用した際の吸光度
I:コントロールの吸光度
J:ブランクの吸光度
Claims (6)
- 活性炭処理を施しておらず、且つ、オリが除去された清澄コメ発酵液を、抗酸化剤の有効成分として使用する工程を含むことを特徴とする抗酸化剤の製造方法。
- さらに、清澄コメ発酵液からオリを除去するオリ除去処理工程を含み、
前記オリ除去処理工程が、前記清澄コメ発酵液にオリ下げ剤を添加して、オリを沈殿させる工程であり、得られた清澄コメ発酵液を、前記オリが除去された清澄コメ発酵液として使用する、請求項1記載の製造方法。 - 前記オリ下げ剤として、柿シブおよびアルギン酸塩を併用する、請求項2記載の製造方法。
- さらに、前記清澄コメ発酵液に加熱処理を施す加熱処理工程を含む、請求項1から3のいずれか一項に記載の製造方法。
- 請求項1から4のいずれか一項に記載の製造方法を用いる、皮膚用化粧料の製造方法。
- 前記皮膚用化粧料が、美白剤、アンチエージング剤およびメラニン抑制剤からなる群から選択された少なくとも一つである、請求項5記載の製造方法。
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