CN111297791B - 一种含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物、精华乳及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物、精华乳及其制备方法和应用，所述抗衰及修复皮肤护理组合物包括共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽‑4、生育酚乙酸酯、密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物和水仙鳞茎提取物；所述共生菌组合发酵物的共生菌包括裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的组合；所述共生菌组合发酵物的发酵原料包括大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子的组合。所述抗衰及修复皮肤护理组合物通过共生菌组合发酵物等有效活性成分的协同复配，能够针对抗氧化、抗糖化、抗蓝光以及促进胶原蛋白合成等对抗皮肤老化的通路进行调理修复，从而保护细胞活力，使皮肤具有对抗外源环境因素的能力。

Description

一种含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物、 精华乳及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物、精华乳及其制备方法和应用。

背景技术

衰老是生物界最基本的自然规律之一，皮肤衰老主要分为内源性衰老和外源性老化。其中，内源性衰老即自然老化，由机体内在因素的作用所引起，主要表现为皮肤的暴露部位和非暴露部位都会产生皱纹和松弛。外源性老化则主要由环境因素导致，包括光辐照、吸烟以及接触有害化学物质等；由于日光辐照是环境因素中导致皮肤老化的主要因素，因此皮肤的外源性老化又称为皮肤光老化。皮肤光老化的特征只出现于皮肤的光暴露部位，具体表现为出现粗深皱纹，角质增厚，皮肤外观灰暗、光泽感低，色素沉着，出现色斑等。此外，糖化反应也是加速皮肤衰老的诱因之一，糖化反应是指人体内多余的糖分在血液中游离，附着在胶原蛋白上发生反应生成高反应性的糖化中间产物，然后与蛋白质作用进而生成不可逆转的糖化终产物(Advanced Glycation End-products，AGEs)；虽然糖化反应在体内进行缓慢，生成的AGEs可代谢排出体外，但随着年龄的增长，机体新陈代谢变慢，使AGEs在皮肤蓄积，其与特异受体的结合会导致皮肤产生弹性下降、皱纹、干燥、松弛、暗黄和色斑等一系列问题。因此，皮肤衰老是由内源性衰老、外源性老化以及糖化反应共同作用的结果。

使用护肤品对抗皮肤衰老是化妆品领域的长期性热点话题，护肤品对抗衰老一般通过长期修复细胞外基质来强化肌肤，或通过添加抗氧化剂减少皮肤的自由基损伤，调节免疫和提高皮肤的自我保护功能，或加入植物油来改善皮肤老化、减速蛋白分泌，从而延缓皮肤衰老。例如CN105662942A公开了一种保持皮肤水分抗氧化的组合物及其制备方法，所述组合物按重量份数包括以下组分：鱼胶原蛋白肽400～2000份，葡萄籽提取物50～100份，黄精提取物50～200份，沙棘提取物300～500份，阿萨伊果粉100～500份，纯净水6679～8329份，甜味剂1份，香精20份；所述组合物制得的制剂为复方制剂，无毒副作用，能够防护人体皮肤免受自由基侵袭，但同时该组合物仅能起到一定的抗氧化作用，无法解决造成皮肤外源性老化的光辐照、糖化等其他问题。CN109568161A公开了一种具有抗糖化与抗皮肤衰老的组合物制备方法，所述组合物包括A相和B相，其中A相包括：小核菌胶0.1份，1.3丁二醇2份，甘油1份，水87.75份；B相包括：苹果果实细胞培养物提取物5份，甘油葡糖甘2份，水5份，烟酰胺5份，甘油5份，辛甘醇5份，黄原胶5份，丹参提取物5份；所述组合物能够消除糖化蛋白，减少皮肤色度不均与偏黄之现象，可用于面膜精华液、精华液和乳液膏霜中，但是该组合物的抗糖化效果并不理想，抗糖化活性成分难以被皮肤吸收而最大化发挥作用。CN110236965A公开了一种抗蓝光护肤化妆品及其制备方法，所述抗蓝光护肤化妆品中包括抗蓝光组合物，该组合物包括以下组分：胡萝卜素2～6％，山茶花提取物2～4％以及藏红花提取物1～4％；所述组合物具有较强的蓝光过滤能力，能够阻挡蓝光对皮肤的伤害，但该组合物仅针对蓝光这一特定的皮肤老化诱因发挥作用，无法解决造成皮肤外源性老化的自由基氧化、糖化等其他问题。

由此可见，现有的护肤品存在功效性单一的问题，其配方设计时只针对氧化、糖化或蓝光辐照等众多皮肤老化诱因中的其中一种，无法满足对抗皮肤衰老的全面性需求；而事实上，皮肤衰老并非源自于单一的环境作用，而是多种内外因共同导向的结果。

因此，开发一种能够全面对抗造成皮肤老化的多重外界因素的皮肤护理产品，从根源上强化和修复皮肤、维持皮肤的年轻状态，具有十分重要的意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物、精华乳及其制备方法和应用，所述抗衰及修复皮肤护理组合物通过共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯以及四种天然植物成分的协同复配，能够针对抗氧化、抗糖化、抗蓝光以及促进胶原蛋白合成等对抗皮肤老化的通路进行调理修复，从根源上保护细胞活力，维持皮肤的年轻状态，使皮肤具有对抗外源环境因素的能力。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物，所述抗衰及修复皮肤护理组合物包括共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯、密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物和水仙鳞茎提取物。

所述共生菌组合发酵物的共生菌包括裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的组合；所述共生菌组合发酵物的发酵原料包括大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子的组合物。

本发明提供的抗衰及修复皮肤护理组合物中含有共生菌组合发酵物，所述共生菌组合发酵物利用共生菌共同发酵大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子五种原料，相比于单一菌种进行单一物质的发酵，所述共生菌进行组合发酵，各个菌种之间相互协同，可以起到互相诱导活化的作用，从而显著提高发酵产物的生物活性。

所述共生菌组合发酵物中，人参发酵物能够增强皮肤免疫力，激发皮肤的防御、抗光老化和舒缓止痒机能，促进皮肤生态修复，可以消炎、调节皮肤炎症因子，并加快皮肤表皮修复与重建，促进皮肤真皮组织再生；覆盆子发酵物具有抗菌、抗敏修复皮肤红斑过敏的功效；巨藻发酵物具有舒缓抗刺激的特点；上述三种发酵物协同增效，可以修复皮肤屏障，提高皮肤的免疫力和耐受力。同时，大米发酵物具有保湿美白去皱的功效；川谷籽发酵物具有抗氧化、美白、抑制黑色素合成和美白淡斑的功效，并能促进肌肤新陈代谢，抵抗衰老，保湿润肤；此外，巨藻发酵物还具有抑制金属蛋白酶表达的特点。因此，本发明所述的共生菌组合发酵物通过发酵原料之间的协同增效，赋予其修复皮肤屏障、美白提亮、抗氧化、保湿和舒缓炎症等功效。

所述脱羧肌肽是由β-丙氨酸和L-组氨构成的咪唑类二肽，具有抗氧化功能和抗糖化功能，尤其在逆转糖化反应中间体糖基乙胺中效用明显，能够有效减少蛋白质糖化和维持蛋白质的自然折叠。

所述棕榈酰五肽-4具有刺激胶原蛋白、弹力纤维和透明质酸增生的效果，从而提高皮肤的含水量和锁水度。

所述生育酚乙酸酯是一种维生素E衍生物，其在机体新陈代谢过程中能够有效防止细胞膜和细胞内不饱和脂肪酸被氧化，保护细胞膜的完整性，进而防止衰老；同时，所述生育酚乙酸酯具有较强的还原性，能够消除体内的自由基，维持皮肤的健康状态。

所述密蒙花提取物中含有多种活性成分黄酮类化合物，能够抑制活性氧的产生，清除自由基，通过抑制环氧化酶-2、5-脂氧合酶和UVB诱导的TNFα来预防皮肤炎症，抑制黑色素沉积，保护皮肤不受蓝光、紫外光辐照的危害；所述白藜芦醇是一种非黄酮类多酚化合物，具有抗菌、抗氧化和免疫调节的功能；所述石榴果提取物的有效成分包括花青素、鞣花酸和石榴多酚等，具有极强的抗氧化性，能有效延缓皮肤衰老；所述水仙鳞茎提取物具有清热解毒、收敛皮肤毛孔的功效。上述四种植物提取物相互协同，共同发挥抗蓝光以及抗氧化功效，保护皮肤细胞的生长和增殖活力。

本发明提供的抗衰及修复皮肤护理组合物通过共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯以及四种天然植物成分密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物和水仙鳞茎提取物的协同复配，首先对受损的皮肤屏障进行有效的调理，使皮肤细胞保持良好的生长和增殖活力，进而针对皮肤衰老的三大外源性因素：氧化、糖化、光损伤进行全面地阻截防御，从多个维度使皮肤免受外界环境因素的损害，同时通过棕榈酰五肽-4活性物质促进胶原蛋白和透明质酸再生，达到修复皱纹、保持皮肤弹性的目的；更为重要的是，共生菌组合发酵物中的活性成分能够有效激发皮肤免疫力，强化应激耐受力，使皮肤重建了对抗外源刺激的能力。

本发明所述的发酵原料指的是在已经具有足够数量和活性的菌种中加入的待发酵的原料，至于对于菌种的培养增菌活化等过程所采用的培养基，可选用现有技术中常用的培养基。所述脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4和生育酚乙酸酯均可通过市场途径获得，所述密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物和水仙鳞茎提取物可以通过现有技术从植物中提取获得，也可通过市场途径购买得到。上述组分的来源不会影响本发明所述皮肤护理组合物的技术效果。

在本发明中，所述抗衰及修复皮肤护理组合物按照重量份包括如下组分：共生菌组合发酵物5～30重量份、脱羧肌肽0.1～15重量份、棕榈酰五肽-4 0.05～10重量份、生育酚乙酸酯0.5～5重量份、密蒙花提取物0.01～3重量份、白藜芦醇0.01～5重量份、石榴果提取物0.05～2重量份和水仙鳞茎提取物0.01～5重量份。

所述共生菌组合发酵物的含量可以为6重量份、8重量份、10重量份、12重量份、15重量份、18重量份、20重量份、22重量份、25重量份、27重量份或29重量份等。

所述脱羧肌肽的含量可以为0.5重量份、1重量份、3重量份、5重量份、7重量份、9重量份、10重量份、12重量份或14重量份等。

所述棕榈酰五肽-4的含量可以为0.1重量份、0.5重量份、1重量份、2重量份、3重量份、4重量份、5重量份、6重量份、7重量份、8重量份或9重量份等。

所述生育酚乙酸酯的含量可以为0.6重量份、0.8重量份、1重量份、1.5重量份、2重量份、2.5重量份、3重量份、3.5重量份、4重量份或4.5重量份等。

所述密蒙花提取物的含量可以为0.05重量份、0.1重量份、0.5重量份、1重量份、1.2重量份、1.5重量份、1.8重量份、2重量份、2.2重量份、2.5重量份、2.7重量份或2.9重量份等。

所述白藜芦醇的含量可以为0.05重量份、0.1重量份、0.5重量份、1重量份、1.5重量份、2重量份、2.5重量份、3重量份、3.5重量份、4重量份或4.5重量份等。

所述石榴果提取物的含量可以为0.1重量份、0.3重量份、0.5重量份、0.8重量份、1重量份、1.2重量份、1.4重量份、1.5重量份、1.7重量份或1.9重量份等。

所述水仙鳞茎提取物的含量可以为0.05重量份、0.1重量份、0.5重量份、1重量份、1.5重量份、2重量份、2.5重量份、3重量份、3.5重量份、4重量份或4.5重量份等。

在本发明中，所述共生菌中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的质量比为(8～18):(4～8):(2～6):(1～3)，进一步优选12:6:4:2。

其中，所述8～18可以为9、10、11、12、13、14、15、16或17等。

所述4～8可以为4.2、4.5、4.8、5、5.2、5.5、5.8、6、6.2、6.5、6.8、7、7.2、7.5、7.7或7.9等。

所述2～6可以为2.2、2.5、2.8、3、3.2、3.5、3.8、4、4.2、4.5、4.8、5、5.2、5.5、5.7或5.9等。

所述1～3可以为1.2、1.4、1.6、1.8、2、2.2、2.4、2.6、2.8或2.9等。

本发明中，所述酵母菌选自啤酒酵母、葡萄汁酵母、汉逊酵母、球拟酵母、假丝酵母、毕赤氏酵母或红酵母中的任意一种或至少两种的组合，优选为啤酒酵母；所述乳酸杆菌选自干酪乳酸杆菌、保加利亚乳酸杆菌、嗜酸乳酸杆菌或嗜热乳酸杆菌中的任意一种或至少两种的组合，优选为嗜酸乳酸杆菌。

本发明所述裂裥菌的有效成分主要为裂裥菌素，具有较好的保湿效果，其添加量与嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的添加量的质量比在上述范围内，四种菌体之间相互协同，使得到的发酵产物活性最佳。如果裂裥菌的含量过高，会导致菌群之间的相互竞争，进而导致裂褶菌素的含量较少；如果裂裥菌的含量过低，同样会导致裂褶菌素的含量较少，使共生菌组合发酵物的保湿效果降低。

优选地，所述发酵原料中大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子的质量比为(40～60):(40～60):1:(20～30):(20～30)。

上述质量比中，两个40～60各自独立地可以为42、44、45、46、48、50、52、54、55、56、58等；两个20～30各自独立地可以为21、22、23、24、25、26、27、28或29等。

本发明所述的大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子可以是现有技术中对于护肤化妆品中常用的原材料。其中，大米分为籼米、粳米、粘米几种，也可以是糙米、精米、加工米等，均可以应用于本发明；川谷籽，也称为薏苡仁、薏仁等；人参可以选自野山参、白参、林下参、移山参、池底参、园参、高丽参、花旗参或西洋参中的任意一种或至少两种的组合；所述巨藻可以为山东长岛县提供的巨藻；所述覆盆子可以为安徽、江苏、浙江等地的覆盆子。上述发酵原料的具体种类不会影响本发明所述皮肤护理组合物的技术效果。

优选地，所述共生菌的质量和为所述发酵原料质量和的20～30％，例如21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％或29％等。

作为本发明的优选技术方案，所述共生菌的质量和为所述发酵原料质量和的20～30％，共生菌之间协同增效，可以起到互相诱导活化的作用，显著提高发酵产物的生物活性。当共生菌的添加量过低时，无法达到较好的发酵效果；当菌种过量添加时，在一定的发酵时间内，可能会由于菌种量过高，培养液无法满足菌种代谢，而导致菌种之间的相互竞争，反而会导致发酵物活性较低。

在本发明中，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中还包括苦参根提取物、胀果甘草根提取物、黄芩根提取物、甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯或烟酰胺中的任意一种或至少两种的组合。

所述苦参根提取物中含有苦参总碱，具体包括氧化苦参碱、苦参碱、羟基苦参碱等活性成分，具有平衡油脂分泌、疏通并收敛毛孔、清除皮肤内毒素杂质以及促进受损血管神经细胞的再生等功效，能够有效恢复毛细血管的细胞活力，促进皮肤的紧致细滑。所述胀果甘草根提取物中含有胶原蛋白成分和抗衰老成分，能够抵抗皮肤中的黑色素沉积，达到美白效果。所述黄芩根提取物具有抗敏消炎的作用，其中含有的黄芩苷锌和黄芩苷铜成分能够清除超氧自由基，并抑制黑色素生成。所述甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯具有促进成纤维细胞增殖的效果，有助于皮肤胶原蛋白的再生。所述烟酰胺能够减少皮肤中黑色素向细胞的运输，加速黑色素的代谢，具有美白提亮的功能。

本发明提供的抗衰及修复皮肤护理组合物中，所述苦参根提取物、胀果甘草根提取物、黄芩根提取物、甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯以及烟酰胺能够从多个维度上作用于皮肤色斑、暗黄的各个途径，清除自由基，抑制黑色素沉积，清除皮肤内的毒素杂质，从而进一步提升皮肤的白度和亮度。

优选地，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中苦参根提取物的含量为0.01～1重量份，例如0.03重量份、0.05重量份、0.08重量份、0.1重量份、0.3重量份、0.5重量份、0.7重量份或0.9重量份等。

优选地，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中胀果甘草根提取物的含量为0.01～1重量份，例如0.03重量份、0.05重量份、0.08重量份、0.1重量份、0.3重量份、0.5重量份、0.7重量份或0.9重量份等。

优选地，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中黄芩根提取物的含量为0.01～1重量份，例如0.03重量份、0.05重量份、0.08重量份、0.1重量份、0.3重量份、0.5重量份、0.7重量份或0.9重量份等。

优选地，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯的含量为0.01～2重量份，例如0.03重量份、0.05重量份、0.08重量份、0.1重量份、0.3重量份、0.5重量份、0.8重量份、1重量份、1.2重量份、1.5重量份、1.7重量份或1.9重量份等。

优选地，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中烟酰胺的含量为0.1～5重量份，例如0.3重量份、0.5重量份、0.8重量份、1重量份、1.5重量份、2重量份、2.5重量份、3重量份、3.5重量份、4重量份或4.5重量份等。

在本发明中，所述共生菌组合发酵物与棕榈酰五肽-4的质量比为(2～10):1，例如3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1或9.5:1等。

作为本发明的优选技术方案，所述共生菌组合发酵物与棕榈酰五肽-4的质量比为(2～10):1时，二者与其他组分协同复配，能够有效强化和修复皮肤、维持皮肤的年轻状态。如果二者的比例超出上述限定范围，共生菌组合发酵物的含量过低，会导致所述抗衰及修复皮肤护理组合物对皮肤屏障的修复功能降低，皮肤的免疫力和耐受力无法有效提升，不能持久地维持皮肤的健康状态；而棕榈酰五肽-4的含量过低则无法有效刺激皮肤中胶原蛋白和透明质酸等活性物质的再生，导致所述抗衰及修复皮肤护理组合物的抗皱效果减弱。

在本发明中，所述抗衰及修复皮肤护理组合物按照重量份包括如下组分：共生菌组合发酵物5～30重量份、脱羧肌肽0.1～15重量份、棕榈酰五肽-4 0.05～10重量份、生育酚乙酸酯0.5～5重量份、密蒙花提取物0.01～3重量份、白藜芦醇0.01～5重量份、石榴果提取物0.05～2重量份、水仙鳞茎提取物0.01～5重量份、苦参根提取物0.01～1重量份、胀果甘草根提取物0.01～1重量份、黄芩根提取物0.01～1重量份、甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯0.01～2重量份和烟酰胺0.1～5重量份。

另一方面，本发明提供一种如上所述的含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物的制备方法，所述制备方法为：按照配方量将共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯、密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物、水仙鳞茎提取物，以及任选的苦参根提取物、胀果甘草根提取物、黄芩根提取物、甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯和烟酰胺混合、分散，得到所述抗衰及修复皮肤护理组合物。

所述共生菌组合发酵物的制备方法包括如下步骤：

(1)将大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子粉碎后与水混合，得到待发酵液，并进行灭菌处理；

(2)将步骤(1)得到的灭菌后的待发酵液接种酵母菌和乳酸杆菌进行第一次发酵，然后加入裂裥菌进行第二次发酵，最后加入嗜热栖热菌进行第三次发酵，得到所述共生菌组合发酵物。

本发明所述共生菌组合发酵物在制备过程中，考虑到不同菌种的不同生活环境，因此，发酵过程分步进行，首先使酵母菌和乳酸杆菌增菌发酵，然后加入裂裥菌进行发酵，酵母菌和乳酸杆菌对裂裥菌有诱导活化作用，可以增加裂裥菌素的产生，而产生的裂裥菌素又对酵母菌和乳酸杆菌有进一步促进作用，促进二者对原料的发酵，最后加入嗜热栖热菌，酵母菌对嗜热栖热菌同样具有诱导活化的作用，从而得到高活性的共生菌组合发酵物。

在本发明中，对酵母菌、乳酸杆菌、嗜热栖热菌和裂裥菌的培养使其数量和活性满足接种要求的方式并不做具体限定，现有技术中的常用的方式均可以采用，示例性地列举几种常见方式：

酵母菌的培养：将保藏的酵母菌取斜面菌种于DYP培养基中，25℃培养24h后，然后将菌种接种于马铃薯葡萄糖培养基(马铃薯20.0g、葡萄糖2.0g，琼脂2.0g，蒸馏水100mL，自然pH，可按比例放大)上，在30℃下培养24h，得到具有足够多的数量和活性的酵母菌。

乳酸杆菌的培养：将菌种接种于MRS培养基(蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g，酵母膏5.0g，葡萄糖20.0g，柠檬酸氢二铵2.0g，吐温-80 1.0g，乙酸钠5.0g，磷酸氢二钾2.0g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，自然pH，可按比例放大)上，在30℃下培养24h，得到具有足够多的数量和活性的乳酸杆菌。

嗜热栖热菌的培养：取嗜热栖热菌HB27冻存液2mL接入装有2L培养液(20L培养液的配比为：蛋白胨60g、麦芽汁4g、无水硫酸镁7g、磷酸二氢钾2.4g、硫酸镁40g、无水氯化铁1g、氯化钠5g，水补足到20L，不同量的培养液按比例进行缩小或方法，pH值为7.8±0.2)的2.5L三角瓶中，通气量维持在5m³/h/50L，150rpm、65℃培养12h左右，得到嗜热栖热菌活化液。

裂裥菌的培养：马铃薯200g/L、葡萄糖20～30g/L、氯化钠10～20g/L、琼脂15～20g/L制成平板培养基，把裂褶菌菌种接种到该平板培养基上，于20～30℃恒温培养箱内培养4～10天得到平板菌丝体；然后将马铃薯淀粉50～200g/L、葡萄糖20～60g/L、酵母浸膏1～10g/L、酵母浸粉1～10g/L和水制成的液体培养基装入摇瓶，装液量为1/5～1/3，上述得到的平板菌丝体接种该摇瓶，于20～30℃恒温摇床内100～220rpm震荡培养4～10天，得到具有足够多的数量和活性的裂裥菌。

在本发明中，菌种的选择可以为任意选择，例如嗜热栖热菌可以利用美国模式菌种收集中心(ATCC)的保藏号为BAA-163的嗜热栖热菌HB27。

本发明中，所述分散的温度为20～60℃，例如22℃、25℃、28℃、30℃、32℃、35℃、37℃、40℃、42℃、45℃、48℃、50℃、52℃、55℃、57℃或59℃等，优选为35～50℃。

优选地，步骤(1)所述待发酵液中，水的质量为所述大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子质量和的1.5～2倍，例如1.55倍、1.6倍、1.65倍、1.7倍、1.75倍、1.8倍、1.85倍、1.9倍或1.95倍等。

优选地，步骤(2)所述第一次发酵的pH值为4.0～5.0，例如4.1、4.3、4.5、4.7或4.9等。

优选地，步骤(2)所述第一次发酵的温度为25～35℃，例如26℃、28℃、30℃、32℃或34℃等；时间为20～25h，例如21h、22h、23h或24h等。

优选地，步骤(2)所述第二次发酵的pH值为6.0～7.0，例如6.1、6.3、6.5、6.7或6.9等。

优选地，步骤(2)所述第二次发酵的温度为25～35℃，例如26℃、28℃、30℃、32℃或34℃等；时间为20～25h，例如21h、22h、23h或24h等。

优选地，步骤(2)所述第三次发酵的pH值为7.5～8.5，例如7.6、7.8、8.0、8.2或8.4等。

优选地，步骤(2)所述第三次发酵的方法为：先在30～40℃(例如31℃、33℃、35℃、37℃或39℃等)条件下发酵20～25h(例如21h、22h、23h或24h等)，然后在55～60℃(例如56℃、57℃、58℃或59℃等)条件下发酵15～20h(例如16h、17h、18h或19h等)。

上述步骤(2)中，pH值可以通过精氨酸进行调节。

上述步骤(2)中第三次发酵完成后，将产物冷却至室温，然后进行过滤、纯化、灭菌，得到所述共生菌组合发酵物；具体方法为：先进行过滤，保留取上层清液，然后加入活性炭，进行吸附纯化处理，完成过后进行固液分离(可以过滤)，保留上清液，最后经过灭菌，得到所述共生菌组合发酵物。

所述共生菌组合发酵物的制备方法具体包括如下步骤：将灭菌后的待发酵液利用精氨酸调节pH为4.0～5.0，然后转移至种子罐中，并接种酵母菌和乳酸杆菌，维持一定通气量，以100～200rpm搅拌转动，25～35℃培养20～25h；然后再次利用精氨酸调节pH为6.0～7.0，加入裂裥菌，维持一定通气量，以100～200rpm搅拌转动，25～35℃培养20～25h；最后调节pH为7.5～8.5，加入嗜热栖热菌，维持一定通气量，以100～200rpm搅拌转动，30～40℃培养20～25h后55～60℃下发酵15～20h，得到发酵液，进行后续常规的提纯、灭菌等工序，得到共生菌组合发酵物。

另一方面，本发明提供一种护肤品，所述护肤品包括如上所述的含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物。

在本发明中，所述护肤品包括精华乳、面霜、精华液、眼霜、面膜或乳液中的任意一种。

优选地，所述护肤品为精华乳，所述精华乳中所述抗衰及修复皮肤护理组合物的质量百分含量为0.1～25％，例如0.3％、0.5％、0.8％、1％、3％、5％、7％、9％、10％、12％、14％、16％、18％、20％、22％或24％等。

优选地，所述精华乳中还包括溶剂、保湿剂、润肤剂、乳化剂、螯合剂、增稠剂和抗氧化剂中的至少一种。

优选地，所述精华乳中保湿剂的质量百分含量为1～23％，例如2％、4％、6％、8％、10％、12％、14％、16％、18％、20％、21％或22％等。

优选地，所述保湿剂选自玫瑰花水、透明质酸钠、海藻糖、糖类同分异构体、1,2-己二醇、丁二醇或甘油中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，所述精华乳中润肤剂的质量百分含量为5～40％，例如6％、8％、10％、12％、14％、16％、18％、20％、23％、25％、27％、30％、33％、35％、37％或39％等。

优选地，所述润肤剂选自角鲨烷、低芥酸菜籽油、碳酸二辛酯、辛酸癸酸甘油三酯或聚二甲基硅氧烷中的任意一种或至少两种的组合.

优选地，所述精华乳中乳化剂的质量百分含量为2.5～9％，例如3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％或8.5％等。

优选地，所述乳化剂选自鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂基葡糖苷、聚甘油-3-甲基葡糖二硬脂酸酯、聚山梨醇酯-80、卵磷脂、鲸蜡醇磷酸酯、PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、聚丙烯酸钠或聚丙烯酸酯钠中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，所述精华乳中螯合剂的质量百分含量为0.02～0.1％，例如0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％或0.09％等。

优选地，所述螯合剂为EDTA二钠。

优选地，所述精华乳中增稠剂的质量百分含量为0.1～1％，例如0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％或0.9％等。

优选地，所述增稠剂为卡波姆和/或水解小核菌胶。

优选地，所述精华乳中抗氧化剂的质量百分含量为0.2～0.6％，例如0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％、0.5％或0.55％等。

优选地，所述抗氧化剂为对羟基苯乙酮。

优选地，所述溶剂为水。

在本发明中，所述护肤品为精华乳，所述精华乳按照质量百分含量包括如下组分：所述含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物0.1～25％、保湿剂1～23％、润肤剂5～40％、乳化剂2.5～9％、螯合剂0.02～0.1％、增稠剂0.1～1％、抗氧化剂0.2～0.6％，余量为水。

本发明所述的精华乳可以通过各组分混合、分散并均质均匀的方法制备得到。示例性的，所述精华乳的制备方法为：(1)将保湿剂、增稠剂以及螯合剂等水溶性组分与水加入水锅并开动搅拌，加热到80～85℃分散均匀，得到水相组分；(2)将生育酚乙酸酯、润肤剂和乳化剂等油溶性成分加入油相锅后加热至75～80℃，搅拌分散均匀，得到油相组分；(3)将步骤(1)得到的水相组分抽入乳化锅中，保温80～82℃，然后将步骤(2)得到的油相组分抽入乳化锅中，搅拌均质5～20min后降温至30～50℃，加入抗氧化剂以及所述抗衰及修复皮肤护理组合物，搅拌混合均匀，冷却、出料，得到所述精华乳。

相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明提供的含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物通过共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯以及四种天然植物成分的协同复配，能够对受损的皮肤屏障进行有效的调理，使皮肤细胞保持良好的生长和增殖活力，并针对皮肤衰老的三大外源性因素：氧化、糖化、光损伤进行全面地阻截防御，使皮肤免受外界环境因素的损害，同时通过棕榈酰五肽-4活性物质促进胶原蛋白和透明质酸再生，达到修复皱纹、保持皮肤弹性的目的；更为重要的是，共生菌组合发酵物中的活性成分能够有效激发皮肤免疫力，强化应激耐受力，使皮肤重建了对抗外源刺激的能力。

(2)所述抗衰及修复皮肤护理组合物以天然成分为主要活性物质，不会造成皮肤刺激，安全性高；能够显著促进成纤维细胞的生长和胶原蛋白的生成；对黑色素的合成具有明显的抑制作用，抑制率可达到58.8～62.5％；具有良好的自由基清除功效，对超氧阴离子自由基清除率可达到90.57～96％；同时，所述皮肤护理组合物具有显著的抗蓝光功效，使用3周后蓝光压力下细胞的活性氧水平明显降低。

(3)本发明所述的抗衰及修复皮肤护理组合物可用于精华乳、面霜、面膜、精华液、眼霜和乳液等护肤品中，能够明显改善皮肤状态，使用4周后可使皮肤的皱纹和色斑明显减少，具有明显的提亮功效，皮肤弹性增加，弹性变化率可以达到33.7％。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。

制备例1

本制备例提供一种共生菌组合发酵物I，制备方法如下：

(1)将33.11g大米、33.11g川谷籽、0.66g人参、16.56g巨藻和16.56g覆盆子粉碎，然后与180g水混合，用80目滤布过滤，得到待发酵液，并在100℃下加热20min进行灭菌处理；

(2)将灭菌后的待发酵液利用精氨酸调节pH为4.5，置于种子罐中，接种4g酵母菌和2g乳酸杆菌，在5m³/h/50L的通气量，以150rpm搅拌转动下，30℃培养22h；

(3)然后加入精氨酸调节pH为6.5，加入12g裂裥菌，在5m³/h/50L的通气量，以150rpm搅拌转动下，30℃培养22h；

(4)最后利用精氨酸调节pH为8.0，加入6g嗜热栖热菌，在5m³/h/50L的通气量，以150rpm搅拌转动，35℃培养22h后升温至58℃培养18h，得到初步产物；

(5)将初步产物进行过滤，取清液，在其中加入活性炭搅拌10min，进行吸附纯化处理，然后利用过滤的方式再次取清液，灭菌，得到共生菌组合发酵物I。

其中，大米为东北大米，川谷籽购自贵州，人参为长白山白参，巨藻购自山东长岛县，覆盆子购自安徽。酵母菌选自啤酒酵母，乳酸杆菌选自嗜热乳酸杆菌。

制备例2

本制备例提供一种共生菌组合发酵物II，制备方法如下：

(1)将39.74g大米、26.49g川谷籽、0.66g人参、19.87g巨藻和13.24g覆盆子粉碎，向其中加入200g水，然后用80目滤布过滤，得到待发酵液，并在100℃下加热20min进行灭菌处理；

(2)将灭菌后的待发酵液利用精氨酸调节pH为5.0，置于种子罐中，接种4g酵母菌和2g乳酸杆菌，在5m³/h/50L的通气量，以200rpm搅拌转动下，35℃培养20h；

(3)然后加入精氨酸调节pH为6.0，加入12g裂裥菌，在5m³/h/50L的通气量，以200rpm搅拌转动下，35℃培养20h；

(4)最后利用精氨酸调节pH为8.0，加入6g嗜热栖热菌，在5m³/h/50L的通气量，以200rpm搅拌转动，40℃培养20h后升温至60℃培养15h，得到初步产物；

(5)将初步产物进行过滤，取清液，在其中加入活性炭搅拌5min，进行吸附纯化处理，然后利用过滤的方式再次取清液，灭菌，得到共生菌组合发酵物II。

其中，大米为泰国香米，川谷籽购自贵州，人参为高丽参，巨藻购自山东长岛县，覆盆子购自安徽。酵母菌选自啤酒酵母，乳酸杆菌选自嗜热乳酸杆菌。

对比制备例1

本对比制备例与制备例1的区别在于，不添加乳酸杆菌；酵母菌、裂裥菌和嗜热栖热菌的添加量为制备例1中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌添加量的和，然后按比例分配，即酵母菌的添加量为4.4g，裂裥菌的添加量为13.1g，嗜热栖热菌的添加量为6.5g。

对比制备例2

本对比制备例与制备例1的区别在于，不添加嗜热栖热菌；酵母菌、裂裥菌和乳酸杆菌的添加量为制备例1中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌添加量的和，然后按比例分配。

对比制备例3

本对比制备例与制备例1的区别在于，不添加嗜热栖热菌和酵母菌；裂裥菌和乳酸杆菌的添加量为制备例1中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌添加量的和，然后按比例分配。

对比制备例4

本对比制备例与制备例1的区别在于，不添加裂裥菌和乳酸杆菌；嗜热栖热菌和酵母菌的添加量为制备例1中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌添加量的和，然后按比例分配。

对比制备例5

本对比制备例与制备例1的区别在于，不添加裂裥菌、乳酸杆菌和酵母菌；嗜热栖热菌的添加量为制备例1中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌添加量的和。

对比制备例6

本对比制备例与制备例1的区别在于，不添加嗜热栖热菌、乳酸杆菌和酵母菌，裂裥菌的添加量为制备例1中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌添加量的和。

实施例1～6

一种抗衰及修复皮肤护理组合物，具体组分如表1所示，各组分的用量单位为“重量份”。

表1

制备方法如下：

将生育酚乙酸酯、甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯和水按照配方量加入真空乳化锅中，60℃均质分散均匀，然后降温冷却至45℃后，加入共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯、密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物、水仙鳞茎提取物、苦参根提取物、胀果甘草根提取物、黄芩根提取物和烟酰胺，分散均匀后用200目滤布过滤、出料，得到所述抗衰及修复皮肤护理组合物。

实施例7

本实施例与实施例1的区别仅在于，将共生菌组合发酵物I用等质量的共生菌组合发酵物II替换。

对比例1～6

与实施例1的区别仅在于，将共生菌组合发酵物I用等质量的对比制备例1～6提供的共生菌组合发酵物替换。

对比例7

本对比例与实施例1的区别仅在于，不含有共生菌组合发酵物I，用水补足。

对比例8

本对比例与实施例1的区别仅在于，不含有脱羧肌肽，用水补足。

对比例9

本对比例与实施例1的区别仅在于，不含有棕榈酰五肽-4，用水补足。

对比例10

本对比例与实施例1的区别仅在于，不含有生育酚乙酸酯，用水补足。

对比例11

本对比例与实施例1的区别仅在于，不含有密蒙花提取物，用水补足。

对比例12

本对比例与实施例1的区别仅在于，不含有白藜芦醇，用水补足。

对比例13

本对比例与实施例1的区别仅在于，不含有石榴果提取物，用水补足。

对比例14

本对比例与实施例1的区别仅在于，不含有水仙鳞茎提取物，用水补足。

测试例1

本测试例为实施例1～7提供的抗衰及修复皮肤护理组合物的安全性能测试，具体为红细胞溶血实验，方法如下：

(1)选健康家兔，心脏取血9mL，加入2％的草酸钾溶液1mL，离心，弃去上清液，用20mmol/L的PBS溶液将沉淀物稀释至20mL，4℃保存备用；

(2)将实施例1～7提供的皮肤护理组合物用PBS溶液依次稀释至不同浓度，每个样品设置5个浓度梯度；

(3)取10mL步骤(2)得到的待测样品的稀释液，加入200μL步骤(1)得到的红细胞悬液(控制样品终浓度分别为5mg/mL、10mg/mL、50mg/mL、100mg/mL、500mg/mL)，以蒸馏水作为阳性对照，PBS溶液作为阴性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计测试其在560nm处的吸光度(A₅₆₀)，按如下公式计算溶血率；

结果如表2所示。

表2

从表2的数据可知：本发明提供的抗衰及修复皮肤护理组合物在浓度为500mg/mL时溶血率依然≤0.01％，说明本发明所述皮肤护理组合物对人体无不良反应，安全性高。

测试例2

本测试例为实施例1～7、对比例1～14提供的抗衰及修复皮肤护理组合物的抗氧化性能测试实验，具体为超氧阴离子自由基清除能力评价试验，方法如下：

(1)使用乙醇为溶剂，将实施例1～7、对比例1～14提供的皮肤护理组合物分别配制成浓度为1％的样品溶液；

(2)取Tris-HCl缓冲溶液(0.05mol/L，pH值为8.2)4.5mL，于25℃水浴锅中预热30min；再加入1mL步骤(1)得到的样品溶液和0.4mL邻苯三酚溶液(25mol/L)，混匀后，于25℃水浴中反应5min，加入1mL的HCl(8mol/L)终止反应；

(3)以Tris-HCl缓冲溶液作参比，在299nm处测吸光度值；以1mL乙醇作为空白对照组；

其中，超氧阴离子自由基清除率＝[1-(A/A₀)]×100％，A₀为空白对照组的吸光度值，A为样品组的吸光度值；测试数据如表3所示。

表3

根据表3的数据可知，本发明实施例1～7提供的抗衰及修复皮肤护理组合物对超氧阴离子自由基的清除率能够达到90.57～96％，证明本发明所述的抗衰及修复皮肤护理组合物具有良好的抗氧化性能。

比较实施例1与对比例1～6的数据可知，本发明所述的共生菌组合发酵物中，裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌可以在发酵过程中相互促进，相互诱导活化，极大增加发酵物的活性，进而增加皮肤护理组合物的抗氧化性能，任一菌种的缺失都会导致发酵产物的活性降低，从而使皮肤护理组合物的自由基清除能力降低。

比较实施例1与对比例7～14的数据可知，本发明提供的抗衰及修复皮肤护理组合物中，共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯、密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物和水仙鳞茎提取物八种有效成分协同复配，赋予了所述抗衰及修复皮肤护理组合物良好的抗氧化性，缺少任何一种成分都会削弱皮肤护理组合物的自由基清除效果。而且，所述八种有效成分中，共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、生育酚乙酸酯以及石榴果提取物的相互协同对皮肤护理组合物的抗氧性能贡献更为显著。

测试例3

本测试例为实施例1～7、对比例1～14提供的抗衰及修复皮肤护理组合物的抗蓝光性能测试实验，具体为蓝光压力下细胞的活性氧水平评价试验，方法如下：

选取健康的SD大鼠88只，体重200g左右，雌雄各半，随机分为22组，其中的21组分别对应于实施例1～7、对比例1～14提供的抗衰及修复皮肤护理组合物，剩余1组为空白对照组，每组4只。脱去大鼠背部的毛，裸露出直径为2cm的皮肤；在LED蓝光425nm(3mW持续辐照18min)条件下，将待测样品涂抹于大鼠裸露的皮肤上，涂抹量为0.1g/cm²，24h后用CellROX荧光强度染色和Volocity图像分析软件进行定量分析，细胞活性氧数值越大，表示待测样品的抗蓝光性能越差，持续使用三周，每周记录一次大鼠皮肤细胞活性氧的测试值，具体结果如表4所示。

表4

根据表4的数据可知，本发明实施例1～7提供的抗衰及修复皮肤护理组合物具有显著的抗蓝光效果，从初始值到涂抹3周后，在蓝光压力下的细胞活性氧水平明显降低。

比较实施例1与对比例1～14的数据可知，本发明提供的抗衰及修复皮肤护理组合物中，共生菌组合发酵物和密蒙花提取物两种有效成分之间的协同复配对所述皮肤护理组合物的抗蓝光性能具有显著贡献。

测试例4

本测试例为实施例1～7、对比例1～14提供的抗衰及修复皮肤护理组合物的美白性能测试实验，具体为黑色素合成的抑制率评价试验，方法如下：

取对数生长期的B16黑色素细胞，常规胰酶消化处理后吹打成单细胞悬液，细胞计数定量接种于96孔板，24小时后，弃去上清液，分别加入含有10％待测样品的RPMI1640培养液，在37℃、5％CO₂恒温很湿条件下培养，对照孔加RPMI1640培养液(含水％)，孵育三天，中间更换一次培育液；弃去上清液，常规胰酶消化处理后，计数细胞密度，离心得到细胞沉淀；用PBS冲洗两次，离心弃去上清液，定量加入含10％的DMSO的1mol/L的NaOH液，80℃水浴50min，然后在酶标仪450nm处测定吸光值。

黑色素生成抑制率＝实验组的吸光度/对照组的吸光度×100％，测试结果如表5所示。

表5

根据表5的数据可知，本发明实施例1～7提供的抗衰及修复皮肤护理组合物对黑色素合成的抑制率能够达到58.8～62.5％，证明本发明所述的抗衰及修复皮肤护理组合物具有良好的美白性能。

比较实施例1与对比例1～6的数据可知，本发明所述的共生菌组合发酵物中，裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌可以在发酵过程中相互促进，相互诱导活化，极大增加发酵物的活性，进而增加皮肤护理组合物的抑制黑色素合成的性能，任一菌种的缺失都会导致发酵产物的活性降低，从而使皮肤护理组合物的美白能力降低。

比较实施例1与对比例7～14的数据可知，本发明提供的抗衰及修复皮肤护理组合物中，共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯、密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物和水仙鳞茎提取物八种有效成分协同复配，赋予了所述抗衰及修复皮肤护理组合物良好的抑制黑色素合成的性能，缺少任何一种成分都会在不同程度上削弱皮肤护理组合物的美白效果。而且，所述八种有效成分中，共生菌组合发酵物和密蒙花提取物的相互协同对皮肤护理组合物的美白性能贡献最为显著。

测试例5

本测试例为实施例1～7、对比例1～14提供的抗衰及修复皮肤护理组合物的促进胶原蛋白合成性能的测试实验，具体包括：

(1)对成纤维细胞增殖的影响

将对数生长期的成纤维细胞以1×10⁵个/mL的密度接种于96孔板，将96孔板中的细胞分为22组，其中的21组分别对应于实施例1～7、对比例1～14提供的皮肤护理组合物，剩余1组为空白对照组；分别向细胞孔中加入待测样品，使孔中抗衰及修复皮肤护理组合物有效成分的浓度为5μg/mL，空白对照组中加入等体积DMEM培养基；将经过上述22组处理的成纤维细胞在5％CO₂、37℃恒温恒湿的条件下孵育72h，用细胞计数仪对22组细胞进行计数，分别统计细胞数目。

重复实验，得到3次独立实验的结果，对数据进行统计，得到本发明所述抗衰及修复皮肤护理组合物对成纤维细胞增殖的影响结果，p＜0.005，具体数据如表6所示。

(2)对成纤维细胞胶原蛋白表达的影响

I型胶原蛋白(collagen I)的mRNA水平检测：将对数生长期的成纤维细胞以1×10⁵个/mL的密度接种于96孔板，将96孔板中的细胞分为22组，其中的21组分别对应于实施例1～7、对比例1～14提供的抗衰及修复皮肤护理组合物，剩余1组为空白对照组；分别向细胞孔中加入待测样品，使孔中皮肤护理组合物有效成分的浓度为5μg/mL，空白对照组中加入等体积DMEM培养基；将经过上述22组处理的成纤维细胞在5％CO₂、37℃恒温恒湿的条件下孵育72h，收集；使用RNAiso Plus试剂(9109Takara)提取总RNA，然后通过PrimeScriptRT试剂盒将mRNA逆转录为cDNA，进而取等量的cDNA通过Real-Time PCR Master Mix试剂盒(ABI)以及引物进行实时荧光PCR检测collagen I的mRNA水平；上述具体操作按照试剂盒说明书进行。

对数据进行统计，得到本发明所述抗衰及修复皮肤护理组合物对成纤维细胞collagen I的mRNA水平的影响结果，具体数据如表6所示，p＜0.005。

表6

从表6的数据可知，与空白对照组相比，本发明实施例1～7提供的抗衰及修复皮肤护理组合物能够显著促进成纤维细胞的增殖，细胞数目的增长率甚至可达到70％以上；而且所述抗衰及修复皮肤护理组合物处理后的成纤维细胞中collagen I的mRNA水平明显提高，说明本发明提供的抗衰及修复皮肤护理组合物能够显著上调collagen I的mRNA水平，具有促进成纤维细胞中I型胶原蛋白生成的功能。此外，比较实施例1、5和6提供的抗衰及修复皮肤护理组合物处理后成纤维细胞的增殖情况以及collagen I的mRNA水平，实施例5和6的效果略低于实施例1，由此可见，所述共生菌组合发酵物与棕榈酰五肽-4的质量比在(2～10):1范围内时，二者与其他组分协同复配，能够有效促进细胞生长和胶原蛋白的生成，超出上述范围则会使皮肤护理组合物的促进作用减弱。

比较实施例1与对比例1～6的数据可知，本发明所述的共生菌组合发酵物中，裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌可以在发酵过程中相互促进，相互诱导活化，极大增加发酵物的活性，进而赋予了所述抗衰及修复皮肤护理组合物良好的促细胞增殖和促进胶原蛋白生成功效，任一菌种的缺失都会导致发酵产物的活性降低，从而使皮肤护理组合物的性能降低。

比较实施例1与对比例7～14的数据可知，本发明提供的抗衰及修复皮肤护理组合物中，共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯、密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物和水仙鳞茎提取物八种有效成分协同复配，使所述抗衰及修复皮肤护理组合物显著的促细胞增殖和促进胶原蛋白生成的性能，缺少任何一种成分都会影响皮肤护理组合物的性能。而且，所述八种有效成分中，共生菌组合发酵物和棕榈酰五肽-4具有明显的协同增效作用，对成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的生成具有较大的影响。

应用例1

一种精华乳，具体组分如表7所示：

表7

制备方法如下：

(1)将保湿剂、增稠剂、螯合剂和水加入水锅并开动搅拌，加热到80℃分散均匀，得到水相组分；

(2)将油溶性成分生育酚乙酸酯、润肤剂和乳化剂加入油相锅后加热至78℃，搅拌分散均匀，得到油相组分；

(3)将步骤(1)得到的水相组分抽入乳化锅中，保温80℃，然后将步骤(2)得到的油相组分抽入乳化锅中，搅拌均质20min后降温至45℃，加入抗氧化剂以及所述抗衰及修复皮肤护理组合物，搅拌混合均匀，冷却、出料，得到所述精华乳。

对上述精华乳进行性能测试：

以40名年龄为35～45岁的女性为受试志愿者，随机分为治疗组20名和对照组20名，治疗组每天早晚2次进行本发明应用例1提供的精华乳涂抹，连续使用4周；对照组每天早晚2次进行凡士林润肤乳涂抹，连续使用4周。

(1)VISIA皮肤分析评价

受试志愿者面部清洁后采用VISIA面部图像分析仪进行面部拍摄，分析面部色素斑、纹理、皱纹的检测数据，数值越高代表色素斑、纹理和皱纹的现象越明显。一疗程结束后将VISIA面部图像分析仪得到的信息与治疗前的信息进行对比，分析受试志愿者的面部色素斑、纹理和皱纹的改善情况，统计数据如表8所示，p＜0.02，具有统计学意义。

(2)提亮功效

利用皮肤色差测试仪(探头CL400及多探头皮肤测试系统MPA10)分别测试治疗前和治疗后受试志愿者的面部肤色情况，并计算ITA°。测试条件为22℃、湿度50％的恒温恒湿环境，统计数据如表8所示。

(3)皮肤弹性测试

治疗前在受试志愿者的表皮位点使用皮肤弹性测量仪ElastiMeter(DelfinTechnologies Ltd.)得到基线皮肤弹性初始值，治疗28天后以同样的方法再次进行皮肤弹性数值测量，得到测试值；皮肤的弹性变化率＝(测试值-初始值)/初始值×100％，计算结果如表8所示。

表8

根据表8的数据可知，对比治疗前后的VISIA测试结果可知，治疗期间无不良反应病例发生，总体肤感较好、清爽，受试志愿者的皮肤色斑、皱纹和纹理情况均有显著改善，面部肤色的提亮效果明显，皮肤弹性显著提高，疗效评价为有效。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物、精华乳及其制备方法和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (38)

1.一种含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述抗衰及修复皮肤护理组合物按照重量份包括如下组分：共生菌组合发酵物5~30重量份、脱羧肌肽0.1~15重量份、棕榈酰五肽-4 0.05~10重量份、生育酚乙酸酯0.5~5重量份、密蒙花提取物0.01~3重量份、白藜芦醇0.01~5重量份、石榴果提取物0.05~2重量份和水仙鳞茎提取物0.01~5重量份；

所述共生菌组合发酵物的共生菌包括裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的组合，所述共生菌中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的质量比为(8~18):(4~8):(2~6):(1~3)；所述共生菌组合发酵物的发酵原料包括大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子的组合物，所述发酵原料中大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子的质量比为(40~60):(40~60):1:(20~30):(20~30)；所述共生菌的质量和为所述发酵原料质量和的20~30%；

所述共生菌组合发酵物采用如下方法进行制备，所述方法包括如下步骤：

（1）将大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子粉碎后与水混合，得到待发酵液，并进行灭菌处理；

（2）将步骤（1）得到的灭菌后的待发酵液接种酵母菌和乳酸杆菌进行第一次发酵，然后加入裂裥菌进行第二次发酵，最后加入嗜热栖热菌进行第三次发酵，得到所述共生菌组合发酵物。

2.根据权利要求1所述的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述共生菌中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的质量比为12:6:4:2。

3.根据权利要求1所述的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中还包括苦参根提取物、胀果甘草根提取物、黄芩根提取物、甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯或烟酰胺中的任意一种或至少两种的组合。

4.根据权利要求3所述的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中苦参根提取物的含量为0.01~1重量份。

5.根据权利要求3所述的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中胀果甘草根提取物的含量为0.01~1重量份。

6.根据权利要求3所述的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中黄芩根提取物的含量为0.01~1重量份。

7.根据权利要求3所述的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯的含量为0.01~2重量份。

8.根据权利要求3所述的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述抗衰及修复皮肤护理组合物中烟酰胺的含量为0.1~5重量份。

9.根据权利要求1所述的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述共生菌组合发酵物与棕榈酰五肽-4的质量比为(2~10):1。

10.根据权利要求1所述的抗衰及修复皮肤护理组合物，其特征在于，所述抗衰及修复皮肤护理组合物按照重量份包括如下组分：共生菌组合发酵物5~30重量份、脱羧肌肽0.1~15重量份、棕榈酰五肽-4 0.05~10重量份、生育酚乙酸酯0.5~5重量份、密蒙花提取物0.01~3重量份、白藜芦醇0.01~5重量份、石榴果提取物0.05~2重量份、水仙鳞茎提取物0.01~5重量份、苦参根提取物0.01~1重量份、胀果甘草根提取物0.01~1重量份、黄芩根提取物0.01~1重量份、甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯0.01~2重量份和烟酰胺0.1~5重量份。

11.一种如权利要求1~9任一项所述的含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：按照配方量将共生菌组合发酵物、脱羧肌肽、棕榈酰五肽-4、生育酚乙酸酯、密蒙花提取物、白藜芦醇、石榴果提取物、水仙鳞茎提取物，以及任选的苦参根提取物、胀果甘草根提取物、黄芩根提取物、甲基硅烷醇羟脯氨酸酯天冬氨酸酯和烟酰胺混合、分散，得到所述抗衰及修复皮肤护理组合物；

所述共生菌组合发酵物的制备方法包括如下步骤：

（1）将大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子粉碎后与水混合，得到待发酵液，并进行灭菌处理；

（2）将步骤（1）得到的灭菌后的待发酵液接种酵母菌和乳酸杆菌进行第一次发酵，然后加入裂裥菌进行第二次发酵，最后加入嗜热栖热菌进行第三次发酵，得到所述共生菌组合发酵物。

12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述分散的温度为20~60℃。

13.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述分散的温度为35~50℃。

14.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述待发酵液中，水的质量为所述大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子质量和的1.5~2倍。

15.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述第一次发酵的pH值为4.0~5.0。

16.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述第一次发酵的温度为25~35℃，时间为20~25 h。

17.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述第二次发酵的pH值为6.0~7.0。

18.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述第二次发酵的温度为25~35℃，时间为20~25 h。

19.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述第三次发酵的pH值为7.5~8.5。

20.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述第三次发酵的方法为：先在30~40℃条件下发酵20~25 h，然后在55~60℃条件下发酵15~20 h。

21.一种护肤品，其特征在于，所述护肤品包括如权利要求1~10任一项所述的含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物。

22.根据权利要求21所述的护肤品，其特征在于，所述护肤品包括面霜、精华液、眼霜、面膜或乳液中的任意一种。

23.根据权利要求22所述的护肤品，其特征在于，所述护肤品为精华乳，所述精华乳中所述含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物的质量百分含量为0.1~25%。

24.根据权利要求23所述的护肤品，其特征在于，所述精华乳中还包括溶剂、保湿剂、润肤剂、乳化剂、螯合剂、增稠剂和抗氧化剂中的至少一种。

25.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述精华乳中保湿剂的质量百分含量为1~23%。

26.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述保湿剂选自玫瑰花水、透明质酸钠、海藻糖、糖类同分异构体、1,2-己二醇、丁二醇或甘油中的任意一种或至少两种的组合。

27.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述精华乳中润肤剂的质量百分含量为5~40%。

28.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述润肤剂选自角鲨烷、低芥酸菜籽油、碳酸二辛酯、辛酸癸酸甘油三酯或聚二甲基硅氧烷中的任意一种或至少两种的组合。

29.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述精华乳中乳化剂的质量百分含量为2.5~9%。

30.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述乳化剂选自鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂基葡糖苷、聚甘油-3-甲基葡糖二硬脂酸酯、聚山梨醇酯-80、卵磷脂、鲸蜡醇磷酸酯、PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、聚丙烯酸钠或聚丙烯酸酯钠中的任意一种或至少两种的组合。

31.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述精华乳中螯合剂的质量百分含量为0.02~0.1%。

32.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述螯合剂为EDTA二钠。

33.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述精华乳中增稠剂的质量百分含量为0.1~1%。

34.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述增稠剂为卡波姆和/或水解小核菌胶。

35.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述精华乳中抗氧化剂的质量百分含量为0.2~0.6%。

36.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述抗氧化剂为对羟基苯乙酮。

37.根据权利要求24所述的护肤品，其特征在于，所述溶剂为水。

38.根据权利要求23所述的护肤品，其特征在于，所述护肤品为精华乳，所述精华乳按照质量百分含量包括如下组分：所述含有共生菌组合发酵物的抗衰及修复皮肤护理组合物0.1~25%、保湿剂1~23%、润肤剂5~40%、乳化剂2.5~9%、螯合剂0.02~0.1%、增稠剂0.1~1%、抗氧化剂0.2~0.6%，余量为水。