CN111135138B - 一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物、肌底液及其制备方法 - Google Patents

一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物、肌底液及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物、肌底液及其制备方法，以所述皮肤调理剂复合物的总质量为100％计，包括15‑40％共生菌组合发酵物、10‑20％白松露菌提取物、30‑50％玫瑰花水、5‑10％糖类同分异构体和5‑10％神经酰胺‑3。本发明提供的肌底液可以刺激细胞的再生力，增加皮肤的弹性，具有防老抗衰的作用；同时对皮肤屏障进行修复，提高皮肤的免疫力和耐受力；并且具有良好的保湿功效。本发明提供的皮肤调理剂复合物可以全方面，多维度修复皮肤屏障，并且增加皮肤弹性，保湿良好。

Description

一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物、肌底液及其 制备方法
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，涉及一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物、肌底液及其制备方法。
背景技术
皮肤是人体与外界的屏障，近年来，人们越来越注重功效性护肤品，但是却忽略了皮肤屏障的健康，只有健康皮肤才能更好的吸收营养。皮肤屏障的结构基础主要是角质层以及表皮脂质、天然保湿因子等。健康的皮肤屏障能够抵御外界有害物质、刺激物和日光侵害皮肤，同时具有保湿及调节作用。同时，随着年龄的增加，人体神经内分泌功能减退，蛋白质合成率下降，真皮层的纤维细胞活性减退或丧失，胶原纤维减少或断裂，导致皮肤弹性减退，新陈代谢的能力也会慢慢减弱，皮肤老化，皱纹正是皮肤老化的外在表现。
CN108567729A公开了一种具有增加皮肤弹性及抗皱功能的化妆品组合物及其应用，该化妆品组合物含有：0.01-1.0％的神经酰胺；0.001-0.1％的棕榈酰寡肽；0.05-1.0％的蜂王浆；0.25-5％的卵磷脂；其中，所述的蜂王浆(以干重计)与卵磷脂的重量比为1:5，以粒径为30-130nm的双层微脂囊水溶液的形式。该专利申请中的化妆品组合物中神经酰胺与榈酰寡肽之间未形成相互间的作用力，在使用过程中不能引起持久的皮肤屏障的作用。CN109431848A公开了一种皮肤屏障修复乳，由以下重量份的原料构成：水60-70重量份，保湿剂8-10重量份，皮肤调理剂2-4重量份，乳化剂0.2-0.5重量份，增稠剂0.1-0.3重量份，抗氧化剂0.1-0.2重量份，植物提取物0.05-0.15重量份，皮肤修护剂0.005-0.015重量份；所述皮肤修护剂由棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2、乙酰基六肽-8、寡肽-1、神经酰胺3、神经酰胺6II、神经酰胺1按重量比1-3:1-3:1-3:2-3:2-5:2-5:2-5构成。该专利申请通过神经酰胺与多肽制备得到了网状结构的修复剂，可以在皮肤表面形成保护膜，但是其保护膜所持续的时间较短，并且无法促进皮肤屏障的修复。CN106109385A公开了一种天然易于吸收的精华液，其制得1000质量份的精华液，各原料质量消耗份数为：传明酸15-25质量份、丙二醇25-35质量份、胶原蛋白25-35质量份、泛酸钙10-20质量份、类脂质聚多糖25-35质量份、尼泊金甲酯1.5-2质量份、甘油45-55质量份、P-提取物25-35质量份、尼泊金丙酯1.5-2质量份、尿囊素1.5-2.5质量份、透明质酸0.1-0.4质量份、六胜肽1-3质量份和类蛇毒蛋白0.5-1.5质量份，余量为水。该专利申请提供的精华液具有抗皱的作用，但是无法兼顾对皮肤屏障的修复。
因此，需要开发一种可以修复皮肤屏障、减少皱纹，并且具有保湿等功效的肌底液。
发明内容
本发明的目的在于提供一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物、肌底液及其制备方法。本发明提供的肌底液可以刺激细胞的再生力，增加皮肤的弹性，具有防老抗衰的作用；同时对皮肤屏障进行修复，提高皮肤的免疫力和耐受力；并且具有良好的保湿功效。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物，以所述皮肤调理剂复合物的总质量为100％计，包括15-40％共生菌组合发酵物、10-20％白松露菌提取物、30-50％玫瑰花水、5-10％糖类同分异构体和5-10％神经酰胺-3。
本发明提供的共生菌组合发酵物具有较高的生物活性，与白松露菌提取物和玫瑰花水相互配合，协同增效，可以大幅度提升本发明提供的皮肤调理剂复合物的保湿性能；同时，共生菌组合发酵物与糖类同分异构体和神经酰胺-3共同配合，一方面可以调理皮肤，修复皮肤屏障，另一方面可以刺激细胞再生，增加皮肤弹性，减少皱纹。本发明提供的皮肤调理剂复合物可以全方面，多维度修复皮肤屏障，并且增加皮肤弹性，保湿良好。
在本发明中，所述共生菌组合发酵物15-40％，例如可以是20％、25％、30％、35％等。
在本发明中，所述白松露菌提取物10-20％，例如可以是12％、14％、15％、18％等。
在本发明中，所述玫瑰花水30-50％，例如可以是35％、40％、45％等。
在本发明中，所述糖类同分异构体5-10％，例如可以是6％、8％、9％等。
在本发明中，所述神经酰胺-3 5-10％，例如可以是6％、7％、9％等。
在本发明中，所述共生菌组合发酵物的共生菌包括裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的组合，所述共生菌组合发酵物的发酵原料包括大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子。
人参发酵物具有增强皮肤免疫力，可以激发皮肤防御，促进皮肤生态修复等特点；与覆盆子和巨藻相互配合，协同增效，可以修复皮肤屏障提高皮肤的免疫力和耐受力；同时，大米发酵物具有保湿美白去皱的功效，川谷籽发酵物具有抗氧化的功效；同时可以促进肌肤新陈代谢、抵抗衰老，保湿润肤；并且巨藻也具有抑制金属蛋白酶表达的特点，因此大米、川谷籽、人参和巨藻协同增效，可以使本发明提供的发酵物具有抗氧化抗皱、保湿、修复皮肤屏障等功效。
优选地，所述共生菌的质量和为所述发酵原料质量和的20-30％，例如可以是21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％或29％等。
优选地，所述共生菌中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的质量比为(8-18):(4-8):(2-6):(1-3)。
其中，所述8-18可以为9、10、11、12、13、14、15、16或17等。
所述4-8可以为4.2、4.5、4.8、5、5.2、5.5、5.8、6、6.2、6.5、6.8、7、7.2、7.5、7.7或7.9等。
所述2-6可以为2.2、2.5、2.8、3、3.2、3.5、3.8、4、4.2、4.5、4.8、5、5.2、5.5、5.7或5.9等。
所述1-3可以为1.2、1.4、1.6、1.8、2、2.2、2.4、2.6、2.8或2.9等。
优选地，所述发酵原料中大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子的质量比为(40-60):(40-60):1:(20-30):(20-30)。
上述质量比中，两个40-60各自独立地可以为42、44、45、46、48、50、52、54、55、56、58等；两个20-30各自独立地可以为22、24、25、26、28、30、32、34、35、36、38等。
本发明中，所述共生菌组合发酵物的制备方法包括如下步骤：
(1)将大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子粉碎后与水混合，得到待发酵液，并进行灭菌处理；
(2)将步骤(1)得到的灭菌后的待发酵液接种酵母菌和乳酸杆菌进行第一次发酵，然后加入裂裥菌进行第二次发酵，最后加入嗜热栖热菌进行第三次发酵，得到所述共生菌组合发酵物。
本发明所述共生菌组合发酵物在制备过程中，考虑到不同菌种的不同生活环境，因此，发酵过程分步进行，首先使酵母菌和乳酸杆菌增菌发酵，然后加入裂裥菌进行发酵，酵母菌和乳酸杆菌对裂裥菌有诱导活化作用，可以增加裂裥菌素的产生，而产生的裂裥菌素又对酵母菌和乳酸杆菌有进一步促进作用，促进二者对原料的发酵，最后加入嗜热栖热菌，酵母菌对嗜热栖热菌同样具有诱导活化的作用，从而得到高活性的共生菌组合发酵物。
在本发明中，对酵母菌、乳酸杆菌、嗜热栖热菌和裂裥菌的培养使其数量和活性满足接种要求的方式并不做具体限定，现有技术中的常用的方式均可以采用。
第二方面，本发明提供了根据第一方面所述的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物，所述制备方法包括如下步骤：
将共生菌组合发酵物和神经酰胺-3加入玫瑰花水中进行第一次混合，然后再依次白松露菌提取物和糖类同分异构体进行第二次混合，得到所述含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物。
优选地，所述第一次混合的温度为50-55℃，例如可以是50℃、51℃、52℃、53℃、54℃或55℃等，时间为10-15min，例如可以是10min、11min、12min、13min、14min或15min等。
优选地，所述第二次混合的温度为45-50℃，例如可以是46℃、47℃、48℃、49℃等，时间为10-15min，例如可以是10min、11min、12min、13min、14min或15min等。
第三方面，本发明提供了一种肌底液，包括第一方面所述的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物。
优选地，所述肌底液按质量百分含量包括如下组分：
第一方面所述的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物40-60wt％、保湿剂10-60wt％、其他皮肤调理剂5-15wt％和抗氧剂0.4-0.6wt％。
本发明提供的肌底液通过第一方面所述的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物、保湿剂以及其他皮肤调理剂的配合，使其具有优异的修复皮肤屏障，改善皮肤细纹、干纹的特点，同时提升皮肤弹性，还具有保湿、等功效。
所述皮肤调理剂复合物40-60wt％可以是42wt％、45wt％、47wt％、50wt％、52wt％、55wt％、58wt％等。
所述保湿剂10-60wt％可以是15wt％、20wt％、30wt％、40wt％、50wt％等。
所述其他皮肤调理剂5-15wt％可以是6wt％、7wt％、8wt％、10wt％、12wt％、14wt％等。
所述抗氧剂0.4-0.6wt％可以是0.45wt％、0.5wt％、0.55wt％等。
优选地，所述保湿剂包括透明质酸、赤藓醇、1,2-己二醇、丁二醇、β-葡聚糖、甘油和水。
优选地，所述其他皮肤调理剂包括氢化卵磷脂、丁二醇、苦参根提取物、胀果甘草根提取物和黄岑根提取物。
优选地，所述抗氧剂包括对羟基苯乙酮。
第四方面，本发明提供了根据第三方面所述的肌底液的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
将含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物加热，并与保湿剂混合均匀，然后加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合，最后过滤、出料，得到所述肌底液。
优选地，所述加热的温度为45-50℃，例如可以是46℃、47℃、48℃、49℃等。
优选地，所述混合均匀的时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min或10min等。
优选地，所述加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合的温度为40-45℃，例如可以是40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃等，时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min或10min等。
优选地，所述过滤为利用100-200目筛过滤。
优选地，所述过滤的温度为36-38℃，例如37℃。
优选地，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物加热至45-50℃，并与保湿剂混合搅拌5-10min；
(2)将步骤(1)得到的料液降温至40-45℃，然后加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合搅拌5-10min；
(3)将步骤(2)得到的料液降温至36-38℃，然后利用100-200目筛过滤、出料，得到所述肌底液。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明提供的共生菌组合发酵物具有较高的生物活性，与白松露菌提取物和玫瑰花水相互配合，协同增效，可以大幅度提升本发明提供的皮肤调理剂复合物的保湿性能；同时，共生菌组合发酵物与糖类同分异构体和神经酰胺-3共同配合，一方面可以调理皮肤，修复皮肤屏障，另一方面可以刺激细胞再生，增加皮肤弹性，减少皱纹；
(2)本发明提供的肌底液通过第一方面所述的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物、保湿剂以及其他皮肤调理剂的配合，使其具有优异的修复皮肤屏障，改善皮肤细纹、干纹的特点，同时提升皮肤弹性，还具有保湿、等功效；其中，经皮失水变化率在100％以下(测试前为100％)，说明本发明提供的肌底液正在缓慢修复皮肤屏障；且水分保持率较高，在83％以上，超氧阴离子自由基清除率在91％以上，弹性蛋白的表达量在5.0以上，表明本发明的肌底液的抗衰老性能较好。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
以下实施例中，所述共生菌组合发酵物可以通过如下方法进行制备：
制备例1
一种共生菌组合发酵物，制备方法如下：
(1)将26.49g大米、39.74g川谷籽、0.66g人参、19.87g覆盆子和13.24g巨藻粉碎并加入150g水，然后利用80目滤布过滤，得到待发酵液，并在100℃下加热20min进行灭菌处理；
(2)将灭菌后的待发酵液利用精氨酸调节pH为4.0，置于种子罐中，接种2g酵母菌和3g乳酸杆菌，在5m3/h/50L的通气量，以100rpm搅拌转动下，25℃培养25h；
(3)然后加入精氨酸调节pH为7.0，加入12g裂裥菌，在5m3/h/50L的通气量，以100rpm搅拌转动下，25℃培养25h；
(4)最后利用精氨酸调节pH为8.5，加入6g嗜热栖热菌，在5m3/h/50L的通气量，以100rpm搅拌转动，30℃培养25h后升温至55℃培养20h，得到初步产物；
(5)将初步产物进行过滤，取清液，在其中加入活性炭搅拌5min，进行吸附纯化处理，然后利用过滤的方式再次取清液，灭菌，得到共生菌组合发酵物。
其中，大米为泰国香米，川谷籽购自贵州，人参为长白山白参，覆盆子购自安徽，巨藻购自山东长岛县。酵母菌选自啤酒酵母，乳酸杆菌选自嗜热乳酸杆菌。
实施例1
一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物，以其总质量为100wt％计，由如下组分组成：
30wt％共生菌组合发酵物、15wt％白松露菌提取物、40wt％玫瑰花水、5wt％糖类同分异构体和10wt％神经酰胺-3。
制备方法如下：
(1)将共生菌组合发酵物和神经酰胺-3加入玫瑰花水中进行第一次混合，混合的温度为50℃，时间为15min；
(2)降温至45℃，然后依次加入白松露菌提取物和糖类同分异构体进行第二次混合，时间为15min，得到含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物。
实施例2
一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物，以其总质量为100wt％计，由如下组分组成：
15wt％共生菌组合发酵物、20wt％白松露菌提取物、50wt％玫瑰花水、10wt％糖类同分异构体和5wt％神经酰胺-3。
制备方法如下：
(1)将共生菌组合发酵物和神经酰胺-3加入玫瑰花水中进行第一次混合，混合的温度为55℃，时间为11min；
(2)降温至50℃，然后依次加入白松露菌提取物和糖类同分异构体进行第二次混合，时间为10min，得到含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物。
实施例3
一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物，以其总质量为100wt％计，由如下组分组成：
40wt％共生菌组合发酵物、15wt％白松露菌提取物、30wt％玫瑰花水、8wt％糖类同分异构体和7wt％神经酰胺-3。
制备方法如下：
(1)将共生菌组合发酵物和神经酰胺-3加入玫瑰花水中进行第一次混合，混合的温度为52℃，时间为12min；
(2)降温至48℃，然后依次加入白松露菌提取物和糖类同分异构体进行第二次混合，时间为12min，得到含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物。
实施例4
一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物，以其总质量为100wt％计，由如下组分组成：
20wt％共生菌组合发酵物、10wt％白松露菌提取物、50wt％玫瑰花水、10wt％糖类同分异构体和10wt％神经酰胺-3。
制备方法如下：
(1)将共生菌组合发酵物和神经酰胺-3加入玫瑰花水中进行第一次混合，混合的温度为54℃，时间为11min；
(2)降温至47℃，然后依次加入白松露菌提取物和糖类同分异构体进行第二次混合，时间为13min，得到含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物。
对比例1
与实施例1的区别在于，本对比例中，不添加白松露菌提取物和玫瑰花水，共生菌组合发酵物85份。
对比例2
与实施例1的区别在于，本对比例中，不添加共生菌组合发酵物和玫瑰花水，白松露菌提取物85份。
对比例3
与实施例1的区别在于，本对比例中，不添加白松露菌提取物和共生菌组合发酵物，玫瑰花水85份。
对比例4
与实施例1的区别在于，本对比例中，不添加白松露菌提取物，玫瑰花水49份，共生菌组合发酵物36份。
对比例5
与实施例1的区别在于，本对比例中，不添加玫瑰花水，白松露菌提取物28份，共生菌组合发酵物57份。
对比例6
与实施例1的区别在于，本对比例中，不添加共生菌组合发酵物，白松露菌提取物23份，玫瑰花水62份。
对比例7
与实施例1的区别在于，本对比例中，不添加糖类同分异构体。
对比例8
与实施例1的区别在于，本对比例中，不添加神经酰胺-3。
应用例1-4
一种肌底液，以肌底液为100wt％计，由如下组分组成：
由实施例1-4提供的皮肤调理剂复合物50wt％、保湿剂39wt％、其他皮肤调理剂10.5wt％和抗氧剂0.5wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，保湿剂由透明质酸4wt％、赤藓醇2wt％、1,2-己二醇1wt％、丁二醇4wt％、β-葡聚糖10wt％、甘油8wt％和水10wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，其他皮肤调理剂由0.5wt％氢化卵磷脂、丁二醇0.2wt％、苦参根提取物3.8wt％、胀果甘草根提取物3wt％和2.5wt％黄岑根提取物组成。
其中，抗氧剂为对羟基苯乙酮。
制备方法如下：
(1)将含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物加热至45℃，并与保湿剂混合搅拌10min；
(2)将步骤(1)得到的料液降温至40℃，然后加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合搅拌10min；
(3)将步骤(2)得到的料液降温至36℃，然后利用100目筛过滤、出料，得到所述肌底液。
应用例5
一种肌底液，以肌底液为100wt％计，由如下组分组成：
由实施例1提供的皮肤调理剂复合物40wt％、保湿剂45wt％、其他皮肤调理剂14.5wt％和抗氧剂0.4wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，保湿剂由透明质酸6wt％、赤藓醇2wt％、1,2-己二醇1wt％、丁二醇4wt％、β-葡聚糖12wt％、甘油8wt％和水12wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，其他皮肤调理剂由1.5wt％氢化卵磷脂、丁二醇0.5wt％、苦参根提取物5wt％、胀果甘草根提取物4wt％和3.5wt％黄岑根提取物组成。
其中，抗氧剂为对羟基苯乙酮。
制备方法如下：
(1)将含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物加热至50℃，并与保湿剂混合搅拌5min；
(2)将步骤(1)得到的料液降温至45℃，然后加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合搅拌5min；
(3)将步骤(2)得到的料液降温至38℃，然后利用200目筛过滤、出料，得到所述肌底液。
应用例6
一种肌底液，以肌底液为100wt％计，由如下组分组成：
由实施例1提供的皮肤调理剂复合物60wt％、保湿剂34wt％、其他皮肤调理剂5.4wt％和抗氧剂0.6wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，保湿剂由透明质酸4wt％、赤藓醇2wt％、1,2-己二醇1wt％、丁二醇1wt％、β-葡聚糖10wt％、甘油6wt％和水10wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，其他皮肤调理剂由1wt％氢化卵磷脂、丁二醇0.1wt％、苦参根提取物1.8wt％、胀果甘草根提取物1wt％和1.5wt％黄岑根提取物组成。
其中，抗氧剂为对羟基苯乙酮。
制备方法如下：
(1)将含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物加热至48℃，并与保湿剂混合搅拌8min；
(2)将步骤(1)得到的料液降温至42℃，然后加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合搅拌8min；
(3)将步骤(2)得到的料液降温至37℃，然后利用150目筛过滤、出料，得到所述肌底液。
应用例7
一种肌底液，以肌底液为100wt％计，由如下组分组成：
由实施例1提供的皮肤调理剂复合物41wt％、保湿剂53wt％、其他皮肤调理剂5.5wt％和抗氧剂0.5wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，保湿剂由透明质酸8wt％、赤藓醇2wt％、1,2-己二醇1wt％、丁二醇4wt％、β-葡聚糖15wt％、甘油8wt％和水15wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，其他皮肤调理剂由0.8wt％氢化卵磷脂、丁二醇05wt％、苦参根提取物1.2wt％、胀果甘草根提取物2wt％和1wt％黄岑根提取物组成。
其中，抗氧剂为对羟基苯乙酮。
制备方法如下：
(1)将含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物加热至45℃，并与保湿剂混合搅拌10min；
(2)将步骤(1)得到的料液降温至40℃，然后加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合搅拌10min；
(3)将步骤(2)得到的料液降温至36℃，然后利用100目筛过滤、出料，得到所述肌底液。
应用例8
一种肌底液，以肌底液为100wt％计，由如下组分组成：
由实施例1提供的皮肤调理剂复合物60wt％、保湿剂39wt％、其他皮肤调理剂14.5wt％和抗氧剂0.5wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，保湿剂由透明质酸4wt％、赤藓醇2wt％、1,2-己二醇1wt％、丁二醇4wt％、β-葡聚糖10wt％、甘油8wt％和水10wt％组成。
其中，以肌底液为100wt％计，其他皮肤调理剂由0.5wt％氢化卵磷脂、丁二醇0.2wt％、苦参根提取物5.8wt％、胀果甘草根提取物5wt％和2.5wt％黄岑根提取物组成。
其中，抗氧剂为对羟基苯乙酮。
制备方法如下：
(1)将含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物加热至45℃，并与保湿剂混合搅拌10min；
(2)将步骤(1)得到的料液降温至40℃，然后加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合搅拌10min；
(3)将步骤(2)得到的料液降温至36℃，然后利用100目筛过滤、出料，得到所述肌底液。
对比应用例1-8
对应用例1的区别在于，将实施例1提供的皮肤调理剂复合物替换为对比例1-8提供的皮肤调理剂复合物。
对比例9
与应用例1的区别在于，不添加实施例1提供的皮肤调理剂复合物，以去离子水替代。
对比例10
与应用例1的区别在于，不添加其他皮肤调理剂，替换为保湿剂，保湿剂中的各组分含量按比例调整。
对比例11
与应用例1的区别在于，不添加保湿剂，以去离子水替代。
性能测试1
对应用例1-8提供的肌底液进行安全性能测试，方法如下：
(1)红细胞溶血实验
红细胞悬液的制备：选择健康家兔，心脏取血9mL，加入2％的草酸钾溶液1mL，离心，弃去上清液，用20mmol/L的PBS溶液将沉淀物稀释至20mL，4℃保存备用。选择样品用PBS溶液稀释至不同浓度，每个样品设置5个浓度梯度。取10mL待测样品的稀释液，加入200μL上述红细胞悬液(控制样品终浓度分别为5、10、20、50、100mg/mL)，以蒸馏水作为全溶血对照，PBS溶液作为阴性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计测试其在560nm处的吸光度(A560)，按如下公式计算溶血率；
Figure BDA0002393073630000161
绘制溶血率-样品浓度标准曲线，计算50％红细胞发生溶血时的样品浓度(HD50)。
(2)蛋白变性实验：
将样品用PBS溶液稀释至10g/L，取10mL待测样品的稀释液，加入200μL上述红细胞悬液，以蒸馏水作为空白对照，1mg/mL十二烷基硫酸钠(SDS)溶液作为阳性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计分别测试其在540nm和575nm处的吸光度A540和A575，按照如下公式计算蛋白变性指数(DI)；
Figure BDA0002393073630000171
其中，R1＝空白对照组A575/空白对照组A540，R2＝实验组A575/实验组A540，R3＝阳性对照组A575/阳性对照组A540。
根据L/D值对待测样品的刺激性进行评价，其中L/D值为HD50/DI，红细胞溶血实验刺激性分级标准如下表1所示：
表1
L/D 分级
>100 无刺激性
10<L/D≤100 微刺激性
1<L/D≤10 轻度刺激性
0.1<L/D≤1 中度刺激性
上述红细胞溶血实验和蛋白变性实验的测试结果如下表2所示：
表2
Figure BDA0002393073630000172
Figure BDA0002393073630000181
由应用例和性能测试可知，本发明提供的肌底液刺激性分级为无刺激性，说明本发明提供的肌底液具有温和无刺激的特点。
性能测试2
对应用例1-8和对比应用例1-11提供的肌底液进行性能测试，方法如下：
(1)经皮失水变化率：仪器为德国CK公司的Tewameter TM300，测试外部环境：室温25℃，湿度60％。
选取200名皮肤健康的18-40岁的志愿者，男女比例各占一半，随机分成20组，每组5名男性、5名女性，分别使用应用例1-8和对比应用例1-11提供的肌底液以及设置一组空白对照组(水)。
在使用前皮肤组合物前，以及连续使用4天后，分别测试各位受试者的经皮失水变化率(以使用前为100％计)，每个数据测试三次，取平均值后，计算每组平均值，保留小数点后一位。
(2)体外称重法保湿性能测试：称取样品0.2g，分别均匀涂敷在贴有微孔通气胶带的5cm×5cm的玻璃板上，并将玻璃板放入恒温恒湿的干燥器中，分别称量玻璃板放置4h后的质量，计算其保湿率。保湿率计算公式为：保湿率/％＝(M2-M0)/(M1-M0)×100％。
其中，M0为玻璃板板质量/g，M1为加样后玻璃板质量/g，M2为干燥器中放置若干小时后玻璃板质量/g。
(3)抗氧化性能：将样品配成浓度为1％的样品溶液(溶剂乙醇)，进行超氧阴离子自由基清除能力评价试验：
取0.05mol/L pH＝8.2的Tris-HCl缓冲溶液4.5mL，于25℃水浴锅中预热30min。再加入1mL样品溶液和0.4mL 25mol/L的邻苯三酚溶液，混匀后，于25℃水浴中反应5min，加入1mL 8mol/L的HCl终止反应。以Tris-HCl缓冲溶液作参比，在299nm处测吸光度值。空白对照组用1mL样品溶液的溶剂来替代样品溶液；
其中，超氧阴离子自由基清除率(％)＝[1-(Ay/Ak)]×100％；
Ak为空白对照组的吸光度值，Ay为样品组的吸光度值。
(4)促进弹性蛋白生成实验：将人成纤维细胞按照2×104个/孔的密度接种在96孔板上，加入新鲜培养基在37℃培养箱中培养24h，待细胞贴壁后，更换新的培养基，并分别加入应用例1-8和对比应用例1-11提供的肌底液(控制样品终浓度为50mg/mL)，以20mmol/L的PBS溶液作为空白对照，然后在37℃培养箱中培养2天。
培养结束后，利用细胞裂解液将细胞洗脱下来，并超声破碎。采用Biocolor弹性蛋白检测试剂盒对弹性蛋白的含量进行检测：用弹性蛋白沉淀剂处理样本，使弹性蛋白沉淀下来，离心分离，去除上清液，向沉淀中加入染料和反应液，反应形成弹性蛋白-染料复合物，离心分离并用PBS溶液洗涤三次，去除未结合的染料，添加染料释放剂，使弹性蛋白-染料复合物中的染料释放出来，采用分光光度计测定样品在513nm处的吸光度。根据吸光度-染料浓度标准曲线计算弹性蛋白的表达量(应用例和对比应用例中弹性蛋白表达量是相对于空白组的相对表达量，空白组的表达量计为1)。
测试结果见表3和表4：
表3
Figure BDA0002393073630000201
Figure BDA0002393073630000211
经皮失水率是一种反映皮肤屏障功能的重要指标，经皮失水率的增加可以认为与皮肤屏障功能下降有关，在本发明中，通过对比使用样品前和使用样品后的经皮失水变化率，来确定本发明的肌底液对皮肤屏障的修复效果。
由应用例和性能测试可知，本发明提供的肌底液具有修复皮肤屏障，刺激细胞再生，提高皮肤弹性，减少皱纹的功效，同时具有优异的保湿效果；其中，经皮失水变化率在100％以下(测试前为100％)，说明本发明提供的肌底液正在缓慢修复皮肤屏障；且水分保持率较高，在83％以上，超氧阴离子自由基清除率在91％以上，弹性蛋白表达量在5.0以上，表明本发明提供的肌底液促进了细胞生长，增加了皮肤弹性，减少了皱纹。
由应用例1和对比例1-6的对比可知，本发明的共生菌组合发酵物、白松露菌提取物和玫瑰花水具有协同作用，可以大幅度增加皮肤弹性以及保湿效果。由应用例1和对比例7-8的对比可知，本发明中的肌底液中的皮肤调理剂复合物中的组分缺一不可。由应用例1和对比例9-11的对比可知，本发明的肌底液中的保湿剂、皮肤调理剂复合物和其他调理剂三者缺一不可。
综上所述，本发明提供的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物和肌底液温和安全无刺激，同时能够有效对抗皮肤皱纹，通过抗氧化以及增加皮肤弹性的方法减缓皱纹的产生；同时，本发明提供的肌底液具有优异的修复皮肤屏障的功效，并且保湿性较佳。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物、肌底液及其制备方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (17)

1.一种含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物，其特征在于，以所述皮肤调理剂复合物的总质量为100%计，包括15-40%共生菌组合发酵物、10-20%白松露菌提取物、30-50%玫瑰花水、5-10%糖类同分异构体和5-10%神经酰胺-3；
所述共生菌组合发酵物的共生菌包括裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的组合，所述共生菌组合发酵物的发酵原料包括大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子；
所述共生菌中裂裥菌、嗜热栖热菌、酵母菌和乳酸杆菌的质量比为(8-18):(4-8):(2-6):(1-3)；
所述发酵原料中大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子的质量比为(40-60):(40-60):1:(20-30):(20-30)；
所述共生菌组合发酵物由包括以下步骤的方法制备得到：
（1）将大米、川谷籽、人参、巨藻和覆盆子粉碎后与水混合，得到待发酵液，并进行灭菌处理；
（2）将步骤（1）得到的灭菌后的待发酵液接种酵母菌和乳酸杆菌进行第一次发酵，然后加入裂裥菌进行第二次发酵，最后加入嗜热栖热菌进行第三次发酵，得到所述共生菌组合发酵物。
2.根据权利要求1所述的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物，其特征在于，所述共生菌的质量和为所述发酵原料质量和的20-30%。
3.根据权利要求1或2所述的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
将共生菌组合发酵物和神经酰胺-3加入玫瑰花水中进行第一次混合，然后再依次加入白松露菌提取物和糖类同分异构体进行第二次混合，得到所述含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述第一次混合的温度为50-55℃，时间为10-15 min。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述第二次混合的温度为45-50℃，时间为10-15 min。
6.一种肌底液，其特征在于，包括权利要求1或2所述的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物。
7.根据权利要求6所述的肌底液，其特征在于，所述肌底液按质量百分含量包括如下组分：
权利要求1或2所述的含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物40-60 wt%、保湿剂10-60 wt%、其他皮肤调理剂5-15 wt%和抗氧剂0.4-0.6 wt%。
8.根据权利要求7所述的肌底液，其特征在于，所述保湿剂包括透明质酸、赤藓醇、1,2-己二醇、丁二醇、β-葡聚糖、甘油和水。
9.根据权利要求7所述的肌底液，其特征在于，所述其他皮肤调理剂包括氢化卵磷脂、丁二醇、苦参根提取物、胀果甘草根提取物和黄岑根提取物。
10.根据权利要求7所述的肌底液，其特征在于，所述抗氧剂包括对羟基苯乙酮。
11.根据权利要求6-10中的任一项所述的肌底液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
将含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物加热，并与保湿剂混合均匀，然后加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合，最后过滤、出料，得到所述肌底液。
12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述加热的温度为45-50℃。
13.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述混合均匀的时间为5-10 min。
14.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合的温度为40-45℃，时间为5-10 min。
15.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述过滤为利用100-200目筛过滤。
16.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述过滤的温度为36-38℃。
17.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
（1）将含共生菌组合发酵物的皮肤调理剂复合物加热至45-50℃，并与保湿剂混合搅拌5-10 min；
（2）将步骤（1）得到的料液降温至40-45℃，然后加入其他皮肤调理剂和抗氧剂混合搅拌5-10 min；
（3）将步骤（2）得到的料液降温至36-38℃，然后利用100-200目筛过滤、出料，得到所述肌底液。
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