CN116172914A - 一种发酵组合物及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种发酵组合物及其制备方法与应用，涉及化妆品技术领域。本发明提供了一种发酵组合物，包括以下重量份的组分：二裂酵母发酵产物溶胞产物50‑70份、乳酸杆菌发酵溶胞产物10‑30份、乙酰壳糖胺10‑20份、糖原1‑10份。本发明提供了一种发酵组合物，通过采用特定组分的复配，并通过控制组合物中各组分的重量份，使各组分之间相互配合，发挥协同作用，针对不同的靶点在多重机制下全方位修护受损肌肤，使受损老化的皮肤得到填充和修护，可达到延缓皮肤衰老的目的，效果显著且作用温和。

Description

一种发酵组合物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，尤其是一种发酵组合物及其制备方法与应用。

背景技术

空气中的可吸入颗粒物、二氧化硫、氮氧化合物、一氧化碳、臭氧等有害物质不仅危害到人体呼吸道的健康，还极易造成面部皮肤出现红肿和过敏，造成这种情况是因为皮肤表层失去了正常的保护功能，引起了皮肤水分含量的散失，从而出现皮肤干燥、脱屑或瘙痒，此时空气中的有害物质、皮肤表面的病菌、花粉等过敏源便容易经过受损的皮肤屏障而进入皮肤内部，从而引发进一步的皮肤炎症反应。

引起皮肤老化的原因相当多。环境压力每天给皮肤造成的细微影响很快就会显现出来。当过度日晒、低温、风、空气污染和情感波动等因素导致的极端压力与皮肤受到的损害叠加时，情况将进一步恶化。皮肤外观迟早会体现这些影响的后果，首先会出现发红或极度干燥，然后可以看到细纹、皱纹或皮肤变色。幸运的是，皮肤能够发现这些问题并采取行动来修复受到的损伤。然而，这是一场与时间的赛跑。只要皮肤能及时再生，修复的几率就很大。过度和持续地接触压力会导致释放自由基，从而损伤皮肤。到了这一阶段，长期的明显损伤将不可避免。

针对以上问题，目前市面上的抗污染类化妆品较少，加之晒伤、术后等一些外在因素所造成的影响，受损皮肤的防护、修护一并成为越来越多人渴望被解决的问题。专利CN201910202428.7提供了一种修复皮肤角质层的化妆水，所述化妆水虽可抑制面部皮肤真菌感染，具有去痘效果，可进一步修护皮肤，但其配方中含有激素，只能起到暂时缓解皮肤炎症的作用，并未从根本上解决问题。针对上述修护皮肤类产品存在的缺陷，开发一种作用温和、可全方位修护皮肤、不含激素的发酵组合物是目前研究的重点。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种发酵组合物及其制备方法与应用。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案为：一种发酵组合物，包括以下重量份的组分：二裂酵母发酵产物溶胞产物50-70份、乳酸杆菌发酵溶胞产物10-30份、乙酰壳糖胺10-20份、糖原1-10份。

二裂酵母发酵产物溶胞产物——是一种双歧杆菌提取物，含有代谢产物、细胞质成分、细胞壁组分和多糖复合物。这种借助生物技术获得的活性物质能特异性地支持皮肤自身的保护和修复机制，因此能对抗皮肤早衰。能使各种介质的比例恢复平衡，这对免疫系统的调控十分重要。这样，受损的细胞得到修复，使皮肤保持充满活力的年轻外观。乳酸菌发酵溶胞产物——含有乳酸菌素等具有抑菌作用的多肽化合物，是天然的抑菌剂，对皮肤具有镇静，杀菌作用，同时粘附于表皮细胞，形成屏障。富含乳酸和乳酸钠，是人体天然保湿因子(NMF)中主要的水溶性酸类，吸湿性强，有效增强角质层的水合作用，防止皮肤水分流失。包含氨基酸、小肽、多糖、B族维生素等有益护肤的成分，可加强角质层代谢，去除细胞自由基，抑制脂质的过氧化，激活机体修复性能，抑制细胞酪氨酸酶活性，具有修复、美白、抗氧化的功能。乙酰壳糖胺(NAG，N-乙酰氨基葡萄糖)——是生物细胞内外许多重要多糖(透明质酸等)与糖蛋白地基本组成单位，是合成双歧因子地重要前提。这些物质在细胞内外起到支持、保护、屏障、免疫、信息传递等重要的生理功能。糖原——补充皮肤中随着衰老而减少的糖原，促进ATP生成并增加细胞能量。促进肌肤自身产生透明质酸和神经酰胺，改善皮肤水分，皱纹和毛孔。参与抗氧化蛋白的表达，并抑制UV等引起的ROS积累。

本发明通过特定的二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸杆菌发酵溶胞产物、乙酰壳糖胺、糖原的协同，得到了一种发酵组合物，在上述特定重量份选择下，相互配合，发挥协同作用，针对不同的靶点在多重机制下修护受损肌肤，使受损老化的皮肤得到填充和修护，可达到延缓皮肤衰老的目的，效果显著且作用温和。

优选地，所述的发酵组合物，包括以下重量份的组分：二裂酵母发酵产物溶胞产物55-65份、乳酸杆菌发酵溶胞产物15-25份、乙酰壳糖胺12-17份、糖原3-8份。进一步优选地，所述的发酵组合物，包括以下重量份的组分：二裂酵母发酵产物溶胞产物60份、乳酸杆菌发酵溶胞产物20份、乙酰壳糖胺15份、糖原5份。

发明人经过大量实验探究后发现，当二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸杆菌发酵溶胞产物、乙酰壳糖胺、糖原4种组分在上述特定重量份选择下，修护皮肤的效果更佳。当二裂酵母发酵产物溶胞产物60份、乳酸杆菌发酵溶胞产物20份、乙酰壳糖胺15份、糖原5份时，修复效果达到最佳。

此外，本发明提供了所述的发酵组合物在化妆品中的应用。所述化妆品为柔肤水、面霜、乳液、精华中的一种。

进一步地，本发明提供了一种化妆品，所述化妆品为柔肤水，包括以下重量百分比的组分：发酵组合物1-10％、皮肤调理剂0.5-1％、pH调节剂0.1-0.5％和水余量。

优选地，所述皮肤调理剂为1，2己二醇、对羟基苯乙酮、氯化钠、氯化钾中的至少一种，所述pH调节剂为精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、十二水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾中的至少一种。

优选地，所述化妆品为柔肤水，包括以下重量百分比的组分：发酵组合物6.25％、氯化钠0.75％、氯化钾0.019％、十二水磷酸氢二钠0.336％；磷酸二氢钾0.022％、水92.623％。

另外，本发明提供了所述的化妆品的制备方法，包括如下步骤：

(1)将皮肤调理剂和水混合后加热至80-85℃，分散均匀后降温至40-45℃，得到混合液A；

(2)将pH调节剂加入步骤(1)制备得到的混合液A中，混合均匀，得到混合液B；

(3)将发酵组合物加入步骤(2)制备得到的混合液B中，混合后得到所述化妆品。

相对于现有技术，本发明的有益效果为：本发明提供了一种发酵组合物，通过采用特定组分的复配，并通过控制组合物中各组分的重量份，使各组分之间相互配合，发挥协同作用，针对不同的靶点在多重机制下全方位修护受损肌肤，使受损老化的皮肤得到填充和修护，可达到延缓皮肤衰老的目的，效果显著且作用温和。

附图说明

图1为样品1细胞毒性测试形态学结果图；

图2为组织形态测试结果图；

图3为屏障相关蛋白LOR测试结果图。

具体实施方式

为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明。实施例中，所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法，所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

具体地，本发明所用原料如下：

二裂酵母发酵产物溶胞产物，厂家湖州蔻婷生物科技有限公司，型号BFL；

乳酸杆菌发酵溶胞产物，厂家湖州蔻婷生物科技有限公司；

乙酰壳糖胺，厂家江苏澳新生物工程有限公司；

糖原，厂家GLICO NUTRITION CO.,LTD.，型号BIOGLYCOGEN；

水解酵母，厂家KATAKURA INDUSTRIES Co.,Ltd.，型号LEVURE GL；

乳酸杆菌/大豆发酵产物提取物，厂家Technoble Co.,Ltd.，型号

PESTICIDE-FREE SOYMILK-FF；

脱乙酰壳多糖，厂家泰安市江舟生物科技有限公司；

壳多糖，厂家江苏普乐司生物科技有限公司；

本发明设置实施例及对比例，实施例及对比例的发酵组合物中二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸杆菌发酵溶胞产物、乙酰壳糖胺、糖原重量比关系如表1和表2所示。

实施例及对比例所述柔肤水，包含表1和表2所述的发酵组合物，包括以下重量百分比的组分：发酵组合物6.25％、氯化钠0.75％、氯化钾0.019％、十二水磷酸氢二钠0.336％；磷酸二氢钾0.022％、水92.623％。

实施例及对比例所述柔肤水的制备方法，包括如下步骤：

(1)将皮肤调理剂和水混合后加热至80-85℃，分散均匀后降温至40-45℃，得到混合液A；

(2)将pH调节剂加入步骤(1)制备得到的混合液A中，混合均匀，得到混合液B；

(3)将发酵组合物加入步骤(2)制备得到的混合液B中，混合后得到所述柔肤水。

表1

表2

性能测试1舒缓功效测试

试验对象：年龄在25-45周岁皮肤存在炎症如脱皮、红斑、瘙痒的志愿者110人，随机分成11组，每组10人。

试验过程：测试时间为30天，每天早晚各涂抹一次，涂抹本发明实施例1-5和对比例1-6制备的产品0.05mg/cm²，按摩至吸收，期间不可使用其他产品，同时设有空白组(不涂任何产品)，分别于使用后的7天、14天、30天后观察皮肤情况。

试验结果：皮肤状况分为4个级别：重度红斑湿疹(9-10分)、中度红斑湿疹(6-8分)、轻度红斑湿疹(3-5分)、正常(1-2分)。

测试结果如表3。

表3舒缓效果测试结果

组别	0天	7天	14天	30天
					实施例1	9	2	-	-
实施例2	9	3	2	-
					实施例3	9	4	2	-
实施例4	9	5	4	2
					实施例5	9	5	4	1
对比例1	9	6	5	3
					对比例2	9	8	6	5
对比例3	9	8	6	5
					对比例4	9	7	5	4
对比例5	9	6	5	3
					对比例6	9	7	5	3
空白组	9	9	9	10

由上表可知，本发明实施例1-5制备得到的柔肤水使用7天后已经由重度红斑湿疹转变为轻度。且二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸杆菌发酵溶胞产物、乙酰壳糖胺、糖原的重量份对制备得到的发酵组合物的舒缓修复效果影响很大。当二裂酵母发酵产物溶胞产物60份、乳酸杆菌发酵溶胞产物20份、乙酰壳糖胺15份、糖原5份时，修复效果达到最佳，仅7天后恢复正常。

对比例1-6制备得到的柔肤水，在使用效果方面虽然也有一定的效果，但是总体来讲，显效慢，且使用一个月后仍然出现轻度红斑湿疹。

性能测试2

将实施例1命名为Lyfida2.0和对比例1命名为Lyfida1.0得到的发酵组合物送样至陕西博溪通用检测科技有限公司CMA(检测检验机构资质认定证书)证书号：202714340013，进行维护功效检测。

维护功效测试。

检测模型：SLS刺激表皮模型EpiKutis；皮肤接触刺激性较强的一些待测物或紫外线等，会导致皮肤屏障发生临床性的急性损伤，导致皮肤干燥，出现红斑现象。阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(Sodium lauryl sulfate，SLS)具有双亲性(亲水性和亲脂性)特征，在较大浓度下接触皮肤后能够损伤皮肤屏障，进一步损伤活细胞，尤其是屏障中的脂质成分以及细胞膜。本实验以体外重组的表皮模型EpiKutis为研究对象，采用SLS刺激造成损伤模型，然后进行产品处理，靶向组织形态、屏障相关蛋白LOR含量变化以及表皮失水率变化，进行化妆品原料的修护功效检测。

检测指标：组织形态；屏障相关蛋白：兜甲蛋白LOR含量；表皮失水率变化TEWL。

组织形态——组织形态是经过HE染色后的组织微观生理学结构分析，通过模型组织学形态，可以看出不同处理条件下皮肤屏障的变化情况。经SLS刺激后，表皮模型EpiKutis角质层疏松，活细胞层活细胞数量明显减少、排列紊乱。而样品施用能够使角质层恢复紧密，厚度增加；活细胞层的活细胞数量明显增多、厚度增加，细胞排列较为有序。表皮组织恢复原有形态，可认为样品具有一定的修护功效。

兜甲蛋白LOR——兜甲蛋白(LOR)是CE组装过程的关键成分，约占CE组成含量的80％，对皮肤屏障起关键性加固作用，其表达升高能够增强皮肤的渗透屏障。样品施用使得LOR表达水平升高，皮肤屏障结构加固，可认为样品具有一定的修护功效。

表皮失水率变化TEWL——经表皮失水率(Trans-Epidermal Water Loss)，又称透皮失水率，是指经过表皮，在单位时间内流失水分的速度。TEWL越大，表示单位时间内流失的水分越多，皮肤保湿能力越弱，皮肤屏障保护能力越弱。

检测方法：组织形态——H&E，兜甲蛋白LOR——IF、表皮失水率变化TEWL——TW24仪器测试。

测试过程：设置空白对照组(BC)、阴性对照组(NC)、阳性对照组(PC)、样品组(Sample)。

空白对照组(BC)不作任何处理；

阴性对照组(NC)0.1％的SLS诱导；

阳性对照组(PC)给样浓度50μM，0.1％的SLS诱导；

样品组1为Lyfida2.0，0.1％的SLS诱导；

样品组2为Lyfida1.0，0.1％的SLS诱导。

测试结果：如图2-3所示。

组织形态测试结果如图2所示，与BC组相比，NC组表皮模型活细胞层变薄(箭头)，而且出现空泡现象(圆圈)，说明SLS刺激条件有效。与NC组相比，PC组模型改活细胞层增厚，细胞损伤明显改善，说明本次阳性对照检测有效。与NC组相比，样品1(Lyfida 2.0)-6.25％、样品2(Lyfida 1.0)-6.25％受损现象明显改善，样品施用使角质层恢复紧密，厚度增加；活细胞层的活细胞数量明显增多、厚度增加，细胞排列较为有序。

屏障相关蛋白LOR测试结果如图3和表4所示，与BC组相比，NC组LOR含量显著下降，说明SLS刺激条件有效。与NC组相比，PC组LOR含量显著上升，说明本次阳性对照检测有效。与NC组相比，样品1(Lyfid a 2.0)-6.25％组的LOR含量显著上升。样品1对模型损伤情况具有明显改善，样品施用使荧光分布面积显著增加，荧光强度有所提升，LOR蛋白含量显著升高(P<0.01)。图2原图为彩色，发白部分为原荧光分布显示。

表4

表5

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表皮失水率变化TEWL测试结果如表5所示，与BC组相比，NC组的TEWL值显著上升，说明本次SLS刺激条件有效。与NC组相比，PC组的TEWL值显著下降，说明本次阳性对照检测有效。与NC组相比，样品1(Lyfida 2.0)-6.25％、样品2(Lyfida 1.0)-6.25％组的TEWL值显著下降。

最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (8)

1.一种发酵组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：二裂酵母发酵产物溶胞产物50-70份、乳酸杆菌发酵溶胞产物10-30份、乙酰壳糖胺10-20份、糖原1-10份。

2.如权利要求1所述的发酵组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：二裂酵母发酵产物溶胞产物55-65份、乳酸杆菌发酵溶胞产物15-25份、乙酰壳糖胺12-17份、糖原3-8份。

3.如权利要求2所述的发酵组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：二裂酵母发酵产物溶胞产物60份、乳酸杆菌发酵溶胞产物20份、乙酰壳糖胺15份、糖原5份。

4.一种如权利要求1-3任一项所述的发酵组合物在化妆品中的应用。

5.一种化妆品，其特征在于，所述化妆品为柔肤水，包括以下重量百分比的组分：发酵组合物1-10％、皮肤调理剂0.5-1％、pH调节剂0.1-0.5％和水余量。

6.如权利要求5所述的化妆品，其特征在于，所述皮肤调理剂为1，2己二醇、对羟基苯乙酮、氯化钠、氯化钾中的至少一种，所述pH调节剂为精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、十二水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾中的至少一种。

7.如权利要求6所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品为柔肤水，包括以下重量百分比的组分：发酵组合物6.25％、氯化钠0.75％、氯化钾0.019％、十二水磷酸氢二钠0.336％；磷酸二氢钾0.022％、水92.623％。

8.一种如权利要求5-7任一项所述的化妆品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将皮肤调理剂和水混合后加热至80-85℃，分散均匀后降温至40-45℃，得到混合液A；

(2)将pH调节剂加入步骤(1)制备得到的混合液A中，混合均匀，得到混合液B；

(3)将发酵组合物加入步骤(2)制备得到的混合液B中，混合后得到所述化妆品。

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