CN116549359A - 一种优化皮肤油脂质量的祛痘组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种优化皮肤油脂质量的祛痘组合物及其制备方法和应用,属于化妆品技术领域;本发明提供祛痘组合物包括以下质量份的组分:芒果叶提取物0.1‑5份、愈创木提取物0.1‑10份、乙酰壳糖胺0.1‑10份、酵母提取物0.1‑10份、EUK‑134 0.01‑5份。本发明提供的祛痘组合物之间能够相互配合,从整体上实现对皮脂成分的优化,维持皮脂组分饱和脂肪酸/不饱和脂肪酸的比例的稳定,抑制皮脂过氧化,达到温和祛痘、修护皮脂层屏障的作用,并且该祛痘组合物具有优异的抗菌性能。同时该祛痘组合物能够作为活性成分添加进化妆品中,实现化妆品的温和无刺激;并且该祛痘组合物的制备方法简单、原料易得,易于实际生产。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域,尤其涉及一种优化皮肤油脂质量的祛痘组合物及其制备方法和应用。
背景技术
一直以来,过度的皮脂分泌、毛囊皮脂腺的角化异常、痤疮丙酸杆菌和炎症都被认为是导致痤疮的四大因素。
目前,市面上宣称控油祛痘除痤疮的产品中,一方面,大多数依旧单一、片面的从全面控制皮脂分泌的角度去达到抑制痤疮的效果,没有考虑到皮脂中各成分的占比平衡,一味的控油可能会将过氧化和抗氧化的皮脂一起抑制,对于优化皮脂结构没有任何好处,且存在过度抑制优质的皮脂却保留易致痘易致炎的皮脂的情况,尤其是油敏肌人群和反复性痤疮人群中,单纯的控油无法有效的解决痤疮炎症和粉刺的产生,导致痤疮无法治愈。另一方面,酸类成分作为强效的控油、剥脱以及杀菌成分也被广泛的运用在控油祛痘的产品中,没有考虑到高功效成分带来的高刺激问题,致使皮肤状态越来越糟糕;同时为了提升组分的长期抗菌性,产品中都会加入一定的抗菌剂,而抗菌剂在一定程度上也带来刺激性较大的缺陷。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种能够优化皮脂成分、维持皮脂组分饱和脂肪酸/不饱和脂肪酸的比例的稳定、抑制皮脂过氧化、温和祛痘、修护皮脂层屏障且抗菌性优异的祛痘组合物及其制备方法和应用。
为实现上述目的,在本发明的第一方面,本发明提供了一种优化皮肤油脂质量的祛痘组合物,所述祛痘组合物包括以下重量份的组分:芒果叶提取物0.1-5份、愈创木提取物0.1-10份、乙酰壳糖胺0.1-10份、酵母提取物0.1-10份、EUK-1340.01-5份。
发明人前期研究发现,皮脂分泌的失调、皮肤表面脂质的氧化/抗氧化比例失衡和皮脂成分的改变是诱发痤疮炎症的主要因素,且可能比皮脂的过量分泌影响更大。皮脂由甘油三酯、游离脂肪酸、蜡酯、角鲨烯、胆固醇酯和胆固醇组成,这些脂质可以被多种因素氧化,例如被痤疮丙酸杆菌分泌的卟啉和紫外线导致的单线态氧氧化,被大气中的氧导致的自由基氧化。在构成皮脂的脂质中,甘油三酯氧化成不饱和脂肪酸,以及角鲨烯被单线态氧氧化产生过氧化物—角鲨烯单氢过氧化氢(SQOOH)是皮脂氧化后的最明显的变化。过氧化的脂质能够通过激活脂氧合酶产生大量的活性氧自由基,增加促炎细胞因子IL-6、COX等的产生,诱导炎症反应,并且具有极强的细胞毒性,导致反应性毛囊角化过度和粉刺形成,由此产生痤疮。并且发明人进一步研究发现,患有痤疮的皮肤比正常的皮肤分泌的皮脂要更多,同时,二者的皮脂中含有的饱和脂肪酸以及不饱和脂肪酸的比例显著不同。患有痤疮的人群的皮脂中甘油三酯和角鲨烯的含量约为正常皮肤人群的2倍,过氧化脂质的含量也显著高于正常皮肤人群。以上数据证明优化皮脂成分结构、减少过氧化脂质,防止皮脂过氧化在预防痤疮炎症方面的重要性,这可能是治疗反复性痤疮的一种有效手段。
在上述研究基础上,本发明提供了一种祛痘组合物,通过添加合适质量份范围的芒果叶提取物、愈创木提取物、乙酰壳糖胺、酵母提取物和EUK-134,五者之间能够相互配合,从整体上实现对皮脂成分的优化,维持皮脂组分饱和脂肪酸/不饱和脂肪酸的比例的稳定,抑制皮脂过氧化,从而达到温和祛痘、修护皮脂层屏障的作用,并且本发明提供的祛痘组合物具有优异的抗菌性能,将该祛痘组合物作为活性组分进行化妆品的制备时可以避免抗菌剂的加入,进一步提升产品的温和性。
具体地,芒果叶提取物对皮脂的分泌具有一定的抑制,并且在针对性的抑制皮脂中致炎致痘的不饱和脂肪酸的基础上,对胆固醇和蜡脂等稳定成分无影响,即能够达到优化皮脂成分组成,稳定皮脂膜状态,预防痘痘的产生和修护皮肤屏障的作用。愈创木提取物中含有丰富的酚类、木质素、醌类、皂苷、倍半萜和三萜类成分,具有抗炎、抗病毒、抗菌、收敛、修复的作用,可抑制皮脂腺中过量的油脂产生炎症进而发展为炎性痘痘的现象,并对痘印和痘坑具备一定的促愈合作用。乙酰壳糖胺是葡萄糖的一种衍生物,几乎存在于所有有机体中,作为糖类物质,它可以促进透明质酸的合成,具有强效的保湿和修护作用,还可以分离细胞间“铰链”——CD44基因,促使细胞粘性下降,软化角质,温和的剥离老旧细胞。酵母提取物为利用生物抽提技术从植物酵母菌种中分离得到有效成分,具有抗氧化、抗自由基,促进新陈代谢,保湿滋润的作用,可以抑制皮肤的皮脂氧化,使肌肤柔软细腻。EUK-134具有SOD和过氧化氢酶的特性,具有强抗氧化能力,可以催化超氧阴离子自由基形成过氧化氢,修护皮肤的氧化损伤,抑制自由基产生的炎症反应,稳定性高且可再生。
作为本发明所述祛痘组合物的优选实施方式,所述祛痘组合物包括以下重量份的组分:芒果叶提取物0.5-3份、愈创木提取物1-5份、乙酰壳糖胺0.2-3份、酵母提取物0.1-3份、EUK-134 0.01-1份。
作为本发明所述祛痘组合物的优选实施方式,所述祛痘组合物包括以下重量份的组分:芒果叶提取物0.8-1.5份、愈创木提取物1.2-3份、乙酰壳糖胺0.3-1份、酵母提取物0.5-1.5份、EUK-134 0.01-0.5份。
作为本发明所述祛痘组合物的优选实施方式,芒果叶提取物1份、愈创木提取物1.5份、乙酰壳糖胺0.5份、酵母提取物1份、EUK-134 0.1份。
发明人研究发现,当祛痘组合物中组分的添加份数发生变化时,会直接影响产品在多方面对皮脂的稳定和优化作用,并且会影响到产品的抗氧化效果、祛痘效果以及抗菌性能;同时,发明人实验时发现,单一组分的含量逐渐提升或减少对产品综合效果的影响并不是线性的,当进一步选择组分的添加份数在本发明优选的范围内时,得到的产品的综合效果最为优异。
作为本发明所述祛痘组合物的优选实施方式,所述芒果叶提取物中,芒果苷的质量百分数为80-90%。
本发明中的芒果叶提取物制备方法为:将洗净后的芒果叶晾至干燥,然后加入和原料等质量50%乙醇,而后放入分馏装置中,在60-85℃条件下进行定向分馏提取,同时加入等质量1-丁基-3-甲基咪唑氯盐离子液体,在常温下搅拌混合1.5-2.5小时,静置分层,离子液体层经减压蒸馏,获得富集芒果苷的芒果叶提取物;采用上述提取方法,通过提取参数的调控,可实现芒果叶提取物中的芒果苷的质量百分数在65-95%之间浮动。该提取物中高含量的芒果苷具有抗炎和抗氧化的作用,但是发明人研究发现,若是完全采用纯芒果苷而非芒果叶提取物时,得到的产品效果无法与使用芒果叶提取物相比;经发明人试验发现,当进一步优选芒果叶提取物中芒果苷的质量百分数为80-90%时,得到的产品的抗氧化作用以及对皮脂的稳定作用更优。
作为本发明所述祛痘组合物的优选实施方式,所述祛痘组合物中,芒果苷的质量百分数为18-30%,愈创木提取物的质量百分数为30-45%。
优选地,所述祛痘组合物中,芒果苷的质量百分数为20-25%,愈创木提取物的质量百分数为35-38%。
本发明中所述愈创木提取物的提取工艺为:称取愈创木,粉碎成粉末,加入愈创木重量的5~10倍体积的60%~95%的乙醇水溶液,在60~80℃下搅拌、提取1~3次,过滤、合并滤液,减压浓缩,即得到所述愈创木提取物。
采用上述提取方法制备得到的愈创木提取物中含有多种具有抗菌作用的物质,比如二氢愈创木脂酸、愈创木醇、布藜醇、愈创木酚等,发明人研究发现,芒果苷在自身具备抗菌性能的基础上,还能在一定程度上能够加强愈创木提取物的抗菌性能,即对愈创木提取物的抗菌性能起到一定的增效作用;当祛痘组合物中的芒果苷和愈创木提取物的质量百分数在优选的范围内时,得到的产品的抗菌性更为优异。
作为本发明所述祛痘组合物的优选实施方式,所述祛痘组合物中,乙酰壳糖胺的质量百分数为12-13%。
乙酰壳糖胺是采用酶解法提取得到的产物,底物为葡萄糖,由于其阳离子属性,能够协同愈创木提取物和芒果叶提取物发挥优异且长效的抗菌效果;发明人研究发现,当进一步选择祛痘组合物中的乙酰壳糖胺的质量百分数在上述范围内时,能够更好的与愈创木提取物和芒果叶提取物作用,实现更为优异的抗菌效果。
在本发明的第二方面,本发明提供了所述祛痘组合物的制备方法,所述制备方法包括以下步骤:将各组分混合,得所述祛痘组合物。
本发明提供的祛痘组合物的制备方法简单、常规,无需特殊的设备。
在本发明的第三方面,本发明提供了所述祛痘组合物在化妆品上的应用。
在本发明的第四方面,本发明提供了一种化妆品,所述化妆品包括本发明所述祛痘组合物。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式,所述化妆品中,本发明所述祛痘组合物的质量百分数为0.5-5%。
将本发明提供的祛痘组合物作为功效组分以上述质量百分数的含量添加进化妆品的制备上时,得到的化妆品具有良好的优化皮脂成分、维持皮脂组分饱和脂肪酸/不饱和脂肪酸的比例的稳定、抑制皮脂过氧化、温和祛痘、修护皮脂层屏障的功效,并且在不添加抗菌剂的情况下,也能达到良好的抑制相关细菌、真菌增殖的作用,且作用持久;若进一步提升祛痘组合物的含量,对效果的提升作用不明显。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式,所述化妆品还包括增稠剂、保湿剂、乳化剂、防腐剂、香精、pH调节剂和水中的至少一种。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式,所述化妆品中,包括以下质量百分数的组分:本发明所述祛痘组合物0.5-5%、增稠剂0.1-0.5%、保湿剂4-20%、乳化剂0.1-10%、防腐剂0.5-5%、香精0.01-0.2%、pH调节剂0.05-0.1%、水余量。
优选地,所述增稠剂包括黄原胶、卡波940、AVC、高分子纤维素中的至少一种;所述保湿剂包括甘油、丁二醇、低分子透明质酸钠中的至少一种;所述乳化剂包括椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、聚二甲基硅氧烷、氢化棕榈仁油、鲸蜡硬脂醇、聚甘油-6二硬脂酸酯、聚甲基倍半硅氧烷中的至少一种;所述防腐剂包括1,3-丙二醇、1,2-己二醇、对羟基苯乙酮中的至少一种;所述pH调节剂包括精氨酸、EDTA-2Na中的至少一种。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式,所述化妆品包括化妆水、乳液、面霜、面膜、精华液、防晒霜、喷雾中的任意一种。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
本发明提供了一种优化皮肤油脂质量的祛痘组合物,该祛痘组合物中的5种成分能够相互配合,在给出的范围内不仅能够从整体上实现对皮脂成分的优化,维持皮脂组分饱和脂肪酸/不饱和脂肪酸的比例的稳定,抑制皮脂过氧化,达到温和祛痘、修护皮脂层屏障的作用,并且本发明提供的祛痘组合物具有优异的抗菌性能。同时本发明提供的祛痘组合物能够作为活性成分添加进化妆品的制备中,能够避免化妆品中抗菌剂的添加,实现化妆品的温和无刺激性;同时本发明祛痘组合物的制备方法简单、原料易得,易于实际生产。
附图说明
图1为效果例5中实施例10乳液面部直观表现测试结果图;
图2为效果例5中实施例10乳液面部皮脂角鲨烯HPLC含量检测结果图。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点,下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
本发明所采用的试剂、方法和设备,如无特殊说明,均为本领域常规试剂、方法和设备;且无特别说明,平行实验使用的原料为同一批原料。
芒果叶提取物1:芒果苷的质量百分数为90%;
芒果叶提取物2:芒果苷的质量百分数为80%;
芒果叶提取物3:芒果苷的质量百分数为70%;
乙酰壳糖胺:江苏澳新生物工程有限公司;
酵母提取物:市售。
实施例1-9和对比例1-11
本发明实施例1-9和对比例1-11提供一种祛痘组合物,其组分含量(质量份)如表1所示;
表1
实施例1-9和对比例1-11提供的一种祛痘组合物的制备方法为:将各组分混合均匀,得祛痘组合物。
对比例12
本发明对比例提供一种祛痘组合物,其与实施例1的唯一差别在于用芒果苷替代芒果叶提取物1。
对比例13
本发明对比例提供一种祛痘组合物,其与实施例1的唯一差别在于用积雪草提取物替代愈创木提取物。
对比例14
本发明对比例提供一种祛痘组合物,其与实施例1的唯一差别在于用壳聚糖替代乙酰壳糖胺。
对比例15
本发明对比例提供一种祛痘组合物,其与实施例1的唯一差别在于用乳酸杆菌发酵产物替代酵母提取物。
对比例16
本发明对比例提供一种祛痘组合物,其与实施例1的唯一差别在于用维生素C替代EUK-134。
实施例10-18和对比例17-32
本发明实施例10-18和对比例17-32提供一种乳液,所述乳液的组分以及质量百分数如表2所示;
表2
其中,实施例10-18配方中的祛痘组合物分别为实施例1-9中制备得到的祛痘组合物,对比例17-32配方中的祛痘组合物分别为对比例1-16中制备得到的祛痘组合物制备得到的祛痘组合物;
实施例10-18和对比例17-32提供的乳液的制备方法为:
(1)将A组分与水混合搅拌,加热至75℃后,于1200rpm的转速下均质5min,均质结束后保温备用,得预制A组分;
(2)将B组分混合,加热至75℃后,于1200rpm的转速下均质5min,均质结束后保温备用,得预制B组分;
(3)将C组分混合,加热至60℃融化,得预制C组分;
(4)将预制A组分升温至80℃,于800rpm的转速下加入预制B组分,搅拌混合,接着降温至60℃后,于400rpm的转速下加入预制C组分搅拌混合,随后降温至40℃以下加入祛痘组合物继续搅拌10min,最后加入精氨酸调节pH,出料,得乳液。
实施例19
本发明实施例提供一种乳液,所述乳液与实施例10的唯一差别在于祛痘组合物的添加质量百分数为0.5%。
实施例20
本发明实施例提供一种乳液,所述乳液与实施例10的唯一差别在于祛痘组合物的添加质量百分数为8%。
实施例21
本发明实施例提供一种乳液,所述乳液与实施例10的唯一差别在于不添加防腐剂。
效果例1
本效果例对实施例1-9和对比例1-16中的祛痘组合物安全性进行探究,采用鸡胚绒毛尿囊膜试验进行探究,本操作按照中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T2329—2009《化妆品眼刺激性/腐蚀性的鸡胚绒毛尿囊膜试验》执行;具体包括以下步骤:
(1)将孵化至9日龄的鸡蛋,用镊子从鸡蛋的气室端剥开蛋壳,用质量分数为0.9%的生理盐水浸润内膜后,从边缘小心剥去蛋膜,漏出绒毛尿囊膜;
(2)用移液枪移取0.3mL的实施例1-9以及对比例1-16的受试样品,将其溶解于PBS(pH 7.0)中,稀释成体积分数为1%后测试;
(3)计时3min后,观察绒毛尿囊膜的血管变化,透明受试物可直接拍照观察,浑浊或影响观察的其他受试物可用质量分数为0.9%的生理盐水冲洗掉受试物后再拍照观察。用放大镜灯观察硅酮橡胶环和鸡胚绒毛尿囊膜的状况,血管充血、血管出血和鬼影血管是有刺激的反应情况。
如果观察表明全部6只鸡胚至少1种反应的评分为中度以上(总评分≥12),试验应重复一次。每只鸡胚记分=每只鸡胚观察到的出血、凝血和血管融解程度的和;ES=6只鸡胚得分的数学总和的平均值,每个样品平行测试6次,鸡胚测试标准(安全性终点评价标准)见表3;
表3
鸡胚评分 | 刺激性 |
ES≤12 | 无/轻度刺激性 |
12<ES<16 | 中度刺激性 |
ES≥16 | 强刺激性/腐蚀性 |
统计得到的结果,得到的结果中显示实施例1-9和对比例1-16的祛痘组合物的ES值都≤12,即所有祛痘组合物都为无/轻度刺激性,具有良好的安全性。
效果例2
本效果例对实施例1-9和对比例1-16中的祛痘组合物的抗氧化性进行探究,采用DPPH自由基清除实验进行探究,具体包括以下步骤:
(1)取0.001972g DPPH溶解于无水乙醇溶液,以无水乙醇溶液定容至25mL,在517nm处测量吸光度并记录吸光度值在200-800之间即得DPPH测试液;
(2)以实施例1-9和对比例1-16为测试样品,分别用移液枪吸取0.1mL样品溶液于PBS中配置为1%的样品测试液。分别按照如下A、B、C管溶液配置,室温下在黑暗中培养30min,在517nm处测量吸光度并记录吸光度值,每个样品重复3次;
A管:2mL样品+2mL DPPH测试液;
B管:2mL DPPH测试液+2mL PBS;
C管:2mLPBS+2mL样品;
调零:无水乙醇溶液;
计算方法为:DPPH自由基清除率=1-(A-C)/B×100%,实验重复3次取平均值,检测结果如表4所示;
表4
从表4中可以看出,当采用本发明的技术方案时,得到的祛痘组合物具有优异的体外清除DPPH的能力,具体地,清除率在61.47%以上;从实施例1-7和对比例1-11中可以看出,祛痘组合物之间的质量份会对产品的性能带来明显影响,当进一步选择实施例1-3中的组分的添加份数时,得到的祛痘组合物对DPPH的清除能力更强,在83.27%以上;
从实施例1和对比例1-10中可以看出,无论是只添加5种成分中的一种,还是不添加其中一种,得到的产品对DPPH的清除能力都明显下降,与实施例1相比,清除率下降幅度为48.02-65.35%之间;从实施例1和对比例12-16中可以看出,当采用具有相同功能的其他组分对本发明的5种组分进行替换时,得到的产品对DPPH的清除率也明显下降,与实施例1相比,清除率下降幅度为48.06%-72.00%之间;从上述数据中可以明显看出,本发明提供的祛痘组合物中的5种组分具有良好的协同效应,能够实现优异的DPPH清除效果。
效果例3
本效果例对实施例1-9、对比例1-3和对比例12-14中的祛痘组合物的抗菌性和实施例10、21中乳液的抗菌性进行探究,
金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus(ATCC6538)为革兰氏阳性细菌,大肠杆菌Escherichia coli(ATCC8739)为革兰氏阴性细菌,白色念球菌(ATCC 10231)为真菌,购自广东微生物菌种保藏中心,金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在Luria-Bertani(LB)培养基、37℃下活化,白色念珠菌在沙堡琼脂培养基、37℃下活化。根据《QBT 2738-2018日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》中“7.3抑菌型日化产品的抑菌效果检验方法(悬液定量法)”进行各样品抑菌效果的测定,测定时间为20min,抑菌率(%)结果如表5所示。
表5
大肠埃希氏菌 | 金黄色葡萄球菌 | 白色念珠菌 | 效果评价 | |
实施例1 | >99% | >99% | >99% | 具有较强抑菌效果 |
实施例2 | 96% | 94% | 94% | 具有较强抑菌效果 |
实施例3 | 97% | 96% | 96% | 具有较强抑菌效果 |
实施例4 | 92% | 93% | 94% | 具有较强抑菌效果 |
实施例5 | 96% | 97% | 95% | 具有较强抑菌效果 |
实施例6 | 90% | 87% | 89% | 具有抑菌效果 |
实施例7 | 88% | 92% | 87% | 具有抑菌效果 |
实施例8 | 93% | 87% | 91% | 具有较强抑菌效果 |
实施例9 | 82% | 79% | 88% | 具有抑菌效果 |
对比例1 | 45% | 55% | 43% | 不具有抑菌效果 |
对比例2 | 47% | 45% | 43% | 不具有抑菌效果 |
对比例3 | 67% | 63% | 52% | 具有抑菌效果 |
对比例12 | 42% | 43% | 37% | 不具有抑菌效果 |
对比例13 | 51% | 42% | 41% | 不具有抑菌效果 |
对比例14 | 37% | 43% | 42% | 不具有抑菌效果 |
实施例10 | >99% | >99% | >99% | 具有较强抑菌效果 |
实施例21 | >99% | >99% | >99% | 具有较强抑菌效果 |
从表5中可以看出,采用本发明的技术方案得到的祛痘组合物的抗菌性都极为优异,实验条件下大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和黑曲霉都没有检测到,且祛痘组合物整体外观无改变,即具有优异的稳定性;进一步地,当实施例1-3和实施例5中芒果苷的质量百分数在18-30%之间,愈创木提取物的质量百分数在30-45%之间时,得到的祛痘组合物的抗菌性能更为优异,在相同的时间内,检测到的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌更低,尤其是实施例1中,当芒果苷的质量百分数为20-25%、愈创木提取物的质量百分数为35-38%且乙酰壳糖胺的质量百分数在12-13%时,得到的祛痘组合物与其他祛痘组合物相比,在相同的时间内,检测到的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌最低。同时从实施例1和对比例1-2中可以看出,当组分中不添加芒果叶提取物和愈创木提取物时,得到的产品不具有抑菌效果;实施例1、对比例3中可以看出,当不添加乙酰壳糖胺时,得到的产品的抑菌效果显著下降,说明乙酰壳糖胺与愈创木提取物以及芒果叶提取物具有协同抑菌的效果,组合使用时可以发挥最大抑菌效率;此点从实施例1和对比例12-14中也可以看出,当采用其他类似成分替代乙酰壳糖胺、愈创木提取物以及芒果叶提取物时,得到的产品的抑菌效率也明显下降。
从实施例10和实施例21中可以看出的,当采用本发明的祛痘组合物时,将其作为活性成分进行乳液的制备时,即使是不添加防腐剂,也能够取得良好的抑制相关菌增殖的作用,从而能够在一定上减少防腐剂的添加,进一步提升产品的温和性。
效果例4
本效果例测试实施例1和对比例1-6、对比例11-12、对比例14-15对体外SZ95细胞油脂分泌的影响,具体步骤如下:
将SZ95细胞置于含有10%胎牛血清、500U/mL青霉素、500U/mL链霉素、5ng/mL表皮生长因子的Sebomed培养液中,在37℃、5%CO2的饱和湿度环境下活化培养。将待测实施例1和对比例1-6、对比例11-12、对比例14-15加入DMSO稀释为体积比为0.1%的浓度。
将细胞悬液接种于96孔细胞培养板(黑色底透型),每孔1.0×104个细胞,培养24h。孵育24h后弃上清,空白对照组加入100μL维持培养基,模型对照组加入100μL含10ng/mL氢化可的松的维持培养基,阳性对照组加入10ng/mL氢化可的松100μL和0.01mM的异维A酸溶液。实验组分别加入100μL含10ng/mL的HC及各浓度为0.1%的待测样本。孵育48h后弃上清,PBS清洗两遍后,实验组加入10g/mL的尼罗红染料100μL,对照组加入15g/mL的荧光素二乙酸酯(FDA)进行染色,37℃避光孵育5min后,以485nm、494nm、565nm激发和523nm吸收波长在多功能酶标仪上检测荧光强度。结果用尼罗红和FDA的比值确定:细胞内中性脂质百分比(%)=实验组OD比值/对照组OD比值x100%。每组测试重复3次,结果如表6所示。
表6
注:“#”表示空白对照组与模型组具有显著性差异,P<0.05;“*”表示样品组与模型组具有显著性差异,P<0.05。
从表6可以看出,模型组对比空白组中性脂质相对含量显著升高(P<0.005),提示造模成功,阳性对照组对比模型对照组中性脂质相对含量显著降低(P<0.005),提示实验有效。在0.1%的浓度下,实施例1具有最强的抑制SZ95细胞分泌油脂的作用;对比例1-6的数据说明本发明中的5个祛痘组合物具有协同作用,增加或减少其中任何成分都会降低其抑制中性脂质分泌的效果;对比例11数据说明考虑本发明所述祛痘组合物含量范围的科学性;对比例12以及对比例14、15的数据说明,本发明所述的祛痘组合物在抑制油脂分泌方面不具有替代性。
效果例5
本效果例测试实施例10和对比例17、20、22以及对比例28的乳液应用在人体上的效果,同时设置空白试验,空白试验与实施例10的唯一差别在于不添加本发明所述祛痘组合物,具体包括以下步骤:
1、面部直观表现测试
挑选18-45岁,面部额头处油脂含量不小于120μg/cm2,乳酸刺痛阳性的志愿者48名。到访前一天洗脸后不涂抹任何护肤品,当天受试区清水洗脸后不涂抹任何产品,于温度为21±1℃、湿度为50±10%的空调房中静坐20min,采用皮肤油脂检测探头SebumeterSM815测试初始面部油脂含量,并用SebutapesTM皮肤角质取样贴片在额头处取样。清洁面部后,于测试房内静坐20min以上,由专业的医生对面部的痘痘、丘疹和鼻头的黑头进行计数,对面部泛红程度进行评分,使用Visia-CR进行面部拍摄,对交叉偏振光下导出的红区图片进行图像分析,得到量化指标红区分析a*值;利用皮肤经皮水分流失探头Hex(Courage+Khazaka)测试初始面部TEWL值。将受试者随机分为6组,每组8人。随机全脸使用空白组、实施例10、对比例17、对比例20、对比例22、对比例28和空白试验的乳液,早晚各一次。在7天、14天和28天对面部油脂、痘痘、丘疹、黑头、TEWL、Visia-CR进行检测和拍摄,对额头油脂进行取样。分析0、7、14、28天各志愿者面部油脂含量,TEWL改善,痘痘、黑头改善,泛红改善,a*值改善情况。改善情况由各数值改善率进行表示,计算方式如下:
得到的数据如表7所示。
表7
注:“*”表示各时间点改善率与初始值具有显著性,P<0.05。
从表7中可以看出,当采用本发明的技术方案时,相较于空白组,能够有效的改善面部皮肤的症状,采用实施例10中的乳液进行测试时,受试者的面部典型图片如图1所示,从图1中也可以直观的看出实施例10中的乳液能够显著的改善面部状态;进一步从实施例10和对比例28中可以看出,组分的种类选择会对产品的性能带来明显影响,尤其是进一步选择实施例1中的祛痘组合物作为活性组分制备得到的实施例10的乳液时,对面部状态的改善效果更为显著,其中,油脂在14d的变化率在35.7%以上、TEWL在14d的变化率在17.7%以上、痘痘在14d的变化率在17.0%以上、丘疹在14d的变化率在37.0%以上、黑头在14d的变化率在22.6%以上、红区在14d的变化率在77.8%以上、a*值在14d的变化率在25.8%以上。
从实施例10、对比例20和对比例22中可以看出,当祛痘组合物在乳液中的质量百分数不变,但是改变祛痘组合物中的成分时,无论是少一种组分还是只添加一种组分,亦或是用其他具有类似功能的物质替代,得到的产品对面部状态的改善效果都显著下降;
2、皮脂成分检测试验
将志愿者0、7、14、28天的皮肤角质取样贴片使用含有0.025%丁基羟基甲苯的乙醇提取贴片上的脂质,用乙酸乙酯进行液-液萃取,进一步清理其他杂质。提取物在丙酮/甲醇/异丙醇(40/40/20v/v)混合物中溶解,浓度为5mg/mL,在-80℃储存,直到进行分析;
其中,脂质过氧化物(LPO)水平是通过南京建成检测试剂盒说明书测定的,货号BC5240,LPO在酸性条件下加热产生丙二醛,丙二醛与硫代巴比妥酸(Thiobarbituricacid,TBA)缩合,生成棕红色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮),在535nm有最大吸收峰,同时为了排除干扰产物的吸光值影响,减去其在600nm下的吸光值;
利用HPLC-MS检测皮脂中角鲨烯的含量。
得到的结果如表8所示;
表8
从表8中可以看出,从分子的角度来看,采用本发明的技术方案得到的乳液能够明显的优化皮脂的成分占比,降低过氧化脂质和不饱和脂肪酸的比例,使皮脂维持在正常皮肤状态;具体地,采用本发明的技术方案得到的产品在使用14d时,LPO数值减少了0.17nmol/cm2、角鲨烯减少了1.52μg/cm2;其中使用实施例10中乳液进行测试时,得到的角鲨烯含量的HPLC含量检测图如图2所示,从图2中也可以直观的看出,角鲨烯的含量明显下降。
从实施例10、对比例20、对比例22以及对比例27中可以看出,当祛痘组合物在乳液中的质量百分数不变,但是改变祛痘组合物中的成分时,无论是少一种组分还是只添加一种组分,亦或是用其他具有类似功能的物质替代,得到的产品对皮脂中角鲨烯和LPO的改变能力都明显下降。
最后应当说明的是,以上实施例以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (15)
1.一种优化皮肤油脂质量的祛痘组合物,其特征在于,所述祛痘组合物包括以下重量份的组分:
芒果叶提取物0.1-5份、愈创木提取物0.1-10份、乙酰壳糖胺0.1-10份、酵母提取物0.1-10份、EUK-134 0.01-5份。
2.根据权利要求1所述的祛痘组合物,其特征在于,所述祛痘组合物包括以下重量份的组分:
芒果叶提取物0.5-3份、愈创木提取物1-5份、乙酰壳糖胺0.2-3份、酵母提取物0.1-3份、EUK-134 0.01-1份。
3.根据权利要求2所述的祛痘组合物,其特征在于,所述祛痘组合物包括以下重量份的组分:
芒果叶提取物0.8-1.5份、愈创木提取物1.2-3份、乙酰壳糖胺0.3-1份、酵母提取物0.5-1.5份、EUK-134 0.01-0.5份。
4.根据权利要求3所述的祛痘组合物,其特征在于,所述祛痘组合物包括以下重量份的组分:
芒果叶提取物1份、愈创木提取物1.5份、乙酰壳糖胺0.5份、酵母提取物1份、EUK-1340.1份。
5.根据权利要求1所述的祛痘组合物,其特征在于,所述芒果叶提取物中,芒果苷的质量百分数为80-90%。
6.根据权利要求1所述的祛痘组合物,其特征在于,所述祛痘组合物中,芒果苷的质量百分数为18-30%,愈创木提取物的质量百分数为30-45%。
7.根据权利要求6所述的祛痘组合物,其特征在于,所述祛痘组合物中,芒果苷的质量百分数为20-25%,愈创木提取物的质量百分数为35-38%。
8.根据权利要求6所述的祛痘组合物,其特征在于,所述祛痘组合物中,乙酰壳糖胺的质量百分数为12-13%。
9.如权利要求1-8任一项所述的祛痘组合物的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:将各组分混合,得所述祛痘组合物。
10.如权利要求1-8任一项所述的祛痘组合物在化妆品上的应用。
11.一种化妆品,其特征在于,所述化妆品包括如权利要求1-8任一项所述的祛痘组合物。
12.根据权利要求11所述的化妆品,其特征在于,所述化妆品中,如权利要求1-8任一项所述的祛痘组合物的质量百分数为0.5-5%。
13.根据权利要求11所述的化妆品,其特征在于,所述化妆品还包括增稠剂、保湿剂、乳化剂、防腐剂、香精、pH调节剂和水中的至少一种。
14.根据权利要求13所述的化妆品,其特征在于,所述化妆品中,包括以下质量百分数的组分:如权利要求1-8任一项所述的祛痘组合物0.5-5%、增稠剂0.1-0.5%、保湿剂4-20%、乳化剂0.1-10%、防腐剂0.5-5%、香精0.01-0.2%、pH调节剂0.05-0.1%、水余量。
15.根据权利要求11所述的化妆品,其特征在于,所述化妆品包括化妆水、乳液、面霜、面膜、精华液、防晒霜、喷雾中的任意一种。
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