JP5753924B2 - 持続性血糖降下剤の投与方法 - Google Patents

Description

本発明は、持続性血糖降下剤を投与するための方法および医薬組成物ならびにＧＬＰ−１活性を有する化合物および／またはＧＬＰ−１アンタゴニストを用いた治療計画に関する。

血糖降下剤は、血中グルコース濃度を低下させるために、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病の治療に用いられうる。インスリン分泌促進ペプチドは、糖尿病の治療のための可能な治療薬として関与している。インスリン分泌促進ペプチドには、限定されるものではないが、インクレチンホルモン、例えば、胃抑制ペプチド（ＧＩＰ）およびグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）、ならびにそのフラグメント、変種、および／またはコンジュゲートが含まれる。インスリン分泌促進ペプチドには、例えば、エキセンジン（ｅｘｅｎｄｉｎ）３およびエキセンジン４も含まれる。ＧＬＰ−１は、食物摂取に応じて腸のＬ細胞により分泌される３６個のアミノ酸長インクレチンホルモンである。ＧＬＰ−１は、生理的およびグルコース依存的にインスリン分泌を刺激し、グルカゴン分泌を減少させ、胃内容排出を抑制し、食欲を減退させ、Ｂ細胞の増殖を刺激することが示された。非臨床実験において、ＧＬＰ−１は、グルコース依存性インスリン分泌に重要な遺伝子の転写を刺激することにより、および、β細胞新生を促進することにより、持続性β細胞反応能を促進する（Ｍｅｉｅｒら．Ｂｉｏｄｒｕｇｓ．２００３；１７（２）：９３−１０２）。

健常人において、ＧＬＰ−１は、膵臓によるグルコース依存性インスリン分泌を刺激することにより食後血中グルコース濃度を制御し、末梢にてグルコース吸収の増加をもたらすという重要な役割を果たす。ＧＬＰ−１はまた、グルカゴン分泌を抑制し、肝臓でのグルコース産生の減少をもたらす。さらに、ＧＬＰ−１は、胃内容排出を遅らせ、小腸運動を遅くし、食物摂取を遅らせる。

ＩＩ型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）を伴う人々において、正常なＧＬＰ−１の食後の上昇は、見られないか、または低下している（Ｖｉｌｓｂｏｌｌ Ｔ，ら，Ｄｉａｂｅｔｅｓ．２００１．５０；６０９−６１３）。したがって、外因性ＧＬＰ−１、インクレチンホルモン、またはインクレチン模倣薬を投与するための一つの理論的根拠は、食事関連インスリン分泌を増加させ、グルカゴン分泌を減少させ、かつ／または胃腸運動を遅くするために、内因性ＧＬＰ−１を促進するか、置換するか、または補完することである。天然ＧＬＰ−１は、非常に短い血清半減期（５分未満）を有する。したがって、現在、糖尿病の治療的処置として天然ＧＬＰ−１を体外から投与することは実現不可能である。エクセナチド（Ｂｙｅｔｔａ（登録商標））などの商業上利用可能なインクレチン模倣薬は、Ｔ２ＤＭを伴う患者に皮下投与する場合（５μｇまたは１０μｇ ＢＩＤ）、空腹時および食後グルコース濃度を低下させることにより血糖コントロールを改善する。

Ｍｅｉｅｒら．Ｂｉｏｄｒｕｇｓ．２００３；１７（２）：９３−１０２ Ｖｉｌｓｂｏｌｌ Ｔ，ら，Ｄｉａｂｅｔｅｓ．２００１．５０；６０９−６１３

したがって、血糖降下剤の平均濃度曲線下面積（ＡＵＣ）値を維持するか、あるいは改善することにより、治療効果を維持しながら注入の回数を減らす、血糖降下剤の投与方法に対する要求が存在する。

本発明の１の実施態様において、それを必要とするヒトにおけるＧＬＰ−１活性を促進するための方法であって、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物を該ヒトに投与することを含み、ここで、該ポリペプチドが、少なくとも約０．６ｎＭの該ポリペプチドの最大血漿濃度および１週間で少なくとも約３．５ｎＭｘ日数である該ポリペプチドの濃度曲線下面積値を提供するところの、方法が提供される。

本発明の別の実施態様において、それを必要とするヒトにおけるＧＬＰ−１活性を促進するための方法であって、少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物を該ヒトに投与することを含み、ここで、該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストが、少なくとも約２１．２ｐＭの該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの最大血漿濃度および１週間で少なくとも約１４９ｐＭｘ日数である該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの濃度曲線下面積値を提供するところの、方法が提供される。

定義
本明細書に用いられる「ＧＬＰ−１アゴニスト」は、限定されるものではないが、インクレチンホルモンおよび／またはそのフラグメント、変種および／またはコンジュゲートならびにインクレチン模倣薬および／またはそのフラグメント、変種および／またはコンジュゲートを含む、少なくとも１のＧＬＰ−１活性を刺激しうる、かつ／または、有しうる任意の化合物または組成物を意味する。

本明細書に用いられる「インクレチンホルモン」は、インスリン分泌を促進するか、あるいはそのレベルまたはインスリンを上昇させる任意のホルモンを意味する。インクレチンホルモンの一例は、ＧＬＰ−１である。ＧＬＰ−１は、食物摂取に応じて腸Ｌ細胞により分泌されるインクレチンである。健常個体において、ＧＬＰ−１は、膵臓によるグルコース依存性インスリン分泌を刺激することにより食後血中グルコース濃度を調節し、末梢にてグルコース吸収の増加をもたらすという重要な役割を果たす。ＧＬＰ−１はまた、グルカゴン分泌を抑制し、肝臓でのグルコース産生の減少をもたらす。さらに、ＧＬＰ−１は、胃内容排出時間を遅らせ、小腸運動を遅くし、食物吸収を遅らせる。ＧＬＰ−１は、グルコース依存性インスリン分泌に関与する遺伝子の転写を刺激することにより、および、β細胞新生を促進することにより、持続性β細胞反応能を促進する（Ｍｅｉｅｒ，ら．Ｂｉｏｄｒｕｇｓ ２００３；１７（２）：９３−１０２）。

本明細書に用いられる「ＧＬＰ−１活性」は、限定されるものではないが、血中および／または血漿グルコースの低下、グルコース依存性インスリン分泌の刺激あるいはインスリン濃度の上昇、グルカゴン分泌の抑制、フルクトサミンの低下、脳へのグルコース輸送および代謝の増加、胃内容排出の遅延、ならびにβ細胞反応能、および／または新生の促進を含む、１つまたは複数の天然に存在するヒトＧＬＰ−１の活性を意味する。これらの活性のいずれかおよびＧＬＰ−１活性に付随する他の活性は、ＧＬＰ−１活性を有する組成物またはＧＬＰ−１アゴニストにより直接的または間接的に引き起こされうる。一例として、ＧＬＰ−１活性を有する組成物は、グルコース依存性インスリン産生を直接的または間接的に刺激しうる一方、インスリン産生の刺激は、哺乳動物における血漿グルコース濃度を間接的に低下させうる。

本明細書に用いられる「インクレチン模倣薬」は、インスリン分泌を促進するか、あるいはインスリン濃度を上昇させうる化合物である。インクレチン模倣薬は、哺乳動物において、インスリン分泌を刺激し、β細胞新生を増加し、β細胞アポトーシスを抑制し、グルカゴン分泌を抑制し、胃内容排出を遅らせ、満腹を誘導しうる。インクレチン模倣薬には、限定されるものではないが、エキセンジン３およびエキセンジン４が含まれるが、それらに限定されず、任意のフラグメントおよび／または変種および／またはコンジュゲートを含む、ＧＬＰ−１活性を有する任意のポリペプチドが含まれうる。

本明細書に用いられる「血糖降下剤」は、血中グルコースを低下させうる化合物を含む任意の化合物または組成物を意味する。血糖降下剤には、限定されるものではないが、インクレチンホルモンまたはインクレチン模倣薬、ＧＬＰ−１および／またはそのフラグメント、変種および／またはコンジュゲートを含む、任意のＧＬＰ−１アゴニストが含まれうる。他の血糖降下剤には、限定されるものではないが、インスリン分泌を増加する薬剤（例えば、スルホニル尿素系（ＳＵ）およびメグリチニド）、ＧＬＰ−１分解を抑制する薬剤（例えば、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤）、グルコース利用を増加する薬剤（例えば、グリタゾン系、チアゾリジンジオン系（ＴＺＤ）および／またはｐＰＡＲアゴニスト）、肝臓グルコース産生を減少させる薬剤（例えば、メトホルミン）、およびグルコース吸収を遅らせる薬剤（例えば、α−グルコシダーゼ阻害薬）が含まれる。スルホニル尿素系の例として、限定されるものではないが、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、トラザミド、グリピザイド、グリクラジド、グリベンクラミド（グリブリド）、グリキドン、およびグリメピリドが含まれる。グリタゾン系の例として、限定されるものではないが、ロシグリタゾンおよびピオグリタゾンが含まれる。

「ポリヌクレオチド」は、一般に、任意のポリリボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチドを表し、それは、修飾されていないＲＮＡもしくはＤＮＡ、または修飾されているＲＮＡまたはＤＮＡであり得る。「ポリヌクレオチド」には、限定されるものではないが、一本鎖および二本鎖ＤＮＡ、一本鎖および二本鎖領域または一本鎖、二本鎖および三本鎖領域の混合物であるＤＮＡ、一本鎖および二本鎖ＲＮＡ、ならびに一本鎖および二本鎖領域の混合物であるＲＮＡ、一本鎖または、より一般には、二本鎖、または三本鎖領域、または一本鎖および二本鎖領域の混合物でありうるＤＮＡおよびＲＮＡを含むハイブリッド分子が含まれうる。さらに、本明細書に用いられる「ポリヌクレオチド」は、ＲＮＡまたはＤＮＡまたはＲＮＡおよびＤＮＡの両方を含む三本鎖領域をいう。かかる領域のストランドは、同一分子からまたは異なる分子からなりうる。それらの領域には、１種または複数の分子の全てが含まれうるが、より一般には、いくつかの分子のある領域のみに関与しうる。三重らせん領域の分子の１つは大抵、オリゴヌクレオチドである。本明細書に用いられる、「ポリヌクレオチド」なる語には、１種または複数の修飾塩基を含む上記のＤＮＡまたはＲＮＡも含まれる。したがって、安定性および他の理由で修飾された骨格を有するＤＮＡまたはＲＮＡは、本明細書に表される「ポリヌクレオチド」である。そのため、２例だけ挙げると、イノシンなどの異常な塩基、またはトリチル化塩基などの修飾塩基を含むＤＮＡまたはＲＮＡは、本明細書に用いられる、ポリヌクレオチドである。当業者に既知の多数の有用な目的を持つＤＮＡおよびＲＮＡに対し種々の修飾が行われていることは明らかであろう。本明細書に用いられる「ポリヌクレオチド」なる語は、かかるポリヌクレオチドの化学的、酵素的または代謝的に修飾された形態、ならびに例えば、単純細胞および複合型細胞を含む、ＤＮＡおよびＲＮＡ特性のウイルスおよび細胞の化学形態を包含する。「ポリヌクレオチド」はまた、オリゴヌクレオチドと一般的に呼ばれる短ポリヌクレオチドを包含する。

「ポリペプチド」は、ペプチド結合または修飾ペプチド結合、すなわち、ペプチドアイソスターにより相互に結合する２種または複数のアミノ酸を含む任意のペプチドまたはタンパク質をいう。「ポリペプチド」は、ペプチド、オリゴペプチドまたはオリゴマーと一般的に呼ばれる短鎖、ならびにタンパク質と一般的に呼ばれる長鎖の両方をいう。ポリペプチドは、２０個の遺伝子にコードされるアミノ酸以外のアミノ酸を含有しうる。「ポリペプチド」には、翻訳後プロセシングなどの自然過程、または当業者によく知られている化学修飾技法のいずれかにより修飾されたアミノ酸配列が含まれる。かかる修飾は、基本書およびより詳細な研究論文、ならびに大量の研究文献によく記載されている。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖およびアミノまたはカルボキシル末端を含む、ポリペプチドのどこでも起こりうる。同種の修飾が、所定のポリペプチド中の複数の部位で同一または種々の頻度で存在しうることは明らかであろう。また、所定のポリペプチドは、多様な修飾を含有しうる。ポリペプチドは、ユビキチン化の結果として分岐していてもよく、分岐の有無に関わらず環化していてもよい。環状、分岐および分岐環状ポリペプチドは、翻訳後自然過程に由来しうるか、または合成法により製造されうる。修飾には、アセチル化、アシル化、ＡＤＰリボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部の共有結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、架橋結合、環化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有結合架橋形成、システイン形成、ピログルタミン酸形成、ホルミル化、γ−カルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨード化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解プロセシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイレーション（ｓｅｌｅｎｏｙｌａｔｉｏｎ）、硫酸化、アルギニン化などのタンパク質へのアミノ酸の転移ＲＮＡ介在付加、およびユビキチン化が含まれる。例えば、ＰＲＯＴＥＩＮＳ−ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ ＡＮＤ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，２ｎｄ Ｅｄ．，Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９３およびＷｏｌｄ，Ｆ．，Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ：Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ，ｐｇｓ．１−１２ ｉｎ ＰＯＳＴＴＲＡＮＳＬＡＴＩＯＮＡＬ ＣＯＶＡＬＥＮＴ ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ ＯＦ ＰＲＯＴＥＩＮＳ，Ｂ．Ｃ．Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８３；Ｓｅｉｆｔｅｒ，ら，「Ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｎｏｎｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｆａｃｔｏｒｓ」，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．（１９９０）１８２：６２６−６４６およびＲａｔｔａｎ，ら，「Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ： Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ａｇｉｎｇ」，Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ（１９９２）６６３：４８−６２を参照。

本明細書に用いられる「変種」は、目的ポリヌクレオチドまたはポリペプチドとはそれぞれ異なるが、本質的特性は有するポリヌクレオチドまたはポリペプチドである。ポリヌクレオチドの典型的変種は、ヌクレオチド配列において、別の目的ポリヌクレオチドとは異なる。変種のヌクレオチド配列の変化は、目的ポリヌクレオチドによってコードされるポリヌクレオチドのアミノ酸配列を変えても変えなくてもよい。ヌクレオチド変化は、下記の通り、目的配列によってコードされるポリペプチドにおいて、アミノ酸置換、付加、欠失、融合および切断をもたらしうる。ポリペプチドの典型的変種は、アミノ酸配列において、別の目的ポリペプチドとは異なる。一般に、違いは、目的ポリペプチドおよび変種の配列が、全体的に極めて類似し、多くの領域において同一であるように限定されている。変種および目的ポリペプチドは、アミノ酸配列において、任意の組み合わせの、１つまたは複数の置換、付加、欠失により異なりうる。置換または挿入されたアミノ酸残基は、遺伝情報によりコードされるものであってもなくてもよい。ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの変種は、対立遺伝子多型などの自然に生じるものであってもよく、または自然に生じることが知られていない変種であってもよい。ポリヌクレオチドおよびポリペプチドの自然に生じない変種は、突然変異技法または直接合成法により作製されうる。変種には、限定されるものではないが、１つまたは複数のアミノ酸側基の化学的修飾を有するポリペプチドまたはそのフラグメントも含まれる。化学的修飾には、限定されるものではないが、化学的部分の付加、新しい結合の作製、および、化学的部分の除去が含まれる。アミノ酸側基での修飾には、限定されるものではないが、リジン−ε−アミノ基のアシル化、アルギニン、ヒスチジン、またはリジンのＮ−アルキル化、グルタミン酸またはアスパラギン酸のカルボン酸基のアルキル化、およびグルタミンまたはアスパラギンの脱アミド化が含まれる。末端アミノ基の修飾には、限定されるものではないが、ｄｅｓ−アミノ、Ｎ−低級アルキル、Ｎ−ジ−低級アルキル、およびＮ−アシル修飾が含まれる。末端カルボキシ基の修飾には、限定されるものではないが、アミド、低級アルキルアミド、ジアルキルアミド、および低級アルキルエステル修飾が含まれる。さらに、１つまたは複数の側基、または末端基は、当該分野のタンパク質化学者に既知の保護基により保護されうる。

本明細書に用いられる「フラグメント」は、ポリペプチドに関して用いる場合、完全な天然ポリペプチドのアミノ酸配列と一部同一であるが、その全部ではないアミノ酸配列を有するポリペプチドである。フラグメントは、「独立」であってもよく、または、単一のより大きいポリペプチド中の単一連続領域としてそれらが一部または領域を形成する、より大きいポリペプチド内に含まれうる。一例として、天然ＧＬＰ−１のフラグメントは、１〜３６番目の天然アミノ酸の７〜３６番目のアミノ酸を含むであろう。さらに、ポリペプチドのフラグメントはまた、自然に生じる部分配列の変種であってもよい。例えば、天然ＧＬＰ−１の７〜３０番目のアミノ酸を含むＧＬＰ−１のフラグメントはまた、その部分配列内のアミノ酸置換を有する変種であってもよい。

本明細書に用いられる「コンジュゲート」または「コンジュゲートされた」は、相互に結合した２個の分子をいう。例えば、第１ポリペプチドは、第２ポリペプチドと共有結合または非共有結合していてよい。第１ポリペプチドは、化学リンカーにより共有結合していてもよく、または第２ポリペプチドに遺伝的に融合していてもよく、ここで、第１および第２のポリペプチドは、共通ポリペプチド骨格を共有する。

本明細書に用いられる「直列に配列している」は、同一分子の一部として相互に隣接する２種または複数のポリペプチドをいう。それらは、共有結合または非共有結合のいずれで連結されていてもよい。２種または複数の直列に配列しているポリペプチドは、同一ポリペプチド骨格の一部を形成しうる。直列に配列しているポリペプチドは、順または逆方向を有していてもよく、かつ／または、他のアミノ酸配列により分離されていてもよい。

本明細書に用いられる、血中または血漿グルコースを「低下させる」または「低下させること」は、血糖降下剤の投与後に患者の血液中で観測される血中グルコース量の低下をいう。血中または血漿グルコースの低下は、個別に、または、対象群の平均変化として、測定および評価されうる。さらに、血中または血漿グルコースの平均低下は、基準値からの平均変化として、かつ／または、プラセボを投与された対象での血中または血漿グルコースの平均変化と比較した平均変化として、治療対象群について測定および評価されうる。

本明細書に用いられる「ＧＬＰ−１活性を促進すること」は、天然ＧＬＰ−１に付随する任意および全ての活性の増加をいう。一例として、ＧＬＰ−１活性の促進は、対象への少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの投与後に測定され、ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの投与前の同対象におけるＧＬＰ−１活性と比較しうるか、またはプラセボを投与する第２対象と比較しうる。

本明細書に用いられる「血中グルコースの上昇に付随する疾患」には、限定されるものではないが、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病、耐糖能異常、高血糖症、およびアルツハイマー病が含まれる。

本明細書に用いられる「併用」または「併用すること」は、同一患者に対する２種または複数の化合物の投与をいう。かかる化合物の併用は、同時またはほぼ同時（例えば、同一時刻内）であってもよく、あるいはお互いが数時間または数日中内であればよい。例えば、第１化合物は１週間に１回投与されうる一方、第２化合物は毎日併用される。

本明細書に用いられる「最大血漿濃度」または「Ｃｍａｘ」は、哺乳動物に対する物質の投与後の哺乳類の血漿中の物質（例えば、ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドまたはＧＬＰ−１アゴニスト）の最も高い観測濃度を意味する。

本明細書に用いられる「濃度曲線下面積」または「ＡＵＣ」は、時間に対する血漿中物質濃度のプロットにおける曲線下面積である。ＡＵＣは、時間間隔中の瞬間濃度の積分の指標とすることができ、質量ｘ時間／容量の単位を有し、ｎＭｘ日数などのモル濃度ｘ時間としても表されうる。ＡＵＣは、典型的には、台形法により算出される（例えば、線形、線形対数）。ＡＵＣは通常、時間間隔０〜無限大で得られ、他の時間間隔は（例えば、ＡＵＣ（ｔ１，ｔ２）（式中：ｔ１およびｔ２は、間隔の開始時間と終了時間である））と示される。したがって、本明細書に用いられる「ＡＵＣ_{０−２４時間}」は２４時間にわたるＡＵＣをいい、「ＡＵＣ_{０−４時間}」は４時間にわたるＡＵＣをいう。

本明細書に用いられる「加重平均ＡＵＣ」は、ＡＵＣを算出する時間にわたる時間間隔で割ったＡＵＣである。例えば、加重平均ＡＵＣ_{０−２４時間}は、２４時間で割ったＡＵＣ_{０−２４時間}を表すであろう。

本明細書に用いられる「信頼区間」または「ＣＩ」は、測定または試験が対応する所定の確率ｐ（式中：ｐは９０％または９５％ＣＩをいう）となる区間であり、算術平均、幾何平均、または最小二乗平均のいずれかの近くで算出される。本明細書に用いられる「幾何平均」は、累乗法を介して逆変換された自然対数変換値の平均値であり、最小二乗平均は、幾何平均であってもなくてもよいが、母数効果を用いる分散分析（ＡＮＯＶＡ）モデルから算出される。

本明細書に用いられる「変動変数（ＣＶ）」は、分散の指標であり、平均値に対する標準偏差の比率として定義される。上記算出値に１００を掛けることによりパーセンテージ（％）として記録される（％ＣＶ）。

本明細書に用いられる「Ｔｍａｘ」は、哺乳動物に対する物質の投与後に、哺乳動物の血漿中物質の最大濃度に達する観測時間をいう。

本明細書に用いられる「血清または血漿半減期」は、哺乳動物に投与された物質の半量が、通常の生物学的過程により哺乳動物の血清または血漿から代謝または排出されるのに要する時間をいう。

ＩＩ型糖尿病を伴う対象における配列番号１の薬物動態プロファイル 時間（時間）ごとの血漿濃度（ｎＭ ＥＬＩＳＡ）の平均（９５％）プロットを示す。 ２型糖尿病を伴う対象における注入部位（腹部、脚および腕）および投与量ごとの配列番号１濃度−暴露のボックスプロット（ＡＵＣ（_{０−Ｉｎｆ}））を示す。 配列番号１の配列を示す。

本発明の１の態様において、ヒトにおけるＧＬＰ−１活性を促進する方法であって、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物を該ヒトに投与することを含み、該ポリペプチドが、少なくとも約０．６ｎＭの該ポリペプチドの最大血漿濃度および１週間で少なくとも約３．５ｎＭｘ日数である該ポリペプチドの濃度曲線下面積値を提供するところの、方法が提供される。当該分野にて理解されるように、血液、血漿および／または他の組織中の活性化合物濃度などの薬物動態データを収集し、測定し、評価するために、種々の方法が用いられうる。当該分野でまた理解されるように、限定されるものではないが、血液および／または血漿および／または他の組織中のグルコース、インスリン、Ｃ−ペプチド、グルカゴンおよび他のバイオマーカー濃度などの種々の薬物動態データを収集し、測定し、評価するために、種々の方法が用いられうる。本発明にしたがって、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドは、ＧＬＰ−１アゴニストでありうる。ＧＬＰ−１アゴニストは、インクレチンホルモンおよび／またはそのフラグメント、変種および／またはコンジュゲートならびにインクレチン模倣薬および／またはそのフラグメント、変種および／またはコンジュゲートからなる群より選択されうる。ヒトＧＬＰ−１および／またはそのフラグメント、変種および／またはコンジュゲートがインクレチンホルモンに含まれる。

本発明の１の実施態様は、限定されるものではないが、ＧＬＰ−１またはそのフラグメント、変種、および／またはコンジュゲートでありうるポリペプチドを含む。本発明のＧＬＰ−１フラグメントおよび／または変種および／またはコンジュゲートは、典型的には、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有する。ＧＬＰ−１またはそのフラグメント、変種、および／またはコンジュゲートは、ヒト血清アルブミンを含みうる。ヒト血清アルブミンは、ＧＬＰ−１あるいはそのフラグメントおよび／または変種と結合していてもよい。ヒト血清アルブミンは、注入前に化学リンカーを介してインクレチンホルモン（ＧＬＰ−１など）および／またはインクレチン模倣薬（エキセンジン３およびエキセンジン４）および／またはそのフラグメントおよび／または変種と結合しうるか、あるいはインビボで天然ヒト血清アルブミンと化学結合しうる（例えば、その全体を出典明示により本明細書の一部とする、米国特許第６，５９３，２９５号および米国特許第６，３２９，３３６号を参照）。あるいは、ヒト血清アルブミンは、ＧＬＰ−１および／またはそのフラグメントおよび／または変種あるいはエキセンジン３またはエキセンジン４および／またはそのフラグメントおよび／または変種などの他のＧＬＰ−１アゴニストと遺伝的に融合していてもよい。ヒト血清アルブミンと遺伝的に融合されたＧＬＰ−１およびそのフラグメントおよび／または変種の例は、以下のＰＣＴ出願：ＷＯ ２００３／０６００７１、ＷＯ ２００３／５９９３４、ＷＯ ２００５／００３２９６、ＷＯ ２００５／０７７０４２（それらは、その全体を出典明示により本明細書の一部とする）にて提供される。

ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドは、少なくとも１種のヒトＧＬＰ−１のフラグメントおよび／または変種を含みうる。２種のヒトＧＬＰ−１の天然フラグメントは、配列番号２で表される。

（式中：３７番目のＸａａはＧｌｙ（以下、「ＧＬＰ−１（７−３７）」と表す）、または−ＮＨ_２（以下、「ＧＬＰ−１（７−３６）」と表す）である）。ＧＬＰ−１フラグメントには、限定されるものではないが、ヒトＧＬＰ−１の７〜３６番目のアミノ酸（ＧＬＰ−１（７−３６））を含むか、あるいはそれからなるＧＬＰ−１分子が含まれうる。ＧＬＰ−１またはそのフラグメントの変種には、限定されるものではないが、野生型ＧＬＰ−１または配列番号２に示されるＧＬＰ−１の天然フラグメントにおける１、２、３、４、５またはそれ以上のアミノ酸置換が含まれうる。ＧＬＰ−１またはＧＬＰ−１フラグメントの変種には、限定されるものではないが、野生型ＧＬＰ−１の８番目のアラニンに対するアラニン残基類似体の置換が含まれ、かかるアラニンは、グリシンに変異している（以下、「Ａ８Ｇ」と表す）（例えば、その全体を出典明示により本明細書の一部とする、米国特許第５，５４５，６１８号に開示される変種を参照）。

いくつかの態様において、少なくとも１種のＧＬＰ−１のフラグメントおよび変種は、ＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））を含み、ヒト血清アルブミンに遺伝的に融合している。さらなる実施態様において、本発明のポリペプチドは、ヒト血清アルブミンまたはその変種のＮ末端またはＣ末端に融合したＧＬＰ−１および／またはそのフラグメントおよび／または変種の１、２、３、４、５、またはそれ以上の直列に配列している分子を含む。他の実施態様は、アルブミンまたはその変種のＮ末端またはＣ末端に融合したかかるＡ８Ｇポリペプチドを有する。ヒト血清アルブミンのＮ末端に融合した２種の直列に配列しているＧＬＰ−１（７−３６）（Ａ８Ｇ）フラグメントおよび／または変種の一例として、配列番号１が含まれ、図３で表される。別の態様において、少なくとも１種のＧＬＰ−１のフラグメントおよび変種は、ヒト血清アルブミンに直列および遺伝的に融合した少なくとも２種のＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））を含む。少なくとも２種のＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））は、ヒト血清アルブミンのＮ末端で遺伝的に融合していてもよい。少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドは、配列番号１を含みうる。

ＧＬＰ−１（７−３７）の変種は、例えば、ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨの２２番目に通常見られるグリシンがグルタミン酸に置換されているＧＬＰ−１変種を指定するＧｌｕ^２２−ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨ；ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨの８番目に通常見られるアラニンおよび２２番目に通常見られるグリシンが各々バリンおよびグルタミン酸に置換されているＧＬＰ−１化合物を指定するＶａｌ^８−Ｇｌｕ^２２−ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨとして表されうる。ＧＬＰ１の変種の例として、限定されるものではないが、

が含まれる。

ＧＬＰ−１の変種にはまた、限定されるものではないが、１つまたは複数のアミノ酸側基の化学的修飾を有するＧＬＰ−１またはＧＬＰ−１フラグメントが含まれうる。化学的修飾には、限定されるものではないが、化学的部分の付加、新しい結合の作製、および化学的部分の除去が含まれる。アミノ酸側基での修飾には、限定されるものではないが、リジン−ε−アミノ基のアシル化、アルギニン、ヒスチジン、またはリジンのＮ−アルキル化、グルタミン酸またはアスパラギン酸のカルボン酸基のアルキル化、およびグルタミンまたはアスパラギンの脱アミド化が含まれる。末端アミノ基の修飾には、限定されるものではないが、ｄｅｓ−アミノ、Ｎ−低級アルキル、Ｎ−ジ−低級アルキル、およびＮ−アシル修飾が含まれる。末端カルボキシ基の修飾には、限定されるものではないが、アミド、低級アルキルアミド、ジアルキルアミド、および低級アルキルエステル修飾が含まれる。さらに、１つまたは複数の側基、または末端基は、当該分野のタンパク質化学者に既知の保護基により保護されうる。

ＧＬＰ−１フラグメントまたは変種にはまた、１個または複数のアミノ酸が該フラグメントまたは変種のＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨのＮ末端および／またはＣ末端に付加しているポリペプチドが含まれうる。アミノ酸がＮ末端またはＣ末端に付加しているＧＬＰ−１におけるアミノ酸は、ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨにおける対応するアミノ酸と同一番号で示される。例えば、２個のアミノ酸をＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨのＮ末端に付加することにより得られたＧＬＰ−１化合物のＮ末端アミノ酸は５番目であり；１個のアミノ酸をＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨのＣ末端に付加することにより得られたＧＬＰ−１化合物のＣ末端アミノ酸は３８番目である。したがって、ＧＬＰ−１（７−３７）ＯＨにあるように、これらのＧＬＰ−１化合物の両方において、１２番目はフェニルアラニンによって占められ、２２番目はグリシンによって占められる。Ｎ末端に付加されたアミノ酸を有するＧＬＰ−１の１−６番目のアミノ酸は、ＧＬＰ−１（１−３７）ＯＨの対応する位置のアミノ酸と同一でありうるか、またはその保存的置換でありうる。Ｃ末端に付加されたアミノ酸を有するＧＬＰ−１の３８−４５番目のアミノ酸は、グルカゴンまたはエキセンジン４の対応する位置のアミノ酸と同一でありうるか、またはその保存的置換でありうる。

本発明の別の態様において、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物を、１日に１回〜１ヵ月に１回ヒトに投与してよく、１日に１回、２日に１回、３日に１回、７日に１回、１４日に１回、４週に１回および／または１ヵ月に１回投与してもよい。別の態様において、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物の第１投与量および第２投与量を、ヒトに投与する。第１および第２投与量は同一であってもよく、または異なっていてもよい。少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの各投与量は、該少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの約０．２５μｇ〜約１０００ｍｇを含みうる。投与量は、限定されるものではないが、該少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの０．２５μｇ、０．２５ｍｇ、１ｍｇ、３ｍｇ、６ｍｇ、１６ｍｇ、２４ｍｇ、４８ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１０４ｍｇ、２０ｍｇ、４００ｍｇ、８００ｍｇ、最大約１０００ｍｇまで含みうる。

本発明の別の態様において、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物は、ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの少なくとも約０．６ｎＭ〜約３１９ｎＭの最大血漿濃度およびＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの１週間で少なくとも約３．５〜約１９３６ｎＭｘ日数の濃度曲線下面積値を提供する。ある場合には、ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの血清半減期は、約４〜約７日である。別の態様において、ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドのＴｍａｘ値は、約１〜約５日である。ある場合には、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物は、該少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの約８ｎＭ〜約５４ｎＭの最大血漿濃度および該少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの１週間で約２９ｎＭｘ日数〜約２４５ｎＭｘ日数のＡＵＣ（１週）値を提供する。別の態様において、該少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物は、該少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの単回投与後に、該少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの約８ｎＭ〜約５４ｎＭの最大血漿濃度および少なくとも約９９ｎＭｘ日数〜約６３７ｎＭｘ日数の単回投与後のＡＵＣ（０−∞）値を提供する。

本発明にしたがって、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物を投与される任意のヒトは、高血糖症、耐糖能異常、および／またはＴ２ＤＭでありうる糖尿病を有しうる。少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドが該ヒトにおける血漿グルコースを低下させ、Ｔ２ＤＭを伴うヒトの集団サンプルでの少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物の投与後に、プラセボと比較して、血漿グルコースのＡＵＣ_{０−２４時間}の加重平均が約１週間にわたり有意に低下する方法もまた提供される。基準値からの変化として測定されうる血漿グルコースの平均ＡＵＣ_{０−２４時間}は、プラセボを投与した対象における変化と比較して、Ｔ２ＤＭを伴うヒトの集団サンプルにおける少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む該組成物の少なくとも１回の投与量の投与後に、少なくとも１週間にわたり９５％信頼区間（−３２．４，−７．８）で約２０ｍｇ／ｄＬから９５％信頼区間（−７６．６，−２１．４）で少なくとも約４９ｍｇ／ｄＬまたはそれ以上まで低下しうる。血漿グルコースの低下は、用量依存性でありうる。さらに、該少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドは、該ヒトにおける血漿グルコースを低下させ、Ｔ２ＤＭを伴うヒトの集団サンプルにおける少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物の投与後に、空腹時血漿グルコースは約１週間にわたり有意に低下しうる。平均空腹時血漿グルコースは、Ｔ２ＤＭを伴うヒト集団において、基準値からの変化として測定し、プラセボと比較すると、９５％信頼区間（−２５．９，＋１１．２）で約７ｍｇ／ｄＬから９５％信頼区間（−７５．４，−２６．０）で約５０．７ｍｇ／ｄＬまたはそれ以上まで低下しうる。平均空腹時血漿グルコースは、基準値からの変化として測定すると、９５％信頼区間（−１６．５，＋８．２）で約４ｍｇ／ｄＬから９５％信頼区間（−５４．１，−１５．６）で約３５ｍｇ／ｄＬまたはそれ以上まで低下しうる。さらに、食後血漿グルコース（平均ＡＵＣ_{０−４時間}）は、Ｔ２ＤＭを伴うヒトの集団サンプルにおける少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物の少なくとも１回の投与量の投与後に、少なくとも１週間にわたり基準値と比較すると、９５％信頼区間（−２７．２，＋１４．９）で約６ｍｇ／ｄＬから９５％信頼区間（−６４．７，−４０．８）で約５３ｍｇ／ｄＬまたはそれ以上まで低下しうる。少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを含む組成物の少なくとも１回の投与量の投与後に、少なくとも２週間にわたり、ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドが、該ヒトのプラセボと比較した基準値からの変化として、血漿フルクトサミンを少なくとも約３４μＭ／Ｌまで低下させる方法も提供される。ＧＬＰ−１活性を有する本発明のポリペプチドは、ヒトの脚、腕、または腹部に皮下投与されうる。

限定されるものではないが、ＩＩ型糖尿病を含む、血中グルコースの上昇を伴う疾患を治療するための医薬の製造における少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの使用であって、該ポリペプチドが、少なくとも約０．６ｎＭの該ポリペプチドの最大血漿濃度および１週間で少なくとも約３．５ｎＭｘ日数である該ポリペプチドの濃度曲線下面積値を提供する投与のために処方されるところの、使用がまた、本明細書にて提供される。

別の実施態様において、ヒトにおけるＧＬＰ−１活性を促進する方法であって、少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物を該ヒトに投与することを含み、該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストは、少なくとも約２１．２ｐＭ〜約５１．６ｐＭまたはそれ以上の該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの最大血漿濃度および１週間で少なくとも約１４９ｐＭｘ日数〜約３６１ｐＭｘ日数である該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの濃度曲線下面積値を提供するところの、方法が提供される。１の態様において、ＧＬＰ−１アゴニストは、少なくとも約１．４ｎＭの該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの最大血漿濃度および１週間で少なくとも約８ｎＭｘ日数である該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの濃度曲線下面積値を提供する。ＧＬＰ−１アゴニストは、インクレチンホルモンおよび／またはそのフラグメント、変種および／またはコンジュゲートならびにインクレチン模倣薬および／またはそのフラグメント、変種および／またはコンジュゲートからなる群より選択される。別の態様において、少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの血清半減期は、約４〜約７日である。該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストのＴｍａｘ値は約１日〜約５日である。

本発明の１の態様において、少なくとも1種のＧＬＰ−１アゴニストで治療を受けるヒトは、高血糖症および／または糖尿病を有しうる。該ヒトはＴ２ＤＭを有しうる。

別の実施態様において、該ＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物が、ヒトにおける血漿グルコースを低下させ、ヒトの血漿グルコースのＡＵＣ_{０−２４時間}の加重平均を、該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物の投与後に約１週間にわたり臨床的および統計的に有意に低下させる方法が提供される。該ヒトのプラセボと比較した基準値からの変化として測定される血漿グルコースのＡＵＣ_{０−２４時間}の加重平均は、少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物の少なくとも１回の投与量の投与後に、少なくとも１週間にわたり少なくとも約５ｍｇ／ｄＬ、１０ｍｇ／ｄＬ、１５ｍｇ／ｄＬおよび／または２０ｍｇ／ｄＬまで低下しうる。他の態様において、ＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物は、ヒトにおける血漿グルコースを低下させ、ヒトの空腹時血漿グルコースを、少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物の投与後に約１週間にわたり低下させる。別の態様において、ＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物が、ヒトにおける血漿グルコースを低下させ、食後血漿グルコースを、少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物の少なくとも１回の投与量の投与後に低下させる方法が提供される。

本発明の別の態様において、ＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物は、７日に１回投与される。あるいは、ＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物は、１日に１回、２日に１回、３日に１回、２週に１回、４週に１回および／または１ヵ月に１回投与されうる。ＧＬＰ−１アゴニストは、限定されるものではないが、皮下注入、筋肉注入、静脈注入、粘膜、経口、および／または吸入を含む、当該分野にて既知の複数の経路により投与されうる。本発明の別の態様において、ＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物は、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）リガンド、チアゾリジンジオン（例えば、グリタゾン系）、メトホルミン、インスリン、およびスルホニル尿素からなる群より選択される１種または複数の化合物をさらに含む。別の態様において、少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストをペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）リガンド、チアゾリジンジオン、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、メトホルミン、インスリン、およびスルホニル尿素からなる群より選択される１種または複数の化合物と併用する工程を含む方法が提供される。少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物は、少なくとも１種のＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドに加えて１種または複数のこれらの化合物を有しうる。さらに、それを必要とするヒトにおける血中グルコース濃度を低下させる方法であって、少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストを含む組成物を該ヒトに投与することを含み、該ヒトが、グルコースを制御するための食事をしているところの、方法が提供される。

本発明はまた、限定されるものではないが、ＩＩ型糖尿病を含む、血中グルコースの上昇を伴う糖尿病の治療のための医薬の製造における少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの使用であって、該少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストが投与のために処方され、少なくとも約２１．２ｐＭの少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの最大血漿濃度および１週間で少なくとも約１４９ｐＭｘ日数である少なくとも１種のＧＬＰ−１アゴニストの濃度曲線下面積値を提供するところの、使用を提供する。

本発明は、本明細書に記載のＧＬＰ−１およびＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドを用いる、限定されるものではないが、ＩＩ型糖尿病を含む、血中グルコースの上昇を伴う疾患の治療方法を提供する。本明細書に記載の各治療方法における投与のために処方される医薬の製造におけるＧＬＰ−１アゴニストおよびＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドの使用がまた提供される。また、ＧＬＰ−１活性を有するポリペプチドおよび／またはＧＬＰ−１アゴニストを含むヒトにおけるＧＬＰ−１活性を促進することができる医薬組成物が提供され、本明細書に記載の方法および使用のために処方される。

当業者であれば、本明細書に記載の薬物動態（例えば、限定されるものではないが、Ｃｍａｘ、ＡＵＣ、Ｔｍａｘ、血清半減期）および薬力学的（例えば、限定されるものではないが、血清、血漿および血中グルコース濃度）パラメータを測定および算出する種々の方法を理解するであろう。さらに、当業者であれば、統計比較の種々の方法（例えば、限定されるものではないが、基準値〜治療後の変化の比較および／または治療群間の比較）および／または本明細書に記載の薬物動態および薬力学的パラメータを理解するであろう。さらに、当業者であれば、薬物動態、薬力学的および他の臨床データを収集および分析する種々の他の方法を理解するであろうし、用いることができる。

以下の実施例は、本発明の種々の非限定的な態様を説明するものである。以下の実施例について、特に明記しない限り、配列番号１は、２．８％マンニトール、４．２％トレハロース二水和物、０．０１％ポリソルベート８０、２０ｍＭ ｐＨ７．２のリン酸緩衝液を含む凍結乾燥形態から２５ｍｇ／ｍＬとして処方された。配列番号１を含む組成物は、各投与量の必要に応じて注射用水で希釈された。

実施例１
これは、健常対象の腹部に皮下投与された配列番号１を含む医薬組成物（０．２５ｍｇ〜１０４ｍｇ）の単純盲検、プラセボ対照、漸増用量試験であった。

３９人の健常男性および女性対象が試験に参加した。健常対象の５つのコホートは、以下のように腹部に皮下注入された配列番号１を含む医薬組成物の投与量を段階的に増加させながら、２週間受けた：コホート１（０．２５ｍｇ＋１ｍｇ）；コホート２（３ｍｇ＋６ｍｇ）；コホート３（１６ｍｇ＋２４ｍｇ）；コホート４（４８ｍｇ＋６０ｍｇ）；およびコホート５（８０ｍｇ＋１０４ｍｇ）。コホート１−４の内、６人の対象は、活性化合物を受けるように無作為に選択され、２人の対象は、プラセボを受けるように無作為に選択された。コホート５の内、５人の対象は、活性化合物を受けるように無作為に選択され、２人の対象は、プラセボを受けるように無作為に選択された。したがって、２９人の対象は積極的治療を受け、１０人の対象はプラセボを受けた。配列番号１を含む医薬組成物への暴露は、試験した投与量範囲にわたって、用量に比例するより大きく増加させた。配列番号１の半減期は、全投与量について約７日であり、Ｔｍａｘは２〜４日の範囲にあった。

活性化合物を受けた健常対象における薬物動態パラメータは、表１に要約される。プラセボを受けた対象の薬物動態データは、要約されていない。ＡＵＣ（Ｗｋ１）は、第１投与後の１週にわたる、第１投与の時間から算出された濃度対時間曲線下面積を表す。ＡＵＣ（Ｗｋ２）は、第２投与後の１週にわたる、第２投与の時間から算出された濃度対時間曲線下面積を表す。Ｃｍａｘ（Ｗｋ１）は、第１投与後の１週にわたる、第１投与の時間からの最大観測濃度を表す。Ｃｍａｘ（Ｗｋ２）は、第２投与後の１週にわたる、第２投与の時間からの最大観測濃度を表す。

実施例２
これは、Ｔ２ＤＭを伴う対象における単純盲検、プラセボ対照、反復投与試験であった。４４人の男性および女性対象が試験に参加した。対象は、食事制限を受けているか、またはメトホルミン、スルホニル尿素、またはメトホルミンもしくはスルホニル尿素の組み合わせを服用していた。試験開始前にメトホルミンおよび／またはスルホニル尿素を服用している対象は、第１投与の２週前にこれらの治療から除外された。対象は、以下のように、週に１回、２週間にわたる腹部の皮下注入による、プラセボまたは配列番号１を含む医薬組成物に無作為化された：コホート１（９ｍｇ＋９ｍｇ；４人プラセボ、１４人活性）；コホート２（１６ｍｇ＋１６ｍｇ；５人プラセボ、１２人活性）；コホート３（３２ｍｇ＋３２ｍｇ；５人プラセボ、１４人活性）。４０人の対象が積極的治療に無作為化され、１４人の対象がプラセボに無作為化された。

５３人の対象は試験を完了した。コホート２において積極的治療を受けるように無作為に選択された１人の対象は、第２投与量（１６ｍｇ）の投与前に試験から除外した。コホート２において積極的治療を受けるように無作為に選択された第２対象は、第１投与量（１６ｍｇ）のみ受けた。該第２対象は、薬物動態分析に含まれなかった。３人の対象は誤った投与がされた（２人のプラセボ対象およびコホート３における積極的治療を受けるように無作為に選択された１人の対象（３２ｍｇ））。誤った投与がされた対象は、いかなる薬物動態分析にも含まれなかった。

配列番号１の半減期は、全投与量について約４〜６日であった。Ｔｍａｘは、明確な用量依存性を伴わず、投与後約１〜約５日の範囲であった。薬物動態パラメータは、活性化合物を受けた対象について図１および表２に要約される。プラセボに無作為化された対象は、図１または表２に含まれていない。

実施例３
実施例２に記載の対象の薬物動態プロファイルが、この実施例において提供される。対象は、以下のように、週に１回、２週間にわたり投与されるプラセボまたは配列番号１を含む医薬組成物の皮下注入を受けた：コホート１（９ｍｇ＋９ｍｇ；４人プラセボ、１４人活性）；コホート２（１６ｍｇ＋１６ｍｇ；５人プラセボ、１２人活性）；コホート３（３２ｍｇ＋３２ｍｇ；５人プラセボ、１４人活性）。対象は、１日目および８日目に投与された。Ｔ２ＤＭを伴う対象におけるグルコースおよびフルクトサミンに対する配列番号１の効果を評価した。Ｔ２ＤＭを伴う対象は、食事制限を受けているか、またはメトホルミン、スルホニル尿素、またはメトホルミンもしくはスルホニル尿素の組み合わせを服用しており、第１投与の２週前からこれらの治療から除外した。空腹時および２４時間グルコースプロファイルを、基準値で、ならびに第１および第２投与の２４時間後に評価した。フルクトサミンを、基準値で、ならびに投与後１３日目、２１日目および最終追跡（５６日目または６３日目）調査で評価した。

正確な無作為化治療を受けた全対象を薬物動態分析に含めた。コホート２における１人の対象は、１日目に正確に投与されたが、第２投与前に除外された。該対象は、８日目の前に収集されたデータについての薬物動態分析に含まれ、投与８日目の後のＰＤ要約から除外された。プラセボを受けるように無作為に選択され、半分投与された２人の対象は、全ての薬力学的分析から除外された。コホート３における３２ｍｇの活性化合物を無作為に選択された１人の対象は、誤った投与がされ、全ての薬物動態分析から除外された。

全ての投与レベルにて、２４時間の加重平均グルコースおよび空腹時血漿グルコース（ＰＰＧ）濃度の臨床的および統計的に有意な低下を観測した。グルコースデータを表３に示す。

フルクトサミンの著しい低下は、投与後１３日目および２１日目の全ての投与レベルで見られた。低下は、予測される配列番号１の半減期のために、最終追跡調査（５６日目および６３日目）では期待されないであろう。プラセボ対象と比較した、活性化合物を受けたＴ２ＤＭを伴う対象におけるフルクトサミンの比較は、表４に要約される。

実施例４
これは、健常被験者およびＴ２ＤＭを伴う対象における非盲検、無作為化、単回投与試験であった。６２人の男性および女性対象が試験に参加した。Ｔ２ＤＭを伴う対象は、食事制限、メトホルミン服用またはチアゾリジンジオン服用を受けており、試験にわたって彼らの前治療を続けた。Ｔ２ＤＭを伴う対象は、１６ｍｇ（腹部（Ｎ＝８）；腕（Ｎ＝７）；または脚（Ｎ＝７））または６４ｍｇ（腹部（Ｎ＝８）；腕（Ｎ＝８）；または脚（Ｎ＝８））の１回の投与量として皮下注入により配列番号１を含む医薬組成物を受けた。健常被験者は、腹部の皮下注入により１６ｍｇ（Ｎ＝８）または６４ｍｇ（Ｎ＝８）のいずれかの活性化合物を受けた。したがって、１６人の健常で、正常な被験者は、活性化合物を受け、Ｔ２ＤＭを伴う４６人の対象は、活性化合物を受けた。

Ｔ２ＤＭ対象において、暴露は、全ての注入部位にわたって同程度であり、比例的増加よりも適度に大きく増加した。暴露は、健常対象とＴ２ＤＭ対象との間で同程度であった。濃度プロファイルおよびボックスプロットＡＵＣは、各々、図１および２に表される。薬物動態パラメータは、表５に要約される。ＡＵＣ（Ｗｋ１）は、投与後１週間にわたる投与時間から算出された濃度対時間曲線下面積を表す。ＡＵＣ（０−∞）は、配列番号１の排出速度に基づいて、無限時間に推定された投与時間からの濃度対時間曲線下面積を表す。１６ｍｇの投与レベルを受ける６人の対象について、利用可能なデータは、配列番号１の排出速度の予測を可能にしなかった。したがって、無限時間に対する外挿は可能ではなく、ＡＵＣ（０−∞）はこれらの対象について算出されなかった。

実施例５
実施例４に記載の対象の薬力学的プロファイルが、この実施例で提供される。配列番号１を含む医薬組成物の単回投与の薬力学的プロファイルは、該試験にて調査され、Ｔ２ＤＭを伴う対象におけるグルコース、インスリン、グルカゴン、およびＣ−ペプチドに対する配列番号１の効果を含んでいた。Ｔ２ＤＭを伴う対象は、食事制限、メトホルミン服用またはチアゾリジンジオン服用のいずれかを受けており、試験にわたって彼らの前治療を続けた。対象は、以下のように単回投与量の配列番号１を含む医薬組成物を受けた：実施例４に記載されるように、１６ｍｇまたは６４ｍｇの単回投与量が、１６人の健常で、正常な被験者の腹部の皮下注入により投与されたか、または４６人のＴ２ＤＭを伴う対象の腕、脚、または腹部に投与された。空腹時グルコースは、投与の４８時間後に、朝食前に評価した。食後（４時間）グルコースプロファイルは、投与の４８時間後に、朝食後４時間にわたり評価した。

グルコースの低下は、投与される各投与量について注入部位にわたって一致した。食後グルコース（４時間加重平均グルコース）および空腹時血漿グルコース（ＦＰＧ）の臨床的および統計的に有意な低下は、６４ｍｇ投与量で観測された。グルコースデータを表６に示す。

本出願が優先権を主張する任意の特許出願はまた、ある刊行物および参考文献について上記されるように、その全体を出典明示により本明細書の一部とする。

Claims (5)

1. ａ）１６ｍｇないし６４ｍｇの配列番号１のアミノ酸配列を有するポリペプチド、２.８％マンニトール、４.２％トレハロース二水和物、０.０１％ポリソルベート８０、ｐＨ７.２のリン酸緩衝液および注射用水を含む皮下注入用の組成物、および
   ｂ）インクレチン模倣薬、メグリチニド、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、ｐＰＡＲアゴニスト、α−グルコシダーゼ阻害薬、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、トラザミド、グリキドンおよびグリメピリドからなる群から選択される血糖降下剤、
   を併用することを特徴とする、医薬。
2. 血糖降下剤がグリメピリドである、請求項１に記載の医薬。
3. さらにメトホルミンを併用する、請求項２に記載の医薬。
4. 血糖降下剤がインクレチン模倣薬である、請求項１に記載の医薬。
5. インクレチン模倣薬がエキセンジン３およびエキセンジン４から選択される、請求項４に記載の医薬。

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