JP5679128B2 - 抗微生物及び放射線防御化合物 - Google Patents

Description

本発明は、抗微生物及び放射線防御活性を有する化合物に関する。特に、本発明は、細菌、真菌、プロトゾアを含む広いスペクトルの生物に対する活性を有する、置換ニトロスチレン化合物に関する。本発明の化合物はまた、放射線ダメージからの防御を提供する能力を有する。

発明の背景
本明細書で引用するいずれの特許又は特許出願も含む全ての参考文献は、引用により本明細書に含まれるものとする。いずれの参考文献も従来技術を構成することは是認しない。参考文献の考察はそれらの著者の主張することを述べてあり、本出願人は、引用文献の正確さと妥当性に挑戦する権利を有する。多数の従来技術刊行物が本明細書で引用されるが、これらの文献のいずれも、オーストラリア又は他の如何なる国において、当業分野で共通の一般知識の一部を形成するということは、この引用からは認められないことが、明瞭に理解されよう。

細菌、真菌、プロトゾア病原体は、軽度の呼吸器の病気から激症全身感染や慢性疾患の範囲の非常に様々な種類の感染の原因である。Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ又はＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒなどの生物によって引き起こされる食中毒は一般的であり、集中的畜産技術を用いて生じる家畜又は家禽の風土性感染としばしば関連する。

抗生物質の広範な利用可能性にもかかわらず、感染の制御は困難であり、多数の生物は、耐性を生じる能力を有する。病院での多剤耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ感染、薬剤耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ感染、ＨＩＶ患者の細菌、真菌、プロトゾア感染、結核、ならびに発展途上国でのマラリアおよび他の風土性感染などの非常に扱いにくいことが今までに分かっている問題を多数の微生物は引き起こす。

現在、細菌、真菌及びプロトゾア起源の病原体に対する広いスペクトルの活性を有する薬剤はほんの少ししかない。抗生物質は、病原性微生物に対する闘いで最も広範に使用される薬剤である。しかし、大部分の抗生物質は、狭い特異性しか有さない。広いスペクトルの抗細菌性抗生物質でさえ、真菌やプロトゾアにはあまり有効ではない。大部分の抗生物質は、制限された範囲の化合物クラスに属する。これらの改良された半合成誘導体が開発されたが、ほんの少しの新規抗生物質化合物クラスが、最近２０年間に利用可能になっただけである。

放射線照射に対する生物の防御用薬剤の選択も、非常に限定されている。放射線防御剤の中で、最も有効なものは、硫黄含有化合物である（Ｋｕｎａ，１９８９）。例えば、シスタミンは、放射線防御剤としての使用を承認されている（Ｖｌａｄｉｍｉｒｏｖら，１９８９）。この製剤の防御指数は１．４５を超えず、下痢を起こす不利点を有する。別の公知の放射線防御製剤は、メルカミン（β−メルカプトエチルアミン）である（Ｍａｓｈｋｏｖｓｋｉｙ，１９８６）。
これは、低い治療係数、短い作用時間（０．５〜１時間）、放射線防御活性の短い持続（１５〜３０分）を有する。

β−ニトロスチレンとその誘導体の幾つかは、生物学的活性と部分的に殺真菌活性を示すことが知られている（Ｆｏｙｅｒ，１９７３）。アリールニトロアルケンのある誘導体は、抗微生物、抗真菌、抗プロトゾア活性を有し、放射線ダメージからの防御を提供できることをロシア特許第２１４５２１５号は示した。これらの化合物は、以下の式

（式中、Ｒ_１’は、Ｈ又はＣＨ_３であり；そして
Ｒ_２’とＲ_３’は同一又は異なって、Ｈ、ＯＣＨ_３、ＯＨ、ＮＯ_２、（ＣＨ_３）_２Ｎから選択される）を有する。

これらの化合物の活性は満足いくものであるが、広いスペクトルの抗微生物活性を有する低コストで低毒性の薬剤が求められている。

ここで、特定の置換ニトロスチレン化合物が、細菌、真菌、プロトゾアを含む非常に広いスペクトルの生物に対し優れた活性を有し、また放射線ダメージからの防御を提供する能力を有することを、本発明者らは見出した。

発明の要旨
本発明は、 微生物感染の治療及び／又は予防の方法であって、式Ｉ：

（式中、
ＸとＹは同一又は異なって、ヘテロ原子から選択され；

は、ヘテロ原子ＸとＹに依存して二重又は単結合であり；
Ｒ_１〜Ｒ_５は同一又は異なって、水素又は非有害置換基から選択され；そして
Ｒ_６とＲ_７は同一又は異なって、水素及び非有害置換基から選択されるか、又は、二重結合が存在するとき、Ｒ_６とＲ_７の一方は存在しない）の化合物、その医薬として許容できる塩又は誘導体、プロドラッグ、互変異性体及び／又は異性体の有効量を投与する工程を含む方法を提供する。

本発明はまた、微生物感染の治療及び／又は予防用の医薬の製造における式Ｉの化合物の使用を提供する。
本発明は更に、微生物感染の治療及び／又は予防のための式Ｉの化合物の使用を提供する。
本発明はまた更に、放射線ダメージから被験体を防御する方法であって、その必要のある被験体に式Ｉの化合物の有効量を投与することを含む方法を提供する。
別の局面では、本発明は、癌放射線治療の方法であって、このような治療の必要のある被験体に、式Ｉの化合物の有効量を投与すること、被験体の腫瘍個所を放射線源に曝すことを含む方法を提供する。
更なる局面では、本発明は、抗微生物剤又は放射線防御剤としての式Ｉの化合物の使用を提供する。

好ましくは、ＸとＹは同一又は異なって、Ｏ及びＮから選択され、より好ましくは、ＸとＹは両方とも酸素である。
好ましくは、Ｒ_１とＲ_２は同一又は異なって、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、又は置換されていてもよいＣ_１−６アルキルから選択される。
Ｒ_３〜Ｒ_５は、好ましくは、同一又は異なって、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、ニトロ、Ｃ_１−６アルコキシ、又は置換されていてもよいＣ_１−６アルキルから選択される。
好ましくは、ハロゲンは、塩素又は臭素である。
式Ｉの化合物のＥ異性体が好ましい。

Ｘ、Ｙ、

Ｒ_６、Ｒ_７は上で定義した通りであり；Ｒ_１とＲ_２は同一又は異なって、水素、ヒドロキシ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＣ_１−４アルキルから選択され；Ｒ_３〜Ｒ_５は同一又は異なって、水素、ヒドロキシ、Ｃｌ、Ｂｒ、ニトロ、Ｃ_１−４アルコキシ、又はＣ_１−４アルキルから選択されている、式Ｉの化合物が特に好適である。

本発明の化合物の具体例は以下の通りである。
（１）ＸとＹはＯであり、Ｒ_１はメチルであり、Ｒ_２とＲ_３は水素である
（３，４−メチレンジオキシ−β−メチル−β−ニトロスチレン）

（２）ＸとＹはＯであり、Ｒ_１〜Ｒ_３は水素である
（３，４−メチレンジオキシ−β−ニトロスチレン）

（３）ＸはＮであり、ＹはＮＨであり、Ｒ_１はメチルであり、Ｒ_２とＲ_３は水素である
（ベンズイミダゾール−５−β−ニトロプロピレン）

（４）ＸはＮであり、ＹはＮＨであり、Ｒ_１は水素であり、Ｒ_２はメチルであり、Ｒ_３は存在しない
（２−メチルベンズイミダゾール−５−β−ニトロエチレン）

（５）ＸはＯであり、ＹはＮであり、Ｒ_１とＲ_２は水素であり、Ｒ_３は存在しない
（ベンズオキサゾール−５−β−ニトロエチレン）

（６）ＸはＮであり、ＹはＯであり、Ｒ_１とＲ_２はメチルであり、Ｒ_３は存在しない
（２−メチルベンズオキサゾール−５−β−ニトロプロピレン）

式Ｉの化合物の幾つかは、それ自体新規である。
従って、本発明は、式Ｉａ：

（式中、
Ｘ、Ｙ、

Ｒ_１〜Ｒ_７は、上記式Ｉで定義した通りである、
但し、ＸとＹの両方がＯであり、Ｒ_２〜Ｒ_７が水素であるとき、Ｒ_１は、水素、Ｃ_１−４アルキル、又はＣＯ_２Ｅｔではなく、又はＸとＹの両方がＯであるとき、Ｒ_１〜Ｒ_７は水素ではない）
の化合物を提供する。

本発明はまた、上で定義した式Ｉａの化合物の製造方法であって、式ＩＩ：

（式中、
Ｘ、Ｙ、

Ｒ_３〜Ｒ_７は上記式Ｉａで定義した記載の通りである）の化合物を、式ＩＩＩ：
Ｒ_１Ｒ_２ＣＨＮＯ_２
ＩＩＩ
（式中、Ｒ_１とＲ_２は上記式Ｉａで定義した通りである）の化合物と縮合させることを含む方法を提供する。

本発明は更に、上で定義した式Ｉａの化合物の製造方法であって、式ＩＶ：

（式中、
Ｘ、Ｙ、

Ｒ_１〜Ｒ_７は上記式Ｉａで定義した通りである）の化合物を、Ｃ（ＮＯ_３）_４と反応させることを含む方法を提供する。

これらの方法は好ましくは、アミン又は水酸化アルカリ金属（例えば、ＮａＯＨ又はＫＯＨ）などの触媒の存在下で行う。

更なる局面では、本発明は、医薬として又は獣医学的に許容できる担体と一緒に、上で定義した式Ｉａの化合物を含む、医薬又は獣医学用組成物を提供する。
好ましくは、医薬又は獣医学用組成物は、局所、経口、又は非経口組成物である。
医薬として又は獣医学的に許容できる担体は、好ましくは、アセトン、ベンゼン、アセトニトリル、ＤＭＳＯ、又はアルコール、例えば、メタノール又はエタノールなどの有機溶媒である。本発明の化合物は、低い水溶性を示すが、水を有機溶媒と一緒にすると、安定な混合物が形成される。

図１は、実施例９のＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓに関する生存菌数の対数対時間（時間）のグラフである。 図２は、実施例２６における、寄生されている血液細胞％対培養時間のグラフである（Ｔ＝Ｔｒｏｐｈｏｚｏｉｔｅｓ、Ｒ＝Ｒｉｎｇｓ、Ｔ／Ｓ＝Ｔｒｏｐｈｏｚｏｉｔｅｓ又はＳｃｈｉｚｏｎｔｓ）。

発明の詳細な説明
本明細書のために、語「含む（含有する）（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「含むが、それに限定されない」を意味し、語「含む（含有する）（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は同様の意味を有する。
用語「ヘテロ原子」は、Ｏ、Ｎ、又はＳを示す。
用語「非有害置換基」は、その最も広い意味で本明細書で使用し、化合物の抗微生物又は放射線防御特性に有害効果を有さない置換基を指す。例として、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ハロ、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、ハロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ、アリールオキシ、ベンジルオキシ、ハロアルコキシ、ハロアルケニルオキシ、ハロアリールオキシ、ニトロ、ニトロアルキル、ニトロアルケニル、ニトロアルキニル、ニトロアリール、ニトロヘテロシクリル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルケニルアミノ、アルキニルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、ベンジルアミノ、ジベンジルアミノ、アシル、アルケニルアシル、アルキニルアシル、アリールアシル、アシルアミノ、ジアシルアミノ、アシルオキシ、アルキルスルホニルオキシ、アリールスルフェニルオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクルオキシ、ヘテロシクルアミノ、ハロヘテロシクリル、アルキルスルフェニル、アリールスルフェニル、カルボアルコキシ、カルボアリールオキシ メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、アシルチオ、リン含有化合物が挙げられる。

特に適切な非有害置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ、ハロアルコキシ、ハロアルケニルオキシ、ニトロ、ニトロアルキル、ニトアルケニル、ニトロアルキニルである。
好適な実施態様では、非有害置換基は、Ｃ_１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１−６アルコキシ、ニトロである。

用語「置換されていてもよい」は、基が、例えば、非有害置換基の定義の下に上で特定した基で更に置換されていても、置換されていなくてもよいことを意味する。
用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、好ましくは、塩素、臭素を指す。
用語「アルコキシ」は、その最も広い意味で本明細書で使用し、アルキル部分、好ましくは、Ｃ_１−６アルキル、より好ましくはＣ_１−４アルキルを各々が有する、直鎖、分岐鎖、又は環状のオキシ含有基を指す。このようなアルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ｔ−ブトキシである。
単独で、又は「置換されていてもよいＣ_１−４又はＣ_１−６アルキル」などの複合語で使用される用語「Ｃ_１−４アルキル」又は「Ｃ_１−６アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する、直鎖、分岐鎖、又は環状の炭化水素基を指す。このようなアルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルである。

式Ｉ又はＩａの化合物の塩は好ましくは、医薬として許容できるものであるが、非医薬として許容できる塩も、本発明の範囲内であることが理解されよう。これらは、医薬として許容できる塩の製造での中間体として有用であるからである。医薬として許容できる塩の例は、ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、アルキルアンモニウムなどの、医薬として許容できるカチオンの塩；塩酸、オルトリン酸、硫酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、スルファミン酸、臭化水素酸などの、医薬として許容できる無機酸の酸付加塩；又は、酢酸、プロピオン酸、酪酸、酒石酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フマル酸、クエン酸、乳酸、粘液酸、グルコン酸、安息香酸、コハク酸、シュウ酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、トリメタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、サリチル酸、スルファニル酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、エデト酸、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、ラウリル酸、パントテン酸、タンニン酸、アスコルビン酸、吉草酸などの、医薬として許容できる有機酸の塩；が挙げられる。

更に、本発明の化合物の幾つかは、水又は普通の有機溶媒と溶媒和物を形成してもよい。このような溶媒和物は、本発明の範囲に包含される。
「医薬として許容できる誘導体」とは、任意の医薬として許容できる塩、水和物、又は被験体に投与すると、式ＩもしくはＩａの化合物、又はその抗微生物性もしくは放射線防御性の活性代謝物もしくは残基を提供（直接的又は間接的）できる任意の他の化合物を意味する。
用語「プロドラッグ」は、インビボで式Ｉ又はＩａの化合物に変換される化合物を含むように、本明細書ではその最も広い意味で使用される。
用語「互変異性体」は、２つの異性体形態の間の平衡状態で存在できる式Ｉ又はＩａの化合物を含むように、本明細書ではその最も広い意味で使用される。このような化合物は、化合物中の、２つの原子もしくは基を連結する結合、及びこれらの原子もしくは基の位置が異なりうる。
用語「異性体」は、本明細書ではその最も広い意味で使用され、構造、幾何、立体異性体を含む。式Ｉ又はＩａの化合物は、１個以上のキラル中心を有しうるので、それは、エナンチオマー形態で存在できる。

用語「微生物感染」は、本明細書ではその最も広い意味で使用され、微生物によって引き起こされる任意の感染を指し、細菌感染、真菌感染、酵母感染、プロトゾア感染を含む。
用語「微生物」は、藻類、細菌、真菌、酵母、プロトゾアなどのカテゴリー内の、任意の顕微鏡的生物、又は分類的に関連する肉眼で見える生物を含む。

細菌感染として、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉａ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ （Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ Ｄ）、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、肺炎球菌感染（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ブドウ球菌感染及び連鎖球菌感染； Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ、カンピロバクター感染、腸管出血性Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ （ＥＨＥＣ／Ｅ． ｃｏｌｉ ０１５７ ： Ｈ７）、腸管侵入性Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ （ＥＩＥＣ）、腸内毒素原性Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ （ＥＴＥＣ）、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｓｐｐ．、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ ｓｐｐ．、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｓｐｐ．、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｐｐ．、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａ及びＹｅｒｓｉｎｉａを含むグラム陰性細菌； Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｖｉｕｍ−ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ、Ｍｙｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｊｏｈｎｅｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ、異型細菌、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ、Ｓｐｉｒｏｃｈｅｔｅｓ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｉｉ及びＬｅｐｔｏｓｐｉｒａ ｉｃｔｅｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｉａｅを含む抗酸細菌； 並びに、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ及びＮｏｃａｒｄｉａを含む他の種々の細菌；によって引き起こされる感染が挙げられるが、それらに限定されない。

真菌感染として、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｌａｖｕｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｄｉｔｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｄｕｂｌｉｅｎｓｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｋｒｕｓｅｉ、Ｃａｎｄｉｄａ ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｇｌａｂｒａｔａ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｉｍｍｉｔｉｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ ｆｌｏｃｃｏｓｕｍ、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｆｕｒｆｕｒ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｃａｎｉｓ、Ｍｕｃｏｒ
ｓｐｐ．、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｍａｒｎｅｆｆｅｉ、Ｐｉｔｙｒｏｓｐｏｒｕｍ ｏｖａｌｅ、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉｎｉｉ、Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｋｉｉ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｉｎｔｅｒｄｉｇｉｔａｌｅ、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ ｂｅｉｇｅｌｉｉ及びＲｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ ｓｐｐ．によって引き起こされる感染が挙げられるが、それらに限定されない。

酵母感染として、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ ｃｌａｕｓｅｎｉｉ、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ ｃｕｓｔｅｒｉｉ、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ ａｎｏｍａｌｏｕｓ、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ ｎａａｒｄｅｎｅｎｓｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｈｉｍｉｌｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ、Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｋｉ、Ｃａｎｄｉｄａ ｓｏｌａｎｉ、Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｖｅｒｓａｔｉｌｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｂｅｃｈｉｉ、Ｃａｎｄｉｄａ ｆａｍａｔａ、Ｃａｎｄｉｄａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ、Ｃａｎｄｉｄａ ｓｔｅｌｌａｔａ、Ｃａｎｄｉｄａ ｖｉｎｉ、Ｄｅｂａｒｏｍｙｃｅｓ ｈａｎｓｅｎｉｉ、Ｄｅｋｋｅｒａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ、Ｄｅｋｋｅｒａ ｂｒｕｘｅｌｌｅｎｓｉｓ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｉｕｍ ｓａｎｄｉｄｕｍ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｆａｂｉａｎｉ、Ｈａｎｓｅｎｉａｓｐｏｒａ
ｕｖａｒｕｍ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ａｎｏｍａｌａ、Ｈａｎｓｅｎｉａｓｐｏｒａ ｇｕｉｌｌｅｒｍｏｎｄｉｉ、Ｈａｎｓｅｎｉａｓｐｏｒａ ｖｉｎａｅ、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｌａｃｔｉｓ、Ｋｌｏｅｋｅｒａ ａｐｉｃｕｌａｔａ、Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｍａｒｘｉａｎｕｓ、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ、Ｍｅｔｓｃｈｉｋｏｗｉａ ｐｕｌｃｈｅｒｒｉｍａ、Ｐｉｃｈｉａ ｇｕｉｌｌｉｅｒｍｏｄｉｉ、Ｐｉｃｈｉａ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ、Ｐｉｃｈｉａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ｐｉｃｈｉａ ｍｅｍｒａｎｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｂａｙａｎｕｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｄａｉｒｉｅｎｓｉｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｅｘｉｇｕｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｕｉｎｓｐｏｒｕｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｕｖａｒｕｍ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｏｌｅａｇｉｎｏｓｕｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｂｏｕｌａｒｄｉｉ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｄｉｅｓ
ｌｕｄｗｉｇｉｉ、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ、Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ ｄｅｌｂｒｕｅｋｉｉ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ ｓｔｅｌｌａｔａ、Ｚｙｇｏａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｂａｉｌｌｉ及びＺｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｒｏｕｘｉｉによって引き起こされる感染が挙げられるが、それらに限定されない。

プロトゾア感染として、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ、Ｐｌａｓｍｏｄｉａ、Ｔｈｅｉｌｅｒｉａ、Ａｎａｐｌａｓｍａ、Ｇｉａｒｄｉａ、Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ、Ｃｏｃｃｉｄｉａ及びＢａｂｅｓｉａによって引き起こされる感染が挙げられるが、それらに限定されない。具体例として、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ、Ｅｉｍｅｒｉａ ｔｅｎｅｌｌａ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｖｉｖａｘ又はＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｏｖａｌｅが挙げられる。

好ましくは、微生物感染は、グラム陽性又はグラム陰性細菌、例えば、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｅｃａｌｉｓ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ又はｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｊｅｊｕｎｉ、又はＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ；真菌又は酵母感染、例えば、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｉｎｔｅｒｄｉｇｉｔａｌｅ；Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ、又はＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ；あるいは、プロトゾア感染、例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ又はＴｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓ；によって引き起こされる感染である。

微生物感染の例として、細菌又は真菌の創傷感染、粘膜感染、腸管感染、敗血状態、肺炎、トラコーマ、オルニトーシス、トリコモナス症、真菌感染及びサルモネラ症（特に、獣医学的実施において）が挙げられる。本発明の化合物はまた、耐性微生物種の治療のた
めに、又は、物質の殺菌処理もしくは消毒、例えば、表面消毒、が必要な種々の分野で使用されうる。

本明細書で使用する用語「被験体」は、医薬活性な薬剤での治療を必要とする疾患又は状態を有する任意の動物を指す。被験体は、哺乳動物、好ましくは、ヒトでありうるか、又は家畜もしくはペット動物（ｃｏｍｐａｎｉｏｎ ａｎｉｍａｌ）でありうる。本発明の化合物は、ヒトの医学的治療での使用に適切であると特に考えられるが、イヌやネコなどのペット動物、ウマ、ポニー、ロバ、ラバ、ラマ、アルパカ、ブタ、ウシ、ヒツジなどの家畜、又は、霊長類、ネコ科動物、イヌ科動物、ウシ科動物、有蹄類などの動物園の動物の治療を含む獣医学的治療に適用できる。

適切な哺乳動物として、霊長目、げっ歯目、ウサギ目、クジラ目、食肉目、奇蹄目、偶蹄目のメンバーが挙げられる。奇蹄目と偶蹄目のメンバーが、同様の生物学と経済的重要性のため、特に好適である。
例えば、偶蹄目は、９つの科に分布する約１５０の生物種を含む：ブタ（Ｓｕｉｄａｅ）、ペッカリー（Ｔａｙａｓｓｕｉｄａｅ）、カバ（Ｈｉｐｐｏｐｏｔａｍｉｄａｅ）、ラクダ（Ｃａｍｅｌｉｄａｅ）、マメジカ（Ｔｒａｇｕｌｉｄａｅ）、キリン及びオカピ（Ｇｉｒａｆｆｉｄａｅ）、シカ（Ｃｅｒｖｉｄａｅ）、プロングホーン（Ａｎｔｉｌｏｃａｐｒｉｄａｅ）、並びに、ウシ、ヒツジ、ヤギ及びアンテロープ（Ｂｏｖｉｄａｅ）。これらの動物の多くは、種々の国で飼料動物（ｆｅｅｄ ａｎｉｍａｌ）として使用される。より重要には、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ブタなどの経済的に重要な動物の多くは、非常に類似の生物学を有し、高度のゲノム相同性を共有する。
奇蹄目は、ウマやロバを含み、それらは、両方とも経済的に重要で、密接に関連する。実際、ウマとロバが交雑することは周知である。

本明細書で使用するとき、用語「有効量」は、所望の抗微生物又は放射線防御活性を生じるのに有効な本発明の化合物の量を意味する。
具体的「有効量」は、治療される特定の状態、被験体の物理的状態、治療される被験体のタイプ、治療期間、併用療法（もしあれば）の種類、使用する具体的製剤、化合物もしくはその誘導体の構造などの因子によって、明らかに変わろう。

用語「放射線ダメージ」は、本明細書ではその最も広い意味で使用され、イオン化放射線などの放射線源への暴露から生じるダメージを指す。本明細書で使用する用語「イオン化放射線」は、放射性原子核からのα、β、γ線やＸ線などの結合をイオン化するのに十分なエネルギーを有する光子を指す。

用語「癌放射線療法」は、本明細書ではその最も広い意味で使用され、良性又は悪性でありうる腫瘍を含めた、放射線療法を含む。
本発明の放射線防御剤の主な適用は、癌放射線療法においてである。皮膚、口腔粘膜、食道粘膜、直腸粘膜、膣粘膜、膀胱上皮などの、放射線療法で問題である正常組織の多くは、本発明の放射線防御剤によって防御できる。
癌放射線療法の状況外で、本発明の放射線防御剤は、高リスク放射能状況で予防的に使用できよう。

本発明の化合物は、有効な組合せを提供するために他の医薬と更に組合せてもよい。組合せが、式Ｉ又はＩａの化合物の活性を無くさない限り、医薬活性な薬剤の任意の化学的適合性の組合せを含むことが意図される。本発明の化合物と他の医薬は、別々に、逐次に、又は同時に投与してもよいことが理解されよう。
微生物感染を治療するとき使用されうる他の医薬として、抗生物質などの他の抗感染性薬剤が挙げられる。

化合物を放射線防御剤として使用するときには、他の医薬としては、化学療法剤、例えば、ＤＮＡに生じた傷がイオン化放射線から生じるものと同様であるようにしてＤＮＡを損傷する細胞障害性薬剤である放射線様薬剤が挙げられうる。ＤＮＡ鎖切断を引き起こす放射線様薬剤の例として、ブレオマイシン、ドキソルビシン、アドリアマイシン、５ＦＵ、ネオカルシノスタチン、アルキル化剤、及びＤＮＡ付加物を産生する他の薬剤が挙げられる。本発明の放射線防御剤は、イオン化放射線の影響に対し防御するのと同様に、これらの薬剤の一部によるダメージからＤＮＡを防御することが予想される。臨床適用で、本放射線防御剤は、化学療法剤と一緒に全身的に投与されることはありそうもない。これは、腫瘍に対するこの薬剤の作用を弱め得るからである。しかし、問題の組織への局所適用が利点がありうる状況がある。例えば、口腔粘膜炎は、ドキソルビシンなどの細胞障害性薬剤の問題の副作用であり、化学療法剤の投与前の口腔洗浄剤としての本発明の放射線防御剤の投与は、口腔内にはない腫瘍に対するこの薬剤の作用を弱めずにこの副作用を改善できよう。同様に、消化管は、経口投与によって防御でき、肺はエアロゾル吸入によって、膀胱は膀胱内送達によって、例えば、本放射線防御剤のカテーテルを介して、防御できよう。従って、本発明の好適方法では、放射線様薬剤などの他の医薬と組合せて式Ｉ又はＩａの化合物を用いる。

本発明の化合物は、例えば、相互作用基を介して、薬剤とコンジュゲートしてもよく、それは、それらを所望の腫瘍部位に特異的に送達しよう。適切な薬剤として、抗生物質又は蛋白質、増殖因子、例えば、全身照射と骨髄移植の状況下で造血幹細胞の優先的放射線防御が起こるのを可能とするであろう造血増殖因子が挙げられうる。

骨髄移植の状況下で本発明の化合物のコンジュゲートのエキソビボ適用もある。骨髄移植は一般的に、状態の悪化の予期において被験体から骨髄サンプルを得て、保存することを含む。次いで、化学療法のかなり猛烈な形態（即ち、高投与量）が投与される。この化学療法は、正常幹細胞の破壊故に通常致死的であるようであるが、被験体は、自身の造血幹細胞の投与によって救済されるようなものである。この方法の問題点は、幹細胞の最初のサンプルは、腫瘍細胞が夾雑する可能性があるということであり、従って、骨髄調製物から腫瘍細胞を取り除くために種々の方法が使用される。造血増殖因子とコンジュゲートされた放射線防御剤は、骨髄細胞の懸濁液に加えることによって、この状況で使用できよう。次いで、腫瘍細胞ではなく、正常骨髄細胞は、放射線の殺細胞効果から優先的に防御されようと予想して、その懸濁液を照射できよう。

本明細書で使用するとき、「医薬担体」は、式Ｉ又はＩａの化合物を患者に送達するための医薬として許容できる溶媒、懸濁剤、又はビヒクルである。担体は、液体又は固体でありえ、投与の計画された方法に従い選択される。各担体は、組成物の他の成分と適合性があり、被験体に無害であるという意味で医薬として「許容でき」なければならない。

式Ｉ又はＩａの化合物は、通常の非毒性の医薬として許容できる担体、アジュバント、ビヒクルを含有する投与単位製剤として、経口、局所、又は非経口で投与されうる。本明細書で使用する用語、非経口として、皮下注射、肺もしくは鼻腔への投与のためのエアロゾル、静脈内、筋肉内、クモ膜下内、頭蓋内、注射又は注入技術が挙げられる。

本発明はまた、本発明の治療の新規方法で使用するために適切な局所、経口、非経口医薬製剤を提供する。本発明の化合物は、錠剤、水性もしくは油性懸濁剤、ロゼンジ、トローチ、粉末、顆粒、エマルジョン、カプセル、シロップ又はエリキシルとして経口投与されうる。経口使用のための組成物は、医薬としてエレガントで口当たりのよい製剤を製造するために、甘味剤、矯味剤、着色剤、及び保存剤の群から選択される１つ以上の剤を含有しうる。適切な甘味剤として、ショ糖、ラクトース、グルコース、アスパルテーム又は
サッカリンが挙げられる。適切な崩壊剤として、コーンスターチ、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、キサンタンガム、ベントナイト、アルギン酸又は寒天が挙げられる。適切な矯味剤として、ペパーミント油、ウィンターグリーン油、チェリー、オレンジもしくはラズベリーフレーバーが挙げられる。適切な保存剤として、安息香酸ナトリウム、ビタミンＥ、アルファトコフェロール、アスコルビン酸、メチルパラベン、プロピルパラベン又は亜硫酸水素ナトリウムが挙げられる。適切な滑沢剤として、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウム又はタルクが挙げられる。適切な時間遅延剤として、グリセリル モノステアレート又はグリセリル ジステアレートが挙げられる。錠剤は、錠剤の製造に適切である非毒性の医薬として許容できる賦形剤と混合して活性成分を含有する。

これらの賦形剤は、例えば、（１）炭酸カルシウム、ラクトース、リン酸カルシウム、又はリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；（２）コーンスターチ又はアルギン酸などの顆粒化及び崩壊剤；（３）澱粉、ゼラチン又はアカシアなどの結合剤；及び、（４）ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクなどの滑沢剤；でありうる。これらの錠剤は、非被覆でありうるか、又は、消化管での崩壊と吸収を遅延させ、それによって、長期間にわたる持続作用を得るために、公知の技術によって被覆されうる。例えば、グリセリル モノステアレート又はグリセリル ジステアレートなどの時間遅延物質を使用しうる。被覆はまた、米国特許第４，２５６，１０８号；同第４，１６０，４５２号；同第４，２６５，８７４号に記載の技術を用いて行い得、制御放出用の浸透圧治療錠剤を形成しうる。

本発明の方法で有用な式Ｉ又はＩａの化合物並びに医薬活性剤は、インビボ適用のために、独立に、又は一緒に、注射によって、又は長時間にわたる緩やかな灌流によって、非経口で投与できる。投与は、静脈内、動脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内、経皮、又は例えば、浸透圧ポンプによる注入によってでありうる。インビトロ研究のために、本薬剤は、適当な生物学的に許容できる溶媒又は緩衝液に加え得、又は溶解し得、細胞又は組織に加え得る。

非経口投与用製剤として、滅菌水性又は非水性溶液、懸濁剤及びエマルジョンが挙げられる。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、及びオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルである。水性担体として、生理食塩水及び緩衝化媒体を含む、水、アルコール／水溶液、エマルジョン、又は懸濁液が挙げられる。非経口ビヒクルとして、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウムが挙げられる。乳酸化リンゲル静脈内ビヒクルとしては、補液及び栄養素補給物、電解質補給物（リンゲルデキストロースに基くものなど）などが挙げられる。例えば、抗微生物剤、抗酸化剤、キレート剤、増殖因子、不活性気体などの保存剤や添加剤も存在しうる。

一般的に、用語「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ、ｔｒｅａｔｍｅｎｔなど）」は、所望の薬理効果及び／又は生理効果を得るために、被験体、組織、又は細胞に影響を与えることを意味するように、本明細書では使用される。効果は、疾患又はその徴候もしくは症状を完全又は部分的に予防する点で予防的であり得、及び／又は疾患の部分的又は完全な治癒の点で治療的でありうる。本明細書で使用する「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、脊椎動物、哺乳動物、特にヒトの疾患の任意の治療又は予防を包含し、（ａ）疾患に罹り易いかもしれないが、まだ疾患であるとは診断されていない被験体に疾患が起こるのを予防すること；（ｂ）疾患を阻害すること、即ち、その発症を抑止すること；又は（ｃ）疾患の影響を軽減すること又は改善すること、即ち、疾患の影響の軽減を引き起こすこと；を含む。

本発明は、疾患の改善に有用な種々の医薬組成物を含む。本発明の１実施態様による医
薬組成物は、担体、賦形剤、添加剤又は助剤を用いて、式Ｉ又はＩａの化合物、そのアナログ、誘導体又は塩、あるいは、式Ｉ又はＩａの化合物と１種以上の医薬活性な薬剤の組合せを、被験体への投与に適した形態にすることによって製造される。しばしば使用される担体又は助剤として、炭酸マグネシウム、二酸化チタン、ラクトース、マンニトールや他の糖、タルク、ミルク蛋白質、ゼラチン、澱粉、ビタミン、セルロースやその誘導体、動物油や植物油、ポリエチレングリコール、及び滅菌水、アルコール、グリセロール及び多価アルコールなどの溶媒が挙げられる。静脈内ビヒクルとして、補液及び栄養素補給物が挙げられる。保存剤として、抗微生物剤、抗酸化剤、キレート剤、及び不活性気体が挙げられる。他の医薬として許容できる担体として、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ２０ｔｈ ｅｄ． Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｌｉａｍｓ （２０００）、ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｎａｔｉｏｎａｌ
Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ， ４３^ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ （Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｏｙａｌ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｇｒｅａｔ Ｂｒｉｔａｉｎ， ２０００）（これらの内容は、引用により本明細書に含まれるものとする）に記載のように、水溶液、塩を含む非毒性賦形剤、保存剤、緩衝剤などが挙げられる。医薬組成物のｐＨ及び種々の成分の正確な濃度は、当該分野の慣用的技術に基づき調整される。Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｆｏｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ （７ｔｈ ｅｄ．， １９８５）参照。

医薬組成物は好ましくは、投与単位で製造され、投与される。固体投与単位は、錠剤、カプセル、座薬でありうる。被験体の治療のために、化合物の活性、投与方法、疾患の性質と程度、被験体の年齢と体重に依存して、異なる１日投与量を使用できる。しかし、特定の状況下、より高い又はより低い１日投与量が適切でありうる。１日投与量の投与は、個々の投与量単位もしくは幾つかのより小さい投与量単位の形態で単回投与、また、特定の間隔で分割投与量の多回投与、の両方によって行うことができる。

本発明の医薬組成物は、治療有効投与量で局所的又は全身的に投与されうる。この使用に有効な量は、勿論、疾患の程度及び被験体の体重や全般的状態に依存しよう。典型的には、インビトロで使用される投与量は、医薬組成物のｉｎ ｓｉｔｕ投与に有用な量の有用なガイダンスを提供し得、微生物感染の治療に有効な投与量を決定するために、動物モデルが使用されうる。種々の検討材料は、例えば、Ｌａｎｇｅｒ， Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２４９： １５２７， （１９９０）に記載されている。経口使用のための製剤は、活性成分が、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリンと混合されている硬ゼラチンカプセルの形態でありうる。これらはまた、活性成分が、水、又はピーナッツ油、流動パラフィン、もしくはオリーブ油などの油性媒体と混合されている軟ゼラチンカプセルの形態でありうる。

水性懸濁剤は通常、水性懸濁剤の製造に適した賦形剤と混合された活性物質を含有する。このような賦形剤は、（１）カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム、及びアカシアゴムなどの懸濁剤；（２）以下のものでありうる分散剤又は湿潤剤：（ａ）レシチンなどの天然のホスファチド；（ｂ）アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合産物、例えば、ポリオキシエチレン ステアレート；（ｃ）エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合産物、例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール；（ｄ）エチレンオキシドと、脂肪酸及びヘキシトール由来の部分エステルとの縮合産物、例えば、ポリオキシエチレン ソルビトール モノオレエートなど；又は、（ｅ）エチレンオキシドと、脂肪酸及びヘキシトール無水物由来の部分エステルとの縮合産物、例えば、ポリオキシエチレン ソルビタン モノオレエート；でありうる。

医薬組成物は、滅菌の注射可能な水性又は油性の懸濁剤の形態でありうる。上記の適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤を用いて、公知の方法に基づき、この懸濁剤は処方されうる。滅菌の注射可能な製剤はまた、非毒性の、非経口的に許容できる希釈剤又は溶媒（例えば、１，３−ブタンジオールの溶液のように）中の滅菌の注射可能な溶液又は懸濁液でありうる。使用されうる許容できるビヒクルと溶媒には、水、リンゲル溶液、等張性塩化ナトリウム溶液がある。更に、滅菌の固定油は、通常、溶媒又は懸濁媒体として使用される。この目的のために、合成モノもしくはジグリセリドを含む任意の無刺激性の固定油が使用されうる。更に、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の製造における使用を見出している。

式Ｉ又はＩａの化合物はまた、リポソーム送達システム（小さな単層ベシクル、大きな単層ベシクル、及び多層ベシクルなど）の形態で投与されうる。リポソームは、種々のリン脂質（コレステロール、ステアリルアミン、又はホスファチジルコリンなど）から形成できる。

式Ｉ又はＩａの化合物はまた、獣医学用組成物の形態で使用されるために提示されることもあり、それは、例えば、当該分野で通常の方法によって製造されうる。このような獣医学用組成物の例として、以下のものに適合したものが挙げられる：
（ａ）経口投与、外用、例えば、ドレンチ（例えば、水性もしくは非水性溶液又は懸濁剤）；錠剤又はボーラス；飼料と混合されるための、粉末、顆粒、又はペレット；舌に適用するためのペースト；
（ｂ）非経口投与、例えば、皮下、筋肉内、又は静脈内注射による、例えば、滅菌溶液又は懸濁剤として；又は、（適当な場合）懸濁剤又は溶液が、乳頭を介し乳房に導入される乳房内注射によって；
（ｃ）局所適用、例えば、皮膚に適用されるクリーム、軟膏、又はスプレーとして；又は（ｄ）膣内、例えば、ペッサリー、クリーム、又は泡状物として。

本発明の式Ｉ又はＩａの化合物の投与量レベルは、体重１ｋｇ当たり約１ｇまでのオーダーでありうる。単一投与量を生じさせるのに、担体物質と組合せうる活性成分の量は、治療される宿主と投与の特定の様式に依存して変わろう。例えば、ヒトへの経口投与を意図した製剤は、組成物全体の約５〜約９５％まで変わりうる担体物質の適当で便利な量と共に、活性化合物を約１ｇまで含有しうる。投与単位形態は一般的に、活性成分を約５ｍｇ〜約５００ｍｇ含有しよう。

場合によっては、本発明の化合物は、スケジュールにおいて全体で少なくとも２回投与が行われるように、分割投与スケジュールで投与される。好ましくは、４時間以上までの間少なくとも２時間毎投与する。例えば、化合物は、１時間毎又は３０分毎に投与されうる。１好適実施態様では、血液中の活性薬剤の有効含量が維持されるように、分割投与レジメンは、血液中の活性化合物のレベルが、第１投与後到達した最大血漿レベルの約５〜３０％に減少するのに十分長い第１投与からの間隔後の本発明の化合物の第２投与を含む。場合によっては、各々の先行投与からの対応する間隔で、１回以上の次の投与が行われうる。好ましくは、血漿レベルが、直前の先行する最大値の約１０〜５０％に減少したときである。

しかし、任意の特定の患者に特異的な投与量レベルは、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全般的健康、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄速度、薬剤の組合せ、治療を受ける特定の疾患の程度を含む種々の因子に依存することが理解されよう。

実施例
以下の非限定的実施例と図面のみ言及して、ここで本発明を詳細に説明する。

実施例１ 全般的合成方法
ベンズジオキソールは文献（Ｐｅｒｅｋａｌｋｉｎ，１９８２ａ）に記載されている。ベンゾイミダゾールとベンゾオキサゾールの合成はまた、下記の標準的縮合方法１及び２（Ｐｅｒｅｋａｌｋｉｎ，１９６６，１９８２ｂ）を用いて行われうる。
方法１

方法２

（式中、Ｘ、Ｙ、

及びＲ_１〜Ｒ_７は、上記式Ｉで定義した通りである。）

方法２で、等モル量のベンズアルデヒドとニトロアルカンを、三角フラスコ中で混合し、等容量のアルコールに溶解した。触媒量（通常、アルデヒドとニトロアルカンに対し１：１０）で新鮮な蒸留エチレンジアミンを、得られた溶液に加え、室温で数日間（３〜１０日まで）暗所に置いた。この間に化合物は結晶化した。約０℃まで冷却後、結晶を濾過し、冷アルコールで洗浄し、次いで乾燥した。収量が低いときには、母液を一緒にして、ロータリーエバポレーターで蒸発させることができる。冷却後、更なる量の不純な生成物を得る。生成物を、最小量の沸騰アルコールに溶解することによって精製した。次いで、それを、活性炭で処理し、熱濾過し、冷却が進行している間に微細な黄色針状結晶が結晶化した。収率は約８０〜８５％であり、該化合物はクロマトグラフィー的に均一であった。
得られた化合物の赤外スペクトルは、文献（Ｈａｍｌｉｎ ａｎｄ Ｗｅｓｔｏｎ， １９４９； Ｋｎｏｅｖｅｎａｇｅｌ ａｎｄ Ｗａｌｔｅｒ， １９０４ ； Ｂｕｒｔｏｎ ａｎｄ Ｄｕｆｆｉｅｌｄ， １９４９）に記載のものと一致する。
化合物は、エタノール、アセトン、ベンゼン、メタノール、アセトニトリル、クロロホルム、ＤＭＳＯなどの有機溶媒に可溶であったが、水には非常に低い溶解性を示した（０．１％）。アルコール溶液を水に加えたとき、安定なコロイド性混合物が形成された。

実施例２ 化合物（１）（３，４−メチレンジオキシ−β−メチル−β−ニトロスチレン）の製造方法
上記実施例１に記載の方法１を用いて、化合物（１）を製造した。反応スキームを下に示す。

テトラニトロメタン（１ｍｏｌｅ）９．８ｇとアセトン１０ｃｍ^３の混合物を氷冷し、アセトン２０ｃｍ^３に溶解した蒸留イソサフロール（１ｍｏｌｅ）８．１ｇとピリジン（１．２ｍｏｌｅ）４．８ｇに滴下した。正に最初の滴下によって、反応混合物は黒ずみ、テトラニトロメタンを全部加えたとき、液体は不透明で、暗赤色になった。テトラニトロメタンの臭いは急速に消失し、約２時間で、透明になった暗赤色溶液を、ストッパーのついた瓶中の水１００ｃｍ^３に注いだ。混合物を徹底的に振盪し、エーテル層で覆い、苛性カリウム（１．０３ｍｏｌｅ）の３３％溶液６．７ｃｍ^３と水５０ｃｍ^３の混合物を、少しずつ加えた。各添加後、混合物を振盪し、アルカリの全量を加えるたら、暗赤色油として存在するピリジンとニトロホルムの全塩が消失するまで、振盪を続けた。次いで、水層を分離し、エーテルで再び抽出した。一緒にしたエーテル抽出物を水で最初に濯ぎ、次いで、硫酸で酸性化した水で濯ぎ、最後に再び純水で濯いだ。エーテルの真空蒸留後、β−ニトロイソサフロールの沈殿物が黄色針状結晶の形態で見出すことができ、それを、アルコール約６５ｃｍ^３から再結晶した。融点９８℃、収量７ｇで、化合物（１）が得られた。溶媒を蒸発させると、別の０．５ｇの化合物（１）が得られた。全生成物は、理論収量の７２．５％に達した。

実施例３ 化合物（１）（３，４−メチレンジオキシ−β−メチル−β−ニトロスチレン）の別の製造方法
上記実施例１に記載の方法２を用いて、化合物（１）を製造した。反応スキームを下に示す。

９００ｇｍピペロナールを１０００ｃｃアルコールに、一定の振盪を行いながら溶解し、４５０ｍｌニトロエタンをゆっくりと、次いで１０ｍｌエチルジアミンを加えた。
１７時間撹拌後、混合物を、室温で５〜７日間、暗所に置いた。生じた黄色結晶を、乾燥するまでブフナー漏斗で濾過し、次いで、１５０ｍｌアルコールで２回洗浄した。これにより、融点９５℃の化合物（１）１２００ｇｍが得られた。エタノールからの更なる結晶化後、融点９８℃の明黄色結晶１０００ｇｍが得られた（収率約８０％）。

分子式 Ｃ_１０Ｈ_９ＮＯ_４、分子量−２０７．０５
物理的及び化学的特徴
状態の形態 黄色結晶
溶解性プロフィール ＜エタノール、アセトン、ベンゼン、メタノール、
アセトニトリル、クロロホルム、ＤＭＳＯに可溶
−水に殆ど不溶
融点 ９４〜９８℃（５０％エタノールから結晶化した
とき、生成物は、９６〜９８℃を有した）
ｐＨ（５０％ｖ／ｖエタノール中） ほぼ中性
比旋光度 光学的に不活性だが、２種の立体異性体を有する
安定性 ２００℃超で黒ずみ始める
純度 ＭＳは、主要不純物である分子量３０３．４と
３３１．４の不純物を示す。

ＩＲスペクトル
１．芳香環−３０００超の波数及び付随の芳香族１４７０〜１６３０領域
２．β−メチルスチレン−スチレン上の更なる基１４４２脂肪族−Ｃ−＋９００〜１０００ピーク
３．低波数のニトロ基、例えば、７４７、６７３及びβ−ニトロスチレンは１５２０を有する。
４．芳香族エーテル基−１３１２、（１２５８）、１１３８、１０３０
それにもかかわらず、この化合物のフィンガープリントは、ＩＲスペクトル（ｑ．ｖ．）によって提供される。これは、夾雑物によるピークを減少させるために、再結晶化物質で行われた。
ＩＲスペクトル
分子量３０３．４及び３３１．４の不純物
主要種の分子量の確認 ２０７．１

ＮＭＲスペクトル
−水素ＮＭＲ（２００ＭＨｚ）は以下を示す：
３個の残存Ｈを有する芳香環、ＣＨ_３の一部として３Ｈ、側鎖に結合した別のもの、及び別の環の一部として２Ｈ；
−炭素ＮＭＲ（５０ＭＨｚ）は以下を示す：
−ＣＨ_３、ＣＨ−、−ＣＨ_２（メチレンジオキシとして）
−化学シフトの値は、与えられた構造と、使用した合成に好まれる、Ｚ−立体異性体よりもＥ−立体異性体の可能性を支持する。強い求引基（ＮＯ_２）が示される。
ＵＶ／可視スペクトル
再結晶化物質は、２５０〜２７０ｍｍと３６０〜３７０ｍｍでピーク（幅広）を有し、２１０ｍｍ未満で高い吸収を有する。

実施例４ 化合物（２）の製造方法
上記実施例１に記載の方法２を用いて、化合物（２）を製造した。反応スキームを下に示す。

新鮮蒸留のエチレンジアミンＮＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２を触媒として用い、３，４−メチレンジオキシベンズアルデヒドをニトロメタンと縮合させた。反応は、アルコール中、暗所、室温で５日間行った。生じた結晶を濾過で分離し、冷アルコールで洗浄した。風乾後、収率は８０％、融点１５８〜１５９℃、及び再結晶後、融点は１６２〜１６３℃であった。化合物（２）は非水溶性で、アセトン、アルコール、酢酸、及び有機溶媒の大部分に可溶であった。

実施例５ 抗細菌活性
本明細書記載の実験では、「軍医学アカデミー微生物部門博物館（ｔｈｅ ｍｕｓｅｕｍ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ｃｈａｉｒ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｃａｄｅｍｙ）」から得た病原体の博物館株（指標「Ｍ」と命名）、及び患者から採取し、たった３回の実験室継代を行った、病理学材料から選択された株（指標「Ｂ」と命名）を使用した。病原体の各タイプに関し、対応する最適な栄養培地を用いた。含浸法（ｉｍｐｒｅｇｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ）に関し、化合物（１）と（２）を、０．０３〜２．０％の用量で固体栄養培地に加えた。抗生物質への感受性を測定する標準的方法と類似した寒天拡散アッセイを用いた。

寒天拡散アッセイは、以下のように行った。
肉ペプトン寒天を調製し、０．０１〜２．０％の濃度で試験化合物を含ませた。培地をペトリ皿に注ぎ、固まらせた。１０ｍｍ径の寒天プラグを切り出し、調べる微生物を植菌した直後、同じ培地を含むペトリ皿の表面に置いた（１培養当たり少なくとも６個のプラグ）。３７℃のインキュベーション１日後、プラグの周りの培養物発育阻止ゾーンの直径を測定した。結果は、抗生物質に対する感受性の試験の公式標準に従って評価した。２０ｍｍ以下の直径は、安定培養に対応し、２１〜２８ｍｍは中程度安定、２９ｍｍ以上は感受性に対応した。
これと並行して、１５種の抗生物質への病原体の感受性を、新規医薬物質及び医薬技術の導入のためのロシア管理機関の公式プロトコルに従い試験した（ディスク法）。

性能の可能性のある全体幅を評価するために、幾つかの病原体のタイプと株を用いて、試験物質に対する株とタイプの感受性の限界を示した。
下記の表１は、濃度１．０％の化合物（１）での実験の結果（ここでは、化合物（１）は、５×１０^５〜５×１０^７生物／ｍＬの増殖を抑制した）、及び以下の１５種の抗生物質を用いた感受性実験の比較結果を示す。
１−ペニシリン、
２−アンピシリン、
３−ゲンタマイシン、
４−カルベニシリン、
５−カナマイシン、
６−リンコマイシン、
７−リボミセチン、
８−オキサシリン、
９−ポリミキシン、
１０−リファンピシン、
１１−リストマイシン、
１２−ストレプトマイシン、
１３−テトラサイクリン、
１４−エリスロマイシン、
１５−セファロスポリン。

注：
＋ 感受性株
± 中程度に感受性の株
− 安定株

下記の表２は、上記寒天拡散法を用いた、化合物（１）に対する幾つかの微生物の感受
性に関する実験の結果を示す。

注：
♯ 感受性
＋ 中程度に感受性
− 安定

表３は、化合物（１）に対する病原性真菌の感受性の実験の結果を示す。

実施例６ 抗微生物試験
寒天拡散法を用いて、化合物（１）の抗微生物活性を試験した。
化合物の非常に低い溶解性のために、研究は、液相で行うことはできなかった。このために、試験化合物０．５％を含有する最初の母含有物（ｉｍｐｒｅｇｎａｔｅ）を、肉ペプトン寒天上で調製した。水浴中で液体状態で再生されたこの母含有物から、二段階希釈物を、寒天基剤の添加によって調製した。このようにして得られた、０．５％、０．２５％、０．１２％、０．０６％、０．０３％、０．０１５％の濃度の化合物を含む希釈物をペトリ皿中に注ぎ、その上に６種の細菌と２種の真菌の試験培養物を植菌した。

以下の試験培養物を用いた：
１）Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ株６７４、患者から単離され、ゲンタミシン、オキサシリン、テトラサイクリン、エリスロマイシン、セファロスポリンに感受性、ストレプトマイシンに僅かに感受性。
２）Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ博物館株、アンピシリン、リファンピシン、ストレプトマイシンに感受性。
３）Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ株３１２、患者から単離され、ゲンタマイシンとポリミキシンに感受性。
４）Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ博物館株７２７、アンピシリン、ゲンタマイシン、カルベニシリン、カナミシリン、ポリミキシン、セファロチンに感受性。５）Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ株６８１、患者から単離され、ポリミキシンに僅かに感受性。
６）Ｐｓｅｕｄｏｎｏｍａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ株３２８、患者から単離され、ポリミキシンに僅かに感受性。
７）Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｉｎｔｅｒｄｉｇｉｔａｌｅ
８）Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ

８種の試験培養物の各々を、ペトリ皿中の滅菌肉ペプトン寒天に播き、次いで、濃度０．５％で９種の化合物の１つを含ませた寒天の標準プラグを、寒天表面上に置いた。３７℃で２４時間と４８時間の生育後、プラグの周りの阻止ゾーンを測定した。真菌培養物に関しては、３０℃でインキュベーション７〜１０日後、結果を評価した。
含有寒天上の化合物の作用の結果を表４に要約する。

下記の表５は、寒天拡散実験の結果を示す。

等濃度で、化合物（１）は、アンピシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓの増殖と、この抗生物質に感受性であるＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓの増殖を阻止する。他の病原体と他の製剤では、同様の差異が観察できる。

化合物（１）の抗ＴＢ効果
１０％正常ウマ血清を含む合成液体培地（ＳＯＴＯＮ）中で、二段階希釈の標準的方法によって、抗ＴＢ効果を調べた。溶液は、ツウィーン８０中で調製した。
試験培養物は、抗ＴＢ薬剤に感受性のＭｙｃｏｂａｃｔ ｔｕｂ． Ｈ． ３７ＲＶであった。
マイコバクテリア懸濁液（密度５×１０^７細胞／ｍｌ）を、特殊な液体培地（Ｖｉｓｃｈｎｅｖｓｋｙ， Ｂ． Ｉ．）上に播種した。
結果は、３７℃での１０〜１４日インキュベーションで計算した。ＭＩＣ（Ｍ． ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓの完全阻害）。
結果を、下記の表６に示す。

化合物（１）のみが、エタンブトール／イソニアジドのＭＩＣに近いＭＩＣを有した。

実施例７ 抗プロトゾア活性
トリコモナスに対する化合物（１）と（２）の効果も調べた。患者から単離したＴｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓを用いた。トリコモナスは、５．０％ネイティブウシ胎仔血清、炭水化物、付随するフローラを抑制する抗生物質を含有する培地１９９で、ｐＨ５．８〜６．５、３７℃で培養した。培養管中の培地表面にワセリンを塗布した。実験標本は、濃度０．３％で試験化合物を含んでいた。
１．０ｃｍ^３中５〜８細胞の量で、運動性形態の該寄生虫を含む７個の標本を調べた。対照では、寄生虫は、３〜４継代で培養するのが成功した（各継代５〜６日）。対照的に、試験化合物を含む培地での運動性形態の培養は、全ての場合に不成功であった。試験化合物の存在下での唯一の継代後、運動性形態は増殖しなかった。

実施例８ インビボの抗細菌活性
該物質の治療及び予防効果を、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓで腹腔内又は鼻腔内感染させたマウスのインビボ実験で測定した。
感染日から異なる期間で、即ち、感染前２日と１日（スケジュール２、１）、感染日（スケジュール０）、感染後１日、２日、３日など（スケジュール＋１、＋２、＋３など）で、＜２０％ＬＤ_５０／０．２の投与量で、化合物（１）と（２）を、腹腔内、筋肉内、経口で投与した。
毎日の死亡率を測定し、累積の偏差を計算し、これに基づき、製剤の性能の結果を式
ＡＩ＝［（Ｂ−Ａ）／Ｂ］×１００
（式中、ＡＩ＝製剤の活性指標（％）、Ａ＝実験群での累積死亡率、Ｂ＝対照群での累積死亡率）
によって決定した。

結果は、下記の表７に示され、試験した化合物（１）と（２）は、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓを感染させたマウスで治療及び予防活性を示したことを示している。
筋肉内投与に関し、動物の減少死亡率の形態での臨床的予防性能は、５２．５３％であった。サルモネラ症の臨床性能は、５０．０〜２０．０％の限界内で変動した。ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに関し、予防性能は、５０．０％であった。

実施例９ 放射線保護活性
調べた化合物（１）及び（２）の放射線保護性能を、体重１８〜２０ｇの雄性白マウスで試験した。
投与量：２，４，６，８，１０，１５，２０Ｇｒ（１ｈＲ＝１００レントゲン）
観察期間＝２５日間
報告手段：動的死亡率、累積死亡率及び投与量実質変化（ＦＣＤ）
導入スケジュール：５０ｍｇ／ｋｇを０．２ｍＬで、マウスに。
群１：対照
群２：放射まで１及び２日
表８は調べた化合物の放射性能に対する実験の結果を示す。

注：
^＊１ｈＲ＝１００レントゲン

結果は、すべての放射量に対し、試験化合物の予防的投与は対照群と比較して放射を受けた動物の死亡率をかなり下げた。ＦＣＤ（ＬＤ_５０対照）＝１．３９〜１．４３、これは示した化合物の高い放射線保護効果を示しており、その性能は今までに報告されている媒体に劣らない。

実施例１０ 感染した創傷の治療
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ及びＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓによって感染した皮膚創傷を患っているヒトボランティアを、ワセリン、ヒツジ脂及びスルホキシドの軟膏ベース中０．１％の化合物（１）及び（２）で治療した。０．１％軟膏を３日間塗布すると、創傷は膿が完全になくなり、次いで創傷は治癒した。
３症例で真菌感染によって引き起こされた皮膚の広範囲損傷を治療した。真菌の種類は特定しなかった。損傷した領域に０．１％軟膏を、１日２回塗りつけた。皮膚は１週間以内に真菌増殖がなくなった。

実施例１１ 薬物動態学
本発明の化合物の薬物動態学は詳細には調べられていないが、腹腔内に及び胃内に化合物（１）及び（２）を投与したマウスで行った実験において、化合物は２４時間超血液中にて生物学的に活性な濃度のままであることが証明された。

実施例１２ 毒物学
胃内に投与した場合のマウスの平均的致死用量は１５００ｍｇ／ｋｇ体重であり、腹腔内に投与した場合の平均致死用量は５７５ｍｇ／ｋｇ体重であった。よって、本発明の化合物は毒性が低い。

実施例１３ 化合物（１）の抗微生物活性及び溶解度
化合物（１）は水に比較的不溶であるが、１ｍｇ／ｍＬ（０．１％）で１０％ＤＭＳＯに、２ｍｇ／ｍＬで１０％エタノールに及び２ｍｇ／ｍＬで１０％アセトンに可溶である。
検査可能な一番高い濃度は５％溶媒の５１２μｇ／ｍＬ、又は２．５％溶媒の２５６μｇ／ｍＬである。特別な化学中和は必要なく、希釈は殺微生物試験において残りの活性を中和させるのに十分である。
試験株に対し一番毒性が低いので、ＤＭＳＯを試験のための溶媒として選んだ。
エタノール中に処方すると、化合物（１）はＥ．ｃｏｌｉに対して少なくとも８倍活性が大きく、＞５１２μｇ／ｍＬ（２．５％ＤＭＳＯ）と比較して１２８μｇ／ｍＬ（０．０６％ＥＴＯＨ）のＭＩＣを示した。エタノールはＥ．ｃｏｌｉに対し２．５％より高い濃度で有毒である。

実施例１４ 化合物（１）の抗細菌活性
ＮＣＣＬＳ−ＵＳＡ標準方法−ブロス微量希釈法（又は多量希釈）（ミュラー−ヒントン）
播種１〜４×１０^４ｃｆｕ（又は−４×１０^５ｃｆｕ）
シプロフロキサシン試験対照。クロルヘキシジン値を殺菌及び消毒活性比較のために加えた。
３５℃、２４時間、好気性における３ログ減少（９９．９％殺菌）としての最小阻止濃度（ＭＩＣ）及び最小殺菌濃度（ＭＢＣ）は（他に記載がない場合）。４８時間力価は有意には異ならなかった。
結果を表９に示す。

結果のまとめ
化合物（１）は、グラム陽性及びグラム陰性細菌の代表的な選択物に対しインビトロで許容できる濃度範囲内の殺菌活性を有する、比較的広いスペクトルの抗菌剤である。化合物（１）は、好気性グラム陽性及びグラム陰性球菌並びに臨床的に重要なグラム陽性桿菌に対して広く効果がある。

耐性グラム陽性球菌での感染
Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＥ．ｆａｅｃａｌｉｓの臨床単離物（多剤耐性）は標準株と同じくらい感受性があった。現在の治療薬と比較すると、低濃度では活性ではないが、現在の選択薬に反応しない多剤耐性のブドウ球菌及び腸球菌の治療として化合物（１）を利用できる可能性はありうる。

嫌気性感染
化合物（１）は臨床的に重要な嫌気性菌、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓに対して活性がある。Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅは入院患者に全腸炎をもたらし、選択薬として現在バンコマイシンで治療されている。耐性の誘発が、バンコマイシンの潜在的な問題である。バンコマイシンの代替品として、Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ全腸炎のための経口薬剤の需要がありうる。
嫌気性感染は一般的に、１つ以上の通性菌を伴った嫌気性菌（通常は腸のグラム陰性桿菌）の混合感染である。もっとも一般的な嫌気性病原体はＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓである。その他の抗細菌
薬と組み合わせたメトロニダゾールでの現在の治療は一般的に有効である。化合物（１）の好気性及び嫌気性細菌両方に対する広いスペクトルを考慮すると、これは、これらの感染を治療することができる可能性がある。

腸感染
化合物（１）はＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｊｅｊｕｎｉに対して非常に活性である。Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ現在世界中で腸感染の最も大きな原因であり、一部の患者の重症度や、感染がギラン・バレー症候群（重度のＣＮＳ疾患）を生じさせやすくさせる傾向のためにしばしば治療されている。
腸グラム陰性細菌の相対耐性は、溶解性及び化合物（１）の細胞へ浸透力の関数でありうる。動物における困難な腸管感染の治療の成功及びＳａｌｍｏｎｅｌｌａ感染の治療の成功が示されている。

外陰膣炎
化合物（１）はＮｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅに対して活性である。外陰膣炎は、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｎ．ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ及びＴｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓによって引き起こされる（個々にであって、同時感染ではない）。化合物（１）はこれらの剤の２つに対して活性である。
化合物（１）の溶解性をより大きくすると（そして、それによっておそらく吸収も大きくなる）、インビボでのその活性と分布の両方が改善されるであろう。

実施例１５ 化合物（１）の抗真菌活性
ＮＣＣＬＳ−ＵＳＡブロス多量希釈法（ＲＰＭＩ培地）。
播種約５×１０^４菌糸断片／ｍＬ（血球計算器）。ミコナゾール対照。
最小阻止濃度（ＭＩＣ）及び最小殺真菌濃度（ＭＦＣ、２ログ減少−９９％殺菌）、３０℃、好気性、酵母菌は２、７及び１０日並びに糸状菌は４、７及び１４日。
結果を表１０に示す。

結果のまとめ
化合物（１）は、臨床的に重要な酵母及び糸状菌の幅広い範囲に対して比較的低濃度にて殺真菌性である（表１０）。

皮膚糸状菌感染
化合物（１）は、ヒトや動物における皮膚、髪及び爪の感染の３つの主な原因に対して優れた活性を示す。表層の真菌感染は、世界中でもっとも一般的な真菌感染である。治療
は長く、何ヶ月もかかる（爪の感染だと何年もかかる）。抗真菌ローション及びクリームによる表層治療は部分的にしか有効ではない。コストは一般的に低いが、現在の治療は効率が悪く、再発する可能性もしばしばある。経口全身性薬剤（テルビナフィン及びイトラコナゾール）は易感染性患者の表層感染及び爪の感染に好ましい。

全身性感染
易感染性患者における重度の真菌感染が、罹患率の点でも重症度の点でも世界中で増加している。真菌感染は一般的に、高い治療失敗率、頻繁な再発及び真菌による耐性力の発生を伴い、長期にわたるものである。カンジダ症（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）及びアスペルギルス症（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｉｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）は主要な真菌感染である。重度の侵入性感染は、高い死亡率である。有効な薬剤はほとんどない（抗細菌薬剤と比較して）。長期治療が、安全性と、耐性を誘発する不具合を重要な事柄にしている。アムホテリシンＢはたくさんの重度の真菌症にとって主な選択薬である。それは殺真菌性だが、溶解性及びバイオアベイラビリティーが低く、毒性と送達の問題、並びに高い治療失敗率によって制限されている。アゾール類及びトリアゾール類は低い毒性と優れた薬物動態学的性質を有する静真菌剤であるが、長期の治療では耐性が生じるためしばしば効果がない。
化合物（１）は広いスペクトルを有し、殺真菌性で、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ及びＡ．ｆｕｍｉｇａｔｕｓにて耐性を誘発しなかった。（以下、参照）

実施例１６ 化合物（１）の殺胞子活性
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ内生胞子
Ａｓｏｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ無性外生胞子
水＋ツイーン２０中の化合物（１）を２４時間まで殺胞子活性について試験した。
化合物（１）５１２μｇ／ｍＬはＢ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ内生胞子を２４時間以内に殺さなかった。
化合物（１）５１２μｇ／ｍＬはＡ．ｆｕｍｉｇａｔｕｓ無性外生胞子を２４時間で殺したが、６時間では殺さなかった。
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ胞子の吸引が、主な伝染機構である。胞子に対する活性は、易感染性個体の予防に有意である可能性がある。しかしながら、胞子は感染するためには発芽しなければならないため、最終的には有効性を決めるのは真菌の栄養型に対する活性である。

実施例１７ 化合物（１）の耐性の発生
細菌及び真菌株を、１２週間連続で亜阻止濃度にて化合物（１）にさらし、耐性機構の発生を示すＭＩＣにおける上昇をモニターした。重く可変の接種株を週ごとの継代培養に使用し、各週の阻止濃度が変わるようにする。標準化したＭＩＣを暴露の前と後で測定する。標準化ＭＩＣの４倍より大きな変化は、耐性の増大を示すか、又は週ごとのＭＩＣの上昇傾向を示している。選択された属は、多くの抗生物質に対し容易に耐性を発生させ、主な臨床上の問題となっていることで知られている。
たくさんの現在の薬剤に耐性を発生することが知られている、細菌種及びＣ．ａｌｂｉｃａｎｓは、１２週間連続で暴露した後でも化合物（１）に対して耐性を生じなかった（表１１）。異常な顕微鏡的、肉眼的変化について株を調べた。Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓは群がる能力を失い、これは鞭毛に対する影響を示している。その他の株は正常に見えた。Ｒ．ｒｕｂｒａと３つのかびについてはまだ試験は終わっていない。これらの株における耐性の発生がなかったということは、化合物（１）の有意な特性である。

実施例１８ 血液存在下での化合物（１）の抗細菌活性
化合物（１）及びシプロフロキサシンの活性を、血漿及び全血（ウマ）の存在下で、ミュラー・ヒントンブロスにおける４８時間までの多量希釈法によって測定した。
化合物（１）は、１０％血漿の存在には比較的影響を受けず、５％全血存在下ではより活性であるように見えた。血液存在下におけるわずかな阻止活性の改善は、時々抗細菌剤で生じ、おそらく血液中に存在する自然の抗細菌因子によるものである。表１３に示したように、さらに血漿及び血液の濃度を増やすと、化合物（１）のＳ．ａｕｒｅｕｓに対する殺細菌活性は減少した。シプロフロキサシンはそれぞれ１０％血漿及び全血の存在下で、Ｓ ａｕｒｅｕｓに対する活性を４倍、及び２倍の減少を示した。

実施例１９ 血漿タンパクに結合する化合物（１）
化合物（１）のＭＩＣを増加濃度の血漿において測定した。化合物（１）はヒト血清アルブミン及びアガロースに結合することが示された。血清に結合することは、薬剤の分布及びバイオアベイラビリティーにおいて重要である。
化合物（１）のＭＩＣは、血漿濃度の上昇にともない著しく上昇する。殺細菌活性は阻止活性よりはるかに大きく影響を受ける。
化合物（１）のバイオアベイラビリティーは、血漿タンパク存在下で著しく減少する（表１３）。化合物（１）は可逆的にタンパク質と結合する。

実施例２０ 殺菌率
試験株を化合物（１）の水溶液中に播種し、即刻、並びに１、２、４、６及び９時間でサンプリングした。生存菌をＭＨＡ（３５℃、４８時間）での生存可能数で概算した。
殺菌の測定：ログ減少因数として表した生存可能数（ログ）の減少は。（例えば、Ｉログ減少＝９０％殺菌、２ログ＝９９％殺菌、３ログ＝９９．９９％殺菌など）
化合物（１）はＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓに対してのみ迅速な殺菌を示し、図１に示したように、５１２μｇ／ｍＬで２時間以内及び２５６μｇ／ｍＬで４時間以内に、９９．９９９％超の減少であった。
殺菌率は細菌に対して、ずっとよりゆっくりであった。５１２μｇ／ｍＬでの殺菌率はＢ．ｓｕｂｔｉｌｉｓに対し２時間以内で９９．９９％、Ｓ．ａｕｒｅｕｓに対し９時間以内で９９．９９％であった。
シプロフロキサシンは、試験しなかった。

実施例２１ ラットにおける化合物（１）の投与範囲試験
この実施例の目的は、１回量を経口で投与した後のラットにおける化合物（１）の吸収と血中レベルを明らかにすることであった。

試験プロトコール
Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（６週齢、２００１年１月３０日生）を動物施設にて標準化環境条件（２２℃±３℃、相対湿度３０〜７０％、人工灯、１２時間明／１２時間暗）下で６日間馴化させた。ラットには従来の研究用の食餌と水を随意に与え、１つのケージに５匹ずつ入れた。

試験物質
化合物（１）を滅菌ＬＰＷ中の水性懸濁液として調製した。高濃度にて懸濁液に超音波をかけ、栄養補給針を十分に通過できるよう粒子サイズを小さくした。
化合物（１）を、１２５０、１０００、５００及び１００ｍｇ／ｋｇにて試験した。

試験方法
ラットをランダムに治療群に割り当て、尻尾に番号を打って識別できるようにした。投与量は一番低いものから順に試験した。
群 Ａ １００ｍｇ／ｋｇ ５／２／０１
Ｂ ５００ ８／２／０１（絶食してない）
Ｃ ５００ １２／２／０１（絶食した）
Ｄ １０００ １４／２／０１
Ｅ １２５０ ２１／２／０１
化合物（１）懸濁液及び水対照を約１００ｍＬ／ｋｇ体重で、単回投与した。１つの対照と５つの治療のラットはそれぞれの投与の直前に体重を量り、投与容量を計算し、投与を強制飼養により行った（２２ゲージステンレス鋼、シリンジに滑らかな丸い先端がつけられたもの）。
約１００〜２００μＬの血液（微量遠心管）を、４時間と８時間で尾から取った。尾は熱ランプを用いて事前に暖め、大きなメスで先端を切り取った。血液を微量遠心管へ入れた。２４時間血液サンプルは、傷ついた尾を切り取るのは難しく、さらにラットへ苦痛を引き起こすため、行わなかった。
血液を凝固させ、微量遠心管にて３分間遠心分離にかけ（スピード１４）、血清を分離して−２０℃で保存した。
動物を７日間、１日に２回観察し、個々の動物に対して個別に全ての観察を記録した。動物の体重は最初の測定後は量っていない。７日後に供死し、検死を行った。
動物は二酸化炭素で安楽死させた。
全体の症状を記録し、心臓、肺、肝臓、腎臓、胃、脾臓、十二指腸及び結腸のサンプルを組織学のため取り出した（１０％ホルマリン）。

実施例２２ 化合物（１）の血中レベル
バイオアッセイ
化合物（１）の血中レベルのためのバイオアッセイは、化合物（１）が血液タンパク質及び寒天に強く結合するのが障害となり、不可能であった。

寒天拡散法
化合物（１）の寒天拡散アッセイは、化合物（１）が寒天に強く結合し、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ又はＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓの感受性株Ｄｅｈａ１〜５１２μｇ／ｍＬの間のどの濃度においても阻害ゾーンが形成されなかったため、不可能であった。ウェル拡散及びディスク拡散アッセイの両方を試みた。

ブロス希釈
ＭＨＢへの血清の希釈及びＳ．ｐｙｏｇｅｎｅｓでの低播種量での試験（ＭＨＢ中の化合物（１）、１μｇ／ｍＬにおいて阻害）は、高濃度での血漿への強い結合が大きなプロゾーンを引き起こしたために不可能であった。

ＵＶ分光法によるアッセイ
個々のラットサンプルのアッセイのための血清は不足していた。
よって治療群及び対照のためのサンプルをプールし、それぞれの治療群のについて化合物（１）の平均レベルを測定した。

試験方法
化合物（１）をトルエンによって血清から抽出し（２回）、吸光度を３７０ｎｍで測定した（日立Ｕ２０００）。５０％メタノール／水（Ｖ／Ｖ）中の１００μｇ／ｍＬの化合物（１）を用いスパイクした対照及び未処理の対照もアッセイした。

血中レベル
消化管からの化合物（１）の吸収は非常に低く、血中に達するのは経口投与量の約２％である。血中レベルは投与レベルに伴い上昇した。８時間でのレベルは概して４時間でのレベルより高かった。４時間と８時間の差が小さいということは、吸収が遅いということを示している。

実施例２３ 化合物（１）の抗細菌活性スペクトル
抗真菌活性
糸状菌
ＮＣＣＬＳ−ＵＳＡブロス多量希釈法（ＲＰＭＩ培地）−ドラフト。播種量１〜４×１０^５ｃｆｕ。ミコナゾール対照。この試験を初期活性スペクトル評価のために用いた。
前にＮＣＣＬＳ−ＵＳＡブロス多量希釈法で試験した糸状菌のＭＩＣ及びＭＦＣを、糸状菌Ｍ３８−Ｐ ＮＣＣＬＳ−ＵＳＡを試験するために新しく提案された標準微量希釈法を用いて繰り返した。
結果は異なる日における２又は３回の重複測定のものである。
結果は、以前試験された全ての糸状菌の古い方法によって得られた結果と大して変わら
なかった。アムホテリシンＢをいくつかの試験の対照として、ミコナゾールの代わりに用いた。

酵母
酵母のブロス多量希釈抗真菌感受性試験のためのＮＣＣＬＳ−Ｍ２７−Ａ法、認可された標準法。
糸状菌のためのＭ３８−Ｐ微量希釈法も用いた。
３５℃、４８時間における最小阻止濃度（ＭＩＣ）及び最小殺真菌濃度（ＭＦＣ−２ログ減少−９９％殺菌）。それぞれの方法の異なる日における２又は３回の重複測定から結果をとった。結果は２つの方法では大した差はなかった。Ｍ３８Ｐは酵母及び糸状菌についてのみ報告した。

細菌
方法
ＮＣＣＬＳ−Ｍ７−Ａ５標準方法−ブロス微量希釈法（ミュラー−ヒントン）。播種量１〜４×１０^４ｃｆｕ。シプロフロキサシン試験対照。殺菌及び消毒活性比較のためクロルヘキシジン及びセチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）。
ＮＣＣＬＳ−Ｍ７−Ａ５標準方法−多量希釈法（ミュラー−ヒントン±特定の濃縮）も用いた。３５℃、２４時間、好気的で、最小阻止濃度（ＭＩＣ）及び３ログ減少（９９．９％殺菌）としての最小殺細菌濃度（ＭＢＣ）。４８時間力価は大した変化なく、報告していない。微量及び多量希釈法では顕著に異なるＭＩＣ／ＭＭＣは得られなかった。

カンピロバクター
化合物（１）をヒトから分離したＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｐ．の様々な臨床株について試験した。

カンピロバクターは世界中でもっとも一般的な胃腸炎感染の原因である（血液を伴った下痢、腹痛、嘔吐、頭痛、熱、約１週間続く）。続発症は関節炎及びギラン・バレー症候群（０．１％）である。主に鶏肉を食べることで感染する。発生はアメリカ合衆国において年間約２５０万人である。Ｃ．ｊｅｊｕｎｉがその９９％を占める。症状の重さは亜臨床的なものから易感染性患者における重度のものまでさまざまでありうる。補液以外の治
療は一般的になされないが、病気が重度で生命を脅かす場合には抗生物質を使う（エリスロマイシン、テトラサイクリン及びフルオロキノロン）。

上記は重要なヒト病原菌で、これらすべてにおいて抗生物質による治療レジメンが成功している。Ｎ．ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅは女性の膣炎の原因となる。したがって、化合物（１）は低い濃度で２つの原因、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ及びＮ．ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅに対して活性がある。

Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓ
方法
Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓの臨床単離物のＭＩＣを、Ｇａｒｃｉａ，Ｌ．によって記されたようにＫｌａｓｓで改変したＤｉａｍｏｎｄ完全培地（改変ＴＹＭ）において、多量ブロス希釈法により測定した。培養物を５ｍＬグラス（空気のスペースのないスクリューキャップしたビン）に入れた。ログ２希釈物５ｍＬ容量（改変ＴＹＭ中、５％ＤＭＳＯ中における５１２μｇ／ｍＬの化合物（１）から０．００２％ＤＭＳＯ中における０．２５μｇ／ｍＬの化合物（１）まで）に、対数増殖期の細胞５ｍＬを播種し、最終播種濃度を１×１０^４から３×１０^４細胞／ｍＬにした。運動性の顕微鏡観察の前に、ビンを３７℃にて２４時間好気培養した。ＭＩＣを、運動性を示さない最も低い濃度として測定した。運動性を示さない全ての管からの０．５ｍＬのアリコートをさらに５ｍＬ容量の改変ＴＹＭに継代培養し、３７℃にて５日間まで好気培養し、非生存を確認した。
試験はＴＹＭ（２．５％ＤＭＳＯを含む改変ＴＹＭ及び５％ＤＭＳＯを含む改変ＴＹＭ）において増殖コントロールによって確認した。
試験は異なった日において３回の重複測定で行った。
結果

実施例２４ 化合物（１）に対する耐性の発生
１２週間の耐性試験より選択された耐性株を、新しい微量希釈法を用いて親株と同時に再試験した。

真菌は４倍までのＭＩＣにおける差を反復試験にて示す。ＭＩＣにおける有意な増加は８倍以上である。
試験した糸状かび株による耐性の有意な発生はない。

実施例２５ エタノール中の製剤が活性に及ぼす影響
ＤＭＳＯ及びエタノール中の製剤が化合物（１）のＭＩＣに及ぼす影響について、多量希釈法及び微量希釈法の両方を用いてＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ及びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉで比較した。
エタノールのストック溶液は使用の前に４８時間置いて、溶解度を高めた。化合物（１）はＤＭＳＯに溶けるほどにはエタノールには溶けない。エタノール及びＤＭＳＯの濃度を２％で一定に保ち、ストック溶液の通常希釈における溶液の減少濃度と比較した。２つの試験法の間に差はなかった。ＤＭＳＯの一定の、及び減少したレベルの間に、ＭＩＣにおける差はなかった。Ｅ．ｃｏｌｉだけが一定の２％エタノールの存在下で、エタノールに対し感受性増大を示した。

エタノールのＥ．ｃｏｌｉに対する相乗的な効果は、薬剤に適した溶媒を選ぶために溶媒を試験した時に既に言及した。エタノールはＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ又はＣａｎｄｉｄａには増大効果は示さない。ＤＭＳＯはインビトロ試験に
おいてこの薬剤により適した溶媒である。エタノールは動物研究に用いられる。

実施例２６ 保存の際の化合物（１）の安定性
水＋５％ＤＭＳＯ中、５１２μｇ／ｍＬの化合物（１）のストック溶液を、室温（ＲＴ約１８〜２１℃）、４℃及び−２０℃で１２週間まで保存し、２週間ごとにＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓに対するＭＩＣを測定することによって効能を試験した。

１ 溶液は８週後に明黄色から暗黄色に変化した。
２ 溶液は２週後に明黄色から暗黄色に変化した。

化合物（１）は非常に安定で、希釈溶液で、４℃及び−２０℃で１２週間保存しても効能を維持する。室温で６週後の効能の２倍の損失は、これも抗生物質の作業溶液と比較すると非常に低い。細菌に対するＭＩＣ測定に関しても許容できる変化の範囲であった（２倍）。対照抗真菌薬については試験しなかった。

実施例２７ インビトロのヒト赤血球における、ヒトマラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）の成長に及ぼす化合物（１）の効果
この実施例の目的は、インビトロのヒト赤血球におけるヒトマラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）の進入及び成長に対する化合物（１）の効果を数値で表すことであった。

方法
マラリア原虫
３Ｄ７は、これらの実験で用いたＰ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍの、よく特徴付けられたインビトロ培養適合した系列である。この寄生虫はヒト赤血球の中で成長と複製のサイクルを繰り返す。それぞれの完全なサイクルの期間は４８時間で、若い環状段階から始まり、サイクルの始めの２４時間中に有色栄養体を経てセグメント化された分裂体になり、急速に赤血球に侵入する感染性の分裂小体を放出する。新しく侵入した分裂小体は環状形態になり、サイクルを繰り返す。

寄生虫培養と成長阻止アッセイ
Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍを、よく確立されている技術を使って、新鮮に集められたヒ
ト赤血球細胞中の同調インビトロ培養で維持した。侵入アッセイでは、段階同調的に成熟した有色栄養体を含む赤血球を精製し、新鮮なヒト赤血球に再懸濁し、１００赤血球毎に約２個寄生させた（２％感染血液）。新鮮な培養培地を加え、最終赤血球濃度を２×１０^８赤血球／ｍｌにした。
試験化合物、ビヒクルのみ（この場合エタノール）又はＰＢＳ（対照）のどちらかを含む赤血球懸濁液のアリコートを、３７℃で酸素を減じた環境（１％酸素、３％二酸化炭素、９６％窒素）でインキュベートした。薄い血液塗付を即座に行い（時間＝０）、次いでそれ以降、培養の２４時間、４８時間及び７２時間後に行った。それぞれの塗付にて、感染血液及び寄生虫の成長段階を、ｐＨ７．２にてギムザで染色した後の顕微鏡観察によって定量した。これによって、侵入、寄生虫の発達及びそれに続く再侵入を数値で表すことができた。それぞれのサンプリング時点にて、すべてのサンプルにおける培養培地（±化合物／ビヒクル）を新鮮な培地と完全に取り替えた。
化合物（１）を、それぞれ１０％エタノールを含む１００、４００及び１０００μｇ／ｍｌの水溶液として試験した。ストック溶液は必要になるまで４℃で保存した。アッセイでは、それぞれの溶液をさらに完全寄生虫培養培地中に１：４０で所望の作業濃度に希釈し（５、１０及び２５μｇ／ｍｌ）、次いで寄生した赤血球懸濁液に加える前に滅菌濾過した（０．２２μｍ）。ストック溶液はアッセイの間中４℃で保存し、必要なときに寄生虫培養培地に適切に希釈した。１０００μｇ／ｍｌでは３７℃に暖め、激しくボルテックスした後でさえ、化合物が完全には溶解しなかったことを留意すべきである。したがって、２５μｇ／ｍｌの推定濃度にて行った試験は、実際には、より低い有効濃度において行えたかもしれない。

結果
寄生虫成長に対する化合物（１）の効果を、５、１０及び２５μｇ／ｍｌの最終濃度で試験した。結果を図２に図解する。寄生虫の成長及び複製に対する濃度依存性の阻害効果が、試験したすべての薬剤濃度で見られ、培養７２時間後の試験した最高濃度（２５μｇ／ｍｌ）で一番大きかった。最終濃度０．２５％のエタノール単独では、寄生虫の成長に対する有意な効果はなかった。全ての濃度の試験した化合物は、赤血球形態に検出可能な悪影響を全く示さなかった。
２５μｇ／ｍＬでは寄生虫は観察されず、１０μｇ／ｍＬではほんの微量しか見つからなかった。これは化合物が実際に寄生虫を殺していることを示している。

明瞭さと理解のために本発明をいくらか詳細に記載してきたが、本明細書にて開示した発明概念の範疇を外れることなく、ここで述べた実施態様や方法に様々な修飾や改変を施してもよいことは、当業者にとっては明らかである。

本明細書で引用した参考文献を以下のページに載せる。この参照により、これらは本明細書に含まれる。
明細書および特許請求の範囲を通じて特に言及がなければ、「含む（含有する）（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」なる用語、および「含む（含有する）（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」又は「含む（含有する）（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」の変形用語は、記載した成分（ｉｎｔｅｇｅｒ）又は成分もしくは工程の集合の包含を意味するものと理解されるべきであり、他の成分又は成分もしくは工程の集合の排除を意味するものではない。

参考文献
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Claims (24)

1. ３，４−メチレンジオキシ−β−メチル−β−ニトロスチレンを含む、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ ｄｉｖｅｒｓｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ、Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ、Ａｌｋａｌｉｇｅｎｅｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｐａｒａｔｙｐｈｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ、及びＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒからなる群から選択される微生物（但し、Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓを除く。）によって引き起こされる感染の治療用の医薬。
2. 感染が全身性感染である、請求項１に記載の医薬。
3. 感染が呼吸器感染である、請求項１に記載の医薬。
4. 感染がＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ ｄｉｖｅｒｓｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ、Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｘｅｒｏｓｉｓ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ、及びＡｌｋａｌｉｇｅｎｅｓからなる群から選択される微生物（但し、Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓを除く。）によって引き起こされる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
5. 微生物がＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬。
6. 微生物がＹｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬。
7. 微生物がＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬。
8. 感染が消化器感染である、請求項１に記載の医薬。
9. 感染がＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｐａｒａｔｙｐｈｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓからなる群から選択される微生物（但し、Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓを除く。）によって引き起こされる、請求項８に記載の医薬。
10. 感染が皮膚又は軟部組織感染である、請求項１に記載の医薬。
11. 感染がＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ、及びＥｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎからなる群から選択される微生物（但し、Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓを除く。）によって引き起こされる、請求項１０に記載の医薬。
12. 他の医薬と組合せた、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の医薬。
13. Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ ｄｉｖｅｒｓｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ、Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ、Ａｌｋａｌｉｇｅｎｅｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｐａｒａｔｙｐｈｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ、及びＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒからなる群から選択される微生物（但し、Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓを除く。）によって引き起こされる感染の治療用の医薬の製造における、３，４−メチレンジオキシ−β−メチル−β−ニトロスチレンの使用。
14. 感染が全身性感染である、請求項１３に記載の使用。
15. 感染が呼吸器感染である、請求項１３に記載の使用。
16. 感染がＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ ｄｉｖｅｒｓｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ、Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｘｅｒｏｓｉｓ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ、及びＡｌｋａｌｉｇｅｎｅｓからなる群から選択される微生物（但し、Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓを除く。）によって引き起こされる、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の使用。
17. 微生物がＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓである、請求項１３〜１６のいずれか１項に記載の使用。
18. 微生物がＹｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである、請求項１３〜１６のいずれか１項に記載の使用。
19. 微生物がＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓである、請求項１３〜１６のいずれか１項に記載の使用。
20. 感染が消化器感染である、請求項１３に記載の使用。
21. 感染がＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｐａｒａｔｙｐｈｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓからなる群から選択される微生物（但し、Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓを除く。）によって引き起こされる、請求項２０に記載の使用。
22. 感染が皮膚又は軟部組織感染である、請求項１３に記載の使用。
23. 感染がＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ、及びＥｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎからなる群から選択される微生物（但し、Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓを除く。）によって引き起こされる、請求項２２に記載の使用。
24. 他の医薬と組合せた、請求項１３〜２３のいずれか１項に記載の使用。