JP5670728B2 - 改良されたポリヒドロキシアルカノエート生産微生物及びそれを用いたポリヒドロキシアルカノエートの製造方法 - Google Patents
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Description
(1)phbA遺伝子の発現が抑制されているか、該遺伝子がコードする酵素の触媒活性が抑制されていること、
(2)bktB遺伝子の発現が強化されているか、該遺伝子がコードする酵素の触媒活性が向上されていること、
(3)ポリヒドロキシアルカノエート合成酵素遺伝子、および/または、クロトニル−CoA還元酵素遺伝子が導入されていること。
<遺伝子挿入用プラスミドベクターの作製>
挿入用DNAとしてA. caviaeのphaCのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAを次のように作製した。A.caviaeのゲノムDNAをテンプレートとして配列番号6および配列番号7で示されるプライマーを用いて、PCRを行った。PCRは(1)98℃で2分、(2)98℃で15秒、60℃で30秒、68℃で20秒を25サイクル繰り返し、ポリメラーゼはKOD−plus−(TOYOBO製)を用いた。PCRで得たDNA断片を末端リン酸化およびEcoRI消化した。このDNA断片をPAc−5P+Ecoとした。
次に、KNK−005AS株を親株としてbAO/pBlu/SacB−Kmを用いてbktB遺伝子の開始コドン直前にphaCのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された菌株を作製した。遺伝子挿入用プラスミドbAO/pBlu/SacB−Kmで大腸菌S17−1株(ATCC47005)を形質転換した。得られた形質転換体をKNK−005AS株とNutrient Agar培地(Difco社製)上で混合培養して接合伝達を行った。250mg/Lのカナマイシンを含むシモンズ寒天培地(クエン酸ナトリウム2g/L、塩化ナトリウム5g/L、硫酸マグネシウム・7水和物0.2g/L、リン酸二水素アンモニウム1g/L、リン酸水素二カリウム1g/L、寒天15g/L、pH6.8)上で生育してきた菌株を選択して、プラスミドがKNK−005AS株の染色体上に組み込まれた株を取得した。この株をNutrient Broth培地(Difco社製)で2世代培養した後、15%のシュークロースを含むNutrient Agar培地上に希釈して塗布し、生育してきた菌株を選択して2回目の組換えが生じた株を取得した。さらにPCRによる解析により所望の遺伝子挿入株を単離した。
<遺伝子挿入用プラスミドベクターの作製>
挿入用DNAとしてC. necatorのphbCのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNA(以下Preとする)を次のように作製した。KNK−005株のゲノムDNAをテンプレートとして配列番号12および配列番号13で示されるプライマーを用いて、PCRを行った。PCRは(1)98℃で2分、(2)98℃で15秒、54℃で30秒、68℃で25秒、を25サイクル繰り返し、ポリメラーゼはKOD−plus−を用いた。PCRで得たDNA断片を末端リン酸化した。このDNA断片をPre−5Pとした。
実施例1の遺伝子置換株の作製方法と同様にして、KNK−005AS株を親株としてbRO/pBlu/SacB−Kmを用いてbktB遺伝子の開始コドン直前にphbCのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された菌株を作製した。このDNA挿入株をPre−bktB/AS株と命名した。塩基配列を決定し、bktB遺伝子の開始コドン直前にphbCのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された株であることを確認した。
<遺伝子挿入用プラスミドベクターの作製>
DNA挿入位置をKNK−005AS株の染色体DNAのbktB遺伝子の開始コドン上流側91塩基目と92塩基目の間、即ちbktB遺伝子の上流に存在するORFの停止コドン直後と設定した。
実施例1の遺伝子挿入株の作製方法と同様にして、KNK−005AS株を親株としてBAB3/pBlu/SacB−Kmを用いてbktB構造遺伝子の開始コドンの上流側にphaPCJのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された菌株を作製した。このDNA挿入株をBAB3/AS株と命名した。塩基配列を決定し、bktB遺伝子の開始コドン上流側91塩基目と92塩基目の間にphaPCJのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された株であることを確認した。
<遺伝子挿入用プラスミドベクターの作製>
DNA挿入位置をKNK−005AS株の染色体DNAのbktB遺伝子の開始コドン上流側65塩基目と66塩基目の間、即ちbktB遺伝子の上流に存在するORFの停止コドンから26塩基下流と設定した。
実施例1の遺伝子挿入株の作製方法と同様にして、KNK−005AS株を親株としてBAB4/pBlu/SacB−Kmを用いてbktB構造遺伝子の開始コドンの上流側にphaPCJのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された菌株を作製した。このDNA挿入株をBAB4/AS株と命名した。塩基配列を決定し、bktB構造遺伝子の開始コドン上流側65塩基目と66塩基目の間にphaPCJのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された株であることを確認した。
<遺伝子挿入用プラスミドベクターの作製>
DNA挿入位置をKNK−005AS株の染色体DNAのbktB遺伝子の開始コドン上流側58塩基目と59塩基目の間、即ちbktB遺伝子の上流に存在するORFの停止コドンから33塩基下流と設定した。
KNK−005株のゲノムDNAを鋳型DNAの供給源として、配列番号17および配列番号22で示されるプライマーを用いてPCRを行い、bktB遺伝子の上流側ORFの塩基配列からなるDNAを得た。PCRは(1)98℃で2分、(2)98℃で15秒、64℃で30秒、68℃で30秒を25サイクル繰り返し、ポリメラーゼはKOD−plus−を用いた。PCRで得たDNA断片を制限酵素MunIで消化した。このDNA断片をmiaB−Mun/5とした。
実施例1の遺伝子挿入株の作製方法と同様にして、KNK−005AS株を親株としてBAB5/pBlu/SacB−Kmを用いてbktB遺伝子の開始コドンの上流側にphaPCJのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された菌株を作製した。このDNA挿入株をBAB5/AS株と命名した。塩基配列を決定し、bktB遺伝子の開始コドン上流側58塩基目と59塩基目の間にphaPCJのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された株であることを確認した。
<遺伝子挿入用プラスミドベクターの作製>
DNA挿入位置をKNK−005AS株の染色体DNAのbktB遺伝子の開始コドン上流側58塩基目と59塩基目の間、即ちbktB遺伝子の上流に存在するORFの停止コドンから33塩基下流と設定した。
実施例1の遺伝子挿入株の作製方法と同様にして、KNK−005AS株を親株としてBRB5/pBlu/SacB−Kmを用いてbktB遺伝子の開始コドンの上流側にphbCのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された菌株を作製した。このDNA挿入株をBRB5/AS株と命名した。塩基配列を決定し、bktB構造遺伝子の開始コドン上流側58塩基目と59塩基目の間にphbCのプロモーターおよびリボソーム結合部位を含む塩基配列からなるDNAが挿入された株であることを確認した。
<ccr遺伝子のクローニング及び発現ユニット構築>
クロトニル−CoAを、3HHモノマーの前駆体であるブチリル−CoAに変換する酵素をコードするccr遺伝子を、ストレプトマイセス・シンナモネンシス(Streptomycescinnamonensis)Okami株(DSM 1042)の染色体DNAからクローニングした。配列番号25及び配列番号26記載のDNAをプライマーとしPCRを行った。その条件は(1)98℃で2分、(2)94℃で10秒、55℃で20秒、68℃で90秒を25サイクル繰り返し、ポリメラーゼはKOD−plus−を用いた。PCRで増幅した断片を精製後、制限酵素BamHI及びAflIIで切断した。EE32d13断片(J.Bacteriol., 179, 4821 (1997))を、pUC19ベクターのEcoRI部位にサブクローニングし、このプラスミドをBglIIとAflIIで切断し、BamHI及びAflII断片としたccr遺伝子と断片を置換することによってccr発現ユニットを構築した。
<phaC遺伝子のクローニング及び発現ユニット調製>
配列番号4を含むphaC発現ユニットをSpeI断片として調製した。特開2007-228894号公報[0031]に記載のHG::PRe−N149S/D171G−T/pBluを鋳型とし、配列番号27と配列番号28に示すプライマーとしてPCRを行った。その条件は(1)98℃で2分、(2)94℃で10秒、55℃で30秒、68℃で2分を25サイクル繰り返し、ポリメラーゼはKOD−plus−を用いた。PCRで増幅した断片を精製後、制限酵素SpeIで切断して発現ユニットを調製した。
<発現ベクターの構築>
発現ベクターpCUP2−631は以下のようにして構築した。
C. necatorにおける発現ベクター構築用のプラスミドベクターとしては、国際公開公報WO/2007/049716号公報[0041]に記載のpCUP2を用いた。まず実施例7で構築したccr遺伝子発現ユニットをEcoRI処理により切り出し、この断片をMunIで切断したpCUP2と連結した。次に実施例8で作製したphaC発現ユニットをSpeI断片として調製し、ccr遺伝子発現ユニットを含むpCUP2のSpeI部位に挿入してpCUP2−631ベクターを構築した。
pCUP2−631ベクターの種々の細胞への導入は以下のように電気導入によって行った。遺伝子導入装置はBiorad社製のジーンパルサーを用い、キュベットは同じくBiorad社製のgap0.2cmを用いた。キュベットに、コンピテント細胞400μlと発現ベクター20μlを注入してパルス装置にセットし、静電容量25μF、電圧1.5kV、抵抗値800Ωの条件で電気パルスをかけた。パルス後、キュベット内の菌液をNutrientBroth培地(DIFCO社製)で30℃、3時間振とう培養し、選択プレート(NutrientAgar培地(DIFCO社製)、カナマイシン100mg/L)で、30℃にて2日間培養して、生育してきた形質転換体を取得した。
作製した種々の形質転換体の培養を行った。前培地の組成は1%(w/v)Meat−extract、1%(w/v)Bacto−Trypton、0.2%(w/v)Yeast−extract、0.9%(w/v)Na2HPO4・12H2O、および、0.15%(w/v)KH2PO4で、pH6.7に調整した。
Claims (9)
- 次の(1)から(4)の要件を備えたCupriavidus necator由来である微生物;
(1)phbA遺伝子の発現が抑制されているか、該遺伝子がコードする酵素の触媒活性が抑制されていること、
(2)bktB遺伝子の発現が強化されているか、該遺伝子がコードする酵素の触媒活性が向上されていること、
(3)配列番号4に示される塩基配列からなるDNAと90%以上の配列同一性を有し、ポリヒドロキシアルカノエート合成活性を有する酵素をコードする遺伝子、または
配列番号4に示される塩基配列からなるDNAと相補的なDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、ポリヒドロキシアルカノエート合成活性を有する酵素をコードする遺伝子が導入され、
前記ポリヒドロキシアルカノエートが3−ヒドロキシ酪酸と3−ヒドロキシヘキサン酸を構成単位に含むポリエステルであること、および
(4)クロトニル−CoA還元酵素遺伝子が導入されていること。 - 次の(1)から(6)の少なくとも一つにより、phbA遺伝子の発現が抑制されているか、該遺伝子がコードする酵素の触媒活性が抑制されている、請求項1記載の微生物;
(1)phbA遺伝子の開始コドンと終止コドンの間に、新たな終止コドンが導入されている、
(2)phbA遺伝子のリボソーム結合部位に、リボソーム結合活性が低下する変異を導入している、
(3)phbA遺伝子内部に、phbA遺伝子がコードする酵素の触媒活性が低下する変異を導入している、
(4)RNA干渉を利用する、
(5)phbA遺伝子内部に、トランスポゾンを挿入している、
(6)phbA遺伝子の一部或いは全部を欠失している。 - bktB遺伝子の上流に、新たにbktB遺伝子の転写を誘発する活性を有するプロモーターが挿入されることにより、bktB遺伝子の発現が強化されている、請求項1記載の微生物。
- 新たに挿入されるプロモーターが、次の(1)または(2)のDNAである、請求項3記載の微生物;
(1)bktB遺伝子の上流に、配列番号1または2に示される塩基配列からなるDNAと90%以上の配列同一性を有し、bktB遺伝子の転写を誘発する活性を有するDNA、
(2)bktB遺伝子の上流に、配列番号1または2に示される塩基配列からなるDNAと相補的なDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、bktB遺伝子の転写を誘発する活性を有するDNA。 - 次の(1)または(2)のクロトニル−CoA還元酵素遺伝子が導入されている、請求項1記載の微生物;
(1)配列番号3に示される塩基配列からなるDNAと90%以上の配列同一性を有し、クロトニル−CoAを還元し、ブチリル−CoAを生成する活性を有する酵素をコードする遺伝子、
(2)配列番号3に示される塩基配列からなるDNAと相補的なDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、クロトニル−CoAを還元し、ブチリル−CoAを生成する活性を有する酵素をコードする遺伝子。 - 遺伝子組換えにより作製した請求項1〜5の何れかに記載の微生物。
- 植物油脂を炭素源として乾燥菌体量150g/L以上でポリマー含量70%以上、且つ3−ヒドロキシヘキサン酸組成比12mol%以上のポリヒドロキシアルカノエートを生産可能な、請求項1〜6の何れかに記載の微生物。
- bktB遺伝子の上流に、次の(1)または(2)のDNAからなるプロモーターが挿入されることにより、bktB遺伝子の発現が強化されている、請求項7記載の微生物;
(1)bktB遺伝子の上流に、配列番号2に示される塩基配列からなるDNAと90%以上の配列同一性を有し、bktB遺伝子の転写を誘発する活性を有するDNA、
(2)bktB遺伝子の上流に、配列番号2に示される塩基配列からなるDNAと相補的なDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、bktB遺伝子の転写を誘発する活性を有するDNA。 - 請求項1〜8の何れかに記載の微生物を、植物油脂を炭素源として培養することを特徴とする3−ヒドロキシヘキサン酸単位含有ポリヒドロキシアルカノエートの製造方法。
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JP5839855B2 (ja) * | 2011-06-29 | 2016-01-06 | 株式会社カネカ | ポリヒドロキシアルカノエートの製造方法 |
EP2832796B1 (en) | 2012-03-30 | 2019-10-30 | Kaneka Corporation | Biodegradable polyester resin composition |
WO2014002417A1 (ja) | 2012-06-29 | 2014-01-03 | 株式会社カネカ | ポリ-3-ヒドロキシアルカノエート系樹脂組成物および成形体 |
WO2014020838A1 (ja) | 2012-08-03 | 2014-02-06 | 株式会社カネカ | ポリエステル樹脂組成物および該樹脂組成物を含む成形体 |
EP2896701A4 (en) * | 2012-09-14 | 2016-05-04 | Tokyo Inst Tech | PROCESS FOR THE PREPARATION OF POLYHYDROXYALKANOATE USING A MODIFIED FAT OR OIL COMPOSITION |
WO2014054278A1 (ja) | 2012-10-05 | 2014-04-10 | 株式会社カネカ | ポリエステル樹脂組成物およびその製造方法 |
US9644082B2 (en) | 2012-10-15 | 2017-05-09 | Kaneka Corporation | Polyester resin composition and molded article containing this resin composition |
WO2014068943A1 (ja) | 2012-10-29 | 2014-05-08 | 株式会社カネカ | 脂肪族ポリエステル樹脂組成物および該樹脂組成物を含む成形体 |
EP2963119A4 (en) * | 2013-02-28 | 2016-11-09 | Tokyo Inst Tech | PROCESS FOR THE PRODUCTION OF POLYHYDROXYALCANOATE COPOLYMER USING A GENETICALLY MODIFIED STRAIN OF THE FATTY ACID OXIDATION PATHWAY |
WO2014188646A1 (ja) | 2013-05-20 | 2014-11-27 | 株式会社カネカ | ポリエステル樹脂組成物および該樹脂組成物を含む成形体 |
WO2014194220A1 (en) | 2013-05-30 | 2014-12-04 | Metabolix, Inc. | Recyclate blends |
US9574082B2 (en) | 2013-08-06 | 2017-02-21 | Kaneka Corporation | Soft thermoplastic resin composition |
CN105452368B (zh) | 2013-08-06 | 2019-05-03 | 株式会社钟化 | 软质热塑性树脂组合物 |
WO2015052876A1 (ja) | 2013-10-11 | 2015-04-16 | 株式会社カネカ | 脂肪族ポリエステル樹脂組成物および脂肪族ポリエステル樹脂成形体 |
EP3088467B1 (en) | 2013-12-24 | 2019-04-10 | Kaneka Corporation | Aliphatic polyester resin composition and aliphatic polyester resin molded body |
JPWO2015114719A1 (ja) | 2014-01-30 | 2017-03-23 | 株式会社カネカ | ポリエステル樹脂組成物の製造方法およびポリエステル樹脂成形体 |
EP3101129B1 (en) * | 2014-01-31 | 2020-10-28 | Kaneka Corporation | Microorganism having adjusted expression of r-specific enoyl-coa hydratase gene, and method for manufacturing polyhydroxyalkanoate copolymer using same |
JP2017077184A (ja) * | 2014-03-04 | 2017-04-27 | 国立大学法人東京工業大学 | ポリエステル顆粒結合タンパク質遺伝子座を改変した組換え株による共重合ポリエステルの製造法 |
EP3124615B1 (en) * | 2014-03-28 | 2021-11-10 | Kaneka Corporation | Microorganism having multiple genes encoding pha synthase and method for producing pha using same |
WO2016021604A1 (ja) | 2014-08-04 | 2016-02-11 | 国立大学法人東京工業大学 | 糖質原料からの共重合ポリヒドロキシアルカン酸の製造法 |
WO2017122679A1 (ja) | 2016-01-12 | 2017-07-20 | 国立大学法人東京工業大学 | 生分解性脂肪族ポリエステル系繊維および製造方法 |
JP7123909B2 (ja) * | 2017-04-05 | 2022-08-23 | 株式会社カネカ | ポリヒドロキシアルカノエート粒子及びその水分散液 |
US11186831B2 (en) * | 2018-01-16 | 2021-11-30 | Kaneka Corporation | Mutant polyhydroxyalkanoate synthase, gene thereof and transformant, and method for producing polyhydroxyalkanoate |
EP3741840A4 (en) * | 2018-01-17 | 2021-12-08 | Kaneka Corporation | MICRO-ORGANISM TRANSFORMED TO PRODUCE A PHA COPOLYMER INCLUDING A 3HH MONOMERIC UNIT AT A HIGH COMPOSITION RATE AND PROCESS FOR THE PRODUCTION OF PHA USING IT |
CN114072448A (zh) * | 2019-04-26 | 2022-02-18 | 株式会社未来科学 | 聚羟基烷酸及其制备方法 |
EP4134434A4 (en) * | 2020-04-10 | 2024-06-26 | Kaneka Corporation | METHOD FOR MANUFACTURING A COPOLYMER MIXTURE OF POLYHYDROXYALKANOIC ACID, AND TRANSFORMED MICROORGANISM |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07265065A (ja) * | 1994-03-29 | 1995-10-17 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 共重合体の合成遺伝子による形質転換体および共重合体の製造方法 |
JP2008086238A (ja) * | 2006-09-29 | 2008-04-17 | Kaneka Corp | ポリヒドロキシアルカノエートの製造方法 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0052460B1 (en) | 1980-11-18 | 1985-02-06 | Imperial Chemical Industries Plc | Polymer blends |
GB8301344D0 (en) | 1983-01-18 | 1983-02-16 | Ici Plc | Poly(beta-hydroxybutyric acid) |
JP2777757B2 (ja) | 1991-09-17 | 1998-07-23 | 鐘淵化学工業株式会社 | 共重合体およびその製造方法 |
JP3062459B2 (ja) | 1996-08-14 | 2000-07-10 | 理化学研究所 | ポリエステル重合酵素遺伝子及びポリエステルの製造方法 |
JP4643799B2 (ja) | 2000-06-01 | 2011-03-02 | 株式会社カネカ | ポリエステルの製造方法 |
JP5650368B2 (ja) | 2005-10-27 | 2015-01-07 | 株式会社カネカ | 新規プラスミドベクター及びプラスミドを安定に保持する形質転換体 |
JP4995469B2 (ja) | 2006-03-01 | 2012-08-08 | 株式会社カネカ | 遺伝子組み換え微生物及びそれを用いたポリエステルの製造方法 |
JP4960033B2 (ja) | 2006-07-26 | 2012-06-27 | 株式会社カネカ | 酵素活性を低下させた微生物を用いる共重合ポリエステルの製造方法 |
JPWO2008090873A1 (ja) * | 2007-01-24 | 2010-05-20 | 株式会社カネカ | ポリヒドロキシアルカノエートの製造方法 |
-
2009
- 2009-05-26 US US12/994,378 patent/US20110091948A1/en not_active Abandoned
- 2009-05-26 EP EP09754672.5A patent/EP2295536B1/en active Active
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07265065A (ja) * | 1994-03-29 | 1995-10-17 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 共重合体の合成遺伝子による形質転換体および共重合体の製造方法 |
JP2008086238A (ja) * | 2006-09-29 | 2008-04-17 | Kaneka Corp | ポリヒドロキシアルカノエートの製造方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN6013061252; Journal of Bacteriology, 1998, Vol.180, No.8, p.1979-1987 * |
JPN6013061254; Biomacromolecules, 2002, Vol.3, p.618-624 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20110091948A1 (en) | 2011-04-21 |
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WO2009145164A1 (ja) | 2009-12-03 |
EP2295536A1 (en) | 2011-03-16 |
EP2295536B1 (en) | 2016-01-06 |
EP2295536A4 (en) | 2013-07-24 |
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