JP5547640B2 - 前立腺癌の治療・予防剤 - Google Patents
前立腺癌の治療・予防剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5547640B2 JP5547640B2 JP2010529778A JP2010529778A JP5547640B2 JP 5547640 B2 JP5547640 B2 JP 5547640B2 JP 2010529778 A JP2010529778 A JP 2010529778A JP 2010529778 A JP2010529778 A JP 2010529778A JP 5547640 B2 JP5547640 B2 JP 5547640B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- prostate cancer
- cells
- sendai virus
- group
- therapeutic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 title claims description 104
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 title claims description 104
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 76
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 29
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 163
- 108010003533 Viral Envelope Proteins Proteins 0.000 claims description 155
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 claims description 151
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 100
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 82
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 58
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 52
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 47
- 208000018821 hormone-resistant prostate carcinoma Diseases 0.000 claims description 45
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 37
- 238000009261 endocrine therapy Methods 0.000 claims description 32
- 229940034984 endocrine therapy antineoplastic and immunomodulating agent Drugs 0.000 claims description 30
- 239000003098 androgen Substances 0.000 claims description 24
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 20
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 19
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 17
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 claims description 17
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 15
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 14
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 13
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 8
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 8
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 claims description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 claims description 6
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 claims description 6
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 claims description 6
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 claims description 5
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 claims description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 5
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims description 5
- VELGMVLNORPMAO-JTFNWEOFSA-N n-[(e)-1-[(3r,4r,5s,6r)-5-[(2s,3r,4r,5r,6r)-5-[(2s,3r,4r,5r,6r)-3-acetamido-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-(hydroxym Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)C(OCC(NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)C(O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](CO)O1 VELGMVLNORPMAO-JTFNWEOFSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 51
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 30
- 210000004779 membrane envelope Anatomy 0.000 description 28
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 26
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 25
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 22
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 21
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 18
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 16
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 16
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 15
- 230000008859 change Effects 0.000 description 14
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 13
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 12
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 11
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 10
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 10
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 229940122245 Janus kinase inhibitor Drugs 0.000 description 9
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 9
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 9
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 8
- 210000000064 prostate epithelial cell Anatomy 0.000 description 8
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 8
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 7
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 7
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 7
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 7
- 239000012830 cancer therapeutic Substances 0.000 description 7
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 6
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 6
- 230000034994 death Effects 0.000 description 6
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 6
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 5
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 5
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 5
- 102100029855 Caspase-3 Human genes 0.000 description 5
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 5
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 5
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 5
- 101001128694 Homo sapiens Neuroendocrine convertase 1 Proteins 0.000 description 5
- 241000711504 Paramyxoviridae Species 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 5
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 5
- -1 etc.) Proteins 0.000 description 5
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 5
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 4
- 208000031648 Body Weight Changes Diseases 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 4
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 4
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M Pentobarbital sodium Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)[N-]C1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 description 4
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 4
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 4
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 4
- 230000004579 body weight change Effects 0.000 description 4
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 4
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 4
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 238000010809 targeting technique Methods 0.000 description 4
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 4
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000003332 Ilex aquifolium Nutrition 0.000 description 3
- 241000209027 Ilex aquifolium Species 0.000 description 3
- 102000002227 Interferon Type I Human genes 0.000 description 3
- 108010014726 Interferon Type I Proteins 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000006381 STAT1 Transcription Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010044012 STAT1 Transcription Factor Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 3
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 3
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 3
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 3
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 3
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 3
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 3
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 230000034217 membrane fusion Effects 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 3
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 3
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 2
- 241000712892 Arenaviridae Species 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000701412 Baculoviridae Species 0.000 description 2
- 208000019300 CLIPPERS Diseases 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004091 Caspase-8 Human genes 0.000 description 2
- 108090000538 Caspase-8 Proteins 0.000 description 2
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 2
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 238000000116 DAPI staining Methods 0.000 description 2
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000711950 Filoviridae Species 0.000 description 2
- 241000710781 Flaviviridae Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 2
- 241000700739 Hepadnaviridae Species 0.000 description 2
- 241000700586 Herpesviridae Species 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 2
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 241000712464 Orthomyxoviridae Species 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000700625 Poxviridae Species 0.000 description 2
- 206010038111 Recurrent cancer Diseases 0.000 description 2
- 241000712907 Retroviridae Species 0.000 description 2
- 241000711931 Rhabdoviridae Species 0.000 description 2
- 101000903919 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) Glucan 1,3-beta-glucosidase Proteins 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 241000710924 Togaviridae Species 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 2
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 230000004523 agglutinating effect Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 2
- SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N benzyl benzoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003711 chorioallantoic membrane Anatomy 0.000 description 2
- 208000021930 chronic lymphocytic inflammation with pontine perivascular enhancement responsive to steroids Diseases 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 2
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 2
- 230000000385 effect on melanoma Effects 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000003067 hemagglutinative effect Effects 0.000 description 2
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 2
- 238000001325 log-rank test Methods 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 2
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 229940105631 nembutal Drugs 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 210000005267 prostate cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 230000002100 tumorsuppressive effect Effects 0.000 description 2
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 2
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 2
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- 239000006200 vaporizer Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- CPKVUHPKYQGHMW-UHFFFAOYSA-N 1-ethenylpyrrolidin-2-one;molecular iodine Chemical compound II.C=CN1CCCC1=O CPKVUHPKYQGHMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGXBDMJGAMFCBF-HLUDHZFRSA-N 5α-Androsterone Chemical compound C1[C@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 QGXBDMJGAMFCBF-HLUDHZFRSA-N 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 101000957724 Catostomus commersonii Corticoliberin-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241000725101 Clea Species 0.000 description 1
- 101000904177 Clupea pallasii Gonadoliberin-1 Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 239000004287 Dehydroacetic acid Substances 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- QGXBDMJGAMFCBF-UHFFFAOYSA-N Etiocholanolone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC21 QGXBDMJGAMFCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010040476 FITC-annexin A5 Proteins 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010062904 Hormone-refractory prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102100040019 Interferon alpha-1/13 Human genes 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004163 JAK-STAT signaling pathway Effects 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 238000000719 MTS assay Methods 0.000 description 1
- 231100000070 MTS assay Toxicity 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- 208000025696 NK cell deficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 241000713112 Orthobunyavirus Species 0.000 description 1
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 1
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 241000150350 Peribunyaviridae Species 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- HCBIBCJNVBAKAB-UHFFFAOYSA-N Procaine hydrochloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 HCBIBCJNVBAKAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 1
- 108090000944 RNA Helicases Proteins 0.000 description 1
- 102000004409 RNA Helicases Human genes 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 108091006629 SLC13A2 Proteins 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 1
- ABBQHOQBGMUPJH-UHFFFAOYSA-M Sodium salicylate Chemical compound [Na+].OC1=CC=CC=C1C([O-])=O ABBQHOQBGMUPJH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000012288 TUNEL assay Methods 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000001790 Welch's t-test Methods 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000000240 adjuvant effect Effects 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- AEMFNILZOJDQLW-QAGGRKNESA-N androst-4-ene-3,17-dione Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 AEMFNILZOJDQLW-QAGGRKNESA-N 0.000 description 1
- 229960003473 androstanolone Drugs 0.000 description 1
- 229960005471 androstenedione Drugs 0.000 description 1
- AEMFNILZOJDQLW-UHFFFAOYSA-N androstenedione Natural products O=C1CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 AEMFNILZOJDQLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940061641 androsterone Drugs 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- LFYJSSARVMHQJB-QIXNEVBVSA-N bakuchiol Chemical compound CC(C)=CCC[C@@](C)(C=C)\C=C\C1=CC=C(O)C=C1 LFYJSSARVMHQJB-QIXNEVBVSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960002903 benzyl benzoate Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004227 calcium gluconate Substances 0.000 description 1
- 229960004494 calcium gluconate Drugs 0.000 description 1
- 235000013927 calcium gluconate Nutrition 0.000 description 1
- NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L calcium;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanoate Chemical compound [Ca+2].OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000000991 chicken egg Anatomy 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019258 dehydroacetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940061632 dehydroacetic acid Drugs 0.000 description 1
- JEQRBTDTEKWZBW-UHFFFAOYSA-N dehydroacetic acid Chemical compound CC(=O)C1=C(O)OC(C)=CC1=O JEQRBTDTEKWZBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PGRHXDWITVMQBC-UHFFFAOYSA-N dehydroacetic acid Natural products CC(=O)C1C(=O)OC(C)=CC1=O PGRHXDWITVMQBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 238000009408 flooring Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 1
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 1
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 208000024963 hair loss Diseases 0.000 description 1
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007236 host immunity Effects 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000008011 inorganic excipient Substances 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940031703 low substituted hydroxypropyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000000464 low-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000006674 lysosomal degradation Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 238000010208 microarray analysis Methods 0.000 description 1
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 238000009099 neoadjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011474 orchiectomy Methods 0.000 description 1
- 239000008012 organic excipient Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- 229960002275 pentobarbital sodium Drugs 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 229940068984 polyvinyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 1
- 229960001309 procaine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 238000011472 radical prostatectomy Methods 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003370 receptor cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000016691 refractory malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000009118 salvage therapy Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 150000004760 silicates Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004025 sodium salicylate Drugs 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 239000012879 subculture medium Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L sulfite Chemical class [O-]S([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 1
- 238000013042 tunel staining Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/74—Synthetic polymeric materials
- A61K31/755—Polymers containing halogen
- A61K31/76—Polymers containing halogen of vinyl chloride
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
- A61K35/768—Oncolytic viruses not provided for in groups A61K35/761 - A61K35/766
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18811—Sendai virus
- C12N2760/18833—Use of viral protein as therapeutic agent other than vaccine, e.g. apoptosis inducing or anti-inflammatory
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
センダイウイルスはエーリッヒ腫瘍細胞を融合させるとして注目され、細胞膜融合活性(以下、融合活性とする)の解析が進められるとともに遺伝子導入ベクターとしての利用が検討されてきた。しかし、センダイウイルスは免疫原性が高く、特にNPタンパク質が大量に生産されるとCTLを誘導することが知られており(非特許文献3)、さらに宿主のタンパク質合成が阻害される懸念もある。そこで遺伝子やタンパク質を封入したリポソームと予め紫外線照射により不活性化しておいたセンダイウイルスとを融合することで、融合粒子(センダイウイルス−リポソーム)を作製する方法が考案され、これにより細胞や生体への非侵襲の遺伝子導入が可能となった(特許文献1、非特許文献4および非特許文献5)。
前立腺に限局した癌の場合は根治的前立腺摘除術が適応となるが、近年は前立腺特異抗原(PSA)マーカーによるスクリーニングにより、外科的切除可能と判断される早期癌の患者が増加してきている。しかしながら外科的切除後の再発頻度は、一般に20〜57%とされ、依然高い再発率が問題となっている。
一般に再発症例および前立腺外に進展が認められる前立腺癌に対しては、局所放射線照射や内分泌療法等が救済療法として選択されるが、根治を得る可能性は概して低い。そこで術前に内分泌療法を施行するネオアジュバント療法も完全切除の可能性を高くする目的で行われているが、不満足な結果となっている。特に、内分泌療法ではしばしばホルモン抵抗性を獲得した前立腺癌細胞が出現し、治療成績を低くしてしまう。そのため、術前内分泌療法に代わる、より有効な前立腺癌の治療法や、ホルモン抵抗性の前立腺癌を効率的に治療する方法の開発が期待されている状況である。
[1]ウイルスエンベロープを有効成分として含有する、前立腺癌治療・予防剤;
[2]ウイルスが、ポックスウイルス科、ヘルペスウイルス科、ヘパドナウイルス科、バキュロウイルス科、レトロウイルス科、トガウイルス科、コロナウイルス科、フラビウイルス科、パラミクソウイルス科、オルトミクソウイルス科、ブニヤウイルス科、ラブドウイルス科、アレナウイルス科、およびフィロウイルス科からなる群から選択されるいずれか1つの科に属するウイルスである、上記[1]記載の治療・予防剤;
[3]ウイルスが、パラミクソウイルス科に属するウイルスである、上記[2]記載の治療・予防剤;
[4]ウイルスが、センダイウイルス、レトロウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルスおよびインフルエンザウイルスからなる群より選択される、上記[1]記載の治療・予防剤;
[5]ウイルスが、センダイウイルスである、上記[4]記載の治療・予防剤;
[6]NK細胞もしくはアシアロGM1陽性細胞の活性化または腫瘍細胞からのインターフェロンαもしくはβの産生誘導をもたらすことを特徴とする、上記[1]〜[5]のいずれか1つに記載の治療・予防剤;
[7]前立腺癌のアンドロゲン感受性が一部または完全に低減されている、上記[1]〜[6]のいずれか1つに記載の治療・予防剤。
[8]前立腺癌がホルモン抵抗性である、上記[1]〜[6]のいずれか1つに記載の治療・予防剤;
[9]前立腺癌に直接投与されることを特徴とする、上記[1]〜[8]のいずれか1つに記載の治療・予防剤;
[10]前立腺癌に直接注射されることを特徴とする、上記[9]記載の治療・予防剤;
[11]他の癌治療方法と併用されることを特徴とする、上記[1]〜[10]のいずれか1つに記載の治療・予防剤;
[12]他の癌治療方法が、投薬、内分泌療法、放射線療法、化学療法および免疫療法からなる群より選択される、上記[11]記載の治療・予防剤;
[13]内分泌療法の適用履歴を有する前立腺癌患者に投与されることを特徴とする、上記[12]記載の治療・予防剤;
[14]内分泌療法の適用履歴を有する前立腺癌患者が、アンドロゲン感受性が一部または完全に低減された前立腺癌を有する、上記[13]記載の治療・予防剤;
[15] 内分泌療法の適用履歴を有する前立腺癌患者が、ホルモン抵抗性前立腺癌を有する、上記[13]記載の治療・予防剤;
[16]前立腺癌患者または前立腺癌に罹患するリスクを有する者にウイルスエンベロープを有効量投与することを特徴とする、前立腺癌の治療・予防方法;
[17]前立腺癌の治療・予防において使用するためのウイルスエンベロープ;
[18]前立腺癌の治療・予防剤を製造するためのウイルスエンベロープの使用;
[19]ウイルスエンベロープを有効成分として含有する、前立腺癌細胞のアポトーシス誘導剤;
[20]ウイルスがセンダイウイルスである、上記[19]記載のアポトーシス誘導剤;
[21]前立腺癌患者または前立腺癌に罹患するリスクを有する者にウイルスエンベロープを有効量投与することを特徴とする、前立腺癌細胞のアポトーシス誘導方法;
[22]前立腺癌細胞のアポトーシス誘導において使用するためのウイルスエンベロープ;
[23]前立腺癌細胞のアポトーシス誘導剤を製造するためのウイルスエンベロープの使用;
[24]有効成分としてセンダイウイルスエンベロープ(HVJ−E)のみを含有する、メラノーマ治療・予防剤;
[25]1回あたりの投与量が10〜10000HAUであることを特徴とする、上記[24]のメラノーマ治療・予防剤;
[26]1回あたりの投与量が40〜400HAUであることを特徴とする、上記[24]のメラノーマ治療・予防剤;
[27]投与回数が1〜10回であることを特徴とする、上記[24]のメラノーマ治療・予防剤;
[28]投与回数が3〜6回であることを特徴とする、上記[24]のメラノーマ治療・予防剤;
[29]メラノーマ患者またはメラノーマに罹患するリスクを有する者に、メラノーマの治療・予防のための唯一の有効成分としてセンダイウイルスエンベロープ(HVJ−E)を有効量投与することを特徴とする、メラノーマの治療・予防方法;
[30]メラノーマの治療・予防において使用するためのセンダイウイルスエンベロープ(HVJ−E)を唯一の有効成分として含む医薬組成物;
[31]メラノーマの治療・予防剤を製造するためのセンダイウイルスエンベロープ(HVJ−E)を唯一の有効成分として含む医薬組成物の使用
などを提供する。
前立腺癌の治療においては、現在PSAスクリーニング法、外科的切除法、内分泌療法、放射線治療法などが存在するが、その根治は依然大きな課題である。本発明は、生体内実験を用いてセンダイウイルスエンベロープが前立腺癌への直接投与で癌を著しく退縮させることを示した。
また、本発明によって、メラノーマの新たな治療・予防剤が提供される。該治療・予防剤は、低用量でメラノーマ退縮効果を示す。
本発明は、ウイルスエンベロープを有効成分として含有する前立腺癌治療・予防剤を提供する。
http://www.atcc.org/ATCCAdvancedCatalogSearch/ProductDetails/tabid/452/Default.aspx?ATCCNum=VR−105&Template=animalVirology
前立腺癌は、発生当初はアンドロゲン依存的に増殖するため、アンドロゲン分泌組織(睾丸、副腎等)の摘出や、アンドロゲンの拮抗阻害薬の投与等により、体内におけるアンドロゲンの分泌量や、アンドロゲンの作用を抑制する内分泌療法(ホルモン療法)が有効である場合が多い。「アンドロゲン」の例としては、テストステロン、ジヒドロテストステロン、デヒドロエピアンドロステロン、アンドロステロン、アンドロステンジオンなどが挙げられる。また、本明細書中において、「内分泌療法(ホルモン療法)」とは、アンドロゲンの分泌や働きを抑えることによって、前立腺癌細胞の増殖を抑制する治療法をいう。内分泌療法(ホルモン療法)の具体的手段としては、精巣摘除術(去勢術)および薬物療法が挙げられ、薬物療法としては、LH−RHアゴニスト、抗男性ホルモン剤(抗アンドロゲン剤)、または女性ホルモン剤(エストロゲン剤)等の投与が挙げられる。しかし、この療法を継続すると前立腺癌細胞のアンドロゲンに対する感受性が低下し、やがてアンドロゲン非依存的に増殖し得るようになることが知られている。その結果、前立腺癌に対する内分泌療法(ホルモン療法)の有効性が減弱する。本発明の治療・予防剤は、このようなアンドロゲンへの感受性が一部または完全に低減された前立腺癌に特に有効である。「アンドロゲンへの感受性」とは、アンドロゲンの刺激により前立腺癌細胞の増殖が促進される程度を意味する。「アンドロゲンへの感受性の完全な低減」とは、アンドロゲンの刺激により前立腺癌の増殖が全く促進されないことを意味する。「アンドロゲンへの感受性の一部低減」とは、アンドロゲンの刺激により前立腺癌の増殖は促進されるものの、その程度が、前立腺癌の発生当初よりも小さいことを意味する。また、本発明の治療・予防剤は、特にホルモン抵抗性の前立腺癌に有効である。「ホルモン抵抗性」とは、アンドロゲンへの感受性が低減したため、内分泌療法(又はホルモン療法)が一部又は完全に無効となった前立腺癌の状態をいい、アンドロゲン抵抗性の前立腺癌をも包含する。「内分泌療法が一部無効」とは、内分泌療法により前立腺癌増殖が部分的に抑制されるが、完全にはその増殖が停止しないことをいう。「内分泌療法が完全に無効」とは、内分泌療法により前立腺癌増殖が全く抑制されないことをいう。
ウイルスエンベロープは、前立腺癌細胞に直接作用し、アポトーシスを誘導することができる。従って本発明の治療・予防剤は、前立腺癌細胞のアポトーシス誘導剤として有用である。アポトーシスとは、細胞の形態学的変化およびDNAのヌクレオソーム単位での断片化という生化学的変化の2つによって定義された、遺伝的に制御された細胞死を指す。
ウイルスエンベロープは、前立腺癌細胞にサイトカインであるインターフェロンα及び/又はβの産生を誘導する。インターフェロンαやβは、強力な抗腫瘍効果を有しており、NK細胞を活性化し、また腫瘍細胞に対して直接作用し、増殖を抑制することが知られている。
後述の実施例に示すように、抗アシアロGM1抗体処理によりNK細胞を欠損したマウスにおいては、前立腺癌に対するウイルスエンベロープの治療効果が減少している。従って、ウイルスエンベロープの抗腫瘍効果の少なくとも一部は、ウイルスエンベロープがNK細胞(アシアロGM1陽性細胞)を直接的又は間接的に活性化することにより達成されたものと考えられる。
ウイルスエンベロープは、細胞傷害性T細胞(CTL)を活性化させる。従って、ウイルスエンベロープは直接的な細胞傷害効果のみならず、抗腫瘍免疫を介して抗腫瘍効果を発揮し得る。
当業者であれば、それぞれの投与方法に応じた医薬組成物に製剤化できる。
製剤上の必要に応じて、適宜の薬学的に許容される担体、例えば、賦形剤、結合剤、滑沢剤、溶剤、崩壊剤、溶解補助剤、懸濁化剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤、無痛化剤、防腐剤、抗酸化剤、矯味矯臭剤、着色剤などを配合して製剤化される。
賦形剤としては、乳糖、ブドウ糖、D−マンニトールなどの糖類、デンプン類、結晶セルロースなどのセルロース類などの有機系賦形剤、炭酸カルシウム、カオリンなどの無機系賦形剤などが、結合剤としては、α化デンプン、ゼラチン、アラビアゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、結晶セルロース、D−マンニトール、トレハロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコールなどが、滑沢剤としては、ステアリン酸、ステアリン酸塩などの脂肪酸塩、タルク、珪酸塩類などが、溶剤としては、精製水、生理的食塩水などが、崩壊剤としては、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、化学修飾されたセルロースやデンプン類などが、溶解補助剤としては、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、トレハロース、安息香酸ベンジル、エタノール、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなどが、懸濁化剤あるいは乳化剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、アラビアゴム、ゼラチン、レシチン、モノステアリン酸グリセリン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどのセルロース類、ポリソルベート類、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などが、等張化剤としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、糖類、グリセリン、尿素などが、安定化剤としては、ポリエチレングリコール、デキストラン硫酸ナトリウム、その他のアミノ酸類などが、無痛化剤としては、ブドウ糖、グルコン酸カルシウム、塩酸プロカインなどが、防腐剤としては、パラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸などが、抗酸化剤としては、亜硫酸塩、アスコルビン酸などが、矯味矯臭剤としては、医薬分野において通常に使用される甘味料、香料などが、着色剤としては、医薬分野において通常に使用される着色料が挙げられる。
たとえば、注射剤を癌組織に直接注射により3日おきに3回直接投与する、などの投与方法が考えられる。
本発明の不活性化ウイルスエンベロープの抗腫瘍効果のメカニズムとしては、限定はしないが以下のとおり推測される。センダイウイルスエンベロープの細胞膜上のレセプターはgangliosideの一種であり、中でもGD1aが主要な受容体である。このgangliosideは正常の前立腺上皮にはほとんどなく、ホルモン抵抗性の前立腺癌で強発現している。したがってセンダイウイルスエンベロープをホルモン抵抗性の前立腺癌細胞と接触させると効率よく細胞融合を起こして細胞増殖を阻害する。一方、ウイルス由来2本鎖RNAが細胞内のウイルスゲノムレセプターであるRIG−Iに結合し、そのシグナル伝達によりインターフェロン−α、βを分泌させ、癌細胞は自分の分泌したインターフェロンによりcaspase3、8を活性化してアポトーシスを起こす。しかし正常前立腺細胞はセンダイウイルスエンベロープによるインターフェロン分泌もなく影響を受けない。さらにセンダイウイルスエンベロープはRIG−Iの発現の増強も促し、この癌細胞特異的なアポトーシス誘導効果を増強する。マウスでの腫瘍モデルでは、この効果に加えて、本発明者が腎癌のマウスモデルで見たように腫瘍を攻撃できるNK細胞も活性化されることが分かり、抗腫瘍効果がさらに高まる。またヒト前立腺癌のマウスモデルでは検証はできないが、すでに我々が大腸癌の治療実験で報告しているように腫瘍に対する細胞傷害性T細胞も活性化されることが予想され、直接的な腫瘍殺傷効果に加えて腫瘍に対する宿主免疫の活性化により、局所の癌病巣へのセンダイウイルスエンベロープの投与により治療抵抗性である癌でも原発巣ばかりでなく遠隔転移も抑制し、さらには再発をも防止できることが期待される。
たとえば、注射剤を癌組織に直接注射により通常1〜10、好ましくは3〜6回直接投与する、などの投与方法が考えられる。また、投与の間隔についても、患者の状態に応じて決定することができるが、例えば、2または3日おきに投与することができる。
以下の実施例おいて、本発明を詳細に述べるが、本発明はそれらになんら限定されるものではない。
(1:センダイウイルスの増殖)
センダイウイルスは鶏の受精卵への種ウイルスの接種により増殖されたものが一般に使用され得るが、サル、ヒトなどの培養細胞、培養組織へのウイルスの持続感染系(トリプシンなどの加水分解酵素を培養液中に添加)を利用して増殖させたもの、クローニングされたウイルスゲノムを培養細胞に感染させ持続感染をおこさせて増殖させたもの、全てが利用可能である。
本実施例において、センダイウイルスの増殖を以下のようにおこなった。センダイウイルスの種ウイルスを、SPF(Specific pathogen free)の受精卵を使って増殖させ分離・精製したセンダイウイルス(Z種)を細胞保存用チューブに分注し、10% DMSOを加えて液体窒素中に保存し、調製した。
受精直後のニワトリ卵を入荷し、インキュベーター(SHOWA−FURANKI P−03型;約300鶏卵収容)にいれ、36.5℃、湿度40%以上の条件で10〜14日飼育した。暗室中で、検卵器(電球の光が口径約1.5cmの窓を通して出るようになっているもの)を用いて、胚の生存及び気室と漿尿膜を確認し、漿尿膜の約5mm上方に鉛筆でウイルス注入箇所の記しをつけた(太い血管を除いた場所を選定する)。ポリペプトン溶液(1%ポリペプトン、0.2% NaClを混合し、1M NaOHでpH7.2に調整してオートクレーブ滅菌し、4℃保存したもの)で種ウイルス(液体窒素からとりだしたもの)を500倍に希釈し、4℃においた。卵をイソジン及びアルコールで消毒し、ウイルス注入箇所に千枚通しで小孔をあけ、希釈した種ウイルス0.1mlを26ゲージの針付き1mlシリンジを用いて、漿尿腔内に入るように注入した。溶かしたパラフィン(融点50〜52℃)をパスツールピペットを用いて孔の上に置き、これをふさいだ。卵をインキュベーターにいれ、36.5℃、湿度40%以上の条件で3日飼育した。次に、接種卵を一晩4℃においた。翌日、卵の気室部分をピンセットで割り、18ゲージの針を付けた10mlシリンジを漿尿膜の中にいれて、漿尿液を吸引し、滅菌ボトルに集め、4℃に保存した。
センダイウイルスは、遠心分離による精製方法、カラムによる精製方法、または当該分野において公知のその他の精製方法によって、精製され得る。
手短には、増殖させたウイルス液を回収し低速遠心で培養液や漿尿液中の組織・細胞片を除去した。その上清を高速遠心(27,500×g,30分間)とショ糖密度勾配(30〜60%w/v)を利用した超遠心(62,800×g,90分間)により精製した。精製の間にウイルスをできるだけ穏和に扱い、4℃で保存することに注意すべきである。
本実施例において、具体的には、以下の方法によってセンダイウイルスを精製した。
センダイウイルス含有漿尿液(センダイウイルス含有のニワトリ卵の漿尿液を集め4℃にて保存)の約100m1を広ロの駒込ピペットで50mlの遠心チューブ2本に入れ(Saeki,Y.,およびKaneda,Y:Protein modifiedliposomes(HVJ−1iposomes)for the delivery of genes,oligonucleotides and proteins. Cell Biology;A laboratory handbook(第2版)J.E.Celis編(Acadcmic Press Inc.,SanDiego)第4巻、127〜135,1998を参照のこと)、低速遠心機で3,000rpm,10分、4℃で遠心し(ブレーキはオフ)、卵の組織片を除去した。
遠心後、上清を35ml遠心チューブ4本(高速遠心用)に分注し、アングルローターで27,000×g,30分遠心した(アクセル、ブレーキはオン)。上清を除き、沈殿にBSS(10mM Tris−HCl(pH7.5)、137mM NaC1、5.4mM KC1;オートクレーブし、4℃保存)(BSSのかわりにPBSでも可能)をチューブ当たり約5ml加え、そのまま4℃で一晩静置した。広ロの駒込ピペットでゆるやかにピペッテイングして沈殿をほぐし1本のチューブに集め、同様にアングルローターで27,000×g、30分遠心した。上清をのぞき、沈殿にBSS約10mlを加え、同様に4℃で一晩静置した。広ロの駒込ピペットでゆるやかにピペッテイングして沈殿をほぐし、低速遠心機で3,000rpm、10分、4℃で遠心し(ブレーキはオフ)、除ききれなかった組織片やウイルスの凝集塊をのぞいた。上清を新しい滅菌済みチューブに入れ精製ウイルスとして4℃で保存した。
このウイルス液0.1mlにBSSを0.9ml加え、分光光度計で540nmの吸収を測定し、ウイルス力価を赤血球凝集活性(HAU)に換算した。540nmの吸収値1がほぼ15,000HAUに相当した。本明細書においてHAU(Hemagglutinating unit)とは赤血球を凝集させる活性の単位であり、HVJ−Eの1HAUとはニワトリの赤血球と混合した場合に凝集を起こす最小単位のことをいう。HAUは融合活性とほぼ比例すると考えられる。また実際にニワトリ赤血球液(0.5%)を用いて、赤血球凝集活性を測定してもよい(動物細胞利用実用化マニュアル、REALIZE INC.(内田、大石、古沢編集)P259〜268、1984を参照のこと)。
さらにショ糖密度勾配を用いたセンダイウイルスの精製も必要に応じて行い得る。具体的には、ウイルス懸濁液を60%、30%のショ糖溶液(オートクレーブ滅菌)を重層した遠心チューブにのせ、62,800×gで120分間密度勾配遠心を行う。遠心後、60%ショ糖溶液層上にみられるバンドを回収する。回収したウイルス懸濁液をBSSもしくはPBSを外液として4℃で透析を一晩行い、ショ糖を除去する。すぐに使用しない場合は、ウイルス懸濁液にグリセロール(オートクレーブ滅菌)と0.5M EDTA液(オートクレーブ滅菌)をそれぞれ最終濃度が10%と2〜10mMになるように加えて−80℃で穏やかに凍結し、最終的に液体窒素中で保存する(凍結保存はグリセロ一ルと0.5M EDTA液の代わりに10mM DMSOでも可能)。
遠心分離による精製方法に代えて、カラムによるセンダイウイルスの精製も本発明に適用可能である。
手短には、分子量カットオフが50,000のフィルターによる限外濾過による濃縮(約10倍)とイオン交換クロマトグラフィー(0.3M〜lM NaCl)による溶出を用いて精製した。
具体的には、本実施例において、以下の方法を使用して、センダイウイルスをカラムによって精製した。
漿尿液を採集した後、80μm〜10μmのメンブランフィルターにてろ過した。0.006〜0.008% BPL(最終濃度)を漿尿液に加え(4℃、1時間)、センダイウイルスを不活性化した。漿尿液を37℃、2時間インキュベートすることによって、BPLを不活性化した。
500KMWCO(A/G Technology、Needham、Massachusetts)を用いたタンジェンシャルフロー限外ろ過法により約10倍濃縮した。緩衝液として、50mM NaCl、1mM MgCl2、2%マンニトール、20mM Tris(pH7.5)を用いた。HAUアッセイにより、ほぼ100%のセンダイウイルス回収率であり優れた結果がえられた。
QSepharoseFF(アマシャムファルマシアバイオテクKK、Tokyo)によるカラムクロマトグラフィー法(緩衝液:20mM TrisHCl(pH7.5)、0.2〜1M NaCl)でセンダイウイルスを精製した。40〜50%の回収率であり、純度は99%以上であった。
500KMWCO(A/G Technology)を用いたタンジェンシャルフロー限外ろ過法によりセンダイウイルスの画分を濃縮した。
センダイウイルスの不活性化を、以下に記載するように、紫外線照射によって行った。
センダイウイルス懸濁液1mlを30mm径のシャーレにとり、99または198ミリジュール/cm2を照射した。不活性化されたウイルスは、複製能力は持たないが、ウイルスへの融合能力は保持されている。
PC3細胞、DU145細胞およびLNCap細胞はAmerican Type Culture Collection(Rockville,MD)から購入した。DU145細胞は10% fetal bovine serum(FBS)、100U/mL penicillin、100μg/mL streptomycin存在下でRPMI1640メディウム(Nakarai Tesque,Kyoto,Japan)中で培養した。PC3細胞は10% FBS、100U/mL penicillin、100μg/mL streptomycin存在下でDulbecco’s modified Eagle F12 メディウム中で培養した。細胞培養は全て37℃、5%CO2の加湿条件下で行った。
ホルモン抵抗性前立腺癌細胞であるPC3細胞およびDU145細胞、ホルモン非抵抗性前立腺癌細胞株であるLNCap細胞、もしくはヒト正常前立腺上皮細胞(PNT2)をそれぞれ96穴プレートに1×104cells/wellの密度で播種し、24時間後にセンダイウイルスエンベロープと反応させた[multiplicity of infection(MOI):10〜104]。更に24時間培養し、細胞の生存率をCelltiter 96(R) Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay(Promega,USA)を用いて、MTSアッセイにより調べた。生存率は、各々のセンダイウイルスエンベロープ未処置群(control)に対する割合で表され、グラフを図1(A)に示す。ホルモン抵抗性前立腺癌細胞においてはいずれの細胞でも、センダイウイルスエンベロープの濃度依存的に生細胞が減少し、MOI 104のセンダイウイルスエンベロープで処理した細胞では、コントロールに比べてPC3細胞では46%、DU145細胞では35%にまで減少した。一方、センダイウイルスエンベロープは同濃度の幅ではホルモン非抵抗性前立腺癌細胞および正常前立腺上皮細胞の生存率に影響を与えなかった。それぞれの細胞株のコントロールおよびMOI 104のセンダイウイルスエンベロープ処理の顕微鏡画像を図1(B)に示す(倍率×40)。
ホルモン非抵抗性前立腺癌細胞および正常前立腺上皮細胞ではセンダイウイルスエンベロープによる細胞死は認められず、センダイウイルスエンベロープはホルモン抵抗性(前立腺)癌細胞選択的に細胞死を誘導した。これにより、センダイウイルスエンベロープのホルモン抵抗性前立腺癌細胞に対する選択的抗腫瘍効果が明らかにされた。
ホルモン抵抗性前立腺癌細胞PC3細胞およびDU145細胞、ホルモン非抵抗性前立腺癌細胞LNCapならびにヒト正常前立腺上皮細胞(PNT2)を、それぞれ6穴プレートに入れたポリエチレンイミン・コートされたカバーガラス上に2×105cells/wellの密度で播種した。翌日、PKH26でラベルされたセンダイウイルスエンベロープ(MOI 104)と37℃で60分間反応させた後、細胞をPBSで2度洗浄し、4% paraformaldehyde処置で固定した(15分、4℃)。DAPIで細胞核を対比染色した後、細胞を共焦点顕微鏡で観察した(倍率×200)。
これらにより、センダイウイルスエンベロープはホルモン抵抗性前立腺癌細胞に対して接着能力、そして膜融合能力を持つことが明らかになった(図2)。
PC3細胞を、6穴プレートに入れたポリエチレンイミン・コートされたカバーガラス上に1×105cells/wellの密度で播種した。翌日、センダイウイルスエンベロープと反応させ(MOI 104)、更に24時間培養した後、細胞をPBSで2度洗浄し、4% paraformaldehyde処置で固定した(15分、4℃)。Apoptosis Detection Kit (TAKARA bio.)を用いて、説明書の手順に従い、アポトーシス細胞をthe terminal deoxynucleotide transferase(TdT)−mediated dUTP nick−end labeling(TUNEL)染色により検出した。共焦点顕微鏡観察(倍率×200)の結果を図3に示す。これらにより、センダイウイルスエンベロープ投与群におけるTUNEL陽性細胞の増加が明らかになった。
Annexin V−FITC Apoptosis Detection Kit(BD Bioscience,CA,USA)を用いて、センダイウイルスエンベロープ処置後のアポトーシス細胞の割合の違いを調べた。PC3細胞を1×105cells/wellの密度で6穴プレートに播種し、24時間後、細胞をセンダイウイルスエンベロープと反応させた(MOI 104)。更に24時間培養し、PBSで2回洗浄してアネキシンV(5μl)とプロピディウムイオダイド(PI)(2μl)を含む染色溶液に再懸濁し、暗所で15分間、室温で処置した。アネキシンVとプロピディウムイオダイドは、BD PharMingen(San Diego,CA)から購入した。細胞はFACScanフローサイトメーター(Becton Dickinson)を使って、Cell Quest softwareを用いて解析した。その結果を図4(A)に示す。MOI 104のセンダイウイルスエンベロープで処置した細胞群では、センダイウイルスエンベロープ未処置のコントロール群に比べて2倍以上のアネキシンV陽性細胞の増加が認められた。次に、PC3細胞を1×105cells/wellの密度で6穴プレートに播種し、24時間後、センダイウイルスエンベロープと反応させた(MOI 104)。更に12もしくは24時間培養し、PBSで2回洗浄した後、細胞を回収し、lysis bufferで融解した。これに等量のサンプルバッファーを加えた後、細胞融解液を10分間煮沸した。各サンプルについて10μg分のタンパク質を4−20% sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelにかけ、電気泳動により解析した。泳動後サンプルをフッ化ポリビニリデンメンブレンに移し、メンブレンを5%スキムミルクでブロッキングし、1次抗体0.1%、5%スキムミルクの反応液と共に4℃、オーバーナイトで処置した。その後メンブレンを洗い、HRP−ラベルされた抗caspase3抗体(PC−020:TREVIGEN,MD,USA)、抗caspase8抗体(H−134:Santa Cruz,CA,USA)、抗caspase9抗体(H−83:Santa Cruz,CA,USA)と、室温で約1時間反応させた。化学発光による検出はECL user’s guide(Amersham)に記載のプロトコールをもとに行った。その結果を図4(B)に示す。MOI 104のセンダイウイルスエンベロープで処置した細胞では、コントロールに比べてcaspase3と8の発現上昇が認められた。なお陽性対照群として、放射線照射(RT50Gy)のサンプルを用いた。これらにより、センダイウイルスエンベロープはホルモン抵抗性前立腺癌細胞に対してアポトーシス誘導能を持つことが明らかになった。
PC3細胞を5×104cells/wellの密度で96穴プレートに播種し、24時間後に細胞をセンダイウイルスエンベロープと反応させ(MOI 102〜104)、更に24時間培養した。培養上清を回収し、typeIインターフェロン(INF−αとINF−β)の発現を、市販で入手できる試薬を用い(PBL Biomedical Laboratories、Piscataway、NJ、USA)、ELISAによって測定した。その結果を図5(A)に示す。センダイウイルスエンベロープのdose−dependentlyにIFNα、βの発現の上昇が認められた。次に、RNAヘリカーゼであるRetinoic Acid Inducible Gene−I(RIG−I)の発現に対する、センダイウイルスエンベロープおよび抗INF受容体抗体の影響を調べた。PC3細胞を5×105cells/wellの密度で96穴プレートに播種し、24時間後に細胞を抗IFN受容体抗体(20μg/ml)による前処置の有無に分け、3時間の前処置を行った後、更にセンダイウイルスエンベロープと24時間反応させた(MOI 104)。その結果を図5(B)に示す。これより、センダイウイルスエンベロープ処置はRIG−I発現を増加させる一方、この作用は抗IFN受容体抗体処置により低減されることが明らかになった。
PC3細胞を約1×105cells/wellの密度で6穴プレートに播種し、24時間後、細胞をJAK阻害剤(1μM)(Calbiochem,USA)による前処置1時間の有無に分け、センダイウイルスエンベロープと反応させた(MOI 104)。更に24時間培養し、PBSで2回洗浄した後、細胞を回収し、lysis bufferで融解した。これに等量のサンプルバッファーを加えた後、細胞融解液を10分間煮沸した。このサンプルを実施例と同様のSDS−PAGEとウェスタンブロット法を用いてpSTAT1(Ser727:Santa Cruz,CA,USA)、caspase3、8、βアクチン(IMG−5142A:IMAGENEX,CA,USA)についてタンパク質の発現を解析した。その結果を図6(A)に示す。MOI 104のセンダイウイルスエンベロープで処置した細胞群では、センダイウイルスエンベロープ未処置のコントロール群に比べてSTAT1のリン酸化とcaspase3、8の活性化が認められた。
また、IFN受容体からのシグナルの影響を調べるため、以下の実験を行った。PC3細胞を約1×105cells/wellの密度で6穴プレートに播種し、24時間後、細胞をセンダイウイルスエンベロープ単独(MOI 104)、センダイウイルスエンベロープとJAK阻害剤(1μM)、センダイウイルスエンベロープと抗IFN受容体抗体(20μg/ml)の3グループに分け、まずJAK阻害剤および抗IFN受容体抗体による前処置を3時間行った後、更にセンダイウイルスエンベロープと24時間反応させた(MOI 104)。この後PBSで2回洗浄し、細胞を回収し、lysis bufferで融解した。これに等量のサンプルバッファーを加えた後、細胞融解液を10分間煮沸した。このサンプルを実施例と同様のSDS−PAGEとウェスタンブロット法を用いてpSTAT1(Ser727:Santa Cruz,CA,USA)、caspase3、8、βアクチン(IMG−5142A:IMAGENEX,CA,USA)について蛋白発現を解析した。その結果を図6(B)に示す。センダイウイルスエンベロープ投与前にJAK阻害剤を処置するとSTAT1のリン酸化が消失し、caspase3,8の発現も減少した。センダイウイルスエンベロープ投与前に抗IFN受容体抗体を処置するとSTAT1のリン酸化が減少し、caspase3、8の発現も減少した。
次に、PC3細胞を約1×105cells/wellの密度で6穴プレートに播種し、24時間後、細胞をJAK阻害剤(1μM)による前処置1時間の有無に分け、センダイウイルスエンベロープと反応させた(MOI 104)。更に24時間培養し、PBSで2回洗浄してアネキシンV(5μl)とプロピディウムイオダイド(PI)(2μl)を含む染色溶液に再懸濁し、暗所で15分間、室温で処置し、フローサイトメーターを使って解析した。その結果を図6(C)に示す。センダイウイルスエンベロープ投与で上昇が認められたアネキシンV陽性細胞は、JAK阻害剤による前処置によって減少した。これらにより、センダイウイルスエンベロープはJAK−STAT経路を活性化してカスパーゼを活性化し、アポトーシスを誘導することが明らかになった。
使用した動物については、5〜6週齢雄C.B−17/IcrCrj−SCIDマウスは、Charles River Inc.(Yokohama,Japan)から購入した。PC3 cells(5×106cells)をPBS100μlに再懸濁し、5〜6週齢雄C.B−17/IcrCrj−SCIDマウスの背中に、皮内注射により投与した。癌が直径約4−6mmに成長したら、手術後10、13、16日目にセンダイウイルスエンベロープ(5,000HAU in a total volume of 100ml)もしくはPBS100μlを腫瘍内注射した。癌体積はノギスを用いて盲目検査により測り、以下の公式により計算した:tumor volume(mm3)=length×(width)2/2。その結果を図7(A)に示す。センダイウイルスエンベロープ群では、著しく腫瘍増殖が阻害されたが、コントロールのPBS群ではその効果は認められなかった。腫瘍移植後41日目のセンダイウイルスエンベロープ治療群とPBS治療群の写真を図7(B)に示す。これらにより、SCIDマウスに移植したホルモン抵抗性前立腺癌細胞に対し、センダイウイルスエンベロープが腫瘍抑制効果を持つことを明らかになった。
また、抗アシアロGM−1抗体を投与することにより作成するNK細胞欠損モデルにおいて、センダイウイルスエンベロープの効果を調べた。PC3細胞を同系のSCIDマウスの背部皮内に注射し、センダイウイルスエンベロープまたはセンダイウイルスエンベロープおよびアシアロGM1抗体40μlを3日おきに3回腫瘍内注射した(day10、13、16)。この結果を図7(C)に示す。センダイウイルスエンベロープと抗アシアロGM1抗体治療群では腫瘍抑制効果の減少が観察された。
以上より推測される、ホルモン非抵抗性前立腺癌細胞に対する、センダイウイルスエンベロープのアポトーシス誘導メカニズムの概略を図8に示す。なお、センダイウイルスエンベロープの受容体となるガングリオシドGD1a(Rocheleau J.V.らBiosci Rep. 20, 139−55, 2000年、Wybenga L.EらBiochemistry 35, 9513−8, 1996年)は、PC3細胞、DU145細胞には高く発現される一方、LNCap細胞には発現されていないことが既に知られている(Ravindranath M.HらInt J Cancer.116, 368−77. 2005年)。
また、ヒト細胞(HEK293)を宿主として調製したセンダイウイルスエンベロープ凍結乾燥製剤(GEN0101)を用いた実験を行った。方法は、基本的には鶏卵を用いた方法と同じであり、宿主として、鶏卵の変わりにヒト細胞(HEK293)を用いた。精製後、常法に従って凍結乾燥製剤化したものを用いた。これに対しては、センダイウイルスエンベロープの単位としてノイラミニダーゼ活性(mNAU)を用いた(HAU、mNAUの変換についてはおおよそHAU/mNAU=5〜3)。
ホルモン抵抗性のヒト前立腺癌細胞株(PC3)をSCIDマウスに皮内移植した担癌動物モデルに対し、GEN0101(1,000mNAU)を4日に1回の間隔で計3回腫瘍内投与した場合(試験ア)と、7日に1回の間隔で計2回腫瘍内投与した場合(試験イ)の両条件における腫瘍増殖抑制効果を検討した。実験開始日(Day0)に、対数増殖期のヒトPC3細胞をトリプシン処理し、RPMI1640(インビトロジェン株式会社)で洗浄したのち、RPMI1640とマトリゲル(日本ベクトン・ディッキンソン株式会社)の2:1混合液に分散し、移植用の細胞懸濁液を調製した。ネンブタール(大日本住友製薬株式会社)麻酔下の6週齢のC.B−17/lcr−scid/scid Jcl雄マウス(日本クレア株式会社)26匹に対し、右側背部の体毛をバリカンで刈り、個体あたり2.0×106個の細胞を皮内に移植した。腫瘍細胞移植後4日目(day4)に動物20匹を選別し、各群の腫瘍体積平均値がほぼ均一になるよう層化無作為抽出法により4群に分け、さらに試験ア、イにおける投薬群(GEN0101)および対照群(溶媒投与群)に無作為に割り付けた(n=5)。1,000mNAUのGEN0101または溶媒(5%トレハロース溶液)の投与は、試験Aではday4、day8およびday12の計3回、試験Bでは細胞移植後day4およびday11の計2回それぞれ行った。各投与日において、麻酔気化器を用い気化したフォーレン(アボットジャパン株式会社)を満たした麻酔箱に、一定時間動物を入れた。麻酔箱から取り出した直後の動物の腫瘍内に、1−mLシリンジ(テルモ株式会社)と30G注射針(日本ベクトン・ディッキンソン株式会社)を用いて、GEN0101または溶媒のみを0.1mL投与した。投薬開始日から実験最終日(Day48)までの間、腫瘍体積および体重変化率をモニターした。
なお、腫瘍体積および体重変化率は以下の式により算出した。
腫瘍体積(mm3)=[短径(mm)]2×長径(mm)/2
体重変化率(%)=100×[(各測定日の体重/群分け時の体重)−1]
薬効の評価項目はday48における腫瘍体積とし、対照群と投薬群の差を統計学的に検定した。試験ア、イともに先ずF検定により等分散性の検定を行い、等分散の場合はStudentのt検定を、不等分散の場合はWelchのt検定をそれぞれ実施した。検定は全て両側検定で行い、有意水準はα=0.05またはα=0.01とした。
投薬開始日(day4)からday48までの各試験群の腫瘍体積、体重変化率の平均値およびそれらの標準誤差の推移を試験アについては図9、試験イについては図10に示す。試験アおよび試験イ共に、Day19以降、対照群では平均腫瘍体積が著明に増大したのに対し、投薬群では明瞭な増加の傾向を示さず観察期間を通じて低値で推移した(図9A、図10A)。観察終了日(day48)の時点で、投薬群に目視による腫瘍の識別が容易でない個体もみられた(データ示さず)。Day48における投薬群の平均腫瘍体積は、試験アでは対照群の8.0%、試験イでは対照群の9.5%であり、いずれの試験においても、対照群と投与群との間の差は統計学的に有意であった(p<0.05[試験ア],p<0.01[試験イ])。いずれの試験においても、観察期間を通じて体重増加に対する投薬の影響はほとんど認められなかった(図9B、図10B)。
以上より、1,000mNAUのGEN0101を腫瘍移植後4日目(day4)より4日に1回の間隔で計3回腫瘍内投与した場合、およびday4より7日に1回の間隔で計2回腫瘍内投与した場合の両用法において有意な薬効が示された。また、体重増加に対する投薬の影響はほとんど認められないことが明らかになった。
被験物質として、HVJ−Eの凍結乾燥製剤(ジェノミディア(株)、ロット番号:CC7−13)を用いた。投与に際しては、注射用水(大塚製薬工場(株)、ロット番号:K7C75)により凍結乾燥製剤を溶解し40000HAU/mLとした後、終濃度400HAU/mL、または4000HAU/mLになるように5%トレハロース溶液(ジェノミディア(株)、ロット番号:GP29)で希釈し、それぞれDFD−40、DFD−400とした。被験物質は投与当日に調製し、氷上で保存ののち注射筒に充填し、投与まで常温で1分間静置した。対照物質として、5%トレハロース溶液(ジェノミディア(株)、ロット番号:GP29)を用いた。以下、5%トレハロース溶液をTSと記載する。
B16/BL6細胞株移植用動物として6週齢のC57BL/6J雌性マウス、70匹を日本チャールスリバー(株)から購入し、耳パンチ法により個体識別した。また、群分け前は動物入荷日、系統、性別、個体識別番号を、群分け後は試験番号、動物入荷日、系統、性別、試験群、動物番号、個体識別番号を飼育ケージのラベルに記載した。馴化期間は動物入荷日から8日間とし、馴化期間中、全個体の一般状態(外観的異常の有無、摂餌・摂水の状態など)を観察した。ポリカーボネート製のマウス用ケージ(日本クレア(株)、縦13.6×横20.8×高さ11.5cm)にオートクレーブ滅菌済み床敷き((株)イワクラ)を入れ、馴化期間および実験期間中のいずれの期間も1ケージにつき1匹のマウスを収容した。飼育室の温度は23±2℃、湿度は55±10%、換気回数は10〜15回/時間(オールフレッシュ・エアー方式)、照明時間は7:00〜19:00とした。ケージを収納するラックについては、土日祝日を除き毎日、消毒液(ピューラックス(6%次亜塩素酸ナトリウム、(株)オーヤラックス)を300倍希釈した液)を用いて拭き、床も掃除後に消毒液で拭いた。飼料は固形飼料(CRF−1、オリエンタル酵母工業(株))とし、飲水は栗東市営水道水とした。余剰動物は試験から除外し、ジエチルエーテルにより安楽死させた。
B16/BL6(マウスメラノーマ株、ID:TKG 0598、ロット番号:12−6−02)を東北大学加齢医学研究所附属医用細胞資源センターから購入し、再起培養開始後1週間以降1ヶ月以内に使用した。継代用培地は10%ウシ胎子血清(JRH Biosciences社)を含むRPMI1640(インビトロジェン社)とし、5%のCO2存在下、37℃で培養した。2日毎に継代する場合、1.5×106個の細胞を10cmの培養皿に播種した。3日毎に継代する場合は1.0×106個の細胞を10cmの培養皿に播種した。実験開始日(Day0)の午後に対数増殖期の細胞をトリプシン処理し、リン酸緩衝化生理食塩液(PBS(−)、日水製薬(株))に5.0×106個/mL(5.0×105個/0.1mL/マウス)になるように懸濁した。得られた液を移植用の細胞懸濁液とし、30Gの注射針(ベクトン・ディッキンソン社)を装着した1mLの注射筒(テルモ(株))に採取して移植した。調製後の細胞懸濁液は氷上に置き、適時、ピペット操作により攪拌しながら、60分以内に移植を完了させた。
ペントバルビタールナトリウム(ネンブタール注射液、大日本住友製薬(株))を生理食塩液(大塚製薬工場(株))で希釈し、6mg/mLの溶液とした。マウスの腹腔内に本溶液をペントバルビタールナトリウム60mg/kgの用量で投与し、麻酔した。移植部位の体毛をバリカンで刈ったのち、0.1mLの細胞懸濁液を右側背部皮内に移植した。
腫瘍細胞移植後4日(Day4)に腫瘍径を測定した。腫瘍体積が70mm3以上の個体、腫瘍細胞移植時に細胞懸濁液が漏れた個体、腫瘍細胞移植部位の近傍の皮下に黒斑が確認された個体、および腫瘍細胞移植部位に紅斑のある個体を除外し、残り全個体の腫瘍体積の平均値と標準偏差(SD)を算出した。次に、腫瘍体積が平均値±2SD以内の条件を満たした54例を決定した。これらの個体を、各群の平均腫瘍体積が均一になるように、腫瘍体積に基づいて層化無作為抽出法により6群に分けた。さらに、カードを用いてそれぞれ無作為に各試験群へ9匹ずつ振り分けた。
腫瘍細胞移植後11日(Day11)において、群間に無視できない腫瘍体積の偏りが認められたため、Day11の投与前に、Day11の腫瘍体積に基づき、再度群分けを行った。同じ物質を投与した個体各18例(試験群1および4、試験群2および5、試験群3および6)を平均体積がほぼ均一になるように腫瘍体積別に層化無作為抽出法により各2群に分け、さらにその2群ごとにカードを用いて無作為に3回投与あるいは6回投与群に振り分け6群とした。群分けを表2に示す。
腫瘍細胞移植後4日(Day4)、6日(Day6)、8日(Day8)、11日(Day11)、13日(Day13)および15日(Day15)に被験物質または対照物質を投与した。11日(Day11)、13日(Day13)および15日(Day15)には、D群、E群、F群にのみ投与した。気化器(TK−5、ニューロサイエンス(株))により2〜3%のイソフルラン(フォーレン、アボットジャパン(株))が維持されている麻酔箱の中に動物を入れ、6分間吸入麻酔した。麻酔箱から取り出した直後に、動物の腫瘍内に0.1mLの被験物質または対照物質を投与した。投与に際しては、腫瘍塊近位の皮下に注射針を刺入し、皮下を通して腫瘍に針先が到達したことを確認したのち、さらに腫瘍の中心部まで針を刺入した。最後まで抵抗を感じながらゆっくりと投与した。ただし、Day11(4回目)の投与以降において、腫瘍径が160mm3を超える個体では、腫瘍組織が生存している可能性の高い腫瘍辺縁部に投与した。
Day4、8、11、13、15、18、20、24、28、32および36に、デジタルノギス((株)ミツトヨ、CD−15)を用いて、腫瘍の短径と長径を測定した。なお、腫瘍径の測定の際、以下の3項目の基準に従った。(1)腫瘍細胞移植部位の黒斑あるいは黒色の結節を測定する。(2)痂皮等が観察された場合、当該部位が黒色でかつ原発巣と接触していれば測定範囲に含む。(3)原発巣が黒色でなくなった場合、腫瘍消失と判断する。各群とも個々の腫瘍体積を次の計算式により算出した。
腫瘍体積(mm3)=[短径(mm)]2×長径(mm)/2
統計学的解析はDay20の腫瘍体積に対して実施した。腫瘍が体重に影響を与えない最長の期間としてDay20を設定した。統計学的解析は、GraphPad PRISM 4(GraphPad Software社)を用いた。Day20の結果について、投与回数別にDunnettの多重比較検定を用いて解析した。すなわち、A群(3回投与対照群)の結果に対するB群(3回投与40HAU群)とC群(3回投与400HAU群)の結果、並びにD群(6回投与対照群)の結果に対するE群(6回投与40HAU群)とF群(6回投与400HAU群)の結果をそれぞれ検定した。検定結果が有意であった場合、投与回数による差異を、A群とD群、B群とE群、C群とF群の組み合わせについて、Holmの多重比較検定により解析した。また、用量による差異を、B群とC群、E群とF群の組み合わせについて、Holmの多重比較検定により解析した。HVJ−E腫瘍内投与後の腫瘍体積を図11に示す。B群、C群、E群、F群のいずれも、対応する投与回数の対照群に比べて低い値で推移し、腫瘍細胞移植後20日においては、対応する投与回数の対照群に比べて有意に低い腫瘍体積であった。一方、3回投与と6回投与のいずれにおいても、40HAU群と400HAU群の間に差は認められなかった。また、40HAUと400HAUのいずれの用量においても、3回投与群と6回投与群の間に差は認められなかった。検定結果を表3にまとめて示す。
各群とも実験終了日までの生存率を次の計算式により算出した。死亡日については、正午以前に死亡した場合は当日の死亡とみなし、それ以降に死亡した場合は翌日の死亡とみなした。統計学的解析は、Kaplan−Meier法により生存率グラフを作成した後、投与回数別に、Logrank検定を用いて行った。多重補正はHolm法に従った。生存率は、下記の式にしたがって求めた。
生存率(%)=100×(各群の生存例数)/(Day11の各群の例数)
D群においてのみ、5回目投与後1日以内に2個体が死亡した。死亡原因は特定できなかったが、大きくなった腫瘍内に薬液を投与することによるストレスが、ショックのような何らかの致死性反応を引き起こした可能性がある。死亡した2個体のデータは、解析対象から除外した。HVJ−E腫瘍内投与後の生存曲線を図12に示す。3回投与では、C群(400HAU群)において、対照群に比べて生存期間の延長は認められなかったが、B群(40HAU群)では有意な生存期間の延長が認められた。一方、6回投与では、E群(40HAU群)、F群(400HAU群)のいずれも対照群に比べて有意な生存期間の延長が認められた。Logrank検定結果を表4に示す。
入荷翌日(Day −7)、腫瘍細胞移植当日(Day0)、および腫瘍体積測定日(Day4、8、11、15、18、20、24、28、32および36)に、電子天秤(研精工業(株)、GX−2000)を用いて測定した。測定結果はプリンター((株)エー・アンド・デイ、AD−8121)で印字した。各群とも個々のDay4以降の体重変化率を次の計算式により算出した。
体重変化率(%)=100×(各測定日の体重−Day4の体重)/(Day4の体重)
Day4(初回群分け)以降Day11までの体重変化率は、各群とも、体重が一過的に減少する個体が認められたものの、体重変化率の平均値からは、全体傾向として顕著な体重の増減は認められず、群間での明らかな差も認められなかった。Day12以降の体重変化率については、Day20までは全体傾向として顕著な体重の増減は認められず、群間での明らかな差も認められなかった。Day20以降では、各群とも、実験期間を通じて体重変化率の平均値が増加し、体重増加の傾向がみられた。図13にDay15からDay36までの各群の体重変化率を示す。
本出願は、日本で出願された特願2008−237102(出願日:平成20年9月16日)を基礎としており、その内容はすべて本明細書に包含されるものとする。
Claims (14)
- 野生型センダイウイルスエンベロープを有効成分として含有する、前立腺癌治療・予防剤。
- NK細胞もしくはアシアロGM1陽性細胞の活性化または腫瘍細胞からのインターフェロンαもしくはβの産生誘導をもたらすことを特徴とする、請求項1に記載の治療・予防剤。
- 前立腺癌のアンドロゲン感受性が一部または完全に低減されている、請求項1または2に記載の治療・予防剤。
- 前立腺癌がホルモン抵抗性である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の治療・予防剤。
- 前立腺癌に直接投与されることを特徴とする、請求項1〜4のいずれか1項に記載の治療・予防剤。
- 前立腺癌に直接注射されることを特徴とする、請求項5記載の治療・予防剤。
- 他の癌治療方法と併用されることを特徴とする、請求項1〜6のいずれか1項に記載の治療・予防剤。
- 他の癌治療方法が、投薬、内分泌療法、放射線療法、化学療法および免疫療法からなる群より選択される、請求項7記載の治療・予防剤。
- 内分泌療法の適用履歴を有する前立腺癌患者に投与されることを特徴とする、請求項8記載の治療・予防剤。
- 内分泌療法の適用履歴を有する前立腺癌患者が、アンドロゲン感受性が一部または完全に低減された前立腺癌を有する、請求項9記載の治療・予防剤。
- 内分泌療法の適用履歴を有する前立腺癌患者が、ホルモン抵抗性前立腺癌を有する、請求項9記載の治療・予防剤。
- 前立腺癌の治療・予防剤を製造するための野生型センダイウイルスエンベロープの使用。
- 野生型センダイウイルスエンベロープを有効成分として含有する、前立腺癌細胞のアポトーシス誘導剤。
- 前立腺癌細胞のアポトーシス誘導剤を製造するための野生型センダイウイルスエンベロープの使用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010529778A JP5547640B2 (ja) | 2008-09-16 | 2009-09-16 | 前立腺癌の治療・予防剤 |
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2008237102 | 2008-09-16 | ||
JP2008237102 | 2008-09-16 | ||
JP2010529778A JP5547640B2 (ja) | 2008-09-16 | 2009-09-16 | 前立腺癌の治療・予防剤 |
PCT/JP2009/066195 WO2010032764A1 (ja) | 2008-09-16 | 2009-09-16 | 前立腺癌の治療・予防剤 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2010032764A1 JPWO2010032764A1 (ja) | 2012-02-09 |
JP5547640B2 true JP5547640B2 (ja) | 2014-07-16 |
Family
ID=42039588
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010529778A Active JP5547640B2 (ja) | 2008-09-16 | 2009-09-16 | 前立腺癌の治療・予防剤 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8691212B2 (ja) |
EP (1) | EP2345415B1 (ja) |
JP (1) | JP5547640B2 (ja) |
ES (1) | ES2532808T3 (ja) |
WO (1) | WO2010032764A1 (ja) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2519763C9 (ru) | 2012-11-26 | 2015-04-27 | Ольга Вячеславовна Матвеева | Метод иммунотерапии онкологических заболеваний и фармацевтические композиции на основе онколитического вируса сендай |
BR112015015045A8 (pt) * | 2012-12-21 | 2018-01-23 | Ottawa Hospital Res Inst | partículas derivadas de vírus não replicante e respectivos usos. |
ES2930099T3 (es) | 2016-11-01 | 2022-12-05 | Univ Osaka | Agente anticancerígeno que comprende HVJ-E y un anticuerpo neutralizante contra PD-1 |
JP6799296B2 (ja) | 2016-12-06 | 2020-12-16 | 国立大学法人大阪大学 | 新規プリオノイド病用治療薬 |
WO2022054878A1 (ja) * | 2020-09-11 | 2022-03-17 | 日産化学株式会社 | エンベロープを有するウイルスの付着が抑制された器具 |
WO2022059703A1 (ja) * | 2020-09-16 | 2022-03-24 | 国立大学法人大阪大学 | がん治療用医薬、免疫賦活剤および抗がん物質のスクリーニング方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH09503995A (ja) * | 1993-04-30 | 1997-04-22 | ローレンス,ロバート,エム. | ウイルスを用いる癌の処置および検出方法 |
WO2005095613A1 (ja) * | 2004-03-30 | 2005-10-13 | Genomidea Inc. | Rad51の発現抑制剤、該発現抑制剤を有効成分として含む医薬、及びその使用 |
WO2006001120A1 (ja) * | 2004-06-24 | 2006-01-05 | Dnavec Research Inc. | マイナス鎖rnaウイルスを含む抗癌剤 |
JP2008519590A (ja) * | 2004-11-12 | 2008-06-12 | バイエル・シエーリング・ファーマ アクチエンゲゼルシャフト | 組換えニューカッスル病ウィルス |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NZ224422A (en) * | 1987-05-05 | 1990-11-27 | Molecular Eng Ass | Composition adapted for intranasal immunisation against viral infection comprising a glycoprotein complexed with a lipid |
US5631237A (en) | 1992-12-22 | 1997-05-20 | Dzau; Victor J. | Method for producing in vivo delivery of therapeutic agents via liposomes |
HUP0003911A3 (en) * | 1997-10-09 | 2007-11-28 | Pro Virus | Treatment of neoplasms with viruses |
US6472375B1 (en) * | 1998-04-16 | 2002-10-29 | John Wayne Cancer Institute | DNA vaccine and methods for its use |
US6432925B1 (en) * | 1998-04-16 | 2002-08-13 | John Wayne Cancer Institute | RNA cancer vaccine and methods for its use |
EP1170363B1 (en) | 2000-02-02 | 2007-11-21 | Kaneda, Yasufumi | Virus envelope vector for gene transfer |
JP3942362B2 (ja) | 2000-02-02 | 2007-07-11 | アンジェスMg株式会社 | 遺伝子導入のためのウイルスエンベロープベクター |
JP2002006578A (ja) | 2000-06-20 | 2002-01-09 | Minolta Co Ltd | カラー画像形成装置 |
JP2002065278A (ja) | 2000-08-31 | 2002-03-05 | Anges Mg Inc | Hvjの融合タンパク質を含有する遺伝子移入ビヒクル |
EP1420065A4 (en) | 2001-08-02 | 2005-03-09 | Anges Mg Inc | PROCESS FOR PRODUCING INACTIVE VIRAL ENVELOPES |
JPWO2003092738A1 (ja) * | 2002-04-30 | 2005-09-08 | 株式会社ディナベック研究所 | ヘマグルチニン活性を低下させた薬剤または遺伝子運搬組成物 |
AU2003280604A1 (en) | 2002-11-01 | 2004-05-25 | Anges Mg, Inc. | Medicinal preparation having chemotherapeutic encapsulated therein |
JP4855250B2 (ja) | 2004-03-31 | 2012-01-18 | ジェノミディア株式会社 | 抗腫瘍作用を有する組成物 |
JP2007020494A (ja) * | 2005-07-19 | 2007-02-01 | Hokkaido | 抗cea抗体を用いた標的化遺伝子治療 |
JP5102630B2 (ja) * | 2005-11-24 | 2012-12-19 | ジェノミディア株式会社 | 改変パラミクソウイルスおよびその作製方法 |
JP2008237102A (ja) | 2007-03-27 | 2008-10-09 | Meiji Seika Kaisha Ltd | 機能性複合食品およびその製造方法 |
-
2009
- 2009-09-16 WO PCT/JP2009/066195 patent/WO2010032764A1/ja active Application Filing
- 2009-09-16 JP JP2010529778A patent/JP5547640B2/ja active Active
- 2009-09-16 ES ES09814609.5T patent/ES2532808T3/es active Active
- 2009-09-16 US US13/119,148 patent/US8691212B2/en active Active
- 2009-09-16 EP EP09814609.5A patent/EP2345415B1/en active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH09503995A (ja) * | 1993-04-30 | 1997-04-22 | ローレンス,ロバート,エム. | ウイルスを用いる癌の処置および検出方法 |
WO2005095613A1 (ja) * | 2004-03-30 | 2005-10-13 | Genomidea Inc. | Rad51の発現抑制剤、該発現抑制剤を有効成分として含む医薬、及びその使用 |
WO2006001120A1 (ja) * | 2004-06-24 | 2006-01-05 | Dnavec Research Inc. | マイナス鎖rnaウイルスを含む抗癌剤 |
JP2008519590A (ja) * | 2004-11-12 | 2008-06-12 | バイエル・シエーリング・ファーマ アクチエンゲゼルシャフト | 組換えニューカッスル病ウィルス |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
JPN6009054836; 小丸 淳 他: 'ウロキナーゼ発現癌細胞を標的とした選択的腫瘍崩壊性を持つM遺伝子欠失型センダイウイルスベクターの前立' 第72回日本泌尿器科学会東部総会記録集 , 20080315, p.426 * |
JPN6009054838; 喜納 宏昭 他: '前立腺癌遺伝治療をめざした新しいOncolyticセンダイウイルスベクターの開発' 第64回日本癌学会学術総会 , 20050815, p.434 * |
JPN6009054840; 坪庭 直樹 他: 'HVJ-リポソーム法を応用した前立腺癌細胞に対する自殺遺伝子療法の検討' 第89回日本泌尿器科学会総会 , 20010220, p.322 * |
JPN6009054842; 喜多 正和 他: '前立腺肥大患者と前立腺癌患者のインターフェロン産生能' 京都パストゥール研究所研究報告 No.2, 1988, pp.9-14 * |
JPN6009054844; 金田 安史: '不活性化Sendai virusによるがん免疫療法の可能性' 血液・腫瘍科 Vol.55 , No.3, 2007, pp.346-353 * |
JPN7013004255; 黒岡 正之: '不活化センダイウイルス粒子を用いた抗腫瘍免疫療法の展開' ウイルス Vol.57, No.1, 2007, p.19-28 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPWO2010032764A1 (ja) | 2012-02-09 |
US20110223148A1 (en) | 2011-09-15 |
EP2345415A4 (en) | 2012-11-14 |
US8691212B2 (en) | 2014-04-08 |
ES2532808T3 (es) | 2015-03-31 |
EP2345415A1 (en) | 2011-07-20 |
EP2345415B1 (en) | 2015-01-21 |
WO2010032764A1 (ja) | 2010-03-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20230338251A1 (en) | Method of treating cancer | |
RU2652296C2 (ru) | Композиция назальной вакцины против гриппа | |
JP6095227B2 (ja) | 新生物(腫瘍)を治療するための免疫原性組成物及び方法。 | |
JP5547640B2 (ja) | 前立腺癌の治療・予防剤 | |
JP4855250B2 (ja) | 抗腫瘍作用を有する組成物 | |
US20060153808A1 (en) | Cancer immunotherapy incorporating p53 | |
US6326356B1 (en) | Suppression of neu overexpression using a mini-E1A gene | |
ES2770073T3 (es) | Uso terapéutico de proteínas morfogenéticas óseas | |
KR20180120204A (ko) | 공기 매개 병원체 및 자극물질에 대한 보호용 조성물 및 방법 | |
JP5807788B2 (ja) | ニューカッスル病ウイルスの新規クローン、その作製及び癌治療への応用 | |
Li et al. | mRNA vaccine in cancer therapy: Current advance and future outlook | |
JP2018526460A (ja) | 急性骨髄性白血病の処置のためのダクチノマイシン組成物および方法 | |
CN116710118A (zh) | 病毒性呼吸道感染的治疗方法 | |
ES2871051T3 (es) | Una composición que comprende PIC para el tratamiento del cáncer | |
US20220211663A1 (en) | Nano co-delivery of quercetin and alantolactone promotes anti-tumor response through synergistic immunogenic cell death for microsatellite-stable colorectal cancer | |
US9526779B2 (en) | Method for cancer immunotherapy and pharmaceutical compositions based on oncolytic non-pathogenic Sendai virus | |
JP4746877B2 (ja) | 不活性化されたセンダイウイルスエンベロープを有効成分とする抗癌剤 | |
ES2896255T3 (es) | Nuevo agente terapéutico para enfermedades por prionoides | |
US20090233848A1 (en) | Pea15 as a Tumor Suppressor Gene | |
TW202430206A (zh) | 組合疫苗 | |
EP1842921B1 (en) | Recombined adenovirus p53 preparation for treating tumor | |
US20020169126A1 (en) | Compositions and methods for inactivating the Akt oncogene and/or activating the p38 pro-apoptotic gene | |
KR20120098351A (ko) | 인터페론 수용체 유전자를 포함하는 조류독감 예방용 조성물 | |
Qadir | Historical development of gene therapy | |
JP2011160683A (ja) | Il−2含有hvj−eベクター及びそれを含む脳腫瘍治療剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120725 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20120725 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20131126 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140124 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20140127 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140225 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140313 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140422 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140515 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5547640 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |