JP4955779B2 - （１ｒ，２ｓ，５ｓ）−ｎ−［（１ｓ）−３−アミノ−１−（シクロブチルメチル）−２，３−ジオキソプロピル］−３−［（２ｓ）−２−［［［（１，１−ジメチルエチル）アミノ］カルボニル］−アミノ］−３，３−ジメチル−１−オキソブチル］−６，６−ジメチル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキサミドを調製するための方法 - Google Patents

Description

本発明は、ＨＣＶプロテアーゼ阻害剤として活性を有すると示された式Ｉの化合物の調製方法に関する。本発明は、式Ｉの化合物を調製するのに有用な中間化合物を調製するための方法にも関する。

このセクションまたは本願の任意のセクションにおけるいずれの刊行物の識別（ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ）も、そのような刊行物が本発明に対する従来技術であることを認めるものではない。

式Ｉの化合物である、（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−３−アミノ−１−（シクロブチルメチル）−２，３−ジオキソプロピル］−３−［（２Ｓ）−２−［［［（１，１−ジメチルエチル）アミノ］カルボニル］−アミノ］−３，３−ジメチル−１−オキソブチル］−６，６−ジメチル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキサミドを作製する方法は、特許文献１（’０６６特許）の第４４８欄から始まる実施例ＸＸＩＶに記載されている。式Ｉの化合物の調製についての追加の方法は、２００５年１１月１０日に公開された、特許文献２、および２００５年３月１７日に公開された、特許文献３に記載されている。

一般に、式Ｉの化合物の調製方法は、スキームＩに例示される。

スキームＩによれば、式Ｉの化合物は、２，６ルチジンと式Ｉａの化合物のアセトニトリル溶液を、式Ｉｂの化合物、エチル［（３−ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ−ＨＣｌ）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢｔ）を含有するアセトニトリル溶液で処理することにより、好ましくは、公開された特許文献３に例示されているように、式Ｉａの化合物を式Ｉｂの化合物とカップリングさせることによって調製される。カップリング反応が完了した後、ステップ１によって提供される反応混合物は、メチル−第三ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）を添加し、ＨＣｌでｐＨを調製し、炭酸水素ナトリウムで抽出し、有機溶液を濃縮することによって後処理される。次いで、この濃縮物は、アセトニトリルで希釈され、再濃縮され、次いで水酸化リチウム水溶液で処理され、その後にＨＣｌ／酢酸イソプロピル溶液で処理されて、遊離酸が遊離され、最後にＬ−α−メチルベンジルアミンで処理されて、カップリングされた生成物のＩｃ塩形態が沈殿する。ここで「塩」は、式１ｆ（Ｌ−α−メチルベンジルアミン）

の対イオンである。

スキームＩに例示したように、式Ｉの化合物は、２つのプロセスのうちの１つを使用して、式Ｉｃの化合物から提供される。ステップ２’ａおよび２’ｂに示した、３ステップ手順である、一プロセスでは、遊離酸は、式Ｉｃの化合物から生成される（酸で処理し、引き続いてＬ−α−メチルベンジルアミン対イオンを除去することによって）。Ｉｃの遊離酸形態は、アミンＩｄ’とカップリングされ、その後にカップリングされた生成物の酸化が行われる。

ステップ２としてスキームＩに示した、代替プロセスでは、化合物Ｉｃの遊離酸形態は、アミンＩｄとカップリングされることによって、式Ｉの化合物が直接提供される。したがって、’０６６特許を参照すると、ステップ２のカップリングプロセスは、化合物Ｉｃの遊離酸形態のＤＭＦ／ＣＨ_２Ｃｌ_２溶液を、ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、およびＮ−メチルモルホリンの存在下、アミンＩｄ’で処理してカップリングされた生成物を提供することによって実施することができる。カップリング反応が完了した後、反応混合物は濃縮され、ＨＣｌ水溶液で処理され、水層がジクロロメタンで抽出される。次に、ジクロロメタン抽出物は、ＮａＨＣＯ_３水溶液、ＨＣｌ水溶液、およびブラインで洗浄され、ＭｇＳＯ_４で乾燥され、真空下で乾燥されて固体になる。次いで、カップリングされた生成物のアルコール官能基は、酸化されて式Ｉの化合物が提供される。酸化は、ジクロロ酢酸の存在下、混合されたトルエン／ＤＭＳＯ中で、ＥＤＣＩで処理することによって実施することができる。

前述によれば、スキームＩを使用して式Ｉの化合物を調製するための以前の方法では、式Ｉｃの中間化合物を形成するために、式ＩａとＩｂの化合物をカップリングする第１のアミド化反応において、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを使用することが必要である。ＨＯＢｔは、反応性固体として分類されているので、この物質の貯蔵と輸送は規制されており、商業的規模製造におけるその使用には、取扱いと貯蔵に困難が伴い、したがって、これが使用されるステップの数を最小限にすることが望ましい。さらに、式Ｉｃの化合物の遊離酸形態を生成する場合、反応効率を改善するために、溶媒蒸留ステップおよび／または溶媒交換ステップが必要であり、これらのいずれによっても遊離酸分解が増大する。さらに、スキームＩのプロセスでは、引き続くプロセスステップにおいて使用することができる、十分に純粋な形態での中間体Ｉｃを提供するために、α−メチルベンジルアミン塩の形成が利用されるが、Ｌ−α−メチルベンジルアミン対イオンは、単離溶媒、例えば、イソプロピルアセテートと反応することによってＮ−アセチル−α−メチルベンジルアミン不純物を形成することが判明している。さらに、Ｌ−α−メチルベンジルアミン対イオンは、引き続くカップリング反応において式ＩｄとＩｄ’のアミンと競合し、対象とする反応条件下で望ましくない副生成物を形成することが判明している。したがって、そのような処理スキームが使用される場合、塩中間体が遊離酸に変換されるとき、第２カップリング反応を実施する前に、アミンを遊離酸から分離しなければならない。

米国特許第７，０１２，０６６号明細書 米国特許出願公開第２００５／０２４９７０２号明細書 米国特許出願公開第２００５／００５９８００号明細書

必要とされているのは、ＨＯＢＴの使用を最小限にし、スキームＩに例示した第２カップリングステップ（ステップ２）を実施するための中間化合物Ｉｃの遊離酸形態を再生成する必要性を取り除く、式Ｉの化合物を提供するための方法である。

例えば、本発明は以下の項目を提供する：
（項目１）
式Ｉの化合物

を提供するための方法であって、
（ｉ）少なくとも１つのペプチドカップリング試薬と、三級アミン、三級アミド、モルホリン化合物、およびこれらの２つ以上の混合物から選択される、塩基性窒素原子を有する少なくとも１つの試薬の存在下で、式Ｉｃの化合物の三級アミン塩

を、式ＩｄおよびＩｄ’の塩化合物

から選択される化合物とカップリングさせるステップと、
（ｉｉ）ステップ（ｉ）で選択される塩化合物が式Ｉｄ’の化合物であるとき、ステップ（ｉ）で生成される化合物を酸化させることによって、式Ｉの化合物を得るステップと
を含む方法。
（項目２）
ステップ（ｉ）が、酢酸エチル、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、およびＮ−メチルピロリジニン（ＮＭＰ）、およびこれらの２つ以上の混合物から選択される極性有機溶媒中で実施される、項目１に記載の方法。
（項目３）
式Ｉｃの化合物中の対イオンＲ _３ ＮがＮ，Ｎ−ジメチルシクロヘキシルアミンである、項目１または２に記載の方法。
（項目４）
ペプチドカップリング試薬が、（ｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含む酢酸エチル中のＨＯＢｔ一水和物、（ｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、ＮＭＰを含む酢酸エチル中のＨＯＢｔ一水和物、（ｉｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）を含む酢酸エチル中の水湿潤性ＨＯＢｔ、（ｉｖ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）を含む酢酸エチル中のＤＭＡＰ、（ｖ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、ＤＭＦを含む酢酸エチル中のＤＭＡＰ、（ｖ）ＤＭＦを含む酢酸エチル中のカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、（ｖｉ）ＤＭＦを含む酢酸エチル中の１−クロロ−３，５−ジメトキシ−トリアジン、（ｖｉｉ）ＤＭＦを含む酢酸エチル中の１，３，５トリメトキシ−２，４，６−トリアジン、ならびに（ｖｉｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌの存在下での、酢酸エチル／ＤＭＦ混合物中の２−ヒドロキシピリジンから選択される、項目１から３のいずれかに記載の方法。
（項目５）
ステップ（ｉ）で添加される、塩基性窒素を有する追加部分が、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、トリエチルアミン、２，６−ルチジン、およびテトラメチルエチレンジアミンから選択される、項目４に記載の方法。
（項目６）
式Ｉｃの化合物を提供する方法であって、
（ａ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌ、２，６−ルチジン、および式Ｉｃａのカップリングされたアミド生成物

を含有する反応混合物を形成するための条件を提供するのに適した溶媒の存在下で、式Ｉａの化合物

を、式Ｉｂの化合物

とカップリングさせるステップと、
（ｂ）水中のＬｉＯＨ、その後に酢酸イソプロピル中のＨＣｌで、ステップ（ａ）で生成された反応混合物を順次処理することにより、前記反応混合物を後処理することによって、生成物のアセテート形態から遊離酸を遊離させるステップと、
（ｃ）ステップ（ｂ）で生成された遊離酸を、酢酸イソプロピル中の三級アミンで処理することによって、式Ｉｃの三級アミン塩を沈殿させるステップと
を含む方法をさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目７）
ステップ（ａ）で選択される溶媒がアセトニトリルである、項目６に記載の方法。
（項目８）
ステップ「ｃ」で使用される三級アミンがＮ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−シクロヘキシルアミンである、項目６または７に記載の方法。
（項目９）
カップリングステップ（ａ）で使用される、式Ｉｂの化合物の形態が、少なくとも約９０％ｅｅの式（Ｉｂ−Ｄ）

の（Ｓ，Ｒ，Ｓ）鏡像異性体を含む、項目８に記載の方法。
（項目１０）
式Ｉｂの化合物が、少なくとも約９５％ｅｅの式（Ｉｂ−Ｄ）の（Ｓ，Ｒ，Ｓ）鏡像異性体を含む、項目９に記載の方法。
（項目１１）
式Ｉｂの化合物が、少なくとも約９８％ｅｅの式（Ｉｂ−Ｄ）の（Ｓ，Ｒ，Ｓ）鏡像異性体を含む、項目９に記載の方法。
（項目１２）
式Ｉｂの化合物が、少なくとも約９９％ｅｅの式（Ｉｂ−Ｄ）

の（Ｓ，Ｒ，Ｓ）鏡像異性体を含む、項目８に記載の方法。
（項目１３）
式Ｉｃ’

の化合物。
発明の概要
本発明の一態様では、式Ｉの化合物

を提供するための方法であって、（ｉ）少なくとも１つのカップリング試薬と、三級アミン、三級アミド、モルホリン化合物、およびこれらの２つ以上の混合物から選択される、塩基性窒素原子を有する少なくとも１つの添加部分の存在下で、式Ｉｃの化合物の三級アミン塩

を、式ＩｄまたはＩｄ’の塩化合物

とカップリングさせるステップと、
（ｉｉ）ステップ（ｉ）で選択される式Ｉｄの化合物が式Ｉｄ’の化合物であるとき、カップリングステップ（ｉ）で生成される化合物を酸化させることによって、式Ｉの化合物を得るステップと
を含む方法である。

いくつかの実施形態では、カップリング反応を実施するのに、非プロトン性、極性有機溶媒を使用することが好適である。本発明のいくつかの実施形態では、酢酸エチル、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびこれらの２つ以上の混合物から選択される媒質中でカップリング試薬を用いてカップリング反応を行うことが好適であり、より好ましくは、カップリング反応溶媒は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびＮ−メチル−２−ピロリジノン（ＮＭＰ）から選択される溶媒と組み合わせた酢酸エチルである。いくつかの実施形態では、式Ｉｃの化合物の三級アミン塩中の対イオンとしてジメチルシクロヘキシルアミンを使用することによって式Ｉｃ’の化合物を提供することが好適である。

本発明のいくつかの実施形態では、場合により、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、および２−ヒドロキシピリジンから選択される、１つまたは複数の試薬とともに、エチル（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド−ＨＣｌ（ＥＤＣＩ−ＨＣｌ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、および１−クロロ−３，５−ジメトキシトリアジン（ＤＭＴ−Ｃｌ）から選択される、少なくとも１つの部分を含むペプチドカップリング試薬を使用して反応を実施することが好適である。

本発明のいくつかの実施形態では、追加の三級アミン、より好ましくは、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、トリエチルアミン（ＴＥＡ）、２，６−ルチジン、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）およびテトラエチレンジアミンから選択される三級アミンの存在下で、カップリング反応を実施することが好適である。

本発明のいくつかの実施形態では、（ｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせたＨＯＢｔ一水和物、（ｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、Ｎ−メチルピロリジノン中の水湿潤性ＨＯＢｔ、（ｉｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせたＤＭＡＰ、（ｉｖ）ＤＭＦ中のカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、（ｖ）１−クロロ−３，５−ジメトキシ−トリアジン、（ｖｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせたトリアジン、例えば、それだけに限らないが、１，３，５トリメトキシ−２，４，６−トリアジンおよび２−ヒドロキシピリジンを含むカップリング試薬から選択されるカップリング試薬を使用することが好適である。いくつかの実施形態では、Ｎ−メチルモルホリンおよびジイソプロピルエチルアミンから選択される三級アミンを添加することが好適である。

本発明のいくつかの実施形態では、本発明の方法は、式Ｉｃの化合物を形成する方法であって、
（ａ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌおよび２，６−ルチジン、および式Ｉｃａのカップリングされたアミド−エステル生成物

を形成するための条件を提供するのに適した非極性、非プロトン性溶媒、例えば、それだけに限らないが、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）、アセトニトリル（ＡＣＮ）の存在下、またはアセトニトリルおよびＭＴＢＥもしくはＥｔＯＡＣを含む混合溶媒中で、式Ｉａの化合物

を、式Ｉｂの化合物

で処理するステップと、
（ｂ）ＬｉＯＨ水溶液、その後にＨＣｌおよび酢酸イソプロピルで順次処理することにより、反応生成物を後処理することによって、生成物のカルボン酸リチウム形態から遊離酸を遊離させるステップと、
（ｃ）酢酸イソプロピル、ヘプタン類、ヘプタン、およびこれらの２つ以上の混合物から選択される溶媒中でこの遊離酸を三級アミンで処理することによって、式Ｉｃの三級アミン塩を沈殿させるステップと
を含む方法をさらに含む。

いくつかの実施形態では、ステップ「ａ」のための溶媒としてアセトニトリルを使用することが好適である。いくつかの実施形態では、ステップ「ｃ」における三級アミンとしてＮ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−シクロヘキシルアミンを使用することが好適である。

いくつかの実施形態では、少なくとも約９０％ｅｅで（１Ｒ、２Ｓ、５Ｓ）鏡像異性体を含み、より好ましくは、少なくとも約９５％ｅｅで（１Ｒ、２Ｓ、５Ｓ）鏡像異性体を含み、より好ましくは、少なくとも約９８％ｅｅで（１Ｒ、２Ｓ、５Ｓ）鏡像異性体を含む、式Ｉｂの化合物の形態を使用することが好適であり、このｅｅは、カップリング反応中で保持されることによって、同じジアステレオマー過剰率を反映する、式Ｉｃの化合物が提供される。いくつかの実施形態では、式Ｉｂの化合物の量の少なくとも約９０％が２つの鏡像異性体の混合物、すなわち、（１Ｒ、２Ｓ、５Ｓ）鏡像異性体と（１Ｓ、２Ｒ、５Ｒ）鏡像異性体を含む、式Ｉｂの化合物の形態を使用することが好適であり、この異性体の組成は、式１ｃの化合物を調製するプロセス中で保持される。いくつかの実施形態では、提供される式Ｉｂの化合物の量の少なくとも約９５％が、式１ｃの化合物を形成するためのプロセス中で、（１Ｓ、２Ｒ、５Ｒ）鏡像異性体と（１Ｒ、２Ｓ、５Ｓ）鏡像異性体の混合物を含み、より好ましくは、提供される式Ｉｂの化合物の量の少なくとも約９９％が、式１ｃの化合物を形成するためのプロセス中で、（１Ｒ、２Ｓ、５Ｓ）鏡像異性体と（１Ｓ、２Ｒ、５Ｒ）鏡像異性体の混合物を含む混合物を使用することが好適である。

本発明の別の態様は、式Ｉｃ’の化合物

を提供することである。

詳細な説明
上記、および本明細書全体にわたって使用される場合、別段の指定のない限り、以下の用語は、以下の意味を有すると理解されるものとする。

「アルキル」は、直鎖であっても分岐であってもよく、鎖中に約１から約２０個の炭素原子を含む脂肪族炭化水素基を意味する。好適なアルキル基は、鎖中に約１から約１２個の炭素原子を含有する。より好適なアルキル基は、鎖中に約１から約６個の炭素原子を含有する。分岐は、メチル、エチル、またはプロピルなどの１つまたは複数の低級アルキル基が、直鎖状アルキル鎖に結合していることを意味する。「低級アルキル」は、鎖中に約１から約６個の炭素原子を有する基を意味し、これは、直鎖であっても分岐であってもよい。用語「置換アルキル」は、アルキル基は、同じであっても異なっていてもよい、１つまたは複数の置換基によって置換することができることを意味し、各置換基は、ハロ、アルキル、アリール、シクロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルチオ、アミノ、−ＮＨ（アルキル）、−ＮＨ（シクロアルキル）、−Ｎ（アルキル）_２、カルボキシおよび−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキルからなる群から独立に選択される。適当なアルキル基の非限定例として、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ヘプチル、ノニル、デシル、フルオロメチル、トリフルオロメチルおよびシクロプロピルメチルが挙げられる。

「シクロアルキル」は、約３から約１０個の炭素原子、好ましくは、約５から約１０個の炭素原子を含む、非芳香族、単環または多環系を意味する。好適なシクロアルキル環は、約５から約７個の環原子を含有する。シクロアルキルは、同じであっても異なっていてもよく、上記に定義された通りの、１つまたは複数の「環系置換基」で場合により置換することができる。適当な単環式シクロアルキルの非限定例として、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが挙げられる。適当な多環式シクロアルキルの非限定例として、１−デカリン、ノルボルニル、アダマンチルなどが挙げられる。

「複素環」は、最大１０個の炭素原子と組み合わせて、環構造のメンバーとして、１つまたは複数のＮ、Ｓ、またはＯ原子を含有する環系を意味する。

以下の略語が、以下の説明および実施例において使用される：ＲＴ（室温）；ＴＥＡ（トリエチルアミン）；ＣＤＩ（カルボニルジイミダゾール）；ＤＩＰＥＡ（ジイソプロピルエチルアミン）；ＤＭＡＰ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン）；ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）；ＤＭＴ−Ｃｌ（１−クロロ−３，５−ジメトキシトリアジン）、ＥＤＣＩ（エチル［（３−ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミド）；ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）；ＨＯＢｔ（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）；ＩＰＡ（イソプロピルアルコール）；ＮＭＭ（Ｎ−メチルモルホリン）；ＮＭＰ（Ｎ−メチル−２−ピロリジノン）；Ａｃ（アセチル）；Ｅｔ（エチル）；ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）；ｅｑ（当量（複数も））；ＭＴＢＥ（ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル）；Ｂｏｃ（ｔ−ブトキシカルボニル）。

上述したように、式Ｉの化合物は、ＨＣＶプロテアーゼ阻害剤として有用な活性を有する。本発明者らは、式Ｉの化合物は、以下のスキームＩＩによって調製することができることを驚いたことに見出した。スキームＩＩにおいて、ステップＩｃで使用されるアミンの「Ｒ」基は、１から約２０個の炭素原子のアルキル、置換アルキル、シクロアルキルおよびアルキルシクロアルキル、および置換シクロアルキル部分から選択される。

スキームＩＩを参照すると、驚いたことに、以前の方法と比較して、カップリング反応を媒介するために１−ヒドロキシベンゾ−トリアゾール（ＨＯＢｔ）を使用することなく実施されるアミド化において、容易な高収率のアミド化カップリングが本発明の方法のステップ１、すなわち２−ｔｅｒｔ−ブチル−ウレイド−３，３−ジメチル−酪酸（式（Ｉａ）の化合物）を式（Ｉｂ）のアザビシクロ化合物にカップリングさせるステップで起こる。さらに、アセトニトリル（ＡＣＮ）またはアセトニトリルおよびＭＴＢＥもしくはＥｔＯＡＣを含む混合溶媒中でステップ１を実施することによって起こる。ＡＣＮは、出発物質と比べて約３倍から約８倍のＶ／ｗの量で使用されることが好ましい。スキームＩＩのステップ１では、三級アミンが利用されることによって、式（Ｉｃ）の化合物の塩形態が沈殿し、これは、以前の方法、例えば、Ｌ−α−メチルベンジルアミンを使用する方法で必要であったように、最初に遊離酸を再生し、塩を調製するのに使用された対イオン部分を除去することなく、引き続くカップリングステップにおいて直接使用することができる。これにより、式Ｉの化合物の多ステップ調製において、より効率的な方法、および後段階の中間体試薬のより良好な利用がもたらされる。

理解されるように、式Ｉｂの化合物は、４つの立体異性体、すなわち、（１Ｓ、２Ｒ、５Ｒ）立体異性体（化合物Ｉｂ−ＬとしてスキームＩＩＩに示されている）、（１Ｒ、２Ｒ、５Ｓ）立体異性体（示されていない）、（１Ｓ、２Ｓ、５Ｒ）立体異性体（示されていない）および（１Ｒ、２Ｓ、５Ｓ）立体異性体（化合物Ｉｂ−ＤとしてスキームＩＩＩに示されている）を有することができる。いくつかの実施形態では、存在する異性体の量の９０％超、例えば９８％超が、（１Ｓ、２Ｒ、５Ｒ）立体異性体と（１Ｒ、２Ｓ、５Ｓ）立体異性体の混合物を含み、この２つの鏡像異性体が等しい量で存在する形態での式Ｉｂの化合物を、ステップＩにおいて使用することが好適である。いくつかの実施形態では、１つの立体異性体、すなわち、（１Ｒ、２Ｓ、５Ｓ）異性体（式Ｉｂ−Ｄ）が高鏡像体過剰率、例えば、約９０％ｅｅ超、好ましくは少なくとも約９５％ｅｅ超、より好ましくは少なくとも約９８％ｅｅで存在する形態での式Ｉｂの化合物を、ステップＩにおいて使用することが好適である。鏡像体過剰率（「ｅ．ｅ．」）は、存在する各鏡像体の量の差を減じた値を存在する各鏡像異性体の量の合計で除することによって計算される、１つの鏡像異性体（例えば、Ｒ鏡像異性体）が、他の鏡像異性体（例えば、Ｓ鏡像異性体）に対して存在する程度を表す百分率である。鏡像異性体の所望の混合物について選択される式Ｉｂの化合物の形態を使用することにより、反応からカップリングされた生成物中に存在する異性体の相対量の制御が可能になる。

そのそれぞれの全体が本明細書に参照により組み込まれている、上述した米国特許第７，０１２，０６６号、および２００５年１２月２２日に出願された米国仮特許出願第６０／７５３，２１５号の優先権に基づいており、かつこの優先権を主張する同時係属出願を伴った、２００５年１１月１０日に公開された米国特許出願公開第２００５／０２４９７０２号、２００５年３月１７日に出願された同第２００５／００５９８００号、２００５年３月１７日に出願された同第２００５／００５９６４８号には、異性体の所望の混合物、または１つの特定の異性体の富化物を含有する形態での式Ｉｂの化合物を提供する方法が記載されている。

第２カップリングステップである、本発明の方法のステップＩＩでは、本発明の方法のステップＩで生成された中間体の四級アミン塩生成物、例えば、式Ｉｃの化合物と、例えば、式ＩｄおよびＩｄ’の化合物、好ましくは式Ｉｄ’の化合物とのカップリングが実施される。本発明者らは、カップリングが実施される溶媒系として、混合された酢酸エチルとＤＭＦ、または酢酸エチルとＮＭＰを使用し、この第２ステップにおいて試薬の塩形態中の対イオンとして三級アミンを選択することにより、本発明の方法で、上述した従来方法で必要であったような、生成物（Ｉｃ）の遊離酸形態を最初に再生することを必要とするのではなく、反応に塩化合物を直接利用することが可能になることを見出した。本発明の方法のステップ２は、塩基性窒素原子を有する、少なくとも１つの追加の部分と、少なくとも１つのペプチドカップリング試薬の存在下で実施される。本発明の方法の選択された条件により、式Ｉの生成物の不純物が低減される。

本方法のステップＩとＩＩの両方を一緒に使用することが有利であるが、個々のステップのそれぞれによって提供されるいくつかの利点は、個々に実行される場合に実現し、公開された方法に組み込むことができることが理解されよう。これらの処理ステップのそれぞれは、次により詳細に考察される。

ステップＩ − 第１アミド化カップリング反応
第１ステップでは、式（Ｉｂ）のアザビシクロ化合物と式（Ｉａ）の酸化合物とがカップリングされる。このカップリング反応は、１つまたは複数の２，６置換ピリジン化合物、例えば、２，６−ルチジンと、カップリング試薬、例えば、（エチル［（３−ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミド）の塩酸塩（式Ｉａ１）

の存在下で実施される。
この反応を実施するのに適した溶媒は、極性、非プロトン性、有機溶媒、例えば、アセトニトリルおよび酢酸エチル（ＥｔＯＡＣ）である。この反応は、約５℃から約３０℃の温度で実施されることが好ましい。一般に、この反応は、１当量の式Ｉａの化合物、および使用される式Ｉａの化合物の量に対して、約０．９当量から約１．１当量である量の式Ｉｂの化合物を使用して行われる。一般に、この反応では、使用される式Ｉａの化合物の量に対して、約０．５ｅｑから約２．５ｅｑの量の、１つまたは複数のピリジン塩基、および使用される式Ｉａの化合物の量に対して、少なくとも１．０５当量の量の、１つまたは複数のカップリング剤が使用される。一般に、この反応は、出発物質の完全なカップリングを保証するために４時間行われる。一般に、この反応には、ＬＣによって追跡され、反応混合物中に式Ｉａの出発化合物が約０．７５％未満しか残存していない場合、完了したとみなされる。

反応におけるカップリング剤としてＥＤＣＩを使用することが好適であるが、ＥＤＣＩの代わりに、またはＥＤＣＩに加えて他のカップリング剤、例えば、塩化ピバロイル、プロパンホスホン酸無水物および混合物（ＥＤＣＩ／ＤＭＡＰ）も使用することができる。置換ピリジン塩基として２，６−ルチジンを使用することが好適であるが、他のピリジン塩基、例えば、他の２，６アルキル置換ピリジン、トリエチルアミン、およびＮＭＭも、２，６−ルチジンの代わりに、または２，６−ルチジンに加えて使用することができることが理解されよう。

カップリング反応が進んで完了した後、反応混合物は、この反応混合物にメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを添加し、得られた混合物をＨＣｌ水溶液、その後に炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、次いで有機層を３倍に濃縮する（すなわち、初期容積の約１／３）ことによって後処理され、これは、濃縮後に主にアセトニトリルを含有している。この反応混合物は、水中の金属水酸化物塩基で引き続いて処理され、その後にＨＣｌまたは別の適当な酸、例えば、Ｈ_２ＳＯ_４で処理され、その後に、酢酸イソプロピルおよび２−メチルテトラヒドロフラン（Ｍｅ−ＴＨＦ）から選択される溶媒で処理され、それによって式Ｉｃの生成物の遊離酸形態が遊離される。

式Ｉｃの化合物の遊離酸形態を遊離した後、反応混合物は、三級アミンで処理されることによって、式Ｉｃの化合物のアンモニウム塩形態が沈殿する。スキームＩＩに示したように、三級アミンは、化合物の遊離酸官能性と相互作用し、塩中で対イオンを形成する。いくつかの実施形態では、単一成分溶媒、好ましくは酢酸イソプロピルを使用することが好適である。いくつかの実施形態では、三級アミンが溶解した溶媒と混合された抗溶媒、例えば、酢酸イソプロピル／ヘプタンを含むことが好適である。これらの実施形態では、反応混合物と三級アミン溶液の混合により、結果として式Ｉｃの化合物の塩形態が沈殿し、これは、濾過によって収集し、乾燥させてステップ２において使用することができる。いくつかの実施形態では、カップリングされた生成物を沈殿させるために、三級アミンとして、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−シクロヘキシルアミンを使用することが好適である。

ステップＩＩ − 第２アミド化カップリング反応
式Ｉの化合物を調製するための、本発明の方法の第２ステップは、ステップＩによって提供されたアンモニウム塩化合物Ｉｃと式Ｉｄの化合物および式Ｉｄ’の化合物から選択される塩化合物との間で第２カップリング反応を実施するためのものである。本発明のいくつかの実施形態では、式Ｉｄ’の化合物を利用することが好ましい。したがって、第２アミド化カップリング反応は、少なくとも１つのペプチドカップリング試薬ならびに、三級アミン、アミド、およびモルホリン化合物、およびこれらの２つ以上の混合物から選択される塩基性窒素原子を含有する１つまたは複数の試薬の存在下で、式Ｉｃの化合物を、式Ｉｄの選択された塩化合物と反応させることによって実施される。一般に、この反応は、約−１０℃から約＋３０℃、好ましくは約３０℃未満の温度で実施される。

いくつかの実施形態では、溶媒として酢酸エチルを使用することが好適である。使用することができる他の溶媒として、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメチルアセトアミド、およびアセトニトリル（ＡＣＮ）、およびこれらの２つ以上の混合物が挙げられる。本発明の方法のステップＩＩで使用するのに適したペプチドカップリング試薬として、それだけに限らないが、例えば、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ、水湿潤性および水和物の両方）、エチル［（３−ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣＩ−ＨＣｌ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、１−クロロ−３，５−ジメトキシトリアジン（ＤＭＴ−Ｃｌ）、２−ヒドロキシピリジン、およびこれらの２つ以上の組合せが挙げられる。本発明のいくつかの実施形態では、酢酸エチル、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）、およびこれらの２つ以上の組合せから選択される溶媒中で、選択されたカップリング剤（複数も）を利用することが好適である。本発明のいくつかの実施形態では、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、２，６，−ルチジン、Ｎ−メチルモルホリン、およびテトラメチルエチレンジアミンから選択される、塩基性窒素原子を含有する１つまたは複数の部分を利用することが好適である。

本発明のいくつかの実施形態では、以下の組合せ、すなわち（ｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、ＤＭＦまたはＮＭＰを含む酢酸エチル中のＨＯＢｔ一水和物、（ｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、Ｎ−メチルピロリジノンを含む酢酸エチル中の水湿潤性ＨＯＢｔ、（ｉｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、ＤＭＦまたはＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）を含む酢酸エチル中のＤＭＡＰ、（ｉｖ）酢酸エチルおよびＤＭＦ中のカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、（ｖ）ＤＭＦを含む酢酸エチル中の１−クロロ−３，５−ジメトキシ−トリアジン、（ｖｉ）１，３，５トリメトキシ−２，４，６−トリアジン、ならびに（ｖｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌを伴った、ＤＭＦを含む酢酸エチル中の２−ヒドロキシピリジンから選択される、１つまたは複数のカップリング試薬と１つの溶媒を含むカップリング試薬を使用することが好適である。いくつかの実施形態では、塩基性窒素原子を有する部分として、三級アミンジイソプロピルエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンを加えることが好適である。

一般に、使用される式Ｉｃのアンモニウム塩の量と式Ｉｄの塩化合物の量の比は、約０．７６当量のアンモニウム塩Ｉｃ：１．０当量の式Ｉｄの塩化合物から約１．０当量のアンモニウム塩Ｉｃ：１．１当量の式Ｉｄの塩化合物であり、１：１．１の比が使用されることが好ましい。一般に、使用されるカップリング剤の量は、使用される式Ｉｃのアンモニウム塩の量に基づいて、少なくとも約１．０５当量である。一般に、提供される追加の三級アミンの量は、存在する式Ｉｃの化合物の量に基づいて、約０．５当量から約２．５当量、好ましくは約０．７５当量から約２．０当量である。

式Ｉｄ’の塩化合物が使用された実施形態では、上記スキームＩを参照すると、第２ステップ（２’ｂ）が実施され、この中で付加物の−ＯＨ官能基が酸化されることによって、対応するケトンが提供され、したがって式Ｉの化合物が提供される。この酸化は、上述した特許および公開された出願の手順、例えば、米国特許出願第７，０１２，０６６号の第４５１欄、２０から２９行に記載されている手順、および代理人整理番号ＣＤ０６３６６Ｌ０１下で、２００６年１１月１３日に出願された同時係属米国出願に記載されている手順に従って実施することができる。

本方法のステップＩで使用される出発物質、および本方法のステップＩＩで使用される式Ｉｄの塩化合物は、上述した特許および公開された出願のいずれかに記載されている手順に従って調製することができる。

（実施例１）− スキームＩＩ、ステップＩによる、Ｉｃ’（Ｎ，Ｎ−ジメチルシクロヘキシルアミン塩）の調製
反応器（Ｒ−１）中に、３５１ｋｇの化合物Ｉａ、３１４ｋｇの化合物Ｉｂ，および８０７Ｌのアセトニトリルを装填した。バッチ温度は、０から１０℃に調整した。温度を０から１５℃に維持しながら、３２３ｋｇの２，６−ルチジン、その後に１２３ＬのアセトニトリルをＲ−１に装填した。３５１ｋｇのＥＤＣＩ−ＨＣｌ、その後に１２３Ｌのアセトニトリルを、５から２５℃の間で装填した。この混合物を２０から３０℃で４時間撹拌した。反応の完了は、ＨＰＬＣにより未反応化合物Ｉａが０．７５％未満であることが示されることによって確認した。１７５５ＬのＭＴＢＥ、その後に８０７ｋｇの９．９％ＨＣｌを、１５℃から２５℃の間でＲ−１に装填した。このバッチを１５分間撹拌し、少なくとも３０分間静置し、水層をＨＯＬＤ ＴＡＮＫに分離した。８０７ｋｇの９．９％ＨＣｌを、１５から２５℃でＲ−１に装填した。このバッチを１５分間撹拌し、３０分間静置し、水層をＨＯＬＤ ＴＡＮＫに分離した。２１１ｋｇの炭酸水素ナトリウム、その後に４００１Ｌの水をＲ−２に装填し、すべての固体が溶解するまで全体を撹拌した。Ｒ−２中の１４０４ＬのＮａＨＣＯ_３溶液を、１５から２５℃でＲ−１に移した。この混合物を１５分間撹拌し、少なくとも３０分間静置した。水層をＨＯＬＤ ＴＡＮＫに分離した。１４０ｋｇの塩化ナトリウムを、Ｒ−２中のＮａＨＣＯ_３溶液に装填した。Ｒ−２中のＮａＨＣＯ_３／ＮａＣｌ溶液の半分をＲ−１に移した。Ｒ−１中の全体を１５分間撹拌し、少なくとも３０分間静置した。水層をＨＯＬＤ ＴＡＮＫに分離した。Ｒ−２中のＮａＨＣＯ_３／ＮａＣｌ溶液の残りをＲ−１に移した。Ｒ−１中の全体を１５分間撹拌し、少なくとも３０分間静置した。水層をＨＯＬＤ ＴＡＮＫに分離した。Ｒ−１中のバッチを真空下で濃縮して約１０５３Ｌにした。９７ｋｇの水酸化リチウム一水和物、その後に１４０４Ｌの水をＲ−２に装填し、この混合物を、すべての固体が溶解するまで２０から３０℃で撹拌した。Ｒ−２中の水酸化リチウム溶液をＲ−１に移した。全体を２０から３０℃で３時間撹拌した。加水分解の完了は、ＨＰＬＣにより１００％の変換が示されることによって確認した。１０５３ＬのＭＴＢＥ、その後に１４０４Ｌの水をＲ−１に装填した。この混合物を２０分間撹拌し、少なくとも３０分間静置した。水層をＲ−２に分離した。有機層をＨＯＬＤ ＴＡＮＫに移した。１０５３ＬのＭＴＢＥをＲ−２に装填した。この混合物を約１０分間撹拌し、少なくとも３０分間静置した。水層をＲ−１に移した。有機層をＨＯＬＤ ＴＡＮＫに移した。２９３ｋｇの９．９％ＨＣｌ、その後に１５３０ｋｇの酢酸イソプロピルと６６０ｋｇの９．９％ＨＣｌを、２０から３０℃でＲ−１に装填した。Ｒ−１中の混合物を３０分間撹拌し、少なくとも３０分間静置した。水層をＨＯＬＤ ＴＡＮＫに分離した。３５ｋｇの塩化ナトリウム、その後に７０２Ｌの水をＲ−２に装填した。Ｒ−２中のＮａＣｌ溶液をＲ−１に移した。この混合物を、１５から２５℃で１５分間撹拌し、少なくとも３０分間静置した。水層をＨＯＬＤ ＴＡＮＫに分離した。Ｒ−１中のバッチ、その後に３０６ｋｇの酢酸イソプロピルすすぎ液を、１μｍのインラインフィルターを介してＲ−２に移した。Ｒ−２中のバッチを、真空下、３５から６０℃で濃縮して約１４０４Ｌにした。９１８ｋｇの酢酸イソプロピルをＲ−２に装填し、このバッチを、真空下、３５から６０℃で濃縮して約１４０４Ｌにした。このバッチ中の水含有量は、０．５％ｗ／ｗ未満であった。１５３０ｋｇの酢酸イソプロピルをＲ−２に装填した。バッチ温度を４３から４８℃に調整し、１０９ｋｇのＮ，Ｎ−ジメチルシクロヘキシルアミン（ＤＭＣＡ）をＲ−２に装填した。１１Ｌの酢酸イソプロピル中の４ｋｇの化合物Ｉｃ’シードをＲ−２に装填した。このバッチを５時間、４３から４８℃で１時間撹拌した。１３０ｋｇのＤＭＣＡを、４３から４８℃で２時間かけてＲ−２に装填した。１５３ｋｇの酢酸イソプロピルすすぎ液をＲ−２に装填した。このバッチを３時間かけて５から１０℃に冷却した。このバッチを遠心機で少しずつ濾過した。湿ったケーキを冷酢酸イソプロピルで洗浄し、真空下、２５℃で４時間、その後に４５℃で少なくとも８時間乾燥させた。７０６ｋｇの化合物Ｉｃ’を得た（９０％の収率）。

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（実施例２）− ＥＤＣＩ−ＨＣｌが存在する状態でのＮＭＰ中の湿潤ＨＯＢＴを使用する、スキームＩＩ、ステップ２による、式Ｉｘの化合物の調製
反応器中に８０ｍＬの酢酸エチルを反応器に装填し、その後に２０．０１ｇ（４０．４ｍｍｏｌ）のＩｃ’、および９．２０ｇ（４４．１ｍｍｏｌ、１．０９当量）のＩｄ’を装填した。追加の２０ｍＬの酢酸エチルと２０．５ｇのＮ−メチルピロリジノンを反応器中に装填した。反応器の内容物を１５℃に冷却した。さらに、３．６７ｇ（２７．１６ｍｍｏｌ、０．５９当量）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物、その後に２．９６ｇの水を装填した。Ｎ−メチルモルホリン（２．８３ｇ、２８．０ｍｍｏｌ、０．６３当量）、引き続いてエチル［（３−ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣＩ−ＨＣｌ）、（９．９８ｇ、５２．１ｍｍｏｌ、１．３０当量）を、反応混合物中に順次装填した。この反応混合物を、完了するまで（ＬＣ分析によって０．５面積％未満のＩｃ’しか残っていない）、この場合３時間、１５℃で撹拌した。

反応器温度を２０℃に上昇させ、８０ｍＬのＤＩ水、その後に４０ｍＬの９．９％塩酸水溶液を添加した。反応器内容物を２０℃で１３分間撹拌し、次いで９０分間分離させた。水層を除去し、６０ｍＬの酢酸エチルで処理した。この混合物を２０℃で２０分間撹拌し、次いで２５分間分離させた。この有機層を前述の有機層と合わせた。合わせた有機層を、８０ｍＬのＤＩ水と４０ｍＬの９．９％塩酸水溶液で処理した。この混合物を２０℃で１５分間撹拌し、次いで２８分間分離させた。水層を取り出して廃棄した。有機層を１２０ｍＬの０．４５Ｍ炭酸カリウム溶液で処理し、２０℃で２１分間撹拌し、次いで３０分間分離させた。この水層を取り出して廃棄した。次いで有機層を１２０ｍＬの０．４５Ｍ炭酸カリウム溶液で処理し、２０℃で３１分間撹拌し、次いで２８分間分離させ、引き続いて水層を取り出して廃棄した。有機層を１２０ｍＬのＤＩ水で処理し、２０℃で１５分間撹拌し、次いで層を５９分間分離させた。水層を取り出して廃棄した。有機層中の式Ｉｘの化合物のＬＣによる溶液収率は９２％である。

（実施例２ａ）
１００ｇの出発Ｉｃ’を含む同様のバッチで、式Ｉｘの化合物を含有する、得られた有機層を次に濃縮して４８６．４５ｇにした。１６２．１７ｇのこの物質（ＫＦ＝５．６％）を９２ｍＬの酢酸エチルで処理し、エバポレーションによって濃縮して９８ｍＬにし、次いで７ｍＬの酢酸エチルで処理した（ＫＦ＝３．０％）。０．７５ｍＬのＤＩ水を添加することによってＫＦを３．８％にした。この酢酸エチル溶液を、丸底フラスコ中の−１０℃のヘプタンに、シリンジポンプによって２時間かけて徐々に添加した。添加後、このスラリーを−１０℃で１５分間撹拌し、次いで濾過し、６６ｍＬ、次いで５５ｍＬの冷ヘプタンで洗浄した。白色固体をフィルターで３０分間乾燥させ、次いで室温真空乾燥器中で３日間乾燥させた。真空乾燥器の温度を、１日間７０℃に上昇させた。式の化合物の最終固体量は、３１．５１ｇであり、８９．６％の収率であった。

（実施例３）− ＥＤＣＩ−ＨＣｌが存在する状態でＨＯＢＴ一水和物を使用する、スキームＩＩ、ステップ２による式Ｉｘの化合物の調製
ＥＤＣＩ−ＨＣｌ（２４４．００ｋｇ、１２７２ｍｏｌ、１．２７当量）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（８０．００ｋｇ、５９２ｍｏｌ、０．５９当量）、および２３６．００ｋｇ（１１３１ｍｏｌ、１．１３当量）の式Ｉｄ’の化合物（スキームＩＩ、ステップ２）を反応器に装填し、ＤＭＦ（１４０７ｋｇ）および酢酸エチル（１４９２Ｌ）中に溶解させた。この反応物を６．２℃に冷却し、ジイソプロピルエチルアミン（８０．００ｋｇ、６１９ｍｏｌ、０．６２当量）を添加し、その後に５２５．００ｋｇ式Ｉｄ’の化合物（９４．６８％ｗ／ｗ、１００４ｍｏｌ、１．００当量）を固体装填物として添加した。この反応混合物を、撹拌しながら０℃から１０℃の温度で３０分間維持し、次いで１．５時間かけて２０℃から２５℃に加温し、撹拌を継続しながら２０℃から２５℃の温度で３．５時間維持した。反応温度を１５℃から２５℃に調整し、水（２４８６．５Ｌ）と酢酸エチル（３４８６．８Ｌ）を添加し、その後に３６％ＨＣｌ（２２４．０ｋｇ）を添加した。この混合物を１５分間撹拌し、次いで水層を取り出した。この水層を酢酸エチル（５４３８Ｌ）で逆抽出した。合わせた有機物を水（１９８８．５Ｌ）および３６％ＨＣｌ（７０．００ｋｇ）で処理した。この混合物を１５分間撹拌し、水層を取り出した。次いで有機層を０．４５ＭのＫ_２ＣＯ_３（水溶液）（１９９１．２Ｌの水と１２４．００ｋｇのＫ_２ＣＯ_３）で処理した。この混合物を１５分間撹拌し、水層を取り出した。有機層を０．７５ＭのＫＨＣＯ_３（水溶液）（２０１０Ｌ）で処理した。この混合物を１５分間撹拌し、水層を取り出した。有機層を０．７５ＭのＫＨＣＯ_３（水溶液）（１９３５Ｌ）で処理した。この混合物を１５分間撹拌し、水層を取り出した。有機層を水（１９８９．６Ｌ）で処理した。この混合物を１５分間撹拌し、水層を取り出した。有機層を真空下で濃縮して１５９０Ｌにし、水（１９．１Ｌ）を添加し、この混合物を２．５時間かけて−１０℃のヘプタン（７４５７．３Ｌ）に添加した。得られた固体生成物を遠心濾過によって単離し、冷ヘプタンで洗浄し、真空下、３０℃で６時間、次いで７０℃で１５時間乾燥させることによって、白色固体としての式Ｉｘの化合物を得た（４７３．５５ｋｇ、９０．４％）。

（実施例４）− ＥＤＣＩ−ＨＣｌが存在する状態でのＨＯＢＴと式１ｄ’の化合物の選択された鏡像異性体を使用する、スキームＩＩ、ステップ２による式Ｉｘの化合物の調製
２．５ｇ（１２ｍＭｏｌ．）の混合（Ｓ，ＳとＲ，Ｒ）鏡像異性体および０．２５ｇ（１．２ｍＭｏｌ．）の混合（Ｒ，ＳとＳ，Ｒ）鏡像異性体（鏡像異性体の比８７／１３、［（ＲＲ＋ＳＳ）／（ＲＳ＋ＳＲ）］）を含む式１ｄ’の化合物（スキームＩＩ、ステップ２）を、２１ｍｌの酢酸エチル中で１．０ｇの１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴ、７．４ｍｍｏｌ）と混合した。この混合物を０℃から５℃の間の温度に冷却した。この反応混合物に、２．１ｇのＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１６．２ｍｍｏｌ）、５ｍｌの１−メチル−２−ピロリジノン、および４．７ｇの式１ｃ’の化合物（９．５ｍｍｏｌ）を添加し、その後に２．８５ｇの１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ ＨＣｌ、１４．９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物の温度を、撹拌しながら０℃と１０℃の間で１５分間維持し、次いで２０℃と２５℃の間の温度に徐々に加温し、撹拌しながらその温度範囲で一晩維持した。撹拌期間の最後に、１５℃と２５℃の間の温度を維持しながら、４０ｍＬの酢酸エチルと２５ｍＬの３ＮのＨＣｌを反応混合物に添加した。層を分離した。有機層を、３ＮのＨＣｌの１５ｍｌの１アリコート、水の１５ｍｌの１アリコート、水中の１０％の炭酸カリウムの２０ｍＬの３アリコート、および水の１つの２０ｍＬアリコートで連続的に洗浄した。有機層を濃縮し、酢酸エチルを再び添加し、濃縮して乾燥させた。式Ｉｘの生成物を白色粉末として得た（３．３ｇ、８７／１３の（ＲＲ＋ＳＳ）／（ＲＳ＋ＳＲ）の比）。

（実施例５）− ＥＤＣＩ−ＨＣｌが存在する状態でのＨＯＢＴと式１ｄ’の化合物の選択された鏡像異性体を使用する、スキームＩＩ、ステップ２による式Ｉｘの化合物の調製
２．５ｇ（１２ｍＭｏｌ．）の混合（Ｓ，ＲとＲ，Ｓ）鏡像異性体および０．２５ｇ（１．２ｍＭｏｌ．）の混合（Ｓ，ＳとＲ，Ｒ）鏡像異性体（鏡像異性体の比１０／９０、［（ＲＲ＋ＳＳ）／（ＲＳ＋ＳＲ）］）を含む式１ｄ’の化合物（スキームＩＩ、ステップ２）を、２１ｍｌの酢酸エチル中で１．０ｇの１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴ、７．４ｍｍｏｌ）と混合した。この混合物を０℃から５℃の間の温度に冷却した。この反応混合物に、１．８ｇのＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１３．９ｍｍｏｌ）、５ｍｌの１−メチル−２−ピロリジノン、および４．７ｇの式１ｃ’の化合物（９．５ｍｍｏｌ）を添加し、その後に２．３５ｇの１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ ＨＣｌ、１２．２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物の温度を、撹拌しながら０℃と１０℃の間で１５分間維持し、次いで２０℃と２５℃の間の温度に徐々に加温し、撹拌しながらその温度範囲で一晩維持した。撹拌期間の最後に、１５℃と２５℃の間の温度を維持しながら、４０ｍＬの酢酸エチルと２５ｍＬの３ＮのＨＣｌを反応混合物に添加した。層を分離した。有機層を、３ＮのＨＣｌの１５ｍｌの１アリコート、水の１５ｍｌの１アリコート、水中の１０％の炭酸カリウムの２０ｍＬの１アリコート、および水の１つの２０ｍＬアリコートで連続的に洗浄した。有機層を濃縮し、酢酸エチルを再び添加し、濃縮して乾燥させた。有機層を濃縮し、酢酸エチルを再び添加し、濃縮して乾燥させた。式Ｉｘの生成物を白色粉末として得た（３．８ｇ、１０／９０の（ＲＲ＋ＳＳ）／（ＲＳ＋ＳＲ）の比）。

（実施例６）− 式Ｉｃ’の化合物のＣＤＩ処理から調製される中間体を介した、式Ｉｘの化合物の調製

式Ｉｘの化合物を、以下の手順に従って、ＣＤＩを使用するカップリング反応で生成した。
１．５３．２ｇの１Ｃ’塩（９４．３ｗｔ／ｗｔ％、５０ｇ活性）を装填する
２．１５０ｍｌ（３回）のＤＭＦを装填（ＫＦ：０．１％）する；
３．１１〜１６ｍｌのＤＩＰＥＡ（０．８〜１．２当量、ＫＦ：０．０４％）を装填し、次いで１９．２ｇ（１．１５当量）のＣＤＩを装填する；
４．バッチを室温で２〜３時間撹拌する
注：必要に応じて、反応を促進して完了させるためにより多くのＣＤＩを添加する；
５．２３．７５ｇ（１．１２当量）の１ｄ’を周囲温度で装填し、反応が完了するまで周囲温度で撹拌する；
６．バッチを１０℃に冷却し、３５０ｍｌ（７回）ＥｔＯＡｃを添加し、次いで２５０ｍｌ（５回）の水を添加する；
７．反応混合物を１５℃から２０℃で維持しながら、濃ＨＣｌを用いて水層のｐＨを約０．５に調整し、層を分離する；
８．有機層を１ＮのＨＣｌで２〜３回洗浄する；
９．有機層を２アリコートの８〜１０％Ｋ_２ＣＯ_３および／またはＫＨＣＯ_３水溶液で洗浄する；
１０．有機層を水で４回洗浄する
１１．一般に、９８．９５面積％の純度を有する式Ｉｘの化合物の８０．３％の溶液収率である有機層からアッセイかつ／または単離する。

（実施例７ａ）− ＥＤＣＩ−ＨＣｌの存在下で、カップリング剤として２−ヒドロキシピリジンを使用する、スキームＩＩによる、式Ｉｘの化合物の調製
室温の、１００ｍＬのメチルｔ−ブチルエーテルとＤＭＦの１：１混合物を含有する反応容器中に、１１．７０ｇのＥＤＣＩ−ＨＣｌ（６１．０ｍｍｏｌ、１．６２当量）、１１．３１ｇの式Ｉｄ’の化合物（５４．２ｍｍｏｌ、１．４４当量）、および２．６４ｇの２−ヒドロキシピリジン（２７．８ｍｍｏｌ、０．７４当量）を懸濁させた。ジイソプロピルエチルアミン（１２．８ｍＬ、７３．５ｍｍｏｌ、１．９５当量）をこの反応混合物に添加し、その後に２０．００ｇの固体形態での式Ｉｃ’の化合物（（９３．１％ｗ／ｗ）、３７．６ｍｍｏｌ、１．００当量）を装填した。この反応混合物を、室温（１９℃から２２℃）で一晩撹拌し、ＨＰＬＣによってモニターして完了した。撹拌期間の最後に、５０ｍＬのメチルｔ−ブチルエーテルと５０ｍＬの２．５％ＨＣｌ水溶液を反応混合物に添加した。水層を、４アリコートの５０ｍＬのメチルｔ−ブチルエーテルで逆抽出した。合わせた有機層を、１００ｍＬの２．５％ＨＣｌ（水溶液）、１００ｍＬの１％ＨＣｌ（水溶液）、１００ｍＬの水、１００ｍＬの０．４５ＭのＫ_２ＣＯ_３（水溶液）、１００ｍＬの０．７５ＭのＫＨＣＯ_３（水溶液）、および１００ｍＬの水で順次洗浄した。有機層を濃縮して１３６ｍＬにし、１０℃に冷却した。冷状態の濃縮された有機層に、２００ｍＬの０℃のヘプタンを５０分かけて添加した。得られたスラリーを５０分間撹拌し、固体を濾過によって単離し、３５ｍＬのヘプタンで洗浄した。こうして得られた固体を真空下で、７５℃で一晩乾燥させることによって、所望の生成物の約１ｇの白色固体（濾液とフラスコ壁への損失４．５９ｇ）（全収率２６．６％）を得た。

（実施例７ｂ）− ＥＤＣＩ−ＨＣｌの存在下で、カップリング剤としてＤＭＡＰを使用する、スキームＩＩによる、式Ｉｘの化合物の調製
室温の、１２０ｍＬの酢酸エチルとＤＭＦの１：１混合物を含有する反応容器中に、９．７５ｇのＥＤＣＩ−ＨＣｌ（５０．９ｍｍｏｌ、１．３５当量）、９．７９ｇの式Ｉｄ’の化合物（４６．９ｍｍｏｌ、１．２４当量）、および２．７６ｇのＤＭＡＰ（２２．６ｍｍｏｌ、０．６０当量）を懸濁させた。ジイソプロピルエチルアミン（１０．２ｍＬ、５８．６ｍｍｏｌ、１．５１当量）をこの反応混合物に添加し、その後に２０．０３ｇの固体形態での式Ｉｃ’の化合物（（９３．１％ｗ／ｗ）、３７．７ｍｍｏｌ、１．００当量）を装填した。この反応混合物を、室温（１９℃から２２℃）で１７時間撹拌し、ＨＰＬＣによってモニターして完了した。反応が完了したとき、５０ｍＬの酢酸エチルと１００ｍＬの２．５％ＨＣｌ水溶液を反応混合物に添加した。水層を、６０ｍＬの酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を、８０ｍＬの１％ＨＣｌ（水溶液）、８０ｍＬの水、８０ｍＬの０．４５ＭのＫ_２ＣＯ_３（水溶液）、８０ｍＬの０．７５ＭのＫＨＣＯ_３（水溶液）、８０ｍＬの０．７５ＭのＫＨＣＯ_３（水溶液）、および８０ｍＬの水で順次洗浄し、次いでエバポレーションによって濃縮して４７．４５ｇにした。濃縮物から結晶化したＳＳ異性体と２．７５ｍｌの水をスラリーに添加した。このＳＳ異性体は、４〜５時間以内に溶解した。有機濃縮物を、４７．５分かけて１７１ｍＬの０℃のヘプタンに添加し、０℃で３０分間撹拌した。固体がこの混合物から沈殿し、この固体生成物を真空濾過によって単離した。こうして得られた固体を真空乾燥器中で、７５℃で１８時間乾燥させることによって、１１．２ｇの式Ｉｘの化合物（５６．９％の収率、９１．０％ｗｔ／ｗｔの純度）を得た。

（実施例７ｃ）− ＥＤＣＩ−ＨＣｌの存在下で、カップリング剤として１，３，５−トリメトキシ−２，４，６トリアジンを使用する、スキームＩＩによる、式Ｉｘの化合物の調製
室温の、１００ｍＬの酢酸エチルとＤＭＦの１：１混合物を含有する反応容器中に、７．５６ｇの１，３，５−トリメトキシ−２，４，６−トリアジン（４３．１ｍｍｏｌ、１．１３当量）、および９．７９ｇの式Ｉｄ’の化合物（４６．９ｍｍｏｌ、１．２３当量）を懸濁させた。Ｎ−メチルモルホリン（４．７ｍＬ、４２．７ｍｍｏｌ、１．１２当量）をこの反応混合物に添加し、その後に２０．０１ｇの固体形態での式Ｉｃ’の化合物（（９３．９％ｗ／ｗ）、３８．０ｍｍｏｌ、１．００当量）を装填した。この反応混合物を、室温（１９℃から２２℃）で２５．５時間撹拌し、ＨＰＬＣによってモニターして完了した。反応が完了すると、５０ｍＬの酢酸エチルと１００ｍＬの１Ｍクエン酸水溶液を反応混合物に添加した。水層を、６０ｍＬの酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を、１００ｍＬの１Ｍクエン酸（水溶液）、８０ｍＬの１Ｍクエン酸（水溶液）、８５ｍＬの水、８０ｍＬの０．４５ＭのＫ_２ＣＯ_３（水溶液）、８０ｍＬの０．７５ＭのＫＨＣＯ_３（水溶液）、８０ｍＬの水、および８０ｍＬの１Ｍクエン酸（水溶液）で順次洗浄した。ＨＰＬＣ分析により、この溶液は、８４．７％の収率の式Ｉｘの化合物を含有していることが示された。

本発明を、上記に示した特定の実施形態を用いて、かつこれらととともに説明してきたが、これらの例は例示的であり、限定するものではないことを意味する。これらの多くの代案、改変、および他の変形は、当業者に明らかとなろう。すべてのそのような代案、改変、および変形は、本発明の精神および範囲内に入ることが意図されている。

Claims (12)

1. 式Ｉの化合物
   

   

   を提供するための方法であって、
   （ｉ）少なくとも１つのペプチドカップリング試薬と、三級アミン、三級アミド、モルホリン化合物、およびこれらの２つ以上の混合物から選択される、塩基性窒素原子を有する少なくとも１つの試薬の存在下で、式Ｉｃの化合物の三級アミン塩
   

   

   を、式ＩｄおよびＩｄ’の塩化合物
   

   

   から選択される化合物とカップリングさせるステップと、
   （ｉｉ）ステップ（ｉ）で選択される塩化合物が式Ｉｄ’の化合物であるとき、ステップ（ｉ）で生成される化合物を酸化させることによって、式Ｉの化合物を得るステップとを含み、
   ステップ（ｉ）が、酢酸エチル、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、およびＮ−メチルピロリジニン（ＮＭＰ）、およびこれらの２つ以上の混合物から選択される極性有機溶媒中で実施される、方法。
2. 式Ｉｃの化合物中の対イオンＲ_３ＮがＮ，Ｎ−ジメチルシクロヘキシルアミンである、請求項１に記載の方法。
3. ペプチドカップリング試薬が、（ｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含む酢酸エチル中のＨＯＢｔ一水和物、（ｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、ＮＭＰを含む酢酸エチル中のＨＯＢｔ一水和物、（ｉｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）を含む酢酸エチル中の水湿潤性ＨＯＢｔ、（ｉｖ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）を含む酢酸エチル中のＤＭＡＰ、（ｖ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌと組み合わせた、ＤＭＦを含む酢酸エチル中のＤＭＡＰ、（ｖ）ＤＭＦを含む酢酸エチル中のカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、（ｖｉ）ＤＭＦを含む酢酸エチル中の１−クロロ−３，５−ジメトキシ−トリアジン、（ｖｉｉ）ＤＭＦを含む酢酸エチル中の１，３，５トリメトキシ−２，４，６−トリアジン、ならびに（ｖｉｉｉ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌの存在下での、酢酸エチル／ＤＭＦ混合物中の２−ヒドロキシピリジンから選択される、請求項２に記載の方法。
4. ステップ（ｉ）の前記塩基性窒素原子を有する少なくとも１つの試薬が、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、トリエチルアミン、２，６−ルチジン、およびテトラメチルエチレンジアミンから選択される、請求項３に記載の方法。
5. 式Ｉｃの化合物を提供する工程をさらに含む、請求項１に記載の方法であって、該工程が、
   （ａ）ＥＤＣＩ−ＨＣｌ、２，６−ルチジン、および式Ｉｃａのカップリングされたアミド生成物
   

   

   を含有する反応混合物を形成するための条件を提供するのに適した溶媒の存在下で、式Ｉａの化合物
   

   

   を、式Ｉｂの化合物
   

   

   とカップリングさせるステップと、
   （ｂ）水中のＬｉＯＨ、その後に酢酸イソプロピル中のＨＣｌで、ステップ（ａ）で生成された反応混合物を順次処理することにより、前記反応混合物を後処理することによって、生成物のアセテート形態から遊離酸を遊離させるステップと、
   （ｃ）ステップ（ｂ）で生成された遊離酸を、酢酸イソプロピル中の三級アミンで処理することによって、式Ｉｃの三級アミン塩を沈殿させるステップと
   を含む、方法。
6. ステップ（ａ）で選択される溶媒がアセトニトリルである、請求項５に記載の方法。
7. ステップ「ｃ」で使用される三級アミンがＮ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−シクロヘキシルアミンである、請求項６に記載の方法。
8. カップリングステップ（ａ）で使用される、式Ｉｂの化合物の形態が、少なくとも９０％ｅｅの式（Ｉｂ−Ｄ）
   

   

   の（Ｓ，Ｒ，Ｓ）鏡像異性体を含む、請求項７に記載の方法。
9. 式Ｉｂの化合物が、少なくとも９５％ｅｅの式（Ｉｂ−Ｄ）の（Ｓ，Ｒ，Ｓ）鏡像異性体を含む、請求項８に記載の方法。
10. 式Ｉｂの化合物が、少なくとも９８％ｅｅの式（Ｉｂ−Ｄ）の（Ｓ，Ｒ，Ｓ）鏡像異性体を含む、請求項８に記載の方法。
11. 式Ｉｂの化合物が、少なくとも９９％ｅｅの式（Ｉｂ−Ｄ）
    

    

    の（Ｓ，Ｒ，Ｓ）鏡像異性体を含む、請求項７に記載の方法。
12. 式Ｉｃ’
    

    

    の化合物。