JP4922682B2

JP4922682B2 - 分析装置

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Publication number: JP4922682B2
Application number: JP2006180196A
Authority: JP
Inventors: 欣也内橋; 喜郎池内; 憲志成定
Original assignee: Sysmex Corp
Current assignee: Sysmex Corp
Priority date: 2006-06-29
Filing date: 2006-06-29
Publication date: 2012-04-25
Anticipated expiration: 2026-06-29
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Description

本発明は、血液分析装置などの分析装置に関するものである。

血液分析装置は、採血管に入った血液を吸引し、吸引した血液（試料）を溶血剤などの試薬と混合した測定試料を調製した上で、その測定試料を測定し、その測定結果を分析して血球数などの分析結果を得るように構成されている。
例えば、フローサイトメトリー法とよばれる方式で白血球を検出する場合、溶血剤によって赤血球が溶血されるとともに希釈された血液試料が光学検出部（フローセル）に送られる。
光学検出部では、血球にレーザ光が照射される。さらに、分析装置は、レーザ光の照射によって得られた前方散乱光と側方散乱光に基づいて、粒子の２次元分布図（スキャッタグラム）を生成する。

特許文献１には、上記のような血球分析装置が記載されている。特許文献１の血液分析装置では、前記スキャッタグラムに基づいて、白血球を分類するとともに、白血球数を算出することができる。
特開昭６３−１８７１５８号公報

本発明者らは、上記分析装置における粒子数の検出に関し、次のような問題を見出した。例えば、患者への脂肪乳剤の投与により、血液中の脂質粒子が増加すると、図１２に示すように、この脂質粒子が測定結果としてのスキャッタグラム上に表れる。したがって、このスキャッタグラムに基づいて白血球数を検出すると、脂質粒子の存在によって、実際の白血球数よりも多い数が白血球数として検出される偽性高値となる。なお、図１２は、本実施形態の分析装置によって測定したものである。

また、赤血球の膜抵抗性が高い場合、溶血剤によって赤血球が十分に溶血されない溶血不良が生じる場合がある。溶血不良の粒子も、図１３及び図１４に示すように、測定結果としてのスキャッタグラム上に現れる。したがって、このスキャッタグラムに基づいて白血球数を検出すると、溶血不良粒子の存在によって、実際の白血球数よりも多い数が白血球数として検出される偽性高値となる。なお、図１３及び図１４も、本実施形態の分析装置によって測定したものである。

本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであって、粒子数異常に対処するための新たな技術的手段を提供することを目的とする。

本発明は、血液を分析する分析装置であって、血液試料と第１試薬とが混合された第１測定試料の第１測定結果から、血液試料中の白血球に関する第１の分類を行うと共に、当該血液試料中の白血球数を検出する第１分析部と、血液試料と前記第１試薬とは異なる第２試薬とが混合された第２測定試料の第２測定結果から、血液試料中の白血球に関する第２の分類を行うと共に、当該血液試料中の白血球数を検出する第２分析部と、前記第２分析部により検出された白血球数を出力する出力部と、第１測定結果及び第２測定結果の少なくとも一方に基づいて、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じているか否かを判定する判定部と、を備え、前記出力部は、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じていると判定された場合に、前記第１分析部により検出された白血球数を出力するように構成されている。

上記本発明によれば、第２分析部により検出された白血球数に異常があれば、第１分析部により検出された白血球数が出力されるため、第２分析部による異常な白血球数を出力してしまうことを防止できる。

前記判定部は、第１測定結果における白血球の出現範囲とは異なる第１の所定範囲に出現する粒子数、及び第２測定結果における白血球の出現範囲とは異なる第２の所定範囲に出現する粒子数の少なくとも一方に基づいて、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じているか否かを判定し、前記第１の所定範囲は、第１測定結果において、前記第１試薬によって溶解された第１溶血赤血球が出現せず、かつ脂質粒子が出現する可能性のある領域であり、前記第２の所定範囲は、第２測定結果において、前記第２試薬によって溶解された第２溶血赤血球が出現せず、かつ脂質粒子が出現する可能性のある領域、又は、前記白血球の集団と第２溶血赤血球の集団とを区別するための境界線及び前記境界線の近傍を含む領域であるのが好ましい。
前記第１分析部は、前記第１測定結果に基づいて、前記血液試料中の白血球を複数の粒子集団に分類するとともに、前記複数の粒子集団に属する粒子数を前記血液試料中の白血球数として検出し、前記第２分析部は、前記第２測定結果に基づいて、前記血液試料中の白血球を前記複数の粒子集団とは異なる他の複数の粒子集団に分類するとともに、前記他の複数の粒子集団に属する粒子数を前記血液試料中の白血球数として検出するのが好ましい。

前記第１分析部による第１分類結果と、前記第２分析部による第２分類結果とに基づいて、血液試料中の白血球を５分類するように構成されているのが好ましい。

前記第１分析部は、血液試料中の白血球を複数の分類項目に分類するように構成されており、前記第２分析部は、血液試料中の白血球を、前記複数の分類項目のうちの１つに属する分類項目と他の白血球とに分類するように構成されているのが好ましい。

前記第１分析部は、血液試料中の白血球を単球、リンパ球、好中球及び好塩基球のグループ、並びに好酸球の４つに分類するように構成されており、前記第２分析部は、血液試料中の白血球を、好塩基球と他の白血球とに分類するように構成されているのが好ましい。

測定試料を光学的に測定し、互いに異なる複数の光学的情報を検出する検出部をさらに備え、前記第１分析部は、前記検出部によって測定試料を測定したときに検出された少なくとも第１の光学的情報に基づいて、血液試料中の血球に関する第１の分類を行うように構成されており、前記第２分析部は、前記検出部によって測定試料を測定したときに検出された少なくとも第２の光学的情報に基づいて、血液試料中の血球に関する第２の分類を行うように構成されているのが好ましい。

前記判定部は、白血球以外の粒子を白血球として認識することによって白血球数が多く検出される偽性高値による異常を判定するのが好ましい。
さらには、前記判定部は、測定試料に含まれる脂質粒子による白血球数の異常を判定するように構成されているのが好ましく、この場合、脂質粒子による白血球数異常に対処することができる。
前記判定部は、前記第１測定結果又は前記第２測定結果の少なくともいずれか一方から、脂質粒子による白血球数の異常を判定するように構成されているのが好ましい。

前記判定部は、白血球以外のゴースト粒子であると認識された粒子中に脂質粒子が含まれているか否かによって白血球数の異常を判定するように構成されているのが好ましい。脂質粒子が存在する場合、白血球と脂質粒子とを区別するのは必ずしも容易ではないため、白血球以外のゴースト粒子であると認識された粒子中に脂質粒子が含まれているか否かによって白血球数の異常を判定することで、比較的容易に異常を判定できる。

前記判定部は、測定試料における溶血不良による白血球数の異常を判定するように構成されているのが好ましく、この場合、溶血不良による白血球数異常に対処することができる。

前記判定部は、前記第２測定結果から、溶血不良による白血球数の異常を判定するように構成されているのが好ましい。
前記判定部は、白血球と白血球以外のゴースト粒子との区別に用いられる境界付近に存在する粒子に基づいて白血球数の異常を判定するように構成されているのが好ましい。溶血不良の粒子は前記境界付近に現れるため、白血球と白血球以外のゴースト粒子とを区別する境界付近に着目することで、溶血不良による白血球数の異常を容易に判定できる。

他の観点からみた本発明は、血液を分析する分析装置であって、血液試料と第１試薬とが混合された第１測定試料の第１測定結果から、血液試料中の白血球に関する第１の分類を行うと共に、当該血液試料中の白血球数を検出する第１分析部と、血液試料と前記第１試薬とは異なる第２試薬とが混合された第２測定試料の第２測定結果から、血液試料中の白血球に関する第２の分類を行うと共に、当該血液試料中の白血球数を検出する第２分析部と、前記第１測定結果及び第２測定結果の少なくとも一方に基づいて、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じているか否かを判定する判定部と、前記判定部により、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じていると判定された場合には、第１分析部により検出された白血球数を選択し、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じていないと判定された場合には、前記第２分析部により検出された白血球数を選択する選択部と、を備える分析装置である。

さらに他の観点からみた本発明は、試料を分析する分析装置であって、試料中の対象粒子の粒子数を検出する分析部と、検出した対象粒子の粒子数を出力する出力部と、前記分析部によって検出した対象粒子の粒子数が、脂質粒子の粒子数を含むために異常であるか否かを判定する判定部と、を備える分析装置である。
上記本発明によれば、脂質粒子の粒子数を含むために異常であるか否かを判定することができるので、脂質粒子に起因した粒子数異常に対処することができる。

さらに他の観点から見た本発明は、試料を分析する装置であって、試料中の対象粒子の粒子数を検出する分析部と、検出した対象粒子の粒子数を出力する出力部と、前記分析部によって検出した対象粒子の粒子数が、前記試料に混合された試薬によって溶解されるはずの他の粒子の粒子数を含むために異常であるか否かを判定する判定部と、を備える分析装置である。
上記本発明によれば、溶解されるはずの粒子の粒子数を含むために異常であるか否かを判定することができるので、粒子の溶解異常（例えば、溶血異常）に対処することができる。

上記発明において、前記分析部は、前記試料の測定結果に基づいて、試料中の粒子を、前記対象粒子と、前記試薬によって溶解された前記他の粒子とに分類し、前記判定部は、前記対象粒子の集団および前記試薬によって溶解された前記他の粒子の集団の両方の集団に近接する所定範囲に所定数以上の粒子がある場合に、前記分析部によって検出した対象粒子の粒子数が、前記試薬によって溶解されるはずの前記他の粒子の粒子数を含むために異常であると判定するのが好ましい。

本発明によれば、粒子数異常に対処することが可能となる。

以下、本発明の好ましい実施形態について図面に基づき説明する。
図１は、血液分析装置１を示している。この分析装置１は、血液検査を行うための多項目自動血球分析装置として構成されており、試料容器（採血管）に収容された血液試料の測定を行い、その測定結果の分析を行う。
分析装置１は、試料である血液の測定を行う機能を有する測定部２と、測定部２から出力された測定結果を分析して分析結果を得るデータ処理部３とを有して構成されている。
なお、図１では、測定部２とデータ処理部３とが別体の装置として構成されているが、両者が一体の装置として構成されていてもよい。

この分析装置１は、白血球に関する分類・計数の他、他の血球に関する分類・計数も行うことができるが、以下では、主として白血球に関する説明を行う。
図２は、分析装置２の測定部２のブロック図を示している。図２に示すように、測定部２は、血球の検出部４、検出部４の出力に対するアナログ処理部５、マイクロコンピュータ部６、表示・操作部７、血液測定のための装置機構部８を備えている。

検出部４は、白血球を検出する白血球検出部を備えている。なお、検出部は、白血球検出部の他、赤血球数及び血小板数を測定するＲＢＣ／ＰＬＴ検出部、血液中の血色素量を測定するＨＧＢ検出部、幼若球を検出するＩＭＩ検出部も備えている。
前記白血球検出部４は、光学式検出部として構成されており、具体的には、フローサイトメトリー法による検出部として構成されている。
ここで、サイトメトリーとは、細胞やその他の生物学的な粒子の物理的な性質や化学的な性質を測定することであり、フローサイトメトリーとは細い流れの中に、これらの粒子を通過させて測定を行う方法をいう。

図３は、白血球検出部４の光学系を示している。同図において、レーザダイオード４０１から出射されたビームは、照射レンズ系４０２を介してシースフローセル４０３内を通過する血球に照射される。
この白血球検出部４では、光が照射されたシースフローセル内の血球から発せされる前方散乱光、側方散乱光、側方蛍光が検出される。

ここで、光散乱は、血球のような粒子が光の進行方向に障害物として存在し、光がその進行方向を変えることによって生じる現象である。この散乱光を検出することによって、粒子の大きさや材質に関する情報を得ることができる。特に、前方散乱光からは、粒子（血球）の大きさに関する情報を得ることができる。また、側方散乱光からは、粒子内部の情報を得ることができる。血球粒子にレーザ光が照射された場合、側方散乱光強度は細胞内部の複雑さ（核の形状、大きさ、密度や顆粒の量）に依存する。したがって、側方散乱光強度のこの特性を利用することで、血球を分類（弁別）した上で、血球の数を測定することができる。

また、染色された血球のような蛍光物質に光を照射すると、照射した光の波長より長い波長の光を発する。蛍光の強度はよく染色されていれば強くなり、この蛍光強度を測定することによって血球の染色度合いに関する情報を得ることができる。したがって、（側方）蛍光強度の差によって、白血球の分類の測定その他の測定を行うことができる。

図３に示すように、シースフローセル４０３を通過する血球（白血球）から発せられる前方散乱光は、集光レンズ４０４とピンホール部４０５を介してフォトダイオード（前方散乱光受光部）４０６によって受光される。
側方散乱光は、集光レンズ４０７、ダイクロイックミラー４０８、光学フィルタ４０９、及びピンホール部４１０を介してフォトマルチプライヤ（側方散乱光受光部）４１１によって受光される。
側方蛍光は、集光レンズ４０７及びダイクロイックミラー４０８を介してフォトマルチプライヤ（側方蛍光受光部）４１２によって受光される。

各受光部４０６，４１１，４１２から出力された受光信号は、それぞれ、アンプ５１，５２，５３等からなるアナログ処理部５によって増幅・波形処理等のアナログ処理が施され、マイクロコンピュータ部６に与えられる。

マイクロコンピュータ部６は、アナログ処理部５から与えられた受光信号をデジタル信号に変換するＡ／Ｄ変換部６１を備えている。Ａ／Ｄ変換部６１の出力は、マイクロコンピュータ部６の演算部６２に与えられ、演算部６２において受光信号に対する所定の処理を行う演算が行われる。

また、マイクロコンピュータ部６は、制御用プロセッサ及び制御用プロセッサ動作のためのメモリからなる制御部６３と、解析用プロセッサ及び解析用プロセッサ動作のためのメモリからなる解析部６４とを備えている。
制御部６３は、採血管を自動供給するサンプラ（図示省略）、試料の調製・測定のための流体系などからなる装置機構部８の制御及びその他の制御を行うものである。
解析部６４は、検出部における出力を解析するためのものであり、例えば、検出部４の出力に基づいて、２次元のスキャッタグラム（未分画のもの）を生成する。解析部６４は、外部インタフェース部６５を介して、データ処理部３と接続されており、生成したスキャッタグラム等の測定結果をデータ処理部３へ送信することができる。
さらに、マイクロコンピュータ部６は、表示・操作部７との間に介在するインタフェース部６６、装置機構部８との間に介在するインタフェース部６７を備えている。
また、演算部６２、制御部６３、及びインタフェース部６６，６７は、バス６８を介して接続され、制御部６３と解析部６４とはバス６９を介して接続されている。

本実施形態の分析装置１の測定部２は、同一の血液試料に対し、白血球の測定として第１の測定（ＤＩＦＦ測定）と、第２の測定（ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定）を行うことができる。ここで、白血球は、大別して、リンパ球、単球、顆粒球に分類される。さらに、顆粒球は、顆粒の染色性によって好中球、好塩基球、好酸球に分かれる。
前記第１測定（ＤＩＦＦ測定）は、白血球を４つの集団に分画測定する４ＤＩＦＦ測定であり、具体的には、リンパ球の集団、単球の集団、好酸球の集団、並びに好中球及び好塩基球の集団に分画測定し、各集団の粒子数を計数するためのものである。

図４は、測定部２による４ＤＩＦＦ測定の流れを示している。この図４は、血液試料に第１測定（ＤＩＦＦ）用の第１試薬を混合した第１測定試料を調製し、その第１測定試料を白血球検出部４で測定する様子を示している。
図４において、採血管１１内の血液試料は、図示しない吸引ピペットからサンプリングバルブ１２へと吸引される。サンプリングバルブ１２で定量された血液試料は、第１試薬としての所定量の溶血剤（ストマトライザ−４ＤＬ、シスメックス株式会社製）によって希釈され、希釈試料として反応チャンバ１３に運ばれる。反応チャンバ１３には、さらに、他の第１試料としての所定量の染色液（ストマトライザ−４ＤＳ、シスメックス株式会社製）が供給され、希釈試料がさらに希釈される。この状態で、希釈試料を反応チャンバ１３で所定時間反応させることで、血液試料中の赤血球が溶血され、白血球が染色された第１測定試料が得られる。
第１測定試料は、シース液（セルパック（ＩＩ）、シスメックス株式会社製）とともに、白血球検出部４に送り込まれ、白血球検出部４においてフローサイトメトリー法により測定される。

第１測定の場合、解析部６４は、白血球検出部４から出力された受光信号のうち側方散乱光と側方蛍光の信号に基づいて、図５に示す２次元のスキャッタグラム（粒子分布図）を第１測定結果として生成する。なお、ここでは、側方散乱光と側方蛍光の信号を第１の光学的情報という。
このスキャッタグラムは、Ｘ軸に側方散乱光強度、Ｙ軸に側方蛍光強度をとって描いたものであり、通常、「赤血球ゴーストの粒子集団」、「リンパ球の粒子集団」、「単球の粒子集団」、「好中球＋好塩基球の粒子集団」及び「好酸球の粒子集団」が表れる。これらの粒子集団は、データ処理部３によってスキャッタグラムを分析（分画処理）することにより認識され、当該分析により白血球の第１の分類（ＤＩＦＦ分類）が行われる。また、当該分析により白血球数の計数も行われる。

なお、第１試薬としての溶血剤（ストマトライザ−４ＤＬ、シスメックス株式会社製）は、溶血能力が比較的抑えられている。これは、溶血剤は、赤血球だけでなく白血球も溶血させて収縮させることから、白血球が溶血されすぎると白血球の分画・分類が困難となるため、白血球が比較的細かく分類されるＤＩＦＦでは、比較的穏やかに溶血させておき、白血球の収縮を抑えているのである。

前記ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定（第２測定）は、血液試料中の白血球（好塩基球を除く）の集団と、好塩基球の２つの集団に分画測定し、各集団の粒子数を計数することができる。

図６は、分析装置１によるＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定の流れを示している。この図６は、血液試料に第２測定（ＷＢＣ／ＢＡＳＯ）用の第２試薬を混合した第２測定試料を調製し、その第２測定試料を白血球検出部４で測定する様子を示している。
図６において、採血管１１内の血液試料は、図示しない吸引ピペットからサンプリングバルブ１２へと吸引される。サンプリングバルブ１２で定量された血液試料は、第２試薬としての所定量の溶血剤（ストマトライザ−ＦＢ（ＩＩ）、シスメックス株式会社製）によって希釈され、希釈試料として反応チャンバ１３に運ばれる。この状態で、希釈試料を反応チャンバ１３で所定時間反応させることで、血液試料中の赤血球が溶血された第２測定試料が得られる。
第２測定試料は、シース液（セルパック（ＩＩ）、シスメックス株式会社製）とともに、白血球検出部４に送り込まれ、白血球検出部４においてフローサイトメトリー法により測定される。

第２測定の場合、解析部６４は、白血球検出部４から出力された受光信号のうち側方散乱光と前方散乱光の信号に基づいて、図７に示す２次元のスキャッタグラム（粒子分布図）を第２測定結果として生成する。なお、ここでは側方散乱光と前方散乱光の信号を第２の光学的情報という。
このスキャッタグラムは、Ｘ軸に側方散乱光強度、Ｙ軸に前方散乱強度をとって描いたものであり、通常、「赤血球ゴーストの粒子集団」、「白血球中の好塩基球の粒子集団」「それ以外の白血球（リンパ球、単球、好中球、好酸球）の粒子集団」が表れる。これらの粒子集合は、データ処理部３によってスキャッタグラムを分析（分画処理）することにより認識され、当該分析により白血球の第２の分類（ＷＢＣ・ＢＡＳＯ分類）が行われる。また、当該分析により白血球数の計数も行われる。

なお、第２試薬としての溶血剤（ストマトライザ−ＦＢ（ＩＩ）４ＤＬ、シスメックス株式会社製）は、溶血能力が第１試薬としての溶血剤（ストマトライザ−４ＤＬ）よりも比較的高くなっている。第２測定（ＷＢＣ／ＢＡＳＯ）では、白血球の細かな分類をしないため、白血球も溶血剤によってある程度収縮させても、溶血剤によって赤血球を確実に溶血することで、白血球数を確実に計数するとともに、採血後の白血球の経時変化による影響を抑えて白血球数を検出することができる。

以上のように、分析装置１は、１つの粒子（白血球）に対し、２つの（複数の）測定（分画測定）方法による測定を行うことができ、第１測定による第１の測定結果（未分画スキャッタグラム）と、第２測定による第２の測定結果（未分画スキャッタグラム）という２つの（複数の）測定結果を得ることができる。

測定部２のマイクロコンピュータ部６は、第１及び第２測定結果をデータ処理部３へ送る。図６に示すように、データ処理部３は、本体３０１と、ディスプレイ３０２と、入力デバイス３０３とから主として構成されたコンピュータによって構成されている。本体３０１は、ＣＰＵ３０１ａと、ＲＯＭ３０１ｂと、ＲＡＭ３０１ｃと、ハードディスク３０１ｄと、読出装置３０１ｅと、入出力インタフェース３０１ｆと、画像出力インタフェース３０１ｈとから主として構成されており、ＣＰＵ３０１ａ、ＲＯＭ３０１ｂ、ＲＡＭ３０１ｃ、ハードディスク３０１ｄ、読出装置３０１ｅ、入出力インタフェース３０１ｆ、及び画像出力インタフェース３０１ｈは、バス３０１ｉによってデータ通信可能に接続されている。

ＣＰＵ３０１ａは、ＲＯＭ３０１ｂに記憶されているコンピュータプログラム及びＲＡＭ３０１ｃにロードされたコンピュータプログラムを実行することが可能である。そして、後述するようなアプリケーションプログラム３０５ａを当該ＣＰＵ３０１ａが実行することにより、後述するような各機能ブロックが実現され、コンピュータがデータ処理部３として機能する。
ＲＯＭ３０１ｂは、マスクＲＯＭ、ＰＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、ＥＥＰＲＯＭ等によって構成されており、ＣＰＵ３０１ａに実行されるコンピュータプログラムおよびこれに用いるデータ等が記録されている。

ＲＡＭ３０１ｃは、ＳＲＡＭ又はＤＲＡＭ等によって構成されている。ＲＡＭ３０１ｃは、ＲＯＭ３０１ｂ及びハードディスク３０１ｄに記録されているコンピュータプログラムの読み出しに用いられる。また、これらのコンピュータプログラムを実行するときに、ＣＰＵ３０１ａの作業領域として利用される。
ハードディスク３０１ｄは、オペレーティングシステム及びアプリケーションプログラム等、ＣＰＵ３０１ａに実行させるための種々のコンピュータプログラム及び当該コンピュータプログラムの実行に用いるデータがインストールされている。後述するアプリケーションプログラム３０５ａも、このハードディスク３０１ｄにインストールされている。

読出装置３０１ｅは、フレキシブルディスクドライブ、ＣＤ−ＲＯＭドライブ、又はＤＶＤ−ＲＯＭドライブ等によって構成されており、可搬型記録媒体３０５に記録されたコンピュータプログラム又はデータを読み出すことができる。また、可搬型記録媒体３０５には、コンピュータに所定の機能を実現させるためのアプリケーションプログラム３０５ａが格納されており、データ処理部３としてのコンピュータが当該可搬型記録媒体３０５からアプリケーションプログラム３０５ａを読み出し、当該アプリケーションプログラム３０５ａをハードディスク３０１ｄにインストールすることが可能である。

なお、前記アプリケーションプログラム３０５ａは、可搬型記録媒体３０５によって提供されるのみならず、電気通信回線（有線、無線を問わない）によってデータ処理部３と通信可能に接続された外部の機器から前記電気通信回線を通じて提供することも可能である。例えば、前記アプリケーションプログラム３０５ａがインターネット上のサーバコンピュータのハードディスク内に格納されており、このサーバコンピュータにデータ処理部３がアクセスして、当該コンピュータプログラムをダウンロードし、これをハードディスク３０１ｄにインストールすることも可能である。
また、ハードディスク３０１ｄには、例えば米マイクロソフト社が製造販売するＷｉｎｄｏｗｓ（登録商標）等のグラフィカルユーザインタフェース環境を提供するオペレーティングシステムがインストールされている。以下の説明においては、本実施形態に係るアプリケーションプログラム３０５ａは当該オペレーティングシステム上で動作するものとしている。

入出力インタフェース３０１ｆは、例えばＵＳＢ、ＩＥＥＥ１３９４、ＲＳ−２３２Ｃ等のシリアルインタフェース、ＳＣＳＩ、ＩＤＥ、ＩＥＥＥ１２８４等のパラレルインタフェース、およびＤ／Ａ変換器、Ａ／Ｄ変換器等からなるアナログインタフェース等から構成されている。入出力インタフェース３０１ｆには、キーボードおよびマウスからなる入力デバイス３０３が接続されており、ユーザが当該入力デバイス３０３を使用することにより、データ処理部３にデータを入力することが可能である。
画像出力インタフェース３０１ｈは、ＬＣＤまたはＣＲＴ等で構成されたディスプレイ３０２に接続されており、ＣＰＵ３０１ａから与えられた画像データに応じた映像信号をディスプレイ３０２に出力するようになっている。ディスプレイ３０２は、入力された映像信号にしたがって、画像（画面）を表示する。

図９は、前記アプリケーションプログラム（データ処理プログラム）によるデータ処理部３による処理の流れ及びこれに関連する測定部２の処理の流れを示している。まず、データ処理部３側において、ユーザの操作等により、測定部２側へ測定開始指示が送信され（ステップＳ３−１）、測定部２がこれを受信すると（ステップＳ２−１）、測定部２は第１測定（４ＤＩＦＦ測定）及びその解析処理を行うとともに（ステップＳ２−３）、第２測定（ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定）及びその解析処理を行う（ステップＳ３−３）。
すると、データ処理部３は、測定部２から第１測定の第１測定結果を受信するとともに（ステップＳ３−２）、第２測定の第２測定結果の受信も行う（ステップＳ３−３）。

［分析処理（第１分析部、第２分析部）］
さらに、データ処理部３は、第１及び第２測定結果に対して、白血球を分類するための分画処理等の分析処理を行う（ステップＳ３−４，Ｓ３−５）。また、分析処理の際には、白血球と赤血球等のゴーストとを区別する境界処理も行う。

［境界処理］
ＤＩＦＦ測定（第１測定）結果に対する第１分析の場合、図５に示すように、ＤＩＦＦスキャッタグラム上で、白血球（リンパ球、単球、好中球＋好塩基球、好酸球）と、赤血球ゴーストとを区別するための所定の蛍光強度が「ゴースト・白血球（対象粒子）境界」として設定されている。ＤＩＦＦ測定結果に基づく境界処理の際は、このゴースト・白血球境界よりも蛍光強度（染色度合い）が大きい範囲（白血球範囲）にある粒子が白血球（対象粒子）として認識され、当該境界よりも蛍光強度が低い範囲（ゴースト範囲）にある粒子はゴーストとして認識される。

また、ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定（第２測定）結果に対する第２分析の場合も、図６に示すように、ＷＢＣスキャッタグラム上で、「ゴースト・白血球（対象粒子）境界」が設定されている。この境界は、側方散乱光強度が低い範囲では側方散乱光強度が大きくなるにつれて前方散乱光強度が小さくなる右肩下がりであり、側方散乱光強度が高い範囲では前方散乱光が一定となっている。ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定結果に基づく境界処理の際には、このゴースト・白血球境界よりも前方散乱光強度（粒子大きさ）が大きい範囲（白血球範囲）にある粒子が白血球（対象粒子）として認識され、当該境界よりも前方散乱強度（粒子大きさ）が低い範囲（ゴースト範囲）の粒子はゴーストとして認識される。

［分画処理］
分画処理では、境界処理によって白血球として認識された粒子が、さらに粒子集団（クラスター）の認識（分画）によって、白血球の複数の分類項目に分類される。すなわち、第１分析処理（ＤＩＦＦ分析処理）では白血球が４つのクラスターに分画・分類される。また、４つのクラスターに属する粒子が最終的に白血球として認識される。第２分析処理（ＷＢＣ／ＢＡＳＯ分析処理）では白血球が２つのクラスターに分画・分類されるとともに、２つのクラスターに属する粒子が最終低に白血球として認識される。また、分画処理により各スキャッタグラムにおいて白血球として認識された粒子数から、ＤＩＦＦ分析処理により検出された白血球数と、ＷＢＣ／ＢＡＳＯ分析処理により検出された白血球数がそれぞれ求まる。
また、各スキャッタグラムにおいて、境界処理によってゴーストとして認識されたもののうち、赤血球によるゴーストも分画され、各スキャッタグラムにおける赤血球クラスターとして認識される。

なお、分画された各クラスターには、クラスターとスキャッタグラム上の他の領域と区別するための境界が生成される。これらの境界内に存在する粒子がクラスターに属する粒子として認識される。
また、分画処理を行った場合、白血球のクラスターがゴースト範囲にまで及ぶことや、赤血球ゴーストのクラスターが白血球範囲にまで及ぶこともある。

［白血球の５分類］
データ処理部５は、第１分析処理によって白血球を４つに分類した結果（第１分類結果）と、第２分析処理によって白血球を２つに分類した結果に基づいて、血液試料の白血球を５分類する。具体的には、第１分析処理によって得られた「好中球＋好塩基球の集団」と第２分析処理によって得られた「好塩基球の集団」から、好中球の血球数と好塩基球の血球数をそれぞれ算出する。これにより、第１分析処理によって得られた他の３つの白血球集団の各血球数に基づいて、白血球を５分類（リンパ球、単球、好中球、好塩基球、好酸球）して各分類項目の血球数を求めることができる。

［判定処理（判定部）］
データ処理部３は、第１測定結果及び第２測定結果並びに必要であれば第１分析結果及び第２分析結果に基づいて、下記の判定処理を行う（ステップＳ３−６）。

［白血球数（粒子数）の異常判定処理］
データ処理部３は、以下のルール１〜４のいずれかを満たした場合、第２測定（ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定）結果に基づいて検出された白血球数は、白血球以外の粒子の数を含んでおり、異常（偽性高値）であると判定する。なお、ルール１〜４は、脂質粒子を異常原因とするもの（ルール１及び２）と、溶血不良を異常原因とするもの（ルール３及び４）に大別される。

［脂質粒子による異常判定条件：ルール１、ルール２］
脂質粒子による異常が生じているか否かの判定は、第１測定結果としてのＤＩＦＦスキャッタグラム又は第２測定結果としてのＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムに脂質粒子が表れているか否かにより行う。すなわち、スキャッタグラム上に、脂質粒子検出用の所定領域を設定しておき、その所定領域における粒子数等に応じて、脂質粒子が表れているか否かを判定する。

ここで、脂質粒子は、４ＤＩＦＦ（第１測定）のスキャッタグラムにおいては、ほとんどの場合、図１０（ａ）に示すように、右下に横長く表れる。すなわち、脂質粒子は、白血球（リンパ球、単球、好中球、好塩基球、好酸球）よりも蛍光強度（染色度合い）が低い。換言すると、脂質粒子は、赤血球ゴーストと同程度又はそれ以下の蛍光強度である。また、脂質粒子は、側方蛍光強度（粒子内部の複雑さ）が低い範囲から高い範囲にわたって幅広く分布する傾向がある。
このように、脂質粒子は、ＤＩＦＦスキャッタグラムにおいては、ゴースト・白血球境界よりも下のゴーストの範囲に主に現れるため、ＤＩＦＦスキャッタグラムに基づく白血球数は脂質粒子数をほとんど含まない。

また、脂質粒子は、ＷＢＣ／ＢＡＳＯ（第２測定）のスキャッタグラムにおいては、図１０（ｂ）に示すように、白血球（好塩基球を除く）の集団の近傍において、「脂質粒子１」「脂質粒子２」として示す位置のいずれかに髭状に表れることがあるが、ＤＩＦＦスキャッタグラムの場合と異なり、その場所は必ずしも一定しない。なお、図１０（ｂ）に示す「脂質粒子２」は図１２（ｂ）に示す脂質粒子と対応する。
脂質粒子１，２のいずれの場合でも、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムにおいては、脂質粒子はゴースト・白血球境界より上の白血球の範囲にもあるため、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムに基づく白血球数は脂質粒子の数をかなり含んだものとなっている。また、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムに分画処理を施しても分画が適切に行えない分画異常となって分画処理後に得られる白血球数も脂質粒子の数をかなり含んだままとなる。

［ルール１］
ルール１では、図１０（ａ）に示す領域Ａにおいて、所定数のゴースト粒子が存在する場合に、異常であると判定する。

ルール１は、脂質粒子が、第１測定（ＤＩＦＦ測定）によって得られたＤＩＦＦスキャッタグラムの下方（ゴースト範囲）に表れることを利用したものであり、ＤＩＦＦスキャッタグラムを対象としたルールである。すなわち、脂質粒子検出用の領域Ａが、ＤＩＦＦスキャッタグラム上に設定されている。この領域Ａは前記ゴースト・白血球境界より下のゴースト範囲に設定されているが、ゴースト範囲であっても赤血球ゴーストが通常現れない領域であるとともに、脂質粒子が現れることがある位置に設定されている。

具体的には、領域Ａは、ゴースト範囲であって、赤血球ゴーストの集合が、通常現れる位置（側方散乱光強度が低い位置）よりも側方散乱光強度が高い範囲（図１０（ａ）において赤血球ゴーストの右側）に設定されている。

ルール１が満たされる場合、血液試料中に脂質粒子が存在し、ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定による白血球数は偽性高値であると判定される。
なお、脂質粒子は、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムの白血球範囲にも現れるため（図１０（ｂ）で示す脂質粒子２）、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムの白血球範囲であって、白血球とは区別可能な位置に領域Ａを設定してもよい。

［ルール２］
ルール２では、図１０（ｂ）に示す領域Ｂにおいて、所定数のゴースト粒子が存在する場合に、異常であると判定する。

ルール２は、図１０（ｂ）に示す「脂質粒子１」が、第２測定（ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定）によって得られたＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムのゴースト範囲（ゴースト・白血球境界の下方範囲）内に現れることを利用したものであり、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムを対象としたルールである。すなわち、脂質粒子検出用の領域として、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラム上に前記領域Ｂが設定されている。この領域Ｂはともに前記ゴースト・白血球境界より下のゴースト範囲に設定されているが、ゴースト範囲であっても赤血球ゴーストが通常現れない領域であるとともに、脂質粒子が現れることがある位置に設定されている。

具体的には、領域Ｂは、ゴースト範囲であって、赤血球ゴーストの集合が、通常現れる位置（側方蛍光強度が低い位置）よりも側方蛍光強度が高い範囲（赤血球ゴーストの上側）に設定されている。

ルール２が満たされる場合、血液試料中に脂質粒子が存在し、ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定による白血球数は偽性高値であると判定される。
なお、脂質粒子は、スキャッタグラムの白血球範囲にも現れるため、スキャッタグラムの白血球範囲であって、白血球とは区別可能な位置に領域Ｂを設定してもよい。

以上のルール１，２により、図１０（ｂ）に示す「脂質粒子１」「脂質粒子２」はいずれも検出可能である。特に、ルール１によって、「脂質粒子１」「脂質粒子２」のいずれでも検出可能である。特に「脂質粒子１」はルール２でも検出可能であるため、検出精度が高い。また、ルール１は、脂質粒子が、図１０（ｂ）に示す他の位置に現れた場合であっても、ほとんど検出可能である。

［溶血不良による異常判定条件：ルール３、ルール４］
溶血不良による異常が生じているか否かの判定は、第２測定結果としてのＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムに溶血不良の粒子（赤血球）が表れているか否かにより行う。すなわち、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラム上の所定位置における粒子数等に応じて、溶血不良が生じているか否かを判定する。

ここで、溶血不良の粒子は、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムにおいては、好塩基球を除く白血球クラスターと赤血球ゴーストクラスタの中間位置、又は当該中間位置から右側（やや右下）に現れる（図１３（ｂ）及び図１４（ｂ）参照）。
すなわち、溶血不良の赤血球は、前述のゴースト・白血球境界付近において当該境界を跨いで現れる。また、換言すると、溶血不良の赤血球は、白血球のクラスターの境界線及び赤血球ゴーストクラスタの境界線の間又は両境界線の近傍に現れる。
一般に、溶血不良粒子が無く異常でない場合、白血球クラスターと赤血球ゴーストクラスタの中間位置では、粒子数が少なくなるのであるが、赤血球が溶血不良の場合、十分に溶血されない赤血球が、白血球クラスターと赤血球ゴーストクラスタの中間位置やその右側に分布する。
このように、溶血不良の赤血球は、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムにおいては、ゴースト・白血球境界よりも上の白血球範囲にも現れるため、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムに基づく白血球数は、溶血不良の赤血球数をかなり含む。
一方、溶血不良による赤血球は、ＤＩＦＦスキャッタグラムにおいては、ゴースト・白血球境界よりも下のゴーストの範囲に主に現れるため、ＤＩＦＦスキャッタグラムに基づく白血球数は、溶血不良による赤血球数をほとんど含まない。

［ルール３］
ルール３では、図１１に示すように、赤血球ゴーストクラスタと好塩基球を除く白血球クラスターの中間位置（ゴースト・白血球境界付近の第１領域）Ｃ１に、所定数以上の粒子がある場合に、異常であると判定する。

上記ルール３が満たされる場合、血液試料中に溶血不良の赤血球が存在し、ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定による白血球数は偽性高値であると判定される。

［ルール４］
ルール４では、図１１に示すように、赤血球ゴーストクラスタと好塩基球を除く白血球クラスターの中間位置よりも右側（ゴースト・白血球境界付近の第２領域）Ｃ２に、所定数以上の粒子がある場合に、異常であると判定する。

上記ルール４が満たされる場合、血液試料中に溶血不良の赤血球が存在し、ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定による白血球数は偽性高値であると判定される。

［白血球数表示のスイッチング（選択部）］
データ処理部３は、前記ルール１〜４のいずれにも該当したいため白血球数が正常であると、白血球数出力のスイッチングは不要であると判断して（ステップＳ３−７）、ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定によって検出された白血球数をディスプレイ（出力部）３０２やプリンタ等に出力する（通常表示；ステップＳ３−８）。一方、ルール１〜４のいずれかに該当する白血球数異常の場合、データ処理部３は、白血球出力のスイッチングが必要であると判断して（ステップＳ−７）、ＤＩＦＦ測定によって検出された白血球数を出力する（スイッチングされた表示；ステップＳ３−９）。
なお、ＤＩＦＦ測定によって検出された白血球数を出力する場合には、ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定によって検出された白血球数でないことが、ユーザにわかるように表示される。例えば、ＤＩＦＦ測定によって検出された白血球数を出力する場合には、特別なマーク付きで表示する。

以上のように、本実施形態の分析装置１によれば、脂質粒子又は溶血不良の赤血球によって偽性高値の白血球数が表示されることが防止される。
なお、本発明は、上記実施形態に限定されるものではなく、様々な変形が可能である。例えば、偽性高値の原因となる粒子は、脂質粒子や溶血不良の赤血球に限られるものではなく、他の粒子であってもよい。
また、脂質粒子を検出する場合、スキャッタグラムのゴースト範囲に着目するのではなく、白血球範囲（特に、ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムの白血球範囲において脂質領域が現れる場所）に着目してもよい。

血液分析装置を示す斜視図である。測定部の機能ブロック図である。検出部の構成図である。ＤＩＦＦ測定の流れを示す図である。４ＤＩＦＦスキャッタグラムである。ＷＢＣ／ＢＡＳＯ測定の流れを示す図である。ＷＢＣ／ＢＡＳＯスキャッタグラムである。データ処理部の機能ブロック図である。測定及び分析のフローチャートである。スキャッタグラム上で、脂質粒子を検出するための説明図である。スキャッタグラム上で、溶血不良粒子を検出するための説明図である。脂質粒子が現れているスキャッタグラムである。溶血不良粒子が現れているスキャッタグラムである。溶血不良粒子が現れている他のスキャッタグラムである。

符号の説明

１血液分析装置
２測定部
３データ処理部

Claims

血液を分析する分析装置であって、
血液試料と第１試薬とが混合された第１測定試料の第１測定結果から、血液試料中の白血球に関する第１の分類を行うと共に、当該血液試料中の白血球数を検出する第１分析部と、
血液試料と前記第１試薬とは異なる第２試薬とが混合された第２測定試料の第２測定結果から、血液試料中の白血球に関する第２の分類を行うと共に、当該血液試料中の白血球数を検出する第２分析部と、
前記第２分析部により検出された白血球数を出力する出力部と、
第１測定結果及び第２測定結果の少なくとも一方に基づいて、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じているか否かを判定する判定部と、を備え、
前記出力部は、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じていると判定された場合に、前記第１分析部により検出された白血球数を出力するように構成されている分析装置。
前記判定部は、第１測定結果における白血球の出現範囲とは異なる第１の所定範囲に出現する粒子数、及び第２測定結果における白血球の出現範囲とは異なる第２の所定範囲に出現する粒子数の少なくとも一方に基づいて、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じているか否かを判定し、
前記第１の所定範囲は、第１測定結果において、前記第１試薬によって溶解された第１溶血赤血球が出現せず、かつ脂質粒子が出現する可能性のある領域であり、
前記第２の所定範囲は、第２測定結果において、前記第２試薬によって溶解された第２溶血赤血球が出現せず、かつ脂質粒子が出現する可能性のある領域、又は、前記白血球の集団と第２溶血赤血球の集団とを区別するための境界線及び前記境界線の近傍を含む領域である、請求項１に記載の分析装置。
前記第１分析部は、前記第１測定結果に基づいて、前記血液試料中の白血球を複数の粒子集団に分類するとともに、前記複数の粒子集団に属する粒子数を前記血液試料中の白血球数として検出し、
前記第２分析部は、前記第２測定結果に基づいて、前記血液試料中の白血球を前記複数の粒子集団とは異なる他の複数の粒子集団に分類するとともに、前記他の複数の粒子集団に属する粒子数を前記血液試料中の白血球数として検出する、請求項１又は２に記載の分析装置。
前記第１分析部による第１分類結果と、前記第２分析部による第２分類結果とに基づいて、血液試料中の白血球を５分類するように構成されている請求項１乃至３のいずれかに記載の分析装置。
前記第１分析部は、血液試料中の白血球を複数の分類項目に分類するように構成されており、
前記第２分析部は、血液試料中の白血球を、前記複数の分類項目のうちの１つに属する分類項目と他の白血球とに分類するように構成されている請求項１乃至４のいずれかに記載の分析装置。
前記第１分析部は、血液試料中の白血球を単球、リンパ球、好中球及び好塩基球のグループ、並びに好酸球の４つに分類するように構成されており、
前記第２分析部は、血液試料中の白血球を、好塩基球と他の白血球とに分類するように構成されている、請求項５に記載の分析装置。
測定試料を光学的に測定し、互いに異なる複数の光学的情報を検出する検出部をさらに備え、
前記第１分析部は、前記検出部によって測定試料を測定したときに検出された少なくとも第１の光学的情報に基づいて、血液試料中の血球に関する第１の分類を行うように構成されており、
前記第２分析部は、前記検出部によって測定試料を測定したときに検出された少なくとも第２の光学的情報に基づいて、血液試料中の血球に関する第２の分類を行うように構成されている、請求項１乃至６のいずれかに記載の分析装置。
前記判定部は、白血球以外の粒子を白血球として認識することによって白血球数が多く検出される偽性高値による異常を判定する請求項１乃至７のいずれかに記載の分析装置。
前記判定部は、測定試料に含まれる脂質粒子による白血球数の異常を判定するように構成されている請求項１乃至７のいずれかに記載の分析装置。
前記判定部は、前記第１測定結果又は前記第２測定結果の少なくともいずれか一方から、脂質粒子による白血球数の異常を判定するように構成されている請求項９記載の分析装置。
前記判定部は、白血球以外のゴースト粒子であると認識された粒子中に脂質粒子が含まれているか否かによって白血球数の異常を判定するように構成されている請求項９又は１０記載の分析装置。
前記判定部は、測定試料における溶血不良による白血球数の異常を判定するように構成されている請求項１乃至１１のいずれかに記載の分析装置。
前記判定部は、前記第２測定結果から、溶血不良による白血球数の異常を判定するように構成されている請求項１２記載の分析装置。
前記判定部は、白血球と白血球以外のゴースト粒子とを区別する境界付近に存在する粒子に基づいて白血球数の異常を判定するように構成されている請求項１乃至１３のいずれかに記載の分析装置。
血液を分析する分析装置であって、
血液試料と第１試薬とが混合された第１測定試料の第１測定結果から、血液試料中の白血球に関する第１の分類を行うと共に、当該血液試料中の白血球数を検出する第１分析部と、
血液試料と前記第１試薬とは異なる第２試薬とが混合された第２測定試料の第２測定結果から、血液試料中の白血球に関する第２の分類を行うと共に、当該血液試料中の白血球数を検出する第２分析部と、
前記第１測定結果及び第２測定結果の少なくとも一方に基づいて、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じているか否かを判定する判定部と、
前記判定部により、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じていると判定された場合には、第１分析部により検出された白血球数を選択し、前記第２分析部により検出された白血球数に異常が生じていないと判定された場合には、前記第２分析部により検出された白血球数を選択する選択部と、を備える分析装置。