CN109270281A - 提高白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的方法及设备 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种提高白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的方法与设备，包括：白细胞计数的白细胞计数装置；向白细胞计数装置分配血样试剂的样本血推送装置；向白细胞计数装置分配溶血试剂的溶血剂推送装置；分别控制样本血推送装置和溶血剂推送装置分批次向白细胞计数装置推送样本血和溶血剂的自动控制系统；对白细胞计数装置进行清洗的清洗排液装置；对比每次分类计数结果的准确性的准确性对比模块；所述自动控制系统先后两次控制样本血推送装置和溶血剂推送装置向白细胞计数装置推送试剂，第二次溶血剂量小于第一次溶血剂量。采用本发明可提高了血液细胞分析仪WBC计数结果的准确性及重复性。

Description

提高白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的方法及设备
技术领域
本发明涉及一种血液分析仪的领域，尤其涉及的是一种提高白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的方法与设备。
背景技术
目前，市场上销售的以电阻抗法为检测原理的三分类动物血液细胞分析仪在动物临床及实验室领域应用广泛，对于三分类动物血液细胞分析仪，准确性以及重复性是评价血液细胞分析仪性能的重要指标。针对猫、狗等动物血液样本白细胞计数及分类，主要采用以下三种方法：
第一种方法是按照人血样本同样的溶血剂量对动物血样本进行处理，这种方法能够保证猫、狗等动物血液样本在溶血剂作用后红细胞碎片不影响白细胞计数，但容易造成白细胞分类不准确的问题，即淋巴细胞测试结果偏高。
第二种方法对猫、狗等动物血样本弱溶处理，即减少溶血剂量，对一定比例的样本，红细胞在溶血剂作用后不影响白细胞计数，通过与镜检分类数据的对比，可提高分类结果的准确性。由于减少溶血剂加入量，会造成一定比例的样本存在红细胞碎片干扰，导致计数结果和分类结果的不准确，目前通过固定界标，对红细胞碎片进行滤除，解决狗、猫等样本测试时分类不准的问题，通过这种方法可提高白细胞分类性能。但由于动物样本自身的特异性，用固定界标的方法，会导致有相当比例的动物样本的白细胞计数值有较大的偏差。用固定界标滤除红细胞碎片干扰后，会造成白细胞计数结果不准确。
第三种方法如专利CN 101470109 B，在白细胞计数过程中分先后两次加入溶血剂，并测试获得第一次加入溶血剂后的第一白细胞计数值和第一白细胞直方图，以及第二次加入溶血剂后的第二白细胞计数值；第一次加入的溶血剂量，其作用后使血液样本中仍有一定量影响白细胞计数值的红细胞碎片存在，第二次加入的溶血剂量，其作用后使白细胞计数值中没有红细胞碎片的影响；根据第一白细胞计数值和第二白细胞计数值之比，确定进行白细胞分类的直方图，并进行白细胞分类，既保证了白细胞计数值和血红蛋白测试结果的准确性，同时也提高了狗、猫等动物血液样本白细胞分类结果准确性。这种方法采用一次分血，并分别两次加溶血剂进行白细胞计数，最终以第一次计数及第二次计数结果的比值作为判断依据，输出白细胞计数及分类结果，虽能保证大部分样本分类及计数结果的准确性，但对于血液细胞仪的重复性还有待进一步改进。
因此，现有技术还有待于改进和发展。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的方法与设备，旨在解决现有的三分类动物血液细胞分析仪检测结果不准确，重复性差的问题。
本发明的技术方案如下：
一种提高白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的设备，其包括：用于白细胞计数的白细胞计数装置；
用于向白细胞计数装置分配血样试剂的样本血推送装置；
用于向白细胞计数装置分配溶血试剂的溶血剂推送装置；
用于分别控制样本血推送装置和溶血剂推送装置分批次向白细胞计数装置推送样本血和溶血剂的自动控制系统；
用于对白细胞计数装置进行清洗的清洗排液装置；
用于对比每次分类计数结果的准确性对比模块；
其中，所述自动控制系统先后两次控制样本血推送装置和溶血剂推送装置向白细胞计数装置推送试剂，且第一次推送的血液样本量和第二次的血液样本量相同，第二次溶血剂量小于第一次溶血剂量。
一种提高白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的方法，其包括以下步骤：
步骤S1：向白细胞计数装置第一次分血及加入第一次溶血剂，第一次溶血剂量记作L1；
步骤S2：白细胞技术装置进行第一次白细胞计数，记作WBC1；
步骤S3：排空及清洗白细胞计数装置；
步骤S4：向白细胞计数装置第二次分血及加入第二次溶血剂，第二次溶血剂量记作L2，控制L1大于L2；
步骤S5：白细胞技术装置进行第二次白细胞计数，记作WBC2；
步骤S6：以第一次计数结果WBC1与第二次结果WBC2的比值作为判断依据，通过面积比的方式确认红细胞碎片区面积，总面积去除红细胞碎片区面积即为第二次白细胞计数分类结果。
步骤S7：第一次计数以及第二次计数粒子数相加统计输出白细胞计数结果。
所述的方法，其以第一次计数结果WBC1与第二次结果WBC2的比值作为判断依据，通过面积比的方式确认红细胞碎片区面积的具体方法为：
WBC2/WBC1＝(Sr+Sw)/Sw
其中，Sr为第二次计数红细胞碎片区的面积，Sr/Sw＝WBC2/WBC1-1；Sw为第二次计数白细胞的面积；(Sr+Sw)为第二次计数白细胞直方图的面积。
所述的方法，其所述第二次溶血剂量L2的取值用以下步骤确定：
步骤a1：取第一溶血剂量L1值为参考，用50支样本测试得到WBC1i；
步骤a2：取上述L1值的40％-70％中的多个取值用相同标准的50支样本进行评估，先观察白细胞的分类结果，若不能实现白细胞三分类的取值则排除；能实现明显分类效果的取值作为L2的备选值，对多组L2备选值分别采用相同标准的50支样本进行计数，获取各备选值的WBC2i，将WBC2i与WBC1i比值分布在1至1.6之间最多的备选值作为第二血剂量L2的取值；
其中，i取整1至50。
本发明的有益效果：本发明通过两次向WBC池(白细胞计数池)分血及加溶血剂方法确定白细胞计数结果及分类结果，第二次计数保证了WBC分类结果的准确性。然后，将第一次白细胞计数的结果和第二次白细胞计数的结果粒子数相加，两段粒子数统计得到白细胞的计数结果,增加样本统计粒子数,提高了血液细胞分析仪WBC计数结果的重复性。该方案既保证了血液细胞分析仪白细胞分类结果准确性，又提高白细胞计数结果的重复性。
附图说明
图1是本发明提供的设备模块框图。
图2是本发明提供的方法流程示意图。
图3是本发明中第一次白细胞计数结果直方图示意图。
图4是本发明中第二次白细胞计数结果直方图示意图。
图5是本发明中第二次白细胞计数结果直方图中红细胞碎片区的面积和白细胞的面积的示意图。
图6是本发明中处理后的白细胞计数直方图示意图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚、明确，以下参照附图并举实施例对本发明进一步详细说明。
本发明的目的是提供一种提高血液细胞分析仪白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的方法，该方案既保证了血液细胞分析仪白细胞分类结果准确性，又提高白细胞计数结果的重复性。
参见图1，本发明提供的提高血液细胞分析仪白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的设备，主要包括模块有：
用于白细胞计数的白细胞计数装置；
用于向白细胞计数装置分配血样试剂的样本血推送装置；
用于向白细胞计数装置分配溶血试剂的溶血剂推送装置；
用于分别控制样本血推送装置和溶血剂推送装置分批次向白细胞计数装置推送样本血和溶血剂的自动控制系统；
用于对白细胞计数装置进行清洗的清洗排液装置；
用于对比每次分类结果的准确性的准确性对比模块。
其中：在本发明实施例中，所述自动控制系统先后两次控制样本血推送装置和溶血剂推送装置向白细胞计数装置推送试剂。
且，第一次推送的血液样本量和第二次的血液样本量相同，第一次的溶血剂量要足量，第二次溶血剂量小于第一次溶血剂量。
本发明提供的方法流程如图2所示，包括以下步骤：
步骤S1：向白细胞计数装置第一次分血及加入第一次溶血剂，第一次溶血剂量记作L1；
步骤S2：白细胞技术装置进行第一次白细胞计数，记作WBC1；
步骤S3：排空及清洗白细胞计数装置；
步骤S4：向白细胞计数装置第二次分血及加入第二次溶血剂，第二次溶血剂量记作L2，控制L1大于L2；
步骤S5：白细胞技术装置进行第二次白细胞计数，记作WBC2；
步骤S6：以第一次计数结果与第二次结果的比值作为判断依据，通过面积比的方式确认红细胞碎片区面积，即第一界标值，总面积去除红细胞碎片区面积即为第二次白细胞计数分类结果；
步骤S7：第一次计数以及第二次计数粒子数统计输出白细胞计数结果。
通常第一次WBC计数是完全溶解红细胞的计数结果，可直接作为WBC计数结果准确输出，根据白细胞粒子数计数公式：
白细胞计数结果∝白细胞有效粒子总数/(稀释比*采集时间)
其中两次白细胞计数需保证稀释比一致，采集时间可保持一致。由上述公式可知白细胞计数结果与白细胞有效粒子总数正相关。
本发明将第一次计数WBC1和第二次计数WBC2(虑除红细胞碎片后)的有效粒子总数相加，以此输出白细胞的计数结果，旨在在保证结果准确性和系统偏差不变的情况下，统计量增大，相当于减少了系统偏差对样本测试结果的影响，可以提高白细胞计数结果的重复性。
在上述实施流程中，第一次加入的溶血剂量L1足以保证使得98％以上第一次加入的动物血液样本白细胞计数结果无红细胞碎片干扰，得到第一次白细胞计数结果为WBC1，在这种状态下的白细胞直方图，如图3所示，溶血剂量L1的值可根据稀释比进行适当调整。其中，每次检测时的样本血样输入量是预先设定好的，每次相同。第一次的溶血剂量L1的选择也是预先经过多次实验调试获取的最优取值，在检测应用阶段都是已经设定好的溶血剂量，当然，本发明不排除提供具有第一次溶血剂量L1可选择的的血液分析仪。该可选择的范围也是保证使得98％以上第一次加入的动物血液样本白细胞计数结果无红细胞碎片干扰为前提的。
为了保证白细胞分类结果的准确性，第二次向白细胞计数装置中加入的溶血剂量为L2，本发明实施例中第二次溶血剂量L2小于第一次溶血剂量L1，即对白细胞计数装置中的动物血液样本采用弱溶处理的方式，使其仍存在部分的红细胞碎片区，得到第二次白细胞计数结果为WBC2，并得到第二次白细胞计数直方图，如图4所示。
L2的取值是研发实验阶段确定下来的，每次检测时我们直接取研发阶段已经确定下来的L2的最优值(定值)输入分析仪系统中进行检测即可。并不是每次检测都要进行L2的取值实验。其具体的取值方法如下：
其中，所述第二次溶血剂量L2的取值用以下步骤确定：
步骤a1：取第一溶血剂量L1值为参考，用X支样本测试得到WBC11、WBC12、WBC13……WBC1X；
步骤a2：取上述L1值的40％-70％中的多个取值用相同标准的X支样本进行评估，先观察白细胞的分类结果，若不能实现白细胞三分类的取值则排除；能实现明显分类效果的取值作为L2的备选值，对多组L2备选值分别采用相同标准的X支样本进行计数，获取各备选值的WBC2i，将WBC2i与WBC1i比值分布在1至1.6之间最多的备选值作为第二血剂量L2的取值,i取整1至X。其中，X取值不少于50。
例如：
1)：取第一溶血剂量L1值为参考，用50支样本测试得到WBC11、WBC12、WBC13……WBC150；
2)：取上述L1值的40％、45％、50％、55％、60％、65％和70％用相同标准的50支样本进行评估，先观察白细胞的分类结果，若不能实现白细胞三分类，则不作为溶血剂量L2的取值考虑，若实现明显分类效果，例如溶血剂量L1的45％、50％、55％都能实现白细胞三分类的效果，则L2值取50支样本的WBC2i与WBC1i比值分布在1至1.6之间最多的对应溶血剂量的取值,i取整1至50。
确定溶血剂量L2值后，这时还需要确认红细胞碎片区的位置，即第一届标位置。由于动物血液样本自身的特异性，得到白细胞直方图中仍存在红细胞碎片区，将WBC1及第一次计数的WBC直方图与WBC2及第二次计数的WBC直方图进行比较可得如下关系：
WBC2/WBC1＝(Sr+Sw)/Sw
如图5所示，Sr为第二次计数红细胞碎片区的面积，Sw为第二次计数白细胞的面积，(Sr+Sw)为第二次计数白细胞直方图的面积。上述关系式可推出Sr/Sw＝WBC2/WBC1-1，由此可确定红细胞碎片区的位置，即第一界标位置。
确定第一界标位置后，第二次计数结果可以输出白细胞的分类结果，处理后的WBC直方图如图6所示。与实际镜检结果相比，保证了白细胞分类结果的准确性。对第二次白细胞计数结果作修正，即滤除掉红细胞碎片的干扰后，统计第一次和第二次计数白细胞的粒子数及采集时间，将第一次白细胞计数的结果和第二次白细胞计数的结果粒子数相加，两段粒子数统计得到白细胞的计数结果,增加样本统计粒子数,从而提高了样本WBC计数结果的重复性。
本发明通过两次向WBC池分血及加溶血剂方法确定白细胞计数结果及分类结果，第二次计数保证了WBC分类结果的准确性。然后，将第一次白细胞计数的结果和第二次白细胞计数的结果粒子数相加，两段粒子数统计得到白细胞的计数结果,增加样本统计粒子数,提高了血液细胞分析仪WBC计数结果的重复性。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims (4)

1.一种提高白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的设备，其特征在于，包括：用于白细胞计数的白细胞计数装置；
用于向白细胞计数装置分配血样试剂的样本血推送装置；
用于向白细胞计数装置分配溶血试剂的溶血剂推送装置；
用于分别控制样本血推送装置和溶血剂推送装置分批次向白细胞计数装置推送样本血和溶血剂的自动控制系统；
用于对白细胞计数装置进行清洗的清洗排液装置；
用于对比每次分类计数结果的准确性的准确性对比模块；
其中，所述自动控制系统先后两次控制样本血推送装置和溶血剂推送装置向白细胞计数装置推送试剂，且第一次推送的血液样本量和第二次的血液样本量相同，第二次溶血剂量小于第一次溶血剂量。
2.一种提高白细胞分类结果准确性和计数结果重复性的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤S1：向白细胞计数装置第一次分血及加入第一次溶血剂，第一次溶血剂量记作L1；
步骤S2：白细胞技术装置进行第一次白细胞计数，记作WBC1；
步骤S3：排空及清洗白细胞计数装置；
步骤S4：向白细胞计数装置第二次分血及加入第二次溶血剂，第二次溶血剂量记作L2，控制L1大于L2；
步骤S5：白细胞技术装置进行第二次白细胞计数，记作WBC2；
步骤S6：以第一次计数结果WBC1与第二次结果WBC2的比值作为判断依据，通过面积比的方式确认红细胞碎片区面积，总面积去除红细胞碎片区面积即为第二次白细胞计数分类结果；
步骤S7：第一次计数以及第二次计数粒子数相加统计输出白细胞计数结果。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以第一次计数结果WBC1与第二次结果WBC2的比值作为判断依据，通过面积比的方式确认红细胞碎片区面积的具体方法为：
WBC2/WBC1＝(Sr+Sw)/Sw
其中，Sr为第二次计数红细胞碎片区的面积；Sw为第二次计数白细胞的面积；(Sr+Sw)为第二次计数白细胞直方图的面积。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二次溶血剂量L2的取值用以下步骤确定：
步骤a1：取第一溶血剂量L1值为参考，用50支样本测试得到WBC1i；
步骤a2：取上述L1值的40％-70％中的多个取值用相同标准的50支样本进行评估，先观察白细胞的分类结果，若不能实现白细胞三分类的取值则排除；能实现明显分类效果的取值作为L2的备选值，对多组L2备选值分别采用相同标准的50支样本进行计数，获取各备选值的WBC2i，将WBC2i与WBC1i比值分布在1至1.6之间最多的备选值作为第二血剂量L2的取值；
其中，i取整1至50。
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