JP4817847B2 - 磁気付与型ハイドロゲル薄膜 - Google Patents
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Description
1. 磁気ビーズとして直径4.5μm±0.2μmのDynabeads(商品名)を使用し、細胞外マトリックス成分としてI型コラーゲンを使用して、磁気ビーズ含有型のハイドロゲル薄膜を製造した。
(1) Dynabeads(商品名)を培養液:10%牛胎仔血清(FBS)含有のダルベッコ改変イーグル培養液(DMEM)に、4×108ビーズ/mLの密度となるように懸濁し、磁気ビーズ含有溶液を調製した。
(2) 上記磁気ビーズ含有溶液と等量の0.5%I型コラーゲン溶液と混合し、混合液を調製した。
(3) 上記混合溶液を、37℃で2時間保温し、ゲル化させた。
(4) 次いで、10℃、40%湿度の条件下で、ガラス化させた。
(5) PBSで再水和処理して、薄膜全体に磁気ビーズが均一分散した含有型のハイドロゲル薄膜を製造した(図1(A))。
2. 得られたハイドロゲル薄膜に磁石を近づけて、磁力を加えたところ、図4(A)(B)に例示したように、ハイドロゲル薄膜は磁石に引き寄せられるように移動し、最終的には磁石に付着して固定された。
実施例2:磁石シート挟持型のハイドロゲル薄膜の製造
1. 細胞外マトリックス成分としてI型コラーゲンを使用して、従来の保持体が一体化しているハイドロゲル薄膜を製造し、これを用いて磁石シート挟持型のハイドロゲル薄膜を製造した。
(1) 公知の方法(例えば、特開平8−228768号公報)で、従来の保持体が一体化している円盤状のハイドロゲル薄膜を製造し、用意した。保持体は、ナイロン膜をしようした。
(2) シート状のゴム磁石を環状にカット、成型した。これを2枚用意した。
(3) 上記2枚の環状ゴム磁石の間に、従来のハイドロゲル薄膜を入れ、挟持させて磁力で固定することで、磁石シート挟持型のハイドロゲル薄膜を製造した(図2(A)(B))。
2. 図には示していないが、得られた磁石シート挟持型のハイドロゲル薄膜に磁石を近づけたところ、磁石に引き寄せられて移動し、しかも培養液中でも平面形状を維持していた。したがって、平面形状を維持して、任意の場所へ容易に移動させることができることを確認することができた。
Claims (15)
- 磁気ビーズとともに細胞外マトリックス成分を含有するガラス化されたマトリックスゲル薄膜の再水和物からなる薄膜であることを特徴とする磁気付与型ハイドロゲル薄膜。
- 複数の細胞外マトリックス成分を含有する請求項1の磁気付与型ハイドロゲル薄膜。
- 細胞外マトリックス成分が、コラーゲンである請求項1または2の磁気付与型ハイドロゲル薄膜。
- 細胞培養液成分を有する請求項1から3いずれかの磁気付与型ハイドロゲル薄膜。
- 細胞外マトリックス成分を含有するガラス化されたマトリックスゲルの再水和物からなる薄膜の周縁部に保持体が一体化形成されてなり、この保持体において少なくとも2つの磁石シートによって挟持されてなることを特徴とする磁気付与型ハイドロゲル薄膜。
- 保持体が、環状体である請求項5の磁気付与型ハイドロゲル薄膜。
- 保持体が、生体吸収材からなる請求項5または6の磁気付与型ハイドロゲル薄膜。
- 磁石シートが、前記保持体の形状と略同一形状である請求項5から7いずれかの磁気付与型ハイドロゲル薄膜。
- 磁気ビーズ含有溶液と細胞外マトリックス成分含有溶液とを混合し、この混合溶液をゲル化させて、さらに乾燥させてガラス化し、次いで再水和することを特徴とする磁気付与型ハイドロゲル薄膜の製造方法。
- 磁気ビーズ含有溶液と細胞外マトリックス成分含有溶液との混合比率が、1:100〜1:1の範囲内である請求項9の磁気付与型ハイドロゲル薄膜薄膜の製造方法。
- 複数の細胞外マトリックス成分を有する請求項9または10の磁気付与型ハイドロゲル薄膜の製造方法。
- 細胞外マトリックス成分がコラーゲンである請求項9から11いずれかの磁気付与型ハイドロゲル薄膜の製造方法。
- 細胞培養液成分を有する請求項9から12のいずれかの磁気付与型ハイドロゲル薄膜の製造方法。
- 請求項1から8のいずれかの磁気付与型ハイドロゲル薄膜からなる細胞培養基質体。
- 請求項14の基質体に細胞を播種して、培養することを特徴とする磁気付与型ハイドロゲル薄膜を用いた細胞培養方法。
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