JP4781580B2 - コラゲナーゼ阻害剤 - Google Patents
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Description
【発明の属する技術分野】
本発明は、インディアンバーベリーの抽出物を含有することを特徴とするコラゲナーゼ阻害剤に関する。
【0002】
【従来の技術】
近年、生体成分を酸化させる要因として、フリーラジカルや活性酸素がとりあげられ、その悪影響が問題となっている。フリーラジカルや活性酸素は、生体内で生じ、コラーゲン等の生体組織を分解あるいは架橋し、また、油脂類を酸化して、細胞に障害を与える過酸化脂質をつくると言われている。この様な障害は、肌のシワやハリが低下する等の老化の原因になると考えられており、老化を防ぐ方法の一つにフリーラジカルや活性酸素を除去する抗酸化剤を配合する方法が知られている。従来、老化防止を目的として用いられるフリーラジカル消去剤にはアスコルビン酸、トコフェロール、3,5−tert−ブチル−4−ヒドロキシトルエン(BHT)、スーパーオキシドジスムターゼ(SOD)等が用いられてきた。
【0003】
皮膚は、表皮、真皮、皮下組織からなるが、中でも真皮は皮膚の構造維持に極めて重要であり、コラーゲン、ヒアルロン酸、エラスチン等から形成される真皮結合組織によって皮膚のハリが保たれている。この結合組織が収縮力を失い、さらに弾力性を失う結果として皮膚のシワやタルミが発生すると考えられている。
【0004】
また、皮膚が紫外線を浴びるとコラゲナーゼやエラスターゼ等のマトリックスメタロプロテアーゼが活性化されることが知られている。これらの酵素は、真皮の主要成分であるコラーゲンやエラスチンを減少させることによりシワやタルミを促進すると言われている。また、ヒアルロニダーゼは、炎症時に活性化され、高分子のヒアルロン酸を低分子化することにより、皮膚のハリを低下させてシワ等の老化を引き起こすことが知られている。
【0005】
近年、この皮膚のシワやタルミ等を防止する多くの化粧料が知られ、その有効成分としてレチノイン酸、α−ヒドロキシ酸、レチノール等が報告されている。しかしながら、これらの有効成分は皮膚刺激性や安定性に問題がある。また、シワやタルミを防ぐ方法の一つに、コラゲナーゼ、ヒアルロニダーゼ、エラスターゼ阻害剤を配合することが知られている。しかし、これらの酵素の阻害作用を持つ植物原料として、ホルトノキ属植物は検討されていなかった。
【0006】
【発明が解決しようとする課題】
皮膚の老化防止又は抗酸化を目的として用いられるSODは不安定であり、製剤化が難しく、トコフェロールも効果が充分であるとは言えない。また、合成化合物であるBHT等は安全性に問題があり、配合量に制限があることから、化学合成品ではなく、安定でかつ副作用の少ない天然原料が望まれている。同様に、安全で安定なコラゲナーゼ、ヒアルロニダーゼ及びエラスターゼ阻害作用を有することが老化防止に好ましい。
【0007】
以上のことから、安全で安定性に優れ、老化防止に優れた皮膚外用剤が望まれている。
【0008】
【課題を解決するための手段】
このような事情により、本発明者らは鋭意検討した結果、インディアンバーベリーの抽出物が優れたコラゲナーゼ阻害作用を持つことを見出し、本発明を完成するに至った。
【0009】
本発明に用いるインディアンバーベリー(メギ科、学名Beriberis aristata)は、その果実、樹皮、根が下血、眼疾患等に用いられ、参考例として用いたインディアンキノツリー(マメ科、学名Pterocarpas marsapim)は、その種子が抗炎症、止血、皮膚病、打撲に用いられてきた。また、これらの植物は、インド、東南アジア等の地域より生薬として入手し、利用することができる。
【0010】
本発明に用いるインディアンバーベリー及び参考例として用いたインディアンキノツリーの抽出物とは、植物体の葉、茎、樹皮、花、果実、種子、根等の植物体の一部又は全草から抽出したものである。好ましくは、インディアンバーベリーの果実や樹皮、インディアンキノツリーの種子や樹脂から抽出して得られるものが良い。その抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温抽出したものであっても良い。
【0011】
抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類(メタノール、エタノール、1−プロパノール、2−プロパノール、1−ブタノール、2−ブタノール等)、液状多価アルコール(1,3−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等)、ケトン類(アセトン、メチルエチルケトン等)、アセトニトリル、エステル類(酢酸エチル、酢酸ブチル等)、炭化水素類(ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等)、エーテル類(エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等)が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、1,3−ブチレングリコール及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【0012】
上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈し、濾過処理、活性炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。
【0013】
本発明の皮膚外用剤には、上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、pH調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤等の成分を配合することができる。
【0014】
本発明の皮膚外用剤は、化粧品、医薬部外品、医薬品のいずれにも用いることができ、その剤形としては、例えば、化粧水、クリ−ム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデ−ション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等の皮膚に適用されるものが挙げられる。
【0015】
本発明に用いる上記抽出物の配合量は、本発明の皮膚外用剤全量に対し、固形物に換算して0.0001重量%以上、好ましくは0.001〜10重量%の配合が良い。0.0001重量%未満では十分な効果は望みにくい。10重量%を越えて配合した場合、効果の増強は認められにくく不経済である。また、添加の方法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【0016】
【実施例】
次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、本発明の処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量の部とは重量部を、%とは重量%を示す。
【0017】
製造例1
インディアンバーベリーの熱水抽出物
インディアンバーベリーの樹皮及び果実の乾燥物40gに精製水800mLを加え、95〜100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してインディアンバーベリーの熱水抽出物を1.4g得た。
【0018】
参考製造例1 インディアンキノツリーの熱水抽出物
インディアンキノツリーの樹皮の乾燥物100gに精製水2Lを加え、95〜100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してインディアンキノツリーの熱水抽出物を2.6g得た。
【0019】
参考製造例2 インディアンキノツリーの50%1,3−ブチレングリコール抽出物
インディアンキノツリーの種子及び樹脂の乾燥物20gに精製水200mL及び1,3−ブチレングリコール200mLを加え、常温で7日間抽出した後、濾過し、インディアンキノツリーの50%1,3−ブチレングリコール抽出物を360g得た。
【0020】
実施例1 パック
処方 配合量
1.インディアンバーベリーの熱水抽出物(製造例1) 0.1部
2.インディアンキノツリーの熱水抽出物(参考製造例1) 0.1
3.ポリビニルアルコール 12.0
4.エタノール 5.0
5.1,3−ブチレングリコール 8.0
6.パラオキシ安息香酸メチル 0.2
7.ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油(20E.O.) 0.5
8.クエン酸 0.1
9.クエン酸ナトリウム 0.3
10.香料 適量
11.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分1〜11を均一に溶解し製品とする。
【0021】
実施例2 軟膏
処方 配合量
1.インディアンバーベリーの熱水抽出物(製造例1) 0.01部
2.インディアンキノツリーの50%1,3−ブチレン
グリコール抽出物(参考製造例2) 0.5
3.ポリオキシエチレンセチルエーテル(30E.O.) 2.0
4.モノステアリン酸グリセリン 10.0
5.流動パラフィン 5.0
6.セタノール 6.0
7.パラオキシ安息香酸メチル 0.1
8.プロピレングリコール 10.0
9.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分3〜6を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とする。成分1、2及び7〜9を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら30℃まで冷却して製品とする。
【0022】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【0023】
実験例1 コラゲナーゼ阻害作用
製造例1及び参考製造例1を試料として用い、コラゲナーゼ阻害作用を測定した。マイクロプレートを用いて、試料液50μLに酵素液として0.1mg/mLのコラゲナーゼ Type 4(シグマ製)水溶液を50μL加える。基質溶液として0.39mg/mLのPz−ペプタイド(Pz−Pro−Leu−Gly−Pro−D−Arg−OH、シグマ製)・20mM塩化カルシウム入りトリス塩酸緩衝液(pH7.1)を加えて混合し、37℃、3分反応させた後、25mMクエン酸1mLを加えて反応を停止させた。酢酸エチル5mLを加えて抽出して、酢酸エチル層を320nmの吸光度を測定した。また、各試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害率で算出した。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブランクとしてコラゲナーゼの代わりに20mM塩化カルシウム入りトリス塩酸緩衝液(pH7.1)を用いた。
阻害率(%)=〔1−(C−D)/(A−B)〕×100
A:対照の320nmにおける吸光度(O.D.320)
B:対照ブランクのO.D.320
C:試料のO.D.320
D:試料ブランクのO.D.320
【0024】
これらの実験結果を表1に示した。その結果、インディアンバーベリーの抽出物は優れたコラゲナーゼ阻害作用を示した。
【0025】
表1.コラゲナーゼ阻害試験結果
【0026】
【発明の効果】
以上のことから、本発明のインディアンバーベリーの抽出物は、優れたコラゲナーゼ阻害作用を有していた。
Claims (1)
- インディアンバーベリーの抽出物を含有することを特徴とするコラゲナーゼ阻害剤。
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