KR102271748B1

KR102271748B1 - 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102271748B1
Application number: KR1020200013587A
Authority: KR
Inventors: 이상종; 정용수; 민영희; 장길연; 박천규; 허정미; 최성규; 이대우
Original assignee: (주)코바스; 주식회사 더마랩
Priority date: 2020-02-05
Filing date: 2020-02-05
Publication date: 2021-07-06

Abstract

본 발명은 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면 상기 화장료 조성물은 우수한 항산화 효과, 피부 염증 완화 효과, 피부 자극 완화 및 진정효과, 피부 보호 효과를 나타낸다.

Description

미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물{Cosmetic composition comprising mixed extracts of immature fruits}

본 발명은 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자의 혼합추출물을 포함하는, 항산화 효과, 피부 염증 완화 효과, 피부자극 완화 효과, 피부진정 효과 및 피부보호 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

인간은 시간이 흐름에 따라 생리적 기능이 저하되는 노화 현상을 경험하게 되고, 생체적인 노화 정도를 판단할 수 있는 지표가 되는 것 중 하나가 피부이다. 피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 제기관을 온도 및 습도변화와 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 하고 있다. 피부는 외부환경에 항상 노출되어 있으므로 노화에 따른 피부변화는 많은 부분이 외부인자들의 영향에 의한 것이라고 할 수 있다. 특히 외부 인자에 대한 염증 반응, 활성산소, 자외선 등이 주요 원인으로 간주되고 있다.

활성산소는 피부세포 및 조직 손상을 주도하여 항산화 방어체계를 파괴하여 생체 노화 뿐 아니라 피부노화에 관여하고 있으며 여러 장기에 기능적 손상을 입힘으로써 여러 질병을 유발하고 노화를 촉진시킨다. 또한 지속적인 산화스트레스로 인해 단백질 분해효소의 활성화, 탄력섬유인 콜라겐과 엘라스틴 절단, 히아루론산 절단 등의 생체 구성 성분들의 손상을 야기시키며 피부 염증 유발 및 피부 면역기능을 억제시켜 세균 감염증 또는 발암율의 증가를 가져온다.

염증반응은 체내에 기질적 변화를 가져오는 화학적 물질, 세균 감염 및 물리적 작용에 의해 발생된 손상 부위를 재생하려는 기전으로, 이러한 염증반응은 유해한 자극, 감염 및 외상 등에 의한 염증이 발현되면 국소적으로 염증성 성분과 같은 혈관 활성물질이 유리되어 유발되며, 이와 같은 염증반응이 지속되면 오히려 점막손상을 촉진함에 따라 발적, 발열, 종창, 동통, 기능장애 등의 여러 질환을 발생시키는 원인이 된다. 피부에 있어 염증반응의 결과로 분비되는 효소들은 주변 세포나 조직을 파괴하고 손상시키게 되고, 이로 인해 피부의 콜라겐 섬유 및 탄력 섬유가 파괴되는 등 피부 노화의 원인이 된다. 따라서 각종 피부 노화 원인으로부터 피부를 지키기 위해서는 활성산소를 억제하고 피부 자극 및 염증을 완화하여 피부를 진정시키고 보호하여야 한다.

본 발명자들은 피부 진정 및 피부 개선 활성을 가지는 다양한 천연물들에 대하여 연구하던 중, 미성숙 열매의 혼합추출물을 포함하는 조성물을 제조하고 그 활성에 대하여 연구하였으며, 미성숙 토마토, 미성숙 복분자, 미성숙 탱자의 혼합추출물을 포함하는 조성물이 단일 추출물에 비해 우수한 항산화 효과, 피부 염증 완화 효과, 피부자극 완화 효과, 피부진정 효과 및 피부보호 효과 등을 나타내어 피부 개선 화장료로 유용하게 사용될 수 있음을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

일본공개특허공보 2006-076925(2006.03.23) 미국등록특허 6780444(2004.08.24)

본 발명은 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자를 포함하는 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 항산화 효과, 피부 염증 완화 효과, 피부자극 완화 효과, 피부진정 효과 및 피부보호 효과가 우수한 미성숙 열매 혼합추출물을 제조하는 방법을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, 미성숙 토마토추출물, 미성숙 복분자추출물 및 미성숙 탱자추출물을 포함하는 화장료 조성물이 제공된다. 상기 미성숙 토마토추출물은 토마틴(tomatine), 토마티딘(tomatidine) 및 토마티데놀(tomatidenol)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 성분을 포함한다. 상기 미성숙 복분자추출물은 코아노시드 F1(coreanoside F1), 수아비시모시드(suavissimoside), 니가이치고시드 F1(nigaichigoside F1), 니가이치고시드 F2(nigaichigoside F2), 에피카테친(epicatechin), 카테친(catechin), 프로시아니딘 B4(procyanidin B4) 및 상귀인 H4(sanguiin H4)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 성분을 포함한다. 상기 미성숙 탱자추출물은 21α-메틸멜리아노디올(21α-methylmelianodiol), 21β-메틸멜리아노디올(21β-methylmelianodiol), 25-메톡시히스피돌 A(25-methoxyhispidol A) 및 25-메톡시히스피돌 B(25-methoxyhispidol B)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 성분을 포함한다. 상기 혼합추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001 ~ 20 중량% 포함한다. 또한 상기 화장료 조성물은 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자를 각각 1~10: 1~10: 1~10의 중량비로 혼합하여 추출한 혼합추출물을 포함하며, 더욱 바람직하게는 1:1:1의 중량비로 혼합하여 추출한 혼합추출물을 포함한다. 상기 화장료 조성물은 항산화 활성, 피부염증 완화용, 피부자극 완화 및 진정용 또는 피부 보호용임을 특징으로 한다.

상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, (A) 건조된 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자를 혼합하는 단계; (B) 상기 (A)단계의 혼합물에 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 부틸렌글리콜, 글리세린, 클로로포름, 에틸아세테이트, 디클로로메탄, 헥산, 아세톤, 아세토나이트릴, 페트로레움에테르 및 디에틸에테르로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 용매를 상기 혼합물 건조 중량의 5~25배 첨가하는 단계; (C) 상기 (B)단계의 혼합물을 일정 온도에서 환류 추출하는 단계; 및 (D) 상기 (C)단계의 환류 추출물을 여과하고 감압농축하는 단계를 포함하는 미성숙 열매 혼합추출물의 제조방법이 제공된다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자의 혼합추출물을 유효성분으로 포함하여 항산화 효과, 피부 염증 완화 효과, 피부자극 완화 효과, 피부진정 효과 및 피부보호 효과가 우수하여 피부 개선용 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.

이하 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.

본 발명은 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자를 혼합하여 추출한 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

미성숙 토마토는 가지과의 일년생 반덩굴성 식물인, 토마토(Lycopersicon esculentum)의 익지 않은 초록색의 열매로, 단단하고 떫은맛이 있으며 미국에서는 식용으로도 사용되고 있다. 미성숙 토마토에는 토마틴(tomatine)과 토마티딘(tomatidine) 및 토마티데놀(tomatidenol)이 많이 함유되어 있으며, 이러한 성분들은 토마토의 성숙도에 따라 그 양이 현저하게 감소하는 것으로 알려져 있다. 이중 미성숙 토마토에 들어있는 토마티딘은 근육의 성장을 촉진하고 근육 약화를 억제하는 작용을 하며 부상이나 노화로부터 근육 소모를 막아주는 것으로 알려져 있다. 또한 토마티딘은 조직 손상, 유전자 변이 등의 염증을 유발하는 iNOS(inducible nitric oxide synthase)와 염증반응 부위에서 발견되는 COX(cyclooxygenase)-2의 발현을 감소시킴으로서 피부 염증 반응을 완화시킨다.

미성숙 복분자는 장미과의 복분자딸기(Rubus coreanus)의 익지 않은 초록색의 열매로, 한방에서는 소변을 이롭게 하고 머리를 검게하며, 정력(스테미나)을 강화한다고 소개되고 있으며 강장, 청량, 지갈, 축뇨, 당뇨, 토혈, 지혈 등에 말린 복분자를 약재로 사용한다. 알려진 약리작용으로는 항균작용, 수렴작용, 간장 및 신장 보호 작용이 있고, 복분자의 성숙도에 따라 복분자의 생리활성 성분이 변화하는데 복분자의 완숙도에 따라 안토시아닌은 현저히 증가하는 반면 폴리페놀성 물질의 함량은 거의 변화하지 않거나 감소하는 것으로 보고되었으며, 이에 따라 복분자의 약리 효과도 달리 나타나며 특히 항산화 효과는 미성숙 복분자에서 현저히 증가하는 것으로 알려져 있다. 복분자의 항산화 효과를 나타내는 폴리페놀성 물질로서 코아노시드 F1(coreanoside F1), 수아비시모시드(suavissimoside), 니가이치고시드 F1(nigaichigoside F1), 니가이치고시드 F2(nigaichigoside F2) 등의 트리테르페노이드(triterpenosids)와 에피카테친(epicatechin), 카테친(catechin), 프로시아니딘 B4(procyanidin B4), 상귀인 H4(sanguiin H4)등의 탄닌류가 보고되었다.

미성숙 탱자인 지실(枳實)은 산초과의 탱자나무(Poncirus trifoliata)의 완전히 여물지 않아 껍질이 초록색인 열매(Poncirus immature fruit)로 이를 말려서 한방에서 약재로 사용한다. 동의보감에서는 피부의 심한 가려움증과 담벽(痰癖)을 낫게 하며 오랜 식체를 삭인다고 기록되어 있다. 지실의 약리 작용으로는 항염증, 소화불량 해소, 강심, 항알러지, 항암, 혈액응고 작용, 항균작용, 이뇨작용, 항산화 작용이 있다. 특히 우수한 항염증 활성을 나타내는 화합물로는 21α-메틸멜리아노디올(21α-methylmelianodiol), 21β-메틸멜리아노디올(21β-methylmelianodiol), 25-메톡시히스피돌 A(25-methoxyhispidol A) 및 25-메톡시히스피돌 B(25-methoxyhispidol B)이 있으며, 지실에서 분리된 신물질이다.

본 발명에 따르면, 미성숙 토마토추출물, 미성숙 복분자추출물 및 미성숙 탱자추출물을 포함하는 화장료 조성물이 제공된다. 상기 미성숙 토마토추출물은 토마틴(tomatine), 토마티딘(tomatidine) 및 토마티데놀(tomatidenol)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 성분을 포함한다. 상기 미성숙 복분자추출물은 코아노시드 F1(coreanoside F1), 수아비시모시드(suavissimoside), 니가이치고시드 F1(nigaichigoside F1), 니가이치고시드 F2(nigaichigoside F2), 에피카테친(epicatechin), 카테친(catechin), 프로시아니딘 B4(procyanidin B4) 및 상귀인 H4(sanguiin H4)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 성분을 포함한다. 상기 미성숙 탱자추출물은 21α-메틸멜리아노디올(21α-methylmelianodiol), 21β-메틸멜리아노디올(21β-methylmelianodiol), 25-메톡시히스피돌 A(25-methoxyhispidol A) 및 25-메톡시히스피돌 B(25-methoxyhispidol B)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 성분을 포함한다. 상기 혼합추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001 ~ 20 중량% 포함한다. 또한 상기 화장료 조성물은 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자를 각각 1~10: 1~10: 1~10의 중량비로 혼합하여 추출한 혼합추출물을 포함하며, 더욱 바람직하게는 1:1:1의 중량비로 혼합하여 추출한 혼합추출물을 포함한다. 상기 화장료 조성물은 항산화 활성, 피부염증 완화용, 피부자극 완화 및 진정용 또는 피부 보호용임을 특징으로 한다.

이하, 또 다른 본 발명인, 미성숙 열매 혼합추출물의 제조방법에 대하여 설명하기로 한다.

먼저, 건조된 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자를 혼합한다(A단계). 상기 미성숙 열매들은 앞서 언급한 바와 같이 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자가 각각 1~10: 1~10: 1~10의 중량비로 혼합할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 1:1:1의 중량비로 혼합할 수 있다.

다음으로, 상기 (A)단계의 혼합물에 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 부틸렌글리콜, 글리세린, 클로로포름, 에틸아세테이트, 디클로로메탄, 헥산, 아세톤, 아세토나이트릴, 페트로레움에테르 및 디에틸에테르로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 용매를 상기 혼합물에 첨가할 수 있으나, 상기 용매에 한정되는 것은 아니다. 상기 용매는 상기 혼합물 건조 중량의 5~25배 첨가하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 혼합물 건조 중량의 15배 첨가할 수 있다(B 단계).

다음으로, 상기 (B)단계의 혼합물을 80 내지 120℃에서 30분 내지 10시간 환류 추출한다(C 단계). 바람직하게는 80 내지 100℃에서 6시간 내지 10시간, 더욱 바람직하게는 100℃에서 6시간 환류 추출할 수 있다.

마지막으로, 상기 (C)단계의 환류 추출물을 여과하고 감압농축하여 본 발명에 따른 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제조할 수 있다(D 단계).

이와 같이 제조된 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물은 우수한 항산화 효과(시험예 1), 피부 염증 완화 효과(시험예 2), 피부 자극 완화 및 진정 효과(시험예 3), 피부 보호 효과(시험예 4)를 나타내었다.

본 발명의 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물은 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 그 예로는 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 풋크림, 에센스, 마스크팩을 포함한 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 클렌징오일, 클렌징워터, 바디로션, 바디클렌저, 헤어팩, 패치, 하이드로겔, 하이드로젤, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도등을 들 수 있다.

또한 본 발명의 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조될 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 화장품 이외에도 피부 과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소 적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.

또한 본 발명 화장료 조성물은 상기 미성숙 열매 혼합추출물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤제화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 보조제를 함유할 수 있다. 그리고 상기의 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.

[실시예]

이하, 실시예 및 시험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

실시예 1 ~ 10: 미성숙 열매 혼합추출물의 제조

건조된 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자를 하기 표 1의 중량비율로 혼합한 후, 건조 중량의 15배가 되는 정제수에서 100℃에서 6시간 환류 추출하였다. 추출한 뒤 여과지(Qualitive Filter Paper No.2)를 이용하여 여과한 후 여액을 감압농축하여 미성숙 열매 혼합추출물을 제조하였다.

천연물	실시예
천연물	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
미성숙 토마토	1	1	2	3	4	5	6	7	8	9
미성숙 복분자	1	4	5	6	7	8	9	1	2	3
미성숙 탱자	1	5	6	7	8	9	1	2	3	4

비교예 1: 미성숙 토마토 추출물의 제조

건조된 미성숙 토마토 100 g, 정제수 1.5 kg을 넣고 100℃에서 6시간 환류 추출하였다. 추출한 뒤 여과지(Qualitive Filter Paper No.2)를 이용하여 여과한 후 여액을 감압 농축하여 미성숙 토마토 추출물을 제조하였다.

비교예 2: 미성숙 복분자 추출물의 제조

건조된 미성숙 복분자 100 g, 정제수 1.5 kg을 넣고 100℃에서 6시간 환류 추출하였다. 추출한 뒤 여과지(Qualitive Filter Paper No.2)를 이용하여 여과한 후 여액을 감압 농축하여 미성숙 복분자 추출물을 제조하였다.

비교예 3: 미성숙 탱자 추출물의 제조

건조된 미성숙 탱자 100 g, 정제수 1.5 kg을 넣고 100℃에서 6시간 환류 추출하였다. 추출한 뒤 여과지(Qualitive Filter Paper No.2)를 이용하여 여과한 후 여액을 감압 농축하여 미성숙 탱자 추출물을 제조하였다.

시험예 1: 미성숙 열매 혼합추출물의 항산화 효과 확인

상기 실시예 및 비교예의 항산화 효과를 확인하기 위해 DPPH 시험법을 이용하여 활성산소 소거율을 측정하였다.

시험관에 농도별로 준비된 시료 용액 100 μL를 넣고, 100 μL의 에탄올과 50 μL의 0.5 mM 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)/ethanol 용액을 첨가하여 25℃의 실온에서 30분 동안 방치한 후, 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 라디칼 소거율(%)은 하기의 식에 따라 계산하였고 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 기준 물질로는 항산화제인 아스코르빈산(Ascorbic acid)을 사용하였다.

라디칼 소거율(%)=(B-A)/B × 100

A: 시료를 처리하지 않은 대조군 웰의 흡광도

B: 시료를 처리한 실험군 웰의 흡광도

시료명	DPPH 라디칼 소거율(%)
시료명	0.1%	0.5%	1.0%
비교예 1	58.7	65.1	70.9
비교예 2	58.5	65.3	71.2
비교예 3	58.3	65.6	71.3
실시예 1	69.9	79.4	88.5
실시예 2	67.9	76.9	85.1
실시예 3	68.1	77.5	85.6
실시예 4	68.4	77.1	85.4
실시예 5	67.8	77.3	85.2
실시예 6	68.0	77.4	85.0
실시예 7	68.2	76.8	85.7
실시예 8	68.5	77.2	85.5
실시예 9	68.3	77.0	85.3
실시예 10	68.1	77.6	85.2
Ascorbic acid(0.05%)	71.2

상기 표 2에서 확인되는 바와 같이 동일 농도 처리 시, 본 발명 실시예1 내지 10의 미성숙 열매 혼합추출물은 비교예1 내지 3의 단일 추출물 보다 우수한 항산화 효과를 나타내었다.

시험예 2: 염증 매개 인자 발현 감소 효과 확인

상기 미성숙 열매 혼합추출물의 염증 완화 효과를 확인하기 위해 염증 매개 인자 발현 감소 효과를 확인하기 위해 염증반응매개 인자 TNF-α의 생성량을 확인하였다.

실험에 사용된 세포는 RAW264.7(Macrophase cell)이며 37℃, 5%의 CO₂, 10%의 Fetal bovine serum(FBS, Lonza), 50 μg/mL의 streptomycin(Sigma)을 첨가한 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM, Invitrogen)에서 배양하였다. 배양 후 LPS(Lipopolysaccharide) 100 ng/mL를 처리한 후 시료를 농도별로 처리하여 배양하였다. 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 Reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR)을 통해 TNF-α의 발현 억제율을 확인하였다. TNF-α 발현 억제율은 하기 식에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다. 대조군으로는 덱사메타손(Dexamethason)을 사용하였다.

TNF-α발현억제율(%) = 100-[(시료 TNF-α발현양 / 대조군 TNF-α발현양)×100]

시료명	TNF-α 발현억제율(%)
시료명	0.1%	0.5%	1.0%
비교예 1	51.7	52.2	53.1
비교예 2	51.9	52.4	53.5
비교예 3	52.3	53.3	54.6
실시예 1	64.8	69.9	75.7
실시예 2	62.9	67.9	73.2
실시예 3	62.5	67.4	71.7
실시예 4	62.7	66.6	72.9
실시예 5	61.8	67.5	73.1
실시예 6	62.6	67.3	73.3
실시예 7	62.4	66.8	73.5
실시예 8	61.7	66.7	72.4
실시예 9	62.3	65.9	73.2
실시예 10	61.6	67.2	71.8
대조군 (Dexamethason 0.05%)	63.0

상기 표 3에서 확인되는 바와 같이, 본 발명 실시예1 내지 10의 미성숙 열매 혼합추출물에서 TNF-α 발현 억제 효과가 나타났으며, 비교예1 내지 3의 단일 추출물 보다 우수한 TNF-α 발현 억제 효과를 나타내었다.

실시예 11 ~ 12: 미성숙 열매 혼합추출물을 함유하는 크림 제조

상기 실시예 1 및 6의 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 크림을 하기 표 4의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성 분	함량(중량%)
성 분	대조예	실시예 11	실시예 12
미성숙 열매 혼합추출물(실시예 1)	-	3.00	-
미성숙 열매 혼합추출물(실시예 6)	-	-	3.00
글리세릴스테아레이트	2.00	2.00	2.00
세테아릴알코올	2.20	2.20	2.20
스테아릭애씨드	1.50	1.50	1.50
비즈왁스	1.00	1.00	1.00
폴리솔베이트 60	1.50	1.50	1.50
솔비탄스테아레이트	0.60	0.60	0.60
식물성오일	1.00	1.00	1.00
스쿠알란	3.00	3.00	3.00
미네랄오일	5.00	5.00	5.00
트리옥타노인	5.00	5.00	5.00
디메치콘	1.00	1.00	1.00
소듐마그네슘실리케이트	0.10	0.10	0.10
글리세린	5.00	5.00	5.00
베타인	3.00	3.00	3.00
트로메타민	0.10	0.10	0.10
소듐하이알루로네이트	1.00	1.00	1.00
방부제, 향, 색소	미량	미량	미량
정제수	to 100	to 100	to 100

시험예 3: 피부 자극 완화 및 진정 효과 확인

현재 피부 알레르기 증상이 없는 20 내지 30대 남녀 10명을 대상으로 하완의 안쪽 부위에 테입 스트리핑 법(Tape Stripping Method)을 통한 피부자극을 유발한 후, 본 발명에 따른 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 크림과 이를 포함하지 않은 크림을 도포하여 유발된 자극이 진정되는 정도를 상대평가하였다. 먼저 하완의 안쪽 부위 두 곳에 일반 스카치 테입으로 30회 테이핑을 하여 피부 홍반을 유발하였다. 홍반이 유발된 후, 본 발명에 따른 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물(실시예 11, 12)을 도포 하였으며, 이를 함유하지 않은 화장료 조성물(대조예)을 도포하였다. 도포 후 3시간 후 피부 자극 정도를 평가하여 하기 표 5에 나타내었다.

<피부 자극정도(홍반) 평가>

0(무반응) 1(매우 경미한 홍반 흔적) 2(희미한 또는 가벼운 홍반)

3(경계가 뚜렷하나 약한 홍반) 4(뚜렷한 홍반) 5(심한 홍반)

시료명	피부자극정도
시료명	좌	우
대조예	1	1
실시예 11	0	0
실시예 12	0	0

상기 표 5에서 확인되는 바와 같이, 본 발명의 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 실시예 11 및 12의 크림 조성물은 이를 함유하지 않은 대조예에 비해 피부 자극완화 효과가 우수하였다. 이로써 본 발명의 화장료 조성물은 피부 자극 완화 및 진정 효과가 우수함을 알 수 있다.

시험예 4: 피부 세포 보호 효과 확인

상기 실시예 및 비교예의 피부 세포 보호 효과를 확인하기 위하여 시료 처리에 의한 피부 세포의 세포독성을 확인하였다.

사람 유래 섬유아세포를 1×10⁵ cells/웰의 농도로 12 웰 플레이트에 배양하고 10% FBS를 함유하는 IMDM 배지 1 ㎖를 공급한 후 24시간 동안 CO₂배양기에서 배양하였다. 여기에 포름알데하이드 50 ppm과 시료용액을 처리한 다음 24시간 동안 배양하였다. 이후, 세포의 생존력을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행하였다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1 ㎖을 가한 후 4시간 동안 배양한 다음 배지는 제거하고 DMSO 0.5 ㎖를 넣어 형성된 포마잔을 ELISA를 사용하여 570 ㎚에서 흡광도 측정에 의해 분석하였다. 그 결과는 하기 표 6에 나타내었다. 세포생존율(%)은 하기 식에 의해 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.

세포 생존율(%) = [(St-Bo)/(Bt-Bo)] ×100

Bo : 세포배양 배지만을 발색 반응한 웰의 570 nm 흡광도

Bt : 시료를 처리하지 않고 발색 반응한 웰의 570 nm 흡광도

St : 시료를 처리하고 발색 반응한 웰의 570 nm 흡광도

시료명	세포 생존율(%)
시료명	0.1%	0.5%	1.0%
비교예 1	80.5	80.1	78.6
비교예 2	80.1	79.9	77.5
비교예 3	79.8	79.7	76.2
실시예 1	95.9	95.4	94.1
실시예 2	92.7	95.5	93.7
실시예 3	93.8	89.9	86.8
실시예 4	91.5	90.3	87.5
실시예 5	90.3	87.7	86.6
실시예 6	90.1	88.3	85.9
실시예 7	87.7	86.4	85.3
실시예 8	89.3	87.6	86.2
실시예 9	86.9	86.3	85.0
실시예 10	88.8	87.0	85.4
대조군 (Dexamethason 0.05%)	86.7

상기 표 6에서 확인되는 바와 같이 동일 농도 처리 시, 본 발명 실시예1 내지 10의 미성숙 열매 혼합추출물은 비교예1 내지 3의 단일 추출물 보다 우수한 세포 생존율을 나타내었으며, 이로써 본 발명 화장료 조성물은 피부 세포 보호 효과 우수함을 알 수 있다.

제형예 1 ~ 2: 시트마스크 에센스

상기 실시예 1 및 6의 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 시트마스크 에센스를 하기 표 7의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분(중량%)	제형예 1	제형예 2
미성숙 열매 혼합추출물(실시예 1)	2.00	-
미성숙 열매 혼합추출물(실시예 6)	-	2.00
부틸렌글라이콜	5.20	5.20
글리세린	3.50	3.50
다이소듐이디티에이	0.02	0.02
베타인	0.50	0.50
판테놀	0.30	0.30
카보머	0.20	0.20
폴리솔베이트 20	3.2	3.2
소듐하이알루로네이트	1.00	1.00
향	미량	미량
방부제	미량	미량
정제수	to 100	to 100

제형예 3 ~ 4: 하이드로겔

상기 실시예 1 및 6의 미성숙 열매 혼합추출물을 포함하는 하이드로겔을 하기 표 8의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분(중량%)	제형예 3	제형예 4
미성숙 열매 혼합추출물(실시예 1)	2.0	-
미성숙 열매 혼합추출물(실시예 6)	-	2.0
글리세린	10.00	10.00
부틸렌글라이콜	3.20	3.20
카라기난	1.00	1.00
아가	0.80	0.80
캐롭검	0.50	0.50
소듐하이알루로네이트	0.10	0.10
씨트릭애씨드	0.02	0.02
향	미량	미량
방부제	미량	미량
정제수	to 100	to 100

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

미성숙 토마토추출물, 미성숙 복분자추출물 및 미성숙 탱자추출물을 함유하는 혼합추출물을 포함하는 피부염증 완화 및 피부 보호용 화장료 조성물에 있어서,
상기 혼합추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001 ~ 20 중량% 포함하며,
상기 화장료 조성물은 미성숙 토마토, 미성숙 복분자 및 미성숙 탱자를 각각 1~9: 1~9: 1~9의 중량비로 혼합하여 추출한 혼합추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부염증 완화 및 피부 보호용 화장료 조성물.
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제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 항산화 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 피부염증 완화 및 피부 보호용 화장료 조성물.
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제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부자극 완화 및 진정 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 피부염증 완화 및 피부 보호용 화장료 조성물.
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