JP4682314B2

JP4682314B2 - ヌクレオシドホスホリラーゼおよびヌクレオシダーゼの阻害剤

Info

Publication number: JP4682314B2
Application number: JP2004530687A
Authority: JP
Inventors: ゲーリー，ブライアンエヴァンズ，; リチャード，ハーバートフルノー，; ダーク，ヘニングレンズ，; ヴェルン，エル．シュラム，; ピーター，チャールズタイラー，; オルガ，ヴラディミロヴナズブコヴァ，
Original assignee: Industrial Research Ltd
Current assignee: Industrial Research Ltd
Priority date: 2002-08-21
Filing date: 2003-08-21
Publication date: 2011-05-11
Anticipated expiration: 2023-08-21
Also published as: AU2003258911B2; EP1539783A1; KR20050093756A; HK1085219A1; RU2330042C2; US20060160765A1; AU2003258911A1; DE60336734D1; CY1111700T1; JP2006501239A; CN100379750C; BR0313664A; CA2496698C; EP1539783B1; RU2005107714A; PT1539783E; US7553839B2; US8173662B2; BRPI0313664B8; CN1692120A

Description

本発明は、ＰＮＰ、ＰＰＲＴ、ＭＴＡＰ、ＭＴＡＮおよび／またはＮＨの阻害剤である一定のヌクレオシド類似体、それらの化合物の医薬品としての使用、ならびにそれらの化合物を含有する医薬組成物に関する。また本発明は、疾患を治療する方法に関する。

背景

米国特許第５，９８５，８４８号、米国特許第６，０６６，７２２号および米国特許第６，２２８，７４１号は、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（ＰＮＰ）およびプリンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＰＰＲＴ）の阻害剤であるヌクレオシド類似体を対象としている。これらの類似体は寄生虫感染、Ｔ細胞悪性腫瘍、自己免疫疾患および炎症性障害の治療に役立つ。これらの類似体は臓器移植における免疫抑制にも役立つ。

ＰＣＴ／ＮＺ００／０００４８には一定のＰＮＰ阻害剤化合物を製造する方法が記載されている。この出願ではそれらの化合物をＰＮＰ阻害剤であると認識し、それらをより簡単に製造する方法の必要に対処している。ＰＣＴ／ＮＺ０１／００１７４にもＰＮＰおよびＰＰＲＴの阻害剤である他のヌクレオシド類似体が記載されている。

また、一定のヌクレオシド類似体が、５’−メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）および５’−メチルチオアデノシンヌクレオシダーゼ（ＭＴＡＮ）の強力な阻害剤であることも、確認されている。これらはＰＣＴ／ＮＺ０３／０００５０の主題である。

また、本願の出願人は、ホルムアルデヒドまたはホルムアルデヒド等価体を環状アミンおよびヘテロ芳香族化合物と反応させることを含む、メチレン結合環状アミンデアザプリン類の製造方法も開発している。この方法はニュージーランド特許出願第５２３９７０号の主題である。

ＰＮＰは、リボヌクレオシドおよびデオキシリボヌクレオシド（例えばグアニンおよびヒポキサンチンのリボヌクレオシドおよびデオキシリボヌクレオシド）の加リン酸分解的な切断を触媒して、対応する糖−１−リン酸とグアニン、ヒポキサンチンまたは他のプリン塩基とを与える。

プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（ＰＮＰ）が欠損しているヒトは、刺激されたＴリンパ球の増殖を妨げるｄＧＴＰの蓄積により、特定のＴ細胞免疫不全を起こす。したがってＰＮＰに対する阻害剤は免疫抑制性であり、Ｔ細胞悪性腫瘍およびＴ細胞増殖障害に対して活性である。

ヌクレオシドヒドロラーゼ（ＮＨ）はヌクレオシドの加水分解を触媒する。これらの酵素は哺乳動物には見いだされないが、一部の寄生原虫類ではヌクレオシドのサルベージに必要である。一部の寄生原虫類では、この目的にヌクレオシドホスホリラーゼを、ヌクレオシドヒドロラーゼの代わりに、またはヌクレオシドヒドロラーゼに加えて使用する。ヌクレオシドヒドロラーゼおよびヌクレオシドホスホリラーゼの阻害剤は寄生虫の代謝を妨害すると予想することができ、したがって寄生原虫類に対して有効に使用することができる。

ＭＴＡＰおよびＭＴＡＮは、ポリアミン生合成経路、哺乳動物におけるプリンのサルベージ、および細菌におけるクオラムセンシング経路で機能する。ＭＴＡＰは、５’−メチルチオアデノシン（ＭＴＡ）からアデニンおよび５−メチルチオ−α−Ｄ−リボース−１−リン酸（ＭＴＲ−１Ｐ）への可逆的加リン酸分解を触媒する。ＭＴＡＮは、ＭＴＡからアデニンおよび５−メチルチオ−α−Ｄ−リボースへの可逆的加水分解と、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステイン（ＳＡＨ）からアデニンおよびＳ−リボシル−ホモシステイン（ＳＲＨ）への可逆的加水分解とを触媒する。生成したアデニンはその後、再利用されて、ヌクレオチドに変換される。基本的に、ヒト細胞における唯一の遊離アデニン源は、これらの酵素の作用の結果である。ＭＴＲ−１Ｐはその後、一連の酵素作用によってメチオニンに変換される。

ＭＴＡは、スペルミジンの生成中に起こる、脱カルボキシル化Ｓ−アデノシルメチオニンからプトレシンへのアミノプロピル基の転移を伴う反応の副生成物である。この反応はスペルミジンシンターゼによって触媒される。スペルミジンシンターゼは、ＭＴＡの蓄積による生成物阻害に対して、極めて高い感受性を持つ。したがってＭＴＡＰまたはＭＴＡＮの阻害は、細胞におけるポリアミン生合成と、アデニンのサルベージ経路とを、厳しく制限する。更にＭＴＡは、細菌がＳ−アデノシルメチオニン（ＳＡＭ）とアシル−アシルキャリアタンパク質とからアシル化ホモセリンラクトンを合成する際の副生成物でもある。この合成では、続いてラクトン化が起こることにより、ＭＴＡとアシル化ホモセリンラクトンとが放出される。アシル化ホモセリンラクトンは、ヒト組織に対する細菌毒性に関与する細菌中の細菌クオラムセンシング分子である。最近の研究では、第２のコミュニケーション系（オートインデューサー２、ＡＩ−２）が同定されている。このコミュニケーション系は、グラム陽性菌とグラム陰性菌の両方に共通するので、異種間の細胞間コミュニケーションにおいて機能する「普遍的シグナル」であると提唱されている。ここでもＭＴＡＮがＡＩ−２の前駆体であるＳ−リボシル−ホモシステイン（ＳＲＨ）を生成する。微生物中のＭＴＡＮまたはＭＴＡＰを阻害すると、ＭＴＡの除去が妨害されて、上記の経路が生成物阻害にさらされることになり、その結果、クオラムセンシング経路の産生量が低下し、微生物感染の毒性が低下することになる。微生物中のＭＴＡＮを阻害すると、ＳＲＨの生成が妨げられて、上記第２のクオラムセンシング経路の産生量を低下させることになる。

遺伝子欠失によるＭＴＡＰ欠損は多くの悪性腫瘍で報告されている。これらの細胞におけるＭＴＡＰ酵素機能の喪失は、密接に連鎖しているＭＴＡＰおよびｐ１６／ＭＴＳ１腫瘍抑制遺伝子の第９染色体でのホモ接合性欠失によるものであることがわかっている。ｐ１６／ＭＴＳ１の不在がおそらく腫瘍の原因であるので、ＭＴＡＰ活性の欠如は遺伝子欠失の結果であって、癌の原因ではない。しかしＭＴＡＰの不在は、これらの細胞がプリンの供給を主としてデノボ経路に依存することになるように、これらの細胞におけるプリン代謝を変化させる。そのため、これらの細胞は、デノボ経路を遮断するメトトレキセート、アラノシンおよびアザセリンのような阻害剤に対して、並外れて高い感受性を示すことになる。したがって、メトトレキセート、アラノシンまたはアザセリンとＭＴＡＰ阻害剤との併用療法は、並外れて有効な抗腫瘍性を持つ。

ＭＴＡＰ阻害剤は、赤血球（ＲＢＣ）に感染するマラリアなどの寄生虫感染に対しても、極めて有効である。なぜならそれらはプリン生合成用のデノボ合成経路を持っていないからである。寄生原虫類は、その成長および増殖を、サルベージ経路によって産生されるプリンに、もっぱら依存している。したがってＭＴＡＰ阻害剤は、宿主ＲＢＣに負の作用を及ぼさずに、これらの寄生虫を殺す。なぜなら、ＲＢＣは最終分化細胞であって、プリンを合成したり、ポリアミンを産生したり、増殖したりしないからである。

上述した特許明細書の大半に記載されている化合物のイミノ糖部分は、１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール化合物が形成されるように、Ｃ−１とＣ−４の間に位置する窒素原子を持っている。リビトール環中の窒素原子の位置は、酵素への結合にとって極めて重要でありうる。また、糖部分とヌクレオシド塩基類似体との連結部の位置も、酵素阻害剤活性にとって極めて重要でありうる。既知の化合物はその連結部を糖環のＣ−１に持っている。

改良された新しいヌクレオシドホスホリラーゼ阻害剤およびヌクレオシダーゼ阻害剤の研究において、本出願人は、糖環中の窒素原子が様々な位置にある化合物、また加えて、２つの窒素原子が糖環の一部を形成している化合物の合成および生物活性を検討した。糖部分と塩基類似体との連結の別の様式も検討した。

本出願人は、驚くべきことに、一定の新規化合物がＰＮＰ、ＰＰＲＴ、ＭＴＡＰおよびヌクレオシドヒドロラーゼＭＴＡＮの１つ以上に対して強力な阻害活性を示すことを見いだした。

したがって、ＰＮＰ、ＰＰＲＴ、ＭＴＡＰ、ＭＴＡＮおよび／またはＮＨの阻害剤である化合物を提供すること、または少なくとも有用な選択肢を提供することが、本発明の目的である。

発明の説明

本発明の第１の態様として、式（Ｉ）の化合物もしくはその互変異性体、または薬学的に許容できるその塩、もしくはそのエステル、もしくはそのプロドラッグが提供される。

［式中、
ＶはＣＨ_２およびＮＨから選択され、かつＷはＮＲ^１およびＮＲ^２から選択されるか、あるいはＶはＮＲ^１およびＮＲ^２から選択され、かつＷはＣＨ_２およびＮＨから選択され；
ＸはＣＨ_２およびＲ配置またはＳ配置のＣＨＯＨから選択され；
Ｙは水素、ハロゲンおよびヒドロキシから選択され、ただし、ＶがＮＨ、ＮＲ^１およびＮＲ^２から選択される場合は、Ｙは水素であり；
Ｚは水素、ハロゲン、ヒドロキシ、ＳＱ、ＯＱおよびＱから選択され、Ｑは置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール基であり；
Ｒ^１は式（ＩＩ）

の基であり；
Ｒ^２は式（ＩＩＩ）

の基であり；
ＡはＮ、ＣＨおよびＣＲから選択され、Ｒはハロゲン、置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ^３、ＮＲ^３Ｒ^４およびＳＲ^５から選択され、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５はそれぞれ、置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール基であり；
ＢはＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ^６、ＳＨ、水素およびハロゲンから選択され、Ｒ^６は置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール基であり；
ＤはＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ^７、水素、ハロゲンおよびＳＣＨ_３から選択され、Ｒ^７は置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール基であり；
ＥはＮおよびＣＨから選択され；
ＧはＣＨ_２およびＮＨから選択されるか、またはＧは存在せず、ただし、ＷがＮＲ^１またはＮＲ^２であり、かつＧがＮＨである場合は、ＶはＣＨ_２であり、ＶがＮＲ^１またはＮＲ^２であり、かつＧがＮＨである場合は、ＷはＣＨ_２である。］

好ましくは、Ｚは水素、ハロゲン、ヒドロキシ、ＳＱおよびＯＱから選択される。より好ましくは、ＺはＯＨである。あるいは、ＺはＳＱであることが好ましい。もう一つの好ましい態様では、ＺはＱである。

ＶがＣＨ_２であることも好ましい。ＸがＣＨ_２であることは更に好ましい。また、ＧはＣＨ_２であることが好ましい。

好ましくは、ＷはＮＲ^１である。あるいは、ＷはＮＲ^２であることが好ましい。ＷがＮＨ、ＮＲ^１またはＮＲ^２から選択される場合は、ＸがＣＨ_２であることも好ましい。

本発明の好ましい化合物として、Ｖ、ＸおよびＧがすべてＣＨ_２であり、ＺがＯＨであり、かつＷがＮＲ^１である化合物が挙げられる。

本発明の他の好ましい化合物として、Ｖ、ＸおよびＧがすべてＣＨ_２であり、ＺがＳＱであり、かつＷがＮＲ^１である化合物が挙げられる。

好ましくは、Ｙは水素である。あるいは、Ｙはヒドロキシであることが好ましい。

好ましくは、Ｂはヒドロキシである。あるいは、ＢはＮＨ_２であることが好ましい。

好ましくは、ＡはＣＨである。あるいは、ＡはＮであることが好ましい。

好ましくは、ＤはＨである。あるいは、ＤはＮＨ_２であることが好ましい。

ＥがＮであることも好ましい。

本発明の好ましい化合物として、
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシルメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（８−アザ−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（８−アザ−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン；
（３Ｓ，４Ｒ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３，４−ジヒドロキシ−４−メチルチオメチルピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン；
Ｎ−（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール；
Ｎ−（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール；
（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル−１−（ヒポキサンチン−９−イル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（８−アザ−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザグアニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（４−クロロフェニルチオメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（６−クロロ−９−デアザプリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（６−アジド−９−デアザプリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；または
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−アセトキシ−４−（アセトキシメチル）ピロリジン
が挙げられる。

もう一つの態様として、本発明は、薬学的有効量の上記式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物を提供する。

更にもう一つの態様として、本発明は、プリンホスホリボシルトランスフェラーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、５’−メチルチオアデノシンホスホリラーゼ、５’−メチルチオアデノシンヌクレオシダーゼおよび／またはヌクレオシドヒドロラーゼを阻害することが望ましい疾患または状態を治療する方法であって、薬学的有効量の上記式（Ｉ）の化合物を、治療を必要としている患者に投与することを含む方法を提供する。

上記疾患または状態には、癌、細菌感染、原虫感染またはＴ細胞性疾患を含めることができる。Ｔ細胞性疾患としては、乾癬、関節炎または移植拒絶を挙げることができる。

更にもう一つの態様として、本発明は、プリンホスホリボシルトランスフェラーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、５’−メチルチオアデノシンホスホリラーゼ、５’−メチルチオアデノシンヌクレオシダーゼおよび／またはヌクレオシドヒドロラーゼを阻害することが望ましい疾患または状態を治療するための医薬品の製造における上記式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。

詳細な説明

Ｂおよび／またはＤがヒドロキシ基である場合は、式（Ｉ）の化合物の表記が、対応するアミドのエノール型互変異性体の表記であることと、これが大部分はアミド体として存在するであろうことは、理解される。このエノール型互変異性体表記の使用は、単に、より少ない構造式で本発明の化合物を表現できるようにするためである。

同様に、Ｂおよび／またはＤがチオール基である場合は、式（Ｉ）の化合物の表記が、対応するチオアミドのチオエノール型互変異性体の表記であることと、これが大部分はチオアミド体として存在するであろうことも、理解される。このチオエノール型互変異性体表記の使用は、単に、より少ない構造式で本発明の化合物を表現できるようにするためである。

本発明の化合物は任意の適切な方法で製造することができる。適切な一方法では、糖部分と塩基部分とを別個に合成した後、塩基部分を糖部分の環内の窒素原子に連結する。

例えば下記反応式１には、糖分子中でＣ−１アノマー炭素原子が見いだされるであろう位置と同じ位置に糖類似体の窒素原子が位置している、本発明化合物の１−Ｎ−イミノ糖部分の製造が概説されている。この１−Ｎ−イミノ糖の合成における有用な出発物質は、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］ピロリジンである。この出発化合物は、Ｆｉｌｉｃｈｅｖらの方法（ＣａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅＲｅｓ．，２００１，３３３，１１５−１２２）に、窒素保護基としてＮ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）基ではなくｔ−ブトキシカルボニル部分を使用するという唯一の変更を加えることによって、製造することができる。ジオール部分を酸化的に切断した後、系中で還元を行うことにより、Ｎ−保護３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジン（１）を得る。Ｎ保護基を除去すると、（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジン（４）が得られる。ラセミ型の３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジンは、Ｊａｅｇｅｒらによって初めて製造され（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９６５，３０，７４０−７４４）、１’−アザカルバ環状チミジン類似体（Ｌｅｅ，Ｙ．Ｈ．，Ｋｉｍ，Ｈ．Ｋ．，Ｙｏｕｎ，Ｉ．Ｋ．，Ｃｈａｅ，Ｙ．Ｂ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１９９１，１，２８７−２９０）およびアザ−Ｃ−ピリミジン類（Ｓｏｒｅｎｓｏｎ，Ｍ．Ｄ．，Ｋｈａｌｉｆａ，Ｎ．Ｍ．，Ｐｅｄｅｒｓｅｎ，Ｅ．Ｂ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９９９，１９３７−１９４３）の製造に使用された。

（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジンの合成方法は、他にも２つ記載されている。Ｂｏｌｓらによる一方法［Ｂｏｌｓ，Ｍ．，Ｈａｎｓｅｎ，Ｓ．Ｕ．，ＡｃｔａＣｈｅｍ．Ｓｃａｎｄ．，１９９８，５２，１２１４−１２２２］ではエナンチオマーの酵素精製が行われる。Ｉｃｈｉｋａｗａらによるもう一つの方法［Ｉｃｈｉｋａｗａ，Ｙ．，Ｍａｋｉｎｏ，Ｋ．，ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．，１９９８，３９，８２４５−８２４８］は、フマル酸モノエチルエステルを使った（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジンのマルチグラム不斉合成である。Ｉｃｈｉｋａｗａらは、ヒトＰＮＰに対する（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジンの阻害活性を評価して、１６０μＭのＩＣ_５０を得た。

適切な塩基類似体への連結にすぐに使用することができる有用な化合物として（３Ｒ，４Ｒ）−３−ベンジルオキシ−４ベンジルオキシメチルピロリジン塩酸塩（３）を得るには、Ｎ保護基を除去する前に、化合物（１）のヒドロキシル基をベンジル化することが望ましい。

糖部分の連結は適当なアルデヒドの還元的アミノ化によって達成することができる。対応するブロモ前駆体から製造される適切なアルデヒドの例を、反応式２に示す。

アルデヒド塩基類似体と保護糖類似体（３）とのカップリングを反応式３に示す。保護基の除去により、本発明の阻害剤化合物（３Ｓ，４Ｓ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３，４−ジヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（８）が得られる。

この方法で、環内の任意の位置に窒素原子を持つ任意の糖類似体を、任意の塩基類似体にカップリングすることができるということを理解すべきである。また、アルデヒドの還元的アミノ化によるカップリング以外の方法を使用できることも、理解すべきである。

下記反応式４からわかるように、中間体（７）を操作して（１０）を得ることができる。

塩基類似体と糖類似体（４）とのカップリングの他の例を反応式５に示す。この方法は、化合物（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（８−アザ−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（１２）および（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（８−アザ−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（１３）を製造するために使用することができる。

環内に２つの窒素原子を含む中間体糖類似体を製造した。（３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチルピラゾリジン（２１）は、反応式６に概説する経路に従って製造することができる。ケトン（１４）は周知の化学反応を使ってＤ−キシロースから製造される（Ｌｉｎ，Ｔ−Ｓ．，Ｚｈｕ，Ｊ−Ｌ．，Ｄｕｔｓｃｈｍａｎ，Ｇ．Ｅ．，Ｃｈｅｎｇ，Ｙ−Ｃ．，Ｐｒｕｓｏｆｆ，Ｗ．Ｈ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９３，３６，３５３−３６２）。アミノ化に続いて、イミンの還元を行い、得られた２級アミンをアシル化することにより、化合物（１７）を得る。酸加水分解と同時に再環化を行うキーステップにより、イミノ環（１８）を得る。水素添加に続いて、ジオール部分の切断と、酢酸基の除去を行うことにより、所望のピラゾリジン（２１）を得る。

ピラゾリジン（２１）またはその前駆体Ｎ−アセテート（２０）を、様々な塩基類似体とカップリングさせて、本発明の式（Ｉ）の阻害剤候補を得ることができる。

塩基類似体を糖類似体にカップリングする代替的方法を反応式７に示す。アルデヒドであるＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−ホルミルピロリジン（２２）をウィッティヒ型反応に使用して、５’Ｃ−Ｃ連結中間体であるＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエテニル）ピロリジン（２３）を得る。次に、水素添加およびＢｏｃ切断を行うことにより、塩酸塩（２５）を得る。これをマンニッヒ型反応に使用すると、（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（６−クロロ−９−デアザプリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン（２６）を得ることができる。封管中１３０℃にてメタノール中の７Ｎアンモニアで処理した後、３ＮＨＣｌ水溶液で塩酸塩に変換すると、（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン塩酸塩（２７）が得られる。

反応式７に例示した経路を、Ｃ−４置換基が異なる２５の様々な類似体と様々な９−デアザプリン類似体とのカップリングに応用できることは、理解される。

反応式８は、選ばれた本発明化合物の更にもう一つの代替製造法を示している。この手順では、出発化合物Ｄ−アラビニトールを、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］ピロリジンの代わりに使用する。

本発明の化合物はＰＮＰ、ＭＴＡＰおよび／またはＭＴＡＮの強力な阻害剤である。表１に、ヒトＰＮＰに対する阻害定数を、選ばれた本発明の化合物について示す。表２に、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＭＴＡＮに対する阻害定数を、選ばれた化合物について示す。表３に、ヒトＭＴＡＰに対する阻害定数を、選ばれた化合物について示す。表４に、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）ＰＮＰに対する阻害定数を、選ばれた化合物について示す。表５に、熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）ＰＮＰに対する阻害定数を、選ばれた化合物について示す。

表１、２、３、４および５に示すＫ_ｉは、酵素−阻害剤複合体によって形成される初期阻害定数であり、Ｋ_ｉ ^＊は、遅発性強結合阻害期間後に観察される阻害に関する平衡解離定数である。Ｋｉ^＊は生物学的に有効な定数である。

（他の態様）
本発明の化合物は遊離塩基の形態でも塩の形態でも有用である。「薬学的に許容できる塩」という用語は、例えば以下に挙げる酸を含む無機酸または有機酸から誘導される無毒性塩に適用されるものとする：塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、グルコン酸、クエン酸、メタンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸。

活性化合物は、経口投与、注射または局所投与を含む様々な経路で患者に投与することができる。投与すべき化合物の量は、患者の性質と、治療すべき疾患の性質および程度とに応じて、広範囲にわたって変動する。通例、成人への投与量は、１ミリグラム未満〜１０００ミリグラムの範囲内、好ましくは０．１〜１００ミリグラムの範囲内になる。

経口投与の場合は、化合物を、例えば錠剤、カプセル剤、散剤、溶液剤、懸濁剤および分散剤などの固体製剤または液体製剤に製剤化することができる。このような製剤は、ここに挙げなかった他の経口投薬法と共に、当技術分野では周知である。錠剤形の場合は、乳糖、ショ糖およびトウモロコシデンプンなどの通常の錠剤基剤を、結合剤、崩壊剤および滑沢剤と共に使用して、化合物を錠剤化することができる。結合剤としては例えばトウモロコシデンプンまたはゼラチンを挙げることができ、崩壊剤としてはバレイショデンプンまたはアルギン酸を挙げることができ、滑沢剤としてはステアリン酸マグネシウムを挙げることができる。着色剤または着香剤などの他の成分を加えてもよい。

液体剤形は、薬学的に許容できる界面活性剤または懸濁化剤などの他の薬剤と共に、または他の薬剤を伴わずに、水およびエタノールなどの担体を含む。

本化合物は、水または食塩水などの生理学的に許容できる希釈剤を使った注射によって、投与することもできる。希釈剤は、エタノール、プロピレングリコール、油または薬学的に許容できる界面活性剤など、１種以上の他の成分を含んでもよい。

皮膚または粘膜に局所投与するために、本化合物は、クリーム剤の成分として存在してもよい。好ましくは、クリーム剤は、皮膚または粘膜の通過を助けるために、薬学的に許容できる溶媒を含む。適切なクリーム剤は当業者には周知である。

更に本化合物は徐放系を使って投与することもできる。例えば本化合物を徐溶性の錠剤またはカプセル剤に組み込むことができる。

以下の実施例により、本発明を更に例示する。本発明は以下の実施例に限定されないことを理解すべきである。

実施例１
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（１）．エタノール（５０ｍＬ）中のＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］ピロリジン（３．４ｇ，１３．７ｍｍｏｌ）を、撹拌した過ヨウ素酸ナトリウム（３．４ｇ，１６ｍｍｏｌ）の水（２５ｍＬ）溶液に、反応温度を０℃に保ちながら滴下した。反応液を更に２０分間放置した後、再び反応温度を確実に０℃に維持しながら、水素化ホウ素ナトリウム（２．０ｇ，過剰量）を少しずつ加えた。添加が完了してから、固体を濾過し、エタノール（５０ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮することにより、シロップ状物を得た。クロマトグラフィーにより、１（２．７４ｇ，９２％）をシロップ状物として得た。

実施例２
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｒ）−３−ベンジルオキシ−４−（ベンジルオキシメチル）ピロリジン（２）．水素化ナトリウム（１４０ｍｇ，６０％油分散液，３．７ｍｍｏｌ）を、撹拌した臭化ベンジル（３００μＬ，２．８ｍｍｏｌ）および１（２００ｍｇ，０．９２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、０℃で少しずつ加えた。添加が完了してから、得られた懸濁液を室温まで温め、トルエン（１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）、食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮することにより、シロップ状物を得た。クロマトグラフィーにより２（３５０ｍｇ，９６％）を油状物として得て、それを精製することなく次のステップに使用した。

実施例３
（３Ｒ，４Ｒ）−３−ベンジルオキシ−４−（ベンジルオキシメチル）ピロリジン塩酸塩（３）．塩酸（２ｍＬ，１Ｍ）を、２（５００ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）のメタノール（２ｍＬ）溶液に加え、得られた混合物を４０℃で１時間撹拌した。完了後に、反応液を減圧下で濃縮することにより、３を塩酸塩（３３０ｍｇ，９０％）として得た。
¹H NMR δ 7.35-7.21(m,10H), 4.48 (m, 4H), 4.08 (d, J = 2.9 Hz,1H), 3.53 (m, 1H), 3.44 (m, 3H),3.24 (m, 1H), 2.65 (m, 1H). ¹³C NMR δ 138.0, 137.6, 128.9, 128.8, 128.3, 128.2, 79.3, 73.7, 71.9, 68.7,49.6, 46.4, 44.8.

実施例４
（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（４）．塩酸（５ｍＬ，１２Ｍ）を、撹拌した１（２．３ｇ，１０．６ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）溶液に、室温で滴下した。１時間後に反応液を減圧下で濃縮することにより、４（１．６３ｇ，１００％）を油状物として得た。
¹³C NMR δ 71.9, 60.9, 52.1,47.9, 46.6.

実施例５
７−Ｎ−ベンジルオキシメチル−６−ｔｅｒｔ−ブトキシ−９−デアザプリン−９−カルバルデヒド（５）．５−ベンジルオキシメチル−７−ブロモ−４−ｔｅｒｔ−ブトキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン（４００ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（１０ｍＬ）およびアニソール（５ｍＬ）に溶解し、−７８℃まで冷却した。次に、反応温度が−７０℃未満に維持されるような速度で、ｎ−ブチルリチウム（６００μＬ，２．５Ｍ）を滴下し、得られた溶液を−７８℃で３０分間放置した。次に、ジメチルホルムアミド（１００μＬ）を加え、反応液を更に３０分間撹拌してから、水で反応を停止し、室温まで温めた。次に、反応液を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ）、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮することにより、シロップ状物を得た。クロマトグラフィーでの精製により、５（２７０ｍｇ，７８％）を得た。
¹H NMR δ 10.29 (s, 1H),8.62 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.34-7.22 (m, 5H), 5.79 (s, 2H), 4.53 (s, 2H), 1.71(s, 9H). ¹³C NMR δ 184.8, 156.63,152.6, 150.0, 136.7, 136.6, 128.9, 128.5, 127.8, 118.4, 84.4, 78.3, 71.0, 29.0.

実施例６
８−アザ−９−デアザ−６−メトキシ−７−Ｎ−（テトラヒドロピラン−２−イル）−プリン−９−カルバルデヒド（６）．ｎ−ＢｕＬｉ（０．７ｍＬ，２．４Ｍ）を、撹拌した８−アザ−９−ブロモ−９−デアザ−６−メトキシ−７−Ｎ−（テトラヒドロピラン−２−イル）−プリン（５３０ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、不活性雰囲気下、−７８℃で滴下した。反応液を−７８℃で更に３０分間撹拌した後、ＤＭＦ（１．０ｍＬ）を加え、反応液を室温まで温めた。反応を水（５０ｍＬ）で停止させ、トルエン（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、減圧下で濃縮することにより、固体残渣を得た。クロマトグラフィーにより、６を固体として得た。
¹H NMR δ 10.43 (s, 1H),8.71 (s, 1H), 6.55 (dd, J = 10.0, 2.7 Hz, 1H), 4.25 (s, 3H), 4.13 (m, 1H), 3.83(dt, J = 10.8, 2.8 Hz), 2.53-1.65 (m, 7H). ¹³C NMR δ 177.0, 161.5, 154.5, 143.9, 130.2, 128.9,87.0, 67.4, 53.5, 28.7, 23.7, 21.2.

実施例７
７−［（３Ｒ，４Ｒ）−（３−ベンジルオキシ−４−ベンジルオキシメチルピロリジン−１−イル）メチル］−５−ベンジルオキシメチル−３Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン（３Ｓ，４Ｓ）−１−［（９−デアザ−７−ベンジルオキシメチル−ヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ベンジルオキシ−４−（ベンジルオキシメチル）ピロリジン（７）．シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ，１．５９ｍｍｏｌ）を、撹拌した５（２２０ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）および３・ＨＣｌ（１９０ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）溶液に加え、室温で終夜撹拌した。次に、反応液を減圧下で濃縮し、メタノール（２ｍＬ）およびｃＨＣｌ（２ｍＬ）に再溶解し、１時間撹拌した後、減圧下で濃縮することにより、固体残渣を得た。得られた残渣のクロマトグラフィーにより、７（２０２ｍｇ，６３％）を固体として得た。
¹H NMR δ 7.87 (1H, s),7.32 (1H, s), 7.31-7.23 (m, 5H), 5.89 (s, 2H), 4.56 (s, 2H), 4.50 (s, 2H), 4.48(s, 2H), 4.47 (s, 2H), 3.87 (m, 2H), 3.81 (q, J = 13.4 Hz, 2H), 3.43 (d, J =7.1 Hz, 2H), 3.01 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 2.79 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 2.55 (m, 1H),2.36 (m, 1H). ¹³C NMR δ 156.2, 145.8, 141.8, 138.9, 138.8, 137.6, 131.4, 128.8, 128.7,128.7, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 128.8, 117.9, 115.7, 81.3, 77.1, 73.5, 72.1,71.4, 70.8, 60.0, 56.4, 48.6, 45.9.

実施例８
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（８）．化合物７（１２０ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）およびパールマン触媒（１２０ｍｇ）をエタノール（３ｍＬ）および酢酸（１ｍＬ）に懸濁し、水素ガス雰囲気下、室温で、２４時間激しく撹拌した。次に、反応液をセライトで濾過し、減圧下で濃縮することにより、固体を得た。その固体のクロマトグラフィーおよびイオン交換で処理し、８（３８ｍｇ，６８％）を、２４８〜２５０℃の融点を持つ白色固体として得た。
¹H NMR δ 7.81 (1H, s),7.34 (1H, s), 3.97 (1H, brs), 3.65 (2H, s), 3.53 (1H, m), 3.44 (1H, m), 2.93(1H, t, J = 9.0Hz), 2.77 (1H, m), 2.60 (1H, m), 2.33 (1H, t, J = 7.1Hz), 2.12(1H, brs). ¹³C NMR δ 155.8, 144.1, 142.8, 130.0, 117.3, 111.1, 72.9, 62.7, 60.2, 54.8,48.9, 47.3. HRMS (MH+) C₁₂H₁₆N₄O₃の計算値: 265.1301. 測定値 265.1302. Anal. C₁₂H₁₆N₄O₃・1/2H₂Oの計算値 C, 52.7; H, 6.2; N, 20.5. 測定値 C, 53.0; H 5.9; N, 20.4.

実施例９．１
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザ−７−ベンジルオキシメチル−アデニン−９−イル）メチル］−３−ベンジルオキシ−４−（ベンジルオキシメチル）ピロリジン（９）．化合物７（１．２ｇ，２．１２ｍｍｏｌ）を塩化ホスホリル（２０ｍＬ）に加え、得られた懸濁液を加熱還流した。１時間後に、反応液を減圧下で濃縮し、クロロホルムで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をメタノール中の７ＮＮＨ_３に再溶解し、得られた溶液を封管中で１２０℃まで終夜加熱した。反応液を減圧下で濃縮し、クロマトグラフィーで精製することにより、９（０．８３ｇ，６９％）を得た。
¹H NMR δ 8.38 (s, 1H),7.76 (brs, 1H), 7.32-7.25 (m, 15H), 6.01 (brs, 2H), 5.51 (d, J = 2.3 Hz, 2H),4.55 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 4.25 (d, J = 2.9 Hz, 2H), 4.05 (m,1H), 3.50 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.42 (m, 1H), 3.31 (m, 1H), 3.20 (m, 1H), 3.01(m, 1H), 2.71 (m, 1H). ¹³C NMR δ 152.3, 151.5, 150.1, 138.3, 138.0, 135.7, 134.6, 129.2, 129.0,128.8, 128.2, 128.1, 115.18, 107.94, 79.7, 77.6, 73.6, 71.9, 70.7, 69.8, 58.6,58.1, 55.22, 54.9, 48.8, 45.3.

実施例９．２
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシルメチル）ピロリジン（１０）．化合物９（１００ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（５０ｍｇ，１０重量％）をエタノール（４ｍＬ）に懸濁し、水素雰囲気下、室温で、２４時間激しく撹拌した。次に、反応液をセライトで濾過し、減圧下で濃縮することにより、シロップ状物を得た。シリカゲルでのクロマトグラフィーにより、１０を固体として得た。
¹H NMR (D₂O) d 7.83 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 3.88 (q, J =4.4 Hz, 1H), 3.56-3.32 (4H, m), 2.78 (t, J = 9.0Hz, 1H), 2.62 (dd, J = 10.7,6.4 Hz, 1H), 2.47 (dd, J = 10.7, 4.2 Hz, 1H), 2.16 (dd, J = 9.8, 7.0 Hz, 1H),2.03 (1H, m). ¹³C NMR (D₂O)d 150.1, 149.6, 145.1, 129.6, 113.3, 109.8, 72.9, 62.8, 60.3, 54.8, 49.0,47.3. HRMS (MH⁺) C₁₂H₁₈N₅O₂の計算値: 264.1461. 測定値 264.1457.

実施例１０
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（８−アザ−９−デアザ−６−メトキシ−８−（テトラヒドロピラン−２−イル）−プリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（１１）．シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ，１．５９ｍｍｏｌ）を、撹拌した６（３４０ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）および４・ＨＣｌ（１９０ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）溶液に加え、室温で終夜撹拌した。得られた残渣のクロマトグラフィーにより、１１（１５０ｍｇ，３５％）を固体として得た。
¹H NMR δ 8.39 (s, 1H),5.90 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.17-3.94 (m, 4H), 4.12 (s, 3H), 3.67-3.52 (m, 2H),2.94-2.79 (m, 2H), 2.66-2.52 (m, 2H), 2.35-2.09 (m, 2H), 1.70-1.56 (m,2H). ¹³C NMR δ 162.6, 152.2, (140.1, 140.0), 133.5, 131.6,(87.0, 86.9), 74.3, (68.3, 68.2), (64.3, 64.2), 62.6, (56.2, 56.1), 54.5,(50.6, 50.7), (47.7, 47.6), 29.7, 25.2, 21.8.

実施例１１
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（８−アザ−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（１２）．濃塩酸（１ｍＬ，１２Ｍ）を、１１（５０ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）のメタノール溶液に加え、終夜撹拌した後、減圧下で濃縮することにより、固体残渣を得た。その固体残渣をメタノールでトリチュレーションし、濾過することにより、１２（３８ｍｇ，９２％）を固体として得た。
¹H NMR δ 8.13 (s, 1H),4.35 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.66-3.43 (m, 2H), 3.55 (d, J = 5.7 Hz,2H), 3.10 (m, 1H), 2.44 (brs, 1H). ¹³C NMR δ 154.7, 145.4, 137.1, 134.7, 128.6, 71.4,60.6, 60.6, 55.0, 48.0, 47.9.

実施例１２
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（８−アザ−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（１３）．１１（１００ｍｇ）の７ＮＮＨ_３−メタノール（４ｍＬ）溶液を、封管中、１２０℃で終夜加熱した。次に、反応液を減圧下で濃縮し、粗製残渣をメタノール（１ｍＬ）およびｃＨＣｌ（１ｍＬ）に再溶解して、終夜静置した。反応液を再び減圧下で濾過し、得られた残渣をクロマトグラフィーで精製することにより、１３（６１ｍｇ，８４％）を得た。
¹³C NMR δ 152.4, 151.5,139.1, 134.8, 122.7, 71.7, 61.1, 60.3, 55.0, 48.4, 48.2.

実施例１３
５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，２−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−ｅｒｙｔｈｒｏ−ペントフラノース−３−ウロース（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ヒドラゾン（１５）．１４（１１．５ｇ，３８ｍｍｏｌ）、カルバジン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１７ｇ，１２８ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（１．１５ｇ，４．６ｍｍｏｌ）のトルエン（１５０ｍＬ）溶液を、７０℃で終夜撹拌した。完了後に反応液を飽和ＮａＨＣＯ_３および水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮することにより、シロップ状物を得た。クロマトグラフィーで精製することにより、１５（１２．５ｇ，７９％）を油状物として得た。
¹H NMR δ 8.43 (brs,1H), 5.98 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.90 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 4.76 (q, J = 1.5Hz, 1H), 3.77 (m, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.45 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 0.82 (s, 9H),-0.03 (d, J = 5.8 Hz, 6H). ¹³C NMR δ 153.5, 152.8, 114.3, 105.7, 82.0, 81.7, 76.2, 66.2, 28.6, 28.0,27.5, 26.2, 18.5. HRMS (MH⁺)C₁₉H₃₇N₂O₆Siの計算値: 417.2421. 測定値 417.2398.

実施例１４
３−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルヒドラジノ）−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−３−デオキシ−１，２−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−リボフラノース（１６）．ボラン・ＤＭＳ錯体（１５ｍＬ，約１０Ｍ，１５０ｍｍｏｌ）を、撹拌した１５（１２．５ｇ，３０ｍｍｏｌ）の溶液に、不活性雰囲気下、−７８℃で滴下した。反応液を室温まで温め、メタノールで注意深く反応を停止した後、得られた溶液を減圧下で濃縮した。得られた粗製シロップ状物を、一定量のメタノール（１００ｍＬ×３）と同時蒸留することにより、１６（１２．５ｇ，１００％）を油状物として得て、それを精製せずに次のステップに使用した。
¹H NMR δ 6.29 (brs,1H), 5.67 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 4.62 (t, J = 4.3 Hz, 1H), 4.24 (brs, 1H), 3.75(m, 2H), 3.72 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.38 (s, 9H), 1.27 (s, 3H), 0.82 (s, 9H),-0.03 (s, 6H). ¹³C NMR δ 156.9, 112.8, 104.6, 80.7, 80.4, 80.2, 65.0, 63.1, 28.7, 27.1, 26.9,26.3, 18.7. HRMS (MH⁺) C₁₉H₃₈N₂O₆Siの計算値: 418.2499. 測定値 418.2509.

実施例１５
３−（１−アセチル−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルヒドラジノ−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−３−デオキシ−１，２−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−リボフラノース（１７）．無水酢酸（１０ｍＬ，過剰量）を、撹拌した１６（１２．５ｇ，３０ｍｍｏｌ）のピリジン（３０ｍＬ）溶液に加え、得られた反応液を室温で終夜撹拌しておいた。完了後に反応液をクロロホルム（５００ｍＬ）で希釈し、１０％ＨＣｌ、水、飽和ＮａＨＣＯ_３、食塩水で洗浄した後、有機層を乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮することにより、粗製黄色油状物を得た。クロマトグラフィーで精製することにより、１７（６．５ｇ，４７％）を無色の油状物として得た。
¹H NMR δ 7.20 (brs,1H), 5.75 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 5.02 (dd, J = 9.8, 5.0 Hz, 1H), 4.72 (t, J = 4.2Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 9.8, 2.2 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.70 (dd, J= 11.6, 3.8 Hz, 1H), 2.09 (s, 3H),1.55 (s, 3H), 1.42 (s, 9H), 1.28 (s, 3H),0.84 (s, 9H), -0.03 (s, 6H). ¹³C NMR δ 174.5, 155.2, 112.7, 104.7, 82.0, 81.0, 77.2, 62.9, 62.0, 55.0,28.5, 27.0, 26.7, 26.3, 21.1, 18.7. HRMS (MH⁺) C₂₁H₄₁N₂O₇Siの計算値: 461.2683. 測定値 461.2704.

実施例１６
（３Ｓ，４Ｓ）−２−アセチル−３，４−ジヒドロ−３−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−４−ヒドロキシピラゾール（１８）．撹拌した１７（２．０ｇ，４．３ｍｍｏｌ）の７０％酢酸（２０ｍＬ）溶液を１００℃で終夜加熱した。得られた溶液を冷却し、水（１００ｍＬ）で希釈し、その水溶液をクロロホルム（１００ｍＬ×２）で抽出した後、水層を減圧下で濃縮することにより、シロップ状物を得た。その生成物をクロマトグラフィーで精製することにより、１８（３８０ｍｇ，４７％）を油状物として得た。
¹³C NMR δ 173.1, 150.5,112.7, 74.7, 69.6, 65.4, 62.4, 21.4. HRMS (MH⁺) C₇H₁₃N₂O₄の計算値: 189.0875. 測定値 189.0876.

実施例１７
（３Ｓ，４Ｓ）−２−アセチル−３−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−４−ヒドロキシピラゾリジン（１９）．（３Ｓ，４Ｓ）−２−アセチル−１，５−ジヒドロ−３−［（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル］−４−ヒドロキシ−ピラゾール（１８）（２００ｍｇ，１．１１ｍｍｏｌ）を含むメタノールの溶液に、パールマン触媒（２００ｍｇ）を懸濁し、水素雰囲気下で終夜撹拌した。反応液をセライトで濾過し、濾液を減圧下で濃縮することにより、粗製油状物を得た。その粗生成物をクロマトグラフィーで精製することにより、１９（８５ｍｇ，４３％）を無色の油状物として得た。
¹H NMR δ 4.64 (dd, J =5.7, 3.4 Hz, 1H), 3.90 (m, 2H), 3.61 (m, 2H), 3.36 (dd, J = 11.7, 6.5 Hz, 1H),2.71 (dd, J = 11.7, 6.0 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H). ¹³C NMR δ 174.5, 75.4, 72.7, 68.2, 65.2, 56.4,21.5. HRMS (M⁺) C₇H₁₄N₂O₄の計算値: 190.0953. 測定値 190.0951.

実施例１８
（３Ｒ，４Ｓ）−２−アセチル−４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル−ピラゾリジン（２０）．１９（８０ｍｇ，０．４２ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液を、撹拌した過ヨウ素酸ナトリウム（１５０ｍｇ，０．７ｍｍｏｌ）の水（５ｍＬ）溶液に、反応温度が５℃に保たれるような速度で滴下した。完了後、得られた懸濁液に、水素化ホウ素ナトリウム（１３５ｍｇ，過剰量）を、反応温度が０℃に保たれるように少しずつ加え、添加が完了してから、反応液を室温まで温めた。フラッシュクロマトグラフィー用のシリカを反応液に加え、得られた懸濁液を減圧下で濃縮することにより、白色固体を得た。その固体をクロマトグラフィーで精製することにより、２０（５１ｍｇ，７６％）を無色の油状物として得た。
¹H NMR δ 4.43 (dd, J =5.7, 3.3 Hz, 1H), 3.91 (q, J = 4.7 Hz, 1H), 3.75 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 3.31 (m,1H), 3.28 (dd, J = 11.8, 5.7 Hz, 1H), 2.75 (dd, J = 11.8, 5.5 Hz, 1H), 2.17 (s,3H). ¹³C NMR δ 173.9, 76.5,68.2, 62.5, 55.8, 21.7. HRMS (MH⁺)C₆H₁₃N₂O₃の計算値: 161.0926. 測定値 161.0920.

実施例１９
（３Ｒ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチルピラゾリジン（２１）．濃ＨＣｌ（１．５ｍＬ）を、撹拌した２０（１５ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）のメタノール（１．５ｍＬ）溶液に滴下し、得られた反応液を３時間、６０℃に保った。反応液を減圧下で濃縮することにより、２１（１８ｍｇ，１００％）を、その二塩酸塩として得た。
¹³C NMR δ 72.6, 68.3,60.2, 54.1.

実施例２０
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエテニル）ピロリジン（２３）臭化ベンジルトリフェニルホスホニウム（１．７５ｇ，４．９７ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）懸濁液に、アルゴン下、０℃で、ＴＨＦ中の１．６ＭＢｕＬｉ（２．３３ｍＬ，３．７３ｍｍｏｌ）を加え、その深赤色溶液を冷却せずに１０分間撹拌しておいた。０℃に再冷却した後、アルデヒド２２（３３５ｍｇ，１．５６ｍｍｏｌ）（ＧａｒｙＢ．Ｅｖａｎｓ，ＲｉｃｈａｒｄＨ．Ｆｕｒｎｅａｕｘ，ＡｎｄｒｚｅｊＬｅｗａｎｄｏｗｉｃｚ，ＶｅｒｎＬ．ＳｃｈｒａｍｍおよびＰｅｔｅｒＣ．Ｔｙｌｅｒ（２００３）「ヒトプリンヌクレオシドホスホリラーゼの第２世代遷移状態類似物の合成（ＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆＳｅｃｏｎｄ−ＧｅｎｅｒａｔｉｏｎＴｒａｎｓｉｔｉｏｎＳｔａｔｅＡｎａｌｏｇｕｅｓｏｆＨｕｍａｎＰｕｒｉｎｅＮｕｃｌｅｏｓｉｄｅＰｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ）」Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，印刷中）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を加え、その混合物を室温で１２時間撹拌した。次に、反応を水（１ｍＬ）で停止し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）を加え、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１５ｍＬ）で洗浄した後、水（１５ｍＬ）で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮した後、クロマトグラフィーを行うことにより、２３の約１：３シス／トランス混合物をシロップ状物（２９０ｍｇ，６４％）として得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃): δ ppm: trans: 7.28 (m, 5H), 6.49 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 6.03 (dd, J =15.9 and 8.1 Hz, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.67 (m, 2H), 3.32 (m, 2H), 2.83 (m, 1H),1.46 (s, 9H). cis: 7.27 (m, 5H), 6.58 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 5.43 (dd, J = 11.6Hz and 10.0 Hz, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.65 (m, 2H), 3.21 (m, 2H), 2.88 (m, 1H),1.44 (s, 9H).

実施例２１
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン（２４）Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエテニル）ピロリジン２３（２９０ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）のエタノール（２０ｍＬ）溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（２５０ｍｇ）を加え、その懸濁液を水素雰囲気下で１２時間撹拌した。濾過した後、溶媒を減圧下で除去することにより、２５４ｍｇ（８７％）の標題化合物をシロップ状物として得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃): δ ppm: 7.10 (m, 5H), 4.00 (m, 1H), 3.47 (m, 2H), 3.07 (m, 2H), 2.67(m, 2H), 2.04 (m, 1H), 1.83 (m, 1H), 1.54 (m, 1H), 1.45 (s, 9H). ¹³CNMR (300 MHz, CDCl₃): δ ppm (回転異性体のゆっくりした変換のため、ピークによっては二重になっていることに留意): 155.17, 142.03, 128.83, 128.71, 126.37, 79.88, (74.94, 71.26),(53.17, 52.90), (49.90, 49.34), (46.11, 45.52), 34.41, 33.69, 28.91.

実施例２２
（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン塩酸塩（２５）Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン２４（２５４ｍｇ，０．８７ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍＬ）溶液に濃ＨＣｌ（約１２Ｎ，４ｍＬ）を加え、その溶液を４０℃で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、トルエンと共沸させた後、粗製標題化合物を灰色がかった固体（２０２ｍｇ，０．８９ｍｍｏｌ，１０２％）として得た。
¹H NMR (300 MHz, MeOH-d₄): δ ppm: 7.14 (m, 5H), 4.22 (m, 1H), 3.52 (dd, J = 11.8 and 7.4 Hz,1H), 3.39 (dd, J = 12.3 and 4.9 Hz, 1H), 3.14 (dd, J = 12.3 and 2.8 Hz, 1H),3.02 (dd, J = 11.8 Hz, 1H), 2.71 (m, 2H), 2.20 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 1.62 (m,1H). ¹³C NMR (300 MHz, MeOH-d₄): δ ppm: 142.94, 129.93, 129.89, 127.56, 75.56,52.90, 48.55, 47.28, 35.18, 34.44.

実施例２３
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザ−６−クロロ−プリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン（２６）水（２．２ｍＬ）に懸濁した粗製（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン塩酸塩２５（１９４ｍｇ，０．８５ｍｍｏｌ）および６−クロロ−９−デアザプリン（１１８ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）に、３７％ホルムアルデヒド水溶液（７０μＬ，０．９４ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（７０ｍｇ，０．８５ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を封管中で撹拌しながら９５℃に１２時間加熱した。冷却後、その暗褐色スラリーを１，４−ジオキサン（３ｍＬ）で希釈し、その暗褐色溶液をシリカに予備吸収させた。カラムクロマトグラフィーにより、標題の化合物をクリーム色／茶色がかった薄膜（１０４ｍｇ，３８％）として得た。
¹H NMR (300 MHz, MeOH-d₄): δ ppm: 8.71 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.17 (s, 5H), 4.55 (s, 1H), 4.18(m, 1H), 3.56 (m, 2H), 3.31 (m, 1H), 3.04 (dd, J = 11.6 and 7.7 Hz, 1H), 2.64(m, 2H), 2.21 (m, 1H), 1.87 (m, 1H), 1.61 (m, 1H). ¹³C NMR (300 MHz,MeOH-d₄): δ ppm: 151.62,151.35, 145.02, 142.99, 138.11, 129.84, 129.82, 127.46, 126.81, 107.73, 75.68,61.00, 58.48, 49.51, 47.56, 35.26, 34.88.

実施例２４
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン（２７）７−［（３Ｒ，４Ｒ）−（３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン−１−イル）メチル］−４−クロロ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン２６（７０ｍｇ，０．１９６ｍｍｏｌ）の７Ｎメタノール性アンモニア（４ｍＬ）溶液を、封管中、撹拌しながら、１３０℃で３時間加熱した。冷却後に溶媒を減圧下で除去した。残渣をメタノールにとりだし、その粗製物をシリカに予備吸収させた。カラムクロマトグラフィー後に得た物質を、４０℃の３ＮＨＣｌ水溶液（４ｍＬ）で、１時間処理した。凍結乾燥により、３１ｍｇ（３９％）の標題化合物をクリーム色の固体として得た。
¹H NMR (300 MHz, D₂O): δ ppm: 8.40 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.26 (m, 5H), 4.33 (m, 4H), 4.07(m, 1H), 3.80 (m, 2H), 2.75 (m, 2H), 2.37 (m, 1H), 1.90 (m, 1H), 1.66 (m, 1H). ¹³CNMR (300 MHz, D₂O): δ ppm (回転異性体のゆっくりした変換のため、ピークによっては二重になっていることに留意): 149.54, 144.47, 142.40, 133.05, 129.05, 128.85, 126.51, 113.64,103.48, (74.87, 72.96), (55.34, 54.87), (52.59, 52.09), (45.96, 43.65), 33.30,32.94, 32.33. ES-MS: C₁₉H₂₃N₅Oのm/z: (M+H)⁺: 338.1979; c計算値 338.4326.

実施例２５
（３Ｓ，４Ｓ）−１−［（７−Ｎ−ベンジルオキシメチル−６−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３，４−ジヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル−３，４−Ｏ−イソプロピリデンピロリジン（２９）．アミン２８（Ｂｏｌｓ，Ｍ．ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．１９９６，３７，２０９７−２１００）（０．５０ｇ，２．８９ｍｍｏｌ）およびアルデヒド（５，反応式３）（１．０ｇ，２．９５ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）溶液を、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．１ｇ，５．２ｍｍｏｌ）と共に１時間撹拌した後、ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄し、乾燥し、濃縮乾固した。クロマトグラフィーにより、標題の化合物２９（１．１６ｇ，２．３４ｍｍｏｌ，８０％）をシロップ状物として得た。
¹³C NMR (CDCl₃) δ 156.2, 150.3 (C), 150.0 (CH), 137.5 (C), 131.8, 128.8, 128.2, 127.8(CH), 117.1, 114.6, 113.0, 91.7, 83.2 (C), 82.4 (CH), 77.3, 70.2, 65.7, 62.1,60.5, 48.4 (CH₂), 29.1, 28.3 (CH₃).

実施例２６
（３Ｓ，４Ｓ）−１−［（６−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３，４−ジヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル−３，４−Ｏ−イソプロピリデンピロリジン（３０）．２９（１．１ｇ，２．２１ｍｍｏｌ）のエタノール（３０ｍＬ）溶液を、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．２５ｇ）の存在下に、水素下で撹拌した。１６時間後に触媒を追加し、２４時間後に固形物と溶媒を除去した。残渣のクロマトグラフィーにより、標題の化合物３０（０．３５ｇ，０．９３ｍｍｏｌ，４２％）をシロップ状物として得た。
¹³C NMR (CD₃OD) δ 157.7 (C), 150.2 (CH), 149.8 (C), 131.0 (CH), 118.2, 113.7, 112.9, 93.1,83.9 (C), 83.5 (CH), 66.4, 62.7, 61.0, 48.9 (CH₂), 29.4, 28.2 (CH₃).

実施例２７
（３Ｓ，４Ｓ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３，４−ジヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジン（３１）．３０（０．１５ｇ，０．３９９ｍｍｏｌ）のメタノール（２．５ｍＬ）およびｃＨＣｌ（２．５ｍＬ）溶液を１時間静置した後、蒸発乾固した。残渣のクロマトグラフィー［（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ／ＮＨ_３水溶液１０：６：１］により、標題の化合物３１（０．０９５ｇ，０．３４ｍｍｏｌ，８５％）を白色固体として得た。
¹³C NMR (D₂O/DCl) (85 ℃) δ 153.8 (C),144.7 (CH), 138.0 (C), 132.8 (CH), 118.5, 103.8, 78.8 (C), 70.1 (CH), 63.5,59.5, 57.3, 49.3 (CH₂).

実施例２８
（３Ｓ，４Ｒ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３，４−ジヒドロキシ−４−メチルチオメチルピロリジン（３３）．エチルジイソプロピルアミン（０．２ｍＬ）を、ジクロロメタン（５ｍＬ）に懸濁した３０（０．１４ｇ）に加えた後、塩化メタンスルホニル（０．０４５ｍＬ）を加え、その混合物を１時間撹拌した。得られた溶液を通常どおりに処理し、ＤＭＦ（３ｍＬ）中の粗生成物をナトリウムチオメトキシド（０．１３ｇ）で処理し、得られた混合物を９０℃で４時間加熱した後、トルエンと水とに分配した。有機相を水で洗浄し、乾燥し、濃縮した。残渣のクロマトグラフィーにより、３２（０．０７５ｇ）を得た。この物質のメタノール（４ｍＬ）およびｃＨＣｌ（４ｍＬ）溶液を１時間静置した後、濃縮乾固することにより、３３・ＨＣｌ（０．０４ｇ，６２％）を白色固体として得た。
¹³C NMR (D₂O) δ 153.4 (C), 145.0 (CH), 135.5 (C), 133.1 (CH), 118.6, 102.9, 79.2(C), 71.9 (CH), 60.6, 56.7, 48.3, 39.2 (CH₂), 17.1 (CH₃).

実施例２９
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン（３７）．塩化２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニル（３．０ｇ）を、１（１．０ｇ）のピリジン（２０ｍＬ）溶液に加え、その溶液を１６時間撹拌した後、６０℃に１時間温めた。クロロホルムを加え、その溶液を水、２ＭＨＣｌ水溶液およびＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄した。通常の処理とクロマトグラフィーとによって、１．１２５ｇの３４を無色のガラス質として得た。この物質０．４５ｇのＤＭＦ（５ｍＬ）溶液をナトリウムチオメトキシド（０．２ｇ）で処理し、その混合物を０．５時間撹拌した。トルエンを加え、反応液を通常どおりに処理することにより、０．１１５ｇの粗製物を得た。この物質のジクロロメタン（５ｍＬ）溶液をジオキサン中の４ＭＨＣｌ（３ｍＬ）で処理した。１時間後に溶液を濃縮乾固した。３５の固体残渣を、７−Ｎ−ベンジルオキシメチル−９−デアザ−６−Ｏ−メチルヒポキサンチン−９−カルバルデヒド（０．１８ｇ）を含有するメタノール（３ｍＬ）に溶解し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（０．０８８ｇ）を加えた。その混合物を３日間撹拌した。クロロホルムを加え、その混合物を通常どおりに処理した。次に、クロマトグラフィーを行うことにより、３６（０．１７８ｇ）を得た。ｃＨＣｌ（１０ｍＬ）中のこの物質を１時間加熱還流した後、溶液を濃縮乾固した。残渣をメタノール／２５％ＮＨ_３水溶液（１：１）で１時間処理した後、濃縮乾固した。クロマトグラフィーにより、固形物を得た。これをＨＣｌ水溶液に溶解し、濃縮した。残渣をエタノールでトリチュレーションすることにより、３７・ＨＣｌ（０．０４８ｇ）を吸湿性の白色固体として得た。
¹³C NMR (D₂O 85 ℃) δ 154.6 (C),144.5 (CH), 140.6 (C), 132.6 (CH), 118.6, 104.6 (C), 73.3 (CH), 59.3, 56.3,48.0 (CH₂), 45.7 (CH), 34.7 (CH₂), 15.2 (CH₃).

実施例３０
５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−Ｎ−シアノメチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（３９）．ブロモアセトニトリル（１．４６ｍＬ，２０．９ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン（５．４６ｍＬ，５６．９ｍｍｏｌ）を、３８（Ｈｏｒｅｎｓｔｅｉｎ，Ｂ．Ａ．；Ｚａｂｉｎｓｋｉ，Ｒ．Ｆ．；Ｓｃｈｒａｍｍ，Ｖ．Ｌ．ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．１９９３，３４，７２１３−７２１６）（３．０ｇ，１０．４５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２０ｍＬ）溶液に加えた。１時間後に、溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィーを行うことにより、標題の化合物３９をシロップ状物（３．４ｇ，１０．４ｍｍｏｌ，９９％）として得た。
¹H NMR δ 4.58 (dt, J =6.4, 4.3 Hz, 1H), 4.20 (dd, J = 6.8, 4.2 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 17 Hz, 1H), 3.79(dd, J = 10.9, 3.0 Hz, 1H), 3.58 (m, 1H), 3.56 (d, J = 17 Hz, 1H), 3.19 (dd, J= 9.8, 6.1 Hz, 1H), 2.85 (m, 1H), 2.75 (dd, J = 9.8, 4.3 Hz, 1H), 1.44 (s, 3H),1.23 (s, 3H), 0.82 (s, 9H), 0.09 (s, 3H), 0.08 (s, 3H); ¹³C NMR δ 115.6, 113.6 (C), 82.2, 78.3, 68.6 (CH),64.7, 59.3, 41.0 (CH₂), 27.6, 26.2, 25.6 (CH₃), 18.5(C). HRMS (MH⁺) C₁₆H₃₁N₂O₃Siの計算値: 327.2104. 測定値: 327.2097.

実施例３１
Ｎ−（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール塩酸塩（４０・ＨＣｌ）．Ｎ−シアノメチル誘導体３９（０．５ｇ，１．５３ｍｍｏｌ）を、イムシリン（Ｉｍｍｕｃｉｌｌｉｎ）−Ｈの製造（Ｅｖａｎｓ，Ｇ．Ｂ．；Ｆｕｒｎｅａｕｘ，Ｒ．Ｈ．；Ｇａｉｎｓｆｏｒｄ，Ｇ．Ｊ．；Ｓｃｈｒａｍｍ，Ｖ．Ｌ．；Ｔｙｌｅｒ，Ｐ．Ｃ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ２０００，５６，３０５３−３０６２）に際して既に記載されたものと同じ反応順序で、標題の化合物に変換することにより、４０・ＨＣｌを無定形粉末（０．０７ｇ，０．２３ｍｍｏｌ，１５％）として得た。
¹H NMR (D₂O) δ 8.24 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.29-4.17 (m, 2H), 3.96(m, 1H), 3.82-3.71 (m, 3H); ¹³C NMR δ 154.2 (C), 144.3 (CH), 133.0 (C), 124.0 (CH), 117.8, 115.9 (C),73.4, 70.4, 68.9 (CH), 62.9, 56.1 (CH₂). HRMS (M⁺) C₁₁H₁₅N₄O₄の計算値: 267.1093. 測定値: 267.1101.

実施例３２．１
７−Ｎ−ベンジルオキシメチル−９−デアザ−９−ホルミル−６−Ｏ−メチルヒポキサンチン（５ａ）．７−Ｎ−ベンジルオキシメチル−９−ブロモ−９−デアザ−６−Ｏ−メチルヒポキサンチン（Ｇ．Ｂ．Ｅｖａｎｓら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００１，６６，５７２３−５７３０）（１．０ｇ，２．８７ｍｍｏｌ）のアニソール（１０ｍＬ）およびエーテル（２５ｍＬ）溶液を−７０℃に冷却し、得られた懸濁液にｎ−ブチルリチウム（２．４ｍＬ，１．２Ｍ）を加えた。１０分後、その透明な溶液に、乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．１ｍＬ，１４．２ｍｍｏｌ）を加え、それを−７０℃で３０分間撹拌した後、水で反応を停止した。通常の処理によって固体を得て、それをエタノールでトリチュレーションすることにより、標題の化合物を、融点１００〜１０１℃の白色固体（０．６７ｇ，２．２６ｍｍｏｌ，７８％）として得た。
¹H NMR d 10.30 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.35-7.21 (m,5H), 5.77 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 4.14 (s, 3H); ¹³C NMR d 184.7 (CH),157.0 (C), 153.0 (CH), 150.0 (C), 136.9 (CH), 136.5 (C), 129.0, 128.7, 128.1(CH), 118.6, 116.7 (C), 78.3, 71.4 (CH₂), 54.3 (CH₃). HRMS (MH⁺) C₁₉H₂₁N₃O₃の計算値 340.1661 測定値: 340.1652.

実施例３２．２
Ｎ−（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール塩酸塩（４１・ＨＣｌ）．アルデヒド（５ａ）（１１４ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）を、３８（Ｈｏｒｅｎｓｔｅｉｎ，Ｂ．Ａ．；Ｚａｂｉｎｓｋｉ，Ｒ．Ｆ．；Ｓｃｈｒａｍｍ，Ｖ．Ｌ．ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．１９９３，３４，７２１３−７２１６）（１００ｍｇ，０．３５ｍｍｏｌ）のメタノール（１．５ｍＬ）、ＴＨＦ（０．５ｍＬ）および酢酸（１００μＬ）溶液に加え、その混合物を１０分間撹拌した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（８８ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）を加え、その溶液を４時間撹拌した後、クロロホルムとＮａＨＣＯ_３水溶液とで分配した。有機層を乾燥し、濃縮乾固した。残渣のクロマトグラフィーにより、おそらくは、Ｎ−（７−Ｎ−ベンジルオキシメチル−９−デアザ−６−Ｏ−メチルヒポキサンチン−９−イル）メチル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトールを、シロップ状物（１７５ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ，８８％）として得た。この物質のエタノール（５ｍＬ）溶液を１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）と共に水素雰囲気下で１６時間撹拌した。固形物と溶媒を除去し、残渣のクロマトグラフィーを行うことにより、シロップ状物（１２９ｍｇ）を得た。それをメタノール（５ｍＬ）と濃ＨＣｌ（５ｍＬ）とに溶解し、その溶液を２時間加熱還流した。溶液を濃縮乾固し、残渣を水に再溶解し、凍結乾燥することにより、標題の化合物４１・ＨＣｌを粉末（８０ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ，８０％）として得た。
¹H NMR (D₂O) δ 8.57 (m, 1H), 7.78 (s, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.29 (m,1H), 4.13 (m, 1H), 3.76 (m, 2H), 3.61 (m, 2H), 3.34 (dd, J = 13.0, 3.4 Hz, 1H);¹³C NMR δ 153.6 (C),144.8 (CH), 136.7 (C), 133.2 (CH), 118.5, 103.3 (C), 71.3, 70.3, 68.9 (CH),57.4, 57.1, 50.1 (CH₂). HRMS(M⁺) C₁₂H₁₇N₄O₄の計算値: 281.1250. 測定値: 281.1260.

実施例３３
（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル−１−（ヒポキサンチン−９−イル）ピロリジン（４７）．亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．５ｍＬ，３０ｍｍｏｌ，４等量）を、３の遊離塩基（２．２５ｇ，７．５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に加え、その反応混合物を周囲温度で３日間撹拌した。その溶液を濃縮乾固した。クロマトグラフィーにより、Ｎ−ニトロソ化合物４２を無色のシロップ状物（２．０５ｇ，８３％）として得た。４２（１．０ｇ，３．１ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液をアルゴン雰囲気下で０℃に冷却し、水素化アルミニウムリチウム（１ｇ，２６．３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。その混合物を室温で６時間撹拌した後、まずはＮａＯＨの１５％溶液（２５ｍＬ）で、次に水（１０ｍＬ）で、注意深く反応を停止した。その混合物をクロロホルムで２回抽出し、ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄し、乾燥し、濃縮乾固した。クロマトグラフィー（クロロホルム：酢酸エチル：メタノール，５：２：１）により、ヒドラジン４３（０．４１ｇ，４３％）をシロップ状物として得た。ホルムイミド酸エステル４４（Ｗａｔｓｏｎ，Ａ．Ａ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９７４，３９，２９１１−２９１６）（０．２２４ｇ，１．４４ｍｍｏｌ，１．２等量）を、４３（０．３７５ｇ，１．２ｍｍｏｌ）のエタノール（１．５ｍＬ）溶液に加え、反応混合物を１０分間加熱還流した後、冷却した。その溶液を濃縮乾固した。クロマトグラフィー（クロロホルム：酢酸エチル：メタノール，５：２：１）により、イミダゾール４５を明褐色ゴム質（０．１５５ｇ，３１％）として得た。４５（７７ｍｇ，０．１８３ｍｍｏｌ）の乾燥ＭｅＯＨ（１ｍＬ）溶液を、５ＭＨＣｌ水溶液（３６．５μＬ，０．１８３ｍｍｏｌ）で処理した。溶媒を除去したところ、塩酸塩が褐色ゴム質として残った。ＤＭＦ（１．５ｍＬ）を加えた後、オルトギ酸トリエチル（０．３０４ｍＬ，１．８３ｍｍｏｌ，１０等量）を加え、反応混合物を１２０℃で３０分間加熱した。冷却後に溶媒を減圧下で除去した。残渣をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：酢酸エチル：メタノール，５：２：０．５）で精製することにより、ヒポキサンチン４６（４９ｍｇ，６２％）をゴム質として得た。水酸化パラジウム−炭素（２０ｍｇ，２０％Ｐｄ）を、４６（４１ｍｇ，０．０９５ｍｍｏｌ）のエタノール（３ｍＬ）および２５％アンモニア水（１ｍＬ）溶液に加えた。その反応混合物を水素下に周囲温度および周囲圧で３時間撹拌した。次に、触媒を濾別し、エタノール（１．５ｍＬ）で洗浄した。溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：アンモニア水，７：２：０．５）を行うことにより、標題の化合物４７（２１ｍｇ，８８％）を白色固体として得た。
¹H NMR (CD₃OD) δ 8.17 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 4.26 (m, 1H), 3.85-3.64 (m, 4H),3.48-3.43 (m, 2H), 2.49-2.41 (m, 1H); ¹³C NMR δ 159.3 (C), 149.7 (C), 146.7 (CH), 142.3(CH), 124.7 (C), 72.7 (CH), 63.7, 63.6, 58.4 (CH₂), 50.2 (CH). M/Z C₁₀H₁₃N₅O₃の計算値 (MH⁺): 252.109. 測定値: 252.108.

実施例３４
（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン塩酸塩（４８）．塩化メタンスルホニル（１８０μＬ，２３ｍｍｏｌ）を、トリエチルアミン（４００μＬ，２９ｍｍｏｌ）および（３Ｒ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（１）（２ｇ，９．２ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２溶液に、０℃で滴下し、得られた溶液を室温まで温めた。反応液をＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、水、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、（３Ｒ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ヒドロキシ−４−（メシルオキシメチル）ピロリジン（９００ｍｇ）を油状物として得た。更なる精製を行わずに、この生成物をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、ナトリウムチオメトキシド（４００ｍｇ，５．７ｍｍｏｌ）と共に室温で終夜撹拌した。反応液をトルエンで希釈し、水、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン（６００ｍｇ，２．４ｍｍｏｌ）をシロップ状物として得た。これを更に特徴づけることはしなかった。（３Ｒ，４Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオ）ピロリジンをＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）およびｃＨＣｌ（１．０ｍＬ）に溶解し、減圧下で濃縮することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン塩酸塩（４８）をシロップ状物（４４２ｍｇ，３工程の総収率２６％）として得た。
¹³C NMR (D₂O) δ 73.5, 51.5, 48.6, 45.2, 34.3, 14.9.

実施例３５
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（６−ｔｅｒｔ−ブトキシ−７−ベンジルオキシメチル−９−デアザプリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン（４９）．シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２００ｍｇ，３．２ｍｍｏｌ）を、撹拌した５（８００ｍｇ，２．３２ｍｍｏｌ）および４８（５５０ｍｇ，３．００ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍＬ）溶液に加え、その混合物を室温で終夜撹拌した。粗反応液をシリカに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーカラムに乾式充填し、溶出させることにより、４９（１．１０ｇ，７８％）を固体として得た。
¹H NMR (CDCl₃) δ 8.48 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.33-7.23 (m, 5H), 5.75 (s, 2H), 4.50(s, 2H), 4.12 (m, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.30 (dd, J = 9.9, 7.5 Hz, 1H), 2.95 (m,2H), 2.64 (dd, J = 12.7, 7.1 Hz, 1H), 2.52-2.38 (m, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.70 (s,9H). ¹³C NMR (CDCl₃) δ 156.4, 150.3, 150.3, 137.5, 133.3, 128.8, 128.2, 127.8, 117.1,111.7, 83.5, 77.5, 76.1, 70.4, 61.4, 58.2, 48.8, 47.4, 37.3, 29.0, 16.0.

実施例３６
（３Ｒ，４Ｓ）−３−アセトキシ−１−［（７−ベンジルオキシメチル−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−４−（メチルチオメチル）ピロリジン（５０）．無水酢酸（１ｍＬ，過剰量）を、化合物４９（１．１ｇ，２．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（３０ｍｇ，触媒量）およびＥｔ_３Ｎ（２ｍＬ，過剰量）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）溶液に、室温で滴下した。１５分後に、反応液をＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３、水、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、生成物（１．３５ｇ）をシロップ状物として得た。そのシロップ状物のＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（５ｍＬ）を室温で滴下し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２に再溶解し、飽和ＮａＨＣＯ_３、水および食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−３−アセトキシ−１−［（７−ベンジルオキシメチル−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−４−（メチルチオメチル）ピロリジン（５０）（８００ｍｇ，７６％）を泡状物として得た。
¹H NMR (CDCl₃) δ 7.80 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.25-7.20 (m, 5H), 5.82 (s, 2H), 5.11(brs, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.47 (s, 2H), 3.80-3.59 (m, 3H), 3.32 (brs, 1H),2.80-2.69 (m, 2H), 2.57 (dd, J = 13.0, 8.3 Hz, 1H), 2.07 (s, 3H), 2.05 (s, 3H).¹³C NMR (CDCl₃) δ 170.7, 155.4, 145.8, 143.3, 137.2, 134.2, 128.8, 128.3, 128.1,118.1, 106.9, 77.4, 75.7, 71.2, 57.0, 55.8, 48.1, 43.5, 35.0, 21.0, 16.1. HRMS (MH⁺) C₂₃H₂₉N₄O₄Sの計算値: 457.1910. 測定値 457.2412.

実施例３７
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（７−ベンジルオキシメチル−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン（５１）．アミン５０（８００ｍｇ，１．７５ｍｍｏｌ）をＰＯＣｌ_３に溶解し、１時間加熱還流した。得られた溶液を減圧下で濃縮し、トルエンと同時蒸留（２回）することにより、固体残渣を得た。更なる精製を行わずに、先の反応で得た生成物をＭｅＯＨ中の７ＮＮＨ_３（１５ｍＬ）に再溶解し、封管中、１１０℃で終夜加熱した。反応液を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（７−ベンジルオキシメチル−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン（５１）（５００ｍｇ，６９％）をシロップ状物として得た。
¹H NMR (d₄-MeOH) δ 8.24 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.29-7.26 (m, 5H), 5.74 (s, 2H), 4.63(s, 2H), 4.43 (s, 2H), 4.26-4.22 (m, 1H), 3.70 (dd, J = 11.4, 6.9 Hz, 1H), 3.49(dd, J = 12.1, 5.6 Hz, 1H), 3.29 (dd, J = 12.3, 3.3 Hz, 1H), 3.16 (dd, J =11.4, 6.1 Hz, 1H), 2.76-2.67 (m, 1H), 2.50-2.44 (m, 2H), 2.07 (s, 3H). ¹³C NMR (CDCl₃) δ 153.4, 153.0, 149.9, 138.1, 137.0, 130.0,129.7, 129.3, 116.5, 106.5, 79.5, 75.0, 72.3, 60.9, 57.8, 50.1, 47.6, 36.6,16.0.

実施例３８
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン（５２）．アミン（５１）（１５０ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）をｃＨＣｌ（５ｍＬ）に溶解し、得られた溶液を９０分間加熱還流した。反応液を室温まで冷却し、水（５０ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ_３で洗浄（２回）し、水層を減圧下で濃縮した後、水と同時蒸留（２回）した。得られた残渣をＮＨ_４ＯＨに再溶解し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン（５２）（６９ｍｇ，６５％）を固体として得た。融点１０８〜１１０℃。
¹H NMR (D₂O) δ 7.96 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.00-3.95 (m, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.05(dd, J = 10.5, 7.9 Hz, 1H), 2.88 (dd, J = 11.1, 6.2 Hz, 1H), 2.71 (dd, J =11.1, 4.0 Hz, 1H), 2.49 (dd, J = 13.0, 6.7 Hz, 1H), 2.40-2.24 (m, 2H),2.16-2.13 (m, 1H), 1.93 (s, 3H). ¹³CNMR (D₂O) δ 150.5, 150.1,145.4, 130.4, 113.6, 108.33, 75.0, 59.8, 56.6, 47.4, 45.9, 35.9, 14.8. HRMS (MH⁺) C₁₃H₂₀N₅OSの計算値: 294.1389. 測定値 294.1394. Anal. C₁₃H₁₉N₅OS・4/3H₂Oの計算値 C, 49.19; H, 6.88; N, 22.06; S,10.10. 測定値 C, 49.86; H 6.58; N, 21.63; S, 9.74.

実施例３９
（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン塩酸塩（５３）．（３Ｒ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ヒドロキシ−４−（メシルオキシメチル）ピロリジン（実施例３４参照，１．１０ｇ，３．７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、ベンジルメルカプタン（８７０μＬ，７．４ｍｍｏｌ）およびＮａＨ（２７０ｍｇ，６０％油性分散液，６．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に滴下し、室温で１時間撹拌した。反応液をトルエンで希釈し、水で洗浄してから食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジンをシロップ状物として得た。更なる特性解析を行わずに、生成物をＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）およびｃＨＣｌ（１．０ｍＬ）に溶解し、減圧下で濃縮することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン塩酸塩（５３）をシロップ状物（７３０ｍｇ，２工程の総収率７６％）として得た。
¹H NMR (D₂O) δ 7.40-7.27 (m, 5H), 4.26-4.22 (m, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.56 (dd, J =12.4, 7.2 Hz, 1H), 3.37 (dd, J = 12.8, 5.2 Hz, 1H), 3.21(dd, J = 12.8, 3.0 Hz,1H), 3.07 (dd, J = 12.4, 5.5 Hz, 1H), 2.61-2.52 (m, 1H), 2.47-2.34 (m,2H). ¹³C NMR (D₂O)δ 138.7, 129.5, 129.3,127.9, 73.5, 51.5, 48.5, 45.4, 35.9, 31.8. (MH⁺) C₁₂H₁₈NOSの計算値: 224.1109. 測定値 224.1102.

実施例４０
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（６−ｔｅｒｔ−ブトキシ−７−ベンジルオキシメチル−９−デアザプリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン（５４）．シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２００ｍｇ，３．２ｍｍｏｌ）を、撹拌した５（８００ｍｇ，２．３２ｍｍｏｌ）および５３（５７０ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍＬ）溶液に加え、その混合物を室温で終夜撹拌した。その粗反応液をシリカに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーカラムに乾式充填し、溶出させることにより、５４（１．１０ｇ，７８％）を固体として得た。
¹H NMR (CDCl₃) δ 8.45 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.27-7.22 (m, 10H), 5.75 (s, 2H), 4.51(s, 2H), 4.15 (s, 2H), 3.67 (s, 2H), 3.38 (dd, J = 10.7, 7.0 Hz, 1H), 3.12-3.02(m, 2H), 2.69-2.63 (m, 1H), 2.54-2.49 (m, 1H), 2.44-2.39 (m, 2H), 1.70 (s, 9H).¹³C NMR (CDCl₃) δ 156.6, 150.6, 150.0, 138.3, 137.5, 134.4, 129.3, 129.0, 128.8,128.2, 127.8, 117.1, 109.0, 83.9, 77.9, 75.2, 70.7, 60.5, 57.7, 49.1, 47.0,36.8, 33.7, 29.0. (MH⁺)C₃₁H₄₉N₄O₃Sの計算値: 547.2743. 測定値 547.2723.

実施例４１
（３Ｒ，４Ｓ）−３−アセトキシ−１−［（７−ベンジルオキシメチル−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン（５５）．無水酢酸（１ｍＬ，過剰量）を、５４（１．１６ｇ，２．１２ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（３０ｍｇ，触媒量）およびＥｔ_３Ｎ（２ｍＬ，過剰量）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）溶液に、室温で滴下した。１５分後に、反応液をＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３、水、次に食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、生成物（１．３５ｇ）をシロップ状物として得た。そのシロップ状物のＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）溶液に、室温で、ＴＦＡ（５ｍＬ）を滴下し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２に再溶解し、飽和ＮａＨＣＯ_３で洗浄した後、水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下で濃縮することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−３−アセトキシ−１−［（７−ベンジルオキシメチル−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン（５５）（９００ｍｇ，２工程で８０％）を泡状物として得た。
¹H NMR (CDCl₃) δ 7.90 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.28-7.17 (m, 10H), 5.91 (s, 2H), 4.85(brs, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.86-3.74 (m, 2H), 3.68 (s, 2H), 3.16-3.11 (m, 1H),2.84-2.80 (m, 2H), 2.71 (dd, J = 11.4, 4.6 Hz, 1H), 2.50-2.36 (m, 2H),2.27-2.21 (m, 1H), 2.00 (s, 3H). ¹³CNMR (CDCl₃) δ 171.3, 156.2,145.8, 141.9, 138.6, 137.5, 131.4, 129.2, 128.8, 128.3, 128.2, 127.4, 117.9,115.2, 78.9, 77.0, 70.9, 59.8, 58.7, 48.3, 45.1, 36.9, 34.4, 21.5. HRMS (MH⁺) C₂₉H₃₃N₄O₄Sの計算値: 533.2223. 測定値 533.2236.

実施例４２
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（７−ベンジルオキシメチル−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン（５６）．アミン５５（９００ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）をＰＯＣｌ_３（１５ｍＬ）に溶解し、１時間加熱還流した。得られた溶液を減圧下で濃縮し、トルエンと同時蒸留（２回）することにより、固体残渣を得た。この残渣を更に精製せずに、ＭｅＯＨ中の７ＮＮＨ_３（１５ｍＬ）に再溶解し、封管中、１３０℃で終夜加熱した。反応液を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（７−ベンジルオキシメチル−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン（５６）（７２０ｍｇ，２工程で収率８７％）をシロップ状物として得た。
¹H NMR (CDCl₃) δ 8.32 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.35-7.25 (m, 10H), 5.52 (s, 2H), 4.56(s, 2H), 4.23 (s, 2H), 3.68 (s, 2H), 3.54-3.48 (m, 1H), 3.22 (d, J = 3.4Hz,2H), 2.83 (brs, 1H), 2.63-2.45 (m, 4H). ¹³C NMR (CDCl₃) δ 152.2, 151.6, 149.5, 138.2, 135.7, 134.5, 129.2, 129.1, 128.9,128.8, 128.2, 127.5, 115.2, 107.4, 77.6, 74.9, 70.7, 60.2, 57.3, 48.5, 46.9,46.3, 36.7, 33.5, 23.1.

実施例４３
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン（５７）．アミン５６（３３０ｍｇ，０．７ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（４ｍＬ）とｃＨＣｌ（４ｍＬ）の溶液に溶解し、９０分間加熱還流した。反応液を室温まで冷却し、水（５０ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ_３で洗浄（２回）し、水層を減圧下で濃縮した後、水と同時蒸留（２回）した。得られた残渣をＮＨ_４ＯＨに再溶解し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン（５７）（３０ｍｇ，１２％）を固体として得た。
¹H NMR (d₄-MeOH) δ 8.17 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.26-7.16 (m, 5H), 3.93-3.90 (m, 1H),3.83-3.74 (m, 2H), 3.68 (s, 2H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.80 (dd, J = 10.2, 6.4 Hz,1H), 2.66-2.58 (m, 2H), 2.38 (dd, J = 12.5, 8.9 Hz, 1H), 2.30 (dd, J = 9.5, 7.2Hz, 1H), 2.20-2.14 (m, 1H). ¹³CNMR (d₄-MeOH) δ 152.5, 151.4,147.4, 140.4, 130.4, 130.4, 129.8, 128.3, 115.5, 112.9, 77.3, 62.7, 59.2, 49.3,48.6, 37.5, 35.6. HRMS (MH⁺)C₁₉H₂₄N₅OSの計算値: 370.1702. 測定値 370.1694.

実施例４４
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（８−アザ−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン塩酸塩（５８）．シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２０ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）を、撹拌した６（１８０ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）および（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン塩酸塩（５３）（９５ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）溶液に加え、室温で終夜撹拌した。その粗反応液をシリカに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーカラムに乾式充填し、溶出させることにより、（３Ｒ，４Ｓ）−１−｛［８−アザ−９−デアザ−８−（テトラヒドロピラン−２−イル）−６−メトキシヒポキサンチン−９−イル］メチル｝−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン（８０ｍｇ，４６％）を泡状物として得た。これをＭｅＯＨ中の７ＮＮＨ_３（１５ｍＬ）に再溶解し、封管中、１１０℃で終夜加熱した。反応液を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、（３Ｒ，４Ｓ）−１−｛［８−アザ−９−デアザ−８−（テトラヒドロピラン−２−イル）−アデニン−９−イル］メチル｝−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジンを得た。この生成物の特性解析は行わなかったが、メタノール（２．０ｍＬ）およびｃＨＣｌ（２ｍＬ）に再溶解し、減圧下で濃縮し、得られた残渣をイソプロパノールでトリチュレーションすることにより、（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（８−アザ−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン塩酸塩（５８）（５２ｍｇ，８２％）を白色固体として得た。
¹³C NMR (d₄-MeOH) δ 153.7, 152.0, 139.9, 138.8, 135.1, 130.4, 130.0, 128.5, 124.6,74.6, 61.4, 58.4, 50.4, 47.7, 37.4, 33.4. (MH⁺) C₁₈H₂₃N₆OSの計算値: 371.1654. 測定値 371.1670.

実施例４５
７−ベンジルオキシメチル−６−Ｏ−ベンジル−９−デアザ−９−ホルミル−Ｎ^２，Ｎ^２−ビス（４−メトキシベンジル）−グアニン（５９）．ｎ−ブチルリチウム（０．５ｍＬ，１．５Ｍ）を、撹拌した７−ベンジルオキシメチル−６−Ｏ−ベンジル−９−ブロモ−９−デアザ−Ｎ^２，Ｎ^２−ビス（４−メトキシベンジル）−グアニン（Ｅｖａｎｓ，Ｇ．Ｂ．；Ｆｕｒｎｅａｕｘ，Ｒ．Ｈ．；Ｈａｕｓｌｅｒ，Ｈ．；Ｌａｒｓｅｎ，Ｊ．Ｓ．；Ｔｙｌｅｒ，Ｐ．Ｃ．原稿作成中）のジエチルエーテル（６ｍＬ）およびアニソール（３ｍＬ）溶液に、不活性雰囲気下、−８０℃で滴下した。反応液を−８０℃で更に３０分間撹拌した後、ＤＭＦ（１．０ｍＬ）を加え、その反応液を室温まで温めた。反応を水（５０ｍＬ）で停止させ、クロロホルム（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を合わせ、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、減圧下で濃縮することにより、固体残渣を得た。その固体をエタノールでトリチュレーションすることにより、５９（２８０ｍｇ，７２％）を白色固体として得た。融点 172-174 ℃。
¹H NMR δ 10.25 (s, 1H),7.79 (s, 1H), 7.30-7.21 (m, 13H), 6.85-6.82 (m, 5H), 5.62 (s, 2H), 5.44 (s,2H), 4.84 (s, 4H), 4.45 (s, 2H), 3.79 (s, 6H). ¹³C NMR δ 185.5, 159.4, 159.1, 156.5, 153.9, 136.9,136.7, 134.9, 131.5, 129.5, 128.9, 128.5, 128.3, 128.0, 117.3, 114.2, 111.0,78.4, 71.0, 67.9, 55.7, 49.5. HRMS (MH⁺) C₃₈H₃₇N₄O₅の計算値: 629.2764. 測定値 629.2749.

実施例４６
（３Ｒ，４Ｒ）−１−｛［６−Ｏ−ベンジル−７−ベンジルオキシメチル−９−デアザ−Ｎ^２，Ｎ^２−ビス（４−メトキシベンジル）グアニン−９−イル］メチル｝−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジン（６０）．シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２００ｍｇ，３．０ｍｍｏｌ）を、撹拌した５９（５３０ｍｇ，０．８４ｍｍｏｌ）および４・ＨＣｌ（１６３ｍｇ，１．０６ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍＬ）溶液に加えた後、その混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をシリカに吸収させ、減圧下で濃縮した。得られた残渣のクロマトグラフィーにより、６０（４３０ｍｇ，７０％）を白色固体として得た。融点９８〜１００℃。
¹H NMR δ 7.49 (s, 1H),7.35-7.12 (s, 14H), 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 4H), 5.59 (s, 2H), 5.47 (s, 2H),4.85-4.73 (m, 4H), 4.44 (s, 2H), 4.23-4.12 (m, 3H), 3.75 (s, 6H), 3.50-3.35 (m,3H), 3.20 (dd, J = 12.0, 5.0 Hz, 1H), 3.08 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.95 (dd, J =11.4, 5.4 Hz, 1H), 2.24 (brs, 1H). ¹³C NMR δ 159.0, 158.4, 156.7, 153.1, 137.6, 137.0,135.0, 131.5, 129.4, 128.9, 128.7, 128.4, 128.3, 128.1, 128.0, 125.7, 114.3,110.6, 105.1, 78.1, 73.1, 70.8, 68.0, 62.2, 60.7, 55.7, 54.8, 49.2, 48.9. HRMS (MH⁺) C₄₃H₄₈N₅O₆の計算値: 730.3605. 測定値 730.3629.

実施例４７
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザグアニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（６１）．ｃＨＣｌ（２ｍＬ）を、６０（３７０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）のメタノール（４ｍＬ）溶液に滴下し、得られた溶液を４時間加熱還流した。反応液を室温まで冷却した後、減圧下で濃縮した。得られた残渣を水とクロロホルムとに分配し、分離し、水層を減圧下で濃縮した。得られた残渣のシリカゲルクロマトグラフィーおよびイオン交換クロマトグラフィーにより、６１（３９ｍｇ，２８％）を白色固体として得た。融点２２３〜２２５℃。
¹H NMR δ 7.18 (s, 1H),4.03-3.98 (m, 1H), 3.58 (s, 2H), 3.55 (dd, J = 11.1, 6.3 Hz, 1H), 3.45 (dd, J =11.1, 7.4 Hz, 1H), 2.97 (dd, J = 10.0, 8.5 Hz, 1H), 2.79 (dd, J = 10.9, 6.3 Hz,1H), 2.64 (dd, J = 10.9, 4.0 Hz, 1H), 2.35 (dd, J = 10.3, 7.0 Hz, 1H),2.20-2.09 (m, 1H). ¹³C NMR δ 158.6, 152.8, 143.5, 129.6, 112.7, 107.9, 72.8, 62.6, 60.2, 54.8,48.9, 47.8. HRMS (MH⁺) C₁₂H₁₈N₅O₃の計算値: 280.1410. 測定値 280.1413. Anal. (C₁₂H₁₇N₅O₃・1/2H₂O) C, H, N.

実施例４８：マンニッヒ反応−一般手順

実施例４８．１：一般手順
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザグアニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジン（６１）．（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン塩酸塩（４）（１５４ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（８２ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）を水（２ｍＬ）に溶解し、その溶液にホルムアルデヒド水溶液（８２μＬ，１．０ｍｍｏｌ）およびデアザグアニン（１２０ｍｇ，０．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を９５℃で１２時間撹拌した。シリカゲル（１．０ｇ）を加え、その混合物を蒸発乾固した。ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ（５：４：１）を溶離液とするシリカゲルでのクロマトグラフィーで精製することにより、ｎを酢酸塩として得た。ＨＣｌ塩に変換し、^１Ｈおよび^１３ＣＮＭＲスペクトル解析を行ったところ、この化合物は先に報告された化合物とあらゆる点で一致することがわかった（Ｅｖａｎｓ，Ｇ．Ｂ．；Ｆｕｒｎｅａｕｘ，Ｒ．Ｈ．；Ｌｅｗａｎｄｏｗｉｃｚ，Ａ．；Ｓｃｈｒａｍｍ，Ｖ．Ｌ．；Ｔｙｌｅｒ，．Ｐ．Ｃ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，印刷中）。

実施例４８．２
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジン（８）．マンニッヒ反応の一般手順（上記）に従って化合物８を酢酸塩として得た。ＨＣｌ塩に変換し、^１Ｈおよび^１３ＣＮＭＲスペクトル解析を行ったところ、この化合物は先に報告された化合物とあらゆる点で一致することがわかった（Ｅｖａｎｓ，Ｇ．Ｂ．；Ｆｕｒｎｅａｕｘ，Ｒ．Ｈ．；Ｌｅｗａｎｄｏｗｉｃｚ，Ａ．；Ｓｃｈｒａｍｍ，Ｖ．Ｌ．；Ｔｙｌｅｒ，Ｐ．Ｃ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，印刷中）。

実施例４８．３
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（１０）．マンニッヒ反応の一般手順（上記）に従って化合物１０を酢酸塩として得た。
¹H NMR (d₄-MeOH) δ 8.20 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.22 (quintet, J = 3.0Hz, 1H), 3.59 (m, 2H), 3.46 (dd, J = 11.1, 8.3 Hz, 1H), 3.26 (dd, J = 11.4, 5.7Hz, 1H), 3.11 (dd, J = 11.4, 3.0 Hz, 1H), 2.95 (dd, J = 11.2, 6.8 Hz, 1H), 2.37(brs, 1H), 1.82 (s, 3H). ¹³CNMR (d₄-MeOH) 152.9, 151.9, 147.1, 132.0, 115.8, 108.2, 73.6, 63.1,61.9, 56.0, 50.8, 49.5, 23.7. HRMS(MH⁺) C₁₂H₁₈N₅O₂の計算値: 264.1461. 測定値 264.1457.

実施例４８．４
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン（５７）．マンニッヒ反応の一般手順（上記）に従って化合物５７を酢酸塩として得た。その酢酸塩をイオン交換クロマトグラフィーによって遊離塩基に変換した。
¹H NMR (d₄-MeOH) 8.17 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.26-7.16 (m,5H), 3.93-3.90 (m, 1H), 3.83-3.74 (m, 2H), 3.68 (s, 2H), 3.03-2.97 (m, 1H),2.80 (dd, J = 10.2, 6.4 Hz, 1H), 2.66-2.58 (m, 2H), 2.38 (dd, J = 12.5, 8.9 Hz,1H), 2.30 (dd, J = 9.5, 7.2 Hz, 1H), 2.20-2.14 (m, 1H). ¹³C NMR (d₄-MeOH)152.5, 151.4, 147.4, 140.4, 130.4, 130.4, 129.8, 115.5, 112.9, 77.3, 62.7,59.2, 49.3, 48.6, 37.5, 35.6. HRMS (MH⁺) C₁₉H₂₄N₅OSの計算値: 370.1702. 測定値 370.1694.

実施例４８．５
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（４−クロロフェニルチオメチル）ピロリジン（６２）．マンニッヒ反応の一般手順（上記）に従って化合物６２を酢酸塩として得た。
¹H NMR (d₄-MeOH) 8.25 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.35-7.23 (m,5H), 4.54 (s, 2H), 4.30 (m, 1H), 3.74 (dd, J = 11.9, 7.9 Hz, 1H), 3.59 (dd, J =12.2, 5.6 Hz, 1H), 3.40-3.15 (m, 4H), 2.89 (dd, J = 13.5, 9.1 Hz, 1H), 2.47(brs, 1H), 1.98 (s, 3H). ¹³CNMR (d₄-MeOH) 153.0, 151.8, 146.1, 135.7, 134.0, 133.2, 132.2,130.7, 115.7, 105.5, 74.6, 60.4, 57.3, 49.2, 47.7, 36.1, 23.0. HRMS (MH₊) C₁₈H₂₁ClN₅OSの計算値: 390.1155. 測定値 390.1264.

実施例４８．６
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（６−クロロ−９−デアザプリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（６３）．マンニッヒ反応の一般手順（上記）に従って化合物６３を酢酸塩として得た。
¹H NMR (D₂O) 8.34 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 4.48 (s, 2H),4.31 (m, 1H), 3.68 (dd, J = 12.1,8.3 Hz, 1H), 3.53 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.45 (dd, J = 12.6, 5.5 Hz, 1H), 3.32(dd, J = 12.6, 2.5 Hz, 1H), 3.13 (dd, J = 12.0, 7.4 Hz, 1H), 2.40 (brs, 1H),1.82 (s, 3H). ¹³C NMR (d₄-MeOH)149.7, 148.6, 143.4, 137.6, 124.8, 104.5, 71.3, 60.7, 59.8, 54.4, 48.0, 47.8,23.5. HRMS (MH⁺) C₁₂H₁₆ClN₄O₂の計算値: 283.0962. 測定値 283.0973.

実施例４８．７
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（６−アジド−９−デアザプリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン（６４）．マンニッヒ反応の一般手順（上記）に従って化合物６４を酢酸塩として得た。
¹H NMR (D₂O) 9.52 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 4.62 (s, 2H),4.38 (m, 1H), 3.78 (dd, J = 12.0, 8.5 Hz, 1H), 3.60 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.55(t, J = 5.5 Hz, 1H), 3.42 (brd, J = 11.4 Hz, 1H), 3.23 (dd, J = 11.9, 7.3 Hz,1H), 2.48 (brs, 1H), 1.86 (s, 3H). ¹³CNMR (D₂O) 141.7, 138.6, 133.6, 132.2, 111.7, 107.2, 71.4, 60.8,59.9, 54.6, 48.0, 48.0, 23.7.

実施例４８．８
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−アセトキシ−４−（アセトキシメチル）ピロリジン（６５）．マンニッヒ反応の一般手順（上記）に従って化合物６５を酢酸塩として得た。
¹H NMR (D₂O) 8.25 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 5.05 (quintet, J= 2.8 Hz, 1H), 4.23-4.06 (m, 4H), 3.40 (dd, J = 10.5, 8.1 Hz, 1H), 3.27-3.12(m, 2H), 2.77 (dd, J = 10.5, 7.8 Hz, 1H), 2.63 (m, 1H), 2.03 (s, 3H), 2.00 (s,3H), 1.98 (s, 3H). ¹³CNMR (D₂O) 172.9, 172.6, 153.0, 151.1, 145.4, 132.1, 115.6, 108.8,76.6, 65.1, 59.6, 55.8, 48.6, 45.7, 23.4, 21.3, 21.1. HRMS (MH⁺) C₁₆H₂₂N₅O₄の計算値: 348.1672. 測定値 348.1669.

実施例４９
ＰＮＰの阻害
この反応ではイノシン（１ｍＭ）および無機リン酸（５０ｍＭ，ｐＨ７．４）がヒポキサンチンおよびα−Ｄ−リボース１−リン酸に変換される。この方法による分析には阻害剤濃度が酵素濃度の少なくとも１０倍である必要がある。酵素は１．６ｐＭの濃度で存在した。反応の進行は、キサンチンオキシダーゼ（１２８μｇ；５９ミリ単位／ｍｌ反応混合物）によるヒポキサンチンの酸化がもたらす尿酸の生成を監視することにより、共役測定法で追跡した。０〜１ｎＭの阻害剤濃度を使って初期解離定数を決定した。Ｋ_ｉは０分から４分までの時間間隔から決定し、平衡解離定数Ｋ_ｉ ^＊は３５分から４５分までの時間間隔から決定した。阻害定数（Ｋ_ｉまたはＫ_ｉ ^＊）は、Ｋ_ｉについては式：ｖ＝（ｋ_ｃａｔ）（Ａ）／（Ｋ_ｍ（１＋Ｉ／Ｋ_ｉ）＋Ａ）、Ｋ_ｉ ^＊については式：ｖ＝（ｋ_ｃａｔ）（Ａ）／（Ｋ_ｍ（１＋Ｉ／Ｋ_ｉ ^＊）＋Ａ）に従って決定した。

化合物（８）によって阻害されるヒトＰＮＰに関する反応速度曲線を図１に示す。阻害剤の濃度を右側に示す。

実施例５０
ＭＴＡＰおよびＭＴＡＮの阻害
連続分光光度測定法と不連続測定法とを使って、本発明の阻害剤およびＭＴＡＰおよび／またはＭＴＡＮの生体内阻害剤を特徴づけた。連続分光光度測定法では、ＭＴＡからアデニンへの変換を、２７４ｎｍにおける吸光度の減少として測定した。２７４ｎｍではスペクトル特性の差が最大になり、ＭＴＡからアデニンへの変換に関して、ミリモル吸光係数（ｃｍ^−１）は１．６である。不連続測定法では、５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．５）中の５０μＭ［２，８−^３Ｈ］ＭＴＡ（２８５ｃｐｍ／ｐｍｏｌ）、１０ｍＭＫＣｌおよび酵素を含有する１０〜２０μＬの混合物を、室温でインキュベートした。１μＬの濃ＨＣｌまたは６０％過塩素酸を添加することによって反応を停止した。アデニンをキャリアとして加え（６ｍＭ溶液を１〜２μＬ）、５μＬの試料を薄層セルロースシートにスポットし、比率９：１の１Ｍ酢酸アンモニウム（ｐＨ７．５５）およびイソプロパノールで展開した。展開後に、アデニンスポットの位置を紫外光吸収によって特定し、切り出し、トリチウム含量をカウントした。血中試料中のＭＴＡＰ活性を分析するために、１：１の血液：０．６％トリトンＸ−１００を含有する混合物６μＬを、上述の測定混合物に加え、薄層クロマトグラフィーによる分析用の試料を適当な時点で採取した。マウス肝臓由来のＭＴＡＰ活性の測定も同様の方法で行った。約１００μｇのタンパク質を含有する肝抽出物（３μＬ）を測定混合物に加え、適当な時間後に、薄層クロマトグラフィーによる分析を行った。

遅発阻害および阻害定数
高い基質濃度および様々な阻害剤濃度を持つ反応混合物に、既知濃度（１〜５ｎＭ）の酵素を加えることによって、遅発阻害の反応速度論的研究と、Ｋ_ｉおよびＫ_ｉ ^＊値の測定とを行った。通例、ＭＴＡヌクレオシダーゼには１５０μＭの基質濃度を使用し、ＭＴＡホスホリラーゼには２００μＭの基質濃度を使用した。これらの濃度は２７４ｎｍで０．７〜１．１のＯＤに相当する。生成物の形成は、２７４ｎｍにおける吸光度の減少として監視する。Ｋ_ｉ ^＊決定用の条件では高い基質濃度を使用した。実験には２つの対照（一方は阻害剤なし、もう一方は酵素なし）を含めた。各阻害剤に関するこれらの酵素のＫ_ｉ値は、既知のＫ_ｍおよび基質濃度に関して、阻害剤の存在下での初期速度と阻害剤なしでの初期速度との比を、阻害剤濃度に対して、次式に当てはめることによって計算した：

式中、Ｖ_０’は阻害剤存在下での速度、
Ｖ_０は阻害剤不在下での速度、
［Ｉ］は阻害剤濃度、そして
［Ｓ］は基質濃度である。
また、Ｋ_ｉ ^＊は、次式に当てはめることによって計算した：

式中、Ｖ_ｓ’は阻害剤の存在下で平衡状態に到達した後の定常状態速度であり、Ｖ_ｓは阻害剤を含まない対照における定常状態速度である。これらの等式は、基質と遷移状態類似体阻害剤とが当該酵素に相互排除的に結合する競合阻害を記述している。

実施例５１
生体内でのマウスＭＴＡＰの阻害
マウスに２００マイクログラムの化合物５７を摂食させ、血液試料を時間の関数として採取した。細胞を溶解し、ＭＴＡを含有する測定混合物中の残存ＭＴＡＰ活性を測定した。この測定法では［２，８−^３Ｈ］ＭＴＡからのアデニンの放出を測定する。結果を図２に示す。

以上、実施例を挙げて本発明を説明したが、本発明の範囲から逸脱することなく改変または変更を加えうることを理解すべきである。また、特定の特徴に対して既知の等価物が存在する場合、このような等価物は、あたかも個別に言及したかのように、本明細書に組み込まれる。

本発明は、ＰＮＰ、ＰＰＲＴ、ＭＴＡＰ、ＭＴＡＮおよび／またはＮＨの阻害剤である化合物に関する。それゆえに本化合物は、ＰＮＰ、ＰＰＲＴ、ＭＴＡＰ、ＭＴＡＮおよび／またはＮＨを阻害することが望ましい疾患の治療に役立つと予想される。このような疾患には、癌、細菌感染、原虫感染またはＴ細胞性疾患が含まれる。

化合物（８）によって阻害されるヒトＰＮＰの動態曲線を示す。マウスＭＴＡＰの生体内阻害を示す。

Claims

式（Ｉ）の化合物もしくはその互変異性体、または薬学的に許容できるその塩。
［式中、
ＶはＣＨ_２であり、かつＷはＮＲ^１およびＮＲ^２から選択されるか、あるいはＶはＮＲ^１およびＮＲ^２から選択され、かつＷはＣＨ_２であり；
ＸはＣＨ_２およびＲ配置またはＳ配置のＣＨＯＨから選択され；
Ｙは水素、ハロゲンおよびヒドロキシから選択され、ただし、ＶがＮＨ、ＮＲ^１およびＮＲ^２から選択される場合は、Ｙは水素であり；
Ｚは水素、ハロゲン、ヒドロキシ、ＳＱ、ＯＱおよびＱから選択され、ここで、Ｑは置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール基であり；
Ｒ^１は式（ＩＩ）
の基であり；
Ｒ^２は式（ＩＩＩ）
の基であり；
ＡはＮ、ＣＨおよびＣＲから選択され、ここで、Ｒはハロゲン、置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ^３、ＮＲ^３Ｒ^４およびＳＲ^５から選択され、ここで、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５はそれぞれ、置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール基であり；
ＢはＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ^６、ＳＨ、水素およびハロゲンから選択され、ここで、Ｒ^６は置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール基であり；
ＤはＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ^７、水素、ハロゲンおよびＳＣＨ_３から選択され、ここで、Ｒ^７は置換されていてもよいアルキル、アラルキルまたはアリール基であり；
ＥはＮであり；
ＧはＣＨ_２であるか、またはＧは存在しない。］
Ｚが水素、ハロゲン、ヒドロキシ、ＳＱおよびＯＱから選択される、請求項１に記載の化合物。
ＶがＣＨ_２である、請求項１または２に記載の化合物。
ＸがＣＨ_２である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
ＧがＣＨ_２である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
ＺがＯＨである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
ＺがＳＱである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
ＺがＱである、請求項１、３、４または５のいずれか一項に記載の化合物。
ＷがＮＲ^１である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
ＷがＮＲ^２である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
ＷがＮＨ、ＮＲ^１またはＮＲ^２から選択され、かつＸがＣＨ_２である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
Ｖ、ＸおよびＧがすべてＣＨ_２であり、ＺがＯＨであり、かつＷがＮＲ^１である、請求項１、２、３、４、５、６または９のいずれか一項に記載の化合物。
Ｖ、ＸおよびＧがすべてＣＨ_２であり、ＺがＳＱであり、かつＷがＮＲ^１である、請求項１、２、３、４、５、７または９のいずれか一項に記載の化合物。
Ｙが水素である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物。
Ｙがヒドロキシである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物。
Ｂがヒドロキシである、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
ＢがＮＨ_２である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
ＡがＣＨである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物。
ＡがＮである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物。
ＤがＨである、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
ＤがＮＨ_２である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシルメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（８−アザ−９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（８−アザ−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（２−フェニルエチル）ピロリジン；
（３Ｓ，４Ｒ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３，４−ジヒドロキシ−４−メチルチオメチルピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン；
Ｎ−（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール；
Ｎ−（９−デアザヒポキサンチン−９−イル）メチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール；
（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル−１−（ヒポキサンチン−９−イル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（８−アザ−９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ベンジルチオメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザグアニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｓ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（４−クロロフェニルチオメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（６−クロロ−９−デアザプリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（６−アジド−９−デアザプリン−９−イル）メチル］−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン；もしくは
（３Ｒ，４Ｒ）−１−［（９−デアザアデニン−９−イル）メチル］−３−アセトキシ−４−（アセトキシメチル）ピロリジン
である、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容できるその塩。
薬学的有効量の請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
プリンホスホリボシルトランスフェラーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、５’−メチルチオアデノシンホスホリラーゼ、５’−メチルチオアデノシンヌクレオシダーゼおよび／またはヌクレオシドヒドロラーゼの阻害剤であって、薬学的有効量の請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物を含む阻害剤。
請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物を含む、癌、細菌感染、原虫感染またはＴ細胞性疾患治療剤。
Ｔ細胞性疾患が乾癬、関節炎または移植拒絶である、請求項２５に記載の治療剤。
プリンホスホリボシルトランスフェラーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、５’−メチルチオアデノシンホスホリラーゼ、５’−メチルチオアデノシンヌクレオシダーゼおよび／またはヌクレオシドヒドロラーゼを阻害することが望ましい疾患または状態を治療するための医薬品の製造における請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物の使用。