ES2363766T3 - Inhibidores de nucleosidasas y fosforilasas de nucleosidos. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de la fórmula (I): **Fórmula** donde: V se selecciona entre CH2 y NH, y W se selecciona entre NR1 y NR2; o V se selecciona entre NR1 y NR2, y W se selecciona entre CH2 y NH; X se selecciona entre CH2 y CHOH en la configuración R o S; Y se selecciona entre hidrógeno, halógeno e hidroxi, excepto cuando V se selecciona entre NH, NR1 y NR2 que entonces Y es hidrógeno; Z se selecciona entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, SQ, OQ y Q, donde Q es un grupo alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido; R1 es un radical de la fórmula (II) **Fórmula** R2 es un radical de la fórmula (III) **Fórmula** A se selecciona entre N, CH y CR, donde R se selecciona entre halógeno, alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido, OH, NH2, NHR3, NR3R4 y SR5, donde R3, R4 y R5 son cada uno un grupo alquilo, aralquilo o arillo opcionalmente sustituido; B se selecciona entre OH, NH2, NHR6, SH, hidrógeno y halógeno, donde R6 es un grupo alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido; D se selecciona entre OH, NH2, NHR7, hidrógeno, halógeno y SCH3, donde R7 es un grupo alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido; E se selecciona entre N y CH; G se selecciona entre CH2 y NH, o G está ausente, con la condición de que cuando W es NR1 o NR2 y G es NH, entonces V sea CH2, y con la condición de que cuando V es NR1 o NR2 y G es NH, entonces W sea CH2; o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un éster del mismo.

Description

CAMPO TÉCNICO

[0001] La presente invención se refiere a ciertos análogos de nucleósidos que son inhibidores de PNP, PPRT, MTAP, MTAN y/o NH, y al uso de estos compuestos como productos farmacéuticos y composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos. La invención también se refiere a procedimientos de tratamiento de enfermedades.

ESTADO DE LA TÉCNICA ANTERIOR

[0002] Los documentos US 5.985.848, US 6.066.722 y US 6.228.741 se refieren a análogos de nucleósidos que son inhibidores de la purina nucleósido fosforilasa (PNP) y de las purina fosforribosiltransferasas (PPRT). Los análogos son útiles en el tratamiento de infecciones parasitarias, tumores malignos de células T, enfermedades autoinmunes y trastornos inflamatorios. Los análogos también son útiles para la inmunosupresión en el trasplante de órganos.

[0003] El documento PCT/NZ00/00048 proporciona un procedimiento para preparar ciertos compuestos inhibidores de PNP. Esta solicitud reconoce los compuestos como inhibidores de PNP y aborda la necesidad de procedimientos más simples para prepararlos. El documento PCT/NZ01/00174 también proporciona análogos de nucleósidos adicionales que son inhibidores de PNP y PPRT.

[0004] También se han identificado ciertos análogos de nucleósidos como inhibidores potentes de la 5'metiltioadenosina fosforilasa (MTAP) y 5’-metiltioadenosina nucleosidasa (MTAN). Estos son el objeto del documento PCT/NZ03/00050.

[0005] Los solicitantes de la presente solicitud también han desarrollado un procedimiento para preparar desazapurinas de aminas cíclicas unidas por metileno, que incluye hacer reaccionar formaldehído, o un equivalente de formaldehído, con una amina cíclica y un compuesto heteroaromático. Este procedimiento es el objeto de la solicitud de patente de Nueva Zelanda nº 523970. La PNP cataliza la escisión fosforolítica de ribo-y desoxirribonucleósidos, por ejemplo, los de guanina e hipoxantina, para dar el azúcar-1-fosfato correspondiente y guanina, hipoxantina u otras bases de purina.

[0006] Los seres humanos con deficiencia en purina nucleósido fosforilasa (PNP) padecen una inmunodeficiencia de células T específica debido a una acumulación de dGTP que impide la proliferación de las células T estimulados. Por lo tanto, los inhibidores contra PNP son inmunosupresores y son activos contra tumores malignos de células T y trastornos proliferativos de las células T.

[0007] Las nucleósido hidrolasas (NH) catalizan la hidrólisis de nucleósidos. Estas enzimas no se encuentran en mamíferos pero son necesarias para la recuperación de nucleósidos en algunos parásitos protozoarios. Algunos parásitos protozoarios usan nucleósido fosforilasas en lugar de o además de las nucleósido hidrolasas para este fin. Puede esperarse que los inhibidores de las nucleósido hidrolasas y fosforilasas interfieran con el metabolismo del parásito y, por lo tanto, su empleo puede ser de utilidad contra parásitos protozoarios.

[0008] Las MTAP y MTAN funcionan en la ruta de biosíntesis de poliaminas, en la recuperación de purina en mamíferos, y en las rutas de detección de quórum en bacterias. La MTAP cataliza la fosforolisis reversible de la 5’metiltioadenosina (MTA) en adenina y 5-metiltio--D-ribosa-1-fosfato (MTR-1 P). La MTAN cataliza la hidrólisis reversible de MTA en adenina y 5-metiltio--D-ribosa y de S-adenosil-L-homocisteína (SAH) en adenina y S-ribosilhomocisteína (SRH). La adenina formada se recicla posteriormente y se convierte en nucleótidos. Esencialmente, la única fuente de adenina libre en la célula humana es el resultado de la acción de estas enzimas. El MTR-1P se convierte posteriormente en metionina por acciones enzimáticas sucesivas.

[0009] La MTA es un subproducto de la reacción que implica la transferencia de un grupo aminopropilo de Sadenosilmetionina descarboxilada a putrescina durante la formación de espermidina. La reacción está catalizada por la espermidina sintasa. La espermidina sintasa es muy sensible a la inhibición de producto por acumulación de MTA. Por lo tanto, la inhibición de MTAP o MTAN limita seriamente la biosíntesis de poliaminas y la ruta de recuperación para adenina en las células. Asimismo, la MTA es el subproducto de la síntesis bacteriana de homoserina lactonas aciladas a partir de S-adenosilmetionina (SAM) y proteínas transportadoras de acilo-acilo en las que la posterior lactonización provoca la liberación de MTA y la homoserina lactona acilada. La homoserina lactona acilada es una molécula de detección de quórum bacteriano en bacterias que está implicada en la virulencia bacteriana contra tejidos humanos. Un trabajo reciente ha identificado un segundo sistema de comunicación (autoinductor 2, AI-2) que es común para bacterias tanto Gram-positivas como Gram-negativas y, por lo tanto, se ha propuesto como una “señal universal” que funciona en la comunicación de célula a célula interespecie. De nuevo, la MTAN genera Sribosil-homocisteína (SRH), que es el precursor de Al-2. La inhibición de MTAN o MTAP en microbios evitará la eliminación de MTA y someterá la ruta a la inhibición por producto, disminuyendo de este modo la producción de la ruta de detección de quórum y disminuyendo la virulencia de las infecciones microbianas. La inhibición de MTAN en microbios impedirá la formación de SRH, disminuyendo la producción de la segunda ruta de detección de quórum.

5 [0010] La deficiencia de MTAP debido a una deleción genética se ha descrito en muchos tumores malignos. Se sabe que la pérdida de función enzimática de MTAP en estas células se debe a deleciones homocigotas en el cromosoma 9 de la MTAP y del gen supresor de tumores p16/MTS1 estrechamente unidos. Puesto que la ausencia de p16/MTS1 es probablemente responsable del tumor, la ausencia de actividad de MTAP es una consecuencia de la deleción genética y no es causante del cáncer. Sin embargo, la ausencia de MTAP altera el metabolismo de la

10 purina en estas células, de modo que son principalmente dependientes de la ruta de novo para su suministro de purinas. Esto hace que las células sean extraordinariamente sensibles a inhibidores como metotrexato, alanosina y azaserina, que bloquean la ruta de novo. Por lo tanto, una terapia de combinación de metotrexato, alanosina o azaserina con un inhibidor de MTAP tendrá propiedades antitumorales extraordinariamente eficaces.

15 [0011] Los inhibidores de MTAP también serían muy eficaces contra una infección parasitaria tal como la malaria, que infecta a eritrocitos (RBC), ya que carecen de la ruta de novo para la biosíntesis de purina. Los parásitos protozoarios dependen totalmente de las purinas producidas por la ruta de recuperación para su crecimiento y propagación. Por lo tanto, los inhibidores de MTAP destruirán estos parásitos sin tener ningún efecto negativo sobre los RBC del huésped, ya que los RBC son células terminalmente diferenciadas y no sintetizan purinas, producen

20 poliaminas ni se multiplican.

[0012] La parte de imino azúcar de los compuestos descritos en la mayoría de las memorias descriptivas de patente mencionadas anteriormente tienen el átomo de nitrógeno localizado entre C-1 y C-4, para formar compuestos de 1,4-didesoxi-1,4-imino-D-ribitol. La localización del átomo de nitrógeno en el anillo de ribitol puede ser crítica para la

25 unión a enzimas. Además, la localización del enlace entre la parte de azúcar y el análogo de base de nucleósido puede ser crítica para la actividad inhibidora enzimática. Los compuestos conocidos tienen ese enlace en el C-1 del anillo de azúcar.

[0013] En la búsqueda de inhibidores de nucleósido fosforilasa y nucleosidasa nuevos y mejorados, los solicitantes

30 han investigado la síntesis y bioactividad de compuestos en los que la localización del átomo de nitrógeno en el anillo de azúcar se varía y, además, en los que dos átomos de nitrógeno forman parte del anillo de azúcar. También se han investigado modos alternativos de unir la parte de azúcar y el análogo de base.

[0014] Los solicitantes han descubierto sorprendentemente que ciertos compuestos novedosos presentan una 35 potente actividad inhibidora contra una o más de PNP, PPRT, MTAP y la nucleósido hidrolasa MTAN.

[0015] Por lo tanto, un objeto de la presente invención es proporcionar un compuesto que sea un inhibidor de PNP, PPRT, MTAP, MTAN y/o NH o al menos proporcionar una selección útil.

40 EXPLICACIÓN DE LA INVENCIÓN

[0016] En un primer aspecto de la invención se proporciona un compuesto de la fórmula (I):

imagen1

45

donde:

V se selecciona entre CH2 y NH, y W se selecciona entre NR1 y NR2; o V se selecciona entre NR1 y NR2, y W se selecciona entre CH2 y NH;

50

X se selecciona entre CH2 y CHOH en la configuración R o S; 3

Y se selecciona entre hidrógeno, halógeno e hidroxi, excepto cuando V se selecciona entre NH, NR1 y NR2, que entonces Y es hidrógeno;

Z se selecciona entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, SQ, OQ y Q, donde Q es un grupo alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido;

R1 es un radical de la fórmula (II)

imagen1

R2 es un radical de la fórmula (III)

imagen1

15 A se selecciona entre N, CH y CR, donde R se selecciona entre halógeno, alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido, OH, NH2, NHR3, NR3R4 y SR5, donde cada R3, R4 y R5 es opcionalmente un grupo alquilo sustituido, aralquilo o arilo;

20 B se selecciona entre OH, NH2, NHR6, SH, hidrógeno y halógeno, donde R6 es un grupo alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido;

D se selecciona entre OH, NH2, NHR7, hidrógeno, halógeno y SCH3, donde R7 es un grupo alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido; 25 E se selecciona entre N y CH;

G se selecciona entre CH2 y NH, o G está ausente, con la condición de que cuando W es NR1 o NR2 y G es NH entonces V es CH2, y con la condición de que cuando V es NR1 o NR2 y G es NH, entonces W sea CH2; 30

o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un éster del mismo.

[0017] Preferentemente, Z se selecciona entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, SQ y OQ. Más preferentemente Z es OH. Como alternativa, se prefiere que Z sea SQ. En otra realización preferida, Z es Q.

35 [0018] También se prefiere que V sea CH2. También se prefiere además que X sea CH2. Además, se prefiere que G sea CH2.

[0019] Preferentemente, W es NR1. Como alternativa, se prefiere que W sea NR2. También se prefiere que cuando W se seleccione entre NH, NR1 o NR2 entonces X sea CH2.

[0020] Los compuestos preferidos de la invención incluyen aquellos en los que V, X y G son todos CH2, Z es OH y W es NR1.

[0021] Otros compuestos preferidos de la invención incluyen aquellos en los que V, X y G son todos CH2, Z es SQ y W es NR1.

[0022] Preferentemente, Y es hidrógeno. Como alternativa, se prefiere que Y sea hidroxi.

[0023] Preferentemente, B es hidroxi. Como alternativa, se prefiere que B sea NH2.

[0024] Preferentemente A es CH. Como alternativa, se prefiere que A sea N.

[0025] Preferentemente D es H. Como alternativa, se prefiere que D sea NH2.

[0026] También se prefiere que E sea N.

[0027] Los compuestos preferidos de la invención incluyen:

(3R,4R)-1-[(9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(9-deazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroxilmetil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(8-aza-9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4- (hidroximetil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(8-aza-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidina; (3S,4R)-1-[(9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3,4-dihidroxi-4-metiltiometilpirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina; N-(9-deazahipoxantin-9-il)-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-ribitol; N-(9-desazahipoxantin-9-il)metil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-ribitol; (3R,4R)-3-hidroxi-4-hidroximetil-1-(hipoxantin-9-il)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(8-aza-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(9-desazaguanin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(4-clorofeniltiometil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(6-cloro-9-desazapurin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(6-azido-9-desazapurin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; o (3R,4R)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-acetoxi-4-(acetoximetil)pirrolidina.

[0028] En otro aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad farmacéuticamente efectiva de de un compuesto de fórmula (I) como se ha definido anteriormente.

[0029] En otro aspecto más, la invención proporciona un método para tratar una enfermedad o afección en la que se desea inhibir la purina fosforribosiltransferasa, nucleósido fosfosrilasade purina, 5’-metiltioadenosín fosforilasa, 5’metiltioadenosinonucleosidasa y/o nucleósido hidrolasa que comprende una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I) como se ha definido anteriormente a un paciente que lo necesita.

[0030] La enfermedad o afección puede incluir cáncer, infección bacteriana, infección protozoaria o una enfermedad mediada por células T. La enfermedad mediada por células T puede ser psoriasis, artritis o rechazo a transplante.

[0031] En otro aspecto más, la invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) como se ha definido anteriormente en la preparación de un medicamento para tratar una enfermedad o afección en la que es deseable inhibir la purina fosforribosiltransferasa, purina nucleósido fosforilasa, 5’-metiltioadenosín fosforilasa, 5’metiltioadenosín nucleosidasa y/o nucleósido hidrolasa.

DESCRIPCIÓN DETALLADA

[0032] Se apreciará que la representación de un compuesto de fórmula (I), en la que B y/o D es un grupo hidroxi, es de la forma tautomérica de tipo enol de una amida correspondiente, y ésta existirá en gran medida en la forma de amida. El uso de la representación tautomérica de tipo enol es simplemente para dejar menos formas estructurales para representar los compuestos de la invención.

[0033] De forma análoga, se apreciará que la representación de un compuesto de fórmula (I), donde B y/o D es un grupo tiol, es de la forma tautomérica de tipo tienol de una tioamida correspondiente, y ésta existe en gran medida en la forma de tioamida. El uso de la representación tautomérica de tipo tienol es simplemente para dejar menos fórmulas estructurales para representar los compuestos de la invención.

5 [0034] Los compuestos de la invención pueden prepararse por cualquier método adecuado. Un método adecuado implica sintetizar independientemente la parte de azúcar y la parte de base y después enlazar la parte de base con un átomo de nitrógeno en el anillo de la parte de azúcar.

10 [0035] Por ejemplo, a continuación el Esquema 1 muestra la preparación de la parte de 1-N-imino azúcar de un compuesto de la invención en el que el átomo de nitrógeno del análogo de azúcar está situado en la misma posición en la que el átomo de carbono anomérico C-1 podría encontrarse en una molécula de azúcar. Un compuesto de partida útil en la síntesis del 1-N-iminoazúcar es N-terc-butoxicarbonil-(3R,4S)-3-hidroxi-4-[(1S)-1,2dihidroxietil]pirrolidina. Este compuesto de partida puede prepararse mediante el método de Filichev et al.

15 (Carbohydrate Res., 2001, 333, 115-122), con la única variación de que se utiliza un resto t-butoxi-carbonilo como grupo protector del nitrógeno en lugar del grupo N-(9-fluorenilmetoxicarbonilo). La escisión oxidativa del resto diol seguida de reducción in situ da la 3-hidroxi-4-hidroximetilpirrolidina N-protegida (1). La eliminación del grupo protector de N da la (3R,4R)-3-hidroxi-4-hidroximetilpirrolidina (4). Se preparó en primer lugar 3-hidroxi-4-hidroximetil pirrolidina por Jaeger et al. (J. Org. Chem., 1965, 30, 740-744) y se usó en la preparación de análogos de 1’-aza

20 timidina carbacíclica (Lee, Y.H., Kim, H.K., Youn, I.K., Chae, Y.B., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1991, 1, 287-290) y azaC-pirimidinas (Sorenson, M.D., Khalifa, N.M., Pedersen, E.B., Synthesis, 1999, 1937-1943).

[0036] También se han descrito otros métodos para la síntesis de (3R,4R)-3-hidroxi-4-hidroximetilpirrolidina. Un método por Bols et. al [Bols, M., Hansen, S.U., Acta Chem. Scand., 1998, 52, 1214-1222] implica la purificación

25 enzimática de los enantiómeros. El otro método por Ichikawa et. al [Ichikawa, Y., Makino, K., Tetrahedron Lett., 1998, 39, 8245-8248] es una síntesis asimétrica multi-gramo de (3R,4R)-3-hidroxi-4-hidroximetilpirrolidina mediante éster monoetílico del ácido fumárico. Ichikawa et. al evaluaron la actividad inhibidora de (3R,4R)-3-hidroxi-4hidroximetilpirrolidina frente a PNP humano y obtuvieron un CI50 de 160 M.

30 [0037] Puede ser deseable la bencilación de los grupos hidroxilo del compuesto (1) antes de la eliminación del grupo protector de N para dar clorhidrato de (3R,4R)-3-benciloxi-4-benciloximetilpirrolidina (3) como un compuesto útil preparado para unirse a un análogo de base adecuado.

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[0038] La unión de la parte de azúcar puede conseguirse por aminación reductora de un aldehído apropiado. Los ejemplos de aldehídos adecuados, preparados a partir de sus precursores de bromo correspondientes, se muestran en el Esquema 2.

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[0039] El acoplamiento de un análogo de base aldehídico con el análogo de azúcar protegido (3) se muestra en el Esquema 3. La eliminación de grupo protector proporciona el compuesto inhibidor de la invención (3S,4S)-1-[(9desazahipoxantin-9-il)metil]-3,4-dihidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (8).

5 [0040] También debe apreciarse que cualquier análogo de azúcar que tenga un átomo de nitrógeno en cualquier emplazamiento en su anillo puede acoplarse con cualquier análogo básico de esta manera. También debe apreciarse que pueden usarse métodos diferentes del acoplamiento por aminación reductora de un aldehído.

imagen1

[0041] Como puede verse en el Esquema 4 a continuación, el intermedio (7) puede manipularse para proporcionar (10).

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5 [0042] En el Esquema 5 se muestran otros ejemplos del acoplamiento de análogos de base con el análogo de azúcar (4). Este método puede usarse para preparar los compuestos (3R,4S)-1-[(8-aza-9-desazahipoxantin-9il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (12) y (3R,4S)-1-[(8-aza-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4(hidroximetil)pirrolidina (13).

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10 [0043] Se preparó un análogo de azúcar intermedio que contenía dos átomos de nitrógeno en su anillo. Puede prepararse (3R,4S)-4-hidroxi-3-hidroximetilpirazolidina (21) de acuerdo con la ruta indicada en el Esquema 6. La cetona (14) se prepara a partir de D-xilosa usando una química conocida (Lin, T-S., Zhu, J-L., Dutschman, G.E., Cheng, Y-C., Prusoff, W.H., J. Med. Chem. 1993, 36, 353-362). La aminación seguida de reducción de la imina y acetilación de la amina secundaria resultante da el compuesto (17). La etapa clave de hidrólisis ácida con reciclado

15 concomitante da el ciclo imino (18). La hidrogenación seguida de escisión del resto diol y eliminación del acetato proporciona la pirazolidina deseada (21).

[0044] La pirazolidina (21), o el precursor N-acetato (20), pueden acoplarse con una diversidad de análogos de base para dar inhibidores potenciales de la fórmula (I) de esta invención.

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[0045] En el Esquema 7 se muestra un método alternativo para acoplar el análogo de base al análogo de azúcar. El N-terc-butoxicarbonil-(3R,4S)-3-hidroxi-4-formilpirrolidin aldehído (22) se emplea en una reacción de tipo Wittig para 5 proporcionar la N-terc-butoxicarbonil-(3R,4R)-3-hidroxi-4-(2-feniletenil)pirrolidina intermedia unida en 5’ C-C (23). La hidrogenación posterior y la escisión de Boc proporciona la sal clorhidrato (25) que puede usarse en una reacción de tipo Mannich para proporcionar (3R,4R)-1-[(6-cloro-9-desazapurin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidina (26). El tratamiento con amoniaco 7 N en metanol a 130 ºC en un tubo cerrado herméticamente seguido de la transformación en la sal clorhidrato con HCl acuoso 3 N da clorhidrato de (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(2

10 feniletil)pirrolidina (27).

[0046] Se apreciará que la ruta ejemplificada en el Esquema 7 puede aplicarse al acoplamiento de una diversidad de análogos de 25 que varían en el sustituyente C-4 con una diversidad de análogos de 9-desazapurina.

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[0047] El Esquema 8 muestra otra alternativa más para la preparación de compuestos seleccionados de la invención. Este procedimiento usa el compuesto de partida D-arabinitol, en lugar de N-terc-butoxicarbonil-(3R,4S)-35 hidroxi-4-[(1S)-1,2-dihidroxietil]pirrolidina.

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[0048] Los compuestos de la invención son potentes inhibidores de PNP, MTAP y/o MTAN. La Tabla 1 muestra constantes de inhibición para compuestos seleccionados de la invención frente a PNP humana. La Tabla 2 muestra

5 constantes de inhibición para compuestos seleccionados frente a MTAN de E. coli. La Tabla 3 muestra constantes de inhibición para compuestos seleccionados frente a MTAP humana. La Tabla 4 muestra constantes de inhibición para compuestos seleccionados frente a PNP de Mycobacterium tuberculosis. La Tabla 5 muestra constantes de inhibición para compuestos seleccionados frente a PNP de Plasmodium falciparum.

10 Tabla 1: Constantes de inhibición frente a PNP Humana

Nº de Compuesto

Estructura Ki Ki*

61

imagen1 163  25 pM 6,8  1,2 pM

8

1100  120 pM 16,0  1,4pM

(cont.)

Nº de Compuestos

Estructura Ki Ki*

12

2000  50 pM Sin principio lento

33

433  13 nM Sin principio lento

37

19,6  3,5 pM Sin principio lento

31

14  3 nM Sin principio lento

41

2,8 nM Sin principio lento

40

12,7 mM Sin principio lento

Tabla 2: Constantes de inhibición frente a MTAN de E. coli

Nº de Compuesto

Estructura Ki Ki*

52

17  2 pM 160  14 pM

57

9,0  1 pM 42  5 pM

58

190 pM

62

4,0  0,4 pM 91  2,0pM

27

47,0  8,0 nM 1,0  0,3 nM

Tabla 3: Constantes de inhibición frente a MTAP humana

Nº de Compuesto

Estructura Ki Ki*

52

870  110 pM 22  3 pM

(cont.)

Nº Compuestos

Estructura Ki Ki*

62

46,0  8,0 pM <3 pM

27

Sin inhibición a 10 micromolar

57

280  50 pM 3,0  0,3 pM

58

imagen1 51 nM Sin principio lento

Tabla 4: Constantes de Inhibición frente a PNP de Mycobacterium tuberculosis

Nº de Compuesto

Estructura Ki Ki*

8

1,3  0,1 nM 42,2  2 pM

61

540  40 pM 24  1 pM

(cont.)

Nº Compuestos

Estructura Ki Ki*

12

2,1  0,2 nM Sin principio lento

41

7  0,2 nM Sin principio lento

Tabla 5: Constantes de Inhibición frente a PNP de Plasmodium falciparum

Nº de Compuesto

Estructura Ki Ki*

37

20,4 1,8 nM Sin principio lento

33

45  3 M Sin principio lento

8

500 pM Sin principio lento

31

4,3 M Sin principio lento

5 [0049] KI como se muestra en las Tablas 1, 2, 3, 4 y 5 es la constante de inhibición inicial formada por el complejo de enzima-inhibidor, y KI* es la constante de disociación en equilibro para la inhibición que se observa después de un periodo de inhibición de unión fuerte de inicio lento. Ki* es la constante biológicamente efectiva.

Aspectos adicionales

[0050] Los compuestos de la invención son útiles tanto en forma de base libre como en forma de sales. La expresión “sales farmacéuticamente aceptables” pretende ser aplicable a sales no tóxicas derivadas de ácidos orgánicos o inorgánicos, incluyendo, por ejemplo, los ácidos siguientes: ácido clorhídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, láctico, fumárico, succínico, tartárico, glucónico, cítrico, metanosulfónico y p-toluenosulfónico.

[0051] Los compuestos activos pueden administrarse a un paciente por una diversidad de vías, incluyendo administración oral, inyección o administración tópica. La cantidad de compuesto a administrar variará ampliamente de acuerdo con la naturaleza del paciente y la naturaleza y el grado del trastorno a tratar. Típicamente, la dosificación para un ser humano adulto estará en el intervalo de menos de 1 a 1000 miligramos, preferentemente de 0,1 a 100 mg.

[0052] Para la administración oral, los compuestos pueden formularse en preparaciones sólidas o líquidas, por ejemplo comprimidos, cápsulas, polvos, soluciones, suspensiones y dispersiones. Dichas preparaciones son bien conocidas en la técnica, como lo son otros regímenes de dosificación oral no enumerados en el presente documento. En la forma de comprimido, los compuestos pueden comprimirse con bases para comprimidos convencionales, tales como lactosa, sacarosa y almidón de maíz, junto con un aglutinante, un agente disgregante y un lubricante. El aglutinante puede ser, por ejemplo, almidón de maíz o gelatina, el agente disgregante puede ser almidón de patata o ácido algínico y el lubricante puede ser estearato de magnesio. Pueden añadirse otros componentes tales como colorantes o saporíferos.

[0053] Las formas líquidas incluyen vehículos tales como agua y etanol, con o sin otros agentes tales como un tensioactivo o agente de suspensión farmacéuticamente aceptable.

[0054] Los compuestos también pueden administrarse por inyección en un diluyente fisiológicamente aceptable, tal como agua o solución salina. El diluyente puede comprender uno o más de otros ingredientes, tales como etanol, propilenglicol, un aceite o un tensioactivo farmacéuticamente aceptable.

[0055] Los compuestos pueden estar presentes como ingredientes en cremas, para su administración tópica en la piel o en membranas mucosas. Preferentemente, las cremas incluyen un disolvente farmacéuticamente aceptable para facilitar que atraviesen la piel o las membranas mucosas. Son bien conocidas cremas adecuadas por los expertos en la materia.

[0056] Los compuestos pueden administrarse además por medio de sistemas de liberación sostenida. Por ejemplo, pueden incorporarse en un comprimido o cápsula de disolución lenta.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS

[0057]

La Figura 1 muestra las curvas cinéticas para PNP humana inhibida por compuesto (8).

La Figura 2 muestra la inhibición in vivo de MTAP de ratón.

EJEMPLOS

[0058] Los siguientes ejemplos ilustran adicionalmente la invención. Debe apreciarse que la invención no se limita a los ejemplos.

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Ejemplo 1

[0059] N-terc-Butoxicarbonil-(3R,4R)-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (1). Se añadió gota a gota N-terc

10 butoxicarbonil-(3R,4S)-3-hidroxi-4-[(1S)-1,2-dihidroxietil]pirrolidina (3,4 g, 13,7 mmol) en etanol (50 ml) a una solución agitada de peryodato sódico (3,4 g, 16 mmol) en agua (25 ml) mientras se mantenía la temperatura de reacción a 0 ºC. La reacción se dejó unos 20 min más, tiempo después del cual se añadió en porciones borohidruro sódico (2,0 g, exceso) asegurándose de nuevo de que la temperatura de reacción se mantenía a 0 ºC. Cuando se completó la adición, el sólido se filtró, se lavó con etanol (50 ml) y se concentró al vacío para proporcionar un jarabe.

15 La cromatografía proporcionó 1 (2,74 g, 92%) en forma de un jarabe.

Ejemplo 2

[0060] N-terc-Butoxicarbonil-(3R,4R)-3-benciloxi-4-(benciloximetil)pirrolidina (2). Se añadió en porciones

20 hidruro sódico (140 mg, dispersión en aceite al 60%, 3,7 mmol) a una solución agitada de bromuro de bencilo (300 l, 2,8 mmol) y 1 (200 mg, 0,92 mmol) en DMF (10 ml) a 0 ºC. Cuando se completó la adición, la suspensión resultante se dejó calentar a t.a., se diluyó con tolueno (100 ml), se lavó con agua (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó (MgSO4) y se concentró al vacío para proporcionar un jarabe. La cromatografía proporcionó 2 (350 mg, 96%) en forma de un aceite que se usó en la siguiente etapa sin purificación.

25

Ejemplo 3

[0061] Clorhidrato de (3R,4R)-3-benciloxi-4-(benciloximetil)pirrolidina (3). Se añadió acido clorhídrico (2 ml, 1 M) a una solución de 2 (500 mg, 1,3 mmol) en metanol (2 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 1 h a 40 ºC.

30 Cuando se completó la reacción, se concentró al vacío para proporcionar 3 en forma de la sal clorhidrato (330 mg, 90%). RMN 1H 8 7,35-7,21 (m,10H), 4,48 (m, 4H), 4,08 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,44 (m, 3H), 3,24 (m, 1 H), 2,65 (m, 1 H). RMN 13C  138,0, 137,6, 128,9, 128,8, 128,3, 128,2, 79,3, 73,7, 71,9, 68,7, 49,6, 46,4, 44,8.

Ejemplo 4

35 [0062] (3R,4R)-3-Hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (4). Se añadió gota a gota ácido clorhídrico (5 ml, 12 M) a una solución en agitación de 1 (2,3 g,10,6 mmol) en metanol (5 ml) a temperatura ambiente. Después de 1 h, la reacción se concentró al vacío para proporcionar 4 (1,63 g, 100%) en forma de un aceite. RMN 13C  71,9, 60,9, 52,1, 47,9, 46,6.

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Ejemplo 5

[0063] 7-N-Benciloximetil-6-terc-butoxi-9-desazapurin-9-carbaldehído (5). Se disolvió 5-benciloximetil-7-bromo4-terc-butoxipirrolo[3,2-d]pirimidina (400 mg, 1,02 mmol) en éter dietílico (10 ml) y anisol (5 ml), y se enfrió a -78 ºC. Después, se añadió gota a gota n-butil litio (600 l, 2,5 M) a una velocidad tal que se mantuvo la temperatura de reacción por debajo de -70 ºC y la solución resultante se dejó durante 30 min a -78 ºC. Después, se añadió dimetilformamida (100 l) y la reacción se dejó en agitación durante unos 30 min más y después se inactivó con agua y se dejó calentar a t.a. Después, la reacción se diluyó con acetato de etilo (100 ml), se lavó con agua (30 ml) y salmuera (30 ml), se secó (MgSO4) y se concentró al vacío para proporcionar un jarabe. La purificación por cromatografía proporcionó 5 (270 mg, 78%). RMN 1H  10,29 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,34 - 7,22 (m, 5H), 5,79 (s, 2H), 4,53 (s, 2H), 1,71 (s, 9H). RMN 13C  184,8, 156,63, 152,6, 150,0, 136,7, 136,6, 128,9, 128,5, 127,8, 118,4, 84,4, 78,3, 71,0, 29,0.

Ejemplo 6

[0064] 8-Aza-9-desaza-6-metoxi-7-N-(tetrahidropiran-2-il)-purin-9-carbaldehído (6). Se añadió gota a gota n-buLi (0,7 ml, 2,4 M) a una solución agitada de 8-aza-9-bromo-9-desaza-6-metoxi-7-N-(tetrahidropiran-2-il)-purina (530 mg, 1,7 mmol) en THF (20 ml) a -78 ºC en una atmósfera inerte. La reacción se agitó durante unos 30 min más a -78 ºC y después se añadió DMF (1,0 ml) y la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con agua (50 ml) se extrajo con tolueno (2 x 100 ml), las fase orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío para proporcionar un residuo sólido. La cromatografía proporcionó 6 en forma de un sólido. RMN 1H  10,43 (s, 1 H), 8,71 (s, 1 H), 6,55 (dd, J = 10,0, 2,7 Hz, 1 H), 4,25 (s, 3H), 4,13 (m, 1H), 3,83 (dt, J = 10,8, 2,8 Hz), 2,53 - 1,65 (m, 7H). RMN 13C  177,0, 161,5, 154,5, 143,9, 130,2, 128,9, 87,0, 67,4, 53,5, 28,7, 23,7, 21,2.

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Ejemplo 7

[0065] 7-[(3R,4R)-(3-Benciloxi-4-benciloximetilpirrolidin-1-il)metil]-5-benciloximetil-3H-pirrolo[3,2-d]pirimidin4-ona(3S,4S)-1-[(9-desaza-7-benciloximetil-hipoxantin-9-il)metil]-3-benciloxi-4-(benciloxiximetil)pirrolidina (7). Se añadió cianoborohidruro sódico (100 mg, 1,59 mmol) a una solución agitada de 5 (220 mg, 0,64 mmol) y 3.HCl (190 mg, 0,57 mmol) en metanol (5 ml) y se agitó durante una noche a t.a. Después, la reacción se concentró al vacío y se disolvió de nuevo en metanol (2 ml) y cHCl (2 ml), se agitó durante 1 h y después se concentró al vacío para proporcionar un residuo sólido. La cromatografía del residuo resultante proporcionó 7 (202 mg, 63%) en forma de un sólido. RMN 1H 8 7,87 (1 H, s), 7,32 (1 H, s), 7,31-7,23 (m, 5H), 5,89 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 3,87 (m, 2H), 3,81 (c, J = 13,4 Hz, 2H), 3,43 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 3,01 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,79 (d, J = 4,7 Hz, 1 H), 2,55 (m, 1H), 2,36 (m, 1H). RMN 13C 8 156,2, 145,8, 141,8, 138,9, 138,8, 137,6, 131,4, 128,8, 128,7, 128,7, 128,3, 128,2, 128,1, 128,0, 128,8, 117,9, 115,7, 81,3, 77,1, 73,5, 72,1, 71,4, 70,8, 60,0, 56,4, 48,6, 45,9.

Ejemplo 8

[0066] (3R,4R)-1-[(9-Deazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (8). El Compuesto 7 (120 mg, 0,21 mmol) y catalizador de Pearlman (120 mg) se suspendieron en etanol (3 ml) y ácido acético (1 ml) y se agitaron vigorosamente en una atmósfera de gas hidrógeno durante 24 h a t.a. Después, la reacción se filtró a través de celite y se concentró al vacío para proporcionar un sólido. La cromatografía y el intercambio iónico del sólido proporcionaron 8 (38 mg, 68%) en forma de un sólido de color blanco con p.f. 248-250 ºC. RMN 1H 8 7,81 (1H, s), 7,34 (1H, s), 3,97 (1 H, s a), 3,65 (2H, s), 3,53 (1 H, m), 3,44 (1 H, m), 2,93 (1 H, t, J = 9,0 Hz), 2,77 (1 H, m), 2,60 (1 H, m), 2,33 (1 H, t, J = 7,1 Hz), 2,12 (1 H, s a). RMN 13C  155,8, 144,1, 142,8, 130,0, 117,3, 111,1, 72,9, 62,7, 60,2, 54,8, 48,9, 47,3. HRMS (MH+) calc. para C12H16N4O3: 265,1301. Encontrado 265,1302. Anal. Calc. para C12H16N4O3. ½H2O C, 52,7; H, 6,2; N, 20,5. Encontrado C, 53,0; H 5,9; N, 20,4.

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Ejemplo 9.1

[0067] (3R,4R)-1-[(9-Deaza-7-benciloximetil-adenin-9-il)metil]-3-benciloxi-4-(beniloximetil)pirrolidina (9). El Compuesto 7 (1,2 g, 2,12 mmol) se añadió a cloruro de fosforilo (20 ml) y la suspensión resultante se calentó a reflujo. Después de 1 h, la reacción se concentró al vacío, se diluyó con cloroformo, se lavó con NaHCO3 saturado y salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El residuo resultante se disolvió de nuevo en NH3 7 N en metanol y la solución resultante se calentó a 120 ºC en un tubo cerrado herméticamente durante una noche. La reacción se concentró al vacío y se purificó por cromatografía para proporcionar 9 (0,83 g, 69%). RMN 1H  8,38 (s, 1 H), 7,76 (s a, 1 H), 7,32 - 7,25 (m, 15H), 6,01 (s a, 2H), 5,51 (d, J = 2,3 Hz, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,25 (d, J = 2,9 Hz, 2H), 4,05 (m, 1H), 3,50 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 3,42 (m, 1H), 3,31 (m, 1 H), 3,20 (m, 1H), 3,01 (m, 1H), 2,71 (m, 1H). RMN 13C  152,3, 151,5, 150,1, 138,3, 138,0, 135,7, 134,6, 129,2, 129,0, 128,8, 128,2, 128,1, 115,18, 107,94, 79,7, 77,6, 73,6, 71,9, 70,7, 69,8, 58,6, 58,1, 55,22, 54,9, 48,8, 45,3.

Ejemplo 9.2

[0068] (3R,4R)-1-[(9-Deazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroxilmetil)pirrolidina (10). El Compuesto 9 (100 mg, 0,18 mmol) y Pd/C (50 mg, 10% en peso) se suspendieron en etanol (4 ml) y se agitaron vigorosamente en una atmósfera de hidrógeno durante 24 h a temperatura ambiente. Después, la reacción se filtró a través de celite y se concentró al vacío para proporcionar un jarabe. La cromatografía sobre gel de sílice proporcionó 10 en forma de un sólido. RMN 1H (D2O) d 7,83 (s, 1 H), 7,13 (s, 1 H), 3,88 (c, J = 4,4 Hz, 1 H), 3,56-3,32 (4H, m), 2,78 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 2,62 (dd, J = 10,7, 6,4 Hz, 1 H), 2,47 (dd, J = 10,7, 4,2 Hz, 1H), 2,16 (dd, J = 9,8, 7,0 Hz, 1H), 2,03 (1H, m). RMN 13C (D2O) d 150,1, 149,6, 145,1, 129,6, 113,3, 109,8, 72,9, 62,8, 60,3, 54,8, 49,0, 47,3. HRMS (MH+) calc. para C12H18N5O2: 264,1461. Encontrado 264,1457.

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Ejemplo 10

[0069] (3R,4R)-1-[(8-Aza-9-desaza-6-metoxi-8-(tetrahidropiran-2-il)-purin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil) pirrolidina (11). Se añadió cianoborohidruro sódico (100 mg, 1,59 mmol) a una solución agitada de 6 (340 mg, 1,3 mmol) y 4.HCl (190 mg, 0,57 mmol) en metanol (5 ml) y se agitó durante una noche a t.a.. La cromatografía del residuo resultante proporcionó 11 (150 mg, 35%) en forma de un sólido. RMN 1H  8,39 (s, 1 H), 5,90 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 4,17 -3,94 (m, 4H), 4,12 (s, 3H), 3,67 - 3,52 (m, 2H), 2,94 - 2,79 (m, 2H), 2,66 - 2,52 (m, 2H), 2,35 - 2,09 (m, 2H), 1,70 - 1,56 (m, 2H). RMN 13C  162,6, 152,2, (140,1, 140,0), 133,5, 131,6, (87,0, 86,9), 74,3, (68,3, 68,2), (64,3, 64,2), 62,6, (56,2, 56,1), 54,5, (50,6, 50,7), (47,7, 47,6), 29,7, 25,2, 21,8.

Ejemplo 11

[0070] (3R,4R)-1-[(8-Aza-9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (12). Se añadió ácido clorhídrico concentrado (1 ml, 12 M) a una solución de 11 (50 mg, 0,14 mmol) en metanol, se agitó durante una noche y después se concentró al vacío para proporcionar un residuo sólido que se trituró con metanol y se filtró para proporcionar 12 (38 mg, 92%) en forma de un sólido. RMN 1H  8,13 (s, 1 H), 4,35 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 3,86 (m, 1 H), 3,66 - 3,43 (m, 2H), 3,55 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 3,10 (m, 1 H), 2,44 (s a, 1H). RMN 13C  154,7, 145,4, 137,1, 134,7, 128,6, 71,4, 60,6, 60,6, 55,0, 48,0, 47,9.

Ejemplo 12

[0071] (3R,4R)-1-[(8-Aza-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (13). Se calentó una solución de 11 (100 mg) en NH3 7 N en metanol (4 ml) en un tubo cerrado herméticamente a 120 ºC durante una noche. Después, la reacción se concentró al vacío y el residuo en crudo se disolvió de nuevo en metanol (1 ml) y CHCl (1 ml) y se dejó reposar durante una noche. La reacción se concentró de nuevo al vacío y el residuo resultante se purificó por cromatografía para proporcionar 13 (61 mg, 84%). RMN 13C  152,4, 151,5, 139,1, 134,8, 122,7, 71,7, 61,1, 60,3, 55,0, 48,4, 48,2.

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Ejemplo 13

[0072] 5-O-terc-Butildimetilsilil-1,2-O-isopropiliden--D-eritro-pentofuranos-3-ulosa (tercbutoxicarbonil)hidrazona (15). Una solución en tolueno (150 ml) de 14 (11,5 g, 38 mmol), carbazato de terc-butilo (17 g, 128 mmol) y p-toluenosulfonato de piridinio (1,15 g,4,6 mmol) se agitó durante una noche a 70 ºC. Cuando se completó la reacción, se lavó con NaHCO3 saturado y agua, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío para proporcionar un jarabe. La purificación por cromatografía proporcionó 15 (12,5 g, 79%) en forma de un aceite. RMN 1H  8,43 (s a, 1H), 5,98 (d, J = 4,8 Hz, 1 H), 4,90 (dd, J = 4,8, 1,5 Hz, 1 H), 4,76 (c, J = 1,5 Hz, 1H), 3,77 (m, 2H), 1,48 (s, 9H), 1,45 (s, 3H), 1,41 (s, 3H), 0,82 (s, 9H), -0,03 (d, J = 5,8 Hz, 6H). RMN 13C  153,5, 152,8, 114,3, 105,7, 82,0, 81,7, 76,2, 66,2, 28,6, 28,0, 27,5, 26,2, 18,5. HRMS (MH+) calc. para C19H37N2O6Si: 417,2421. Encontrado 417,2398.

Ejemplo 14

[0073] 3-(2-terc-Butoxicarbonilhidrazino)-5-O-terc-butildimetilsilil-3-desoxi-1,2-O-isopropiliden--Dribofuranosa (16). Se añadió gota a gota complejo de Borano.DMS (15 ml, ~10 M, 150 mmol) a una solución agitada de 15 (12,5 g, 30 mmol) a -78 ºC en una atmósfera inerte. La reacción se dejó calentar a t.a., se interrumpió cautelosamente con metanol y después la solución resultante se concentró al vacío. El jarabe en crudo obtenido se co-destiló con alícuotas de metanol (3 x 100 ml) para proporcionar 16 (12,5 g, 100%) en forma de un aceite, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H  6,29 (s a, 1 H), 5,67 (d, J = 3,7 Hz, 1 H), 4,62 (t, J = 4,3 Hz, 1 H), 4,24 (s a, 1 H), 3,75 (m, 2H), 3,72 (m, 1H), 1,46 (s, 3H), 1,38 (s, 9H), 1,27 (s, 3H), 0,82 (s, 9H), -0,03 (s, 6H). RMN 13C  156,9, 112,8, 104,6, 80,7, 80,4, 80,2, 65,0, 63,1, 28,7, 27,1, 26,9, 26,3, 18,7. HRMS (MH+) calc. para C19H38N2O6Si: 418,2499. Encontrado 418,2509.

Ejemplo 15

[0074] 3-(1-Acetil-2-terc-butoxicarbonilhidrazino-5-O-terc-butildimetilsilil-3-deoxi-1,2-O-isopropiliden--Dribofuranosa (17). Se añadió anhídrido acético (10 ml, exceso) se añadió a una solución agitada de 16 (12,5 g, 30 mmol) en piridina (30 ml) y la reacción resultante se dejó en agitación durante una noche a t.a.. Cuando se completó la reacción, se diluyó con cloroformo (500 ml) y se lavó con HCl al 10%, agua, NaHCO3 saturado y salmuera, y después la capa orgánica se secó (MgSO4), se filtró y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar un aceite en crudo de color amarillo. La purificación por cromatografía proporcionó 17 (6,5 g, 47%) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H  7,20 (s a, 1 H), 5,75 (d, J = 3,8 Hz, 1 H), 5,02 (dd, J = 9,8, 5,0 Hz, 1H), 4,72 (t, J = 4,2 Hz, 1 H), 4,04 (dd, J = 9,8, 2,2 Hz, 1 H), 3,87 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 11,6, 3,8 Hz, 1H), 2,09 (s, 3H),1,55 (s, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,28 (s, 3H), 0,84 (s, 9H), - 0,03 (s, 6H). RMN 13C  174,5, 155,2, 112,7, 104,7, 82,0, 81,0, 77,2, 62,9, 62,0, 55,0, 28,5, 27,0, 26,7, 26,3, 21,1, 18,7. HRMS (MH+) calc. para C2H41N2O7Si: 461,2683. Encontrado 461,2704.

Ejemplo 16

[0075] (3S,4S)-2-Acetil-3,4-dihidro-3-[(1S)-1,2-dihidroxietil]-4-hidroxipirazol (18). Una solución agitada de 17 (2,0 g, 4,3 mmol) en ácido acético al 70% (20 ml) se calentó a 100 ºC durante una noche. La solución resultante se dejó enfriar, se diluyó con agua (100 ml), la solución acuosa se extrajo con cloroformo (2 x 100 ml) y después la capa acuosa se concentró al vacío para proporcionar un jarabe. El producto se purificó por cromatografía para proporcionar 18 (380 mg, 47%) en forma de un aceite. RMN 13C  173,1, 150,5, 112,7, 74,7, 69,6, 65,4, 62,4, 21,4. HRMS (MH+) calc. para C7H13N2O4: 189,0875. Encontrado 189,0876.

Ejemplo 17

[0076] (35,45)-2-Acetil-3-[(1S)-1,2-dihidroxietil]-4-hidroxipirazolidina (19). Se suspendió catalizador de Pearlman (200 mg) en una solución de metanol con (3S,4S)-2-acetil-1,5-dihidro-3-[(1S)-1,2-dihidroxietil]-4-hidroxi-pirazol (18) (200 mg, 1,11 mmol) y se agitó durante una noche en una atmósfera de hidrógeno. La reacción se filtró a través de celite el filtrado se concentró al vacío para proporcionar un aceite en crudo. El producto en crudo se purificó por cromatografía para proporcionar 19 (85 mg, 43%) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H  4,64 (dd, J = 5,7, 3,4 Hz, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,61 (m, 2H), 3,36 (dd, J = 11,7, 6,5 Hz, 1 H), 2,71 (dd, J = 11,7, 6,0 Hz, 1H), 2,18 (s, 3H). RMN 13C  174,5, 75,4, 72,7, 68,2, 65,2, 56,4, 21,5. HRMS (M+) calc. para C7H14N2O4: 190,0953. Encontrado 190,0951.

Ejemplo 18

[0077] (3R,4S)-2-Acetil-4-hidroxi-3-hidroximetil-pirazolidina (20). Una solución de 19 (80 mg, 0,42 mmol) en etanol (5 ml) se añadió gota a gota a una solución agitada de peryodato sódico (150 mg, 0,7 mmol) en agua (5 ml) a una velocidad suficiente para mantener la temperatura de la reacción a 5 ºC. Cuando se completó, se añadió en porciones borohidruro sódico (135 mg, xs) a la suspensión resultante a una velocidad suficiente para mantener la temperatura de reacción a 0 ºC y, cuando se completó la adición, la reacción se dejó calentar a t.a.. A la reacción se le añadió sílice de calidad de cromatografía ultrarrápida y la suspensión resultante se concentró al vacío para proporcionar un sólido de color blanco. El sólido se purificó por cromatografía para proporcionar 20 (51 mg, 76%) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H  4,43 (dd, J = 5,7, 3,3 Hz, 1H), 3,91 (c, J = 4,7 Hz, 1 H), 3,75 (d, J = 4,7 Hz,

5 1H), 3,31 (m, 1H), 3,28 (dd, J = 11,8, 5,7 Hz, 1 H), 2,75 (dd, J = 11,8, 5,5 Hz, 1H), 2,17 (s, 3H). RMN 13C  173,9, 76,5, 68,2, 62,5, 55,8, 21,7. HRMS (MH4+) calc. para C6H13N2O3: 161,0926. Encontrado 161,0920.

Ejemplo 19

10 [0078] (3R,4S)-4-Hidroxi-3-hidroximetilpirazolidina (21). Se añadió gota a gota HCl concentrado (1,5 ml) a una solución agitada de 20 (15 mg, 0,09 mmol) en metanol (1,5 ml) y la reacción resultante se agitó 60 ºC durante 3 h. La reacción se concentró al vacío para proporcionar 21 (18 mg, 100%) en forma de su sal clorhidrato. RMN 1H  4,60 (c, J = 2,4 Hz, 1H), 3,73 - 3,31 (m, 5H). RMN 13C  72,6, 68,3, 60,2, 54,1.

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Ejemplo 20 N-terc-Butoxicarbonil-(3R,45)-3-hidroxi-4-(2-feniletenil)pirrolidina (23) A una suspensión de bromuro de benciltrifenilfosfonio (1,75 g, 4,97 mmol) en THF seco (10 ml) en una atmósfera de argón 0 ºC se le añadió BuLi 1,6 M en THF (2,33 ml, 3,73 mmol) y la solución de color rojo intenso se dejó en agitación sin refrigeración durante 10 min. Después de enfriar de nuevo a 0 ºC, se añadió el aldehído 22 (335 mg, 1,56 mmol) (Gary B. Evans, Richard H. Furneaux, Andrzej Lewandowicz, Vern L. Schramm y Peter C. Tyler (2003), Synthesis of Second-Generation Transition State Analogues of Human Purine Nucleoside Phosphorylase, J.Med. Chem., en prensa) en THF (5 ml) y la mezcla se agitó a t.a. durante 12 h. Después, la reacción se interrumpió con agua (1 ml), se añadió diclorometano (100 ml) y la fase orgánica se lavó con solución saturada de hidrogenocarbonato sódico (15 ml) y después agua (15 ml). El secado sobre sulfato de magnesio y la concentración al vacío seguida de cromatografía proporcionaron una mezcla aprox. 1:3 cis/trans de 23 en forma de un jarabe (290 mg, 64%). RMN 1H (300 MHz, CDCl3):  ppm: trans: 7,28 (m, 5H), 6,49 (d, J = 15,9 Hz, 1 H), 6,03 (dd, J = 15,9 y 8,1 Hz, 1 H), 4,11 (m, 1 H), 3,67 (m, 2H), 3,32 (m, 2H), 2,83 (m, 1 H), 1,46 (s, 9H). cis: 7,27 (m, 5H), 6,58 (d, J = 11,6 Hz, 1 H), 5,43 (dd, J = 11,6 Hz y 10,0 Hz, 1 H), 4,11 (m, 1 H), 3,65 (m, 2H), 3,21 (m, 2H), 2,88 (m, 1 H), 1,44 (s, 9H).

Ejemplo 21

[0079] N-terc-Butoxicarbonil-(3R,4S)-3-hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidina (24) A una solución de N-tercbutoxicarbonil-(3R,4R)-3-hidroxi-4-(2-feniletenil)pirrolidina 23 (290 mg, 1,00 mmol) en etanol (20 ml) se le añadió Pd al 10%/C (250 mg) y la suspensión se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante 12 h. Después de la filtración, el disolvente se retiró al vacío para dar 254 mg (87%) del compuesto del título en forma de un jarabe. RMN 1H (300 MHz, CDCl3):  ppm: 7,10 (m, 5H), 4,00 (m, 1H), 3,47 (m, 2H), 3,07 (m, 2H), 2,67 (m, 2H), 2,04 (m, 1 H), 1,83 (m, 1 H), 1,54 (m, 1 H), 1,45 (s, 9H). RMN 13C (300 MHz, CDCl3):  ppm (nótese que algunos picos son dobles debido a la conversión lenta de rotámeros): 155,17, 142,03, 128,83, 128,71, 126,37, 79,88, (74,94, 71,26), (53,17, 52,90), (49,90, 49,34), (46,11, 45,52), 34,41, 33,69, 28,91.

Ejemplo 22

[0080] Clorhidrato de (3R,4S)-3-hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidina (25) A una solución de N-terc-butoxicarbonil(3R,4R)-3-hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidina 24 (254 mg, 0,87 mmol) en metanol (10 ml) se le añadió HCl conc. (~12 N, 4 ml) y la solución se agitó a 40 ºC durante 30 min. Después de la eliminación del disolvente al vacío y la destilación azeotrópica con tolueno, el compuesto del título en crudo se obtuvo en forma de un sólido de color grisáceo (202 mg, 0,89 mmol, 102%). RMN 1H (300 MHz, MeOH-d4):  ppm: 7,14 (m, 5H), 4,22 (m, 1H), 3,52 (dd, J = 11,8 y 7,4 Hz, 1 H), 3,39 (dd, J = 12,3 y 4,9 Hz, 1H), 3,14 (dd, J = 12,3 y 2,8 Hz, 1 H), 3,02 (dd, J = 11,8 Hz, 1 H), 2,71 (m, 2H), 2,20 (m, 1H), 1,84 (m, 1H), 1,62 (m, 1H). RMN 13C (300 MHz, MeOH-d4):  ppm: 142,94, 129,93, 129,89, 127,56, 75,56, 52,90, 48,55, 47,28, 35,18, 34,44.

Ejemplo 23

[0081] (3R,4S)-1-[(9-Deaza-6-cloro-purin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidina (26) A una suspensión de clorhidrato de (3R,4R)-3-hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidina en crudo 25 (194 mg, 0,85 mmol) y 6-cloro-9-desazapurina (118 mg, 0,76 mmol) en agua (2,2 ml) se le añadieron formaldehído acuoso al 37% (70 l, 0,94 mmol) y acetato sódico (70 mg, 0,85 mmol). La mezcla se calentó a 95 ºC en un tubo cerrado herméticamente en agitación durante 12 h. Después de un periodo de refrigeración, la suspensión de color pardo oscuro se diluyó con 1,4-dioxano (3 ml) y la solución de color pardo oscuro se preabsorbió sobre sílice. La cromatografía en columna proporcionó el compuesto del título en forma de una película de color crema/parduzca (104 mg, 38%). RMN 1H (300 MHz, MeOHd4):  ppm: 8,71 (s, 1 H), 8,12 (s, 1H), 7,17 (s, 5H), 4,55 (s, 1H), 4,18 (m, 1 H), 3,56 (m, 2H), 3,31 (m, 1H), 3,04 (dd, J = 11,6 y 7,7 Hz, 1 H), 2,64 (m, 2H), 2,21 (m, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 1,61 (m, 1 H). RMN 13C (300 MHz, MeOH-d4):  ppm: 151,62, 151,35, 145,02, 142,99, 138,11, 129,84, 129,82, 127,46, 126,81, 107,73, 75,68, 61,00, 58,48, 49,51, 47,56, 35,26, 34,88.

Ejemplo 24

[0082] (3R,4S)-1-[(9-Deazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidina (27) Una solución de 7-[(3R, 4R)(3-Hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidin-1-il)metil]-4-cloro-pirrolo[3,2-d]pirimidina 26 (70 mg, 0,196 mmol) en amoniaco metanólico 7 N (4 ml) se calentó en un tubo cerrado herméticamente a 130 ºC en agitación durante 3 h. Después de un periodo de refrigeración, el disolvente se retiró al vacío. El residuo se recogió en metanol y el material en crudo se preabsorbió sobre sílice. El material obtenido después de la cromatografía en columna se trató con HCl acuoso 3 N (4 ml) a 40 ºC durante 1 h. La liofilización proporcionó 31 mg (39%) del compuesto del título en forma de un sólido de color crema. RMN 1H (300 MHz, D2O):  ppm: 8,40 (s, 1H), 7,83 (s, 1 H), 7,26 (m, 5H), 4,33 (m, 4H), 4,07 (m, 1 H), 3,80 (m, 2H), 2,75 (m, 2H), 2,37 (m, 1 H), 1,90 (m, 1 H), 1,66 (m, 1 H). RMN 13C (300 MHz, D2O):  ppm (nótese que algunos picos son dobles debido a la conversión lenta de rotámeros): 149,54, 144,47, 142,40, 133,05, 129,05, 128,85, 126,51, 113,64, 103,48, (74,87, 72,96), (55,34, 54,87), (52,59, 52,09), (45,96, 43,65), 33,30, 32,94, 32,33, EN-EM: m/z para C19H23N5O: (M+H)+: 338,1979; calc. 338,4326.

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Ejemplo 25

5

[0083] (3S,4S)-1-[(7-N-Benciloximetil-6-O-terc-butil-9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3,4-dihidroxi-4-hidroximetil3,4-O-isopropilidenopirrolidina (29). Una solución de la amina 28 (Bols, M. Tetrahedron Lett. 1996, 37, 2097-2100) (0,50 g, 2,89 mmol) y el aldehído (5, Esquema 3) (1,0 g, 2,95 mmol) en 1,2-dicloroetano (50 ml) se agitó con triacetoxiborohidruro sódico (1,1 g, 5,2 mmol) durante 1 h y después se lavó con NaHCO3 ac., se secó y se

10 concentró a sequedad. La cromatografía proporcionó el compuesto del título 29 (1,16 g, 2,34 mmol, 80%) en forma de un jarabe. RMN 13C (CDCl3)  156,2, 150,3 (C), 150,0 (CH), 137,5 (C), 131,8, 128,8, 128,2, 127,8 (CH), 117,1, 114,6, 113,0, 91,7, 83,2 (C), 82,4 (CH), 77,3, 70,2, 65,7, 62,1, 60,5, 48,4 (CH2), 29,1, 28,3 (CH3).

Ejemplo 26

15 [0084] (3S,4S)-1-[(6-O-terc-Butil-9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3,4-dihidroxi-4-hidroximetil-3,4-Oisopropilidenopirrolidina (30). Una solución de 29 (1,1 g,2,21 mmol) en etanol (30 ml) se agitó en una atmósfera de hidrógeno en presencia de Pd al 10%/C (0,25 g). Después de 16 h, se añadió más catalizador y después de 24 h los sólidos y los disolventes se retiraron. La cromatografía del residuo proporcionó el compuesto del título 30 (0,35 g,

20 0,93 mmol, 42%) en forma de un jarabe. RMN 13C (CD3O)  157,7 (C), 150,2 (CH), 149,8 (C), 131,0 (CH), 118,2, 113,7, 112,9,93,1, 83,9 (C), 83,5 (CH), 66,4, 62,7, 61,0, 48,9 (CH2), 29,4, 28,2 (CH3).

Ejemplo 27

25 [0085] (3S,4S)-1-[(9-Deazahipoxantin-9-il)metil]-3,4-dihidroxi-4-hidroximetilpirrolidina (31). Una solución de 30 (0,15 g, 0,399 mmol) en metanol (2,5 ml) y HCl c. (2,5 ml) se dejó en reposo durante 1 h y después se concentró a sequedad. La cromatografía del residuo [(CH2Cl2/MeOH/NH3 ac.10:6:1] proporcionó el compuesto del título 31 (0,095 g, 0,34 mmol, 85%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 13C (D2O/DCl) (a 85 ºC)  153,8 (C), 144,7 (CH), 138,0 (C), 132,8 (CH), 118,5, 103,8, 78,8 (C), 70,1 (CH), 63,5, 59,5, 57,3, 49,3 (CH2).

Ejemplo 28

[0086] (3S,4R)-1-[(9-Deazahipoxantin-9-il)metil]-3,4-dihidroxi-4-metiltiometilpirrolidina (33). Se añadió etildiisopropilamina (0,2 ml) a una suspensión de 30 (0,14 g) en diclorometano (5 ml) seguido de cloruro de metanosulfonilo (0,045 ml) y la mezcla se agitó durante 1 h. La solución resultante se procesó de manera normal, el 5 producto en crudo, en DMF (3 ml), se trató con tiometóxido sódico (0,13 g) y la mezcla resultante se calentó a 90 ºC durante 4 h y después se repartió entre tolueno y agua. La fase orgánica se lavó con agua, se secó y se concentró. La cromatografía del residuo proporcionó 32 (0,075 g). Una solución de este material en metanol (4 ml) y HCl c. (4 ml) se dejó en reposo durante 1 h y después se concentró a sequedad para dar 33.HCl (0,04 g, 62%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 13C (D2O)  153,4 (C), 145,0 (CH), 135,5 (C), 133,1 (CH), 118,6, 102,9, 79,2 (C), 71,9

10 (CH), 60,6, 56,7, 48,3, 39,2 (CH2), 17,1 (CH3).

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Ejemplo 29

15 [0087] (3R,4S)-1-[(9-Deazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina (37). Se añadió cloruro de 2,4,6-triisopropilbencenosulfonilo (3,0 g) a una solución de 1 (1,0 g) en piridina (20 ml), la solución se agitó durante 16 h y después se calentó a 60 ºC durante 1 h. Se añadió cloroformo y la solución se lavó con agua, HCl ac. 2 M y NaHCO3 ac. El procesamiento normal y la cromatografía dieron 1,125 g de 34 en forma de un vidrio incoloro. Una

20 solución de 0,45 g de este material en DMF (5 ml) se trató con tiometóxido sódico (0,2 g) y la mezcla se agitó durante 0,5 h. Se añadió tolueno y la reacción la reacción se procesó de manera normal para dar 0,115 g de material en crudo. Una solución de este material en diclorometano (5 ml) se trató con HCl 4 N en dioxano (3 ml). Después de 1 h, la solución se concentró a sequedad. El residuo sólido de 35 se disolvió en metanol (3 ml) que contenía 7-Nbenciloximetil-9-desaza-6-O-metilhipoxantin-9-carbaldehído (0,18 g) y se añadió cianoborohidruro sódico (0,088 g).

25 La mezcla se agitó durante 3 d. Se añadió cloroformo y la mezcla se procesó de manera normal. Después, la cromatografía proporcionó 36 (0,178 g). Este material en HCl c. (10 ml) se calentó a reflujo durante 1 h y después la solución se concentró a sequedad. El residuo se trató con metanol/NH3 ac. al 25% (1:1) durante 1 h y después seconcentró a sequedad. La cromatografía proporcionó un material sólido. Éste se disolvió en HCl ac. y se concentró. La trituración del residuo con etanol dio 37.HCl (0,048 g) en forma de un sólido higroscópico de color blanco. RMN

30 13C (D2O a 85 ºC)  154,6 (C), 144,5 (CH), 140,6 (C), 132,6 (CH), 118,6, 104,6 (C), 73,3 (CH), 59,3, 56,3, 48,0 (CH2), 45,7 (CH), 34,7 (CH2), 15,2 (CH3).

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Ejemplo 30

[0088] 5-O-terc-Butildimetilsilil-N-cianometil-1,4-didesoxi-1,4-imino-2,3-Oisopropiliden-D-ribitol (39).

Se añadieron bromoacetonitrilo (1,46 ml, 20,9 mmol) y etildiisopropilamina (5,46 ml, 56,9 mmol) a una solución de 38 (Horenstein, B.A.; Zabinski, R.F.; Schramm, V.L. Tetrahedron Lett. 1993, 34, 7213-7216) (3,0 g, 10,45 mmol) en acetonitrilo (20 ml). Después de 1 h, la solución se concentró a sequedad y la cromatografía del residuo proporcionó el compuesto del título 39 en forma de un jarabe (3,4 g, 10,4 mmol, 99%). RMN 1H  4,58 (dt, J = 6,4, 4,3 Hz, 1 H), 4,20 (dd, J = 6,8, 4,2 Hz, 1 H), 3,88 (d, J = 17 Hz, 1 H), 3,79 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1 H), 3,58 (m, 1 H), 3,56 (d, J = 17 Hz, 1H), 3,19 (dd, J = 9,8, 6,1 Hz, 1 H), 2,85 (m, 1 H), 2,75 (dd, J = 9,8, 4,3 Hz, 1 H), 1,44 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 0,82 (s, 9H), 0,09 (s, 3H), 0,08 (s, 3H); RMN 13C  115,6, 113,6 (C), 82,2, 78,3, 68,6 (CH), 64,7, 59,3, 41,0 (CH2), 27,6, 26,2, 25,6 (CH3), 18,5 (C). HRMS (MH+) calc. para C16H31N2O3Si: 327,2104. Encontrado: 327,2097.

Ejemplo 31

[0089] Clorhidrato de N-(9-desazahipoxantin-9-il)-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-ribitol (40.HCl). El derivado de Ncianometilo 39 (0,5 g, 1,53 mmol) se convirtió en el compuesto del título por la misma secuencia de reacciones descrita anteriormente en la preparación de Immucillin-H (Evans, G.B.; Furneaux, R.H.; Gainsford, G.J.; Schramm, V.L.; Tyler, P.C. Tetrahedron 2000, 56, 3053-3062) para dar 40.HCl en forma de un polvo amorfo (0,07 g, 0,23 mmol, 15%). RMN 1H (D2O)  8,24 (s, 1 H), 7,71 (s, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,29-4,17 (m, 2H), 3,96 (m, 1H), 3,82-3,71 (m, 3H); RMN 13C  154,2 (C), 144,3 (CH), 133,0 (C), 124,0 (CH), 117,8, 115,9 (C), 73,4, 70,4, 68,9 (CH), 62,9, 56,1 (CH2). HRMS (M+) calc. para C11H15N4O4: 267,1093. Encontrado: 267,1101.

Ejemplo 32.1

[0090] 7-N-Benciloximetil-9-desaza-9-formil-6-O-metilhipoxantina (5a). Una solución de 7-N-benciloximetil-9bromo-9-desaza-6-O-metilhipoxantina (G.B. Evans et al J. Org. Chem. 2001, 66, 5723-5730) (1,0 g, 2,87 mmol) en anisol (10 ml) y éter (25 ml) se enfrió a -70 ºC y se añadió n-butil-litio (2,4 ml, 1,2 M) a la suspensión resultante. Después de 10 min, se añadió N,N-dimetilformamida seca (1:1 ml, 14,2 mmol) a la solución transparente que se agitó a -70 ºC durante 30 min y después se inactivó con agua. El procesamiento normal proporcionó un sólido, que después de la trituración con etanol dio el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (0,67 g, 2,26 mmol, 78%) con p.f. 100-101 ºC. RMN 1H d 10,30 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,35-7,21 (m, 5H), 5,77 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,14 (s, 3H); RMN 13C d 184,7 (CH), 157,0 (C), 153,0 (CH), 150,0 (C), 136,9 (CH), 136,5 (C), 129,0, 128,7, 128,1 (CH), 118,6, 116,7 (C), 78,3, 71,4 (CH2), 54,3 (CH3). HRMS (MH+) calc. para C19H21N3O3 340,1661 encontrado: 340,1652.

Ejemplo 32.2

[0091] Clorhidrato de N-(9-desazahipoxantin-9-il)metil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-ribitol (41.HCl). El aldehído (5a) (114 mg,0,38 mmol) se añadió a una solución de 38 (Horenstein, B.A.; Zabinski, R.F.; Schramm, V.L. Tetrahedron Lett. 1993, 34, 7213-7216) (100 mg, 0,35 mmol) en metanol (1,5 ml), THF (0,5 ml) y ácido acético (100 5 ml) y la mezcla se agitó durante 10 min. Se añadió cianoborohidruro sódico (88 mg, 1,4 mmol) y la solución se agitó durante 4 h y después se repartió entre cloroformo y NaHCO3 ac. La capa orgánica se secó y se concentró a sequedad. La cromatografía del residuo proporcionó, presumiblemente, N-(7-N-benciloximetil-9-desaza-6-Ometilhipoxantin-9-il)-metil-5-O-terc-butildimetilsilil-1,4-didesoxi-1,4-imino-2,3-O-isopropilideno-D-ribitol en forma de un jarabe (175 mg, 0,31 mmol, 88%). Una solución de este material en etanol (5 ml) se agitó con Pd al 10%/C (100 mg) 10 en una atmósfera de hidrógeno durante 16 h. Los sólidos y el disolvente se retiraron y la cromatografía del residuo proporcionó un jarabe (129 mg) que se disolvió en metanol (5 ml) y HCl conc. (5 ml) y la solución se calentó a reflujo durante 2 h. La solución se concentró a sequedad y el residuo disolvió de nuevo en agua y se liofilizó para dar el compuesto del título 41.HCl en forma de un polvo (80 mg, 0,25 mmol, 80%). RMN 1H (D2O)  8,57 (m, 1H), 7,78 (s, 1 H), 4,66 (s, 1H), 4,56 (s, 1 H), 4,29 (m, 1 H), 4,13 (m, 1 H), 3,76 (m, 2H), 3,61 (m, 2H), 3,34 (dd, J = 13,0, 3,4 Hz, 1 15 H); RMN 13C  153,6 (C), 144,8 (CH), 136,7 (C), 133,2 (CH), 118,5, 103,3 (C), 71,3, 70,3, 68,9 (CH), 57,4, 57,1, 50,1

(CH2). HRMS (M+) calc. Para C12H17N4O4: 281,1250. Encontrado: 281,1260.

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20 Ejemplo 33

[0092] (3R,4R)-3-Hidroxi-4-hidroximetil-1-(hipoxantin-9-il)pirrolidina (47). Se añadió nitrito de terc-butilo (3,5 ml, 30 mmol, 4 equiv.) a una solución de la base libre de 3 (2,25 g, 7,5 mmol) en THF seco (30 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. La solución se concentró a sequedad. La cromatografía 25 dio el compuesto N-nitroso 42 en forma de un jarabe incoloro (2,05 g, 83%). Una solución de 42 (1,0 g, 3,1 mmol) en THF seco (20 ml) se enfrió a 0 ºC en una atmósfera de argón y se añadió lentamente hidruro de litio y aluminio (1 g, 26,3 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 6 h y después se inactivó cuidadosamente con una solución al 15% de NaOH (25 ml) seguido de agua (10 ml). La mezcla se extrajo dos veces con cloroformo, se lavó con NaHCO3 ac. y se secó y se concentró a sequedad. La cromatografía (cloroformo:acetato de etilo:metanol, 5:2:1) 30 proporcionó la hidrazina 43 (0,41 g, 43%) en forma de un jarabe. Se añadió formimidato 44 (Watson, A.A. J. Org. Chem. 1974, 39, 2911-2916) (0,224 g, 1,44 mmol, 1,2 equiv.) a una solución de 43 (0,375 g, 1,2 mmol) en etanol (1,5 ml), la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 10 min y después se dejó enfriar. La solución se concentró a sequedad. La cromatografía (cloroformo:acetato de etilo:metanol, 5:2:1) dio el imidazol 45 en forma de una goma de color pardo claro (0,155 g, 31%). Una solución de 45 (77 mg, 0,183 mmol) en MeOH seco (1 ml) se trató con HCl ac. 5 M (36,5 l, 0,183 mmol). El disolvente se retiró para dejar la sal clorhidrato en forma de una goma 5 de color pardo. Se añadió DMF (1,5 ml) seguido de ortoformiato de trietilo (0,304 ml, 1,83 mmol, 10 equiv.) y la mezcla de reacción se calentó a 120 ºC durante 30 min. Después de enfriar el disolvente se retiró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (cloroformo:acetato de etilo:metanol, 5:2:0,5) para proporcionar la hipoxantina 46 (49 mg, 62%) en forma de una goma. Se añadió hidróxido de paladio sobre carbono (20 mg, Pd al 20%) a una solución de 46 (41 mg, 0,095 mmol) en etanol (3 ml) y amoniaco acuoso al 25% 10 (1 ml). La mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a temperatura y presión ambiente durante 3 h. Después, el catalizador se retiró por filtración y se lavó con etanol (1,5 ml). La solución se concentró a sequedad y la cromatografía del residuo (diclorometano:metanol:amoniaco ac., 7:2:0,5) proporcionó el compuesto del título 47 (21 mg, 88%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CD3OD)  8,17 (s, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 4,26 (m, 1 H), 3,853,64 (m, 4H), 3,48-3,43 (m, 2H), 2,49-2,41 (m, 1H); RMN 13C  159,3 (C), 149,7 (C), 146,7 (CH), 142,3 (CH), 124,7

15 (C), 72,7 (CH), 63,7, 63,6, 58,4 (CH2), 50,2 (CH). M/Z calculado para C10H13N5O3 (MH+): 252,109, Encontrado: 252,108.

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20 Ejemplo 34

[0093] Clorhidrato de (3R,4S)-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina (48). Se añadió gota a gota cloruro de metanosulfonilo (180 l, 23 mmol) a una solución en CH2Cl2 de trietilamina (400 l, 29 mmol) y (3R,4R)-1-terc-butoxicarbonil-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (1) (2 g, 9,2 mmol) a 0 ºC y la solución resultante se dejó calentar a 25 temperatura ambiente. La reacción se diluyó con CH2Cl2, se lavó con agua y salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar (3R,4R)-1-terc-butoxicarbonil-3-hidroxi-4-(mesiloximetil)pirrolidina (900 mg) en forma de un aceite. Sin purificación adicional, el producto se disolvió en DMF (10 ml) y se agitó con tiometóxido sódico (400 mg, 5,7 mmol) a temp. ambiente durante una noche. La reacción se diluyó con tolueno, se lavó con agua y salmuera, se secó 30 (MgSO4) y se concentró al vacío. El residuo resultante se purificó cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar (3R,4S)-1-terc-butoxicarbonil-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina (600 mg, 2,4 mmol) en forma de un jarabe, que no se caracterizó adicionalmente. Se disolvió (3R,4S)-1-terc-butoxicarbonil-3-hidroxi-4-(metiltio)pirrolidina en MeOH (5,0 ml) y HCl c. (1,0 ml) y se concentró al vacío para proporcionar clorhidrato de (3R,4S)-3-hidroxi-4(metiltiometil)pirrolidina (48) en forma de un jarabe (442 mg, 26% de rendimiento total para tres etapas). RMN 13C

35 (D2O)  73,5, 51,5, 48,6, 45,2, 34,3, 14,9.

Ejemplo 35

[0094] (3R,4S)-1-[(6-terc-Butoxi-7-benciloximetil-9-desazapurin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina

40 (49). Se añadió cianoborohidruro sódico (200 mg, 3,2 mmol) a una solución agitada de 5 (800 mg, 2,32 mmol) y 48 (550 mg, 3,00 mmol) en metanol (10 ml) y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La reacción en crudo se absorbió sobre sílice, se cargó en una columna de cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice y se eluyó para proporcionar 49 (1,10 g, 78%) en forma de un sólido. RMN 1H (CDCl3)  8,48 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,33-7,23 (m, 5H). 5,75 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,12 (m, 1H), 4,02 (s, 2H), 3,30 (dd, J = 9,9, 7,5 Hz, 1 H), 2,95 (m, 2H), 2,64 (dd, J = 12,7, 7,1 Hz, 1H), 2,52-2,38 (m, 3H), 2,07 (s, 3H), 1,70 (s, 9H). RMN 13C (CDCl3)  156,4, 150,3, 150,3, 137,5, 133,3, 128,8, 128,2, 127,8, 117,1, 111,7, 83,5, 77,5, 76,1, 70,4, 61,4, 58,2, 48,8, 47,4, 37,3, 29,0, 16,0.

Ejemplo 36

[0095] (3R,4S)-3-Acetoxi-1-[(7-benciloximetil-9-desazahipoxantin-9-il)metil]-4-(metiltiometil)pirrolidina (50). Se añadió gota a gota anhídrido acético (1 ml, xs) a una solución del compuesto 49 (1,1 g, 2,3 mmol), DMAP (30 mg, cat.) y Et3N (2 ml, xs) en CH2Cl2 (20 ml) a temperatura ambiente. Después de 15 min. la reacción se diluyó con CH2Cl2, se lavó con NaHCO3 sat., agua y salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar el producto (1,35 g) en forma de un jarabe. Se añadió gota a gota TFA (5 ml) a una solución del sirope en CH2Cl2 (20 ml) a temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo resultante se disolvió de nuevo en CH2Cl2 y se lavó con NaHCO3 sat., agua y salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío para proporcionar (3R,4S)-3-acetoxi-1-[(7-benciloximetil-9desazahipoxantin-9-il)metil]-4-(metiltiometil)pirrolidina (50) (800 mg, 76%) en forma de una espuma. RMN 1H (CDCl3)  7,80 (s, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,25-7,20 (m, 5H), 5,82 (s, 2H), 5,11 (s a, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 3,80-3,59 (m, 3H), 3,32 (s a, 1H), 2,80-2,69 (m, 2H), 2,57 (dd, J = 13,0, 8,3 Hz, 1 H), 2,07 (s, 3H), 2,05 (s, 3H). RMN 13C (CDCl3)  170,7, 155,4, 145,8, 143,3, 137,2, 134,2, 128,8, 128,3, 128,1, 118,1, 106,9, 77,4, 75,7, 71,2, 57,0, 55,8, 48,1, 43,5, 35,0, 21,0, 16,1. HRMS (MH+) calc. para C23H29N4O4S: 457,1910. Encontrado 457,2412.

Ejemplo 37

[0096] (3R,4S)-1-[(7-benciloximetil-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina (51). Se disolvió amina 50 (800 mg, 1,75 mmol) en POCl3 y se calentó a reflujo durante 1 h. La solución resultante se concentró al vacío y se codestiló con tolueno (x 2) para proporcionar un residuo sólido. Sin purificación adicional, el producto de la reacción anterior se disolvió de nuevo en NH3 7 N en MeOH (15 ml) y se calentó en un tubo cerrado herméticamente a 110 ºC durante una noche. La reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar (3R,4S)-1-[(7-benciloximetil-9-desazaadenin-9il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina (51) (500 mg, 69%) en forma de un jarabe. RMN 1H (d4-MeOH)  8,24 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,29-7,26 (m, 5H), 5,74 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 4,26-4,22 (m, 1H), 3,70 (dd, J = 11,4, 6,9 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 12,1, 5,6 Hz, 1H), 3,29 (dd, J = 12,3, 3,3 Hz, 1H), 3,16 (dd, J = 11,4, 6,1 Hz, 1H), 2,76-2,67 (m, 1H), 2,50-2,44 (m, 2H), 2,07 (s, 3H). RMN 13C (CDCl3)  153,4, 153,0, 149,9, 138,1, 137,0, 130,0, 129,7, 129,3, 116,5, 106,5, 79,5, 75,0, 72,3, 60,9, 57,8, 50,1, 47,6, 36,6, 16,0.

Ejemplo 38

[0097] (3R,4S)-1-[(9-Deazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina (52). La amina (51) (150 mg, 0,37 mmol) se disolvió HCl c. (5 ml) y la solución resultante calentó a reflujo durante 90 min. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (50 ml), se lavó con CHCl3 (x 2) y la capa acuosa se concentró al vacío, seguido de codestilación con agua (x 2). El residuo resultante se disolvió de nuevo en NH4OH, se concentró al vacío, y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar (3R,4S)- 1-[(9desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina (52) (69 mg, 65%) en forma de un sólido. P.f. 108-110 ºC. RMN 1H (D2O)  7,96 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 4,00-3,95 (m, 1H), 3,74 (s, 2H), 3,05 (dd, J = 10,5, 7,9 Hz, 1H), 2,88 (dd, J = 11,1, 6,2 Hz, 1H), 2,71 (dd, J = 11,1, 4,0 Hz, 1H), 2,49 (dd, J = 13,0, 6,7 Hz, 1H), 2,40-2,24 (m, 2H), 2,162,13 (m, 1H), 1,93 (s, 3H). RMN 13C (D2O)  150,5, 150,1, 145,4, 130,4, 113,6, 108,33, 75,0, 59,8, 56,6, 47,4, 45,9, 35,9, 14,8. HRMS (MH+) calc. para C13H20N5OS: 294,1389. Encontrado 294,1394, Anal. Calc. para C13H19N5OS.4/3H2O C, 49,19; H, 6,88; N, 22,06; S, 10,10. Encontrado C, 49,86; H 6,58; N, 21,63; S, 9,74.

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Ejemplo 39

[0098] Clorhidrato de (3R,4S)-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (53). (3R,4R)-1-terc-Butoxicarbonil-3-hidroxi4-(mesiloximetil)pirrolidina (véase Ejemplo 34, 1,10 g, 3,7 mmol) se disolvió en DMF (2 ml) y se añadió gota a gota a una solución de mercaptano de bencilo (870 l, 7,4 mmol) y NaH (270 mg, dispersión en aceite al 60%, 6,8 mmol) en DMF (10 ml) y se agitó a temp. ambiente durante 1 h. La reacción se diluyó con tolueno, se lavó con agua después salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El residuo resultante se purificó cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar (3R,4S)-1-terc-butoxicarbonil-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina en forma de un jarabe. Sin caracterización adicional, el producto se disolvió en MeOH (5,0 ml) y cHCl (1,0 ml) y se concentró al vacío para proporcionar clorhidrato de (3R,4S)-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (53) en forma de un jarabe (730 mg, rendimiento total del 76% para dos etapas). RMN 1H (D2O)  7,40-7,27 (m, 5H), 4,26-4,22 (m, 1H), 3,74 (s, 2H); 3,56 (dd, J = 12,4, 7,2 Hz, 1H), 3,37 (dd, J = 12,8, 5,2 Hz, 1H), 3,21 (dd, J = 12,8, 3,0 Hz, 1 H), 3,07 (dd, J = 12,4, 5,5 Hz, 1H), 2,61-2,52 (m, 1H), 2,47-2,34 (m, 2H). RMN 13C (D2O)  138,7, 129,5, 129,3, 127,9, 73,5, 51,5, 48,5, 45,4, 35,9, 31,8. (MH+) calc. para C12H18NOS: 224,1109. Encontrado 224,1,102.

Ejemplo 40

[0099] (3R,4S)-1-[(6-terc-Butoxi-7-benciloximetil-9-desazapurin-9-il)metil]-3-hidroxi-4(benciltiomatil)pirrolidina (54). Se añadió cianoborohidruro sódico (200 mg, 3,2 mmol) a una solución agitada de 5 (800 mg, 2,32 mmol) y 53 (570 mg, 2,2 mmol) en metanol (10 ml) y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La reacción en crudo se absorbió sobre sílice, se cargó seca en una columna ultrarrápida sobre gel de sílice y se eluyó para proporcionar 54 (1,10 g, 78%) en forma de un sólido. RMN 1H (CDCl3)  8,45 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,27-7,22 (m, 10H), 5,75 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,15 (s, 2H), 3,67 (s, 2H), 3,38 (dd, J = 10,7, 7,0 Hz, 1H), 3,12-3,02 (m, 2H), 2,69-2,63 (m, 1H), 2,54-2,49 (m, 1H), 2,44-2,39 (m, 2H), 1,70 (s, 9H). RMN 13C (CDCl3)  156,6, 150,6, 150,0, 138,3, 137,5, 134,4, 129,3, 129,0, 128,8, 128,2, 127,8, 117,1, 109,0, 83,9, 77,9, 75,2, 70,7, 60,5, 57,7, 49,1, 47,0, 36,8, 33,7, 29,0. (MH+) calc. para C31H49N4O3S: 547,2743. Encontrado 547,2723.

Ejemplo 41

[0100] (3R,4S)-3-Acetoxi-1-[(7-benciloximetil-9-desazahipoxantin-9-il)metil]-4-(benciltiometil)pirrolidina (55). Se añadió gota a gota anhídrido acético (1 ml, exceso) a una solución de 54 (1,16 g, 2,12 mmol), DMAP (30 mg, cat.) y Et3N (2 ml, exceso) en CH2Cl2 (20 ml) a temperatura ambiente. Después de 15 min., la reacción se diluyó con CH2Cl2, se lavó con NaHCO3 sat., agua y después salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar el producto (1,35 g) en forma de un jarabe. Se añadió gota a gota TFA (5 ml) a una solución del jarabe en CH2Cl2 (20 ml) a temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo resultante se disolvió de nuevo en CH2Cl2 y se lavó con NaHCO3 sat., después con agua, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío para proporcionar (3R,4S)-3-acetoxi-1-[(7benciloximetil-9-desazahipoxantin-9-il)metil]-4-(benciltiometil)pirrolidina (55) (900 mg, 80% para dos etapas) en forma de una espuma. RMN 1H (CDCl3)  7,90 (s, 1 H), 7,33 (s, 1H), 7,28-7,17 (m, 10H), 5,91 (s, 2H), 4,85 (s a, 1H), 4,58 (s, 2H), 3,86-3,74 (m, 2H), 3,68 (s, 2H), 3,16-3,11 (m, 1H), 2,84-2,80 (m, 2H), 2,71 (dd, J = 11,4, 4,6 Hz, 1H), 2,502,36 (m, 2H), 2,27-2,21 (m, 1H), 2,00 (s, 3H). RMN 13C (CDCl3)  171,3, 156,2, 145,8, 141,9, 138,6, 137,5, 131,4, 129,2, 128,8, 128,3, 128,2, 127,4, 117,9, 115,2, 78,9, 77,0, 70,9, 59,8, 58,7, 48,3, 45,1, 36,9, 34,4, 21,5. HRMS (MH+) calc. para C29H33N4O4S: 533,2223. Encontrado 533,2236.

Ejemplo 42

5 [0101] (3R,4S)-1-[(7-Benciloximetil-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (56). Se disolvió la amina 55 (900 mg, 1,7 mmol) en POCl3 (15 ml) y se calentó a reflujo durante 1 h. La solución resultante se concentró al vacío y se codestiló con tolueno (x 2) para proporcionar un residuo sólido. Sin purificación adicional, este residuo se disolvió de nuevo en NH3 7 N en MeOH (15 ml) y se calentó en un tubo cerrado herméticamente a

10 130 ºC durante una noche. La reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar (3R,4S)-1-[(7-benciloximetil-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4(benciltiometil)pirrolidina (56) (720 mg, rendimiento del 87% para dos etapas) en forma de un jarabe. RMN 1H (CDCl3)  8,32 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,35-7,25 (m, 10H), 5,52 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,23 (s, 2H), 3,68 (s, 2H), 3,543,48 (m, 1H), 3,22 (d, J = 3,4 Hz, 2H), 2,83 (s a, 1H), 2,63-2,45 (m, 4H). RMN 13C (CDCl3)  152,2, 151,6, 149,5,

15 138,2, 135,7, 134,5, 129,2, 129,1, 128,9, 128,8, 128,2, 127,5, 115,2, 107,4, 77,6, 74,9, 70,7, 60,2, 57,3, 48,5, 46,9, 46,3, 36,7, 33,5, 23,1.

Ejemplo 43

20 [0102] (3R,4S)-1-[(9-Deazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (57). Se disolvió la amina 56 (330 mg, 0,7 mmol) en una solución de MeOH (4 ml) y HCl c. (4 ml) y se calentó a reflujo durante 90 min. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (50 ml), se lavó con CHCl3 (x 2) y la capa acuosa se concentró al vacío, seguido de codestilación con agua (x 2). El residuo resultante se disolvió de nuevo en NH4OH, se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar

25 (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (57) (30 mg, 12%) en forma de un sólido. RMN 1H (d4-MeOH)  8,17 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,26-7,16 (m, 5H), 3,93-3,90 (m, 1H), 3,83-3,74 (m, 2H), 3,68 (s, 2H), 3,03-2,97 (m, 1H), 2,80 (dd, J = 10,2, 6,4 Hz, 1H), 2,66-2,58 (m, 2H), 2,38 (dd, J = 12,5, 8,9 Hz, 1H), 2,30 (dd, J = 9,5, 7,2 Hz, 1H), 2,20-2,14 (m, 1H). RMN 13C (d4-MeOH) 8 152,5, 151,4, 147,4, 140,4, 130,4, 130,4, 129,8, 128,3, 115,5, 112,9, 77,3, 62,7, 59,2, 49,3, 48,6, 37,5, 35,6. HRMS (MH+) calc. para C19H24N5OS: 370,1702. Encontrado

30 370,1694.

imagen1

Ejemplo 44

[0103] Clorhidrato de (3R,4S)-1-[(8-aza-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (58). Se añadió cianoborohidruro sódico (20 mg, 0,32 mmol) a una solución agitada de 6 (180 mg, 0,52 mmol) y clorhidrato de (3R,4S)-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (53) (95 mg, 0,37 mmol) en metanol (5 ml) y se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La reacción en crudo se absorbió sobre sílice, se cargó seca en una 40 columna de cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice y se eluyó para proporcionar (3R,4S)-1-{[8-aza-9-desaza-8

(tetrahidropiran-2-il)-6-metoxihipoxantin-9-il]metil}-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (80 mg, 46%) en forma de unaespuma. Ésta se disolvió de nuevo en NH3 7 N en MeOH (15 ml) y se calentó en un tubo cerrado herméticamente a 110 ºC durante una noche. La reacción se concentró al vacío y el residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para proporcionar (3R,4S)-1-{[8-aza-9-desaza-8-(tetrahidropiran-2-il)-adenin-9-il]

5 metil}-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina. El producto no se caracterizó pero se disolvió de nuevo en metanol (2,0 ml) y HCl c. (2 ml), se concentró al vacío y el residuo resultante se trituró con isopropanol para proporcionar clorhidrato de (3R,4S)-1-[(8-aza-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (58) (52 mg, 82%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 13C (d4-MeOH)  153,7, 152,0, 139,9, 138,8, 135,1, 130,4, 130,0, 128,5, 124,6, 74,6, 61,4, 58,4, 50,4, 47,7, 37,4, 33,4. (MH+) calc. para C18H23N6OS: 371,1654. Encontrado 371,1670.

imagen1

Ejemplo 45

15 [0104] 7-Benciloximetil-6-O-bencil-9-desaza-9-formil-N2,N2-bis(4-metoxibencil)-guanina (59). Se añadió gota a gota n-butil-litio (0,5 ml, 1,5 M) a una solución agitada de 7-benciloximetil-6-O-bencil-9-bromo-9-desaza-N2,N2-bis(4metoxibencil)-guanina (Evans, G.B.; Furneaux, R.H.; Hausler, H.; Larsen, J.S.; Tyler, P.C. manuscript in preparation) en éter dietílico (6 ml) y anisol (3 ml) a -80 ºC en una atmósfera inerte. La reacción se agitó durante unos 30 min más a -80 ºC, después se añadió DMF (1,0 ml) y la reacción se dejó calentar a temp. ambiente. La reacción se

20 interrumpió con agua (50 ml) y se extrajo con cloroformo (2 x 100 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío para proporcionar un residuo sólido. El sólido se trituró con etanol para proporcionar 59 (280 mg, 72%) en forma de un sólido de color blanco. P.f. 172-174 ºC. RMN 1H  10,25 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,30-7,21 (m, 13H), 6,85-6,82 (m, 5H), 5,62 (s, 2H), 5,44 (s, 2H), 4,84 (s, 4H), 4,45 (s, 2H), 3,79 (s, 6H). RMN 13C  185,5, 159,4, 159,1, 156,5, 153,9, 136,9, 136,7, 134,9, 131,5,

25 129,5, 128,9, 128,5, 128,3, 128,0, 117,3, 114,2, 111,0, 78,4, 71,0, 67,9, 55,7, 49,5. HRMS (MH+) calc. para C38H37N4O5: 629,2764. Encontrado 629,2749.

Ejemplo 46

30 [0105] (3R,4R)-1-{[6-O-Bencil-7-benciloximetil-9-desaza-N2,N2-bis(4-metoxibencil)guanin-9-il]metil}-3-hidroxi4-hidroximetilpirrolidina (60). Se añadió cianoborohidruro sódico (200 mg, 3,0 mmol) a una solución agitada de 59 (530 mg, 0,84 mmol) y 4.HCl (163 mg, 1,06 mmol) en metanol (10 ml) y después la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se absorbió sobre sílice y se concentró al vacío. La cromatografía del residuo resultante proporcionó 60 (430 mg, 70%) en forma de un sólido de color blanco. P.f. 98

35 100 ºC. RMN 1H  7,49 (s, 1H), 7,35-7,12 (s, 14H), 6,81 (d, J = 8,5 Hz, 4H), 5,59 (s, 2H), 5,47 (s, 2H), 4,85-4,73 (m, 4H), 4,44 (s, 2H), 4,23-4,12 (m, 3H), 3,75 (s, 6H), 3,50-3,35 (m, 3H), 3,20 (dd, J = 12,0, 5,0 Hz, 1H), 3,08 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 2,95 (dd, J = 11,4, 5,4 Hz, 1 H), 2,24 (s a, 1 H). RMN 13C  159,0, 158,4, 156,7, 153,1, 137,6, 137,0, 135,0, 131,5, 129,4, 128,9, 128,7, 128,4, 128,3, 128,1, 128,0, 125,7, 114,3, 110, 6, 105,1, 78,1, 73,1, 70,8, 68,0, 62,2, 60,7, 55,7, 54,8, 49,2, 48,9. HRMS (MH+) calc. para C43H48N5O6: 730,3605. Encontrado 730,3629.

40

Ejemplo 47

[0106] (3R,4R)-1-[(9-Deazaguanin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (61). Se añadió gota a gota HCl

c. (2 ml) a una solución de 60 (370 mg, 0,5 mmol) en metanol (4 ml) y la solución resultante se calentó a reflujo

45 durante 4 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y después se concentró al vacío. El residuo resultante se repartió entre agua y cloroformo, se separó y la capa acuosa se concentró al vacío. La cromatografía de intercambio iónico y sobre Gel de Sílice del residuo resultante proporcionó 61 (39 mg, 28%) en forma de un sólido de color blanco. P.f. 223-225 ºC. RMN 1H 8 7,18 (s, 1H), 4,03-3,98 (m, 1H), 3,58 (s, 2H), 3,55 (dd, J = 11,1, 6,3 Hz, 1H), 3,45 (dd, J = 11,1, 7,4 Hz, 1H), 2,97 (dd, J = 10,0, 8,5 Hz, 1H), 2,79 (dd, J = 10,9, 6,3 Hz, 1H), 2,64 (dd, J = 10,9, 4,0 Hz,

50 1H), 2,35 (dd, J = 10,3, 7,0 Hz, 1H), 2,20-2,09 (m, 1H) . RMN 13C  158,6, 152,8, 143,5, 129,6, 112,7, 107,9, 72,8, 62,6, 60,2, 54,8, 48,9, 47,8. HRMS (MH’") calc. para C12H18N5O3: 280,1410. Encontrado . 280,1413, Anal. (C12H17N5O3,½H2O) C, H, N.

imagen3

5 Ejemplo 48.1 - Procedimiento General

[0108] (3R,4R)-1-[(9-Deazaguanin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-hidroximetilpirrolidina (61). Se disolvieron clorhidrato de (3R,4R)-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (4) (154 mg, 1,0 mmol) y acetato sódico (82 mg, 1,0 mmol) en agua (2 ml) y a la solución se le añadieron formaldehído acuoso (82 l, 1,0 mmol) y desazaguanina (120 mg, 0,8 mmol). La

10 reacción se agitó a 95 ºC durante 12 h. Se añadió Gel de Sílice (1,0 g) y la mezcla se evaporó a sequedad. La purificación por cromatografía sobre gel de sílice, usando CH2Cl2:MeOH:NH4OH (5:4:1) como eluyente, proporcionó n en forma de la sal de ácido acético. Después de la conversión en la sal HCl y de los análisis espectrales de RMN13C y 1H, el compuesto resultó ser idéntico en todos los sentidos con el indicado anteriormente (Evans, G. B.; Furneaux, R. H.; Lewandowicz, A.; Schramm, V. L.; Tyler, P. C. J. Med. Chem., en prensa.)

15

Tabla: Compuestos adicionales preparados mediante el Procedimiento General de la Reacción de Mannich

imagen1

compuesto

tiempo (h) R1 sustituyentes R2 R3 rendimiento (%)

8

16 OH OH OH 47

10

1 OH OH NH2 65

57

1 SBn OH NH2 72

62 63

1 3 SPhpCl OH OH OH NH2 Cl 72 78

64

3 OH OH N3 65

65

1 OAc OAc NH2 49

20 Ejemplo 48.2

[0109] (3R,4R)-1-[(9-Deazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-hidroximetilpirrolidina (8). El procedimiento general de la reacción de Mannich (anterior) se siguió para proporcionar el compuesto 8 en forma de la sal ácido acético. Después de conversión en la sal HCl y de los análisis espectrales de RMN 13C y 1H, el compuesto resultó ser

25 idéntico en todos los sentidos con el indicado anteriormente (Evans, G. B.; Furneaux, R. H.; Lewandowicz, A.; Schramm, V. L.; Tyler, P. C. J. Med. Chem., en prensa)

Ejemplo 48.3

30 [0110] (3R,4R)-1-[(9-Deazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (10). El procedimiento general de la reacción de Mannich (anterior) se siguió para proporcionar el compuesto 10 en forma de la sal de ácido acético. RMN 1H (d4-MeOH)  8,20 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,22 (quintuplete, J = 3,0 Hz, 1 H), 3,59 (m, 2H), 3,46 (dd, J = 11,1, 8,3 Hz, 1H), 3,26 (dd, J = 11,4, 5,7 Hz, 1H), 3,11 (dd, J = 11,4, 3,0 Hz, 1H), 2,95 (dd, J = 11,2, 6,8 Hz, 1H), 2,37 (s a, 1H), 1,82 (s, 3H). RMN 13C (d4-MeOH) 152,9, 151,9, 147,1, 132,0, 115,8, 108,2, 73,6,

35 63,1, 61,9, 56,0, 50,8, 49,5, 23,7. HRMS (MH+) calc. para C12H18N5O2: 264,1461. Encontrado 264,1457.

Ejemplo 48.4

[0111] (3R,4S)-1-[(9-Deazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina (57). El procedimiento general de la reacción de Mannich (anterior) se siguió para proporcionar el compuesto 57 en forma de la sal de ácido acético. La sal de ácido acético se convirtió en la base libre mediante cromatografía de intercambio iónico. RMN 1H (d4-MeOH) 8,17 (s, 1H), 7,46 (s, 1 H), 7,26 -7,16 (m, 5H), 3,93 - 3,90 (m, 1H), 3,83 - 3,74 (m, 2H), 3,68 (s, 2H), 3,03 2,97 (m, 1 H), 2,80 (dd, J = 10,2, 6,4 Hz, 1 H), 2,66 - 2,58 (m, 2H), 2,38 (dd, J = 12,5, 8,9 Hz, 1H), 2,30 (dd, J = 9,5, 7,2 Hz, 1H), 2,20 - 2,14 (m, 1 H). RMN 13C (d4-MeOH) 152,5, 151,4, 147,4, 140,4, 130,4, 130,4, 129,8, 115,5, 112,9, 77,3, 62,7, 59,2, 49,3, 48,6, 37,5, 35,6. HRMS (MH+) calc. para C19H24N5OS: 370,1702. Encontrado 370,1694.

Ejemplo 48.5

[0112] (3R,4S)-1-[(9-Deazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(4-clorofeniltiometil)pirrolidina (62). El procedimiento general de la reacción de Mannich (anterior) se siguió para proporcionar el compuesto 62 en forma de la sal de ácido acético. RMN 1H (d4-MeOH) 8,25 (s, 1H), 7,84 (s, 1 H), 7,35 - 7,23 (m, 5H), 4,54 (s, 2H), 4,30 (m, 1 H), 3,74 (dd, J = 11,9, 7,9 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 12,2, 5,6 Hz, 1 H), 3,40 - 3,15 (m, 4H), 2,89 (dd, J = 13,5, 9,1 Hz, 1 H), 2,47 (s a, 1 H), 1,98 (s, 3H). RMN 13C (d4-MeOH) 153,0, 151,8, 146,1, 135,7, 134,0, 133,2, 132,2, 130,7, 115,7, 105,5, 74,6, 60,4, 57,3, 49,2, 47,7, 36,1, 23,0. HRMS (MH+) calc. para C18H21ClN5OS:390,1155. Encontrado 390,1264.

Ejemplo 48.6

[0113] (3R,4R)-1-[(6-Cloro-9-desazapurin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (63). El procedimiento general de la reacción de Mannich (anterior) se siguió para proporcionar el compuesto 63 en forma de la sal de ácido acético. RMN 1H (D2O) 8,34 (s, 1 H), 7,98 (s, 1H), 4,48 (s, 2H), 4,31 (m, 1H), 3,68 (dd, J = 12,1, 8,3 Hz, 1H), 3,53 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,45 (dd, J = 12,6, 5,5 Hz, 1H), 3,32 (dd, J = 12,6, 2,5 Hz, 1 H), 3,13 (dd, J = 12,0, 7,4 Hz, 1H), 2,40 (s a, 1H), 1,82 (s, 3H). RMN 13C (d4-MeOH) 149,7, 148,6, 143,4, 137,6, 124,8, 104,5, 71,3, 60,7, 59,8, 54,4, 48,0, 47,8, 23,5. HRMS (MH+) calc. para C12H16ClN4O2: 283,0962. Encontrado 283,0973.

Ejemplo 48.7

[0114] (3R,4R)-1-[(6-Azido-9-desazapurin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina (64). El procedimiento general de la reacción de Mannich (anterior) se siguió para proporcionar el compuesto 64 en forma de la sal de ácido acético. RMN 1H (D2O) 9,52 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 4,62 (s, 2H), 4,38 (m, 1H), 3,78 (dd, J = 12,0, 8,5 Hz, 1H), 3,60 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,55 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 3,42 (d a, J = 11,4 Hz, 1H), 3,23 (dd, J = 11,9, 7,3 Hz, 1 H), 2,48 (s a, 1H), 1,86 (s, 3H). RMN 13C (D2O) 141,7, 138,6, 133,6, 132,2, 111,7, 107,2, 71,4, 60,8, 59,9, 54,6, 48,0, 48,0, 23,7.

Ejemplo 48.8

[0115] (3R,4R)-1-[(9-Deazaadenin-9-il)metil]-3-acetoxi-4-(acetoximetil)pirrolidina (65). El procedimiento general de la reacción de Mannich (anterior) se siguió para proporcionar el compuesto 65 en forma de la sal de ácido acético. RMN 1H (D2O) 8,25 (s, 1 H), 7,69 (s, 1H), 5,05 (quintuplete, J = 2,8 Hz, 1 H), 4,23 - 4,06 (m, 4H), 3,40 (dd, J = 10,5, 8,1 Hz, 1H), 3,27 - 3,12 (m, 2H), 2,77 (dd, J = 10,5, 7,8 Hz, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,03,(s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,98 (s, 3H). RMN 13C (D2O) 172,9, 172,6, 153,0, 151,1, 145,4, 132,1, 115,6, 108,8, 76,6, 65,1, 59,6, 55,8, 48,6, 45,7, 23,4, 21,3, 21,1. HRMS (MH+) calc. para C16H22N5O4: 348,1672. Encontrado 348,1669.

Ejemplo 49

Inhibición de PNP

[0116] La reacción implica la conversión de inosina (1 mM) y fosfato inorgánico (50 mM, pH 7,4) en hipoxantina y -D-ribosa 1-fosfato. El análisis por este procedimiento requiere que la concentración de inhibidor esté presente a al menos 10x la concentración de enzima. La enzima estaba presente a 1,6 pM. Se siguió el desarrollo de la reacción en un ensayo acoplado por control de la formación de ácido úrico a partir de la oxidación de hipoxantina por la xantina oxidasa (128 g; 59 miliunidades/ml de mezcla de reacción). La concentración de inhibidor de 0 a 1 nM se usó para determinar la constante de disociación inicial. La Ki se determinó a partir del intervalo de tiempo de 0 a 4 min y la constante de disociación en equilibrio Ki* se determinó a partir del intervalo de tiempo de 35 a 45 min. Las constantes de inhibición (K¡ o K¡*) se determinaron de acuerdo con las ecuaciones v = (kcat) (A)/(Km.(1 + I/Ki) + A) para Kl o v = (kcat) (A)/(Km. (1 + I/K¡*) + A) para Ki*.

[0117] Las curvas cinéticas para PNP humana inhibida por compuesto (8) se muestran en la Figura 1; la concentración de inhibidor se indica en el lado derecho.

Ejemplo 50

Inhibición de MTAP y MTAN

[0118] Se usaron ensayos espectrofotométricos continuos, así como discontinuos, para caracterizar los inhibidores

5 de la invención y la inhibición in vivo de MTAP y/o MTAN. En los ensayos espectrofotométricos continuos, la conversión de MTA en adenina se midió como una disminución en la absorbancia a 274 nm. A 274 nm, la diferencia en las propiedades espectrales es máxima y el coeficiente de extinción milimolar (cm-1) es de 1,6 para la conversión de MTA en adenina. En el ensayo discontinuo, las mezclas de 10 a 20 l que contienen [2,8-3H]MTA 50 M (285 cpm/pmol) en tampón fosfato de potasio 50 mM pH 7,5, KCl 10 mM y enzima se incubaron a temperatura ambiente.

10 Las reacciones se interrumpieron por adición de 1 l de HCl concentrado o ácido perclórico al 60%. Se añadió adenina como vehículo (de 1 a 2 l de 6 mM) y muestras de 5 l se aplicaron puntualmente sobre láminas de celulosa de capa fina y se revelaron en acetato de amonio 1 M pH 7,55 e isopropanol a una proporción de 9:1. Después del relevado, las manchas de adenina se localizaron por absorbancia de luz ultravioleta, se escindieron y se contaron para determinar el contenido de tritio. Para el análisis de la actividad de MTAP en muestras de sangre,

15 se añadieron 6 l de una mezcla que contenía sangre:Tritón X-100 al 0,6% 1:1 a la mezcla de ensayo descrita anteriormente y se tomaron muestras a tiempos apropiados para su análisis por cromatografía en capa fina. Se efectuaron ensayos para determinar la actividad de MTAP de hígado de ratón de una forma similar. Se añadieron extractos de hígado (3 l) que contenían aproximadamente 100 g de proteína a las mezclas de ensayo durante tiempos apropiados, seguido de análisis por cromatografía en capa fina.

20

Inhibición de inicio lento y constantes de inhibición

[0119] La cinética para la inhibición de inicio lento y la medición de los valores de KI y Ki* se llevaron a cabo añadiendo enzima de concentración conocida (1 a 5 nM) a mezclas de reacción que tenían altas concentraciones de 25 sustrato y diversas concentraciones de inhibidores. Se usaron típicamente concentraciones de sustrato de 150 M para MTA nucleosidasa y 200 M para MTA fosforilasa. Estas concentraciones corresponden a una DO de entre 0,7 y 1,1 a 274 nM. La formación de producto se controla como una disminución en la absorbancia a 274 nm. Las condiciones para la determinación de la Ki* usaban una alta concentración de sustrato. Se incluyeron dos controles, uno que no tenía inhibidor y otro que no tenía enzima, en el experimento. Los valores de Ki de estas enzimas para

30 los inhibidores se calcularon ajustando la relación de velocidades iniciales en presencia de inhibidor respecto a aquellas sin inhibidor frente a la concentración de inhibidor, para la concentración de sustrato y Km conocida en la expresión siguiente:

imagen1

35 Donde Vo’ es la velocidad en presencia de inhibidor. Vo es la velocidad en ausencia de inhibidor.

[I] es la concentración de inhibidor. Y [S] es la concentración de sustrato. Y la Ki* se calculó por ajuste a la expresión siguiente

40

imagen1

Donde Vs’ es la velocidad en estado estacionario después de lograrse el equilibrio en presencia de inhibidor y Vs es

la velocidad en estado estacionario en el control que no tiene inhibidor. Estas ecuaciones describen la inhibición 45 competitiva en la que el sustrato y el inhibidor análogo de estado estacionario se unen de una forma mutuamente

excluyente a la enzima.

36

Ejemplo 51

Inhibición de MTAP de ratón in vivo

5 [0120] A un ratón se le suministraron por vía oral 200 microgramos de Compuesto 57 y se tomaron muestras de sangre en función del tiempo. Las células se lisaron y se ensayaron para determinar la actividad de MTAP residual en mezclas de ensayo que contenían MTA. El ensayo mide la liberación de adenina de [2,8-3H]MTA. Los resultados se muestran en la Figura 2.

10 APLICABILIDAD INDUSTRIAL

La presente invención se refiere a compuestos que son inhibidores de PNP, PPRT, MTAP, MTAN y/o NH. Por lo tanto, se espera que los compuestos sean útiles en el tratamiento de enfermedades en las que la inhibición de PNP, PPRT, MTAP, MTAN y/o NH es deseable. Dichas enfermedades incluyen cáncer, infección bacteriana, infección

15 protozoaria o enfermedades mediadas por células T.

REFERENCIAS CITADAS EN LA DESCRIPCIÓN

Esta lista de referencias citadas por el solicitante es únicamente para la comodidad del lector. No forma parte del documento de la patente europea. A pesar del cuidado tenido en la recopilación de las referencias, 5 no se pueden excluir errores u omisiones y la EPO niega toda responsabilidad en este sentido.

Documentos de patentes citados en la descripción

imagen4

Literatura diferente de patentes citadas en la descripción

15

imagen1

Claims (27)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de la fórmula (I):

   imagen1

   5 donde: V se selecciona entre CH2 y NH, y W se selecciona entre NR1 y NR2; o V se selecciona entre NR1 y NR2, y W se 10 selecciona entre CH2 y NH; X se selecciona entre CH2 y CHOH en la configuración R o S; Y se selecciona entre hidrógeno, halógeno e hidroxi, excepto cuando V se selecciona entre NH, NR1 y NR2 que 15 entonces Y es hidrógeno; Z se selecciona entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, SQ, OQ y Q, donde Q es un grupo alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido; 20 R1 es un radical de la fórmula (II)

   imagen1

   R2 es un radical de la fórmula (III)

   imagen1

   A se selecciona entre N, CH y CR, donde R se selecciona entre halógeno, alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido, OH, NH2, NHR3, NR3R4 y SR5, donde R3, R4 y R5 son cada uno un grupo alquilo, aralquilo o arillo opcionalmente sustituido;

   B se selecciona entre OH, NH2, NHR6, SH, hidrógeno y halógeno, donde R6 es un grupo alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido;

   D se selecciona entre OH, NH2, NHR7, hidrógeno, halógeno y SCH3, donde R7 es un grupo alquilo, aralquilo o arilo opcionalmente sustituido;

   E se selecciona entre N y CH;

   G se selecciona entre CH2 y NH, o G está ausente, con la condición de que cuando W es NR1 o NR2 y G es NH, entonces V sea CH2, y con la condición de que cuando V es NR1 o NR2 y G es NH, entonces W sea CH2;

   o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un éster del mismo.

2. 2.

   Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Z se selecciona entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, SQ y OQ.

3. 3.

   Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que V es CH2.

4. 4.

   Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que X es CH2.

5. 5.

   Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que G es CH2.

6. 6.

   Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que Z es OH.

7. 7.

   Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que Z es SQ.

8. 8.

   Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 3, 4 ó 5, en el que Z es Q.

9. 9.

   Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que W es NR1.

10. 10.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que W es NR2.

11. 11.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que W se selecciona entre NH, NR1

    o NR2 y X es CH2.

12. 12.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, 4, 5, 6 ó 9, en el que V, X y G son CH2, Z es OH y W es NR1.

13. 13.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, 4, 5, 7 ó 9, en el que V, X y G son CH2, Z es SQ y W es NR1.

14. 14.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en el que Y es hidrógeno.

15. 15.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en el que Y es hidroxi.

16. 16.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en el que B es hidroxi.

17. 17.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en el que B es NH2.

18. 18.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, en el que A es CH.

19. 19.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, en el que A es N.

20. 20.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, en el que D es H

21. 21.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, en el que D es NH2.

22. 22.

    Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, en el que E es N.

23. 23.

    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es:

    (3R,4R)-1-[(9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroxilmetil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(8-aza-9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(8-aza-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(2-feniletil)pirrolidina; (3S,4R)-1-[(9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3,4-dihidroxi-4-metiltiometilpirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazahipoxantin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina; N-(9-desazahipoxantin-9-il)-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-ribitol; N-(9-desazahipoxantin-9-il)metil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-ribitol; (3R,4R)-3-hidroxi-9-hidroximetil-1-(hipoxantin-9-il)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(metiltiometil)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(8-aza-9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(benciltiometil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(9-desazaguanin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (3R,4S)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(4-clorofeniltiometil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(6-cloro-9-desazapurin-9-il)metil]-3-hidroxi-4-(hidroximetil)pirrolidina; (3R,4R)-1-[(6-azido-9-desazapurin-9-il)metil]-3-hidroxi-9-(hidroximetil)pirrolidina; o (3R,4R)-1-[(9-desazaadenin-9-il)metil]-3-acetoxi-9-(acetoximetil)pirrolidina;

    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un éster del mismo.

24. 24.

    Una composición farmacéutica que comprende una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 23.

25. 25.

    El uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 23 en la preparación de un medicamento para tratar una enfermedad o afección en la que se desea inhibir la fosforribosiltransferasa de purina, la nucleósido fosforilasa de purina, la 5’-metiltioadenosín fosforilasa, la 5’-metiltioadenosín nucleosidasa y/o la nucleósido hidrolasa.

26. 26.

    El uso de la reivindicación 25, en el que la enfermedad o afección es cáncer, infección bacteriana, infección protozoaria o una enfermedad mediada por células T.

27. 27.

    El uso de la reivindicación 26, en el que la enfermedad mediada por células T es psoriasis, artritis o rechazo a transplante.