JP4673357B2 - コメ由来またはコメ原料醸造食品由来のタンパク質、脂質代謝改善剤および食品素材 - Google Patents
コメ由来またはコメ原料醸造食品由来のタンパク質、脂質代謝改善剤および食品素材 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4673357B2 JP4673357B2 JP2007302909A JP2007302909A JP4673357B2 JP 4673357 B2 JP4673357 B2 JP 4673357B2 JP 2007302909 A JP2007302909 A JP 2007302909A JP 2007302909 A JP2007302909 A JP 2007302909A JP 4673357 B2 JP4673357 B2 JP 4673357B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein
- rice
- liquefied
- food
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 78
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 78
- 241000209094 Oryza Species 0.000 title claims description 48
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 title claims description 48
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title claims description 48
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 title claims description 48
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 title description 31
- 239000000463 material Substances 0.000 title description 23
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 claims description 52
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 claims description 43
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 38
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 16
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 16
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 15
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 13
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 claims description 11
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 claims description 8
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 claims description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 7
- 108010002430 hemicellulase Proteins 0.000 claims description 6
- 229940059442 hemicellulase Drugs 0.000 claims description 6
- 102100032487 Beta-mannosidase Human genes 0.000 claims description 5
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 5
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 5
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 5
- 108010055059 beta-Mannosidase Proteins 0.000 claims description 5
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 claims description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 4
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims description 4
- 238000013124 brewing process Methods 0.000 claims description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 69
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 61
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 26
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 24
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 23
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 21
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 20
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 20
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 19
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 16
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 16
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 16
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 14
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 14
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 13
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 13
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 12
- WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N taurocholic acid Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2O)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@H](O)C1 WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N 0.000 description 12
- 235000019626 lipase activity Nutrition 0.000 description 11
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 11
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 10
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 9
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 9
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 9
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 9
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 9
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N Taurocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 8
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 8
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 239000004129 EU approved improving agent Substances 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 5
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 5
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 5
- 239000000306 component Substances 0.000 description 5
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 5
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 5
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 4
- 108010007979 Glycocholic Acid Proteins 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N Na salt-Glycocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 4
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 4
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 4
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N glycocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 description 4
- 229940099347 glycocholic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 3
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 3
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 3
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 3
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007980 Sørensen’s phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 2
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 2
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 208000006575 hypertriglyceridemia Diseases 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000009103 reabsorption Effects 0.000 description 2
- 235000021067 refined food Nutrition 0.000 description 2
- 235000019685 rice crackers Nutrition 0.000 description 2
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 2
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- DGZSVBBLLGZHSF-UHFFFAOYSA-N 4,4-diethylpiperidine Chemical compound CCC1(CC)CCNCC1 DGZSVBBLLGZHSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical class [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 101710178392 Angiotensin-converting enzyme inhibitory peptide Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010008111 Cerebral haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 1
- 101710156496 Endoglucanase A Proteins 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000012722 SDS sample buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007997 Tricine buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000003858 bile acid conjugate Substances 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 235000021329 brown rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000006694 eating habits Nutrition 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000009207 exercise therapy Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000005428 food component Substances 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000003673 groundwater Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 230000002366 lipolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 239000008239 natural water Substances 0.000 description 1
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 1
- 239000005426 pharmaceutical component Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000021110 pickles Nutrition 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 239000012474 protein marker Substances 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 description 1
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
(a)水、有機溶媒、塩水溶液およびアルカリ溶液に不溶性もしくは難溶性である。
(b)セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、マンナナーゼおよびプロテアーゼに対して難加水分解性であり、かつペプシンおよびパンクレアチンに対して難消化性である。
(c)分子量が8kDaから15kDaの範囲である。
(A)分子量8kDaから9kDaのタンパク質であって、N末端アミノ酸配列が下記配列番号1の配列であるタンパク質。
配列番号1:Ile−Thr−Thr−Met−Gln−Tyr−Phe−Pro
(B)分子量13.5kDaから14.5kDaのタンパク質であって、N末端アミノ酸配列が下記配列番号2または下記配列番号3の配列であるタンパク質。
配列番号2:Arg−Phe−Asp−Ala−Leu
配列番号3:Arg−Phe−Asp−Pro−Leu
(C)分子量14.5kDaから15.5kDaのタンパク質であって、N末端アミノ酸配列が下記配列番号4または下記配列番号5の配列であるタンパク質。
配列番号4:Arg−Phe−Asp−Ala−Leu
配列番号5:Arg−Phe−Asp−Pro−Leu
(1) 蒸留水
(2) 3重量%NaCl水溶液
(3) 75重量%エタノール
(4) 0.025M NaOH水溶液
(5) 55重量%プロパノール
試料2g、蒸留水20mLに対し、下記各酵素粉末を10mg添加し、pHと温度を下記のように設定し、三角フラスコに入れ恒温水槽にて120rpmで6時間反応させた後、10分間沸騰水中で湯煎し、酵素を失活させる。それぞれの反応溶液をすべて回収し、凍結乾燥後、胆汁酸吸着率の測定に供する。
(1)セルラーゼ+ヘミセルラーゼ pH4.5、50℃
(2)マンナナーゼ pH4.0、60℃
(3)プロテアーゼ pH10、60℃
試料1gに対し、蒸留水20mLを加え、1N(1mol/L)のHClでpH2.0に調整し、ペプシン5mgを添加し、37℃で60分間、120rpmで攪拌して反応させた後、0.9N(0.9mol/L)のNaHCO3で中和しさらに1N(1mol/L)のNaOHでpH7.5に調整する。そこにパンクレアチン5mgを添加し、37℃で120分間、120rpmで攪拌して反応させた後、10分間100℃で加熱し反応を止める。遠心分離後、沈殿を2回蒸留水で洗浄した後、残渣を凍結乾燥し、胆汁酸吸着試率の測定に供する。
胆汁酸(タウロコール酸およびグリココール酸の少なくとも一方を含む)の2.5mM溶液(Na/Sorensenリン酸緩衝液pH8.0)10mLに、試料0.286gを添加後、L型試験管中で37℃、16時間振とう(120ストローク/分)させ、遠心分離により上清を得る。得られた上清を0.45μmフィルターによりろ過し、ろ液の液量を測定後、胆汁酸濃度を測定する。経口摂取後の生体内での状態を考慮し、試験管内の試料に含まれる繊維間隙に存在する胆汁酸は、ゆるい結合をして吸着されているとみなし、吸着反応後の液量変化を考慮した下記の式で胆汁酸の吸着率(%)を求める。
A:上清胆汁酸濃度
B:上清液量
C:吸着前の胆汁酸濃度
粗タンパク質:72.1%
粗脂質:5.7%
灰分:1.5%
その他成分:20.7%
水:蒸留水、イオン交換水、天然水、水道水、地下水
アルカリ性水溶液:NaOH水溶液、KOH水溶液、Ca(OH)2水溶液、Mg(OH)2水溶液、アンモニア水
塩水溶液:NaCl水溶液、KCl水溶液、CaCl2水溶液、MgCl2水溶液
有機溶媒:メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、イソアミルアルコール、ヘキサン、アセトン、酢酸エチル
本実施例では、液化酒粕の胆汁酸吸着能を調べた。タウロコール酸およびグリココール酸の2種類の抱合胆汁酸の2.5mM溶液(Na/Sorensenリン酸緩衝液pH8.0)10mLに、液化酒粕の凍結乾燥粉末0.286gを添加後、L型試験管中で37℃、16時間振とう(120ストローク/分)させ、遠心分離により上清を得た。上清を0.45μmフィルターによりろ過し、ろ液の液量を測定後、胆汁酸濃度を測定した。胆汁酸濃度の測定は総胆汁酸テストワコー(商品名、和光純薬社製)を用いた。前記測定結果から、前述の式により、胆汁酸吸着率(%)を求めた。その結果、液化酒粕のタウロコール酸吸着率は、50%であり、液化酒粕のグリココール酸の吸着率は、37%であった。
胆汁酸としてタウロコール酸のみを用いた以外は、実施例1と同様にして、赤糠(コメ(日本晴)の精白で生じた赤糠部分)、ひえ(ムソー株式会社製)、ビール酵母(商品名:ビール酵母食品、アサヒフードアンドヘルスケア株式会社製)、セルロース(粉末、ナカライテスク株式会社製)、キチン(粉末、半井化学薬品株式会社製)、キトサン(東京化学工業株式会社製)について、胆汁酸吸着能を測定した。これらの結果を、実施例1の結果と併せて図1のグラフに示す。図示のように、液化酒粕は、他の食品もしくは食品素材と比較して、胆汁酸吸着率が高かった。
カゼイン(和光純薬工業株式会社製)および大豆タンパク質(商品名:たん白粉末、和光純薬株式会社製)の胆汁酸吸着能を、実施例1と同様にして測定した。その結果を、下記の表1に示す。下記表1に示すように、カゼインおよび大豆タンパク質は、胆汁酸を吸着しなかった。
胆汁酸濃度(μmol/L) タウロコール酸 グリココール酸
反応前 861.4 861.4
反応後 カゼイン 1415.8 1480.2
反応後 大豆タンパク質 881.2 995.0
液化酒粕の凍結乾燥粉末3gに、下記の各溶媒(1)〜(5)を30mL加え、室温で1時間攪拌し、遠心分離後、蒸留水洗浄して得られた沈殿残渣を凍結乾燥し細かく粉砕し、これを試料(抽出残渣)とした。なお、ジエチルエーテルによる脱脂は、ソックスレー脂肪抽出法により一昼夜行った。これらの試料について、胆汁酸としてタウロコール酸のみを用いた以外は、実施例1と同様にして、胆汁酸吸着試験を実施し、胆汁酸吸着率(%)を求めた。また、対照として、各種溶媒による抽出処理をしていない液化酒粕についても、胆汁酸吸着試験を実施し、胆汁酸吸着率(%)を求めた。これらの結果を、図2のグラフに示す。図示のように、各抽出残渣は、対照(液化酒粕)と同等若しくはそれ以上の胆汁酸吸着率を示した。
(1) 蒸留水
(2) 3重量%NaCl水溶液
(3) 75重量%エタノール
(4) 0.025M NaOH水溶液
(5) 55重量%プロパノール
本実施例は、下記加水分解酵素処理および人工消化試験をした液化酒粕の胆汁酸吸着率を求めた例である。なお、対照として、下記消化酵素処理および人工消化試験をしない液化酒粕についても、同様に胆汁酸吸着率を求めた。これらの結果を、図3のグラフに示す。図示のように、消化酵素処理および人工消化試験をした液化酒粕は、対照の液化酒粕に比べ、胆汁酸吸着率はあまり低下せず、35%以上の胆汁酸吸着率を示した。
液化酒粕凍結乾燥粉末2g、蒸留水20mLに対し、下記各酵素粉末を10mg添加し、pHと温度を下記のように設定し、三角フラスコに入れ恒温水槽にて120rpmで6時間反応させた後、10分間沸騰水中で湯煎し、酵素を失活させた。それぞれの反応溶液をすべて回収し、凍結乾燥後、実施例1と同様の胆汁酸吸着試験(胆汁酸はタウロコール酸のみ)に供した。
(1)セルラーゼ(商品名:セルラーゼA「アマノ」3、天野エンザイム株式会社製)+ヘミセルラーゼ(商品名:ヘミセルラーゼ「アマノ」90、天野エンザイム株式会社製)
pH4.5、50℃
(2)マンナナーゼ(商品名:スミチームACH、新日本化学工業株式会社製)
pH4.0、60℃
(3)プロテアーゼ(商品名:プロレザーFG−F、天野エンザイム社製)
pH10、60℃
液化酒粕凍結乾燥品1gに対し、蒸留水20mLを加え、1N(1mol/L)のHClでpH2.0に調整し、ペプシン(商品名:ペプシン 1:60000、 和光純薬工業株式会社製)5mgを添加し、37℃で60分間、120rpmで攪拌して反応させた後、0.9N(0.9mol/L)のNaHCO3で中和しさらに1N(1mol/L)のNaOHでpH7.5に調整した。そこにパンクレアチン(商品名 Pancreatin, From porcine Pancreas、SIGMA−ALDRICH社製)5mgを添加し、37℃で120分間、120rpmで攪拌して反応させた後、10分間100℃で加熱し反応を止めた。遠心分離後、沈殿を2回蒸留水で洗浄した後、残渣を凍結乾燥し、実施例1と同様の胆汁酸吸着試験(胆汁酸はタウロコール酸のみ)に供した。
液化酒粕凍結粉末および実施例3の人工消化試験の消化残渣粉末について、電気泳動(SDS−PAGE)により、本発明の液化酒粕由来タンパク質を確認した。すなわち、まず、各粉末を5mg/mLとなるように2×SDSサンプルバッファーに溶解し、5分間煮沸後、遠心分離し、遠心上清5〜15μLを泳動用試料とした。また、対照として、飯米の凍結乾燥粉末を、50mg/mLになるように前記サンプルバッファーに溶解し、上記と同様に調製した遠心上清15μLを、泳動用試料とした。使用したゲルは商品名マルチゲルII15/25、MarkerはタンパクマーカーIII(M)・ペプチドマーカー(PM)、泳動バッファーは、通常のトリス−グリシンバッファーよりも低分子領域の解析が可能な50mMのトリス−トリシンバッファーを使用した(いずれも、第一化学薬品社製)。電気泳動条件は、30mAで、70分間泳動を行った。これらの結果を、図4の電気泳動の写真に示す。同図において、(1)は飯米、(2)液化酒粕凍結乾燥粉末、(3)は液化酒粕の人工消化試験の消化残渣粉末である。図示のように、液化酒粕の人工消化試験の消化残渣粉末において、分子量10kDaから15kDaの範囲に、三つの本発明の前記タンパク質のバンドを確認した。
Peak 分子量(kDa) 組成率(%)
1st 8.32 30.41
2nd 14.37 31.60
3rd(split) 14.97 37.83
その他のピーク − 0.16
(A)分子量8.32kDaのタンパク質
(B)分子量14.37kDaのタンパク質
(C)分子量14.97kDaのタンパク質
タンパク質種類 N末端アミノ酸配列
A Ile−Thr−Thr−Met−Gln−Tyr−Phe−Pro
(配列番号1)
B Arg−Phe−Asp−Ala−Leu(配列番号2)または
Arg−Phe−Asp−Pro−Leu(配列番号3)
C Arg−Phe−Asp−Ala−Leu(配列番号4)または
Arg−Phe−Asp−Pro−Leu(配列番号5)
配列番号1に対応するクローン
gi|125588032|gb|EAZ28696.1
gi|671591|emb|CAA59142.1
gi|115455559|ref|NP_001051380.1
gi|130946|sp|P15839
gi|15127777|gb|AAK84296.1|AF294580_1
gi|20296|emb|CAA34926.1
gi|20308|emb|CAA33301.1
gi|551659|emb|CAA57495.1
gi|556405|gb|AAA50318.1
gi|556407|gb|AAA50319.1
gi|113549851|dbj|BAF13294.1
gi|119394826|gb|ABL74525.1
gi|226932|prf||1611458A
gi|4379329|emb|CAA35862.1
gi|1345554|emb|CAA35857.1
gi|1345553|emb|CAA35856.1
gi|559922|emb|CAA35861.1
gi|1345555|emb|CAA35858.1
gi|1345552|emb|CAA35854.1
gi|1345557|emb|CAA35860.1
gi|1345556|emb|CAA35859.1
gi|4379327|emb|CAA35855.1
gi|115485761|ref|NP_001068024.1
gi|77551280|gb|ABA94077.1
gi|113645246|dbj|BAF28387.1
gi|119394846|gb|ABL74535.1
gi|125534640|gb|EAY81188.1
gi|125577384|gb|EAZ18606.1
配列番号2と配列番号4に対応するクローン
gi|115471105|ref|NP_001059151.1
gi|6174927|sp|P17048
gi|296129|emb|CAA46197.1
gi|971122|dbj|BAA09940.1
gi|34393306|dbj|BAC83235.1
gi|113610687|dbj|BAF21065.1
gi|119394844|gb|ABL74534.1
gi|2130063|pir||JC4599
gi|20292|emb|CAA32565.1
gi|1587669|prf||2207199A
gi|115471107|ref|NP_001059152.1
gi|8237371|gb|AAF73991.1|AF156714_1
gi|4126691|dbj|BAA36697.1
gi|34393307|dbj|BAC83236.1
gi|113610688|dbj|BAF21066.1
gi|119394850|gb|ABL74537.1
gi|20306|emb|CAA43295.1
配列番号3と配列番号5に対応するクローン
gi|115471107|ref|NP_001059152.1
gi|8237371|gb|AAF73991.1|AF156714_1
gi|4126691|dbj|BAA36697.1
gi|34393307|dbj|BAC83236.1
gi|113610688|dbj|BAF21066.1
gi|119394850|gb|ABL74537.1
gi|20306|emb|CAA43295.1
圧搾直後から約1ヶ月間4℃で保存していた液化酒粕をブレンダーで粉砕したもの50g(水分47%)に対し、(1)蒸留水、(2)0.5重量%NaCl水溶液、(3)25mMのKOH水溶液を、それぞれ150mL加え、室温にて90分間攪拌した。その後、沸騰水中で30分間湯煎し、室温まで冷却後、遠心分離して得られた沈殿を凍結乾燥し、得られた乾燥酒粕をブレンダーで粉砕し、得られた粉末を、下記のモニター試食に供した。
各溶媒で1回洗浄した上記3種類の粉末液化酒粕サンプルに加え、洗浄前の未処理液化酒粕の凍結乾燥粉末サンプルを用意し、計4種類の液化酒粕粉末のブラインド試食を、モニター10名で実施した。採点は「食品素材としての好ましさ」に関して1を最良とし5までの五段階評価で行い、フリーコメントも記入してもらった。この結果を、下記の表5に示す。
本実施例では、下記サンプル(1)〜(4)について、リパーゼ阻害活性を確認した。また、比較例として、下記サンプル(5)〜(7)について、リパーゼ阻害活性を測定した。
液化酒粕は、その凍結乾燥粉末を使用した。
液化酒粕凍結乾燥品50gに対し、1N(1mol/L)のHCl 200mLとペプシン(商品名:ペプシン 1:60000、 和光純薬工業株式会社製)250mgを添加し、pH2.0、37℃で60分間、120rpmで攪拌して反応させた後、0.9N(0.9mol/L)のNaHCO3で中和し、さらに1N(1mol/L)のNaOHでpH7.5に調整して反応を止めた。反応物を遠心分離後、沈殿を2回蒸留水で洗浄した後、残渣を凍結乾燥し、前記凍結乾燥粉末を液化酒粕ペプシン分解物とした。
液化酒粕凍結乾燥品50gに対し、1N(1mol/L)のHCl 200mLとペプシン(商品名:ペプシン 1:60000、 和光純薬工業株式会社製)250mgを添加し、pH2.0、37℃で60分間、120rpmで攪拌して反応させ、0.9N(0.9mol/L)のNaHCO3で中和し、さらに1N(1mol/L)のNaOHでpH7.5に調整して反応を止めた。続いて、この反応物に対し、パンクレアチン(商品名 Pancreatin, From porcine Pancreas、SIGMA−ALDRICH社製)250mgを添加し、37℃で120分間、120rpmで攪拌して反応させた後、10分間100℃で加熱し反応を止めた。遠心分離後、沈殿を2回蒸留水で洗浄した後、残渣を凍結乾燥し、前記凍結乾燥粉末を、液化酒粕ペプシン・パンクレアチン分解物とした。
凍結乾燥品50gに対し、3%NaCl水溶液200mL加え、室温で1時間攪拌し、遠心分離後、得られた沈殿残渣に対し、さらに0.1N(0.1mol/L)のNaOHを200mL加え、室温で1時間攪拌した。遠心分離して得られた上清をアルカリ可溶画分とし、酸沈後凍結乾燥して粉末を得た。一方、前記遠心分離で得られた沈殿をアルカリ不溶画分とし、残渣を凍結乾燥して粉末を得た。
ビール酵母として、ビール酵母食品(商品名:エビオス錠、アサヒフードアンドヘルスケア株式会社製)を粉砕した粉末を使用した。
カゼインとして、カゼイン粉末(和光純薬工業株式会社製)を使用した。
前記(1)〜(7)の各サンプル0.1gに対し、500U/Lのリパーゼ溶液(リパーゼ、和光純薬工業株式会社製)6mLを加え、37℃10分間反応後、遠心して得られた上清、およびブランクとしてサンプルを加えないリパーゼ溶液のリパーゼ活性を、リパーゼ測定用試薬(商品名:「BMY」モノテスト、ベーリンガー・マンハイム株式会社製)を用いて測定した。前記ブランクのリパーゼ活性100に対する各サンプルのリパーゼ活性の阻害率を求めた。この結果を、図6のグラフに示す。
本実施例では、実施例5のサンプル(3)について、ヒトにおける脂質代謝改善効果を確認した。
本実施例では、血液中の総コレステロール量が220mg/dL以上の高脂血症男性5名(平均年齢40.6±1.1歳、平均体重62.8±8.4kg)を被験者とした。前記被験者選定基準(総コレステロール量が220mg/dL以上)は、日本動脈硬化学会による高脂血症の診断基準に基づき設定した。前記被験者に、1日あたり前記粉末液化酒粕サンプル3gを、2ヶ月間毎日摂取させた。なお、前記粉末液化酒粕サンプルに含まれる本発明のタンパク質含有率は、約64%であった。前記サンプルの摂取条件は、1日の摂取量のみを限定し、摂取する時刻および回数は自由とした。また、前記サンプルは、他の飲食物と同時に摂取しても構わないものとした。前記被験者から、摂取開始前、摂取開始1ヶ月後、摂取開始2ヶ月後および試験終了1ヶ月後の計4回採血した。そして、前記採血した血液から、常法により血清を得た。前記血清について、血清中中性脂肪測定用「ネスコートVLII TG(商品名)」、血清中総コレステロール測定用「ネスコートVLII TC(商品名)」(ともに、アルフレッサ ファーマ株式会社製)を用いて、血清中の中性脂肪、総コレステロールおよびHDLコレステロール量を測定した。また、LDLコレステロール量は、以下の式(フリードワルドの公式)により算出可能であった4名について算出した。
LDLコレステロール=総コレステロール−HDLコレステロール−中性脂肪×0.2
(式3)増減率(%)=(変化量)÷(摂取前の前記中性脂肪量)×100
モニター 中性脂肪(mg/dL) 変化量 増減率
摂取前 摂取開始2ヶ月後 (mg/dL) (%)
A 432 385 −47 −10.9
B 144 109 −35 −24.3
C 80 63 −17 −21.3
D 55 81 26 47.3
E 48 62 14 29.2
Claims (4)
- コメ由来またはコメ原料醸造食品由来のタンパク質であって、下記の(a)および(b)の理化学的性質を有する、下記(A)、(B)および(C)からなる複合タンパク質。
(a)水、有機溶媒、塩水溶液およびアルカリ溶液に不溶性もしくは難溶性である。
(b)セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、マンナナーゼおよびプロテアーゼに対して難加水分解性であり、かつペプシンおよびパンクレアチンに対して難消化性である。
(A)分子量8.32kDaのタンパク質であって、N末端アミノ酸配列が下記配列番号1の配列であるタンパク質。
配列番号1:Ile−Thr−Thr−Met−Gln−Tyr−Phe−Pro
(B)分子量14.37kDaのタンパク質であって、N末端アミノ酸配列が下記配列番号2または下記配列番号3の配列であるタンパク質。
配列番号2:Arg−Phe−Asp−Ala−Leu
配列番号3:Arg−Phe−Asp−Pro−Leu
(C)分子量14.97kDaのタンパク質であって、N末端アミノ酸配列が下記配列番号4または下記配列番号5の配列であるタンパク質。
配列番号4:Arg−Phe−Asp−Ala−Leu
配列番号5:Arg−Phe−Asp−Pro−Leu - 前記醸造食品が、清酒醸造過程において生じる副産物である請求項1記載の複合タンパク質。
- 前記副産物が、液化酵素により液化された原料米をアルコール発酵させることにより製造される清酒の製造において生成する液化酒粕である請求項2記載の複合タンパク質。
- 胆汁酸吸着能を有する請求項1から3のいずれか一項に記載の複合タンパク質。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2007302909A JP4673357B2 (ja) | 2007-03-29 | 2007-11-22 | コメ由来またはコメ原料醸造食品由来のタンパク質、脂質代謝改善剤および食品素材 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2007089798 | 2007-03-29 | ||
JP2007302909A JP4673357B2 (ja) | 2007-03-29 | 2007-11-22 | コメ由来またはコメ原料醸造食品由来のタンパク質、脂質代謝改善剤および食品素材 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008266289A JP2008266289A (ja) | 2008-11-06 |
JP4673357B2 true JP4673357B2 (ja) | 2011-04-20 |
Family
ID=40046289
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007302909A Active JP4673357B2 (ja) | 2007-03-29 | 2007-11-22 | コメ由来またはコメ原料醸造食品由来のタンパク質、脂質代謝改善剤および食品素材 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP4673357B2 (ja) |
-
2007
- 2007-11-22 JP JP2007302909A patent/JP4673357B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2008266289A (ja) | 2008-11-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6462100B2 (ja) | 米糠酵素処理組成物 | |
KR102244586B1 (ko) | 귀리분말 제조방법 | |
JP4493725B1 (ja) | 脂肪分解促進作用を有する組成物 | |
de Almeida et al. | Bioaccessibility and gut metabolism of phenolic compounds of breads added with green coffee infusion and enzymatically bioprocessed | |
JP4097335B2 (ja) | 食品添加物 | |
JP5872725B1 (ja) | 鰹節由来のジペプチジルペプチダーゼiv阻害組成物 | |
JP5044643B2 (ja) | 血清尿酸値低下剤および血清尿酸値を低下させる旨の表示を付した飲食品 | |
JP4673357B2 (ja) | コメ由来またはコメ原料醸造食品由来のタンパク質、脂質代謝改善剤および食品素材 | |
JP3459815B2 (ja) | 大麦焼酎蒸留残液から分取した脂肪肝抑制作用を有する組成物及び該組成物の製造方法 | |
EA017609B1 (ru) | Применение гидролизата казеина молока животных и продукта ферментации исходного материала, содержащего молочный белок, включающих ile-pro-pro и/или val-pro-pro, в производстве профилактического средства от артериосклероза | |
JPH09194390A (ja) | 内臓脂肪蓄積抑制剤 | |
CN113768028A (zh) | 一种从高粱黑粉菌中分离蛋白的方法及其应用 | |
JP2021165290A (ja) | α−グルコシダーゼに関連付けられる病的状態の予防及び/又は治療のための組成物 | |
Wang et al. | Process optimization for preparation of hyaluronidase inhibitory hydrolysates with anti-allergic potential from Salmo salar processing by-products | |
JP4783882B2 (ja) | 新規α−アミラーゼ阻害活性物質、その製造方法及びその用途 | |
JP2009148248A (ja) | 低アレルゲン化剤 | |
JP2001145498A (ja) | 大麦麹から分取した脂肪肝抑制作用を有する組成物及び該組成物の製造方法 | |
JP2004359638A (ja) | リパーゼ活性阻害剤 | |
WO2007034958A1 (ja) | 穀類由来の成分を有効成分とする血管新生阻害の作用を有する組成物 | |
JP2012056879A (ja) | アンジオテンシン変換酵素阻害剤およびその用途 | |
JP5831900B2 (ja) | 酵素活性阻害剤 | |
JP7464932B2 (ja) | 大麦若葉由来の膵リパーゼ阻害剤、脂質吸収抑制用剤、及びそれらを含む飲食品 | |
US20100062091A1 (en) | Processed product of fenugreek seeds and method for producing the same | |
JP6948657B2 (ja) | 脳機能改善用組成物 | |
JP4854271B2 (ja) | 血清コレステロール低下に関与するcyp7a1酵素活性化剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100910 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101101 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20101210 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101220 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110112 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110120 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4673357 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140128 Year of fee payment: 3 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |