JP4658290B2

JP4658290B2 - Fibroblast proliferating agent, cosmetic food and drink, and skin cosmetics

Info

Publication number: JP4658290B2
Application number: JP2000191900A
Authority: JP
Inventors: 芳彦石田; 直子岸田
Original assignee: Maruzen Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Maruzen Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2000-06-26
Filing date: 2000-06-26
Publication date: 2011-03-23
Anticipated expiration: 2020-06-26
Also published as: JP2002003390A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、植物からの抽出物を有効成分とする線維芽細胞増殖作用剤、並びに植物からの抽出物を含有する美容用飲食品および皮膚化粧料に関する。
【０００２】
【従来の技術】
皮膚の表皮および真皮は、表皮細胞、線維芽細胞、およびこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するコラーゲン等の細胞外マトリックスにより構成されている。
【０００３】
若い皮膚においては線維芽細胞の増殖は活発であり、線維芽細胞、コラーゲン等の皮膚組織の相互作用により水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、皮膚は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。
【０００４】
ところが、紫外線、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄等、ある種の外的因子の影響があったり、加齢が進んだりすると線維芽細胞の増殖が遅くなり皮膚等の保湿機能や弾力性が低下する。そして、皮膚は張りや艶を失い、荒れ、シワ等の老化症状を呈するようになる。
【０００５】
上記機構による皮膚の老化を防止・改善するために最も一般的に行われていることは、皮膚の表面の保護である。例えば、化粧水、クリーム、乳液等の保湿作用を有する外用剤を皮膚に塗布することによって、皮膚からの水分の蒸発が防止され、皮膚の水分量が保たれ、皮膚に潤いが与えられる。
【０００６】
しかしながら、このような外用剤は表皮の角質の状態を改善するだけのものであって、真皮内の張力保持機構まで改善することは期待できない。また、保湿剤は皮膚からの水分蒸発を遅くするものであるから、概して使用感が悪く、長期間使用すると皮膚障害を起こすことさえある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
そこで、本発明は、第一に、コラーゲン合成を行う線維芽細胞の増殖を促進させる作用を有する物質を見出し、それを有効成分とした線維芽細胞増殖作用剤を提供することを目的とする。
また、本発明は、第二に、コラーゲン合成を行う線維芽細胞の増殖を促進させることによって美肌作用または皮膚老化防止作用を発揮し得る美容用飲食品および皮膚化粧料を提供することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するために、本発明は、第一に、月桃の葉および／または茎からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする線維芽細胞増殖作用剤を提供し、第二に、月桃の葉および／または茎からの抽出物を含有することを特徴とする美容用飲食品および皮膚化粧料を提供する。
本発明の線維芽細胞増殖作用剤の好ましい実施形態において、前記抽出物は、抽出溶媒として極性溶媒を用いて得られる抽出物である。
また、本発明の線維芽細胞増殖作用剤の好ましい実施形態において、前記極性溶媒は、水、メタノール、エタノール、プロパノール、１,３−ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたはこれらの２種以上の混合物である。
【０００９】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００１０】
〔線維芽細胞増殖作用剤〕
本発明の線維芽細胞増殖作用剤は、月桃の葉および／または茎からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【００１１】
本発明の線維芽細胞増殖作用剤において、「抽出物」には、抽出処理によって抽出原料から得られる抽出液、該抽出液の希釈液もしくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、またはこれらの粗精製物もしくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１２】
本発明の線維芽細胞増殖作用剤において、抽出処理の際に抽出原料として使用するものは、月桃の地上部分、特に月桃の葉および／または茎である。
【００１３】
月桃は、ショウガ科のAlpinia属に属し、九州南部からインドにまで分布している多年生常緑草木である。従って、月桃はこれらの地域から容易に入手が可能である。月桃は、一般に、背高は約３ｍ、葉は楕円状披針形で長さ４０〜７０ｃｍ、幅は約１５ｃｍ、色は濃緑色である。月桃の葉は独特の芳香を有し、葉から精油を抽出してダニやカビ等の防虫、防黴剤として利用されたり、あるいは茎が繊維として利用されたりしている。月桃には、月桃（Alpinia nutans または Alpinia speciosa）、タイリン月桃(Alpinia urarensis Hay.)、フイリ月桃(Alpinia sanderae Sand.)、ヤクチ(Alpinia oxyphylla L.)、タイワン月桃(Alpinia sp.)等の種類が存在する。本発明の線維芽細胞増殖作用剤において、抽出原料として使用する月桃の種類、産地等は特に限定されないが、月桃（Alpinia nutansまたは Alpinia speciosa）を使用するのが好ましい。
【００１４】
本発明の線維芽細胞増殖作用剤において、抽出原料として使用する月桃の葉および／または茎は、予め乾燥粉砕または粗砕しておくことが好ましい。月桃の葉および／または茎は、採取後直ちに乾燥し粉砕したものが適当である。乾燥は、天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。
【００１５】
月桃の葉および／または茎は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施したしたものを抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、月桃の葉および／または茎の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１６】
本発明の線維芽細胞増殖作用剤において、抽出処理の際には、極性溶媒を抽出溶媒として使用するのが好ましい。月桃の葉および／または茎に含まれる線維芽細胞増殖作用を示す成分は未だ特定されていないが、その成分は極性溶媒を抽出溶媒とする抽出処理によって、月桃の葉および／または茎から容易に抽出することができる。
【００１７】
好適な極性溶媒の具体例としては、水、低級脂肪族アルコール、含水の低級脂肪族アルコール等を例示でき、これらを単独で、又はこれらの２種類以上を組み合わせて混合液として使用することができる。好適な低級脂肪族アルコールの具体例としては、メタノール、エタノール、プロパノール、１,３−ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール等を例示できる。
【００１８】
２種類以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合比を３：１〜１：９（重量比）とすることができる。
【００１９】
抽出溶媒としては、上記極性溶媒の中でも特に水を使用するのが好ましい。
抽出溶媒として使用し得る水には、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、加熱、殺菌、滅菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、抽出溶媒として使用し得る水には、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２０】
抽出処理は、月桃の葉および／または茎に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定されず、常法に従って行うことができる。抽出処理の際には、特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温ないし還流加熱下において任意の装置を使用することができる。
【００２１】
例えば、抽出溶媒を満たした処理槽に抽出原料を投入し、時々攪拌しながら可溶性成分を溶出させることができる。この際、抽出溶媒量は特に限定されず、抽出原料量等に応じて適宜調節し得るが、抽出原料100gに対して通常500〜2000mlである。また、抽出時間は通常１〜５時間であり、抽出温度は通常40〜90℃である。
【００２２】
抽出処理により可溶性成分を溶出させた後、ろ過して抽出残渣を除くことによって、抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。抽出液の乾燥物を得るに当たっては、吸湿性を改善するためにデキストリン、シクロデキストリン等のキャリアーを添加してもよい。
【００２３】
月桃の葉および／または茎からの抽出物は、特有の匂いと味を有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を行ってもよい。
【００２４】
以上のようにして得られる月桃の葉および／または茎からの抽出物は、線維芽細胞増殖作用を有する。
月桃の葉および／または茎からの抽出物が有する線維芽細胞増殖作用の作用機序は、現在までのところ判明していないが、この抽出物が線維芽細胞増殖作用を有することは後述する実施例から明らかであり、本発明の線維芽細胞増殖作用剤は、月桃の葉および／または茎からの抽出物が有する線維芽細胞増殖作用を利用したものである。
【００２５】
月桃の葉および／または茎からの抽出物は、そのままでも線維芽細胞増殖作用剤として使用することができるが、常法に従って製剤化して使用することもできる。製剤化する場合、保存や取扱いを容易にするために、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容され得るキャリアーその他任意の助剤を添加することができる。月桃の葉および／または茎からの抽出物は、製剤化により粉剤、錠剤等、任意の剤形とすることができる。
【００２６】
本発明の線維芽細胞増殖作用剤は、線維芽細胞の増殖を通じて、線維芽細胞によるコラーゲン、フィブロネクチン、ムコ多糖等の体内間質物質の産生量を増加させることができる。特に、本発明の線維芽細胞増殖作用剤は、線維芽細胞の増殖を通じてコラーゲンの産生量を増加させることにより美肌作用または皮膚老化防止作用を発揮することができる。従って、本発明の線維芽細胞増殖作用剤は、美容用飲食品や皮膚化粧料の原料として使用することができる。
【００２７】
月桃の葉および／または茎からの抽出物は、特有の匂いと味を有しているが、本発明の線維芽細胞増殖作用剤が美容用飲食品や皮膚化粧料の原料として使用される場合、一般的に大量に配合されるものではないから、脱色、脱臭等を行うことなく使用しても実用上支障はない。
【００２８】
〔美容用飲食品〕
本発明の美容用飲食品は、月桃の葉および／または茎からの抽出物を含有することを特徴とする。
ここで、「美容用飲食品」とは、美肌または皮膚の老化防止を図ることを目的とした飲食物を意味する。
【００２９】
月桃の葉および／または茎からの抽出物は、線維芽細胞の増殖を通じて美肌作用または皮膚老化防止作用を発揮し得るので、美容用飲食品に配合するのに好適である。本発明の美容用飲食品は、月桃の葉および／または茎からの抽出物を、その生理活性を妨げないような任意の飲食品に配合したものであってもよいし、月桃の葉および／または茎からの抽出物を主成分とする飲食品であってもよい。
【００３０】
月桃の葉および／または茎からの抽出物を配合して美容用飲食品を製造する際には、例えば、デキストリン、デンプン等の糖類；ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、アラビアゴム等の多糖類；大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類、等の任意の助剤を添加して、月桃の葉および／または茎からの抽出物を任意の剤形に製剤化することができる。
【００３１】
このように製剤化された月桃の葉および／または茎からの抽出物は、そのままでも美容用飲食品として使用することができるが、さらに任意の飲食品に添加することにより美容用飲食品を製造することもできる。
【００３２】
本発明の美容用飲食品における月桃の葉および／または茎からの抽出物の配合量は、月桃の葉および／または茎からの抽出物の摂取量が１日あたり約0.2〜500mg程度となるように調整することが好ましい。
【００３３】
月桃の葉および／または茎からの抽出物を添加し得る飲食品は特に限定されないが、その具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これら飲料の濃縮液および調製用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の氷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、シュウマイの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、天ぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂および油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；錠剤状、顆粒状等の種々の形態の健康・栄養補助食品類；その他スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物、等を例示できる。
【００３４】
〔皮膚化粧料〕
本発明の皮膚化粧料は、月桃の葉および／または茎からの抽出物を含有することを特徴とする。
月桃の葉および／または茎からの抽出物は、線維芽細胞の増殖を通じて美肌作用または皮膚老化防止作用を発揮し得るので、皮膚化粧料に配合するのに好適である。すなわち、月桃の葉および／または茎からの抽出物を皮膚から吸収させることにより、美肌または皮膚の老化防止に役立たせることができる。
【００３５】
月桃の葉および／または茎からの抽出物を配合し得る皮膚化粧料は特に限定されないが、その具体例としては、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック等を例示できる。
【００３６】
本発明の皮膚化粧料における月桃の葉および／または茎からの抽出物の配合量は、皮膚化粧料の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調整することができるが、好適な配合率は未精製の標準的な抽出物の乾燥物に換算して約0.01〜10重量％である。
【００３７】
本発明の皮膚化粧料には、線維芽細胞増殖作用の妨げにならない限り、皮膚化粧料の製造に通常使用される各種主剤、助剤等を配合することができ、月桃の葉および／または茎からの抽出物のみが主剤となるものに限られるわけではない。
【００３８】
本発明の皮膚化粧料において、月桃の葉および／または茎からの抽出物とともに構成成分として利用可能なものとしては、例えば、グリセリン、コラーゲン、ヒアルロン酸およびその塩、コンドロイチン酸およびその塩、キチン、キトサン等の保湿剤；パラジメチルアミノ安息香酸アミル等の紫外線吸収剤；グリセロリン脂質、スフィンゴリン脂質等の複合脂質；β−カロチン、油溶性甘草エキス、リコカルコンＡ、バイカリン、バイカレインその他の活性酸素消去作用を有する物質；アズレン、グリチルリチン酸およびその塩類、グリチルレチン酸およびその誘導体、酸化亜鉛等の抗炎症作用物質；リボフラビン、トコフェロール、アスコルビン酸、葉酸等のビタミンおよびその誘導体類；ホホバ油、ラノリン、流動パラフィン、スクワラン、イソステアリルアルコール等の油性成分；ステアリル硫酸ナトリウム、セチル硫酸ジエタノールアミン、ステアリン酸グリセリン等の界面活性剤；エリソルビン酸ナトリウム等の酸化防止剤；エチルパラベン等の防腐剤；オウバク抽出物、カミツレ抽出物、カンゾウ根抽出物、ローズマリー抽出物、マロニエ抽出物等のコレステロール類；植物ステロール類；リポプロテイン類；ビフィズス菌培養物、乳酸菌培養物、酵母抽出物、ブクリョウ抽出物等の微生物由来成分；褐藻抽出物、紅藻抽出物等の藻類抽出物；γ−オリザノール等の血行促進剤；硫黄等の抗脂漏剤；香料；アルコール；カルボキシポリマー等の増粘剤；チタンイエロー、ベニバナその他着色料等を例示できる。
【００３９】
以上に説明した本発明の線維芽細胞増殖作用剤、美容用飲食品および皮膚化粧料は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、本発明の作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用されてもよい。
【００４０】
【実施例】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００４１】
〔製造例１〕
抽出原料として月桃の葉および茎をそれぞれ粗砕機によって砕き、月桃の葉および茎の粗砕物それぞれ300gに、水、50％エタノール（水とエタノールとの重量比１：１）、メタノールおよび50％プロパノール（水とプロパノールとの重量比１：１）を各々2000ml加え、70℃に保温しながら３時間ゆるく攪拌した後、ろ紙を用いてろ過し、月桃の葉および茎からの抽出液を得た。この抽出液を40℃で減圧濃縮した後、減圧乾燥機で乾燥させ抽出乾燥物を得た。
各抽出原料および各抽出溶媒を用いて得られた抽出物の収率（重量％）は、以下の表１のとおりであった。
【００４２】

【００４３】
〔製造例２〕
製造例１で使用したものと同じ月桃の葉および茎それぞれ300gを、１,３−ブチレングリコールと水との混合液（重量比１：１）2000mlに投入し、攪拌しながら80℃で３時間保持した後、ろ過して、固形分濃度 4.2重量％の月桃葉抽出液、固形分濃度 3.2重量％の月桃茎抽出物を得た。
【００４４】
〔製造例３〕
抽出溶媒をグリセリンと水との混合液（重量比１：１）に変更した他は製造例２と同様にして、固形分濃度 3.6重量％の月桃葉抽出液、固形分濃度 2.8重量％の月桃茎抽出物を得た。
【００４５】
〔製造例４〕
抽出溶媒をプロピレングリコールと水との混合液（重量比１：１）に変更した他は製造例２と同様にして、固形分濃度 3.3重量％の月桃葉抽出液、固形分濃度 3.0重量％の月桃茎抽出物を得た。
【００４６】
〔試験例１〕
製造例１で得られた月桃の葉の50％エタノール抽出物、月桃の茎の50％エタノール抽出物について、その線維芽細胞増殖作用を多田ら（H.Tada et.al., J.Immunol.Methods 93,157,1986）のMTT法を用いて試験した。
試験方法は以下のとおりである。
【００４７】
（１）ヒト正常新生児皮膚線維芽細胞（NB1RGB）１×10⁶個を、10％FBSを含有するMEM-α-Medium（GIBCO製）培養液（pH 7.2）を含む25cm²フラスコ中で、37℃、５％二酸化炭素下で４日間前培養した。前培養後、トリプシン処理により細胞を回収し、５％FBSを含有するMEM-α-Medium培養液を用いて96ウェルマイクロプレートに７×10³細胞／100μl／ウェルずつ分注し、37℃、５％二酸化炭素下で一夜培養した。
【００４８】
（２）５％FBSを含有するMEM-α-Medium培養液に、製造例１で得られた月桃の葉の50％エタノール抽出物（試料ａ）または月桃の茎の50％エタノール抽出物（試料ｂ）を各種濃度（100ppm、50ppm）で溶解し、上記（１）で得られたマイクロプレートの各ウェルに100μlずつ添加した後、37℃、５％二酸化炭素下で３日間培養した。各ウェルから培養液を100μlずつ除去した後、各ウェルにMTT試薬（3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H tetrazolium bromide）（同仁化学製）（5mg/ml）を20μl添加し、4.5時間インキュベーションした。インキュベーション後、10％SDS（ラウリル硫酸ナトリウム）（和光純薬製）を溶解した0.01N 塩酸溶液 100μlを各ウェルに添加し、37℃で一晩インキュベーションした。インキュベーション後、マイクロプレートリーダーを用いて650nmにおける吸光度を対照として570nmにおける吸光度を測定した。そして、570nmにおける吸光度から650nmにおける吸光度を差し引くことにより、試料ａおよび試料ｂについて、試料反応時の吸光度（570nm-650nm）を得た。
【００４９】
（３）上記（１）で得られたマイクロプレートの各ウェルに、MTT試薬を加えることなく、上記（２）と同様の操作を行い、650nmにおける吸光度を対照として570nmにおける吸光度を測定した。そして、570nmにおける吸光度から650nmにおける吸光度を差し引くことにより、試料無反応時の吸光度(570nm-650nm)を得た。
【００５０】
（４）上記（１）で得られたマイクロプレートの各ウェルに、試料ａおよび試料ｂを加えることなく、上記（２）と同様の操作を行い、650nmにおける吸光度を対照として570nmにおける吸光度を測定した。そして、570nmにおける吸光度から650nmにおける吸光度を差し引くことにより、対照反応時の吸光度(570nm-650nm)を得た。
【００５１】
（５）上記（１）で得られたマイクロプレートのウェルに、試料ａ、試料ｂおよびMTT試薬を加えることなく、上記（２）と同様の操作を行い、650nmにおける吸光度を対照として570nmにおける吸光度を測定した。そして、570nmにおける吸光度から650nmにおける吸光度を差し引くことにより、対照無反応時の吸光度(570nm-650nm)を得た。
【００５２】
（６）次式に基づいて、試料ａおよび試料ｂについて線維芽細胞の増加率（％）を求め、試料ａおよび試料ｂの線維芽細胞に対する増殖作用を評価した。
【００５３】
【式１】
増加率（％）＝[｛（Ａ−Ｃ）−（Ｂ−Ｄ）｝／（Ｂ−Ｄ）]×１００
【００５４】
上記式において、Ａは試料反応時の吸光度(570nm-650nm)、Ｂは対照反応時の吸光度(570nm-650nm)、Ｃは試料無反応時の吸光度(570nm-650nm)、Ｄは対照無反応時の吸光度(570nm-650nm)を表す。
【００５５】
試料ａおよび試料ｂの線維芽細胞の増加率（％）は、以下の表２に示すとおりであった。なお、表２には、線維芽細胞の増加率（％）を平均±S.D（ｎ＝７）で示す。また、表２中、「^**」は p＜0.0001、「^*」はp＜0.05を意味する。
【００５６】

【００５７】
表２に示すように、試料ａおよび試料ｂはともに、線維芽細胞に対する増殖作用を示した。これによって、月桃の葉からの抽出物および月桃の茎からの抽出物が、線維芽細胞増殖作用を有することが示された。
【００５８】
〔試験例２〕
（１）乳液の製造
製造例１で得られた月桃の葉の50％エタノール抽出物を配合した下記の組成の乳液を常法に従い製造した。
月桃の葉の50％エタノール抽出物（製造例１） 1.0g
セチルアルコール 0.5g
ミツロウ 2.0g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（10E.O） 1.0g
モノステアリン酸グリセリル 1.0g
ヒアルロン酸 0.1g
プロピレングリコール 5.0g
エタノール 3.0g
パラオキシ安息香酸メチル 0.3g
香料 0.03g
精製水残部（全量を100mlとする）
【００５９】
（２）乳液の評価
上記（１）で得られた乳液ａおよび月桃抽出物を含まない他は乳液ａと同様の組成の乳液ｂについて、以下の評価試験を行った。
24〜43歳の女性多数の中から、以下の表３に示す評価基準で評点１または２に当たる「肌荒れ」と判定された者 20名を選抜して被験者とした。各被験者に、顔の右半分に乳液ａを、顔の左半分に乳液ｂを、朝夕各１回、30日間塗布した。
【００６０】
〔判定１：肌荒れ改善効果〕
塗布試験終了後、シルフロ（FLEXICL DEVELOPMENTS LTD製）によるレプリカ法を用いて顔の肌のレプリカをとり、50倍の顕微鏡で皮紋の状態および角質剥離状態を観察し、以下の評価基準で肌の状態を判定した。
【００６１】

【００６２】
肌の状態の判定結果は以下の表４に示すとおりであった。
【００６３】

【００６４】
表４に示すように、乳液ａを塗布した場合には乳液ｂを塗布した場合よりも顕著に肌荒れが改善された。これによって、月桃の葉の50％エタノール抽出物が美肌作用または皮膚老化防止作用を有することが示された。
【００６５】
〔判定２：官能評価〕
使用感と肌への効果について、乳液ａと乳液ｂとを比較した場合の優劣を被験者に質問した。回答結果は以下の表５に示すとおりであった。
【００６６】

【００６７】
表５に示すように、乳液ａを塗布した場合には乳液ｂを塗布した場合よりも使用者に優れた使用感を与えるとともに優れた美肌効果または皮膚老化防止効果をも与えることが示された。
【００６８】
〔配合例１〕
製造例１で得られた月桃の葉の水抽出物を用いて、下記の組成の清涼飲料を常法により製造した。
液糖 12.0g
レモン果汁 1.0g
サイクロデキストリン 0.01g
レモンフレーバー 0.05g
月桃の葉の水抽出物（製造例１） 0.1g
精製水残部（全量を100gとする）
【００６９】
〔配合例２〕
製造例１で得られた月桃の葉の50％エタノール抽出物を用いて、以下の組成のチューインガムを常法により製造した。
ガムベース 20g
砂糖 55g
果糖 15g
水飴 20g
香料 0.5g
月桃の葉の50％エタノール抽出物（製造例１） 0.5g
【００７０】
〔配合例３〕
製造例１で得られた月桃の茎の50％エタノール抽出物を用いて、以下の組成の錠剤を常法により製造した。
月桃の茎の50％エタノール抽出物（製造例１） 50mg
粉糖（ショ糖） 188mg
グリセリン脂肪酸エステル 12mg
【００７１】
〔配合例４〕
製造例１で得られた月桃の茎の水抽出物を用いて、以下の組成の顆粒を常法により製造した。
月桃の茎の水抽出物 34mg
ビートオリゴ糖 1000mg
難消化性デキストリン 289mg
ビタミンＣ 167mg
ステビア抽出物 10mg
【００７２】
〔配合例５〕
製造例１で得られた月桃の葉の50％エタノール抽出物および製造例３で得られた月桃の葉の50％グリセリン抽出物を用いて、以下の組成の乳液を常法により製造した。
ホホバオイル 4.0g
オリーブオイル 2.0g
スクワラン 2.0g
セタノール 2.0g
モノステアリン酸グリセリル 2.0g
ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.0) 2.5g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) 2.0g
１,３−ブチレングリコール 3.0g
パラオキシ安息香酸メチル 0.15g
香料 0.05g
月桃の葉の50％エタノール抽出物（製造例１） 0.1g
月桃の葉の50％グリセリン抽出物（製造例３） 1.0g
精製水残部（全量を100gとする）
【００７３】
〔配合例６〕
製造例１で得られた月桃の葉の水抽出物および製造例３で得られた月桃の茎の50％グリセリン抽出物を用いて、下記の組成の化粧水を常法により製造した。
グリセリン 3.0g
１,３−ブチレングリコール 3.0g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.0） 0.5g
パラオキシ安息香酸メチル 0.15g
クエン酸 0.1g
クエン酸ソーダ 1.0g
香料 0.05g
月桃の葉の水抽出物（製造例１） 0.2g
月桃の茎の50％グリセリン抽出物（製造例３） 2.0g
精製水残部（全量を100gとする）
【００７４】
〔配合例７〕
製造例１で得られた月桃の葉の50％エタノール抽出物および製造例２で得られた月桃の葉の50％ 1,3-ブチレングリコール抽出物を用いて、下記の組成のクリームを常法により製造した。
流動パラフィン 5.0g
サラシミツロウ 4.0g
セタノール 3.0g
スクワラン 10.0g
ラノリン 2.0g
ステアリン酸 1.0g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.0） 1.5g
モノステアリン酸グリセリル 3.0g
１,３−ブチレングリコール 6.0g
パラオキシ安息香酸メチル 1.5g
香料 0.1g
月桃の葉の50％エタノール抽出物（製造例１） 0.1g
月桃の葉の50％1,3-ブチレングリコール抽出物（製造例２） 1.0g
精製水残部（全量を100gとする）
【００７５】
〔配合例８〕
製造例４で得られた月桃の葉の50％プロピレングリコール抽出物を用いて、下記の組成のパックを常法により製造した。
ポリビニルアルコール 15g
ポリエチレングリコール 3g
プロピレングリコール 7g
エタノール 10g
パラオキシ安息香酸エチル 0.05g
香料 0.05g
月桃の葉の50％プロピレングリコール抽出物（製造例４） 5g
精製水残部（全量を100gとする）
【００７６】
〔配合例９〕
製造例１で得られた月桃の葉および茎の50％エタノール抽出物を用いて、下記の組成の混合物を調製し、該混合物を顆粒状に形成して健康・栄養補助食品を製造した。
月桃の葉および茎の50％エタノール抽出物（製造例１） 30重量部
ハス胚芽抽出物 200重量部
真珠蛋白加水分解物（各種アミノ酸、ペプチドを含む） 15重量部
シルク蛋白加水分解物（各種アミノ酸、ペプチドを含む） 15重量部
大豆イソフラボン 10重量部
赤ワインエキスパウダー（プロシアニジンを含む） 30重量部
酵母エキス（グルタチオン、核酸、アミノ酸、ビタミンを含む） 10重量部
ザクロ種子抽出物 10重量部
小麦胚芽抽出物（ビタミン、クロム、セレン、モリブデンを含む） 10重量部
ＤＨＡ 30重量部
ビートオリゴ糖 1060重量部
ステビア抽出物 10重量部
【００７７】
〔配合例１０〕
製造例１で得られた月桃の葉および茎の水抽出物を用いて、下記の組成の混合物を調整し、該混合物をゼラチンカプセル化して錠剤状健康・栄養補助食品を製造した。
月桃の葉および茎の水抽出物（製造例１） 25重量部
ハス胚芽抽出物 20重量部
セラミド 25重量部
リン脂質（レシチン） 10重量部
ビタミンＥ（トコフェロール） 17重量部
マルチカロチン（αおよびβカロチン、ルテイン、リコペン） 10重量部
オクタコサノール 1重量部
植物ステロール 5重量部
シソの実油（αリノレン酸を含む） 20重量部
精製魚油（ＤＨＡ、ＥＰＡを含む） 20重量部
ごま油（リグナン化合物を含む） 20重量部
オリーブ油 10重量部
大豆、菜種混合油 62重量部
グリセリン脂肪酸エステル 12重量部
【００７８】
〔配合例１１〕
製造例３で得られた月桃の葉および茎の50％グリセリン抽出物を用いて、以下の組成の清涼飲料水を常法により製造した。
月桃の葉および茎の50％グリセリン抽出物（製造例３） 1重量部
ハス胚芽抽出物 1重量部
ローヤルゼリー 3重量部
水溶性コラーゲン 8重量部
ハトムギエキス 1重量部
高麗ニンジンエキス（サポニンを含む） 1重量部
プラセンタ（胎盤）エキス 1重量部
プエラリアエキス（フラボノイドを含む） 1重量部
パープルヤムエキス 1重量部
オリゴ糖 5重量部
ショ糖 10重量部
プルーン果汁 2重量部
ザクロ果汁 5重量部
グレープフルーツ果汁 10重量部
ビタミンＣ 1重量部
グレープフルーツフレーバー 0.7重量部
水残部（全量を100重量部とする）
【００７９】
〔配合例１２〕
製造例１で得られた月桃の葉および茎の50％エタノール抽出物を用いて、下記の組成のキャンディーを常法により製造した。
月桃の葉および茎の50％エタノール抽出物（製造例１） 5重量部
ハス胚芽抽出物 2重量部
水あめ 30重量部
甘草エキス 3重量部
甜茶エキス 1重量部
ブルーベリーエキス（アントシアニンを含む） 1重量部
緑茶エキス（植物ポリフェノールを含む） 3重量部
ストロベリー１／５濃縮果汁 1重量部
赤キャベツ色素 0.05重量部
レモン果汁 0.5重量部
水 5重量部
【００８０】
【発明の効果】
本発明によれば、線維芽細胞を増殖させることができる線維芽細胞増殖作用剤、並びに線維芽細胞の増殖を通じて美肌または皮膚の老化防止を図ることのできる美容用飲食品および皮膚化粧料が提供される。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a fibroblast proliferating agent containing an extract from a plant as an active ingredient, and a cosmetic food and drink and a skin cosmetic containing an extract from a plant.
[0002]
[Prior art]
The epidermis and dermis of the skin are composed of epidermal cells, fibroblasts, and an extracellular matrix such as collagen that is outside these cells and supports the skin structure.
[0003]
In young skin, fibroblasts are actively proliferating, and skin retention such as fibroblasts and collagen ensures moisture retention, flexibility, elasticity, etc. It is kept fresh and fresh.
[0004]
However, the growth of fibroblasts slows down due to the influence of certain external factors such as ultraviolet rays, significant drying of the air, excessive skin washing, etc. descend. And the skin loses its tension and gloss, and exhibits aging symptoms such as roughness and wrinkles.
[0005]
The most common method for preventing and improving skin aging by the above mechanism is protecting the surface of the skin. For example, by applying an external preparation having a moisturizing action such as skin lotion, cream, milky lotion, etc. to the skin, the evaporation of moisture from the skin is prevented, the moisture content of the skin is maintained, and the skin is moistened.
[0006]
However, such an external preparation only improves the keratinous state of the epidermis, and cannot be expected to improve the tension holding mechanism in the dermis. In addition, since the moisturizing agent slows the evaporation of moisture from the skin, it generally has a poor feeling of use and may even cause skin damage when used for a long time.
[0007]
[Problems to be solved by the invention]
In view of this, the first object of the present invention is to find a substance having an action of promoting the proliferation of fibroblasts that synthesize collagen, and to provide a fibroblast proliferation agent containing the substance as an active ingredient.
Another object of the present invention is to provide a cosmetic food and drink and a skin cosmetic that can exert a beautifying action or an anti-skin aging action by promoting the proliferation of fibroblasts that synthesize collagen. To do.
[0008]
[Means for Solving the Problems]
In order to achieve the above object, the present invention first provides a fibroblast proliferating agent characterized by containing an extract from moon peach leaves and / or stems as an active ingredient. Secondly, the present invention provides a cosmetic food and drink and a skin cosmetic characterized by containing an extract from moon peach leaves and / or stems.
In a preferred embodiment of the fibroblast proliferation agent of the present invention, the extract is an extract obtained using a polar solvent as an extraction solvent.
Moreover, in a preferred embodiment of the fibroblast proliferation agent of the present invention, the polar solvent is water, methanol, ethanol, propanol, 1,3-butylene glycol, glycerin, propylene glycol, or a mixture of two or more thereof. is there.
[0009]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
[0010]
[Fibroblast proliferating agent]
The fibroblast proliferating agent of the present invention is characterized by containing an extract from moon peach leaves and / or stems as an active ingredient.
[0011]
In the agent for proliferation of fibroblasts of the present invention, the “extract” includes an extract obtained from an extraction raw material by an extraction process, a diluted or concentrated solution of the extract, and a dried product obtained by drying the extract. Or any of these crude or purified products.
[0012]
In the agent for proliferating fibroblasts of the present invention, the material used as an extraction raw material in the extraction treatment is the above-ground part of moon peach, particularly the moon peach leaf and / or stem.
[0013]
Moon peach is a perennial evergreen plant that belongs to the genus Alpinia in the ginger family and is distributed from southern Kyushu to India. Therefore, moon peach is easily available from these areas. Moon peaches generally have a height of about 3 m, leaves have an elliptical needle shape, a length of 40 to 70 cm, a width of about 15 cm, and a dark green color. Moon peach leaves have a unique fragrance, and essential oils are extracted from the leaves and used as insect repellents and fungicides such as mites and molds, or stems are used as fibers. Moon peaches include moon peaches (Alpinia nutans or Alpinia speciosa), tyrin peaches (Alpinia urarensis Hay.), Fili tsuki peaches (Alpinia sanderae Sand.), Yakchi (Alpinia oxyphylla L.), taiwan peaches (Alpinia sp. ) Etc. exist. In the fibroblast proliferating agent of the present invention, the type and production area of moon peach used as an extraction raw material is not particularly limited, but it is preferable to use moon peach (Alpinia nutans or Alpinia speciosa).
[0014]
In the fibroblast proliferation agent of the present invention, the moon peach leaf and / or stem used as an extraction raw material is preferably dried or crushed in advance. Moon peach leaves and / or stems are suitably dried and ground immediately after collection. Drying may be performed in the sun or may be performed using a commonly used dryer.
[0015]
Moon peach leaves and / or stems that have been pretreated such as defatted with a nonpolar solvent such as hexane or benzene may be used as the raw material for extraction. By performing pretreatment such as degreasing, extraction treatment with a polar solvent of moon peach leaves and / or stems can be performed efficiently.
[0016]
In the fibroblast proliferation agent of the present invention, it is preferable to use a polar solvent as the extraction solvent during the extraction treatment. The component showing the fibroblast proliferation activity contained in the moon peach leaves and / or stems has not yet been identified, but the components are extracted from the moon peach leaves and / or stems by an extraction treatment using a polar solvent as an extraction solvent. It can be easily extracted.
[0017]
Specific examples of suitable polar solvents include water, lower aliphatic alcohols, water-containing lower aliphatic alcohols, and the like, and these can be used alone or in combination of two or more thereof as a mixed solution. . Specific examples of suitable lower aliphatic alcohols include methanol, ethanol, propanol, 1,3-butylene glycol, glycerin, propylene glycol and the like.
[0018]
When using the liquid mixture of 2 or more types of polar solvents as an extraction solvent, the mixing ratio can be adjusted suitably. For example, when using the liquid mixture of water and a lower aliphatic alcohol, the mixing ratio of water and a lower aliphatic alcohol can be set to 3: 1 to 1: 9 (weight ratio).
[0019]
As the extraction solvent, it is particularly preferable to use water among the polar solvents.
Water that can be used as the extraction solvent includes pure water, tap water, well water, mineral spring water, mineral water, hot spring water, spring water, fresh water, and the like, as well as those subjected to various treatments. Examples of the treatment applied to water include heating, sterilization, sterilization, filtration, ion exchange, adjustment of osmotic pressure, buffering, and the like. Accordingly, the water that can be used as the extraction solvent includes hot water, ion-exchanged water, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline, and the like.
[0020]
The extraction treatment is not particularly limited as long as the soluble components contained in moon peach leaves and / or stems can be eluted in the extraction solvent, and can be performed according to a conventional method. In the extraction process, it is not necessary to adopt a special extraction method, and any apparatus can be used at room temperature or under reflux heating.
[0021]
For example, the extraction raw material can be put into a treatment tank filled with the extraction solvent, and the soluble components can be eluted with occasional stirring. At this time, the amount of the extraction solvent is not particularly limited and can be appropriately adjusted according to the amount of the extraction raw material, but is usually 500 to 2000 ml with respect to 100 g of the extraction raw material. Moreover, extraction time is 1 to 5 hours normally, and extraction temperature is 40 to 90 degreeC normally.
[0022]
An eluate can be obtained by eluting soluble components by extraction and then filtering to remove the extraction residue. The obtained extract is diluted, concentrated, dried, purified, etc. according to a conventional method in order to obtain a diluted or concentrated solution of the extract, a dried product of the extract, or a crude purified product or a purified product thereof. Processing may be performed. In obtaining a dried extract, a carrier such as dextrin or cyclodextrin may be added to improve hygroscopicity.
[0023]
Since extracts from moon peach leaves and / or stems have a characteristic odor and taste, decolorization, deodorization, and the like may be performed within a range that does not cause a decrease in physiological activity.
[0024]
The extract from moon peach leaves and / or stems obtained as described above has a fibroblast proliferation action.
The mechanism of action of fibroblast proliferation possessed by extracts from moon peach leaves and / or stems has not been clarified so far, but it will be described later that this extract has fibroblast proliferation action. As is apparent from the Examples, the agent for proliferating fibroblasts of the present invention utilizes the proliferating action of fibroblasts possessed by extracts from moon peach leaves and / or stems.
[0025]
Extracts from the leaves and / or stems of moon peach can be used as they are as a fibroblast proliferating agent, but can also be formulated and used according to conventional methods. In the case of formulating, a pharmaceutically acceptable carrier such as dextrin and cyclodextrin and other optional auxiliaries can be added to facilitate storage and handling. Extracts from moon peach leaves and / or stems can be made into any dosage form such as powders and tablets by formulation.
[0026]
The agent for proliferation of fibroblasts of the present invention can increase the production of interstitial substances such as collagen, fibronectin, mucopolysaccharide and the like by fibroblasts through the proliferation of fibroblasts. In particular, the agent for proliferating fibroblasts of the present invention can exert a skin beautifying action or an action for preventing skin aging by increasing the amount of collagen produced through the proliferation of fibroblasts. Therefore, the fibroblast proliferation agent of the present invention can be used as a raw material for cosmetic foods and skin cosmetics.
[0027]
Extracts from moon peach leaves and / or stems have a characteristic odor and taste, but the fibroblast proliferation agent of the present invention is used as a raw material for cosmetic foods and skin cosmetics. In this case, since it is not generally blended in a large amount, there is no practical problem even if it is used without decoloring, deodorizing and the like.
[0028]
[Beauty food and drink]
The cosmetic food and drink of the present invention is characterized by containing an extract from the leaves and / or stems of moon peach.
Here, “beauty food and drink” means food and drink intended to prevent skin aging or skin aging.
[0029]
Extracts from moon peach leaves and / or stems are suitable for blending into cosmetic foods and beverages because they can exert a beautifying effect or an anti-skin aging effect through the proliferation of fibroblasts. The cosmetic food and drink of the present invention may be a product obtained by blending an extract from moon peach leaves and / or stems with any food or drink that does not interfere with its physiological activity. It may also be a food or drink mainly comprising an extract from the stem.
[0030]
When producing cosmetic foods and drinks by blending extracts from moon peach leaves and / or stems, for example, sugars such as dextrin and starch; proteins such as gelatin, soy protein and corn protein; alanine and glutamine Extraction from leaves and / or stems of moon peach with the addition of any auxiliary such as polysaccharides such as cellulose and gum arabic; oils and fats such as soybean oil and medium chain fatty acid triglycerides The product can be formulated into any dosage form.
[0031]
The extract from the moon peach leaves and / or stems formulated in this way can be used as it is as a cosmetic food or drink, but it can be added to any food or drink to obtain a cosmetic food or drink. It can also be manufactured.
[0032]
The amount of the extract from the moon peach leaf and / or stem in the cosmetic food and drink of the present invention is such that the intake of the extract from the moon peach leaf and / or stem is about 0.2 to 500 mg per day. It is preferable to adjust so that it becomes.
[0033]
Foods and drinks to which extracts from moon peach leaves and / or stems can be added are not particularly limited, and specific examples thereof include beverages such as soft drinks, carbonated drinks, nutritional drinks, fruit drinks, and lactic acid drinks (these drinks Ice cream, ice sherbet, shaved ice, etc .; noodles such as buckwheat, udon, harusame, gyoza skin, shumai skin, Chinese noodles, instant noodles; candy, candy, gum , Chocolate, snack confectionery, biscuits, jelly, jam, cream, baked confectionery, etc .; fishery and livestock processed foods such as kamaboko, ham, sausage; dairy products such as processed milk, fermented milk; salad oil, tempura oil, margarine, Oils and processed foods such as mayonnaise, shortening, whipped cream, dressing; seasonings such as sauces and sauces; tablets, condyles Health-dietary supplement such various forms, such as Jo; other soups, stews, salads, prepared foods, pickles, and the like.
[0034]
[Skin cosmetic]
The skin cosmetic of the present invention is characterized by containing an extract from moon peach leaves and / or stems.
Extracts from moon peach leaves and / or stems are suitable for blending into skin cosmetics because they can exert a beautifying effect or an anti-skin aging effect through the proliferation of fibroblasts. That is, by extracting the extract from the leaves and / or stems of moon peach from the skin, it can be used for preventing skin aging or skin aging.
[0035]
Although the skin cosmetics which can mix | blend the extract from a moon peach leaf and / or a stem are not specifically limited, As the specific example, an ointment, cream, milky lotion, a pack, etc. can be illustrated.
[0036]
The blending amount of the extract from the moon peach leaf and / or stem in the skin cosmetic of the present invention can be adjusted as appropriate depending on the type of skin cosmetic and the physiological activity of the extract. About 0.01 to 10% by weight in terms of dry product of unpurified standard extract.
[0037]
The skin cosmetic of the present invention can be blended with various main agents, auxiliaries and the like that are usually used in the production of skin cosmetics, as long as it does not interfere with the action of proliferating fibroblasts. It is not limited to the one that only the extract from the stem is the main ingredient.
[0038]
Examples of the skin cosmetic composition of the present invention that can be used as constituents together with extracts from moon peach leaves and / or stems include, for example, glycerin, collagen, hyaluronic acid and salts thereof, chondroitinic acid and salts thereof, and chitin. Moisturizing agents such as chitosan, UV absorbers such as amyl paradimethylaminobenzoate, complex lipids such as glycerophospholipid and sphingophospholipid, β-carotene, oil-soluble licorice extract, lycochalcone A, baicalin, baicalein and other active oxygen scavengers Substances with action; Azulene, glycyrrhizic acid and its salts, glycyrrhetinic acid and its derivatives, anti-inflammatory substances such as zinc oxide; Riboflavin, tocopherol, ascorbic acid, folic acid and other vitamins and their derivatives; jojoba oil, lanolin, fluid Paraffin, squaller Oily components such as isostearyl alcohol; surfactants such as sodium stearyl sulfate, diethanolamine cetyl sulfate, glycerin stearate; antioxidants such as sodium erythorbate; preservatives such as ethyl paraben; agaric extract, chamomile extract, Cholesterols such as licorice root extract, rosemary extract, and maronier extract; plant sterols; lipoproteins; microorganism-derived components such as bifidobacteria cultures, lactic acid bacteria cultures, yeast extracts, and horse chestnut extracts; brown algae extraction Extract, red alga extract, etc .; blood circulation promoter such as γ-oryzanol; anti-seborrheic agent such as sulfur; fragrance; alcohol; thickener such as carboxy polymer; titanium yellow, safflower and other colorants It can be illustrated.
[0039]
The fibroblast proliferation-acting agent, cosmetic food and drink, and skin cosmetic of the present invention described above are preferably applied to humans, but as long as the effects of the present invention are exhibited, humans It may be applied to other animals.
[0040]
【Example】
EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples. However, the scope of the present invention is not limited to these examples.
[0041]
[Production Example 1]
As the raw material for extraction, the leaves and stems of moon peach were crushed by a crusher, respectively, and 300 g of crushed material of moon peach leaves and stems were mixed with water, 50% ethanol (weight ratio of water to ethanol 1: 1), methanol and 50 Add 2000 ml of% propanol (weight ratio of water to propanol 1: 1) and stir gently for 3 hours while keeping the temperature at 70 ° C., then filter using filter paper and extract extract from leaves and stems of moon peach Obtained. The extract was concentrated under reduced pressure at 40 ° C. and then dried with a vacuum dryer to obtain a dried extract.
The yield (% by weight) of the extract obtained using each extraction raw material and each extraction solvent was as shown in Table 1 below.
[0042]

[0043]
[Production Example 2]
300 g of the same peach leaves and stems as used in Production Example 1 were introduced into 2000 ml of a mixture of 1,3-butylene glycol and water (weight ratio 1: 1) and stirred at 80 ° C. for 3 hours. After holding for a period of time, the mixture was filtered to obtain a moon peach extract with a solid content of 4.2% by weight and a moon peach extract with a solids concentration of 3.2% by weight.
[0044]
[Production Example 3]
Except for changing the extraction solvent to a mixture of glycerin and water (weight ratio 1: 1), in the same manner as in Production Example 2, a monthly peach leaf extract with a solid content of 3.6% by weight, a month with a solids concentration of 2.8% by weight A peach stem extract was obtained.
[0045]
[Production Example 4]
Except that the extraction solvent was changed to a mixture of propylene glycol and water (weight ratio 1: 1), the same procedure as in Production Example 2 was carried out, and a moon peach leaf extract with a solid content of 3.3% by weight and a solid content of 3.0% by weight Moon peach stem extract was obtained.
[0046]
[Test Example 1]
The fibroblast proliferation activity of the 50% ethanol extract of moon peach leaves and the 50% ethanol extract of moon peach stems obtained in Production Example 1 was demonstrated by Tada et al. (H. Tada et.al., J. Immunol. Methods 93, 157, 1986).
The test method is as follows.
[0047]
(1) Human normal neonatal skin fibroblasts (NB1RGB) 1 × 10 ⁶ 25cm containing MEM-α-Medium (GIBCO) culture solution (pH 7.2) containing 10% FBS ² The cells were precultured in a flask at 37 ° C. and 5% carbon dioxide for 4 days. After pre-culture, cells were collected by trypsin treatment and 7 × 10 7 in a 96-well microplate using MEM-α-Medium culture medium containing 5% FBS. ^Three Cells / 100 μl / well were dispensed and cultured overnight at 37 ° C. under 5% carbon dioxide.
[0048]
(2) 50% ethanol extract of moon peach leaf obtained in Production Example 1 (sample a) or 50% ethanol extract of moon peach stem in MEM-α-Medium culture solution containing 5% FBS (Sample b) was dissolved at various concentrations (100 ppm, 50 ppm), 100 μl was added to each well of the microplate obtained in (1) above, and then cultured at 37 ° C. under 5% carbon dioxide for 3 days. After removing 100 μl of the culture solution from each well, MTT reagent (3- (4,5-Dimethyl-2-thiazolyl) -2,5-diphenyl-2H tetrazolium bromide) (manufactured by Dojindo) (5 mg / ml) was added and incubated for 4.5 hours. After incubation, 100 μl of 0.01N hydrochloric acid solution in which 10% SDS (sodium lauryl sulfate) (manufactured by Wako Pure Chemical Industries) was dissolved was added to each well and incubated at 37 ° C. overnight. After the incubation, the absorbance at 570 nm was measured using a microplate reader with the absorbance at 650 nm as a control. Then, by subtracting the absorbance at 650 nm from the absorbance at 570 nm, the absorbance during sample reaction (570 nm-650 nm) was obtained for sample a and sample b.
[0049]
(3) The same operation as in (2) above was performed without adding the MTT reagent to each well of the microplate obtained in (1) above, and the absorbance at 570 nm was measured using the absorbance at 650 nm as a control. Then, the absorbance at 570 nm (570 nm-650 nm) was obtained by subtracting the absorbance at 650 nm from the absorbance at 570 nm.
[0050]
(4) Perform the same operation as in (2) above without adding sample a and sample b to each well of the microplate obtained in (1) above, and measure the absorbance at 570 nm using the absorbance at 650 nm as a control. did. Then, the absorbance at 570 nm (570 nm-650 nm) was obtained by subtracting the absorbance at 650 nm from the absorbance at 570 nm.
[0051]
(5) The same operation as in (2) above was performed without adding sample a, sample b and MTT reagent to the wells of the microplate obtained in (1) above, and the absorbance at 570 nm was measured using the absorbance at 650 nm as a control. Was measured. Then, by subtracting the absorbance at 650 nm from the absorbance at 570 nm, the absorbance at the time of no control reaction (570 nm-650 nm) was obtained.
[0052]
(6) Based on the following formula, the increase rate (%) of fibroblasts was determined for sample a and sample b, and the proliferation effect of sample a and sample b on fibroblasts was evaluated.
[0053]
[Formula 1]
Increase rate (%) = [{(AC) − (BD)} / (BD)] × 100
[0054]
In the above formula, A is the absorbance at the time of sample reaction (570 nm-650 nm), B is the absorbance at the time of control reaction (570 nm-650 nm), C is the absorbance at the time of no sample reaction (570 nm-650 nm), and D is at the time of no control reaction. The light absorbency (570nm-650nm) is shown.
[0055]
The increase rate (%) of fibroblasts of sample a and sample b was as shown in Table 2 below. In Table 2, the increase rate (%) of fibroblasts is shown as mean ± SD (n = 7). In Table 2, “ ^** Is p <0.0001, ^* "Means p <0.05.
[0056]

[0057]
As shown in Table 2, both sample a and sample b showed a proliferative effect on fibroblasts. Thereby, it was shown that the extract from the moon peach leaf and the extract from the moon peach stalk have a fibroblast proliferation action.
[0058]
[Test Example 2]
(1) Production of emulsion
A milky lotion having the following composition containing 50% ethanol extract of moon peach leaves obtained in Production Example 1 was produced according to a conventional method.
Moon peach leaf 50% ethanol extract (Production Example 1) 1.0g
Cetyl alcohol 0.5g
Beeswax 2.0g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (10E.O) 1.0g
Glyceryl monostearate 1.0g
Hyaluronic acid 0.1g
Propylene glycol 5.0g
Ethanol 3.0g
Methyl paraoxybenzoate 0.3g
Perfume 0.03g
Purified water remainder (total volume is 100 ml)
[0059]
(2) Evaluation of emulsion
The following evaluation test was performed on the emulsion b having the same composition as the emulsion a except that the emulsion a and the moon peach extract obtained in the above (1) were not included.
Among many women aged 24 to 43, 20 subjects who were judged as “rough skin” corresponding to grade 1 or 2 according to the evaluation criteria shown in Table 3 below were selected as subjects. For each subject, latex a was applied to the right half of the face and latex b was applied to the left half of the face once every morning and evening for 30 days.
[0060]
[Judgment 1: Effect of improving rough skin]
After the application test is completed, a replica of the skin of the face is taken using the replica method by Silfro (manufactured by FLEXICL DEVELOPMENTS LTD). The state was judged.
[0061]

[0062]
The determination result of the skin condition was as shown in Table 4 below.
[0063]

[0064]
As shown in Table 4, when the emulsion a was applied, the rough skin was remarkably improved as compared with the case where the emulsion b was applied. Thus, it was shown that a 50% ethanol extract of moon peach leaves has a skin beautifying effect or a skin aging preventing effect.
[0065]
[Judgment 2: Sensory evaluation]
About the feeling of use and the effect on the skin, the subject was asked about superiority or inferiority when comparing the emulsion a and the emulsion b. The answer results are as shown in Table 5 below.
[0066]

[0067]
As shown in Table 5, it was shown that when the emulsion a was applied, the user was given a superior feeling of use than when the emulsion b was applied, and also had an excellent skin beautifying effect or skin aging prevention effect. .
[0068]
[Formulation Example 1]
Using the water extract of moon peach leaves obtained in Production Example 1, a soft drink having the following composition was produced by a conventional method.
Liquid sugar 12.0g
Lemon juice 1.0g
Cyclodextrin 0.01g
Lemon flavor 0.05g
Moon peach leaf water extract (Production Example 1) 0.1g
The remainder of purified water (the total amount is 100 g)
[0069]
[Formulation Example 2]
Using the 50% ethanol extract of moon peach leaves obtained in Production Example 1, a chewing gum having the following composition was produced by a conventional method.
Gum base 20g
55g sugar
Fructose 15g
Minamata 20g
Fragrance 0.5g
50% ethanol extract of moon peach leaves (Production Example 1) 0.5g
[0070]
[Composition Example 3]
Using the 50% ethanol extract of moon peach stem obtained in Production Example 1, a tablet having the following composition was produced by a conventional method.
50% ethanol extract of moon peach stalk (Production Example 1) 50mg
Powdered sugar (sucrose) 188mg
Glycerin fatty acid ester 12mg
[0071]
[Formulation Example 4]
Using the water extract of moon peach stem obtained in Production Example 1, granules having the following composition were produced by a conventional method.
Moon extract stalk water extract 34mg
Beet oligosaccharide 1000mg
Indigestible dextrin 289mg
Vitamin C 167mg
Stevia extract 10mg
[0072]
[Formulation Example 5]
Using the 50% ethanol extract of moon peach leaves obtained in Production Example 1 and the 50% glycerin extract of moon peach leaves obtained in Production Example 3, an emulsion having the following composition was produced by a conventional method. .
Jojoba oil 4.0g
Olive oil 2.0g
Squalane 2.0g
Cetanol 2.0g
Glyceryl monostearate 2.0g
Polyoxyethylene cetyl ether (20E.0) 2.5g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.0) 2.0g
1,3-butylene glycol 3.0g
Methyl paraoxybenzoate 0.15g
Fragrance 0.05g
Moon peach leaf 50% ethanol extract (Production Example 1) 0.1g
Moon peach leaf 50% glycerin extract (Production Example 3) 1.0g
The remainder of purified water (the total amount is 100 g)
[0073]
[Composition Example 6]
Using the water extract of the moon peach leaf obtained in Production Example 1 and the 50% glycerol extract of the moon peach stem obtained in Production Example 3, a lotion having the following composition was produced by a conventional method.
Glycerin 3.0g
1,3-butylene glycol 3.0g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.0) 0.5g
Methyl paraoxybenzoate 0.15g
Citric acid 0.1g
Sodium citrate 1.0g
Fragrance 0.05g
Moon Peach Leaf Water Extract (Production Example 1) 0.2g
Moon peach stalk 50% glycerin extract (Production Example 3) 2.0g
The remainder of purified water (the total amount is 100 g)
[0074]
[Formulation Example 7]
Using the 50% ethanol extract of moon peach leaves obtained in Production Example 1 and the 50% 1,3-butylene glycol extract of moon peach leaves obtained in Production Example 2, a cream having the following composition was prepared: Manufactured in a conventional manner.
Liquid paraffin 5.0g
Salami beeswax 4.0g
Cetanol 3.0g
Squalane 10.0g
Lanolin 2.0g
Stearic acid 1.0g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.0) 1.5g
Glyceryl monostearate 3.0g
1,3-butylene glycol 6.0g
Methyl paraoxybenzoate 1.5g
Fragrance 0.1g
Moon peach leaf 50% ethanol extract (Production Example 1) 0.1g
50% 1,3-butylene glycol extract of moon peach leaves (Production Example 2) 1.0g
The remainder of purified water (the total amount is 100 g)
[0075]
[Formulation Example 8]
Using the 50% propylene glycol extract of moon peach leaves obtained in Production Example 4, a pack having the following composition was produced by a conventional method.
Polyvinyl alcohol 15g
Polyethylene glycol 3g
7g propylene glycol
Ethanol 10g
Ethyl paraoxybenzoate 0.05g
Fragrance 0.05g
50% propylene glycol extract of moon peach leaves (Production Example 4) 5g
The remainder of purified water (the total amount is 100 g)
[0076]
[Formulation Example 9]
A 50% ethanol extract of moon peach leaves and stems obtained in Production Example 1 was used to prepare a mixture having the following composition, and the mixture was formed into granules to produce a health / nutritional supplement.
30% by weight of 50% ethanol extract of moon peach leaves and stems (Production Example 1)
Lotus germ extract 200 parts by weight
Pearl protein hydrolyzate (including various amino acids and peptides) 15 parts by weight
Silk protein hydrolyzate (including various amino acids and peptides) 15 parts by weight
Soybean isoflavone 10 parts by weight
Red wine extract powder (including procyanidins) 30 parts by weight
Yeast extract (including glutathione, nucleic acid, amino acid, vitamin) 10 parts by weight
Pomegranate seed extract 10 parts by weight
Wheat germ extract (including vitamins, chromium, selenium and molybdenum) 10 parts by weight
30 parts by weight of DHA
1060 parts by weight of beet oligosaccharide
Stevia extract 10 parts by weight
[0077]
[Composition Example 10]
Using the water extract of moon peach leaves and stems obtained in Production Example 1, a mixture having the following composition was prepared, and the mixture was gelatin-encapsulated to produce a tablet-like health / nutritional supplement.
Moon peach leaf and stem water extract (Production Example 1) 25 parts by weight
Lotus germ extract 20 parts by weight
Ceramide 25 parts by weight
Phospholipid (lecithin) 10 parts by weight
17 parts by weight of vitamin E (tocopherol)
Multi carotene (alpha and beta carotene, lutein, lycopene) 10 parts by weight
Octacosanol 1 part by weight
5 parts by weight of plant sterols
Perilla seed oil (including α-linolenic acid) 20 parts by weight
Refined fish oil (including DHA and EPA) 20 parts by weight
Sesame oil (including lignan compound) 20 parts by weight
10 parts by weight of olive oil
Soybean / rapeseed oil 62 parts by weight
Glycerin fatty acid ester 12 parts by weight
[0078]
[Composition Example 11]
Using the 50% glycerin extract of moon peach leaves and stems obtained in Production Example 3, a soft drink having the following composition was produced by a conventional method.
1% by weight 50% glycerin extract of moon peach leaves and stems (Production Example 3)
Lotus extract 1 part by weight
3 parts by weight of royal jelly
8 parts by weight of water-soluble collagen
1 part by weight of pearl barley extract
Ginseng extract (including saponin) 1 part by weight
Placenta (placenta) extract 1 part by weight
Pueraria extract (including flavonoids) 1 part by weight
1 part by weight of purple yam extract
Oligosaccharide 5 parts by weight
Sucrose 10 parts by weight
Prune juice 2 parts by weight
Pomegranate juice 5 parts by weight
Grapefruit juice 10 parts by weight
1 part by weight of vitamin C
Grapefruit flavor 0.7 parts by weight
Remaining water (total amount is 100 parts by weight)
[0079]
[Composition Example 12]
Using the 50% ethanol extract of moon peach leaves and stems obtained in Production Example 1, a candy having the following composition was produced by a conventional method.
5% by weight 50% ethanol extract of moon peach leaves and stems (Production Example 1)
Lotus extract 2 parts by weight
30 parts by weight of water candy
Licorice extract 3 parts by weight
1 part by weight of green tea extract
1 part by weight of blueberry extract (including anthocyanins)
Green tea extract (including plant polyphenols) 3 parts by weight
Strawberry 1/5 concentrated fruit juice 1 part by weight
Red cabbage pigment 0.05 parts by weight
Lemon juice 0.5 parts by weight
5 parts by weight of water
[0080]
【The invention's effect】
According to the present invention, there are provided a fibroblast proliferating agent capable of proliferating fibroblasts, and a cosmetic food and drink and a skin cosmetic capable of preventing aging of beautiful skin or skin through the proliferation of fibroblasts. Is done.

Claims

A fibroblast proliferative agent characterized by containing an extract from moon peach leaves and / or stems as an active ingredient (excluding skin cosmetics and anti-inflammatory and antibacterial uses) .

The fibroblast proliferation agent according to claim 1, wherein the extract is an extract obtained using a polar solvent as an extraction solvent (excluding skin cosmetics and anti-inflammatory and antibacterial uses) .

The fibroblast proliferation agent according to claim 2, wherein the polar solvent is water, methanol, ethanol, propanol, 1,3-butylene glycol, glycerin, propylene glycol, or a mixture of two or more thereof. (Excluding skin cosmetics and anti-inflammatory and antibacterial applications.)