KR102577528B1 - Composition for improving skin - Google Patents

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Abstract

본 발명은 피부 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 작두콩 추출물은 피부 줄기세포의 증식 촉진 효과를 통해, 피부 재생용 의약, 화장료 또는 식품 제조에 사용할 수 있다. 또한, 피부 줄기세포의 증식을 촉진하고, 줄기세포성 유지 효과를 나타내고 있어 줄기세포 활성 촉진용 화장료 제조에 사용할 수 있다.The present invention relates to a composition for improving skin. The pea extract according to the present invention can be used in the production of medicines, cosmetics or foods for skin regeneration through its effect in promoting the proliferation of skin stem cells. In addition, it promotes the proliferation of skin stem cells and has the effect of maintaining stem cell properties, so it can be used to manufacture cosmetics for promoting stem cell activity.

Description

피부 개선용 조성물{Composition for improving skin}Composition for improving skin {Composition for improving skin}

본 발명은 피부 재생, 줄기세포 활성 촉진 효과를 나타내는 피부 개선용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for improving skin that has the effect of promoting skin regeneration and stem cell activity.

발생학적으로 사람 피부의 모든 구성성분은 외배엽이나 중배엽에서 유래되는 것으로 알려져 있다. 표피, 모낭, 피지선 및 땀샘선 등은 외배엽에서 기원하며, 멜라닌 세포, 신경 및 특수 감각 수용체는 신경외배엽에서 유래된다. 발생학적 시기에 따라 배아의 줄기세포는 분화를 거듭하여 각각의 조직 기능에 맞는 특성의 세포가 되고, 성체가 된 후에도 일정수의 줄기세포는 조직에 남게 되는데 피부에서는 주로 두 곳에 줄기세포들이 존재한다. 첫째는 모낭(hair follicle)에 존재한다. 이곳은 세포분화가 일어나기 전의 세포로 표피의 재생과 관련해 중요한 역할을 담당하는 것으로 알려져 있으며, 털의 재생과 성장에도 중요한 역할을 수행하고 있다. 둘째는 표피의 기저층(the basal layer of epidermis)이다. 이곳에 자리하고 있는 줄기세포는 표피는 물론 진피층의 섬유아세포까지 관장하여 피부 건강을 지키는 중요한 역할을 수행하고 있음이 밝혀졌다. 이곳의 줄기세포는 상대적으로 양이 많고 쉽게 얻을 수 있다는 장점이 있어 피부줄기세포 연구에 널리 사용되고 있다. 피부는 지속적으로 재생(renew)되며, 피부의 상피에 존재하는 줄기세포 즉, 피부의 상피줄기세포(epidermal stem cells)는 상처 후 상피의 복구에 관여한다[비특허문헌 7]. 상기 피부의 상피줄기세포는 피부줄기세포(skin stem cells)로도 칭해지며, 상기 피부줄기세포를 활성화시킬 경우, 외상 등의 피부상처를 치료하거나 상처 치료를 촉진할 수 있으며 피부의 주름완화 또한 기대할 수 있다. 피부줄기세포의 지표로는 인테그린β1(integrin β1) 및 인테그린 α6(integrin α6)이 사용되고 있고, 상피 형태 형성 및 분화에 필요한 피부줄기세포의 유지는 p63 단백질에 의해 조절된다고 보고되고 있다. Embryologically, all components of human skin are known to be derived from ectoderm or mesoderm. The epidermis, hair follicles, sebaceous glands, and sweat glands originate from the ectoderm, while melanocytes, nerves, and special sensory receptors originate from the neuroectoderm. Depending on the developmental period, embryonic stem cells undergo repeated differentiation to become cells with characteristics suited to each tissue function, and even after becoming an adult, a certain number of stem cells remain in the tissue. In the skin, stem cells mainly exist in two locations. . The first exists in hair follicles. This is a cell before cell differentiation occurs and is known to play an important role in the regeneration of the epidermis, and also plays an important role in hair regeneration and growth. The second is the basal layer of epidermis. It was revealed that the stem cells located here play an important role in protecting skin health by controlling not only the epidermis but also the fibroblasts of the dermal layer. Stem cells here have the advantage of being relatively large in quantity and easy to obtain, so they are widely used in skin stem cell research. The skin is continuously regenerated, and the stem cells present in the epithelium of the skin, that is, the epidermal stem cells of the skin, are involved in the repair of the epithelium after injury [Non-patent Document 7]. The epithelial stem cells of the skin are also called skin stem cells, and when the skin stem cells are activated, skin wounds such as trauma can be treated or wound healing can be promoted, and skin wrinkles can also be alleviated. there is. Integrin β1 and integrin α6 are used as indicators of skin stem cells, and it is reported that the maintenance of skin stem cells required for epithelial morphogenesis and differentiation is regulated by the p63 protein.

피부줄기세포는 피부의 건강과 생리학적 및 생화학적인 항상성을 유지하는데 중요한 역할을 수행한다. 피부에 존재하는 줄기세포도 노화의 영향으로 인하여 기능에 이상이 발생하게 되고, 이에 따라 피부의 항상성이 깨지면서 여러 가지 문제가 발생된다. 따라서 이러한 줄기세포의 활성을 통하여 피부노화의 여러 현상을 개선할 수 있을 것이다[비특허문헌 8].Skin stem cells play an important role in maintaining skin health and physiological and biochemical homeostasis. Stem cells present in the skin also malfunction due to the effects of aging, and as a result, the homeostasis of the skin is broken, causing various problems. Therefore, various phenomena of skin aging may be improved through the activity of these stem cells [Non-patent Document 8].

또한, 생체에 안전하고, 유효성분이 안정하며, 무엇보다도 기존의 피부 재생 효과가 있는 물질보다 효과가 우수한 피부 재생 활성을 지닌 성분의 개발이 절실히 요망되고 있다.In addition, there is an urgent need to develop ingredients that are safe for the living body, have stable active ingredients, and, above all, have skin regenerative activity that is more effective than existing skin regenerative substances.

한편, 작두콩(Canavalia gladiata)은 장미목 콩과에 속하는 한해살이 덩굴성 식물로서, 한방에서는 도두(刀豆)라고 하며 열매가 작두같이 생겼으므로 작두콩이라고 한다. 줄기에 털이 없으며 콩 낟알한 개의 길이가 2~3 cm, 무게가 1.5~3 g으로 콩 종류 중에서 크기가 가장 큰 편이다. 열대 아시아 원산이며 식용으로 재배한다. 작두콩의 색깔은 붉은색 또는 흰색이며, 적색종은 꼬투리를 이용하고, 백색종은 콩을 주로 이용하나 모두 식용 가능하다.. 종자, 껍질, 잎, 줄기, 뿌리 등 모든 부위는 식품소재로 활용될 수 있다.Meanwhile, small beans ( Canavalia gladiata ) is an annual vine plant belonging to the Rosaceae legume family. In Oriental medicine, it is called dodu (刀豆) and its fruit looks like a pea, so it is called a pea. There is no hair on the stem, and each bean grain is 2 to 3 cm long and weighs 1.5 to 3 g, making it the largest among bean types. It is native to tropical Asia and is cultivated for food. The color of black beans is red or white. The red variety is mainly used for pods, and the white variety is mainly used for beans, but all parts are edible. All parts, including seeds, skin, leaves, stems, and roots, can be used as food materials. You can.

작두콩에는 가수분해 효소인 우레아제(urease), 혈구응집소(hemagglutinin), 카나발린(canavalin), 리놀렌산, 사포닌, 콜린, 레시신, 식이 섬유소, 그리고 단백질 등의 다양한 생리활성물질이 함유되어 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 염증을 없애는 작용이 뛰어나고 신체의 면역력을 키워주기 때문에 각종 종기나 화농성 질병에 효과가 있으며, 뱃속을 따뜻하게 하고 천식, 가래, 관절염, 신허요통에 효과가 있고, 신장을 튼튼하게 하고 이수작용이 있어 관절염, 변비, 비만증 등을 두루 치료한다고 알려져 있다. 또한 치질, 축농증, 중이염, 위염, 대장염 등에 큰 효과가 있는 것으로 알려져 있어, 기능성 식품 및 의약품 소재로서 주목 받고 있다. Peas are known to contain various bioactive substances such as the hydrolytic enzyme urease, hemagglutinin, canavalin, linolenic acid, saponin, choline, resicin, dietary fiber, and protein. . In addition, it has an excellent effect in eliminating inflammation and increases the body's immunity, so it is effective in various boils and purulent diseases. It warms the stomach and is effective in asthma, phlegm, arthritis, and renal lumbar pain. It strengthens the kidneys and has an emollient effect. It is known to treat a variety of conditions such as arthritis, constipation, and obesity. It is also known to be very effective in hemorrhoids, sinusitis, otitis media, gastritis, and colitis, and is attracting attention as a functional food and pharmaceutical material.

작두콩과 관련된 국내특허문헌에는, 등록특허 제0350911호 "도두로부터 분리한 항균 활성 추출물 및 그 제조 방법", 등록특허 제0394584호 "작두콩이 첨가된 두유 및 그 제조방법", 등록특허 제0324132호 "작두콩을 이용한 청국장 및 그의 제조방법", 특허출원 제2002-0055538호 "작두콩과 금송혼합 추출물을 이용한 피부화장료", 특허출원 제2002-0056697호 "도두를 이용한 항선충 제제의 개발", 특허출원 제2001-0031264호 "작두콩 등을 이용한 면역 기능 증강 및 항산화 기능성식품의 개발", 특허출원 제2003-0005294호 "알러지 및 염증 치료용 조성물" 등이 있다.Domestic patent documents related to soybeans include Patent No. 0350911, “Antibacterial activity extract isolated from soybeans and method for producing the same,” Patent No. 0394584, “Soymilk with added soybeans and method for producing the same,” and Patent No. 0324132. Cheonggukjang and its manufacturing method using black beans", Patent Application No. 2002-0055538 "Skin cosmetics using mixed extracts of black beans and golden pine", Patent Application No. 2002-0056697 "Development of an anti-nematode preparation using black beans", Patent Application No. These include No. 2001-0031264, “Development of immune function enhancing and antioxidant functional foods using peas, etc.,” and Patent Application No. 2003-0005294, “Composition for the treatment of allergies and inflammation.”

그러나, 작두콩의 줄기세포에 대한 연구는 전무한 실정이다.However, there is no research on stem cells in soybeans.

1. 일본 특개 평8-231370호1. Japanese Patent Laid-open No. 8-231370 2. 일본 특개 평8-208424호2. Japanese Patent Laid-open No. 8-208424 3. 일본 특개 평9-40523호3. Japanese Patent Laid-open No. 9-40523 4. 일본 특개 평10-36283호4. Japanese Patent Laid-Open No. 10-36283

1. Cardinale G. et al, Adv. Enzymol., 41, p. 425, 19741. Cardinale G. et al, Adv. Enzymol., 41, p. 425, 1974 2. Feingold 외, J. Invest. Dermatol., 110, pp 368-375, 1998.2. Feingold et al., J. Invest. Dermatol., 110, pp 368-375, 1998. 3. Feingold 외, J. Invest. Dermatol., 115, pp 353-360, 2000.3. Feingold et al., J. Invest. Dermatol., 115, pp 353-360, 2000. 4. Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology. 12:103-114, 19994. Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology. 12:103-114, 1999 5. The British journal of dermatology. 110: 129-138, 19845. The British journal of dermatology. 110: 129-138, 1984 6. Skin research and technology.5:189-194, 19996. Skin research and technology.5:189-194, 1999 7. Epidermal Stem Cells of the Skin, Cedric Blanpain, Elaine Fuchs, Annual Review of Cell and Developmental Biology, November 2006, Vol. 22, Pages 339-3737. Epidermal Stem Cells of the Skin, Cedric Blanpain, Elaine Fuchs, Annual Review of Cell and Developmental Biology, November 2006, Vol. 22, Pages 339-373 8. Human skin stem cells and the ageing process, Catherin Niemann, Stem Cell Aging and Regenerative Medicine, November 2008, Pages 986-9978. Human skin stem cells and the aging process, Catherin Niemann, Stem Cell Aging and Regenerative Medicine, November 2008, Pages 986-997

이에, 본 발명자들은 작두콩 추출물이 피부줄기세포의 증식을 촉진하여 피부의 재생을 촉진시키고 줄기세포성 유지 효과를 나타내고 있어 줄기세포 활성 촉진 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, the present inventors completed the present invention by confirming the effect of pea extract on promoting stem cell activity, as it promotes skin regeneration by promoting the proliferation of skin stem cells and maintains stem cell properties.

따라서, 본 발명의 목적은 작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생용 조성물을 제공하는데 있다.Accordingly, the purpose of the present invention is to provide a composition for skin regeneration containing pea extract as an active ingredient.

또한, 본 발명의 다른 목적은 작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진용 조성물을 제공하는데 있다.In addition, another object of the present invention is to provide a composition for promoting stem cell activity containing pea extract as an active ingredient.

상기 과제를 해결하기 위한 수단으로서, 본 발명은 의약, 화장료 또는 식품 제조를 위한, 작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생용 조성물을 제공한다.As a means to solve the above problems, the present invention provides a composition for skin regeneration containing a pea extract as an active ingredient for manufacturing medicine, cosmetics or food.

상기 과제를 해결하기 위한 다른 수단으로서, 본 발명은 화장료 제형 제조를 위한, 작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진용 조성물을 제공한다.As another means to solve the above problem, the present invention provides a composition for promoting stem cell activity containing a pea extract as an active ingredient for the production of cosmetic formulations.

본 발명에 따른 작두콩 추출물은 피부줄기세포의 증식을 촉진하여 피부의 재생을 촉진시키는 효과를 나타냄으로써, 의약, 화장료 또는 식품 제조에 사용할 수 있다.The pea extract according to the present invention has the effect of promoting skin regeneration by promoting the proliferation of skin stem cells, and can be used in medicine, cosmetics, or food production.

또한, 작두콩 추출물은 피부줄기세포의 증식을 촉진하고, 줄기세포성 유지 효과를 나타내고 있어 줄기세포 활성 촉진용 화장료 제형 제조에 사용할 수 있다. In addition, soybean extract promotes the proliferation of skin stem cells and has the effect of maintaining stem cell properties, so it can be used in the manufacture of cosmetic formulations for promoting stem cell activity.

이하, 본 발명의 구성을 구체적으로 설명한다.Hereinafter, the configuration of the present invention will be described in detail.

피부 재생 성분이 실제 피부에 적용 시 우수한 효과를 발휘하기 위해서는 저농도에서 고활성의 피부 재생 활성을 나타내고, 피부를 투과하여 흡수되는 능력이 우수하고, 피부 재생 효과를 나타내기에 충분한 시간 동안 머무를 수 있도록 휘발성이 낮고, 조성물이나 피부 상에서 활성 성분이 안정하게 유지되고, 의약, 화장료 또는 식품 등으로의 제조가 용이하며, 또한 피부에 안전한 것이 바람직하다. 그러나, 공지의 성분 중 상기 특성을 모두 만족시키는 성분은 흔치 않다. 예를 들어, 몇몇 피부 재생 성분들은 시험관 내 실험 시 저농도에서도 피부 재생 활성은 우수하나, 피부를 투과하여 흡수되는 능력이 떨어져 실제 피부에 적용하기엔 어렵다. 또 다른 활성 성분들은 친수성이 낮아 의약이나 화장품, 식품으로 제형화가 어렵다. 또한, 몇몇 피부 재생 성분들은 열, 광, 또는 산소에 노출되었을 때 상기 활성 성분이 분해되거나 다른 화합물로 변형되어 피부에 적용하기 전에 이미 효과가 사라지는 경우도 있다. In order for skin regeneration ingredients to exhibit excellent effects when applied to actual skin, they must exhibit highly active skin regeneration activity at low concentrations, have an excellent ability to penetrate and be absorbed through the skin, and be volatile enough to remain for a sufficient period of time to exhibit a skin regeneration effect. It is desirable that this is low, that the active ingredient is stably maintained in the composition or on the skin, that it is easy to manufacture into medicine, cosmetics, or food, and that it is safe on the skin. However, among known components, components that satisfy all of the above characteristics are rare. For example, some skin regenerative ingredients have excellent skin regenerative activity even at low concentrations when tested in vitro, but their ability to penetrate and absorb through the skin is poor, making them difficult to apply to actual skin. Other active ingredients have low hydrophilicity, making them difficult to formulate into medicines, cosmetics, or foods. Additionally, some skin rejuvenating ingredients may lose their effectiveness before application to the skin because the active ingredients are decomposed or transformed into other compounds when exposed to heat, light, or oxygen.

하기 실시예에서 확인할 수 있는 바와 같이, 작두콩 추출물은 저농도에서 월등히 우수한 피부 줄기세포 증식 촉진 효과를 나타내므로 피부 재생을 위한 의약, 화장료 또는 식품 조성물의 유효성분으로 사용할 수 있다. As can be seen in the examples below, the pea extract exhibits an excellent effect of promoting skin stem cell proliferation at low concentrations, and can therefore be used as an active ingredient in medicines, cosmetics, or food compositions for skin regeneration.

따라서, 본 발명은 작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생용 조성물을 제공한다.Accordingly, the present invention provides a composition for skin regeneration containing pea extract as an active ingredient.

상기 작두콩 추출물은 당업계에 공지된 방법에 의해 추출될 수 있으며, 그 방법은 특별히 한정되지 않는다. 또는, 시판되고 있는 추출물을 이용할 수 있다.The pea extract can be extracted by a method known in the art, and the method is not particularly limited. Alternatively, commercially available extracts can be used.

바람직하기로는 상기 작두콩 추출물은 작두콩을 물 및/또는 유기용매로 추출하여 수득한 추출물을 사용할 수 있으며, 상기 유기용매는 극성 유기용매, 비극성 유기용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있다. 상기 극성 유기용매는 탄소수 1 내지 5의 저급 알코올, 에틸아세테이트 또는 아세톤일 수 있으며, 비극성 유기용매는 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산 또는 디클로로메탄일 수 있다. 예를 들어, 상기 탄소수 1 내지 5의 저급 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 또는 이소프로판올일 수 있다. Preferably, the black bean extract may be an extract obtained by extracting black beans with water and/or an organic solvent, and the organic solvent may be a polar organic solvent, a non-polar organic solvent, or a mixed solvent thereof. The polar organic solvent may be a lower alcohol having 1 to 5 carbon atoms, ethyl acetate, or acetone, and the non-polar organic solvent may be ether, chloroform, benzene, hexane, or dichloromethane. For example, the lower alcohol having 1 to 5 carbon atoms may be methanol, ethanol, propanol, butanol, or isopropanol.

한 구체예에서 상기 작두콩 추출물은 전술한 추출용매를 이용하여 추출된 1차 추출물을 극성이 다른 추출용매를 이용하여 분획한 분획물을 포함할 수 있다. 예를 들어, 작두콩 추출물은 탄소수 1 내지 5의 알코올로 추출한 후, 에테르, 벤젠, 헥산 등의 극성이 다른 용매로 다시 분획한 분획물일 수 있다. 상기 분획 시 용매는 2종 이상 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하거나 혼합하여 사용하여, 각 용매 추출물을 제조할 수 있다. In one embodiment, the pea extract may include a fraction obtained by fractionating the primary extract extracted using the above-described extraction solvent using an extraction solvent of different polarity. For example, the soybean extract may be a fraction extracted with an alcohol having 1 to 5 carbon atoms and then fractionated again with a solvent of different polarity such as ether, benzene, or hexane. Two or more types of solvents can be used during the fractionation, and extracts for each solvent can be prepared by using them sequentially or by mixing them depending on the polarity of the solvents.

본 발명에서, 상기 제조된 추출물 또는 상기 분획과정을 수행하여 수득한 분획물에 대해 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 상기 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 구체적으로 상기 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있고, 농축은 감압 농축기 등을 이용하여 감압 농축할 수 있으며, 건조는 동결건조법을 수행할 수 있다. In the present invention, the prepared extract or the fraction obtained by performing the fractionation process can be filtered, concentrated, or dried to remove the solvent, and the filtration, concentration, and drying can all be performed. Specifically, the filtration can be performed using filter paper or a vacuum filter, the concentration can be performed under reduced pressure using a vacuum concentrator, etc., and the drying can be performed using a freeze-drying method.

또한, 상기 제조된 추출물 또는 상기 분획과정을 수행하여 수득한 분획물에 대해 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography) 또는 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등의 다양한 크로마토그래피를 이용하여 정제함으로써 추가로 정제된 분획을 얻을 수 있다. In addition, the prepared extract or the fraction obtained by performing the fractionation process may be subjected to silica gel column chromatography, thin layer chromatography, or high performance liquid chromatography. Additional purified fractions can be obtained by purification using various chromatographies.

본 발명의 조성물은 의약 제형 제조를 위해 사용할 수 있다.The compositions of the present invention can be used for preparing pharmaceutical formulations.

상기 의약 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액의 형태이거나, 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제의 형태일 수 있다.The pharmaceutical formulation may be in the form of a solution, suspension or emulsion in oil or aqueous medium, or in the form of extracts, powders, granules, tablets or capsules.

또한, 상기 조성물은 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 예컨대, 공지의 피부 재생 성분을 포함할 수 있을 것이다. 추가적인 피부 재생 성분을 포함하게 되면 본 발명의 조성물의 피부 재생 효과는 더욱 증진될 수 있을 것이다. 상기 성분 추가 시에는 복합 사용에 따른 피부 안전성, 제형화의 용이성, 유효성분들의 안정성을 고려할 수 있다. 본 발명의 한 구체예에서, 상기 조성물은 당업계에 공지된 피부 재생 성분으로서, 레티노산, TGF, 동물 태반 유래의 단백질, 베튤린산 및 클로렐라 추출물, 당업계에 공지된 항산화 성분으로서, 토코페롤, 셀레늄, 비타민 C 및 페놀성 화합물, 당업계에 공지된 미백 성분으로서, 코지산(Kojic acid), 알부틴(Arbutin) 등과 같은 티로시나제 효소활성을 억제하는 물질, 하이드로퀴논(Hydroquinone), 비타민-C(L-Ascorbic acid) 및 이들의 유도체와 각종 식물 추출물로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상의 성분을 추가로 포함할 수 있다. 추가의 성분은 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함될 수 있을 것이며, 상기 함량 범위는 피부 안전성, 상기 작두콩 추출물의 제형화 시의 용이성 등의 요건에 따라 조절될 수 있을 것이다.In addition, the composition may further contain one or more active ingredients that exhibit the same or similar functions. For example, it may contain known skin regeneration ingredients. The skin regeneration effect of the composition of the present invention can be further improved by including additional skin regeneration ingredients. When adding the above ingredients, skin safety due to combined use, ease of formulation, and stability of the active ingredients can be taken into consideration. In one embodiment of the present invention, the composition includes skin regeneration ingredients known in the art, such as retinoic acid, TGF, protein derived from animal placenta, betulinic acid and chlorella extract, and antioxidant ingredients known in the art, such as tocopherol and selenium. , vitamin C and phenolic compounds, whitening ingredients known in the art, substances that inhibit tyrosinase enzyme activity such as kojic acid and arbutin, hydroquinone, vitamin-C (L- Ascorbic acid) and its derivatives and various plant extracts may additionally contain one or two or more ingredients selected from the group consisting of. Additional ingredients may be included in an amount of 0.0001% to 10% by weight based on the total weight of the composition, and the content range may be adjusted according to requirements such as skin safety and ease of formulation of the pea extract.

또한, 본 발명의 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함할 수 있다.Additionally, the composition of the present invention may further include a pharmaceutically acceptable carrier.

약학적으로 허용 가능한 담체는 완충액, 주사용 멸균수, 일반 식염수 또는 인산염 완충 식염수, 슈크로스, 히스티딘, 염 및 폴리솔베이트 등과 같은 여러 성분을 함유할 수 있다.Pharmaceutically acceptable carriers may contain various ingredients such as buffers, sterile water for injection, normal saline or phosphate buffered saline, sucrose, histidine, salts and polysorbates.

본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 일반 약학 제제의 형태, 예를 들어, 임상 투여 시 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.The composition of the present invention can be administered orally or parenterally, and can be administered in the form of a general pharmaceutical preparation, for example, various oral and parenteral formulations during clinical administration. When formulated, commonly used fillers and extenders are used. It can be prepared using diluents or excipients such as binders, wetting agents, disintegrants, and surfactants.

경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 의약 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose) 또는 락토오스(Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다.Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, etc., and these solid preparations contain at least one excipient, such as starch, calcium carbonate, and water, in the pharmaceutical composition of the present invention. It can be prepared by mixing sucrose, lactose, gelatin, etc.

단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium styrate talc are also used. Liquid preparations for oral use include suspensions, oral solutions, emulsions, syrups, etc. In addition to the commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives may be included.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌 글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.Preparations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. Non-aqueous solvents and suspensions may include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, and injectable ester such as ethyl oleate. As a base for suppositories, witepsol, macrogol, tween 61, cacao, laurin, glycerogeratin, etc. can be used.

본 발명에 있어서, '피부 재생 효과'라 함은 피부 외부 및 내부 원인에 의한 손상에 대하여 피부 조직이 회복되는 것을 말한다. 상기 외부 원인에 의한 손상은 자외선, 외부 오염 물질, 창상, 외상 등을 들 수 있으며, 상기 내부 원인에 의한 손상은 스트레스 등을 들 수 있다.In the present invention, 'skin regeneration effect' refers to the recovery of skin tissue from damage caused by external and internal causes. Damage due to external causes may include ultraviolet rays, external contaminants, wounds, trauma, etc., and damage due to internal causes may include stress.

본 발명에 있어서, '유효량'이라 함은 손상된 피부의 재생을 촉진할 수 있는 추출물의 양을 의미한다. 본 발명의 조성물이 유효량의 상기 작두콩 추출물을 포함할 때 바람직한 피부 재생 효과를 제공할 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함되는 상기 작두콩 추출물의 유효량은 조성물이 제품화되는 형태, 상기 화합물이 피부에 적용되는 방법 및 피부에 머무르는 시간 등에 따라 달라질 것이다. 예컨대, 상기 조성물이 약학 제형으로 제품화되는 경우에는 일상적으로 피부에 적용하게 되는 화장품으로 제품화되는 경우에 비해 높은 농도로 상기 작두콩 추출물을 포함할 수 있을 것이다. 따라서, 일일 투여량은 상기 작두콩 추출물의 양을 기준으로 0.1 내지 100 ㎎/㎏이고, 바람직하게는 30 내지 80 ㎎/㎏이고, 더욱 바람직하게는 50 내지 60 mg/kg이며, 하루 1 ∼ 6 회 투여될 수 있다. In the present invention, 'effective amount' refers to the amount of extract that can promote regeneration of damaged skin. When the composition of the present invention contains an effective amount of the above-mentioned pea extract, it can provide a desirable skin regenerative effect. The effective amount of the pea extract included in the composition of the present invention will vary depending on the form in which the composition is commercialized, the method by which the compound is applied to the skin, and the time it remains on the skin. For example, when the composition is commercialized as a pharmaceutical formulation, it may contain the pea extract at a higher concentration than when it is commercialized as a cosmetic product that is routinely applied to the skin. Therefore, the daily dosage is 0.1 to 100 mg/kg, preferably 30 to 80 mg/kg, more preferably 50 to 60 mg/kg, 1 to 6 times a day, based on the amount of the pea extract. may be administered.

본 발명의 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.The composition of the present invention can be used alone or in combination with surgery, radiation therapy, hormone therapy, chemical therapy, and methods using biological response modifiers.

본 발명의 의약 제형은 피부 외용제 제형을 포함할 수 있다. The pharmaceutical formulation of the present invention may include a skin topical formulation.

상기 작두콩 추출물을 피부외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다. When the pea extract is used as an external skin agent, fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickeners and gelling agents, softeners, antioxidants, suspending agents, stabilizers, foaming agents, fragrances, surfactants, and water are added. , ionic or non-ionic emulsifiers, fillers, sequestering agents and chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles, or commonly used in external preparations for the skin. It may contain adjuvants commonly used in the field of dermatology, such as any other ingredients. Additionally, the ingredients may be introduced in amounts commonly used in the field of dermatology.

상기 작두콩 추출물이 피부 외용제 제형으로 제공될 경우, 이에 제한되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제와 같은 제형을 가질 수 있다.When the black bean extract is provided in a skin external formulation, it is not limited thereto, but may have formulations such as ointment, patch, gel, cream, or spray.

또한, 본 발명의 피부 재생용 조성물은 화장료 제형 제조를 위해 사용될 수 있다.Additionally, the composition for skin regeneration of the present invention can be used to prepare cosmetic formulations.

상기 화장료 제형은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태일 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등과 같은 화장수, 훼이셜 로션, 바디로션 등과 같은 유액, 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등과 같은 크림, 에센스, 화장연고, 스프레이, 젤, 팩, 선 스크린, 메이크업 베이스, 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션, 파우더, 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일과 같은 메이크업 제거제, 클렌징 폼, 비누, 바디 워쉬 등과 같은 세정제 등의 제형을 가질 수 있다. The cosmetic formulation may be in the form of a general emulsified formulation or solubilized formulation. For example, lotion such as flexible lotion or nourishing lotion, emulsion such as facial lotion, body lotion, cream, essence, cosmetic ointment, spray, gel, pack, sunscreen, makeup base, liquid such as nutritional cream, moisture cream, eye cream, etc. It may have a formulation such as foundation type, solid type or spray type, powder, makeup remover such as cleansing cream, cleansing lotion, cleansing oil, cleansing foam, soap, body wash, etc.

또한, 상기 화장품은 작두콩 추출물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.In addition to the pea extract, the cosmetics contain fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickeners and gelling agents, softeners, antioxidants, suspending agents, stabilizers, foaming agents, fragrances, surfactants, water, and ionic agents. or non-ionic emulsifiers, fillers, sequestering and chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other commonly used in cosmetics. It may contain auxiliaries commonly used in the field of cosmetics, such as ingredients.

상기 화장료 제형은 유효성분이 단기간 내에 피부에 머무르게 되는 메이크업 제거제, 세정제 등과 같은 워쉬-오프(wash-off) 타입의 화장품의 경우에는 비교적 높은 농도의 상기 작두콩 추출물을 포함할 수 있을 것이다. 반면, 유효성분이 장기간 동안 피부에 머무르게 되는 화장수, 유액, 크림, 에센스 등의 리브-온(leave-on) 타입의 화장품의 경우에는 워쉬-오프 타입의 화장품에 비해 낮은 농도의 상기 작두콩 추출물을 포함해도 무방할 것이다. 이에 제한되는 것은 아니나, 본 발명의 한 구체예에서, 상기 조성물은 상기 작두콩 추출물을 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 10 중량%(바람직하게는 0.0001 중량% 내지 1 중량%)로 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물이 상기 작두콩 추출물을 0.0001 중량% 미만으로 포함할 경우에는 충분한 피부 재생 효과를 기대할 수 없고, 10 중량%를 초과하여 포함할 경우에는 알러지 등 원치 않는 반응이 발생하거나 피부 안전성에 문제가 있을 수 있으므로 이를 방지하기 위한 것이다.The cosmetic formulation may contain a relatively high concentration of the pea extract in the case of wash-off type cosmetics such as makeup removers and detergents in which the active ingredient stays on the skin for a short period of time. On the other hand, in the case of leave-on type cosmetics such as lotions, emulsions, creams, and essences, in which the active ingredients stay on the skin for a long period of time, even if they contain a lower concentration of the pea extract than wash-off type cosmetics, It will be fine. Although not limited thereto, in one embodiment of the present invention, the composition may include the pea extract in an amount of 0.0001% to 10% by weight (preferably 0.0001% to 1% by weight) based on the total weight of the composition. . If the composition of the present invention contains less than 0.0001% by weight of the pea extract, sufficient skin regenerative effect cannot be expected, and if it contains more than 10% by weight, unwanted reactions such as allergies may occur or problems with skin safety may occur. This is to prevent this from happening.

또한, 본 발명의 피부 재생용 조성물은 식품 제형 제조를 위해 사용될 수 있다.Additionally, the composition for skin regeneration of the present invention can be used to prepare food formulations.

상기 식품 제형은 상기 작두콩 추출물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품 소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품을 의미한다. The food formulation refers to a food manufactured by adding the pea extract to food materials such as beverages, teas, spices, gum, and confectionery, or by encapsulating, powdering, or suspending it.

상기 식품 제형은 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 높은 피부 재생 효과를 기대할 수 있어 매우 유용하다.Since the food formulation can be consumed on a daily basis, it is very useful as it can be expected to have a high skin regeneration effect.

상기 작두콩 추출물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 작두콩 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.When using the pea extract as a food additive, the pea extract can be added as is or used together with other foods or food ingredients, and can be used appropriately according to conventional methods. The mixing amount of the active ingredient can be appropriately determined depending on the purpose of use (prevention, health, or therapeutic treatment). Generally, when producing a food or beverage, the composition of the present invention is added in an amount of 15 parts by weight or less, preferably 10 parts by weight or less, based on the raw materials. However, in the case of long-term intake for the purpose of health and hygiene or health control, the amount may be below the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount above the above range. .

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.There are no special restrictions on the types of foods above. Examples of foods to which the above substances can be added include meat, sausages, bread, chocolate, candies, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gum, dairy products including ice cream, various soups, beverages, tea, drinks, etc. These include alcoholic beverages and vitamin complexes, and include all health foods in the conventional sense.

식품 제형이 음료인 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ∼ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ∼ 0.03 g이다.When the food formulation is a beverage, it may contain various flavoring agents or natural carbohydrates as additional ingredients, like regular beverages. The above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As a sweetener, natural sweeteners such as thaumatin and stevia extract or synthetic sweeteners such as saccharin and aspartame can be used. The proportion of the natural carbohydrate is generally about 0.01 to 0.04 g, preferably about 0.02 to 0.03 g, per 100 mL of the composition of the present invention.

상기 외에 식품 제형은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 식품 제형은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above, food formulations include various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and its salts, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, carbonated drinks. It may contain carbonating agents used in. Additionally, the food formulation may contain pulp for the production of natural fruit juices, fruit juice drinks and vegetable drinks. These ingredients can be used independently or in combination. The ratio of these additives is not very important, but is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.

본 발명은 또한, 상기 작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진용 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for promoting stem cell activity containing the above-mentioned pea extract as an active ingredient.

본 발명에서 용어 ‘줄기세포’는 스스로 세포 분열을 할 수 있고, 매우 다양한 형태의 특이 세포 타입(specific cell type)으로 분화할 수 있는 능력을 갖는 세포이다. 이러한 줄기세포의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 한 구체예에서, 상기 줄기세포는 피부줄기세포일 수 있다. 상기 ‘피부줄기세포’는 피부(표피, 진피 및 피하지방층)를 이루는 세포로 분화될 수 있는 줄기세포를 의미한다. 상기 피부를 이루는 세포는 표피에 존재하는 케라티노사이트(keratinocyte), 멜라노사이트(melanocyte) 및 진피에 존재하는 섬유아세포(콜라겐 및 엘라스틴의 생합성을 주로 담당)를 포함한다. In the present invention, the term ‘stem cell’ is a cell that is capable of cell division on its own and has the ability to differentiate into a wide variety of specific cell types. The type of these stem cells is not particularly limited, and in one embodiment, the stem cells may be skin stem cells. The ‘skin stem cells’ refer to stem cells that can differentiate into cells forming the skin (epidermis, dermis, and subcutaneous fat layer). The cells that make up the skin include keratinocytes and melanocytes present in the epidermis, and fibroblasts (mainly responsible for the biosynthesis of collagen and elastin) present in the dermis.

상기 피부줄기세포의 종류는 특별히 제한되지 않는다. 본 발명에서 사용되는 피부줄기세포는 그것이 어디로부터 유래한 것인지 관계없이 이용될 수 있다. 예를 들어, 피부줄기세포는 공지의 피부줄기세포 공급원, 예를 들어, 모낭 또는 표피의 기저층에서 얻을 수 있으며, 채취 대상인 동물은 포유동물일 수 있다. 한 구체예에서, 포유동물은 인간, 마우스, 랫트, 기니어 피그, 토끼, 원숭이, 돼지, 말, 소, 양, 영양, 개 또는 고양이를 포함할 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직하게 포유동물은 인간일 수 있다. 이러한, 피부줄기세포 공급원으로부터 피부줄기세포를 수득하는 방법에 대해서는 당업계에서 잘 알려져 있다.The type of skin stem cells is not particularly limited. The skin stem cells used in the present invention can be used regardless of where they originate. For example, skin stem cells can be obtained from a known skin stem cell source, for example, hair follicles or the basal layer of the epidermis, and the animal to be collected may be a mammal. In one embodiment, the mammal may include, but is not limited to, a human, mouse, rat, guinea pig, rabbit, monkey, pig, horse, cow, sheep, antelope, dog, or cat. Preferably the mammal may be a human. Methods for obtaining skin stem cells from skin stem cell sources are well known in the art.

본 발명에 있어서, '줄기세포 활성 촉진 효과'라 함은 줄기세포 증식 촉진 효과 및/또는 줄기세포성 유지 효과를 포함하는 것을 말한다.In the present invention, the term 'stem cell activity promotion effect' refers to a stem cell proliferation promotion effect and/or a stem cell property maintenance effect.

또한, 본 발명의 조성물은 화장료 제형 제조를 위해 사용될 수 있다. 이러한 화장료 제형에 대해서는 앞서 작두콩 추출물을 포함하는 화장료 제형에 관한 설명에 기재된 내용과 동일하다. Additionally, the composition of the present invention can be used for preparing cosmetic formulations. The contents of this cosmetic formulation are the same as those previously described in the description of the cosmetic formulation containing pea extract.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in detail by examples. However, the following examples only illustrate the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following examples.

제조예Manufacturing example 1: 작두콩 추출물의 제조 1: Preparation of pea extract

작두콩을 세척하고, 분말화한 뒤, 10 배의 에탄올(w/v)에서 5 일간 냉침한 후 추출 원액을 여과, 농축한 엑기스를 얻었다. 여기에 정제수 및 에탄올의 혼합용액을 첨가하여 용해시킨 다음 여과하여 최종 추출물을 제조하였다.The soybeans were washed, powdered, and cold-soaked in 10 times ethanol (w/v) for 5 days, and then the extracted crude solution was filtered to obtain a concentrated extract. A mixed solution of purified water and ethanol was added thereto, dissolved, and then filtered to prepare the final extract.

제조예Manufacturing example 2: 2: 무혈청Serum-free 배지조건에서Under badge conditions 피부줄기세포의skin stem cells 배양 culture

Cellntec 사에서 구입한 인간 피부줄기세포(Human epidermal stem cell)를 96-웰 플레이트(5×103 cells/well)에, 소태아혈청(fetal bovine serum)과 유사한 BPE(Bovine pituitary extract)가 첨가된 CNT-57 배지(Cellntec 사)를 이용하여 24시간 동안 5% CO2 및 37℃ 조건에서 배양하였다. 그 후, 배양액을 흡입관을 통하여 제거한 다음, PBS 용액(GibcoBRL 사)을 이용하여 배지 성분을 제거하고, BPE가 포함되지 않은 CNT-57 배지에 작두콩 추출물 5㎍/ml을 처리하여 5% CO2 및 37℃ 조건에서 72시간 동안 배양하였다.Human epidermal stem cells purchased from Cellntec were placed in a 96-well plate (5×10 3 cells/well) and BPE (Bovine pituitary extract) similar to fetal bovine serum was added. CNT-57 medium (Cellntec) was used and cultured under conditions of 5% CO 2 and 37°C for 24 hours. Afterwards, the culture medium was removed through the suction tube, the medium components were removed using a PBS solution (GibcoBRL), and the CNT-57 medium without BPE was treated with 5㎍/ml of the pea extract and incubated with 5% CO 2 and Cultured for 72 hours at 37°C.

실험예Experiment example 1: One: CCKCCK -8 평가법을 통한 -8 Through evaluation method 피부줄기세포skin stem cells 증식 촉진 효과 Proliferation promoting effect

상기 제조예 2에서 배양된 피부줄기세포에 CCK-8(Cell counting kit-8) 평가를 실시하였다. CCK-8 평가는 세포 내 전자전달계 내의 탈수소효소(Dehydrogenase)가 테트라졸리움 염(Tetrazolium Salt)를 분해하여 생성하는 포르마잔(Formazan)의 흡광도를 측정하여 살아있는 세포의 밀도를 간접적으로 나타내는 분석방법이다. CCK-8 (Cell counting kit-8) evaluation was performed on the skin stem cells cultured in Preparation Example 2. CCK-8 evaluation is an analysis method that indirectly indicates the density of living cells by measuring the absorbance of formazan, which is produced by dehydrogenase in the intracellular electron transport system by decomposing tetrazolium salt.

세포에 CCK-8 용액(배지부피의 1/10을 처리)을 37℃에서 2 시간 동안 처리한 후, 파장 450 nm에서의 흡광도를 측정함으로써 분광학적으로 측정하였다. 작두콩 추출물의 피부줄기세포의 증식 촉진 효과는 측정된 흡광도 값으로부터 대조군(추출물이 포함되지 않은 CNT-57 배지) 대비 하기 수학식 1에 따라 증식율(%)을 구하고, 그 값을 하기 표 1에 나타냈다.The cells were treated with CCK-8 solution (1/10 of the medium volume) at 37°C for 2 hours, and then the absorbance was measured spectroscopically at a wavelength of 450 nm. The effect of the pea extract on promoting the proliferation of skin stem cells was determined by calculating the proliferation rate (%) compared to the control group (CNT-57 medium without extract) from the measured absorbance value according to Equation 1 below, and the values are shown in Table 1 below. .

[수학식 1][Equation 1]

증식율(%) = (시료처리군의 흡광도/대조군의 흡광도) × 100Proliferation rate (%) = (absorbance of sample treatment group/absorbance of control group) × 100

피부줄기세포의 증식 촉진 효과 (반복수 = 3)Effect of promoting proliferation of skin stem cells (number of repetitions = 3) 첨가시료Added sample 농도density 대조군 대비 세포 증식율(%)Cell proliferation rate (%) compared to control group 작두콩 추출물Pea Extract 5㎍/ml5㎍/ml 132%132% 대조군control group -- 100%100%

표 1에 나타난 바와 같이, 작두콩 추출물을 처리한 배지조건에서의 피부줄기세포는 우수한 증식 촉진 효과를 나타내었다. As shown in Table 1, skin stem cells in medium conditions treated with pea extract showed an excellent proliferation promotion effect.

실험예Experiment example 2: 2: 피부줄기세포의skin stem cells 줄기세포성( Stem cell type ( stemnessstemness ) 유지 효과 확인) Check the maintenance effect

상기 제조예 2에서 배양된 피부줄기세포의 줄기세포성 유지 효과 확인을 위해 p63 발현 정도를 평가하였다. p63은 세포 내 전사인자로서 피부줄기세포의 유지 마커로 잘 알려져 있다. 세포의 RNA를 분리하여 cDNA를 합성한 다음, Taqman 염색액으로 실시간-PCR을 수행하여 p63의 발현 정도를 측정하였다. 본 실험에서 RNA의 농도는 S16 리보솜 RNA로 표준화하였다.To confirm the effect of maintaining stemness of skin stem cells cultured in Preparation Example 2, the level of p63 expression was evaluated. p63 is an intracellular transcription factor and is well known as a maintenance marker for skin stem cells. Cell RNA was isolated, cDNA was synthesized, and real-time PCR was performed using Taqman staining solution to measure the expression level of p63. In this experiment, the concentration of RNA was normalized to S16 ribosomal RNA.

상기 실험 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 하기 표 2에서 p63 증가 배수의 수치는 대조군(BPE 첨가한 CNT-57 배지) 대비 배수를 의미한다.The experimental results are shown in Table 2 below. In Table 2 below, the p63 fold increase value refers to the fold increase compared to the control group (CNT-57 medium with BPE added).

줄기세포성(stemness) 유지 효과(반복수 = 3) Effect of maintaining stemness (number of repetitions = 3) 첨가시료 Added sample 농도 density p63 증가 배수(배) p63 increase fold (fold) 작두콩 추출물Pea Extract 5 ㎍/mL5 ㎍/mL 2.542.54 대조군 control group - - 1.0 1.0

표 2에 나타난 바와 같이, 작두콩 추출물을 처리한 배지 조건은 피부줄기세포의 p63 발현을 촉진하여 줄기세포성 유지 효과가 우수하다.As shown in Table 2, the medium conditions treated with pea extract promote the expression of p63 in skin stem cells and have an excellent effect of maintaining stem cell properties.

제제예example 1: 의약 제제의 제조 1: Preparation of pharmaceutical preparations

1. 정제의 제조1. Preparation of tablets

작두콩 추출물 0.2㎎Pea extract 0.2mg

옥수수전분 100㎎Corn starch 100mg

유 당 100㎎Lactose 100mg

스테아린산 마그네슘 2㎎ Magnesium stearate 2mg

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.After mixing the above ingredients, tablets were manufactured by tableting according to a conventional tablet manufacturing method.

제제예example 2: 화장품의 제조 2: Manufacturing of cosmetics

1. 영양크림의 제조1. Manufacturing of nutritious cream

하기 조성과 같이, 작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.As shown in the composition below, a nutritional cream containing pea extract as an active ingredient was prepared according to a conventional method.

작두콩 추출물 0.2중량%Pea extract 0.2% by weight

베타-1,3-글루칸 5.0 중량%Beta-1,3-glucan 5.0% by weight

밀납 10.0 중량%Beeswax 10.0% by weight

폴리솔베이트60 1.5 중량%Polysorbate 60 1.5% by weight

피이지 60 경화피마자유 2.0 중량%PEG 60 hydrogenated castor oil 2.0% by weight

솔비탄세스퀴올레이트 0.5 중량%Sorbitan sesquioleate 0.5% by weight

유동파라핀 10.0 중량%Liquid paraffin 10.0% by weight

스쿠알란 5.0 중량%Squalane 5.0% by weight

카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 중량%Caprylic/capric triglyceride 5.0% by weight

글리세린 5.0 중량%Glycerin 5.0% by weight

부틸렌글리콜 3.0 중량%Butylene glycol 3.0% by weight

프로필렌글리콜 3.0 중량%Propylene glycol 3.0% by weight

트리에탄올아민 0.2 중량%Triethanolamine 0.2% by weight

방부제 0.05 중량%Preservative 0.05% by weight

색소 0.05 중량%Pigment 0.05% by weight

향료 0.05 중량%Fragrance 0.05% by weight

정제수 to 100 중량%Purified water to 100% by weight

제제예example 3: 피부 외용제의 제조 3: Preparation of external skin preparations

1. 연고의 제조1. Preparation of ointment

하기 조성과 같이, 작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 연고를 통상의 방법에 따라 제조하였다.As shown in the composition below, an ointment containing pea extract as an active ingredient was prepared according to a conventional method.

작두콩 추출물 0.5 중량%Pea extract 0.5% by weight

베타-1,3-글루칸 10.0 중량%Beta-1,3-glucan 10.0% by weight

밀납 10.0 중량%Beeswax 10.0% by weight

폴리솔베이트60 5.0 중량%Polysorbate 60 5.0% by weight

피이지 60 경화피마자유 2.0 중량%PEG 60 hydrogenated castor oil 2.0% by weight

솔비탄세스퀴올레이트 0.5 중량%Sorbitan sesquioleate 0.5% by weight

바셀린 5.0 중량%Vaseline 5.0% by weight

유동파라핀 10.0 중량%Liquid paraffin 10.0% by weight

스쿠알란 5.0 중량%Squalane 5.0% by weight

쉐어버터 3.0 중량%Shea butter 3.0% by weight

카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 중량%Caprylic/capric triglyceride 5.0% by weight

글리세린 10.0 중량%Glycerin 10.0% by weight

프로필렌글리콜 10.2 중량%Propylene glycol 10.2% by weight

트리에탄올아민 0.2 중량%Triethanolamine 0.2% by weight

방부제 0.05 중량%Preservative 0.05% by weight

색소 0.05 중량%Pigment 0.05% by weight

향료 0.05 중량%Fragrance 0.05% by weight

정제수 to 100 중량%Purified water to 100% by weight

Claims (7)

작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for skin regeneration containing pea extract as an active ingredient.
제1항에 있어서,
작두콩 추출물은 작두콩을 물 및 유기용매로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 추출하여 얻으며, 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 5의 저급 알코올, 에틸아세테이트, 또는 아세톤을 포함하는 극성용매; 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산 또는 디클로로헥산을 포함하는 비극성용매; 또는 이들의 혼합용매인, 피부 재생용 화장료 조성물.
According to paragraph 1,
The soybean extract is obtained by extracting the soybeans with one or more selected from the group consisting of water and an organic solvent, wherein the organic solvent includes a polar solvent including a lower alcohol having 1 to 5 carbon atoms, ethyl acetate, or acetone; Nonpolar solvents including ether, chloroform, benzene, hexane, or dichlorohexane; Or a cosmetic composition for skin regeneration, which is a mixed solvent thereof.
작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생용 식품 조성물.
A food composition for skin regeneration containing pea extract as an active ingredient.
제3항에 있어서,
작두콩 추출물은 작두콩을 물 및 유기용매로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 추출하여 얻으며, 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 5의 저급 알코올, 에틸아세테이트, 또는 아세톤을 포함하는 극성용매; 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산 또는 디클로로헥산을 포함하는 비극성용매; 또는 이들의 혼합용매인, 피부 재생용 식품 조성물.
According to paragraph 3,
The soybean extract is obtained by extracting the soybeans with one or more selected from the group consisting of water and an organic solvent, wherein the organic solvent includes a polar solvent including a lower alcohol having 1 to 5 carbon atoms, ethyl acetate, or acetone; Nonpolar solvents including ether, chloroform, benzene, hexane, or dichlorohexane; Or a food composition for skin regeneration, which is a mixed solvent thereof.
작두콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 상처 치유용 약학적 조성물.A pharmaceutical composition for healing skin wounds containing pea extract as an active ingredient. 삭제delete 삭제delete
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