JP4587710B2

JP4587710B2 - 抗菌剤組成物

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Publication number: JP4587710B2
Application number: JP2004165566A
Authority: JP
Inventors: 戸川　　真; 秀樹増田
Original assignee: Ogawa and Co Ltd
Current assignee: Ogawa and Co Ltd
Priority date: 2004-06-03
Filing date: 2004-06-03
Publication date: 2010-11-24
Anticipated expiration: 2024-06-03
Also published as: JP2005343823A

Description

本発明は特定の植物の種子抽出物を含有する抗菌剤組成物に関する。

飲食品、医薬品、口腔衛生剤、化粧品など、生体が直接摂取又は使用する製品の分野では、食中毒、感染症および製品の変敗等の原因となる微生物を制御することは極めて重要である。特に飲食品などの生体が経口摂取する製品の製造においては、微生物制御は最大の課題であり、その手段として最も一般的に用いられる方法は加熱による殺菌である。しかし、この方法は飲食品等そのものへの影響も大きく、加熱による褐変化や風味及び栄養成分の損失により、飲食品等の価値低下を招くことが多い。特に耐熱性を有する芽胞形成細菌においては、栄養細胞状態での殺菌は可能であるが、胞子の状態では耐熱性が高いため、通常の加熱殺菌よりも高温での殺菌が必要となり、飲食品への加熱の影響はさらに大きくなる。

また、飲食品等の保存、品質保持を目的として、例えばソルビン酸、安息香酸及びその塩類、パラオキシ安息香酸エステル（パラベン）類等の合成保存料や、わさびのような香辛料抽出物、柑橘種子抽出物、茶抽出物、孟宗竹抽出物、ポリリジン、キトサン、ヒノキチオール等の抗菌、殺菌作用を有する天然物など、抗菌作用を有するさまざまな物質が保存料や日持ち向上剤等として使用されている。近年は特に消費者の安全志向の高まりから、合成保存料の使用は敬遠され、天然物の使用が好まれる傾向にある。

芽胞形成細菌に対する殺菌、増殖抑制に関しても、コーヒー生豆を発酵させて得た発酵液を有効成分とすることを特徴とする耐熱性芽胞形成細菌増殖抑制剤（特許文献１）、インドネシア産の植物の溶媒抽出物を有効成分とする抗菌剤（特許文献２）、超高圧殺菌処理とユリ科植物エキスによる胞子殺菌処理とを併用することにより生菌と胞子の双方を殺菌する芽胞形成菌の殺菌方法（特許文献３）といった、天然由来の物質を用いた殺菌、抗菌剤等が提案されている。また、本発明者らもバンレイシ属等に属する植物の果皮の溶媒抽出物を含有する抗菌剤組成物（特許文献４）を提案している。

しかし、天然物はそれ自身が特有のにおいや味、色を有している場合があり、使用できる飲食品等が限定されることも多い。また、保存料として使用できる天然物はまだ種類も少なく、特に芽胞形成細菌に対して有効なものは上記従来技術など、ごく少数が知られているに過ぎない。このため、細菌、特に芽胞形成細菌に対して有効であり、かつ、飲食品の風味や色など、使用する製品の品質に影響を与えることのない天然由来の抗菌剤、殺菌剤の更なる開発が望まれるところである。

特開２００１−１７８４３１号公報特開２０００−２２９８０４号公報特開平６−７０７３０号公報特開２００４−５９５２５号公報

本発明が解決しようとする課題は、微生物、特に芽胞形成細菌に対して十分な抗菌力を示すとともに、添加する飲食品等の味やにおいなどの品質に影響を与えない、新たな抗菌剤を提供することである。

本発明者らは、植物を中心とする多種多様の天然由来の成分について抗菌活性を鋭意検討した結果、フトモモ属植物のマレーフトモモの種子、ムクロジ科リュウガンの種子の溶媒抽出物が細菌、特に耐熱性芽胞形成細菌に対して高い抗菌効果を有することを見い出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、マレーフトモモ（学名：Syzygium malaccensis）の種子及び／又はリュウガン（学名：Euphoria longana）の種子の溶媒抽出物を含有することを特徴とする抗菌剤組成物であり、溶媒抽出物が、水、極性有機溶媒又はこれらの混合物で抽出して得られるものである抗菌剤組成物であり、芽胞形成細菌の増殖を抑制することを特徴とする抗菌剤組成物であり、前記抗菌剤組成物が１〜１０００ｐｐｍ添加されてなる飲食品、口腔衛生剤又は医薬品であり、前記抗菌剤組成物を飲食品、口腔衛生剤又は医薬品に１〜１０００ｐｐｍ添加することを特徴とする細菌の増殖抑制方法である。

本発明の抗菌剤組成物を飲食品等に添加することにより、細菌、特に芽胞形成細菌の増殖を抑制することができる。また、優れた抗菌性により低濃度にて効果を発揮する。また本発明の抗菌剤組成物は熱にも安定で、安全である事からさまざまな飲食品等への応用が可能である。本発明の抗菌剤組成物自体の味・においが飲食品等の本来の香味に影響を及ぼすことがないので幅広く適用することができる。

以下、本発明をさらに詳細に説明する。

（１）原材料
本発明で使用するマレーフトモモ（学名：Syzygium malaccensis）はインドから東ポリネシアの各地に広く分布しているフトモモ科フトモモ属の常緑高木であり、果実は生食の他、ジャムなどに加工されている。リュウガン（学名：Euphoria longana）は南アジア原産のムクロジ科の常緑高木で、中国南部及び台湾を中心として果肉を生食、又は加工して缶詰、乾果として食されている。本発明ではマレーフトモモ又はリュウガンの種子を使用する。マレーフトモモ及びリュウガンの種子はいずれも熱病に対する民間薬としての利用が知られているが、これらの溶媒抽出物が抗菌作用を有し、特に耐熱性の芽胞形成細菌の増殖抑制に高い効果を示すことは全く知られていない。本発明ではマレーフトモモ又はリュウガンの果実から種子のみを取り出して後述の抽出処理に付するのが好ましいが、種子の入った果実をそのまま抽出処理に付した場合でも本発明の効果を発揮できる。

（２）抽出処理
１）抽出溶媒
抽出処理に使用する溶媒は、水又は有機溶媒であり、有機溶媒は含水物であってもよい。有機溶媒としては特に制限はなく、メタノール、エタノール、プロパノール、プロピレングリコール等のアルコール類、アセトン等のケトン類、酢酸エチル等のエステル類、ジエチルエーテル等のエーテル類、ヘキサン、ヘプタン等の炭化水素類を適宜単独で、又は混合して使用することができる。アルコール類のような極性有機溶媒が好ましく、特に５０〜９５％エタノールが好ましい。
抽出に用いる溶媒の量は任意に選択できるが、一般には上記原材料１重量部に対して溶媒１〜１００重量部を使用する。

２）抽出処理方法
抽出処理方法としては、溶媒の種類、量等により種々の方法を採用することができる。例えば前記各種天然物を粉砕したものを溶媒中に入れ、浸漬法又は加熱還流法で抽出することができる。なお浸漬法による場合は加温条件下、室温又は冷却条件下のいずれであってもよい。
ついで、溶媒に不溶な固形物を除去して抽出液を得るが、固形物除去方法としては遠心分離、濾過、圧搾等の各種の固液分離手段を用いることができる。
得られた抽出液はそのままでも抗菌剤組成物として使用できるが、例えば水、エタノール、グリセリン、トリエチルシトレート、ジプロピレングリコール、プロピレングリコール等の液体希釈剤で適宜希釈して使用してもよい。またはデキストリン、シュークロース、ペクチン、キチン等を加えることもできる。これらをさらに濃縮してペースト状の抽出エキスとしても、また凍結乾燥又は加熱乾燥などの処理を行い粉末として使用してもよい。

３）精製
上記方法で得られた抽出物は、そのまま食品等に配合することができるが、さらに、脱色、脱臭等の精製処理をすることができる。精製処理には活性炭や多孔性のスチレン-ジビニルベンゼン共重合体からなる合成樹脂吸着剤などが使用できる。精製用の合成樹脂吸着剤としては例えば三菱化学株式会社製「ダイヤイオンＨＰ−２０（登録商標）」やオルガノ株式会社製「アンバーライトＸＡＤ−２（登録商標）」などが使用できる。

（３）抗菌剤組成物の調製
抗菌剤組成物は上記のとおり得られた抽出物を原材料として、例えば以下のように製剤化して使用することもできる。
一般的には有機酸、酸化防止剤、ｐＨ調整剤及び乳化剤等の各種成分を組み合わせて、水、アルコール、グリセリン、プロピレングリコール等の（混合）溶剤に適当な濃度で溶解させて（具体的には、水／エタノール、水／エタノール／グリセリン、水／グリセリン等の混合溶剤）液剤とする。また、各種成分の溶液に賦形剤（デキストリン等）を添加し噴霧乾燥によりパウダー状の製剤にすることも可能であり、用途に応じて種々の剤形を採用することができる。

（４）用法
本発明の抗菌剤組成物は飲食品等の加工段階で適宜添加することができる。添加量は抗菌剤組成物の濃度等により多少異なるが、一般的に飲食品に対して１〜１０００ｐｐｍの添加量（抽出物の固形成分として）が適当である。食品及び口腔衛生剤などの本来の香味に影響を及ぼさない閾値の範囲内で添加する観点からは１〜２００ｐｐｍが好ましく、特に１〜１００ｐｐｍが好ましい。
また、本発明の抗菌剤組成物と、一般に使用されているソルビン酸、安息香酸等の合成保存料や、わさび抽出物、茶抽出物などの天然系の保存料を併用してもよく、併用する保存料の種類及び混合割合は特に限定されるものではない。他の保存料と混合した場合の添加量については、使用する抗菌剤組成物の成分の純度、あるいは添加対象の製品の種類により異なるが、飲食品に対しては１〜１０００ｐｐｍが適当であり、特に１〜１００ｐｐｍの範囲が好ましい。

本発明の抗菌剤組成物は微生物制御が必要とされる製品に対して特に制限なく使用できる。特に耐熱性芽胞形成細菌に対し高い増殖抑制効果を示し、それ自体が味やにおいをほとんど有していないことから、経口で摂取される飲食品や医薬品、口腔内で使用される口腔衛生剤への使用が好適である。
飲食品の例としては、飲料、菓子類、油脂及び油脂加工食品、乳、乳製品などが挙げられるが（「特許庁公報周知慣用技術集（香料）第２部食品用香料（２０００）」ｐ４〜５参照）、より具体的には下記のものを挙げることができる。
飲料の例としては、コーヒー、茶、清涼飲料、乳酸菌飲料、無果汁飲料、果汁、果汁入り飲料、栄養ドリンクなどが挙げられる。
菓子類の例としては、ゼリー、プリン、ババロア、キャンディー、ビスケット、クッキー、チョコレート、ケーキ類、冷菓（アイスクリーム類、アイスキャンディー類等）、水飴、ガムなどが挙げられる。
油脂及び油脂加工食品の例としては、食用油脂（動物性油脂、植物性油脂）、マーガリン、ショートニング、マヨネーズ、ドレッシング、ハードバターなど、さらに、即席（フライ）麺類、とうふの油揚（油揚、生揚、がんもどき）、揚かまぼこ、てんぷら、フライ、スナック類（ポテトチップス、揚あられ類、かりんとう、ドーナッツ）、調理冷凍食品（冷凍コロッケ、エビフライ等）などが挙げられる。
乳、乳製品等の例としては、乳として生乳、牛乳、加工乳等、乳製品としてクリーム、バター、バターオイル、濃縮ホエー、チーズ、ヨーグルト、練乳、粉乳、濃縮乳等などが挙げられる。
口腔衛生剤の例としては、歯磨、うがい薬、口中清涼剤、口臭防止剤などが挙げられる。
医薬品の例としてはドリンク剤などの経口内服薬などが挙げられる。

以下、本発明を実施例に基づいてさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

〔抽出例１〕
インドネシア産マレーフトモモ（Syzygium malaccensis）果実種子を粉砕した後、この粉砕粉末１００ｇに５０％（Ｖ／Ｖ）エタノール１Ｌを添加し、１時間加熱還流抽出を行った。引き続き冷却後、ろ過して不溶物を除去し、ロータリーエバポレーターで減圧濃縮および乾固して、マレーフトモモ種子抽出物を８．３７gを得た。

〔抽出例２〕
インドネシア産マレーフトモモ（Syzygium malaccensis）の種子を含む果実１００ｇを９５％（Ｖ／Ｖ）エタノール１Ｌに加え粉砕した後、これをそのまま１時間加熱還流抽出を行った。引き続き冷却後、ろ過して不溶物を除去し、ロータリーエバポレーターで減圧濃縮および乾固して、マレーフトモモ果実抽出物を６．４ｇを得た。

〔抽出例３〕
インドネシア産リュウガン（Euphoria longana）果実の種子を乾燥し、粉砕した後、この粉砕粉末１００ｇに５０％（Ｖ／Ｖ）エタノール１Ｌを添加し、１時間加熱還流抽出を行った。引き続き冷却後、ろ過して不溶物を除去し、ロータリーエバポレーターで減圧濃縮および乾固して、リュウガン種子抽出物を２２．６ｇを得た。

〔抽出例４〕
活性画分を得るため抽出例１の抽出物５ｇを水に分散させ合成吸着剤（ダイヤイオンＨＰ−２０）１０００ｍＬを充填したカラムに通導し、水、５０％（Ｖ／Ｖ）エタノール、エタノール各１０００ｍＬにて順次溶出させ、各々の画分を濃縮後凍結乾燥することにより、それぞれ水画分２．３ｇ、５０％（Ｖ／Ｖ）エタノール画分２．４ｇ、エタノール画分０．２ｇが得られた。

〔試験例１〕
抽出例１から３で得られた抽出物を用い、種々の細菌に対する抗菌力を以下の実験により評価した。培地はミュラーヒントン培地（Difco社製）を用い、前記培地を高圧滅菌したものにあらかじめ前培養した被検菌を培地１ｍＬ当たり１×１０^４となるように培地に接種した。抽出物は５０％エタノールに１００００ｐｐｍとなるように溶解させ、２倍段階希釈して１００００ｐｐｍから９．８ｐｐｍまでの試験サンプルを調製した。ついでこの試験サンプルを培地に対して１／１０添加し抽出物が最終濃度で１０００ｐｐｍから０．９８ｐｐｍまで含まれた培養液を調製した。使用した被検菌はグラム陽性菌３種、グラム陰性菌２種で、２４時間、３７℃で培養後、菌の生育が認められない濃度をその抽出物のＭＩＣ（最小発育阻止濃度）として抗菌力を求めた。その結果を表1に示す。
いずれの抽出物においても高い抗菌効果示している事がわかった。

被検菌
Bacillus subtilis IFO 3134
Bacillus cereus IFO 13494
Staphylococcus aureus IFO 12732

〔試験例２〕
抽出例４で得られた各画分の抗菌力を試験例１と同様の方法により測定した。その結果を表２に示す。５０％（Ｖ／Ｖ）エタノール溶出画分にもっとも強い活性が見られた。

〔試験例３〕
（コーヒー牛乳飲料中での芽胞増殖抑制効果試験）
下記処方の滅菌済みコーヒー牛乳（ｐＨ６．８）にBacillus cereus IFO13494を１ｍＬあたり１×１０^３となるように胞子懸濁液を添加し、さらに抽出例１の抽出物をコーヒー牛乳中に１００ｐｐｍとなるように添加し密閉容器に充填し、３７℃、１８日間保存後、ｐＨを測定し保存性を評価した。また対照区として無添加のものも同時に培養した。これらの結果を下記表３に示す。

コーヒー牛乳処方
コーヒーエキス２．５
牛乳１０
砂糖６
重曹ｐＨ６．８に調製
水
total １００

対照区では１８日後に菌増殖によりｐＨは低下し、ｐＨ低下に基づく乳の凝集による沈殿が認められた。一方、添加区では１８日後のｐＨは０日後と同等レベルで菌増殖によるｐＨの低下は認められず、ｐＨ低下に基づく乳の凝集による沈殿の生成も見られなかった。以上から、抽出例１の抽出物１００ｐｐｍ添加におけるBacillus cereus IFO13494の発芽抑制効果が確認された。

〔実施例１〕１００％オレンジ果汁飲料
１／５オレンジ濃縮果汁２００ｇと蒸留水８００ｇを添加し、１００％オレンジ飲料を調製した。得られた飲料はｐH３．８、糖度１３．２であった。この飲料１００ｇに抽出例３のリュウガン種子抽出物凍結乾燥粉末を１０ｍｇ添加し、本発明の抗菌剤組成物を添加してなるオレンジ果汁飲料を作成した。このオレンジ果汁飲料は専門パネルによる評価の結果、抗菌剤組成物による異味異臭は感じられなかった。

〔実施例２〕生麺
強力粉５００ｇ、水６０ｍＬおよびかん粉５ｇを配合した基本組成に、抽出例２のマレーフトモモ種子抽出物凍結乾燥粉末を１００ｍｇ添加し、充分混合した後、製麺機により麺線を作り、沸騰水中で茹で上げ、水冷して、本発明の抗菌剤組成物を添加した生麺を作成した。この生麺は専門パネルによる評価の結果、抗菌剤組成物による異味異臭は感じられなかった。

本発明の抗菌剤組成物は、種々の細菌、特に芽胞形成細菌の増殖を抑制するとともに、味やにおいをほとんど有していないことから、さまざまな飲食品、医薬品等への応用が可能である。

Claims

リュウガン（学名：Euphoria longana）の種子の５０〜９５％エタノール水溶液抽出物を含有することを特徴とする枯草菌（Bacillus
subtilis）及び／又はセレウス菌（Bacillus cereus）の増殖を抑制する抗菌剤組成物。
請求項１記載の抗菌剤組成物が１〜１０００ｐｐｍ添加されてなる飲食品。
請求項１記載の抗菌剤組成物を飲食品に１〜１０００ｐｐｍ添加することを特徴とする細菌の増殖抑制方法。