KR20150044193A - 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품보존제, 이의 제법 및 그 조성물 - Google Patents

프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품보존제, 이의 제법 및 그 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20150044193A
KR20150044193A KR20130123264A KR20130123264A KR20150044193A KR 20150044193 A KR20150044193 A KR 20150044193A KR 20130123264 A KR20130123264 A KR 20130123264A KR 20130123264 A KR20130123264 A KR 20130123264A KR 20150044193 A KR20150044193 A KR 20150044193A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
food
propolis
extract
present
antimicrobial
Prior art date
Application number
KR20130123264A
Other languages
English (en)
Inventor
조순영
임미진
한대원
한호준
김덕기
Original Assignee
강릉원주대학교산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 강릉원주대학교산학협력단 filed Critical 강릉원주대학교산학협력단
Priority to KR20130123264A priority Critical patent/KR20150044193A/ko
Publication of KR20150044193A publication Critical patent/KR20150044193A/ko

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L21/00Marmalades, jams, jellies or the like; Products from apiculture; Preparation or treatment thereof
    • A23L21/20Products from apiculture, e.g. royal jelly or pollen; Substitutes therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/34Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
    • A23L3/3454Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23L3/3463Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A23L3/3571Microorganisms; Enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/10Preserving against microbes

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Jellies, Jams, And Syrups (AREA)

Abstract

본 발명은 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 본 발명의 프로폴리스 추출물이 오염된 식품에서 분리한 미생물과 식품의 품질을 저하시키는 미생물에 대하여 우수한 생육 억제효과를 나타냄으로써, 각종 식품의 신선도 유지에 도움을 주어 식품을 장기간 보존할 수 있는 천연 식품보존제 또는 천연 방부제로 유용하게 이용될 수 있으며 식품의 저장이나 보존상의 이점을 득할 수 있도록 하고, 합성 식품보존제를 대신 기능을 제공하고자 하는 것이다.

Description

프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품보존제, 이의 제법 및 그 조성물 {A composition comprising an Propolis extract as food preservatives, and the preparation thereof}
본 발명은 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품보존제, 이의 제조방법에 관한 것이다.
[문헌 1] Greenaway W, May J, Scaysbrook T and Whatley FR. 1991. Identification by gas chromatography-mass spectroscopy of 150 compounds in propolis. Zeitschrift fuer Naturforschung Teil. C46: 111-121.
[문헌 2] Scazzocchio F, D'Auria FD, Alessandrini D and Pantanella F. 2006. Multifactorial aspects of antimicrobial activity of propolis. Microbiological Research 161: 327-333
[문헌 3] Park EH, Kim SH, Park SS. 1996. Antiinflammatory activity of propolis. Arch Pham Res 19: 337-341
[문헌 4] Chiao C, Carothers AM, Grunberger D, Solomon G, Preston A, Barrett JC. 1995. Apotosis and altered redox state induced by caffeic and phenethyl ester(CAPE) in transformed rat fibroblast cell. Cancer Res 55: 3576-3683
[문헌 5] Folin O, Denis W. 1912. On phosphotungastic-phosphomolybdic compounds as color reagent. J Biol Chem 12: 239-243
[문헌 6] Bios MS. 1958. Antioxidant determinations by the use of a stable free radical.Nature 26(4):1199-1200.
식품첨가물이란 가공식품에 특별한 목적을 가지고 사용되는 것으로서 각 첨가물별로 용도가 정해져 있다. 최근소비자의 건강지향적 성향과 함께 천연물에 대한 요구가 높아지고 있고 합성보존료가 첨가된 식품의 사용을 꺼리고 있으며 이와 같은 경향으로 인하여 식품산업계에서도 인공합성보존제의 사용을 될 수 있는 한 제한하려는 추세이다. 전세계 살균제시장은 2008년 기준 약500billion 유로로 추정되며 국내 살균제 시장은 2004년 250억2원 규모로 성장속도를 고려할 때 2010년 500억5원으로 예상되어 지고 있다.
천연물소재를 활용하는 천연식품보존제 개발기술은 현재 국내적으로 미약한 상황으로 안정성과 기능성을 지니는 천연식품보존제를 개발하고 상품화함으로써 기존 보건의료시장에서 뒤떨어진 국내기술을 농업분야에서 만회하는 한편 세계시장에서 우위를 점할수 있는 천연물활용기술개발의 연구가 더욱이 필요한 실정이며, 식중독원인 미생물이나 부패미생물을 제어하여 식품을 안전하게 장기간 저장하기 위한 수단으로 식품에 적용 가능한 천연항균물질에 대한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 그러나 이들 중에는 특유의 맛과 냄새자극성으로 인하여 식품에 적용하기 위해서는 관능적 측면에서 해결되어야 할 문제가 남아있는 것도 있고 항균력이 약하거나 항균스펙트럼이 좁아 아직까지 천연항균제로 개발되어 상품화된 제품은 극히 일부이며, 천연성, 안전성 및 복합적인 건강유효성이 겸비된 항균소재의 개발이 비가열식품에서의 식중독제어를 위해 기술개발이 필요한 실정이다.
최근 소비자의 건강지향적 성향과 함께 천연물에 대한 요구가 높아지고 있고 합성보존료가 첨가된 식품의 사용을 꺼리고 있으며 이와 같은 경향으로 인하여 식품산업계에서도 인공합성보존제의 사용을 될 수 있는 한 제한하려는 추세이다. 전세계 살균제시장은 2008년 기준 약 500billion 유로로 추정되며 국내 살균제 시장은 2004년 250억2원 규모로 성장속도를 고려할 때 2010년 500억5원으로 예상되어 지고 있다.
천연 기능성 물질들 가운데 프로폴리스는 꿀벌에 의해 나무나 식물로부터 수집하는 왁스 성분을 비롯한 식물이 자체적인 생존과 성장을 위해 생성하는 물질들과 꿀벌의 침샘 분비물이 혼합된 천연 수지성, 점착성, 고무상의 물질로, 고대에는 민간의약품으로 널리 이용되어 왔으며(Greenaway W, May J, Scaysbrook T and Whatley FR. 1991. Identification by gas chromatography-mass spectroscopy of 150 compounds in propolis. Zeitschrift fuer Naturforschung Teil. C46: 111-121.: Scazzocchio F, D'Auria FD, Alessandrini D and Pantanella F. 2006. Multifactorial aspects of antimicrobial activity of propolis. Microbiological Research 161: 327-333), 최근 국내의 경우 2005년 식품의약품안전청에서 고시한 건강기능식품들 가운데 이와 관련된 다양한 상품화가 진행되고 있다.
프로폴리스는 항염증(Park EH, Kim SH, Park SS. 1996. Antiinflammatory activity of propolis. Arch Pham Res 19: 337-341), 항암작용(Chiao C, Carothers AM, Grunberger D, Solomon G, Preston A, Barrett JC. 1995. Apotosis and altered redox state induced by caffeic and phenethyl ester(CAPE) in transformed rat fibroblast cell. Cancer Res 55: 3576-3683.)등이 알려진 바가 있다.
폴리페놀은 phenolic hydroxyl을 2개 이상 갖고 있는 방향족 화합물로 우리 몸에 있는 활성산소를 중화시키고, 항암, 황산화, 항균활성과 같은 생리활성 기능을 가지는 물질로 보고되고 있다.
이에 본 발명자들은 본 발명의 프로폴리스 추출물이 항 그램양성균인 B. cereusS. aureus 등에 우수한 항균활성을 나타내고 높은 폴리페놀함량 및 높은 플라보노이드 함량을 나타냈으며, 강력한 항산화능을 DPPH radical 소거능 시험을 통하여 확인함으로서, 식품의 보존을 위한 천연 소재로 사용할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 상기 종래기술의 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명은 강한 항균활성을 가지는 천연물 유래 항균물질을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한 본 발명은 인체에 안전하며, 거부감없이 식품으로 섭취할 수 있는 천연물 유래 항균물질을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한 본 발명은 식중독 유발식품에 용이하게 첨가하여 식중독 발병을 예방할 수 있는 천연물 유래 항균물질을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 항균 조성물을 제공한다.
본원에서 정의되는 천연 항균 조성물은 바람직하게는 식중독균, 구체적으로는 에스케리레키아 콜리(Escherichia coli), 살모넬라 (Salmonella typhi.) 등의 그램음성균, 바실러스 세레우스(Bacillus cereus)와 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 등의 그램양성균, 바람직하게는, 바실러스 세레우스(Bacillus cereus)와 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 등의 그램양성균에서 강력한 항균활성을 나타냄을 특징으로 한다.
또한, 본원에서 정의되는 천연 항균 조성물은 식품보존제, 식품부패방지제 또는 식품 살균제를 포함한다.
또한 본 발명은 프로폴리스 부피 대비 약 1 내지 10배, 바람직하게는, 약 2 내지 8배 부피의 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로, 바람직하게는 물 또는 물 및 에탄올을 첨가하여, 가열추출법, 초음파 추출법, 환류 추출법 등의 통상적인 추출방법, 바람직하게는 초음파 추출법으로 약 10 내지 80℃, 바람직하게는 20 내지 50℃의 반응온도에서 약 30분 내지 5시간, 바람직하게는 1 시간 내지 2시간 동안 초음파 추출법으로 1 내지 10회, 바람직하게는 1 내지 5회 반복 추출하는 제 2단계; 상기 단계에서 수득한 추출액을 여과하여 감압 농축하는 제 3단계; 상기 농축된 추출물을 동결 건조하는 제 4단계의 제조방법을 포함하는 본 발명의 프로폴리스 추출물을 제조하는 제조방법을 제공한다.
본원에서 정의되는 추출물의 천연 식품보존제 조성물은 식품 총 중량에 대하여 0.1 내지 50 중량%, 바람직하게는 1 내지 30%중량%로 사용함을 특징으로 한다.
이하, 본 발명의 추출물을 수득하는 방법을 상세히 설명한다.
본 발명의 프로폴리스 추출물은 프로폴리스에 프로폴리스 부피 대비 약 1 내지 10배, 바람직하게는, 약 2 내지 8배 부피의 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로, 바람직하게는 물 또는 물 및 에탄올을 첨가하여, 가열추출법, 초음파 추출법, 환류 추출법 등의 통상적인 추출방법, 바람직하게는 초음파 추출법으로 약 10 내지 80℃, 바람직하게는 20 내지 50℃의 반응온도에서 약 30분 내지 5시간, 바람직하게는 1 시간 내지 2시간 동안 초음파 추출법으로 1 내지 10회, 바람직하게는 1 내지 5회 반복 추출하는 제 2단계; 상기 단계에서 수득한 추출액을 여과하여 감압 농축하는 제 3단계; 상기 농축된 추출물을 동결 건조하는 제 4단계의 제조방법을 포함하는 단계를 통하여 제조함을 특징으로 한다.
상기 제조방법으로 제조된 프로폴리스 추출물은 E. coli , Salmonella typhi . 등의 그램음성균뿐만 아니라 B. cereusS. aureus 등의 그램양성균에서 강력한 항균활성을 나타냈으며, 높은 폴리페놀함량 및 높은 플라보노이드 함량을 나타냈고 우수한 항산화능을 나타냄을 확인하였다.
따라서, 본 발명은 상기 제조방법으로 제조된 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 항균 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품 또는 식품 첨가제를 제공한다.
또한 본 발명은 상기 항균조성물을 0.5 내지 20 중량%로 포함하는 식품을 제공한다.
본 발명의 항균조성물은 바람직하기로는 식중독균에 대하여 항균활성을 가지는 것이다. 항균조성물은 상기 추출물을 단독으로 포함할 수 있으며, 그 외 약리학적으로 허용 가능한 물질을 더욱 포함할 수 있다. 상기 약리학적으로 허용가능한 물질은 기존 항균제 또는 살균제일 수 있으며, 희석제 또는 부형제일 수 있다.
기존 항균제의 일예로는 라이소자임, 폴리라이신, 프로타민, 콘알부민, 아비딘 등의 단백질과, 아세트산, 밴조익산, 알레익산 및 숙시닉산 등의 유기산, 팩틴분해물, 갈변반응물질, 저급지방산 에스테르 또는 향신료가 있다.
본 발명의 항균조성물은 바람직하기로는 상기 추출물을 0.1 내지 50 중량%로 포함하나, 상기 함량은 첨가물의 종류나 항균조성물의 제형에 따라 적절히 조절할 수 있다. 항균조성물의 제형은 사용목적에 따라 적절히 조절할 수 있으며, 적용가능한 대표적인 제형으로는 과립제, 산제, 시럽제, 액제, 에어로솔제, 유제, 현탁제 또는 주정제이다.
또한 본 발명의 항균조성물은 주정, 에탄올, 메탄올, 시판되는 알콜계 소독제 등의 알콜계 소독제를 더욱 포함할 수 있다. 본 발명의 추출물은 알콜계 소독제와 함께 사용할 경우 항균활성이 현저히 향상되는 시너지 효과를 가지므로, 항균조성물에 알콜계 소독제를 추가로 포함하여 항균효과를 극대화시킬 수 있다. 최적의 시너지 효과를 가지는 바람직한 비율은 본 발명의 추출물 대 알콜계 소독제가 1:99 내지 1:4 중량비로 혼합되는 것이며, 상기 중량비 범위를 벗어날 경우 시너지 효과가 거의 없거나, 효과대비 비경제적일 수 있다. 상기 알콜계 소독제는 바람직하기로는 에탄올이다.
본 발명의 항균조성물은 인체에 무해하여 식품보존제나 식품부패방지제 또는 식품살균제로 사용할 수 있으며, 유효성분인 본 발명의 추출물이 열에 안정하여 식품가공 이전에 처리하므로써 작업성이 매우 우수하다.
또한 본 발명은 항균조성물을 포함하는 식품을 제공한다. 상기 식품은 항균조성물은 0.5 내지 20 중량%로 포함할 수 있으며, 상기 항균조성물의 함량이 0.5 중량% 미만인 경우 식품의 항균활성이 미비할 수 있으며, 20 중량%초과하는 경우 사용량 대비 효과가 증가되지 않으므로 비경제적일 수 있다.
본 발명의 추출물은 기타 식품의 주, 부원료 및 식품첨가제로서 사용이 가능하다.
또한, 본 발명은 식품보존제를 식품에 갈변방지제나 항산화제, 미생물생장억제제, 살균제, 향신료, 조미제, 방부제 등으로의 식품에의 이용방법을 제공한다. 이때 식품보존제는 식품을 침지, 분무 또는 혼합하여 상기 식품에 첨가할 수 있으며, 이러한 보존제의 비율은 0.01 %~10 %의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이때 상기 조성물은 식품에 침지, 분무 또는 혼합하여 식품에 첨가할 수 있으며, 이러한 첨가 비율은 0.01 % ~10 %의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 상기 식품은 과일, 야채, 과일이나 야채의 건조제품이나 절단제품, 과일쥬스, 야채쥬스, 이들의 혼합쥬스이거나 칩류, 면류, 축산가공식품, 수산가공식품, 유가공식품, 발효유식품, 곡류식품, 미생물발효식품, 제과제빵, 양념류, 육가공류,산성음료수, 감초류, 허브류 중 어느 하나 이상을 포함한다.
본 발명의 추출물의 바람직한 적용량은 식품보존제를 사용해야 하는 식품의 중량, 제형, 유통기한 등에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
본 발명의 프로폴리스 추출물을 함유하는 식품첨가물 중 천연보존료는 오염된 식품으로부터 분리된 다양한 종의 미생물에 대한 항균성을 나타냄으로, 이를 함유한 천연 식품보존료는 우수한 항균력, 방부력 및 보존력의 효과를 발휘하여 종래의 합성 식품보존료를 대체할 수 있을 것이다.
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예, 참고예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
참고예 1. 프로폴리스 추출물의 제조
1-1. 재료
추출에 사용된 프로폴리스는 강릉시 소재 초록마을에서 구입하였고 추출에 사용된 용매로 Dae Jung사 에탄올 99.5%를 구매하여 사용하였다. 대조군으로는 농협에서 꿀을 구입하여 사용하였다.
1-2. 프로폴리스 추출액 제조
프로폴리스와 에탄올을 1:5(프로폴리스:에탄올) 비율로 교반 후 초음파 추출기(sonication, JACOS)을 이용하여 45℃에서 1시간 초음파추출을 하였다. 추출한 1:5(프로폴리스:에탄올) 용액을 감압여과하여 여과한 여액을 감압농축기(rotor; buchi B-510)로 감압농축하여 에탄올이 완전 증발할때까지 농축시킨다.
실험예 1. 항균 효능 평가
상기 실시예에서 제조된 프로폴리스 추출물의 오염된 식품에 대한 항균 효과는 문헌에 개시된 디스크 확산법(Paper disk diffusion method)를 이용하여 하기와 같이 실험을 평가하였다.
각 균주 1 백금이를 취하여 10mL의 Lactose broth에 접종하고 30∼37℃에서 배양하여 활성화시켰다. 이 활성된 균주 100를 Lactose agar 배지에 도말하였다. 균이 흡수되면 paper disc(8.0mm, Advantec, Toyo Roshi Kaisha, Japan)를 배지위에 올리고 농도별로 조제한 시료를 각각 흡수시켜서 24시간동안 배양하였다. 그 후 disc 주위의 inhibition zone의 직경(mm)을 측정하였다. (표 1 참조)
사용 균주 및 배양조건
Indicator strains Media Temp(℃)
Gram (+) Staphylococcus aureus ATCC 144458 LB 37
Listeria monocytogenes ATCC 19111 LB 30
Bacillus cereus ATCC 14579 LB 30
Gram (-) Escherichia coli ATCC 25922 LB 37
Salmonella typhimurium KCTC 1925 NA 37
각 균에 대한 각각 추출물의 대한 효과는 표 2에 나타난 바와 같다. 각 균의 농도를 0.4 O/D 맞추어 배지에 24~48시간 배양 후 프로폴리스 추출액의 항균성 확인을 위하여 대조군으로 꿀을 사용하여 비교 분석해보았다. 각각의 추출액은 ethanol 99.5%로 10,000ppm으로 희석하여, 사용하였다. 각각의 추출액의 항균성은 표2와 같다. 꿀의 chloroform과 ethanol 추출액에서는 모든 균에서 항균활성이 나타나지 않았으나 프로폴리스 chloroform에서는 B. cereus S. aureus에 각각 14mm, 13mm의 균의 생육을 저해하는 항균활성을 나타냈으며, ethanol 추출액에서는 B. cereus S. aureus에 각각 14mm, 15mm의 균의 생육을 저해하는 항균활성을 나타내었다. 이것으로 보아 그램음성균인 E. coli , Salmonella typhi . 보다는 항 그램양성균인 B. cereusS. aureus에서 좋은 항균활성을 나타내었다. 이러한 식중독 원인균에 대한 저해기작을 추가적인 연구를 통하여 도출해내어 천연항균제로서 이용도 가능하리라 사료된다. (표 2 참조)
Antimicrobial activities of propolis at each micorobia ( Unit : mm )
sample Diameter(mm) of inhibitory clear zone
B. cereus S. aureus Salmonella typhi . L. monocytogenes E. coli

(chloroform)
N.D* N.D* N.D* N.D* N.D*

(Ethanol)
N.D* N.D* N.D* N.D* N.D*
Propolis
(chloroform)
14 13 N.D* N.D* N.D*
Propolis
(Ethanol)
14 15 N.D* N.D* N.D*
Control
(Ethanol)
N.D* N.D* N.D* N.D* N.D*
실험예 2. 총 폴리페놀 함량 측정
상기 실시예에서 제조된 프로폴리스 추출물의 총 폴리페놀 함량 측정은 문헌에 개시된 AOAC의 Folin-Denis(13)법을 일부 변형하여 비색 정량하여 하기와 같이 실험을 평가하였다.(Folin O, Denis W. 1912. On phosphotungastic-phosphomolybdic compounds as color reagent. J Biol Chem 12: 239-243.)
각각의 프로폴리스 및 대조군으로 이용할 추출물을 10mg/mL의 농도로 만든 후, 시료 0.4mL에 증류수 3mL, Folin-Ciocalteu reagent 0.2mL을 넣은 후 saturated sodium carbonate 0.4mL를 첨가하여 혼합한 후, 실온에서 1시간 정치한 뒤 분광광도계(Jasco, JP/V-550)fmf 이용하여 725nm에서 흡광도를 측정하였다. Gallic acid를 이용한 표준곡선은 Gallic acid 0.01g을 증류수에 녹이고 최종농도가 0, 10 , 20, 40, 60, 100, 150mg/L 용액이 되도록 조제하고 이를 일정량 취하여 위와 같은 방법으로 725nm에서 흡광도를 측정하여 계산하였다. 추출물의 총 폴리페놀함?은 g당 mg gallic acid로 나타내었다.
본 실험에는 프로폴리스 ethanol추출물과 대조군으로 폴리페놀을 많이 가지는 시료 4가지와 비교 분석하여 표 3에 나타내었다. 1000ppm으로 희석하여 UV spectra meter로 측정한 결과 꿀에서는 폴리페놀함량이 0.58ug/mL 가장 낮에 나타났고, 와사비와 푸코이단도 5.00ug/mL 이하로 낮게 나타났다. 이에 반해 아로니아베리는 61.20ug/mL 그리고 프로폴리스는 91.18로 가장 높은 폴리페놀함량을 나타냈다.
Total polyphenol contents in propolis. (단위: ug/mL)
Sample 폴리페놀 함량
control 0.10±0.04
0.58±0.04
푸코이단 4.09±0.13
와사비 2.60±0.13
프로폴리스 91.18±1.35
아로니아베리 61.20±1.63
Values are mean±SD (n=3).
a- cValues with the same letter are not significantly different(p<0.05).
실험예 3. 총 플라보노이드 함량 측정
상기 실시예에서 제조된 프로폴리스 추출물의 플라보노이드 함량 측정은 문헌에 개시된 Moreno 등의 방법을 일부 변형하여 비색 정량하여 하기와 같이 실험을 평가하였다.(Folin O, Denis W. 1912. On phosphotungastic-phosphomolybdic compounds as color reagent. J Biol Chem 12: 239-243.)
프로폴리스 및 대조군으로 사용할 추출물 0.5mL에 10% aluminum nitrate 0.1mL, 1M potassium acetate 0.1mL 및 ethanol 4.3mL를 차례로 가하여 혼합하고 실온에서 40분간 정치한 다음 415nm에서 흡광도를 측정하였다. Quercetin(Sigma Co., USA)을 표준물질로 하여 0~100ug/mL 농도 범위에서 얻어진 표준 검량선으로부터 추출물의 총 플라보노이드 함량을 계산하였다.
식물에 널리 분포되어 있는 플라보노이드 역시 최근 많은 연구에서 밝혀지고 있다. 꿀에서는 플라보노이드 함량이 control 보다 낮게 나타나 거의 존재하지 않는 것으로 나타났다. 푸코이단은 플라보노이드 함량이 151.28ug/mL로 폴리페놀에 비해서 많은 함량을 나타냈고, 폴리페놀을 많이 가진 아로니아베리와 프로폴리스도 각각 197.00ug/mL, 457.09ug/mL로 높은 플라보노이드 함량을 나타냈는데, 그 중에서도 프로폴리스가 월등히 높은 플라보노이드 함량을 나타냈다.(표 4 참조)
Total Flavonoid contents in propolis. (단위: ug/mL)
Sample 플라보노이드 함량
control 0.10±0.01
0.00±0.00
푸코이단 151.28±1.81
와사비 60.69±2.17
프로폴리스 457.09±2.67
아로니아베리 197.00±10.54
Values are mean±SD (n=3).
a- cValues with the same letter are not significantly different(p<0.05).
실험예 4. 항산화능 측정
상기 실시예에서 제조된 프로폴리스 추출물의 항산화능 문헌에 개시된 전자공여능(Electron donating ability, EDA)에 관한 Blois (1958) 방법의 방법을 일부 변형하여 비색 정량하여 하기와 같이 실험을 평가하였다.(Bios MS. 1958. Antioxidant determinations by the use of a stable free radical.Nature 26(4):1199-1200)
각 시료 용액 100ml에 0.15mM로 에탄올 희석한 2,2-diphenyl-2-picrythydrazyl (DPPH) 용액 100mL 넣고 교반한 후 30분간 방치한 다음 분광광도계를 이용해 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 차이를 백분율로 나타내었다. 대조군으로는 gallic acid를 사용하였다.
전자공여능은 항산화 측정에 대표적으로 쓰이는 방법이다. DPPH는 항산화활성을 측정하기 위한 기질로 사용되고, phenol, flavonoid와 같은 페놀성 물질에 대한 항산화작용의 지표라고 알려져 있으며, 유리 라디칼에 전자를 공여하여 식품 중의 지방산화를 억제하고 인체 내 노화를 억제시키는 작용을 한다. 각 추출물의 DPPH radical 소거능은 표 5와 같다. 각각의 추출물을 100ppm으로 ethanol 99.5%를 이용하여 희석하여 사용하였으며, 대조군으로 꿀을 사용하였고 control로는 희석한 용매인 ethanol을 사용하였다. 꿀에서는 추출용매를 희석한 ethanol보다 DPPH radical 소거능이 더 낮게 나타났으며, 항산화효과가 거의 없는 것으로 확인되었다. 이에 반해 프로폴리스 ethanol 추출액의 DPPH radical 소거능은 0.65 O/D로 높은 항산화능을 나타내었다.
The contents of total phenol, and DPPH free radical scavenging activity in the Propolis. (단위:O/D)
Sample DPPH free radical scavenging activity
control 2.38±0.00
2.46±0.00
푸코이단 2.30±0.00
와사비 2.39±0.00
프로폴리스 0.65±0.00
아로니아베리 0.35±0.00

Claims (5)

  1. 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 항균 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 천연 항균 조성물은 식품보존제, 식품부패방지제 또는 식품 살균제인 조성물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 항균 활성은 에스케리레키아 콜리(Escherichia coli), 살모넬라 (Salmonella typhi.), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus), 또는 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus)균에 항균활성을 나타냄을 특징으로 항균 조성물.
  4. 프로폴리스 부피 대비 1 내지 10배 부피의 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매를 첨가하여, 초음파 추출법으로 10 내지 80℃의 반응온도에서 30분 내지 5시간 동안 초음파 추출법으로 1 내지 10회 반복 추출하는 제 2단계; 상기 단계에서 수득한 추출액을 여과하여 감압 농축하는 제 3단계; 상기 농축된 추출물을 동결 건조하는 제 4단계의 제조방법을 포함하는 제 1항의 프로폴리스 추출물을 제조하는 제조방법.
  5. 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품 또는 식품 첨가제.
KR20130123264A 2013-10-16 2013-10-16 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품보존제, 이의 제법 및 그 조성물 KR20150044193A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20130123264A KR20150044193A (ko) 2013-10-16 2013-10-16 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품보존제, 이의 제법 및 그 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20130123264A KR20150044193A (ko) 2013-10-16 2013-10-16 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품보존제, 이의 제법 및 그 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20150044193A true KR20150044193A (ko) 2015-04-24

Family

ID=53036539

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR20130123264A KR20150044193A (ko) 2013-10-16 2013-10-16 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품보존제, 이의 제법 및 그 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20150044193A (ko)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102149215B1 (ko) * 2019-12-12 2020-08-31 주식회사 바이오포스 수밀력 향상을 위한 꿀벌 사양액용 조성물 및 그의 제조방법
WO2020076259A3 (en) * 2018-10-12 2021-02-04 Sbs Bi̇li̇msel Bi̇o Çözümler Sanayi̇ Ve Ti̇caret A.Ş. Chocolate consisting of propolis extract and a method for its production

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020076259A3 (en) * 2018-10-12 2021-02-04 Sbs Bi̇li̇msel Bi̇o Çözümler Sanayi̇ Ve Ti̇caret A.Ş. Chocolate consisting of propolis extract and a method for its production
KR102149215B1 (ko) * 2019-12-12 2020-08-31 주식회사 바이오포스 수밀력 향상을 위한 꿀벌 사양액용 조성물 및 그의 제조방법

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Chan et al. Antioxidant and antibacterial properties of some fresh and dried Labiatae herbs
RU2721055C1 (ru) Антимикробные композиции
KR101759776B1 (ko) 로즈마리 조성물을 함유하는 천연보존료의 제조방법
RU2721277C1 (ru) Антимикробные композиции
US20120141390A1 (en) Natural Preservatives and Antimicrobial Agents
Cordery et al. Antimicrobial Activities of Essential Oils, Plant Extracts and their Applications in Foods-A
Medina et al. Effect of antimicrobial compounds from olive products on microorganisms related to health, food and agriculture
Sahari et al. Effects of plants bioactive compounds on foods microbial spoilage and lipid oxidation
EP1867699B1 (en) Deterioration preventing agent
Gengatharan et al. The application of clove extracts as a potential functional component in active food packaging materials and model food systems: A mini-review
KR101678500B1 (ko) 오배자 추출물을 유효성분으로 하는 천연 식품 보존제 및 이의 제조방법과 그 조성물
Saleh et al. Vital Value of Coriander and Fennel Volatile Oils on Quality Beef Burger During Cryopreservation
KR20150044193A (ko) 프로폴리스 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품보존제, 이의 제법 및 그 조성물
Sultanbawa Food preservation and the antimicrobial activity of Australian native plants
Ştefănescu et al. Short period storage impact on bioactive constituents from bilberries and blueberries
KR100876667B1 (ko) 육두구, 육계 및 양강 혼합 추출물 또는 이로부터 분리한항균 활성 분획물, 이의 제조방법 및 이의 용도
JP4587710B2 (ja) 抗菌剤組成物
Aly Utilization of pomegranate peels to increase the shelf life of chicken burger during cold storage
KR101175693B1 (ko) 백작약 추출물, 육계 추출물 및 오배자 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 식품 보존제
Adris et al. Antioxidant and antimicrobial activities of Rosmarinus officinalis L. growing naturally in El-Jabal El-Akhdar Province–Libya and its Effect on keeping quality of Cold Serola Dumeriri Fillets
KHERRAZ et al. ESTIMATION OF TOTAL PHENOLIC AND FLAVONOIDS CONTENT AND ANTI-FREE RADICAL SCAVENGER, ANTIBACTERIAL AND ANTIFUNGAL ACTIVITIES OF EXTRACT OF Matricaria pubescens (DESF.) SCH. BIP. COLLECTED FROM SOUTH EAST OF ALGERIA.
KR102560979B1 (ko) 카피르라임 및 님트리를 혼합 추출한 ky항균추출물을 유효성분으로 포함하는 식품보존제 제조방법 및 이를 통해 제조된 식품보존제.
Khatib Antioxidant and antibacterial activity of plants extracts in food industry and safety
Sharma et al. Assessment of the antimicrobial and antioxidant activity of oil seed meals against food-borne pathogens, and their application in poultry meat product
EP4018840A1 (en) Food preservative composition and preparation method thereof

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application