JP4567508B2 - 腫瘍細胞増殖抑制効果をもつビルベリー配合食品 - Google Patents
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Description
また、昨今ビルベリーを含有する飲料についても、色々開発がすすめられている。(例えば、特許文献1参照)
特に、近年その手法の一つとして、健康食品による漢方医学的な予防的対処が脚光を浴びてきており、アガリスク茸を含有する健康食品などはこれらの最たるものとして認められてきている。しかしこのアガリスク茸系の健康食品もそれが効果ありとするためには価格的に問題がある。
他方、本出願人は、多くの実験の結果、従来視力治療、回復に効果ありとして認められているビルベリー果実より抽出標準化した所定量のビルベリーエキスが、がん細胞、特に白血球系由来腫瘍細胞および消化器系由来腫瘍細胞に顕著なる細胞増殖抑制作用を示す知見を得た。
(1)ビルベリー果実より抽出標準化された、アントシアニジンを概ね25%含有するビルベリーエキスを1ml当たり0.1〜0.25μg含有し、ビタミンEが添加されていることを特徴とする。
(2)前記(1)において、ビルベリー調合香料、糖類または酸味料の1または2以上が配合されている。
(3)前記(2)において、前記酸味料がクエン酸であり、前記糖類が少なくともブドウ糖、果糖、麦芽糖から選ばれた糖類であることを特徴とする。
(4)前記(1)乃至(3)の何れかにおいて、腫瘍細胞増殖抑制作用に相乗効果が期待できるアミノ酸が加えられていることを特徴とする。
(5)前記(1)乃至(4)の何れかにおいて、正常細胞に対しては増殖抑制を示さないことを特徴とする。
このアントシアニンの代表的構造式は次式で示される。
本発明は、上記ビルベリーの各種効果に対し、腫瘍細胞、特に白血病由来腫瘍細胞および消化器系由来腫瘍細胞に対する細胞増殖抑制作用効果に焦点を合わせ、特殊の方法により抽出標準化したビルベリーエキスを使用することにより、従来の適用量に較べて極めて低いビルベリー濃度の適用量にて、十分上記作用効果を実現したところにそのポイントがある。
すなわち、ビルベリーエキスラクト(原液)は、ビルベリー果実を圧縮粉砕する第1工程と、該圧縮粉砕されたビルベリー砕体より抽出、標準化して25%以上のアントシアニジンを含む粉体のビルベリーエキスを生成する第2工程と、該粉体のビルベリーエキスを85〜100℃の高温水にて攪拌、溶解しビルベリーエキスを100ml当たり10,000mg以上含有するビルベリーエキスラクト(原液)とする第3工程により作成される。
このビルベリーエキスラクト(原液)にビルベリー調合香料、糖類、酸味料および少なくとも種々のビタミン類、又は/およびアミノ酸を添加物として加えてビルベリー飲料原液とする第4工程と、該ビルベリー飲料原液を、最終アントシアニジンを0.025〜0.25μg/ml含有するように混合添加してビルベリー配合飲料とする第5工程により本発明の腫瘍細胞増殖抑制効果をもつビルベリー配合食品は製造される。
0.2μg未満では腫瘍細胞増殖抑制作用効果は殆ど現れず、0.2μg以上の濃度において顕著な細胞増殖抑制効果を発現し始める。また1.01μgを越えても該効果(90%以上の細胞において増殖抑制が認められる)はサチュレートしており、意味がない。
従って、ビルベリー濃度としての最適範囲としては、1ml当たり0.2μg〜1.0μgとすることが望ましい。
試験がん細胞としては、大腸がん細胞(COLO201)、胃印環細胞がん細胞(KATO−III)、Tリンパ血球系白血病細胞(I9.1)、単球由来白血病細胞(U937)を用いた。
各がん細胞の細胞株をそれぞれ培養液と混ぜ約106 個の細胞数(200μl)に調製し、96穴培養用マイクロプレートに播種し、ビルベリーエキスより調製したビルベリー液を培養液の1/10量(最終濃度:0、0.1、0.3、0.6および1.0μg/ml)加え一定時間(24時間)インキュベーター(37℃)中で培養した後生細胞数を計数した。
なお、比較のためヒト正常内皮細胞(HUVEC)の場合についても、同様の実験を行った。
図において、HCFおよびHUV(HUVEC)は正常培養細胞でありそれぞれヒト子宮頸管繊維芽細胞およびヒト内皮細胞、COLOは大腸がん細胞、KATO−IIIは胃印環がん細胞、U937およびHL−60は単核球由来白血病細胞、A3およびI9.1はTリンパ球由来白血病細胞の場合である。
これに対して、大腸がん細胞、胃がん細胞の場合は、アントシアニジン量にほぼ比例して、細胞死滅効果が高くなることがわかった。ただし、1.0μg/ml以上ではこれもサチュレートすることが確認された。
白血病由来の細胞の場合は50〜70%程度の細胞死滅が認められ、また消化器系のがん細胞の場合は約25〜50%程度のがん細胞死滅が確認され、ビルベリー濃度の増加によりより大きな効果を期待することができる。
なお、正常細胞である内皮細胞(HUV)に対しては増殖抑制を示さず、また正常子宮頸管繊維芽細胞(HCF)に対してはその増殖を促進することから、該物質は選択的に腫瘍細胞の増殖を抑制する知見を得た。
ビルベリー濃度0、0.01、0.1、0.3、0.6、1.0μg/ml含有の培養液にVE1mMを添加し、24時間培養後および48時間培養後の実施例1に準じた方法で、細胞生存率を測定した。
試験結果より、前記添加物VEを加えた場合、ビルベリーエキスのみの場合に較べていずれも細胞増殖抑制作用が増すことが明らかとなり、特にビルベリー濃度0.1μg/ml含有においてVE添加の有無による効果が顕著であり、48時間培養時における細胞生存率は20%以下となっている。また、48時間培養の場合の細胞生存率は24時間培養の場合の細胞生存率の約50%、すなわち約2倍の効果があることがわかった。
なお、ビルベリーエキスに対する添加剤VEの添加による細胞増殖抑制作用への相乗効果は、他の添加剤(アミノ酸等)の添加、または他の添加剤(アミノ酸等)との併用添加による場合も期待できるものである。
また、本実施例2においては、添加量を固定したが、添加剤の多量添加による相乗効果アップも期待することができる。
Claims (5)
- ビルベリー果実より抽出標準化された、アントシアニジンを概ね25%含有するビルベリーエキスを1ml当たり0.1〜0.25μg含有し、ビタミンEが添加されていることを特徴とする腫瘍細胞増殖抑制効果をもつビルベリー配合食品。
- ビルベリー調合香料、糖類または酸味料の1または2以上が配合されている請求項1に記載の腫瘍細胞増殖抑制効果をもつビルベリー配合食品。
- 前記酸味料がクエン酸であり、前記糖類が少なくともブドウ糖、果糖、麦芽糖から選ばれた糖類であることを特徴とする請求項2に記載の腫瘍細胞増殖抑制効果をもつビルベリー配合食品。
- 腫瘍細胞増殖抑制作用に相乗効果が期待できるアミノ酸が加えられていることを特徴とする請求項1乃至3の何れかに記載の腫瘍細胞増殖抑制効果をもつビルベリー配合食品。
- 正常細胞に対しては増殖抑制を示さないことを特徴とする請求項1乃至4の何れかに記載の腫瘍細胞増殖抑制効果をもつビルベリー配合食品。
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