JP4522452B2 - 高分子型癌治療用医薬およびその製造方法 - Google Patents

高分子型癌治療用医薬およびその製造方法 Download PDF

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Description

本発明は癌治療用医薬を高分子ミセル複合体とすることにより、腫瘍部などの病変部（以下腫瘍部という）に選択的に集積させ、更に腫瘍部での滞留時間を長くし、投与回数を減らすことを可能にし、また、それにより抗腫瘍効果を増大させ、正常器官組織への副作用を軽減した高分子型癌治療用医薬およびその改良製造方法に関する。更に詳しくは、亜鉛プロトポルフィリン（以下ZnPPという）と、スチレン・マレイン酸共重合体（以下SMAという）とが会合し、腎排泄の分子サイズよりも大きい高分子ミセル複合体となるように配位させたたミセル複合体、それを有効成分とする高分子型癌治療用医薬、および上記亜鉛プロトポルフィリンとSMAとを、直接、特定のpH条件で、縮合剤の非存在下に特定の立体配置をとる高分子型癌治療用医薬を製造する方法に関する。
一般に制癌剤などの薬剤を経口投与、あるいは、注射等により投与しても、その効果は病巣に対する特異性がなく、そのため強力な薬剤であっても効果が充分に発揮できないのみならず、病巣以外の正常器官・組織に対しても作用し、重大な副作用を起こす。このような強力な薬剤はその副作用のため、投与量の増加が制限されている。そのため、ドラッグデリバリーシステム（ＤＤＳ）といわれる病巣指向型の薬剤開発は現在世界的に競って研究開発が続けられている理由である。DDS研究は特に副作用の影響が大きい制癌剤分野で重要である。
本発明者は抗腫瘍剤の高分子化により、病巣指向型及び徐放型製剤となることに着目し、先に40Kda以上の高分子型薬剤は腫瘍組織に選択的に集積し、より長時間滞留するというユニークな現象を見出し、これをEPR(enhanced permeabi1ity and retention)効果と名づけた(非特許文献１)。この現象は高分子型薬剤や脂質微粒子等において観察される。
発明者らは、このような知見に基づき、これまで薬剤を種々の高分子と反応させて得られた多数の高分子型薬剤を作成した。これら高分子化薬剤が上記ＥＰＲ効果によって高い腫瘍集積性や炎症部への集積性が付与され、その結果、低分子量の抗腫瘍剤に比べて、抗腫瘍効果が格段に優れているのみならず、正常器官に対する副作用が少ない優れた高分子型抗腫瘍剤となることを見出した（特許文献１、特許文献２、特許文献３、非特許文献２）。
これら高分子型抗腫瘍剤の中でも、特許文献３に記載された、低分子抗腫瘍剤とスチレン・マレイン酸共重合体（SMA）が非共有結合により会合し、高分子ミセル複合体構造を形成した高分子型抗腫瘍剤（以下SMAミセル複合体という）は、特に抗腫瘍効果が優れ、しかも正常器官に対する副作用が少ない優れた抗腫瘍剤であることを見出した。
特開平１１−６０４９９ 特開２００３−７３２７３ WO 2004/103409 A1 Cancer Res., 44, 2115−2121, 1984; ibid, 46, 6387−92, 1986; Anticancer Res., 13, 1287−1292, 1993 J. Controll. Release, 74, 47−61, 2001; Adv. Enzyme Regul., 41, 189−207, 2001 Cancer Res., 63, 3567−3574, 2003; Bioconj.Chem. 13, 1031−1038, 2002;

一方、本発明者らは先に上記特許文献２において、炎症部や腫瘍部で誘導されるヘムオキシナーゼ（HO−1）に対する阻害剤であるヘムオキシゲナーゼ阻害活性を有する金属ポルフィリン誘導体、例えば式（1）で示される亜鉛−プロトポルフィリン(以下、ZnPPという)を、ポリエチレングリコール(PEG)と結合させて高分子型抗腫瘍剤とすることができることを提案した。
ZnPPは本来水に不溶で、これまでそれを水に可溶化するために、本発明者らは両親媒性のポリエチレングリコール（PEG）の平均分子量100〜20,000（好ましくは5,000前後）を結合させ、水に可溶性の誘導体を創製した（特許文献２）。このPEG−ZnPP結合体は分子量約68,000を示す。従ってその高分子としての生体内での挙動は、上に示したEPR効果を発現する上では重要であった。
しかしながらPEGは、それ自体の分子量が巨大であるが、薬剤に結合する高分子（この場合 １.１万）に対し、ZnPPは１分子のみであり、有効成分を一定量以上投与するためには、高分子化された薬剤の総有効投与量がヒトに換算して数ｇ以上と多くなり過ぎる。そのことはとりもなおさず患者への投与薬物量の増加となり、実際にヒトで有効血中濃度を得るためには、数g〜250gの投与が必要となり、実用性にやや難があった。
また、特許文献２において両親媒性または水溶性のポリマーとして、最適とされているのはポリエチレングリコール(PEG)であるが、直接結合によりZnPPにPEGを付加する方法は困難であるため、ジアミン構造を介してＰＥＧを付加させる方法をとらなければならなかった。特許文献２では高分子化合物として、ＰＥＧのほかにSMAの使用も言及されているが、具体的な開示はなく、またSMAを用いた場合もＰＥＧ付加の場合と同様に、アミノ基導入ポルフィリンにSMAを脱水縮合反応させることにより、高分子化反応を行うと述べられている。
また、上記特許文献３には各種低分子抗腫瘍剤ーSMAミセル複合体の製造法が開示されており、SMA−金属PP誘導体の記載はないが、SMAミセル複合体の製造方法として、SMAの半ブチルエステルなど、SMAの誘導体を用い、酸性条件下、溶解性カルボジイミド等、脱水縮合剤の存在下で反応させ、ついでpHを８以上に上げた後中性に調節し、高分子成分の分離精製操作、例えばセファデックスなどゲルクロマトグラフィー、限外濾過膜等により高分子成分を回収する方法が開示されている。
この方法によれば、一般に用いられるミセル化剤やリポゾーム製剤における必須構成成分としての乳化剤（例えばシュガーエステル、フォスファチジルコリン、スフィンゴシン、コレステロールなど）を用いることなく、ミセル化薬剤を製造することができた。
しかし、この反応においては、水溶解性カルボジイミドのような高価な脱水縮合剤を必要とした。またこのような縮合剤を用いた場合、縮合剤の完全除去が極めて困難であり、その完全除去を期すと薬剤の活性低下を伴う等、実用化が困難であること等の問題も生ずる。また、この方法によって得られたSMAーZnPPミセルについていえば、その分子量が腎排泄の限界分子量よりも有意に小さく、問題であった。
そこで発明者らは今回、ZnPPにSMAを付加することにより、薬剤の取り込み量の多い高分子型薬剤を得ることについて検討し、反応の各段階におけるpHを調節して、亜鉛プロトポルフィリンの可溶化と、ミセルへの取り込みを行なうことによって亜鉛プロトポルフィリンとスチレン・マレイン酸共重合体とのミセル複合体が得られることを見出した。
このミセル複合体は、亜鉛プロトポルフィリンとスチレン・マレイン酸共重合体とが非共有結合により会合し、高分子ミセル複合体構造を形成したもので、ミセル複合体中に１０〜６０％の多量の薬剤を取り込むことができ、これによってより少量（ヒト換算で0.1〜6g）の投与量で有効性を示すミセルを、より簡略化した方法で得ることができた。
このようにして得られた高分子型癌治療用医薬（以下SMAミセル複合体という）は、特に抗腫瘍効果が優れ、しかも正常器官に対する副作用が少ない優れた癌治療用医薬であることを見出した。ここに癌治療用医薬とは、直接腫瘍を壊死させる抗腫瘍剤の他に、放射線やレーザー治療を行なう場合に、あらかじめ投与する光増感剤、あるいは細胞内シグナル伝達制御等、癌治療に用いられる薬剤も含まれる。
また癌治療用医薬は固形癌のみならず、リンパ腫、白血病（成人Ｔ細胞白血病、エイズ関連Ｔ細胞白血病を含む）等のすべての癌の治療薬が含まれる。
また発明者らは、このような癌治療用医薬を得ることができる、よりシンプルで安価な製造方法を研究した結果、特定のpH条件を用い、SMAを直接に薬剤と反応させることにより、縮合剤の不存在下でも反応が進行し、効率よく、高純度の薬剤が得られることを見出した。
またこの方法によれば特許文献２に開示されたようなプロトポルフィリンにジアミノエタンを付加し、アミノ基を付与する反応操作も不要となる。
すなわち本発明は、亜鉛プロトポルフィリンとスチレン・マレイン酸共重合体とが非共有結合により会合したSMAミセル複合体およびそれを有効成分とする高分子型癌治療用医薬である。
また本発明は、亜鉛プロトポルフィリンとスチレン・マレイン酸共重合体とを縮合剤の非存在下、アルカリ性条件下で反応させ、可溶化した後ｐＨを６〜８に調節し、高分子成分の分離操作（低分子分画区分を除去）により高分子薬剤ミセル複合体成分を回収することを特徴とする上記SMAミセル複合体の製造方法である。
本発明のSMAミセル複合体は亜鉛プロトポルフィリンとSMAとが非共有結合により会合したミセル複合体であり、前記非特許文献２とは大きく違っており、分子量は１３万附近あるいは１６万以上と大きく増大し、そのため腫瘍部に対し、より選択的に集積し、また腫瘍内の滞留期間も長い。それによって抗腫瘍効果が優れ、しかも正常器官に対する副作用が少ない等制癌性薬剤としてより有用性が高いものである。
また本発明のSMAミセル複合体の製造方法によれば、縮合剤を用いないで亜鉛プロトポルフィリンとSMAとから単純な方法で合成することができ、しかも精製工程が簡単で純度の高い製品が得られる。
亜鉛プロトポルフィリンはポルフィリン環を有する化合物に亜鉛が配位した錯化合物であるが、ポルフィリン環を有する化合物としてプロトポルフィリンが、入手容易であり、好適に使用される。
配位させる金属としては、亜鉛が用いられる。プロトポルフィリンに亜鉛が配位したZn−プロトポルフィリン(ZnPP)は下記式(１)で示される。
Figure 0004522452
ZnPPは放射線増感剤としても使用できる。
本発明において高分子化剤として用いるSMAは、スチレンと無水マレイン酸との共重合によって得られ、下記式(2)または(3)に示される繰り返し単位を有する共重合体であり、必須成分としてスチレンと無水マレイン酸とを有する。
Figure 0004522452
Figure 0004522452
 但し、ＲはＨまたはその他の炭化水素、アミノ酸、アルコール類である。
本発明においては、SMAはスチレン・無水マレイン酸共重合体を無水物のままで用いることもできるが、特許文献３に開示された完全開環したスチレン・マレイン酸（または、その半アルキルエステル体）を用いてもよい。無水物のままで用いる方が加水分解等の操作が不要であり、簡便に実施できる点では好ましいが、一方開環したスチレン・マレイン酸を用いる方法も極度に高いｐＨ(12以上)まで上げなくてもミセル形成は短時間に終了し、強アルカリ性による薬剤成分の分解が防止できるなどの利点がある。
SMAは重合度により各種の分子量のものが存在するが、本発明において高分子化剤として用いるSMAはトリマー（約６６０Da）から約４０KDaのサイズを有するものが好適である。より厳密には分子量８００〜２５００が体内に集積せず、体外排泄される容易さから好ましい。
ZnPPとSMAとの反応による高分子ミセル複合体の製造は、SMA（無水物または加水分解物等）をZnPPと混合し、炭酸ソーダのようなアルカリ性液を加えてアルカリ性とし、撹拌加温する。適宜炭酸ソーダを加えてアルカリ性に維持する。全体が可溶化した後、酸で中和する。これによって生成物が沈殿し、薬剤のミセルへの取り込みが効率的に行なわれる。更にpHを中性に調節して可溶化した後、限外ろ過、カラムクロマトグラフィー等の高分子成分の分離精製操作を用いて、高分子成分を回収する。上記の操作により、SMAの立体構造変化と分子間作用によって、SMAミセルの低分子薬剤の取り込みが進行し、かくしてミセル構造が生成する。
ZnPPとSMAとの反応はZnPP及び／またはSMA無水物を有機溶媒に溶解して反応させても良い。水に不溶性の化合物はテトラヒドロフラン、ジメチルスルフォキシドなどの有機溶剤に溶解して反応させることができる。SMAの溶剤としてはアセトン、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルフォキサイド、メチルセルソルブ、アセトニトリル、エチルアルコール、グリセリンなどが使用できるが、特にアセトン、アセトニトリルなどが好ましい。有機溶媒溶液の濃度は1〜30％が好ましい。このときピリジン、ジアミノエタンなどを触媒として加えることもできる。
ZnPPとSMAとの反応を超音波を照射しながら行なっても良い。超音波を照射することにより、より短時間に、より効率良くミセルを形成することができる。照射条件は例えば、１分 On、１分 Offで５分〜６０分、少なくとも５〜１０分続ける。
高分子成分分離操作は、分子量３，０００〜５０，０００の限外濾過膜によって行なうのが好ましい。好ましくは、Cut off 分子量３万〜５万のものがよい。本法によって生ずるSMA−ZnPPは分子量が４万以上である。より好ましくは見かけの中心分子量が１３万〜１８万のものである。
このように本発明の高分子型癌治療用医薬は、ミセル複合体を形成させるために、界面活性剤等の補助成分の存在を必要とせず、また脱水縮合剤も使用せず、原料であるZnPPとSMAのみを用いて製造され、SMAとZnPPのみからなる安定なミセル複合体構造の薬剤を簡単に調製することができる。
なお、必要に応じて、安定化剤として、乳糖、マニトール、アミノ酸、グリセリン、レシチン等を薬剤と同量ないし100倍量存在下にこのミセルを調製することもできる。
本発明の高分子型ミセル複合体癌治療用医薬はZnPPとSMAとの反応により、高分子ミセル複合体構造が形成され、ZnPPがミセル内に包摂されて取り込まれたたものであり、ZnPPとSMAとの結合状態は水素結合、疎水結合、あるいはイオン結合であって、アミド結合、エステル結合などの共有結合は存在しないものである。このことは、後記実施例で得られた図１の赤外吸収スペクトルによって証明される。
このようにして製造されたミセル型SMA-ZnPP複合体は、これまでの高分子化薬剤において見られたように、元の低分子量薬剤と比べると、ユニークな薬理学的性質が付与されていることは言うまでもないが、更に特許文献３の方法で製造されたものと比べても、薬剤として下記のごとき優れた性質をもっている。
従来の方法によるSMA〜薬剤ミセル複合体の分子サイズが４万以下であったのに対し、今回の本発明により得られたSMAミセル複合体の分子サイズは１０万以上約１３〜１８万という大幅に高分子化したものであり、これは腎排泄限界である分子量４万を超えているので、血中濃度、血中滞留性が大きく向上し、それにより、よりＥＰＲ効果が発現し、腫瘍選択的な薬剤として各種の制癌剤の改善に大きく貢献している。
また、ミセル内の薬物含有量が通常のリポソーム（ｗ／ｗ１０〜２０％）に比べて大幅に増加（ｗ／ｗ４０〜６０％）している。さらに脱水縮合剤としてカルボジイミドなどを用いた場合、その除去は極めて困難で、５回精製してもその残留窒素としてみとめられるが、本発明では縮合剤、触媒成分等の混入がないことから、それに由来する副作用の減少効果も期待される。
次に、このものは静脈内投与でEPR効果によりより腫瘍組織に集積するが、ZnPPのもつ放射線増感作用により、同一線量の電磁線（γ線、ｘ線、紫外線、α線）を照射しても、このZnPPを取り込んでいる組織のみが、より障害を受けることになり、一段と抗腫瘍効果の高い癌治療が可能となった。すなわち本発明の高分子型癌治療用医薬はそれ自体抗腫瘍剤としての使用のみならず、光増感剤として用いることもできる。
［実施例１］
（SMA−ZnPPミセル複合体の製造方法）
平均分子量約1,500のスチレンと無水マレイン酸共重合物（SMA）1.5gに200mlの0.1M NaOHを加え、pH13となし、マグネチックスターラーで攪拌する。撹拌下に微粉末化した亜鉛（Zn）−プロトポルフィリン（PP）の粉末1.5gを加え、引きつづき攪拌する。時間の経過とともに混濁液は次第に数時間内に濃赤ワイン色の透明溶液となる。不溶性のZnPP、その他残滓を遠心（3,000rpm）で除去し、次にpHを7附近に下げ、この溶液を10mM Na2CO3 /NaHCO3 溶液約3倍量を加え撹拌を続ける。次いで2時間後に0.1M HClを適量加え、pHを約7とし、さらに2時間、撹拌を続ける。次に限外ろ過膜の分子限界サイズ（分子量3,000アミコン社製）を用いて50mlまで加圧下に濃縮する。これによって遊離のZnPPあるいは非ミセル化SMAあるいはその誘導体とその分解物は除去される。さらにこの濃縮されたSMA−ZnPPミセルを含む分画に対し、約20倍量の純水を加え希釈し、上と同様に限外ろ過膜（分子量5000）を用いて加圧下に濃縮・洗浄する。ZnPPのSMAミセル体はこの膜から漏出せず、各遊離の低分子成分のみが漏出する。これによりミセの洗浄を行うことができる。終わりの3回以上は蒸留水で行い、同様の操作を合計3〜5回繰り返したものを凍結乾燥し、注射用原体の粉末とする。
図２にSMA−ZnPPをセファデックスG−150を用いた分子量の解析結果を示してある。これによると、その分子量は１３万〜１５万と推定され、IgG（免疫グロブリン、１６万）と同等である。
本発明のSMA−ZnPPミセルはSMAとZnPPの間に共有結合を有さず、非共有結合の会合体であることがわかる。これを証明するために赤外吸収スペクトルを、PEG−ZnPPと対比して示した。図１−ＢはPEG−ZnPPの赤外吸収スペクトルで、これには共有結合による典型的なアミドＩ、IIの吸収がある。一方図１−Ａは本発明の方法によるSMA−ZnPPのスペクトルであり、これには図１−Ｂに示すアミド結合様式などの新たな結合を示す吸収ピークはない。
この精製物は分子量１０万の限外膜を通らず、比較的均一に分布しているが、その紫外・可視吸収スペクトルを、PEG-ZnPP、未修飾のZnPPとあわせて図３に示す。PEG-ZnPP (図３Ｂ)、未修飾のZnPP（図３Ｃ）と比較すると、本発明のSMA-ZnPPミセル複合体（図３Ａ）は、吸収極大が短波長へシフトし、350nm付近に小さい吸収の肩を有することがわかる。
（治療効果）
また実施例１で得られたSMA-ZnPPミセル複合体を用いて、ウサギのVX−2腫瘍に対する治療効果を表３に示す。
Figure 0004522452
 腫瘍移植部位:肝臓皮膜下.
このように本発明のSMA-ZnPPミセル複合体は強力な抗腫瘍効果を示し、その力価はPEG−MePPよりも優れている。
（レーザーフラッシュ光分解による光増感剤効果）
通常の細胞培養条件下におけるJurkat細胞に対するフラッシュ光分解法により、SMA−ZnPPの光増感剤効果を、PEG-ZnPPと比較して評価した。レーザー光照射開始後の時間（マイクロ秒）と相対吸収発光度との関係を図４に示す。相対吸収発光度はZnPPの三重項状態（励起状態）の寿命を示すものであり、寿命（相対吸収発光度の半減期）を比較すると、SMA−ZnPPが2.4μsであるのに対し、PEG-ZnPPは27μsであり、SMA−ZnPPは光増感効果が効率よく高速で進み、一重項酸素が生じていることがわかる。
図４の結果はJurkat細胞中、通常の空気雰囲気での結果であるが、水中での結果、溶存空気（酸素）を窒素バブリングにより放出させた脱酸素下での試験もあわせて行なった。その結果を表２に示す。SMA−ZnPPは空気中よりもJurkat細胞中において特に顕著な効果を示す。また低酸素雰囲気ではあまり効果がなく、抗腫瘍効果が光照射による一重項酸素生成に基づくものであることが推定される。
（SMA−ZnPPおよびPEG-ZnPPの光照射下の細胞毒性）
リンパ球Jurkat細胞を、Dulbecco MEM培地で5%CO2入り空気中、３７℃で培養し、光照射２４時間目のJurkat細胞の生存率を、MTT法により、分光学的に定量した。結果を図５に示す。本発明のSMA−ZnPPミセル複合体は5.0μMの濃度においては、Jurkat細胞は殆ど完全に死滅しており、同濃度のPEG-ZnPP投与の場合より優れていることがわかる。
Figure 0004522452
［実施例２］
（SMA-ヘミンミセルの製造）
200mlのビーカーにSMAの完全アルカリ加水分解物300mgをとり、50mlの脱イオン水を加え、マグネチックスターラで攪拌下に溶解し、ついで0.1M NaOHを滴下し、pHを10とする。20mlのガラスバイアルにヘミン（シグマ社製）100mgを4mlのDMSO(ジメチルスルフォキシド)にとかし、前述のビーカーにこの溶液を攪拌下に滴下、混合する。ついで1M NaOHを滴下し、pHを12とし、15分攪拌し、ついで1M HClを滴下しつつ、pHを2まで下げると暗褐色の懸濁液となるが、そのまま溶解攪拌を30分〜60分つづける。ついで、遠心(3000〜6000rpm)により沈殿物と上清を除き、さらに0.02M酢酸溶液を30ml加え、懸濁液を再び攪拌(30分)し、次にこのSMA-ミセルの水懸濁液に0.1MNaOHを滴下し、pHを10まで上げ、30分間攪拌ののち、pHを再び0.1M HClで7.4まで下げると、完全に暗褐色の透明溶液となる。以上の操作は室温で行う。これをアミコンの分子量10KDaの cut offの分子フルイ膜で、上記の実施例と同様、濃縮、洗浄をくり返し、ついで凍結乾燥物（粉末）となす。このようにして得られたミセルの一部（0.5mg/ml）をとり、その水溶液を用いて測定した光散乱プロファイルが図６である。図６から、このミセルは平均直径25.5nmの均一な分布を示す標品であることがわかる。その紫外可視部の吸収スペクトルを図７に示す。ヘムの吸収の特徴に由来する約386付近に強い吸収と、約500nmと612nmに弱い吸収極大を示すとともに、SMAに由来する260nm付近に弱い吸収を示す。(濃度は0.01mg/ml、蒸留水中)。
多くの低分子量の癌治療用医薬は抗腫瘍効果が強力であっても、腫瘍部への選択的集積性がなく、そのため正常器官・組織に対する副作用が大きい。そのため、それらの投与量が制限されている。このような薬剤とSMAとのミセル複合体を形成させ、分子量５万以上の高分子型癌治療用医薬とすることにより、EPR効果が発揮され、抗腫瘍効果が向上し、正常器官・組織に対する副作用が著しく軽減される。
本発明は抗腫瘍剤であるZnPPや、放射線増感剤であるヘムプロトプロフィリンのようなMePPとSMAとを非共有結合により会合させたミセル複合体とすることにより、薬剤のミセル内への大量の取り込みが可能となり、また腎排泄限界の分子量４万以上の高分子量であるので、血中濃度、血中滞留性が大きく向上し、EPR効果を発揮し、細胞への取り込みもよく、したがって生物活性も大きいので、癌治療用医薬として優れた薬効を有する。
また本発明はこのような薬剤とSMAとのミセル複合体を、特定のpH条件で反応させることにより、通常分離が困難な脱水縮合剤や、その他乳化剤などが不要であり、精製も省略することができ工程が簡略化されるのみならず、脱水縮合剤不使用のため、高純度の製品が得られる。
図１−Aは本発明方法(実施例１)で得られたSMA−ZnPPミセル複合体の赤外線吸収スペクトルである。図１−BはPEG−ZnPPミセル複合体の赤外線吸収スペクトルである。 本発明方法で得られたSMA-ZnPPミセル複合体及び各種標品の分子量の比較を示すグラフである。 SMA−ZnPP（A）、PEG−ZnPP（B）および未修飾ZnPP（C）の紫外・可視部吸収スペクトルである。 SMA−ZnPPおよびPEG−ZnPPのレーザーフラッシュ光分解における光増感剤効果を示す図である。 SMA−ZnPPおよびPEG−ZnPPによる光照射下の細胞毒性を示す図である。 SMA−ヘミンミセル複合体の光散乱プロファイルである SMA−ヘミンミセル複合体の紫外可視部の吸収スペクトルである。

Claims (6)

  1. 亜鉛プロトポルフィリンとスチレン・マレイン酸共重合体とが、非共有結合により会合したSMAー亜鉛ポルフィリンミセル複合体。
  2. 請求項１に記載のSMAー亜鉛ポルフィリンミセル複合体を有効成分とする高分子型癌治療用医薬。
  3. 亜鉛プロトポルフィリンとスチレン・マレイン酸共重合体とを、縮合剤の非存在下、アルカリ性条件下で反応させ、可溶化した後ｐＨを６〜８に調節し、高分子成分分離操作により高分子薬剤ミセル複合体成分を回収することを特徴とする請求項１に記載のSMAー亜鉛ポルフィリンミセル複合体の製造方法。
  4. スチレン・マレイン酸共重合体及び／又は亜鉛プロトポルフィリンの有機溶媒溶液をアルカリ性条件下で反応させることを特徴とする請求項３に記載のSMAー亜鉛ポルフィリンミセル複合体の製造方法。
  5. 超音波処理を行い反応させることを特徴とする請求項３または４のいずれかに記載のSMAー亜鉛ポルフィリンミセル複合体の製造方法。
  6. 高分子成分分離操作が、分子量３，０００〜５０，０００の限外濾過膜によるものであることを特徴とする請求項３〜５のいずれかに記載のSMAー亜鉛ポルフィリンミセル複合体の製造方法。
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