JP4482555B2 - ポリエチレンイミン−結合樹脂を使用するタキサンおよびタキサン混合物の精製 - Google Patents
ポリエチレンイミン−結合樹脂を使用するタキサンおよびタキサン混合物の精製 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4482555B2 JP4482555B2 JP2006507246A JP2006507246A JP4482555B2 JP 4482555 B2 JP4482555 B2 JP 4482555B2 JP 2006507246 A JP2006507246 A JP 2006507246A JP 2006507246 A JP2006507246 A JP 2006507246A JP 4482555 B2 JP4482555 B2 JP 4482555B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- taxane
- taxanes
- taxol
- polyethyleneimine
- bound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 title claims description 268
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 title claims description 158
- 239000011347 resin Substances 0.000 title claims description 96
- 229920005989 resin Polymers 0.000 title claims description 96
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 56
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 title claims description 55
- 238000000746 purification Methods 0.000 title description 15
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 117
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 104
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims description 81
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims description 80
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 59
- 241001116498 Taxus baccata Species 0.000 claims description 58
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 57
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims description 48
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 43
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 40
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 37
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 241001116500 Taxus Species 0.000 claims description 28
- -1 taxane compound Chemical class 0.000 claims description 28
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 27
- 239000012539 chromatography resin Substances 0.000 claims description 26
- 125000006264 diethylaminomethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 25
- DBXFAPJCZABTDR-WBYYIXQISA-N cephalomannine Chemical compound O([C@@H]1[C@]2(O)C[C@@H](C(=C([C@@H](OC(C)=O)C(=O)[C@]3(C)[C@@H](O)C[C@H]4OC[C@]4([C@H]31)OC(C)=O)C2(C)C)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C(/C)=C/C)C=1C=CC=CC=1)C(=O)C1=CC=CC=C1 DBXFAPJCZABTDR-WBYYIXQISA-N 0.000 claims description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 16
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 15
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 14
- DBXFAPJCZABTDR-KUEXGRMWSA-N Cephalomannine Natural products O=C(O[C@@H]1C(C)=C2[C@@H](OC(=O)C)C(=O)[C@]3(C)[C@@H](O)C[C@@H]4[C@](OC(=O)C)([C@H]3[C@H](OC(=O)c3ccccc3)[C@@](O)(C2(C)C)C1)CO4)[C@@H](O)[C@H](NC(=O)/C(=C\C)/C)c1ccccc1 DBXFAPJCZABTDR-KUEXGRMWSA-N 0.000 claims description 13
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 13
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 13
- SXPIMOCRRJUHJY-MNLIZOKASA-N taxcultine Chemical compound O([C@@H]1[C@]2(O)C[C@@H](C(=C([C@@H](OC(C)=O)C(=O)[C@]3(C)[C@@H](O)C[C@H]4OC[C@]4([C@H]31)OC(C)=O)C2(C)C)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)CCC)C=1C=CC=CC=1)C(=O)C1=CC=CC=C1 SXPIMOCRRJUHJY-MNLIZOKASA-N 0.000 claims description 8
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 7
- BEHTXUBGUDGCNQ-IEAAAIHOSA-N taxol c Chemical compound O([C@@H]1[C@]2(O)C[C@@H](C(=C([C@@H](OC(C)=O)C(=O)[C@]3(C)[C@@H](O)C[C@H]4OC[C@]4([C@H]31)OC(C)=O)C2(C)C)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)CCCCC)C=1C=CC=CC=1)C(=O)C1=CC=CC=C1 BEHTXUBGUDGCNQ-IEAAAIHOSA-N 0.000 claims description 7
- 238000006257 total synthesis reaction Methods 0.000 claims description 5
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 claims description 4
- 241000015728 Taxus canadensis Species 0.000 claims description 4
- 150000001558 benzoic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 3
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 claims description 3
- 241000202349 Taxus brevifolia Species 0.000 claims description 2
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 claims description 2
- 125000002456 taxol group Chemical group 0.000 claims 4
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 claims 3
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 71
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical group CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 61
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 26
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 21
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 20
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 15
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 14
- TYLVGQKNNUHXIP-MHHARFCSSA-N 10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=4C=CC=CC=4)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 TYLVGQKNNUHXIP-MHHARFCSSA-N 0.000 description 13
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 11
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 9
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 8
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 8
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 8
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 7
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 7
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 7
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 7
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 7
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 6
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 description 6
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 5
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 5
- 125000002560 nitrile group Chemical group 0.000 description 5
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 5
- 229930182986 10-Deacetyltaxol Natural products 0.000 description 4
- OVMSOCFBDVBLFW-VHLOTGQHSA-N 5beta,20-epoxy-1,7beta,13alpha-trihydroxy-9-oxotax-11-ene-2alpha,4alpha,10beta-triyl 4,10-diacetate 2-benzoate Chemical group O([C@@H]1[C@@]2(C[C@H](O)C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 OVMSOCFBDVBLFW-VHLOTGQHSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003834 baccatin III group Chemical group 0.000 description 4
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 4
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- 229920003053 polystyrene-divinylbenzene Polymers 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical group NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N Furan Chemical compound C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 description 3
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000005103 alkyl silyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004390 alkyl sulfonyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000005332 alkyl sulfoxy group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004414 alkyl thio group Chemical group 0.000 description 3
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000012296 anti-solvent Substances 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 125000005111 carboxyalkoxy group Chemical group 0.000 description 3
- 150000007942 carboxylates Chemical group 0.000 description 3
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 125000003563 glycoside group Chemical group 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 3
- 125000004469 siloxy group Chemical group [SiH3]O* 0.000 description 3
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 3
- TYLVGQKNNUHXIP-IDZUEFMLSA-N 10-Deacetyl-7-epi-taxol Natural products O=C(O[C@@H]1C(C)=C2[C@@H](O)C(=O)[C@@]3(C)[C@H](O)C[C@@H]4[C@@](OC(=O)C)([C@H]3[C@H](OC(=O)c3ccccc3)[C@](O)(C2(C)C)C1)CO4)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)c1ccccc1)c1ccccc1 TYLVGQKNNUHXIP-IDZUEFMLSA-N 0.000 description 2
- YWLXLRUDGLRYDR-ZHPRIASZSA-N 5beta,20-epoxy-1,7beta,10beta,13alpha-tetrahydroxy-9-oxotax-11-ene-2alpha,4alpha-diyl 4-acetate 2-benzoate Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](O)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 YWLXLRUDGLRYDR-ZHPRIASZSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000013869 Taxus floridana Species 0.000 description 2
- 241000013871 Taxus globosa Species 0.000 description 2
- 241001330449 Taxus wallichiana Species 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006254 arylation reaction Methods 0.000 description 2
- 229930014667 baccatin III Natural products 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003953 normal phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000005420 sulfonamido group Chemical group S(=O)(=O)(N*)* 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 125000006019 1-methyl-1-propenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003241 10-deacetylbaccatin III group Chemical group 0.000 description 1
- NOGFHTGYPKWWRX-UHFFFAOYSA-N 2,2,6,6-tetramethyloxan-4-one Chemical compound CC1(C)CC(=O)CC(C)(C)O1 NOGFHTGYPKWWRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006020 2-methyl-1-propenyl group Chemical group 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FIJISNNFRZGICM-IIMRYZLHSA-N CC(C)=C[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)[C@@H](O)C(=O)O[C@H]1C[C@@]2(O)[C@@H](OC(=O)C=C(C)C)[C@@H]3[C@@]4(CO[C@@H]4C[C@H](O)[C@@]3(C)C(=O)[C@H](OC(C)=O)C(=C1C)C2(C)C)OC(C)=O Chemical compound CC(C)=C[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)[C@@H](O)C(=O)O[C@H]1C[C@@]2(O)[C@@H](OC(=O)C=C(C)C)[C@@H]3[C@@]4(CO[C@@H]4C[C@H](O)[C@@]3(C)C(=O)[C@H](OC(C)=O)C(=C1C)C2(C)C)OC(C)=O FIJISNNFRZGICM-IIMRYZLHSA-N 0.000 description 1
- 241001249699 Capitata Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000003820 Medium-pressure liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241000245026 Scoliopus bigelovii Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001116495 Taxaceae Species 0.000 description 1
- 235000009065 Taxus cuspidata Nutrition 0.000 description 1
- 241001149649 Taxus wallichiana var. chinensis Species 0.000 description 1
- 241001330459 Taxus wallichiana var. wallichiana Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000001769 aryl amino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012467 brownies Nutrition 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000005660 chlorination reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 239000012501 chromatography medium Substances 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 229940114081 cinnamate Drugs 0.000 description 1
- 239000000039 congener Substances 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002933 cyclohexyloxy group Chemical group C1(CCCCC1)O* 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 125000004663 dialkyl amino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004986 diarylamino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000012632 extractable Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940035429 isobutyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000003819 low-pressure liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 239000003791 organic solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 125000003566 oxetanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 125000003538 pentan-3-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 125000005415 substituted alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000565 sulfonamide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000542 sulfonic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid group Chemical group S(O)(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940063683 taxotere Drugs 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000969 xylosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO1)* 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D305/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms
- C07D305/14—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms condensed with carbocyclic rings or ring systems
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
- B01D15/3804—Affinity chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/42—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the development mode, e.g. by displacement or by elution
- B01D15/424—Elution mode
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epoxy Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
発明の分野
本発明は、タキサンを含有する物質から１種以上のタキサン化合物を分離または単離する方法と、それから得られる組成物または化合物とに関する。本発明はまた、１種以上のタキサンを含むバイオマス抽出エキスを精製する方法に関する。一実施態様において、本発明の方法は、ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂（ＰＢＳ樹脂）を含むが、これらに限定されないマトリックス（例えば、固体マトリックス）に結合している１つ以上のアミノを含有する物質を使用することを含む。これらの樹脂は高収率および高純度のタキサン精製を容易にする。一実施態様において、クロマトグラフィー樹脂は、種々の粒子径または孔径のシリカに結合している非−官能基化および／または非−誘導体化ポリエチレンイミン（「ＰＥＴ」）ポリマーを含む。別の実施態様において、ポリエチレンイミンはメチル化されて、ジエチルアミノメチル−結合シリカ（「ＤＥＡＭ）」を形成する。本発明の別の一実施態様において、ＤＥＡＭおよびＰＥＩの両方は、酸性ｐＨ下において順相クロマトグラフィーに使用することができる。
本発明は、タキサンを含有する物質から１種以上のタキサン化合物を分離または単離する方法と、それから得られる組成物または化合物とに関する。本発明はまた、１種以上のタキサンを含むバイオマス抽出エキスを精製する方法に関する。一実施態様において、本発明の方法は、ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂（ＰＢＳ樹脂）を含むが、これらに限定されないマトリックス（例えば、固体マトリックス）に結合している１つ以上のアミノを含有する物質を使用することを含む。これらの樹脂は高収率および高純度のタキサン精製を容易にする。一実施態様において、クロマトグラフィー樹脂は、種々の粒子径または孔径のシリカに結合している非−官能基化および／または非−誘導体化ポリエチレンイミン（「ＰＥＴ」）ポリマーを含む。別の実施態様において、ポリエチレンイミンはメチル化されて、ジエチルアミノメチル−結合シリカ（「ＤＥＡＭ）」を形成する。本発明の別の一実施態様において、ＤＥＡＭおよびＰＥＩの両方は、酸性ｐＨ下において順相クロマトグラフィーに使用することができる。
発明の背景
本発明は、ＰＢＳ樹脂などの固体マトリックスに支持されているアミノを含有する物質を使用して、１種以上のタキサンを含有する物質からパクリタキセルまたは他のタキサンを単離または分離することを含む。本発明はまた、タキサンを含有するバイオマス抽出エキスを精製することも含む
本発明は、ＰＢＳ樹脂などの固体マトリックスに支持されているアミノを含有する物質を使用して、１種以上のタキサンを含有する物質からパクリタキセルまたは他のタキサンを単離または分離することを含む。本発明はまた、タキサンを含有するバイオマス抽出エキスを精製することも含む
種々のタキサン、例えば、パクリタキセルはクロマトグラフィー技法を使用して精製できることは既知である。シリカ、アルミナ、Ｃ１８およびＣ８などのアルキル−結合シリカ樹脂並びにポリスチレンジビニルベンゼン樹脂などのクロマトグラフィー媒体は、この目的に有用であることが文献に報告されている。しかし、精製工程の性質に応じて、これらの媒体には全て限界がある。
マトリックス（例えば、ＰＢＳ樹脂）に結合しているアミノ含有物質は、タキサンを単離および精製するために使用される他の慣用のクロマトグラフィー樹脂よりすぐれた選択性および分解能を提供できることが発見された。従って、マトリックス（例えば、ＰＢＳ樹脂）に結合しているアミノ含有物質は、タキサン精製の分野において他の樹脂より効率的に分離を実施するために使用することができる。例えば、文献には、パクリタキセル（タキソールＡ）およびセファロマニン（タキソールＢ）の分離は困難と記載されている。これらの化合物の分離は、本明細書に記載するように、１種以上のＰＢＳ樹脂を使用するとかなり容易になる。また、ＰＢＳ樹脂は有機溶媒を用いて利用することができるので、この樹脂はより容易に装填することができ、Ｃ１８、Ｃ８およびポリスチレンジビニルベンゼンなどの逆相樹脂より多い装填量のサンプルを適用することができる。
ＰＢＳ樹脂は、主にイオン−交換クロマトグラフィー用途に使用することができる。タキサンは、カルボン酸またはアミン基などのイオン化可能な基をほとんど含有しないので、相互作用様式は従来のイオン交換ではない。予期しなかったことに、ＰＢＳ樹脂を使用すると、タキサンの単離または精製においてすぐれた選択性および分解能が提供される。本発明において、ＰＢＳ樹脂は、少量の酸性調整剤または塩を移動相に使用すると、最もよく機能する。
さらに、本発明者らは、ＰＥＩポリマーのアミノ基はアルキル化、アリール化またはアシル化によって官能基化することができることを発見した。本発明者らはまた、ＰＢＳ樹脂はタキサン化合物の分取および分析用分離を実施するために使用することができることも発見した。分取用分離は、バッチ、半−連続または連続モードで実施することができる。半−連続モードは、擬似移動床式（ＳＭＢ）クロマトグラフィーの形態であってもよい。
本発明は、シリカに結合しているポリエチレンイミンなどの、タキサンを単離または分離することができるポリエチレンイミンマトリックスを含むが、これらに限定されない固体マトリックスに結合している（ａｔｔａｃｈｅｄ）（例えば、結合している（ｂｏｎｄｅｄ））アミノ含有物質を使用して、１種以上のタキサンを含有する物質からパクリタキセルまたは他のタキサンを単離または分離することを含む。マトリックス（例えば、固体マトリックス）に結合している他の好適なアミノ含有物質は、米国特許第５，０８５，７７９号および同第５，０９２，９９２号に開示されている物質を含んでもよい。これらの特許は共に全体として引用することにより本明細書の１部を構成している。
別の一実施態様において、本発明は、タキサンを含有する組成物から、パクリタキセルを含む種々のタキサンの分離または精製の助けとなるＰＥＩＳ樹脂の用途に関する。この目的のためのこれらの樹脂の使用は新規で、従来技術よりすぐれていると考えられる。好ましい樹脂には、ＰＥＩおよびＤＥＡＭが挙げられる。
別の一実施態様において、本発明は、タキサン混合物から１種以上のタキサンおよびそれらの類似体を単離する方法に関する。タキサン混合物はバイオマス抽出エキス（ｅｘｔｒａｏｒ）を含んでも、または半合成または全合成工程で得られてもよい。本発明の方法は、
（ａ）タキサン混合物を、マトリックス（例えば、ＰＢＳ樹脂）に結合しているアミノ含有物質で処理するステップと、
（ｂ）クロマトグラフィー樹脂から１種以上のタキサンおよびそれらの類似体を溶出するステップと、
（ｃ）溶出液の１つ以上の分画中の１種以上のタキサンおよびそれらの類似体を回収するステップと
を含む。
（ａ）タキサン混合物を、マトリックス（例えば、ＰＢＳ樹脂）に結合しているアミノ含有物質で処理するステップと、
（ｂ）クロマトグラフィー樹脂から１種以上のタキサンおよびそれらの類似体を溶出するステップと、
（ｃ）溶出液の１つ以上の分画中の１種以上のタキサンおよびそれらの類似体を回収するステップと
を含む。
別の他の実施態様において、本発明は、イチイ属（Ｔａｘｕｓ）抽出エキスなどのタキサンを含有する物質、またはイチイ（Ｙｅｗ）として知られる植物の群から選択される植物物質から誘導され、半合成もしくは全合成工程から得られるタキサン混合物中のタキサンを精製するおよび／またはタキサンの濃度を増加させる方法に関する。本発明の方法は：
（ａ）タキサンおよびそれらの天然類似体を含む物質を、マトリックス（例えば、ＰＢＳ樹脂）に結合しているアミノ含有物質で処理するステップと、
（ｂ）クロマトグラフィー樹脂からタキサンおよびそれらの類似体を溶出するステップと、
（ｃ）溶出液の１つ以上の分画中のタキサンおよびそれらの類似体を回収するステップと
を含む。
（ａ）タキサンおよびそれらの天然類似体を含む物質を、マトリックス（例えば、ＰＢＳ樹脂）に結合しているアミノ含有物質で処理するステップと、
（ｂ）クロマトグラフィー樹脂からタキサンおよびそれらの類似体を溶出するステップと、
（ｃ）溶出液の１つ以上の分画中のタキサンおよびそれらの類似体を回収するステップと
を含む。
本発明およびその利点は、以下の詳細な説明および添付の図面を参照することによってさらに理解されるであろう。
本明細書において使用する「アルコキシ基」は、酸素原子に結合している直線状、分岐状または環状飽和炭化水素を意味する。好ましくは、アルコキシ基は、炭素原子数１〜６である。アルコキシ基はまた、例えば、アルカノイルオキシ基、アルケニル基、アルキル基、アルキルシリル基、アルキルスルホニル基、アルキルスルホキシ基、アルキルチオ基；アルキニル基、モノ−およびジ−アルキルアミノ基並びにモノ−およびジ−アリールアミノ基などのアミノ基、アミド基、アリール基、アリールアルキル基、カルボキシ基、カルボキシアルコキシ基、カルボキシアミド基、カルボキシレート基、ハロアルキル基、ハロゲン、ヒドロキシル基、ニトリル基、ニトロ基、ホスフェート基、シロキシ基、スルフェート基、スルホンアミド基、スルホニルオキシ基およびこれらの組み合わせなどの置換基を含んでもよい置換アルコキシ基をいう。アルコキシ基の好ましい例には、特に、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、シクロプロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、シクロブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ｎｅｏ−ペントキシ、シクロペントキシ、ヘキソキシおよびシクロヘキソキシが挙げられる。
本明細書において使用する「アルキル基」は、直線状、分岐状または環状飽和炭化水素を意味する。好ましくは、アルキル基は、炭素原子１〜６個を有する。アルキル基は、例えば、アルカノイルオキシ基、アルケニル基、アルキル基、アルキルシリル基、アルキルスルホニル基、アルキルスルホキシ基、アルキルチオ基；アルキニル基、モノ−およびジ−アルキルアミノ基並びにモノ−およびジ−アリールアミノ基などのアミノ基、アミド基、アリール基、アリールアルキル基、カルボキシ基、カルボキシアルコキシ基、カルボキシアミド基、カルボキシレート基、ハロアルキル基、ハロゲン、ヒドロキシル基、ニトリル基、ニトロ基、ホスフェート基、シロキシ基、スルフェート基、スルホンアミド基、スルホニルオキシ基およびこれらの組み合わせなどの置換基を含んでもよい置換アルキル基もいう。好ましい置換基はアルコキシ基、ジ−アルキルアミノ基、ジ−アリールアミノ基などのアミノ基、カルボン酸含有基、ハロアルキル基、ハロゲン、ヒドロキシル基、ニトリル基、ニトロ基および硫酸基である。好ましいアルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、ペンチル、１−エチルプロピル、シクロペンチル、ヘキシルおよびシクロヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書において使用する「アリール基」は、場合により置換されているフェニル基またはナフチル基を意味する。アリール基の置換基の例には、アルカノイルオキシ基、アルケニル基、アルコキシ基、アルキルシリル基、アルキルスルホニル基、アルキルスルホキシ基、アルキルチオ基；アルキニル基、モノ−およびジ−アルキルアミノ基並びにモノ−およびジ−アリールアミノ基などのアミノ基、アミド基、アリール基、アリールアルキル基、カルボキシ基、カルボキシアルコキシ基、カルボキシアミド基、カルボキシレート基、ハロアルキル基、ハロゲン、ヒドロキシル基、ニトリル基、ニトロ基、ホスフェート基、シロキシ基、スルフェート基、スルホンアミド基、スルホニルオキシ基およびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい置換基はアルコキシ基、アルキル基、ジアルキルアミノ基およびジアリールアミノ基などのアミノ基、カルボン酸−含有基、ハロアルキル基、ハロゲン、ヒドロキシル基、ニトリル基、ニトロ基およびスルホン酸基である。
本明細書において使用する「アリールアルキル基」は、アルキル基に結合しているアリール基を意味する。アリールアルキル基の例はベンジル基である。
本明細書において使用する「基本的なバッカチン（ｂａｃｃａｔｉｎ）ＩＩＩ構造」は、図６に示す式（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4、Ｒ7、Ｒ10およびＲ13は各々、独立に、水素、アルキル基、アシル基、アリール基、アリールアルキル基、ビニル基、エーテル基、エステル基、グリコシド基、オキソ基またはヒドロキシル保護基である）を有する化合物を意味する。図７に示す構造式を有するバッカチンＩＩＩおよび図８に示す構造式（式中、Ａｃはアセチルまたはアセテート基 （ＣＨ3Ｃ（Ｏ）−）であり、Ｂｚはベンゾイル基（ＰｈＣ（Ｏ）−またはＣ6Ｈ5Ｃ（Ｏ）−）である）を有する１０−デアセチルバッカチンＩＩＩが、基本的なバッカチンＩＩＩ構造の定義に含まれる。
本明細書において使用する「エステル基」は、エステル官能基、すなわち−Ｃ（Ｏ）−ＯＲを有する直線状、分岐状または環状置換基を意味する。エステル基の例には、ヒドロキシル基に結合している、アセチル（ａｃｔｙｌ）およびベンゾイルなどのアシル基が挙げられる。
本明細書において使用する「エーテル基」は、エーテル官能基、すなわち−Ｃ−Ｏ−Ｃ−を有する直線状、分岐状または環状置換基を意味する。エーテル基の例には、ＨＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣ（ＣＨ2ＯＨ）Ｈ−が挙げられるが、これに限定されない。
本明細書において使用する「グリコシド基」または「グリコシル基」は、酸素または窒素原子に結合している非−糖基を含有し、加水分解の結果グルコースなどの糖を生ずる数多くの糖誘導体のいずれかを意味する。好ましいグリコシル（ｇｙｌｃｏｓｙｌ）基の例はキシロシルである。
本明細書において使用する「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素および／またはヨウ素を意味する。
本明細書において使用する「複素環基」は、環に炭素以外の原子、例えば、酸素、窒素または硫黄、を少なくとも１つ含有する飽和、不飽和または芳香族環状化合物である。複素環基の例には、２−フランなどのフリル、モルホリノ、ピペラジノ（ｐｉｐｅｒａｄｉｎｏ）、ピペラジノ（ｐｉｐｅｒａｚｈｎｏ）、Ｎ−メチルピペラジノ（ｐｉｐｅｒａｚｉｕｏ）、ピロリル、ピリジルおよびチオフェン（ｔｈｉｏｐｈｅｎｚ）が挙げられる。
本明細書において使用する「オキソ−基」は、米国特許第５，３５６，９２８号に記載されているキシロシドなどのグリコシド基の酸化によって誘導される置換基を意味する。
本明細書において使用する「タキサンまたはタキサン分子」には、基本的なバッカチンＩＩＩ構造のＣ−１３位に位置するヒドロキシル基とエステルを形成する（２Ｒ，３Ｓ）−Ｃ6Ｈ5ＣＨ（Ｒｘ）ＣＨ（ＯＨ）Ｃ（Ｏ）−基を有する基本的なバッカチンＩＩＩ構造を含有する分子が挙げられるが、これらに限定されない。Ｒｘによって表される基は、アミノ基、アミノ基の塩（例えば、アンモニウム塩）、アミノ保護基で保護されているアミノ基またはアミノ基に変換することができる置換基であってもよい。基本的なバッカチンＩＩＩ構造および（２Ｒ，３Ｓ）−Ｃ6Ｈ5ＣＨ（Ｒｘ）ＣＨ（ＯＨ）Ｃ（Ｏ）−基の種々の異性体、同族体および類似体もタキサン分子の定義に含まれる。また、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ構造もタキサン分子の範囲内であると考慮される。タキサンまたはタキサン分子の定義に含まれるものには、初代タキサン、例えば、タキソールＡ（パクリタキセル）、タキソールＢ（セファロマニン）、タキソールＣ，タキソールＤ、タキソールＥ、タキソールＦおよびタキソールＧが挙げられるが、これらに限定されない。さらに、タキサンまたはタキサン分子の定義はドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標））（例えば図５〜６を参照されたい）を含む。
本明細書において使用する「ビニル基」は、炭素−炭素二重結合を有する直線状または分岐状置換基を意味する。ビニル基の例には、１−メチル−１−プロペニル（ＣＨ3ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−）および２−メチル−１−プロペニル（（ＣＨ312Ｃ=ＣＨ-）が挙げられるが、これらに限定されない。
イチイは、タクスス（Ｔａｘｕｓ）種である数多くの木の名称であり、イチイ属（Ｔａｘｕｓ）はイチイ科（Ｔａｘａｃｅａｅ）のプレーンな属である。タキソールは、１９６２年初頭に、ワシントン州で採取されたタイヘイヨウイチイ（Ｐａｃｉｆｉｃ ｙｅｗ：Ｔａｘｕｓ Ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）の樹皮から単離され、その後、１９７１年に、ヨーロッパイチイ（Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｙｅｗ：Ｔａｘｕｓ ｂａｃｃａｔａ）およびイチイ（Ｔａｘｕｓ ｃｕｓｐｉｄａｔａ）（日本イチイ（Ｊａｐａｎｅｓｅｓ ｙｅｗ））を含む２つの他のタクスス種に存在すると報告された。徹底的な検討により、タキソールは、数多くの他のタクスス種および栽培品種に存在することがさらに報告された。これらには、タクスス・グロボーサ（Ｔａｘｕｓ ｇｌｏｂｏｓａ）（メキシコイチイ（Ｍｅｘｉｃａｎ ｙｅｗ））、タクスス・フロリダーナ（Ｔａｘｕｓ ｆｌｏｒｉｄａｎａ）（フロリダイチイ（Ｆｌｏｒｉｄａ ｙｅｗ））、カナダイチイ（Ｃａｎａｄｉａｎ ｙｅｗ：Ｔａｘｕｓ ｃａｎａｄｅｎｓｉｓ）、タクスス・ワリチアーナ（Ｔａｘｕｓ ｗａｌｌｉｃｈｉａｎａ）（ヒマラヤイチイ（Ｈｉｍａｌａｙａｎ ｙｅｗ））、タクスス・ウンナネシス（Ｔａｘｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ）、チュウゴクイチイ（Ｔａｘｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）およびメディアイチイ（Ｔａｘｕｓ ｍｅｄｉａ）栽培品種、例えば、メディアイチイ「デンシホルミス（Ｄｅｎｓｉｆｏｒｍｉｓ）」、メディアイチイ「ヒックシ（Ｈｉｃｋｓｉｉ）」、メディアイチイ「ブロンニ（Ｂｒｏｗｎｉｉ）」、メディアイチイ「ダーク・グリーン・スプレダー（Ｄａｒｋ Ｇｒｅｅｎ Ｓｐｒｅａｄｅｒ）」、メディアイチイ「ランヤン（Ｒｕｎｙａｎ）」、メディアイチイ「ワージ（Ｗａｒｄｉｉ）」、メディアイチイ「タウトニ（Ｔａｕｔｏｎｉｉ）」、セイヨウイチイ（Ｔ．ｅｕｓｐｉｄａｔａ）「カピタータ（Ｃａｐｉｔａｔａ）」等々の数多くの観賞用雑種も挙げられるが、これらに限定されない。本発明では、イチイ属抽出エキスまたは半合成反応混合物は、上記に記載する種および栽培品種を含むが、これらに限定されない任意のイチイ種から誘導してもよい。本発明に使用するための他のイチイ種は、Ｃｈａｄｗｉｃｋ，Ｌ．Ｃ．およびＫｅｅｎ，Ｒ．Ａ．１９８６年５月，“Ａ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｅｎｕｓ Ｔａｘｕｓ”，Ｒｅｓ． Ｂｕｌｌ． １０８６，オハイオ農業研究開発センター（Ｏｈｉｏ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｃｅｎｔｅｒ）；Ａｐｐｅｎｄｉｎｏ，Ｇ．１９９５年、“Ｔｈｅ Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｙｅｗ Ｔｒｅｅ”：Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｒｅｐｏｒｔｓ １２（４）：３４９〜３６０；野生動物相および植物相の絶滅危惧種の国際的な取引に関する会議：植物委員会の第１１回議題（Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ Ｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｔｒａｄｅ ｉｎ Ｅｎｄａｎｇｅｒｅｄ Ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ Ｗｉｌｄ Ｆａｕｎａ ａｎｄ Ｆｌｏｒａ：Ｅｌｅｖｅｎｔｈ ｍｏｏｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｌａｎｔｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ），ＬａｎｇＫａｗｉ（マレーシア），２００１年９月３〜７日、Ｄｏｃｕｍｅｎｔ ＰＣ１１ ＤＯＣ．２２−ｐ．１，アメリカ合衆国；およびＧｒｅｅｒ，Ｓｃｈｕｔｚｋｉ，Ｒ．Ｅ．，Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ，Ａ．およびＨａｎｃｏｃｋ，Ｔ．Ｆ．Ｏｃｔ．／Ｄｅｃ．１９９３．“Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔａｘｕｓ Ｃｕｌｔｉｖａｒｓ”：ＨｏｒｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，３（４）：４３０〜４３３に同定されている。これらの文献は各々全体に引用することにより本明細書の1部をなしている。
驚くべきことに、ＰＢＳ樹脂を充填した順相液体クロマトグラフィーカラムによって、パクリタキセルおよびパクリタキソール類似体並びにそれらの同属種を含むタキサン化合物をイチイ種から高収率で単離および精製することができることをここで見出した。本発明の方法によって、パクリタキセルの数多くの類似体を、天然のバイオマス抽出エキスおよび半合成または全合成工程で得られる物質から単離することができる。
本発明の出発物質は、通常イチイ木と呼ばれる植物群から選択される植物物質であってもよい。この群の最も好適な植物はイチイ種である。イチイ種のうち、メディアイチイ栽培品種が特に好ましい。例えば、好ましい栽培品種には、メディアイチイ「ヒクシ」またはメディアイチイ「ダーク・グリーン・スプレダー」が挙げられるが、これらに限定されない。本発明においてイチイ木のある一部を使用することが便利であるが、タキソールおよびその天然の類似体は植物全体または木部、幹、根、葉（針状葉）、種子もしくはこれらの任意の組み合わせなどの別々の部分から抽出されてもよい。被抽出エキス質は、そのままでもまたは乾燥されてもよい。好ましくは、樹皮または針状葉を使用する。さらに、本発明の方法は、インビトロ培養技術を使用することによって得られる増殖植物細胞または培養上清からタキサンを精製するために使用することができる。さらに、本発明の方法は、クロマトグラフィー技法によって処理された混合物またはこのような技法によって処理されていない混合物からのタキサンの分離および精製に適用可能である。本発明の方法は、さらに、半合成または全合成手法で得られるタキサンの分離および精製に適用することができる。
本発明の一態様において、マトリックス（例えば、シリカ）に結合しているアミノ含有物質を、タキサンを含有する混合物から１種以上のタキサン化合物を分離または単離するために使用する。分離または精製されるこのような物質には、タキソールＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、ドセタキセル、ノナタキセルが挙げられるが、これらに限定されない。マトリックスに結合しているそのようなアミノ含有物質の例には、ＰＢＳ樹脂が挙げられるが、これらに限定されない。これらの樹脂は、典型的には、イオン−交換適用に使用され、従って、一般にイオン化可能な基を含有しないタキサンなどの中性分子を分離するのに有用であるとは期待されないと思われる。タキサン混合物を分離する選択性および分解能は、驚くべきことに、例えば、ＰＢＳ樹脂を使用することによって増強される。例えば、ＰＢＳ樹脂は、例えば、Ｃ１８、Ｃ８およびポリスチレンジビニルベンゼンなどの逆相樹脂より高レベルまでより容易に装填される。例えば、ＰＢＳ樹脂はまた、有利なことに、有機溶媒と共に使用される。
ＰＢＳ樹脂は、種々の孔径および／または粒子径のシリカに結合したポリエチレンイミンポリマーから誘導することができる。シリカは、６０〜３００オングストローム単位の範囲の平均孔径を有する。好ましくは、シリカは約１００〜３００オングストローム単位の平均孔径を有し、さらに好ましくは約１２０オングストローム単位の平均孔径を有する。また、シリカは、約０．２５〜約５００ミクロンの範囲の平均粒子径を有してもよい。好ましくは、シリカは、約１０〜１２０ミクロンの平均粒子径を有し、さらに好ましくは約２０〜６０ミクロンの平均粒子径を有し、最も好ましくは約４０ミクロンの平均粒子径を有する。
本発明の好適なＰＢＳ樹脂はＤＥＡＭを含んでもよい。この樹脂は、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒから、ＣＡＳ登録番号製品コード：７３１７、７４７１、７４７２、７４７３、「ＢＡＫＥＲＢＯＮＤ（登録商標）ＤＥＡＭ クロマトグラフィーパッキング」の名称で購入することができる。別の好適なＰＢＳ樹脂にはＰＥＩを挙げることができる。この樹脂も、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒから、ＣＡＳ登録番号：１２６８５０−０７−５、製品コード：７１３４、７１８０、７２６４、７３６８、７４７６および８１７９、「ポリエチレンイミン結合シリカゲル」の名称で購入することができる。
本発明の別の一実施態様において、マトリックス（例えば、ＰＢＳ樹脂）に結合したアミノ含有物質は、例えば、ＰＥＩのように、非−誘導体化されていてもよい。本発明のクロマトグラフィー樹脂は、ポリエチレンイミン部分の一級および／または二級アミノ基が反応性部分と反応している誘導体化ＰＢＳ樹脂を挙げることができるが、これに限定されない。本発明のＰＢＳ樹脂は、一般式：
上記の構造は、例示にすぎず、限定する目的のものではない。ＰＢＳ樹脂の構造は、多数の他の分岐パターンをとってもまたはシリカ粒子の表面への１つもしくは多数の結合部位を含んでもよい。また、Ｒ基には、Ｈ基、メチル基、アシル基、アルキル基、アリール基、アリールアルキル基、スルホニル基またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
ＰＥＩポリマーのアミノ基は、アルキル化、アリール化もしくはアシル化または他の手段によって官能基化されてよい。アミノ基を官能基化することにより、樹脂は、選択性、分解能または他の望ましい特性が増強されうる。例えば、ＤＥＡＭは官能基化ＰＥＩの具体的な例である。
本発明の樹脂は、イチイ属抽出エキスなどのバイオマス抽出エキスを含むが、これらに限定されないタキサン混合物からタキサンを単離または精製するために使用することができる。別の一実施態様において、本発明は、溶媒分配、遠心分離、ろ過、沈殿またはそれらの任意の組み合わせによって製造されるタキサン混合物（例えば、バイオマス抽出エキス）からタキサンを単離または精製するために使用することができる。本発明の樹脂はまた、タキサンが合成または半合成工程から製造されていないタキサンを含有する天然由来の混合物からタキサンを単離および／または精製するために使用することができる。さらに、本発明の樹脂は、半合成または全合成工程から得られるタキサンを含む混合物からタキサンを単離または精製するために使用することができる。
シリカ、アルミナ、Ｃ８、Ｃ１８、ポリスチレンジビニルベンゼン等などの種々の形態のクロマトグラフィーは、イチイ属抽出エキスからタキソールＡおよび他のタキサンを精製する際に有用であることが既知である。クロマトグラフィーに、溶媒分配および結晶化などの当業者に既知の他の方法を追加してもよい。ＰＢＳ樹脂は、イチイ属抽出エキスからのタキソールＡおよび他のタキサンの精製を簡単にするために、これらの他の技法と併用使用してもよい。例えば、本発明者らは、ＰＢＳ樹脂は、タキソールＢ、Ｎ−メチルタキサン、タキサンシンナメート等からタキソールＡを分離する際に特に有効であることを発見した。ＰＢＳ樹脂はまた、イチイ属抽出エキス中に見られる他のタキサンから初代タキサン（図６を参照されたい）などの関連する群のタキサンを分離するためにも使用することができる。ＰＢＳ樹脂は、望ましくない成分からタキサンを分離し、それによって混合物中のタキサン濃度を増加するために使用することができる。
別の一実施態様において、出発物質は、通常イチイと呼ばれる植物群から選択される植物物質を含んでもよい。この群の最も好適な植物はイチイ属の種である。本発明に使用する出発物質には、（１）半合成または全合成手法以外の手法で製造された１種以上のタキサンを含む任意の物質；（２）クロマトグラフィーで分取された１種以上のタキサンを含む任意の物質；（３）クロマトグラフィーで分取されない１種以上のタキサンを含む任意の物質；（４）溶媒分配、遠心分離、ろ過、沈殿もしくはこれらの任意の組み合わせによって分取される１種以上のタキサンを含む任意の物質；（５）イチイ属植物の１種以上のタキサンを含む任意の物質；または（６）タキサンがタイヘイヨウイチイだけから誘導されるのではない、１種以上のイチイ属植物からの１種以上のタキサンを含む任意の物質が挙げられるが、これらに限定されない。出発物質は、上記のパラメーターの任意の組み合わせによって分取される１種以上のタキサンを含む任意の物質を含んでもよい。タキサンを含有する物質（例えば、バイオマス抽出エキスまたは半合成もしくは全合成反応混合物）を調製する方法は当技術分野において公知である。
別の他の実施態様において、本発明は、タキサンを含有する混合物から１種以上のタキサンを単離する方法であって、（ａ）混合物をＰＢＳ樹脂で処理するステップであって、１種以上のタキサンは１種以上のイチイ属植物から誘導され、１種以上のタキサンはタイヘイヨウイチイだけから誘導されるのではないステップと、（ｂ）溶離液で１種以上のタキサンをＰＢＳ樹脂から溶出するステップと、（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップとを含む方法に関する。
別の実施態様において、本発明は、タキサンを含有する混合物から１種以上のタキサンを単離する方法であって、（ａ）２５重量％未満または４０重量％を超える初代タキサンを含む混合物をＰＢＳ樹脂で処理するステップと、（ｂ）ＰＢＳ樹脂から１種以上のタキサンを溶出するステップと、（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップとを含む方法に関する。
別の実施態様において、本発明は、１種以上のタキサンを単離する方法に関しており、この方法は、（ａ）タキサンを含有する混合物をＰＢＳ樹脂で処理するステップであって、混合物が約２５〜４０重量％の初代タキサンを含み、１種以上のタキサンがタイヘイヨウイチイだけから誘導されるのではないステップと、（ｂ）ＰＢＳ樹脂から１種以上のタキサンを溶出するステップと、（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップとを含む。
本発明の別の一実施態様において、出発物質は、タキソールＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦまたはＧを含むが、これらに限定されない初代タキサンを約２５重量％未満または約４０重量％より多く含んでもよい。抽出エキス中の残りの物質は、夾雑物を含むが、これらに限定されない他の化合物を含んでもよい。出発物質中の初代タキサンの他の好適な量は、約０．５％〜１％、１％〜１０％、１０％〜１５％、１５％〜２０％、２０％〜２５％、２５％〜３０％または３０％〜３５％または３５％〜４０％を含んでもよい。他の量は、約４０％〜５０％、５０％〜６０％、６０％〜７０％、７０％〜８０％、８０％〜９０％または９０％〜１００％を含んでもよい。
別の他の実施態様において、バイオマス抽出エキスはイチイ属植物から誘導される。さらに別の他の実施態様において、バイオマス抽出エキスは、タイヘイヨウイチイを除く任意のイチイ属植物から誘導される。さらに別の他の実施態様において、バイオマス抽出エキスは、タイヘイヨウイチイを除く任意のイチイ属植物から誘導され、タキソールＡ、Ｂ，Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦまたはＧを含むが、これらに限定されない初代タキサンを約２５重量％〜約４０重量％含む。
別の実施態様において、本発明は、１種以上のイチイ属植物から誘導されるバイオマス抽出エキスから１種以上のタキサン化合物を精製する方法に関する。一実施態様において、バイオマス抽出エキスは、タイヘイヨウイチイを除く１種以上のイチイ属植物由来である。別の実施態様において、バイオマス抽出エキスは２５重量％未満または４０重量％より多い初代タキサンを含む。さらに別の実施態様において、バイオマス抽出エキスは初代タキサンを約２５％〜約４０％含み、バイオマス抽出エキスはタイヘイヨウイチイを除く１種以上のイチイ属植物から誘導される。
更に、他の一実施態様において、バイオマス抽出エキスは、約５０％未満、４０％未満、３０％未満または２０％未満、好ましくは１０％未満、さらに好ましくは５％未満、最も好ましくは３％未満、２％未満、１％未満、０．５％未満または０．２５％未満の量のイソブチルアルコールを含んでもよい。
本発明の方法は、バイオマス抽出エキスの純度を約１０％〜２０％、２０％〜３０％、３０％〜４０％、４０％〜５０％、５０％〜６０％、６０％〜７０％、７０％〜８０％、８０％〜９０％、９０％〜１００％、１００％〜１１０％、１１０％〜１２０％、１２０％〜１３０％、１３０％〜１４０％、１４０％〜１５０％、１５０％〜２００％、２００％〜２５０％、２５０％〜３００％、３００％〜３５０％、３５０％〜４００％、４００％〜４５０％、４５０％〜５００％、５００％〜５５０％、５５０％〜６００％、６００％〜６５０％、６５０％〜７００％、７００％〜７５０％、７５０％〜８００％、８００％〜８５０％、８５０％〜９００％、９００％〜９５０％、９５０％〜１０００％増加することができる。本明細書において使用する純度という用語は、乾燥した形態の物質またはバイオマス抽出エキス中に存在する１種以上のタキサン化合物の重量パーセントを意味する。
本発明の樹脂は、全体または一部が半合成または全合成工程で得られるタキサン混合物から１種以上のタキサンを精製するために使用することができる。他の一実施態様において、本発明の樹脂は、粗反応混合物から半合成タキソールＡまたは他の半合成タキサンを精製するために使用することができる。ほとんどの合成反応は、多くの場合、望ましい生成物に構造的に密接に関連する副産物または未反応の出発物質を生成するので、このような生成物を精製する工程は非常に重要である。例えば、ＰＢＳ樹脂は、多数の関連のある夾雑物および例えば、図１０に示す構造的に関連のある化合物から、本明細書に記載する工程から生成される半合成タキソールＡの精製を増強し、増幅することが示されている。
他の一実施態様において、本発明は、半合成または全合成工程で調製される物質から１種以上のタキサン化合物を精製することを含む。図１および２は、本発明の樹脂を使用する例示的で、限定するものではない半合成工程を示す。この工程は、２００３年８月４日提出の出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０３／１０５５６号、発明の名称「タキサン分子の変換（Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｏｆ Ｔａｘａｎｅ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ）」および出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０３／２４６６６号、「タキサンアミドをパクリタキセルまたは他のタキサンに変換するための方法および組成物（Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ Ｔａｘａｎｅ Ａｍｉｄｅｓ ｔｏ Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ ｏｒ Ｏｔｈｅｒ Ｔａｘａｎｅｓ）」に記載されている。上記の出願は各々全体に引用することにより本明細書の1部を構成している。
他の一実施態様において、このような物質は、約１０重量％未満のＣ−２’ベンゾイル初代タキサンを含み、好ましくは約５重量％未満のＣ−２’ベンゾイル初代タキサンを含み、さらに好ましくは約３重量％未満のＣ−２’ベンゾイル初代タキサンを含み、最も好ましくは約１重量％未満のＣ−２’ベンゾイル初代タキサンを含む。別の他の実施態様において、タキサンを含有する物質は、約９％未満、８％未満、７％未満、６％未満、４％未満、２％未満、１％未満、０．５％未満、０．１％未満または０．０１％未満を含む。タキサン夾雑物には、タキソールＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦまたはＧのＣ−２’ベンゾエートが挙げられるが、これらに限定されない。タキサン夾雑物はまた、約１０％未満、９％未満、８％未満、７％未満、６％未満、５％未満、４％未満、３％未満、２％未満、１％未満または０．５％未満のタキソールＢ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦまたはＧのＣ−２’ベンゾエートを含んでもよい。本明細書において使用する重量パーセントという用語は、乾燥した固体形態のこのような物質中に存在する１種以上の化合物の割合を意味する。
他の一実施態様において、本発明は、半合成または全合成工程から得られるタキサン化合物を含む物質から１種以上のタキサンを単離する方法であって、（ａ）物質をＰＢＳ樹脂で処理するステップであって、半合成または全合成工程において反応体として使用される分子がタイヘイヨウイチイだけから誘導されるのではないステップと、（ｂ）ＰＢＳ樹脂から１種以上のタキサンを溶出するステップと、（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップとを含む方法に関する。
別の実施態様において、本発明は、半合成または全合成工程から得られるタキサン化合物を含む物質から１種以上のタキサンを単離する方法に関しており、この方法は、（ａ）タキソールＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦもしくはＧ、またはこれらの組み合わせの２’ベンゾエートを約８重量％〜３重量％未満含む物質をＰＢＳ樹脂で処理するステップと、（ｂ）１種以上のタキサンを溶出するステップと、（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップとを含む。別の実施態様において、本発明は、タキサン分子のＣ−２’ヒドロキシル基をベンゾイル化するステップを除く工程から得られるタキサン化合物を含む物質から１種以上のタキサンを単離する方法に関する。
別の実施態様において、本発明は、半合成または全合成工程で得られるタキサン化合物を含む物質から１種以上のタキサンを単離する方法に関しており、この方法は、（ａ）物質をＰＢＳ樹脂で処理するステップであって、物質がタキソールＢ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦもしくはＧ、またはこれらの組み合わせの２’ベンゾエートを０．５重量％未満含むステップと、（ｂ）１種以上のタキサンを溶出するステップと、（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップとを含む。
別の他の実施態様において、本発明は、タキサン混合物を調製する方法に関する。本発明の方法は、半合成または全合成工程で得られる１種以上のタキサンを含む物質をＰＢＳ樹脂で処理するステップを含む。半合成工程に使用されるタキサンまたは他の化合物は１種以上のイチイ属植物またはタイヘイヨウイチイを除く１種以上のイチイ属植物から誘導される。別の実施態様において、タキサンを含有する物質は、タキソールＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦまたはＧの２’ベンゾエートを３重量％未満含む。別の実施態様において、タキサンを含有する物質は、タキソールＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦまたはＧのＣ−２’ベンゾエートを０．５％未満含む。
別の他の実施態様において、本発明によって処理される物質は、好ましくは１０％未満、好ましくは５％未満、さらに好ましくは１％未満、最も好ましくは０．３％未満の量の安息香酸無水物、安息香酸および塩化ベンゾイルを含んでもよい。
半合成または全合成手法で得られる物質に関しては、これらの物質が本発明によって処理される場合には、結果として生ずる望ましい生成物は、純度が少なくとも７０％であり、好ましくは少なくとも約８０％であり、さらに好ましくは少なくとも約９０％であり、最も好ましくは少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％である。
別の他の実施態様において、本発明によって処理される物質は、特に、分子量約１１０４のタキサン夾雑物および／または分子量約８７１のオキセタン環が開環したタキサンを含んでもよい。
本発明の工程は、物質中の特定のタキサンの純度を約１０％〜２０％、２０％〜３０％、３０％〜４０％、４０％〜５０％、５０％〜６０％、６０％〜７０％、７０％〜８０％、８０％〜９０％、９０％〜１００％、１００％〜１１０％、１１０％〜１２０％、１２０％〜１３０％、１３０％〜１４０％、１４０％〜１５０％、１５０％〜２００％、２００％〜２５０％、２５０％〜３００％、３００％〜３５０％、３５０％〜４００％、４００％〜４５０％、４５０％〜５００％、５００％〜５５０％、５５０％〜６００％、６００％〜６５０％、６５０％〜７００％、７００％〜７５０％、７５０％〜８００％、８００％〜８５０％、８５０％〜９００％、９００％〜９５０％、９５０％〜１０００％増加することができる。本明細書において使用する純度という用語は、乾燥した形態の物質中に存在する１種以上のタキサン化合物の重量パーセントを意味する。
本発明の一実施態様は、ＰＢＳ樹脂を使用する、パクリタキセルを含むタキサン化合物の分取−スケールの分離に関係する。分取的分離は、バッチ、半−連続または連続モードで実施することができる。半−連続および連続モードは、疑似移動床法（ＳＭＢ）式クロマトグラフィーの形態であってもよい。
別の実施態様において、本発明は、液体クロマトグラフィーによる分離を実施するためのＰＢＳ樹脂の使用を含む。このような一実施態様において、少量の酸または塩調整剤を液体クロマトグラフィー分離の移動相に使用する。移動相に使用する酸または塩調整剤には、酢酸、ギ酸、酢酸アンモニウムまたはギ酸アンモニウムを挙げることができるが、これらに限定されない。
ＰＢＳ樹脂は順相モードで使用することができ、タキサンに対する独自の選択性を示す。標準タイプのクロマトグラフィーでは、Ｃ−１８およびシリカの両方において、他のタキサンがパクリタキセルの前後に溶出することがある。ＰＢＳ樹脂における順相クロマトグラフィーでは、構造的に類似しているほとんどの他のタキサンはパクリタキセルの前に溶出して、分取的分離を簡単にすることができる。最も一般的なタキサンのうち、１０−デアセチルタキソールはＰＢＳ樹脂ではパクリタキセルの後に溶出する。好運なことに、１０−デアセチルタキソールの保持時間がかなり長いことにより、分取系における分離が容易になる。１０−デアセチルタキソールは半合成製造における顕著な副産物であり、イチイ属全種（Ｔａｘｕｓ ｓｐｐ）の天然抽出エキスにも通常に見られるので、これは重要である。
図１０は、種々の媒体における保持時間の比較およびタキサン標準を示す。図１０では、脚注１は、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（商標）Ｓｙｎｅｒｇｉ（商標）ＨＹｄｒｏ−ＲＰ，４ｍｍ（２５０×４．６ｍｍ）ＨＰＬＣカラム：アセトニトリル／水濃度勾配溶出（４０％〜６０％ＡＣＮ、４５分間）、流速１．５ｍｌ／分である。脚注２は、Ａｍｉｃｏｎ Ｓｉ−１００−１０ｓｐ（２５０×４．６ｍｍ）ＨＰＬＣカラム：均一濃度溶離、６０％酢酸エチル／４０％ヘキサンおよび１．０ｍｌ／分である。脚注３は、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ（登録商標）Ｗｉｄｅ−Ｐｏｒｅ ＰＥＩ，５ミクロン（２５０×４．６ｍｍ）ＨＰＣＣカラム：均一濃度溶離、８０％酢酸エチル／２０％ヘキサン（０．５％酢酸含有）、流速１．０ｍｌ／分である。脚注４は、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ（登録商標）Ｗｉｄｅ Ｐｏｒｅ ＤＥＡＭ，５ミクロ（２５０×４．６ｍｍ）ＨＰＣＣカラム：均一濃度溶離、酢酸エチル（０．５％酢酸含有）、流速１．０ｍｌ／分である。脚注５は、タキサン標準の混合物の１回注入の保持時間である。脚注６は、パクリタキセルと比較した保持時間である。脚注７は、１つのタキサン標準を３回注入した平均の時間である。
ＰＥＴ結合樹脂はタキサンに対する同様の選択性を示すが、一部のタキサンはパクリタキセルに近接して溶出する（例えば、１０−デアセチル−７−ｅｐｉ−タキソール、図１０を参照されたい）。ＤＥＡＭなどの化学的に修飾した形態のＰＥＩは、同じパターンの選択性を保持しており、近接して溶出するタキサンからのパクリタキセルの顕著な分離を示す。
ＰＢＳ樹脂はタキサンに対する親和性が高い。図１０からわかるように、約６０％酢酸エチルと約４０％ヘキサンの混合物は、妥当な時間でパクリタキセルをシリカから溶出するのに十分である。ＰＥＩは、強力な溶媒の混合物、例えば、約７９．７５％酢酸エチル、１９．７５％ヘキサンおよび０．５％酢酸を必要とする場合がある。パクリタキセルに対するＤＥＡＭの親和性はＰＥＩより強力であり、約９９．５％酢酸エチルと約０．５％酢酸の混合物をその移動相として必要とする。ＰＥＩおよびＤＥＡＭに使用する溶媒系が強力であるほど、多くのタキサンを溶解し、装填量を多くすることができる。
バリエーションとして、ポリエチレンイミン結合シリカ樹脂が、イチイ属抽出エキスまたは半合成もしくは全合成タキサン反応混合物などのタキサン混合物から、パクリタキセルを含む種々のタキサンを分離するために使用される。パクリタキセルを含む半合成タキサン混合物を製造するのに好適な方法および組成物は、２００２年８月４日提出の出願番号第６０／４０１，１９１号（’１９１出願）；２００３年４月５日提出のＰＣＴ／ＵＳ０３／１０５５７号；発明の名称「本質的に環の塩素化のないベンゾイル化剤を使用して製薬学的化合物（例えば、パクリタキセルまたは他のタキサン）を製造する方法および組成物（Ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｐｒｅｐａｒｉｎｇ ａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ（ｅ．ｇ．，Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ ｏｒ ｏｔｈｅｒ Ｔａｘａｎｅｓ） Ｕｓｉｎｇ ａ Ｂｅｎｚｏｙｌａｔｉｎｇ Ａｇｅｎｔ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ Ｆｒｅｅ ｏｆ Ｒｉｎｇ Ｃｈｌｏｒｉｎａｔｉｏｎ）」の仮出願、２００３年２月４日提出の米国特許出願第６０／４４４，８４７号に記載されている。これらの出願は各々全体に引用することにより本明細書の1部を構成する。
他の一実施態様において、本発明の方法は以下のステップの１つ以上を含む：（ｉ）適当量のＰＢＳ樹脂を全てカラムに充填するステップ；（ｉｉ）有機溶媒、好ましくは酢酸を含有するアセトンでカラムを平衡にするステップ；（ｉｉｉ）イチイ属抽出エキスの混合物または半合成もしくは全合成反応混合物をカラムに装填するステップ；（ｉｖ）有機溶媒、好ましくはアセトン／酢酸で混合物を溶出するステップ；（ｖ）溶出液を１つ以上の分画に回収するステップ；（ｉｖ）１つ以上の分画中に所望のタキサンの存在を確認するステップ；および（ｉｖ）所望のタキサンを結晶化によって精製するステップ。
他の一実施態様によると、粗または半−精製抽出中に含有されるタキソールおよび他のタキサンを精製するために、タキサンを含有する物質に順相液体クロマトグラフィー（「ＮＰＬＣ」）が実施される。液体クロマトグラフィーによる分離および精製を実施するために、通常、充填剤（例えば、固定相または吸着剤）、溶離液（例えば、移動相）の組成、カラムの寸法および溶離液の流速を含む数種の変数を検討する。これらの変数は当業者に既知であるか、または必要以上の実験を行うことなく容易に決定することができる。
クロマトグラフィーカラムの寸法並びにクロマトグラフィー分離の温度、流速および時間は本発明の実施にとって重要ではなく、かつ当業者に既知であるか、または必要以上の実験を行うことなく容易に決定することができる効率的なクロマトグラフィーのための要件に主に基づいている。
他の一実施態様において、半合成パクリタキセルのクロマトグラフィーによる精製は、移動相として０．５％酢酸を含有する酢酸エチルを使用するＤＥＡＭ樹脂（２０μｍ球状、１００Å）で実施することができる。分離の進行は、適切な吸光波長、好ましくは２５４ｎｍおよび２８０ｎｍにおけるＵＶ吸光度によってモニターすることができる。パクリタキセルのピークを分画に回収する。ピークの上昇部分（ベースラインから頂点まで）を数分画、典型的には２または３分画、に回収することができる。これらの分画の最も早いものは７−ｅｐｉ−タキソールおよび１０−デアセチル−７−ｅｐｉ−タキソール夾雑物のほとんどを含有する。ピークの残りの部分を１つ以上の分画に回収することができる。メタノールと０．５％酢酸を含有する酢酸エチルの５０：５０混合物の段階的−濃度勾配を使用して、１０−デアセチルタキソールをカラムから溶出することができる。
他の一実施態様において、残りの夾雑物の段階的濃度勾配溶出は、操作を簡潔および容易にするために直線的濃度勾配の使用より好ましい。直線的濃度勾配を使用するためには、さらに複雑な装置セットが必要になる。事前−混合溶媒系を使用する段階的濃度勾配溶出は、移動相を供給する１つの弁をポンプに変更することによって実施することができる。別の他の実施態様において、少量のメタノールは、例えば、２−デベンゾイルタキサール（ｄｅｂｅｎｚｏｙｌｔａｘａｌ）などの溶出の遅い夾雑物の溶出を速めるので移動相系へのメタノールの導入を遅延することが好ましい。
他の一実施態様において、本発明の液体クロマトグラフィーシステムは、有利には、分取モード（１００ｍｇ量超）で使用される。分取カラムは、典型的には、径７ｍｍ〜３００ｍｍで、長さ１０ｃｍ〜１００ｃｍである。クロマトグラフィー分野の当業者は、被精製物質の量に適切な床寸法のカラムを容易に選択することができる。移動相の流速は、カラムの寸法、樹脂の粒子径および孔径並びに所望のピーク分解能を含む種々の因子によって調節される。分取カラムの典型的な流速は１０ｍｌ／分〜４ ｌ／分の範囲であってもよい。
クロマトグラフィー分析に必要な時間は約１０分〜約３０時間の範囲である。クロマトグラフィー分離の温度は、典型的には、周囲温度においてであるが、これよりわずかに高い温度を使用することができる。
本発明によりクロマトグラフィー分離を実施する場合には、カラムは低圧（ＬＰＬＣ）から中圧（ＭＰＬＣ）モードまで、典型的には１０〜５００ｐ．ｓ．ｉ．ｇ．で操作することができる。また、高圧（ＨＰＬＣ）モード、典型的には５００〜２０００ｐ．ｓ．ｉ．ｇ．で実行してもよい。
別の実施態様において、イチイ属抽出エキス混合物または半合成もしくは全合成反応混合物は、カラムに装填する前に溶解してもよい。例えば、混合物は、有機溶媒を使用してまたは当業者に既知の手段によって溶解してもよい。好ましい有機溶媒混合物はアセトン／酢酸を含む。次いで、適切な量のＰＢＳ樹脂を充填したカラムに溶解した混合物を装填することができる。
本発明に有用な溶媒（溶離液）は、クロマトグラフィーの標準的な実施を参照することによって選択することができる。典型的には、アセトン、酢酸エチル、テトラヒドロフランまたはアセトニトリルなどの中程度に極性の有機溶媒を溶離液として使用することができる。炭素原子数１〜５の他のケトン、エーテルおよびエステルも使用することができる。溶離液の調整剤には、混合物が極性の強いタキサンを含有する場合には、低級アルコール、酢酸および水などの極性の強い溶媒、並びに混合物が極性の弱いタキサンを含有する場合には、アルカンおよびハロゲン化炭化水素などの極性の低い有機溶媒を挙げることができる。調整剤の割合は、被精製混合物の性質に応じて、０〜１００％であってもよい。この割合は当業者が容易に決定することができる。
別の実施態様において、イチイ属抽出エキス混合物または粗反応混合物は、酢酸エチル／ＴＨＦを含む有機溶媒に溶解して、タキサン溶液を形成することができる。タキサン溶液は、弱く加熱しながら撹拌し、次いで真空ろ過して、夾雑物および細片を除去することができる。
粗タキサン溶液は、有機溶媒、好ましくはＥｔＯＡｃ／ＴＨＦ溶液で希釈してもよい。適切な量のＰＢＳ樹脂を含有するカラムに溶液を注入および／または装填することができる。事前に、カラムを有機溶媒、好ましくはＥｔＯＡｃ／酢酸で平衡にすることができる。タキサン溶液をカラムに注入／装填してから、ＥｔＯＡｃをカラムに注入することができる。溶出した物質を多数の分画に回収することができる。メタノール／ＥｔＯＡｃ混合溶媒を含む段階的濃度勾配を使用することができる。所望のタキサンがカラムから溶出され、次いで１つ以上の分画に集められる。洗浄ステップを使用してもよい。
段階的濃度勾配または連続的濃度勾配の濃度勾配溶媒系を使用することが有利である場合もある。濃度勾配の濃度限界は、（１）吸着剤からタキサンを溶出するのに必要な有機溶媒の濃度および（２）有機溶媒が、タキサンを溶出するのに必要な濃度で完全に混和し、単一相で存在するという要件によって決定される。例えば、最初に１００％酢酸エチルを使用し、次いで単一段階、多段階または連続的濃度勾配様式で１〜１０％メタノールに移行することができる。このシステムは、極性が実質的に異なる種々のタキサンを分離するために必要であることがあり、当業者によって容易に決定される。
１つ以上の分画中に所望のタキサンが存在するかどうかは、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、赤外（ＩＲ）分光法、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、逆相ＨＰＬＣおよび質量分析法（ＭＳ）などの当技術分野において既知の分析技法を使用して検出することができる。
所望のタキサンがカラムから回収されたら、最終生成物のタキサン分子またはタキサン混合物の所望の純度に応じて、他のクロマトグラフィー方法または結晶化および／または１回以上の再結晶を使用してさらに精製することができる。結晶化および再結晶は、二成分または三成分溶媒系、すなわち少なくとも１種の可溶化溶媒および少なくとも１種の貧溶媒（ａｎｔｉ−ｓｏｌｖｅｎｔ）を使用して実施することができる。可溶化溶媒の例には、特に、アセトン、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル、塩化メチレン、ＴＨＦ、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコールおよびアセトニトリルが挙げられる。貧溶媒の例には、ヘキサンおよびヘプタンなどの炭化水素溶媒並びに水が挙げられる。ほとんどの場合において、可溶化溶媒と貧溶媒は、使用する比において混和性である。タキサン分子に有用な溶媒系の例には、特に、アセトン／ヘキサンおよびメタノール／水が挙げられる。
図１および２は、本発明のＰＢＳ樹脂（例えば、ＤＥＡＭ）を使用する例示的な化学反応スキームを示す。具体的には、それは、タキサンアミドをパクリタキセルまたは他のタキサンに変換し、ＰＢＳ樹脂を使用して反応生成物からタキサンを精製する半合成工程を示す。タキサンアミドをパクリタキセルまたは他のタキサンに変換する方法は、以前に本明細書に記載した特許出願に示されている。
本発明に好適な具体的なクロマトグラフィー技法および条件を記載したが、本発明によるタキサン誘導体の単離、分離および精製の好ましい実施態様を以下に記載する。
［実施例］
以下の実施例は例示目的のためだけに含まれており、本発明の範囲を、例えば、任意の特定のステップまたは成分に限定する意図のものではない。
以下の実施例は例示目的のためだけに含まれており、本発明の範囲を、例えば、任意の特定のステップまたは成分に限定する意図のものではない。
この実施例は、半−精製メディアイチイ・デンシホルミス抽出エキスからタキソールＡ（パクリタキセル）およびタキソールＢ（セファロマニン）を精製する際のＰＥＩ樹脂の使用を示す。ここでは、７５リットルカラムに２４．５ＫｇのＪ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ ＰＥＩ樹脂（粒子径４０ミクロン、孔径２７５オングストローム、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ Ｉｔｅｍ＃７２６４）を充填した。２カラム容量である１５０リットルの０．５％酢酸を含有するアセトンで流速３．２リットル／分で樹脂を平衡させた。次いで、半−精製イチイ属抽出エキスフィード（ｆｅｅｄ）を、アセトン１ｍＬ当り約２５０ｍｇの濃度、流速０．５リットル／分でカラムに装填した。タキソールの濃度は、１００グラムのＰＥＩ樹脂に対して２．５重量％または２．５グラムのフィード固体であった。フィード固体中のタキソールＡおよびタキソールＢの重量パーセントは１０．８重量％であった。フィードは、０．５％酢酸を含有するアセトンで、流速３．２リットル／分（表面速度＝４．４ｃｍ／分）で溶出した。合計１０分画を回収した。分画１および分画１０は各々７５リットル（１カラム容量）であり、分画２〜９は各々１９リットル（１／４カラム容量）であった。生成物分画２〜５はフィード中の総タキソールＡおよびＢの８７．９６％を含有し、生成物分画を合わせたものの重量パーセントは５８．５９重量パーセントであった。この生成物は、結晶化によるさらなる精製に十分な量であった。
この実施例は、半−精製タイヘイヨウイチイ抽出エキスに見られる夾雑物からタキソールＡ（パクリタキセル）、タキソールＢ（セファロマニン）およびタキソールＣを精製する際のＰＥＩ樹脂の使用を示す。ここでは、半−精製タイヘイヨウイチイ抽出エキスの固体フィードを、０．６％酢酸を含有するアセトンに溶解した。この溶液を、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ ＰＥＩ樹脂（粒子径４０ミクロン、孔径２７５オングストローム、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ Ｉｔｅｍ＃７２６４）に装填した。フィードの装填量は、１００グラムのＰＥＩ樹脂あたり３％すなわち３グラムのフィード固体であった。溶出溶媒は、０．６％酢酸を含有するアセトンであった。フィード成分がカラムから溶出されるとき、試料はカラム容量の約１／２０ごとに回収された。これらの分画をＨＰＬＣで分析し、図３に示すようにデータをプロットした。この操業は、タキソールＡ、ＢおよびＣからの夾雑物の分離を示す。
この実施例は、半合成の粗タキソールＡ（パクリタキセル）を精製する際のＤＥＡＭ樹脂の使用を説明する。ここでは、半合成または全合成工程において反応体として使用する分子は、タイヘイヨウイチイを除くイチイ属植物から誘導した。この実施例では、使用した機器は、波長２５４ｎｍに設定したＨｉｔａｃｈｉ Ｌ−７４００ ＵＶ検出器を併用したＮｏｖａＰｒｅｐ ２００ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ Ｓｙｓｔｅｍであった。これらの装置は共に、ＬＣ ＲｅＳｐｏｎｄｅｒコントローラソフトウェア−バージョン２．１１．Ｖ（Ｒ＆Ｓ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．）を実行するＰＣインタフェースに直接接続されている。
カラムは、以下の寸法：内径＝５ｃｍ、長さ＝２５ｃｍ、容積＝４９０，８７ｃｍ3を有するＬｏａｄ＆Ｌｏｃｋ２”Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ ＬＣカラム（Ｒ＆Ｓ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．／Ｖａｒｉａｎ）である。カラムに、ジエチルアミノメチル（ＤＥＡＭ）結合シリカゲル：球形、粒子径２０ミクロン、平均孔径１２０オングストロームを充填する。カラムに、２７０ｇの樹脂を８００ｐｓｉに加圧して充填する。
発明の名称「タキサン分子の変換（Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｏｆ Ｔａｘａｎｅ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ）」の米国出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０３／１０５５７号に記載されている一級アミン変換化学により、合計７．１グラムの粗タキソールＡを調製した。９０％（容量）酢酸エチル／１０％（容量）テトラヒドロフランを含む約３５ｍＬの溶媒を使用して粗タキソールを溶解した。弱く加熱しながら（〜３５〜４０℃）溶液を３０分間撹拌した。透明な溶液を真空ろ過して、任意の小さい繊維または微粒子を除去してから注入した。ろ過後、溶液を目盛り付きシリンダーに移し、９０：１０ＥｔＯＡｃ／ＴＨＦ溶液を使用して最終容量４２．５ｍＬ（６倍希釈）まで希釈した。次いで、再混合して確実に均一にしてからサンプリングした。この操業の装填量は、１００グラムのＤＥＡＭ樹脂あたり２．６２５％すなわち２．６２５グラムのフィード固体であった。流速は９０ｍＬ／分に設定した。カラムは、ＥｔＯＡｃ＋０．５％酢酸（ｖ／ｖ）からなる標準的な移動相で２０分間平衡させた。２０分経過時に、以前に調製した試料溶液の全容量をカラムに注入し、直後に２０ｍＬのＥｔＯＡｃで注入ラインを洗浄した。以下の方法で分画を回収した（掲載されている時間は全て注入時−時間０からである）：
５０：５０メタノール／酢酸エチル洗浄溶媒移動相からなる５０％ストップ濃度勾配を２９分経過時（すなわち、注入時−時間０から）に開始した。これは合計２０分実施し、この時点において分析は終了した。この洗浄ステップにより、タキソールＡの後に溶出する１０−デアセチルタキソールＡ化合物の溶出を速くすることができる。１０−デアセチルタキソールＡの溶出を示す吸光度の急激な増加をＵＶ検出器が記録したらすぐに最後の分画回収弁（すなわち、分画５）を閉鎖した。全ての１０デアセチルタキソールＡは、上記条件下において１０分以内にカラムからどっと流れる。しかし、カラムから任意の残存物質を確実に除去させるためおよび日常的な作業として、洗浄ステップは常にぴったり２０分の長さとする。従って、注入時点から完全なカラム洗浄ステップまでの全操作は４９分であった。分画１〜５の回収時点を示すクロマトグラムのトレースを図４に示す。
分画３、４および５は、その後の結晶化作業のためにパスプールにおいて合わせた。通過する分画の（ＨＰＬＣによる）分画分析は合計５．８３５ｇのタキソールＡを示す。全ての分画中の総タキソール量で割ると、回収率は９８．１８％であると算出される。カラムに注入する粗物質の純度は８７．９重量％タキソールで、カラム精製後では、通過した分画を合わせたものの純度は９８．７１％面積（ＨＰＬＣによる）タキソールＡであった。
４４リットルのカラムに、１０ｋｇのＪ．Ｔ． ｂａｋｅｒ ＰＥＩ樹脂（粒子径４０ミクロン、孔径２７５オングストローム）を充填した。３カラム容量である１３５リットルの酢酸エチル／０．５％酢酸含有ヘプタン（５０ｖ％／５０ｖ％）で、流速１．０リットル／分により樹脂を平衡させた。残りの分画の流速は１．０リットル／分に設定した。半−精製フィード（メディアイチイ「ランヤン」から誘導）を、酢酸エチル１ｍＬ当り２５０ｍｇの濃度でカラムに装填した。フィードの初代タキサンの純度は５７重量％である。第一に、最初の分画は、１７０リットルの酢酸エチル／０．５ｖ％酢酸含有ヘプタン（５０ｖ％／５０ｖ％）であった。第二に、１０リットルの酢酸エチル／０．５ｖ％酢酸含有ヘプタン（５０ｖ％／５０ｖ％）の分画を３つ回収した。第三に、生成物の分画は９０リットルの酢酸エチル／メタノール（９０ｖ％／１０ｖ％）であった。最後に、カラムを、４５リットルの９０ｖ％／１０ｖ％酢酸エチル／メタノールで洗浄した。生成物プールは９３．５重量％の初代タキサンを含有する。タキソールＡおよびＢの回収率は９５％であった。
本発明が、具体的な成分を有する、備える、もしくは含むと記載されているか、または工程が、具体的な工程段階を有する、備える、もしくは含むと記載されている説明において、本発明は、又、引用されている成分または処理段階から本質的になる、または引用されている成分または処理段階からなることが考慮される。さらに、本発明が操作可能である限り、段階の順序または特定の行為を実施する順序は重要でないことが理解されるべきである。さらに、２つ以上の段階または行為は、本発明が操作可能である限り、同時に実施されてもよい。また、本発明が操作可能である限り、１つ以上の段階もしくは要素が特許請求の範囲に記載されている発明から省略されてもよく、または本明細書に記載されている本発明は、本明細書に具体的に開示されていない任意の成分もしくは段階が存在しない場合でも好適に実施することができる。
さらに、本発明は、本発明の精神または本質的な特徴から逸脱することなく、他の具体的な形態で具体化されてもよい。従って、上記の実施態様は、本明細書に記載されている本発明を限定するのではなく説明するものであると考えられるべきである。
本明細書において参照している特許および特許以外の文書の内容は各々、全体に引用することにより本明細書の1部をなす。
Claims (46)
- タキサンを含有する混合物から１種以上のタキサンを単離する方法であって、
（ａ）上記タキサンを含有する混合物が、１種以上のイチイ属植物からの１種以上のタキサンを含み、上記１種以上のイチイ属植物が、タイヘイヨウイチイを含まない、上記タキサンを含有する混合物をクロマトグラフィー技法を用いて、シリカに結合したポリエチレンイミンポリマーとシリカに結合したジエチルアミノメチルのうち少なくとも１つを含むポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂で処理するステップと、
（ｂ）上記１種以上のタキサンを溶離液で上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂から溶出するステップと、
（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップと
を含む方法。 - タキサンを含有する混合物から１種以上のタキサンを単離する方法であって、
（ａ）２５重量％未満または４０重量％を超えるタキソールＡ、タキソールＢ、タキソールＣ、タキソールＤ、タキソールＥ、タキソールＦ、またはタキソールＧを含む上記タキサンを含有する混合物をクロマトグラフィー技法を用いて、シリカに結合したポリエチレンイミンポリマーとシリカに結合したジエチルアミノメチルのうち少なくとも１つを含むポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂で処理するステップと、
（ｂ）上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂から上記１種以上のタキサンを溶出するステップと、
（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップと
を含む方法。 - １種以上のタキサンを単離する方法であって、
（ａ）タキサンを含有する混合物をクロマトグラフィー技法を用いて、シリカに結合したポリエチレンイミンポリマーとシリカに結合したジエチルアミノメチルのうち少なくとも１つを含むポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂で処理するステップであって、該タキサンを含有する混合物が２５〜４０重量％のタキソールＡ、タキソールＢ、タキソールＣ、タキソールＤ、タキソールＥ、タキソールＦ、またはタキソールＧを含み、上記タキサンを含有する混合物が１種以上のイチイ属植物からの１種以上のタキサンを含み、上記１種以上のイチイ属植物がタイヘイヨウイチイを含まないステップと、
（ｂ）上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂から１種以上のタキサンを溶出するステップと、
（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップと
を含む方法。 - タキサン化合物を含む物質から１種以上のタキサンを単離する方法であって、
（ａ）上記タキサン化合物を含む物質をクロマトグラフィー技法を用いて、シリカに結合したポリエチレンイミンポリマーとシリカに結合したジエチルアミノメチルのうち少なくとも１つを含むポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂で処理するステップであって、上記タキサン化合物を含む物質が半合成または全合成工程から合成された１種以上のタキサン化合物を含み、上記１種以上のタキサン化合物がタイヘイヨウイチイからのタキサンを含まないステップと、
（ｂ）ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂から１種以上のタキサンを溶出するステップと、
（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップと
を含む方法。 - タキサン化合物を含む物質から１種以上のタキサンを単離する方法であって、
（ａ）上記タキサン化合物を含む物質をクロマトグラフィー技法を用いて、シリカに結合したポリエチレンイミンポリマーとシリカに結合したジエチルアミノメチルのうち少なくとも１つを含むポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂で処理するステップであって、該タキサン化合物を含む物質が半合成または全合成工程から合成された１種以上のタキサン化合物を含み、該タキサン化合物を含む物質がＣ−２’ベンゾエートを有するタキソールＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦもしくはＧそれぞれを８重量％未満含むステップと、
（ｂ）上記１種以上のタキサンを溶出するステップと、
（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップと
を含む方法。 - タキサン化合物を含む物質から１種以上のタキサンを単離する方法であって、
（ａ）上記タキサン化合物を含む物質をクロマトグラフィー技法を用いて、シリカに結合したポリエチレンイミンポリマーとシリカに結合したジエチルアミノメチルのうち少なくとも１つを含むポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂で処理するステップであって、該タキサン化合物を含む物質が半合成または全合成工程から合成された１種以上のタキサン化合物を含み、該タキサン化合物を含む物質がＣ−２’ベンゾエートを有するタキソールＢ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦもしくはＧそれぞれを１．０重量％未満含むステップと、
（ｂ）上記１種以上のタキサンを溶出するステップと、
（ｃ）溶出した１種以上のタキサンを回収するステップと
を含む方法。 - タキサンを含有する混合物からタキソールＡを単離する方法であって、
（ａ）上記タキサンを含有する混合物をクロマトグラフィー技法を用いて、シリカに結合したポリエチレンイミンポリマーとシリカに結合したジエチルアミノメチルのうち少なくとも１つを含むポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂で処理するステップであって、該タキサンを含有する混合物が天然に発生するタキサンを含み、該タキサンを含有する混合物が合成または半合成工程から合成されたタキサンを含まないステップと、
（ｂ）上記タキソールＡを上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂から溶出するステップと、
（ｃ）溶出したタキソールＡを回収するステップと
を含む方法。 - バイオマス抽出エキスから１種以上のタキサンを精製する方法であって、
（ａ）上記バイオマス抽出エキスをクロマトグラフィー技法を用いて、シリカに結合したポリエチレンイミンポリマーとシリカに結合したジエチルアミノメチルのうち少なくとも１つを含むポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂で処理するステップであって、該バイオマス抽出エキスがクロマトグラフィー技法によって処理されていないステップと、
（ｂ）ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂から１種以上のタキサンを溶出するステップと、
（ｃ）溶出した1種以上のタキサンを回収するステップと
を含む方法。 - 上記タキサンを含有する物質が、メディアイチイ栽培品種からのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、メディアイチイ「ヒックシ」からのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、メディアイチイ「ダーク・グリーン・スプレダー」からのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、ヨーロッパイチイからのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、イチイからのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、タクスス・フロリダーナからのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、カナダイチイからのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、タクスス・ワリチアーナからのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、タクスス・ウンナネシスからのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、チュウゴクイチイからのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、メディアイチイ「デンシホルミス」からのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、メディアイチイ「ブロンニ」からのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、メディアイチイ「ヒックシ」からのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、メディアイチイ「ランヤン」からのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、メディアイチイ「ワージ」からのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記タキサンを含有する物質が、メディアイチイ「タウトニ」からのタキサンを含むバイオマス抽出エキスを含む請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
- 上記単離されるタキサンが、タキソールＡである請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記単離されるタキサンが、タキソールＢである請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記単離されるタキサンが、タキソールＣである請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記単離されるタキサンが、タキソールＤである請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記単離されるタキサンが、タキソールＥである請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記単離されるタキサンが、タキソールＦである請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記単離されるタキサンが、タキソールＧである請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記単離されるタキサンが、ドセタキセルである請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、６０から３００オングストローム単位までの範囲の平均孔径を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、１００から２００オングストローム単位までの範囲の平均孔径を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、１２０オングストローム単位の平均孔径を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、０．２５から５００ミクロンまでの範囲の平均粒子径を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、１から１００ミクロンまでの範囲の平均粒子径を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、１０から１２０ミクロンまでの範囲の平均粒子径を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、２０から６０ミクロンまでの平均粒子径を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、４０ミクロンの平均粒子径を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、６０から８００オングストロームまでの範囲の平均孔径を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記ポリエチレンイミン−結合シリカクロマトグラフィー樹脂が、ポリエチレンイミン部分に一級または二級アミノ基を有する請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記シリカに結合したポリエチレンイミンポリマーのアミノ基が官能基化されている請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 上記溶出された１種以上のタキサンが、少なくとも７０％の純度を有する請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記溶出された１種以上のタキサンが、少なくとも８０％の純度を有する請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
- 上記溶出された１種以上のタキサンが、少なくとも９０％の純度を有する請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US45537703P | 2003-03-17 | 2003-03-17 | |
| US45647803P | 2003-03-21 | 2003-03-21 | |
| US10/664,539 US6956123B2 (en) | 2003-03-17 | 2003-09-18 | Purification of taxanes and taxane mixtures using polyethyleneimine-bonded resins |
| PCT/US2004/008055 WO2004083176A2 (en) | 2003-03-17 | 2004-03-17 | Purification of taxanes and taxane mixtures using polyethyleneimine-bonded resins |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2006520789A JP2006520789A (ja) | 2006-09-14 |
| JP4482555B2 true JP4482555B2 (ja) | 2010-06-16 |
Family
ID=32995999
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2006507246A Expired - Lifetime JP4482555B2 (ja) | 2003-03-17 | 2004-03-17 | ポリエチレンイミン−結合樹脂を使用するタキサンおよびタキサン混合物の精製 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6956123B2 (ja) |
| EP (2) | EP2111397B1 (ja) |
| JP (1) | JP4482555B2 (ja) |
| AR (1) | AR043645A1 (ja) |
| AU (1) | AU2004221834B2 (ja) |
| CA (2) | CA2519474C (ja) |
| ES (1) | ES2408329T3 (ja) |
| TW (1) | TWI339130B (ja) |
| WO (1) | WO2004083176A2 (ja) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3643248A1 (de) * | 1986-12-18 | 1988-06-30 | Basf Ag | Silberkatalysator, seine herstellung und verwendung |
| US6956123B2 (en) * | 2003-03-17 | 2005-10-18 | Natural Pharmaccuticals, Inc. | Purification of taxanes and taxane mixtures using polyethyleneimine-bonded resins |
| US8703982B2 (en) | 2003-03-17 | 2014-04-22 | Phyton Holdings Llc | Purification of taxanes |
| US7169307B2 (en) * | 2004-09-02 | 2007-01-30 | Jian Liu | Process for the extraction of paclitaxel and 9-dihydro-13-acetylbaccatin III from Taxus |
| US7503340B2 (en) * | 2005-09-30 | 2009-03-17 | Agilent Technologies, Inc. | System and method for controlling fluid flow |
| WO2007045093A1 (en) * | 2005-10-21 | 2007-04-26 | Her Majesty The Queen In Right Of Canada As Represented By The Minister Of Natural Resources Canada, Canadian Forest Service | Preparation of taxanes |
| UA96139C2 (uk) * | 2005-11-08 | 2011-10-10 | Дженентек, Інк. | Антитіло до нейропіліну-1 (nrp1) |
| US20070190623A1 (en) * | 2006-02-15 | 2007-08-16 | Rijhwani Sushil K | Process for purification and recovery of paclitaxel compounds |
| KR100948143B1 (ko) | 2006-03-24 | 2010-03-18 | 포항공과대학교 산학협력단 | 쿠커비투릴이 결합된 실리카겔을 이용한 정지상 및 컬럼,그리고 상기 컬럼을 이용한 탁산의 분리 방법 |
| CA2667416C (en) | 2006-10-20 | 2013-12-17 | Scinopharm Singapore Pte, Ltd. | Process for making crystalline anhydrous docetaxel |
| EP2358693A4 (en) * | 2008-11-20 | 2012-04-18 | Reddys Lab Ltd Dr | PREPARATION OF DOCETAXEL |
| KR101149600B1 (ko) * | 2009-12-31 | 2012-05-29 | 주식회사 삼양제넥스바이오 | 고순도 무수결정형 도세탁셀 제조방법 |
| EP2570182A1 (en) * | 2011-09-15 | 2013-03-20 | InstrAction GmbH | Sorbent comprising on its surface a cationic or protonizable aliphatic residue for the purification of organic molecules |
| CN105153077A (zh) * | 2015-10-19 | 2015-12-16 | 丁玉琴 | 一种从红豆杉叶中提取紫杉醇的方法 |
Family Cites Families (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01189826A (ja) | 1988-01-22 | 1989-07-31 | Nippon Denso Co Ltd | バイメタル式感温スイッチ |
| US5092992A (en) | 1989-06-07 | 1992-03-03 | J. T. Baker Inc. | Polyethyleneimine matrixes for affinity chromatography |
| US5085779A (en) | 1989-06-07 | 1992-02-04 | J. T. Baker, Inc. | Polyethyleneimine matrixes for affinity chromatography |
| US5475120A (en) | 1990-11-02 | 1995-12-12 | University Of Florida | Method for the isolation and purification of taxol and its natural analogues |
| ATE258171T1 (de) * | 1991-09-23 | 2004-02-15 | Univ Florida State | Metallalkoxide |
| US5356928A (en) | 1992-11-06 | 1994-10-18 | Hauser Chemical Research, Inc. | Cytotoxic agents |
| US5281727A (en) * | 1992-11-27 | 1994-01-25 | Napro Biotherapeutics, Inc. | Method of using ion exchange media to increase taxane yields |
| CA2126698A1 (en) | 1992-12-07 | 1994-06-23 | Muraleedharan G. Nair | Process for the isolation and purification of taxol and taxanes from taxus spp. |
| US5279949A (en) | 1992-12-07 | 1994-01-18 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Process for the isolation and purification of taxol and taxanes from Taxus spp |
| TW467896B (en) * | 1993-03-19 | 2001-12-11 | Bristol Myers Squibb Co | Novel β-lactams, methods for the preparation of taxanes and sidechain-bearing taxanes |
| US5969165A (en) * | 1999-01-07 | 1999-10-19 | 508037 (Nb) Inc. | Isolation and purification of paclitaxel and other related taxanes by industrial preparative low pressure chromatography on a polymeric resin column |
| CA2395573A1 (en) * | 2000-01-13 | 2001-07-19 | Purdue Research Foundation | Production of taxol and taxanes |
| PL350075A1 (en) * | 2000-02-02 | 2002-11-04 | Univ Florida State Res Found | Taxane formulations having improved solubility |
| US6229027B1 (en) * | 2000-03-10 | 2001-05-08 | Jian Liu | Process for manufacturing paclitaxel and 13-acetyl-9-dihydrobaccatin IV |
| JP2002044904A (ja) | 2000-07-21 | 2002-02-08 | Mabuchi Motor Co Ltd | 小型モータ |
| US20030001899A1 (en) | 2001-06-29 | 2003-01-02 | Nokia Corporation | Semi-transparent handwriting recognition UI |
| EP1497275A4 (en) * | 2002-04-05 | 2006-04-12 | Natural Pharmaceuticals Inc | SELECTIVE ACYLATION OF SECONDARY HYDROXYL GROUPS |
| EP1497276B1 (en) * | 2002-04-05 | 2008-08-20 | Natural Pharmaceuticals, Inc. | Conversion of taxane molecules |
| US6956123B2 (en) * | 2003-03-17 | 2005-10-18 | Natural Pharmaccuticals, Inc. | Purification of taxanes and taxane mixtures using polyethyleneimine-bonded resins |
-
2003
- 2003-09-18 US US10/664,539 patent/US6956123B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2004
- 2004-03-17 TW TW093107087A patent/TWI339130B/zh active
- 2004-03-17 EP EP04757522A patent/EP2111397B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-17 CA CA2519474A patent/CA2519474C/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-17 AR ARP040100896A patent/AR043645A1/es not_active Application Discontinuation
- 2004-03-17 CA CA2733837A patent/CA2733837C/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-17 ES ES04757522T patent/ES2408329T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-17 EP EP11002035A patent/EP2364978A1/en not_active Withdrawn
- 2004-03-17 AU AU2004221834A patent/AU2004221834B2/en not_active Expired
- 2004-03-17 JP JP2006507246A patent/JP4482555B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-17 WO PCT/US2004/008055 patent/WO2004083176A2/en active Application Filing
-
2007
- 2007-06-18 US US11/764,362 patent/US7897796B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2006520789A (ja) | 2006-09-14 |
| TWI339130B (en) | 2011-03-21 |
| EP2364978A1 (en) | 2011-09-14 |
| AU2004221834A1 (en) | 2004-09-30 |
| EP2111397B1 (en) | 2013-01-16 |
| US7897796B2 (en) | 2011-03-01 |
| EP2111397A2 (en) | 2009-10-28 |
| TW200500125A (en) | 2005-01-01 |
| US20080076936A1 (en) | 2008-03-27 |
| CA2519474C (en) | 2011-12-13 |
| WO2004083176A3 (en) | 2005-03-31 |
| US6956123B2 (en) | 2005-10-18 |
| WO2004083176A2 (en) | 2004-09-30 |
| CA2519474A1 (en) | 2004-09-30 |
| EP2111397A4 (en) | 2009-10-28 |
| ES2408329T3 (es) | 2013-06-20 |
| AR043645A1 (es) | 2005-08-03 |
| AU2004221834B2 (en) | 2009-06-04 |
| CA2733837A1 (en) | 2004-09-30 |
| US20040186305A1 (en) | 2004-09-23 |
| CA2733837C (en) | 2017-09-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7897796B2 (en) | Purification of taxanes and taxane mixtures using polyethyleneimine-bonded resins | |
| US9926287B2 (en) | Purification of taxanes | |
| JP2000204090A (ja) | ポリマ―樹脂カラムを用いる工業用分取低圧クロマトグラフィ―によるパクリタキセルおよび他の関連タキサンの分離および精製 | |
| EP1999122A1 (en) | Stationary phase and column using cucurbituril bonded silica gel, and separation method of taxol using the column | |
| Watchueng et al. | Efficient purification of paclitaxel from yews using high-performance displacement chromatography technique | |
| KR100816491B1 (ko) | 탁산류 함유 물질로부터 13-디하이드록시바카틴 ⅲ 및10-디아세틸파클리탁셀의 추출 및 정제 방법 | |
| EP0774010B1 (en) | A method for mass production of taxol from taxus genus plant | |
| AU784323B2 (en) | Production of taxol and taxanes | |
| US7169307B2 (en) | Process for the extraction of paclitaxel and 9-dihydro-13-acetylbaccatin III from Taxus | |
| EP1818328A1 (en) | Chromatographic method for the isolation and purification of taxane derivatives | |
| CN100448859C (zh) | 使用键合有聚乙烯亚胺的树脂提纯紫杉醇和紫杉醇混合物的方法 | |
| KR20020084163A (ko) | 파클리탁셀과 13-아세틸-9-디히드로바카틴 ⅲ 의 제조방법 | |
| Yang et al. | Process utilized oligo-β-cyclodextrin substituted agarose gel medium for efficient purification of paclitaxel from Taxus cuspidata | |
| KR100555767B1 (ko) | 파클리탁셀 함유물질로부터 파클리탁셀의 추출 정제 방법 | |
| KR100624104B1 (ko) | 파클리탁셀 함유물질로부터 파클리탁셀의 정제방법 | |
| CA2536000C (en) | Process for the extraction of paclitaxel and 9-dihydro-13-acetylbaccatin iii from taxus | |
| Kozuka et al. | Analytical aspects of taxoids | |
| CZ200070A3 (cs) | Izolace a čištění paclitaxelu a dalších příbuzných taxanů průmyslovou preparativní nízkotlakou chromatografií na polymerních kolonách | |
| JP2008505111A (ja) | パクリタキセルの単離方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090327 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090626 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090724 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20091023 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20091030 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20091124 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20091201 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20091222 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100105 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100125 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100219 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100319 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130326 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4482555 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130326 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140326 Year of fee payment: 4 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |