JP4198260B2 - 化粧料、医薬部外品、医薬品、食品 - Google Patents
化粧料、医薬部外品、医薬品、食品 Download PDFInfo
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は酸化防止作用や美白作用が効果を発揮し、美白、肌荒れ防止、肌のつや、クスミの改善及び肌のはりに効果があるな化粧品、医薬部外品、医薬品、食品に関する。
に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ゴルドロボ（Ｇｏｒｄｏｌｏｂｏ）は学名Gnaphalium sphacellatumといい、高さ２０〜３０cmの多年草でメキシコを中心に広く分布している。
この植物は煎じ薬の用途としてせき、消化不良、腹痛の治療や体液の蓄積で動かなくなった関節を緩めたりきれいにしたり、胃腸膨満を治したり、発汗作用があり利用されている。
【０００３】
クアチャララテ（Ｃｕａｃｈａｌａｌａｔｅ）は学名Juliania adstringens Schlといい.高さ８ｍの高木で、中南部メキシコの低地、落葉性熱帯林に自生している。
薬用に使用される部位は樹皮で乾燥したもので歯ぐきを強固にしたり、なかなか治らない傷を洗うのに用いられている。また、胃や腸のガンや腸チフスに対して効果的である。
【０００４】
コスティラス（Ｃｏｓｔｉｌｌａｓ）は学名Acalypha diversifolia Jacq.、イステカ（Ｉｘｃａｔｅ）は学名Hippocratea celastroides、ヒエルバデルサボ（Ｈｉｅｒｂａ ｄｅｌ ｓａｐｏ）は学名Eryngium comosumといい、いずれもメキシコ等で食用或いは生薬として用いられている。
【０００５】
ピルル（Ｐｉｒｕｌ）は学名Schinus(w)molleといい、コショウボク属ウルシ科の双子葉植物で高さ２０ｍになる常緑樹でペルーを中心に分布する。薬用としては樹皮は下痢どめとして、根は淋病にする。
種子は利尿、ヒステリーに樹皮、樹脂は痛み止めに利用されている。
【０００６】
化粧料、医薬部外品、医薬品、食品の原料として求められる機能には様々あるが、使用できる物質は種々知られているが、合成品は、長期間人間の肌に適用した場合の安全性の保証がなく、使用が制限されつつある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、皮膚に適用して安全であると共に、化粧品、医薬部外品、医薬品、食品に求められる有効な成分を含んだ化粧料、医薬部外品、医薬品、食品を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前記の課題を解決するために、すでに多年にわたって食用に供され、人体に対する安全性が確認されている植物をスクリーニングして調べ、化粧料、医薬部外品、医薬品、食品として利用価値のあるものを検討した。その結果ゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの抽出物が化粧品原料として、或いは医薬部外品、医薬品、食品の原料としての有効性を有することを見い出して本発明を完成するに至ったのである。
【０００９】
【作用】
本発明の化粧料、医薬部外品、医薬品、食品として用いられるゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの抽出物の確認された作用は、美白作用と活性酸素抑制作用である。
【００１０】
肌の色の好みはいろいろあるが、その中でも白い肌は昔より七難隠すと言われるように好まれる肌の色の１つであり、また、しみ、そばかすは肌の問題点の１つである。
原因はいろいろあるが、その１つとして太陽光などからの紫外線がメラニンを産生するメラノサイトを活性化し、過剰に生産されたメラニンが色素沈着の原因の一つである。
皮膚のメラニン沈着は、メラニン産生細胞であるメラノサイト内にメラニンが沈着すること及びメラノサイトからメラニンが表皮角化細胞に移行することによることが知られている
チロシナーゼは、チロシンの酸化を触媒する酵素であり、皮膚のメラニン色素の生成に関与していることが知られている
【００１１】
活性酸素抑制作用について説明する。一般に、空気中に酸素がないと生物（嫌気性のものを除く）は存在しえない。しかし、酸素は紫外線や酵素等の影響を受けて活性酸素になる。
この活性酸素は、脂肪酸を酸化し過酸化物を生成させる。生体の生体膜のリン脂質も酸化させ、障害を与える。その上、生成した過酸化物と活性酸素はＤＮＡに損傷を与え、老化を促進するといわれている。この活性酸素は、チロシンからメラニンを作る機構にも影響を与え皮膚の黒化にも関与している。この活性酸素を抑制することは皮膚にとって重要な、言い換えれば化粧料、医薬部外品、医薬品、食品に求められる重要な要素である。
【００１２】
ゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの利用方法としては、水或いは親水性有機溶媒、例えば、エタノール、メタノール、アセトン等で抽出する。しかしながら、化粧料、医薬部外品、医薬品、食品の原料の抽出であるから、水、或いはエタノール又はこれらの混合溶媒での抽出が好ましいのは当然である。また、場合によっては、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール等の多価アルコール又は多価アルコールと水の混液も抽出に利用できる。さらにまた、凍結乾燥して粉体として利用することも利用方法によっては有効である。
【００１３】
この物質を他の化粧料、医薬部外品、医薬品、食品の原料、例えば、スクワラン、ホホバ油等の液状油、ミツロウ、セチルアルコール等の固体油、各種の活性剤、グリセリン、１，３ーブチレングリコールラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、リンゴファイバー、大豆ファイバー、肉エキス、黒酢エキス、ゼラチン、コーンスターチやビタミン類など各種薬剤等を配合して様々な剤形の化粧料、医薬部外品、医薬品、食品、例えば、ローション、クリーム、乳液、パック、錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、カプセル剤、顆粒剤、パン、チューインガム、クッキー、チョコレート、菓子、シリアル類等の固形食品、ジャム、アイスクリーム、ヨーグルト、ゼリー等のジャム状、クリーム状またはゲル状食品、ジュース、コーヒー、ココア等の飲料等に目的に応じて種々の利用形態の化粧料、医薬部外品、医薬品、食品などに調製することができる。
【００１４】
【実施例】
以下に、本発明で使用する、ゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの抽出物の製造例、実際の利用方法である実施例を記載するが、
本発明はこれらの製造例及び実施例によって何ら限定されるものではない。
【００１５】
（製造例１）ゴルドロボ(Gordolobo)の全草（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００１６】
（製造例２）クアチャララテ(Cuachalalate)の樹皮（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００１７】
（製造例３）コスティラス(Costillas) の幹や枝（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００１８】
（製造例４）イステカ(Ixcate)の樹皮（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００１９】
（製造例５）ヒエルバデルサボ(Hierba del sapo)の全草（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００２０】
（製造例６）ピルル(Pirul)の全草（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００２１】
（実施例１） ローション
オリーブ油 ０．５
製造例１の抽出物 ０．５
ポリオキシエチレン（20E.O.）ソルビタンモノステアレート ２．０
ポリオキシエチレン（60E.O.）硬化ヒマシ油 ２．０
エタノール １０．０
１．０％ヒアルロン酸ナトリウム水溶液 ５．０
精製水 ８０．０
【００２２】
（実施例２） クリーム
Ａ スクワラン ２０．０
オリーブ油 ２．０
ミンク油 １．０
ホホバ油 ５．０
ミツロウ ５．０
セトステアリルアルコール ２．０
グリセリンモノステアレート １．０
ソルビタンモノステアレート ２．０
製造例２の抽出物 １．０
Ｂ 精製水 ４７．９
ポリオキシエチレン（20E.O.）ソルビタンモノステアレート ２．０
ポリオキシエチレン（60E.O.）硬化ヒマシ油 １．０
グリセリン ５．０
１．０％ヒアルロン酸ナトリウム水溶液 ５．０
パラオキシ安息香酸メチル ０．１
ＡとＢをそれぞれ計量し、７０℃まで加温し、ＢにＡを攪拌しつつ徐々に加えたのち、ゆっくり攪拌しつつ３０℃まで冷却した。
【００２３】
（実施例３） ローション
実施例３は実施例１の製造例１の抽出物を製造例３の抽出物に変えて作成したもの
【００２４】
（実施例４） クリーム
実施例４は実施例２の製造例２の抽出物を製造例４の抽出物に変え、Ａ成分として作成したもの
【００２５】
（実施例５） ローション
実施例５は実施例１の製造例１の抽出物を製造例５の抽出物に変えて作成したもの
【００２６】
（実施例６） クリーム
実施例６は実施例２の製造例２の抽出物を製造例６の抽出物に変え、Ａ成分として作成したもの
【００２７】
〔実施例７（錠剤の調製）〕
製造例１を２０ｇ、結晶セルロースを３０ｇ、乳糖２０ｇ、ステビア１ｇを混合し、２ｇの錠剤にした。
【００２８】
〔実施例８（ドリンクの調製）〕
製造例２を５ｇ、還元麦芽糖５ｇ、ビタミンＣ１ｇ、ビタミンＢ2０．０５ｇ、ビタミンＢ6０．０５ｇ、精製水で１００mlにした。
【００２９】
〔実施例９（錠剤の調製）〕実施例２０において製造例１の抽出
物を製造例３の抽出物に変えて調製した。
【００３０】
〔実施例１０（ドリンクの調製）〕実施例２１において製造例２の
抽出物を製造例４の抽出物に変えて調製した。
【００３１】
〔実施例１１（錠剤の調製）〕実施例２０において製造例１の抽出
物を製造例５の抽出物に変えて調製した。
【００３２】
〔実施例１２（ドリンクの調製）〕実施例２１において製造例２の
抽出物を製造例６の抽出物に変えて調製した。
【００３３】
チロシナーゼ活性阻害試験（ＤＯＰＡ基質）
（試験方法）
リン酸緩衝液（ｐＨ６．８、３０ｍＭ） １．８ml、０．０５％Ｌ−β−（３，４−ジヒドロキシフェニル）アラニン(L-β-(3,4-Dihydroxy-phenyl)alanine)溶液 1.0ml、実施例の水またはジメチルスルホキシド溶液０．１ml、をスクリューバイアルにとり、２５℃恒温水槽中で１０分以上恒温にした。
チロシナーゼ溶液（Sigma 社製、マッシュルーム由来、)０．１mlを加え、攪拌し、３０秒後に４７５nm で吸光度を１５秒ごとに１１回測定した。（吸光度測定セルは２５℃に保ちつつ）
対照として、上記試料液のかわりに純水またはジメチルスルホキシドを加え同様に測定した。
計算式
【００３４】
結果を表１に示す。
【００３５】
チロシナーゼ活性阻害試験（チロシン基質）
（試験方法）
リン酸緩衝液（ｐＨ６．８、３０ｍＭ） 0.9ml、1.66mMチロシン(Tyrosine)溶液 1.0ml、実施例の水またはジメチルスルホキシド溶液０．１ml、精製水０．９mlをスクリューバイアルにとり、37℃恒温水槽中で５分以上加温した。
チロシナーゼ溶液（Sigma 社製、マッシュルーム由来、914 ユニット/ml) 0.1mlを加え、37℃恒温水槽中で保温し、10分後に475nm で吸光度を測定した。
対照として、上記試料液のかわりに純水またはジメチルスルホキシドを加え同様に測定した。
（計算式）
チロシナーゼ活性阻害率（チロシン基質）()=｛B-(A-P)｝/B×100
但し Ａ：試料検体の吸光度
Ｂ：対照の吸光度
Ｐ：試料検体の着色による吸光度（３倍希釈）
結果を表２に示す。
【００３６】
【００３７】
Ｂ−１６メラノーマ細胞試験
検体を所定の濃度になるように、ＥａｇｌｅｓＭＥＭ培地に加え、除菌フィルターでろ過後、牛胎児血清が１０％なるように加え、ｐＨを７．６±０．１になるように炭酸水素ナトリウムで調整し、シャーレに６ｍｌ分注し、Ｂ−１６メラノーマ細胞浮遊液（１×１０６ｃｅｌｌ／ｍｌ）を０．０５ｍｌ加え、５％ＣＯ2、９５％ａｉｒの条件下で３７℃で３日間培養した。さらに、培地交換（上記の検体が入った１０％牛胎児血清含有ＥａｇｌｅｓＭＥＭ培地）を行い、３日間培養した。（このとき、細胞増殖を判定する）
細胞を剥離し、遠心分離して、細胞を集め、肉眼で白色度の判定を行った。
下記の判定基準に従い判定した結果を表３に示す。
【００３８】
判定基準
白色度
ブランクと同程度 ±
わずかに白色化傾向 ＋
明らかに白色化傾向 ＋＋
強い白色化傾向 ＋＋＋
細胞増殖
ブランクの８０％以上 Ａ
ブランクの６０〜８０％ Ｂ
ブランクの３０〜６０％ Ｃ
ブランクの３０％以下 Ｄ
【００３９】
【００４０】
（活性酸素抑制試験）活性酸素を抑制する効果を測定する方法は各
種あるが、今回以下の方法を利用した。
ｐＨ８．２緩衝液（リン酸二水素ナトリウム６５ｍＭ、ホウ酸ソーダ３５ｍＭ、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム０．５ｍＭ）を０．２ml、０．５ｍＭキサンチンを０．２ml、１ｍＭヒドロキシルアミン塩酸塩水溶液０．１ml、水０．１mlをバイヤル瓶に加えて攪拌し、検体（製造例の１％水溶液）０．１mlを加えてさらに水０．１mlを加えて攪拌し、キサンチンオキシダーゼ水溶液（ミルク製、６unit／ml）を０．２mlを加えて、３７℃で３０分間放置した。これに発色液を２．０ml加えて室温で放置３０分〜１８０分の間に５５０ｎｍの吸光度を測定した。（検体の変わりに水を測定し、ブランクとした）
結果を表４に示す。
【００４１】
【００４２】
（使用テストの１）女性８名の顔面を左右に分け、一方に、実施例のローションとクリームをセットにして、他方には比較例のローションとクリームをセットにして毎日、１回以上使用してもらって、３カ月後に、美白、肌荒れ防止、肌のつや、クスミの改善及び肌のはりについて評価した。なお、比較例は実施例より製造例の各種抽出物を水に代えたものである（比較例１、２）。なお、２４名を３班にわけ、下記表５に示される試料を使って試験した。
【００４３】
評価は、下記の評価基準により評価し、その結果をまとめたのが下記の表６である。
（評価基準）
実施例の方が非常によい ３
実施例の方がかなりよい ２
実施例の方がややよい １
差がない ０
比較例の方がややよい −１
比較例の方がかなりよい −２
比較例の方が非常によい −３
【００４４】
【００４５】
（使用テストの２）女性６名に実施例の錠剤２錠とドリンク１００mlを１日１回毎日、３カ月食してもらった。なお、１８名を３班にわけ、下記表７に示される試料を使って試験した。
【００４６】
評価は、下記の評価基準により評価し、その結果をまとめたのが下記の表８である。
（評価基準）
試験後の方が非常によい ３
試験後の方がかなりよい ２
試験後の方がややよい １
差がない ０
試験前の方がややよい −１
試験前の方がかなりよい −２
試験前の方が非常によい −３
【００４７】
【効果】
ゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの抽出物を配合した化粧料、医薬部外品、医薬品、食品は酸化防止作用や美白作用が効果を発揮し、美白、肌荒れ防止、肌のつや、クスミの改善及び肌のはりに効果がある。
【産業上の利用分野】
本発明は酸化防止作用や美白作用が効果を発揮し、美白、肌荒れ防止、肌のつや、クスミの改善及び肌のはりに効果があるな化粧品、医薬部外品、医薬品、食品に関する。
に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ゴルドロボ（Ｇｏｒｄｏｌｏｂｏ）は学名Gnaphalium sphacellatumといい、高さ２０〜３０cmの多年草でメキシコを中心に広く分布している。
この植物は煎じ薬の用途としてせき、消化不良、腹痛の治療や体液の蓄積で動かなくなった関節を緩めたりきれいにしたり、胃腸膨満を治したり、発汗作用があり利用されている。
【０００３】
クアチャララテ（Ｃｕａｃｈａｌａｌａｔｅ）は学名Juliania adstringens Schlといい.高さ８ｍの高木で、中南部メキシコの低地、落葉性熱帯林に自生している。
薬用に使用される部位は樹皮で乾燥したもので歯ぐきを強固にしたり、なかなか治らない傷を洗うのに用いられている。また、胃や腸のガンや腸チフスに対して効果的である。
【０００４】
コスティラス（Ｃｏｓｔｉｌｌａｓ）は学名Acalypha diversifolia Jacq.、イステカ（Ｉｘｃａｔｅ）は学名Hippocratea celastroides、ヒエルバデルサボ（Ｈｉｅｒｂａ ｄｅｌ ｓａｐｏ）は学名Eryngium comosumといい、いずれもメキシコ等で食用或いは生薬として用いられている。
【０００５】
ピルル（Ｐｉｒｕｌ）は学名Schinus(w)molleといい、コショウボク属ウルシ科の双子葉植物で高さ２０ｍになる常緑樹でペルーを中心に分布する。薬用としては樹皮は下痢どめとして、根は淋病にする。
種子は利尿、ヒステリーに樹皮、樹脂は痛み止めに利用されている。
【０００６】
化粧料、医薬部外品、医薬品、食品の原料として求められる機能には様々あるが、使用できる物質は種々知られているが、合成品は、長期間人間の肌に適用した場合の安全性の保証がなく、使用が制限されつつある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、皮膚に適用して安全であると共に、化粧品、医薬部外品、医薬品、食品に求められる有効な成分を含んだ化粧料、医薬部外品、医薬品、食品を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前記の課題を解決するために、すでに多年にわたって食用に供され、人体に対する安全性が確認されている植物をスクリーニングして調べ、化粧料、医薬部外品、医薬品、食品として利用価値のあるものを検討した。その結果ゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの抽出物が化粧品原料として、或いは医薬部外品、医薬品、食品の原料としての有効性を有することを見い出して本発明を完成するに至ったのである。
【０００９】
【作用】
本発明の化粧料、医薬部外品、医薬品、食品として用いられるゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの抽出物の確認された作用は、美白作用と活性酸素抑制作用である。
【００１０】
肌の色の好みはいろいろあるが、その中でも白い肌は昔より七難隠すと言われるように好まれる肌の色の１つであり、また、しみ、そばかすは肌の問題点の１つである。
原因はいろいろあるが、その１つとして太陽光などからの紫外線がメラニンを産生するメラノサイトを活性化し、過剰に生産されたメラニンが色素沈着の原因の一つである。
皮膚のメラニン沈着は、メラニン産生細胞であるメラノサイト内にメラニンが沈着すること及びメラノサイトからメラニンが表皮角化細胞に移行することによることが知られている
チロシナーゼは、チロシンの酸化を触媒する酵素であり、皮膚のメラニン色素の生成に関与していることが知られている
【００１１】
活性酸素抑制作用について説明する。一般に、空気中に酸素がないと生物（嫌気性のものを除く）は存在しえない。しかし、酸素は紫外線や酵素等の影響を受けて活性酸素になる。
この活性酸素は、脂肪酸を酸化し過酸化物を生成させる。生体の生体膜のリン脂質も酸化させ、障害を与える。その上、生成した過酸化物と活性酸素はＤＮＡに損傷を与え、老化を促進するといわれている。この活性酸素は、チロシンからメラニンを作る機構にも影響を与え皮膚の黒化にも関与している。この活性酸素を抑制することは皮膚にとって重要な、言い換えれば化粧料、医薬部外品、医薬品、食品に求められる重要な要素である。
【００１２】
ゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの利用方法としては、水或いは親水性有機溶媒、例えば、エタノール、メタノール、アセトン等で抽出する。しかしながら、化粧料、医薬部外品、医薬品、食品の原料の抽出であるから、水、或いはエタノール又はこれらの混合溶媒での抽出が好ましいのは当然である。また、場合によっては、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール等の多価アルコール又は多価アルコールと水の混液も抽出に利用できる。さらにまた、凍結乾燥して粉体として利用することも利用方法によっては有効である。
【００１３】
この物質を他の化粧料、医薬部外品、医薬品、食品の原料、例えば、スクワラン、ホホバ油等の液状油、ミツロウ、セチルアルコール等の固体油、各種の活性剤、グリセリン、１，３ーブチレングリコールラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、リンゴファイバー、大豆ファイバー、肉エキス、黒酢エキス、ゼラチン、コーンスターチやビタミン類など各種薬剤等を配合して様々な剤形の化粧料、医薬部外品、医薬品、食品、例えば、ローション、クリーム、乳液、パック、錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、カプセル剤、顆粒剤、パン、チューインガム、クッキー、チョコレート、菓子、シリアル類等の固形食品、ジャム、アイスクリーム、ヨーグルト、ゼリー等のジャム状、クリーム状またはゲル状食品、ジュース、コーヒー、ココア等の飲料等に目的に応じて種々の利用形態の化粧料、医薬部外品、医薬品、食品などに調製することができる。
【００１４】
【実施例】
以下に、本発明で使用する、ゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの抽出物の製造例、実際の利用方法である実施例を記載するが、
本発明はこれらの製造例及び実施例によって何ら限定されるものではない。
【００１５】
（製造例１）ゴルドロボ(Gordolobo)の全草（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００１６】
（製造例２）クアチャララテ(Cuachalalate)の樹皮（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００１７】
（製造例３）コスティラス(Costillas) の幹や枝（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００１８】
（製造例４）イステカ(Ixcate)の樹皮（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００１９】
（製造例５）ヒエルバデルサボ(Hierba del sapo)の全草（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００２０】
（製造例６）ピルル(Pirul)の全草（乾燥品）１０ｇに５０％エタノール水溶液３００mlを加えて時々撹拌しつつ５日間放置した。これを濾過後、減圧濃縮後、凍結乾燥した。
【００２１】
（実施例１） ローション
オリーブ油 ０．５
製造例１の抽出物 ０．５
ポリオキシエチレン（20E.O.）ソルビタンモノステアレート ２．０
ポリオキシエチレン（60E.O.）硬化ヒマシ油 ２．０
エタノール １０．０
１．０％ヒアルロン酸ナトリウム水溶液 ５．０
精製水 ８０．０
【００２２】
（実施例２） クリーム
Ａ スクワラン ２０．０
オリーブ油 ２．０
ミンク油 １．０
ホホバ油 ５．０
ミツロウ ５．０
セトステアリルアルコール ２．０
グリセリンモノステアレート １．０
ソルビタンモノステアレート ２．０
製造例２の抽出物 １．０
Ｂ 精製水 ４７．９
ポリオキシエチレン（20E.O.）ソルビタンモノステアレート ２．０
ポリオキシエチレン（60E.O.）硬化ヒマシ油 １．０
グリセリン ５．０
１．０％ヒアルロン酸ナトリウム水溶液 ５．０
パラオキシ安息香酸メチル ０．１
ＡとＢをそれぞれ計量し、７０℃まで加温し、ＢにＡを攪拌しつつ徐々に加えたのち、ゆっくり攪拌しつつ３０℃まで冷却した。
【００２３】
（実施例３） ローション
実施例３は実施例１の製造例１の抽出物を製造例３の抽出物に変えて作成したもの
【００２４】
（実施例４） クリーム
実施例４は実施例２の製造例２の抽出物を製造例４の抽出物に変え、Ａ成分として作成したもの
【００２５】
（実施例５） ローション
実施例５は実施例１の製造例１の抽出物を製造例５の抽出物に変えて作成したもの
【００２６】
（実施例６） クリーム
実施例６は実施例２の製造例２の抽出物を製造例６の抽出物に変え、Ａ成分として作成したもの
【００２７】
〔実施例７（錠剤の調製）〕
製造例１を２０ｇ、結晶セルロースを３０ｇ、乳糖２０ｇ、ステビア１ｇを混合し、２ｇの錠剤にした。
【００２８】
〔実施例８（ドリンクの調製）〕
製造例２を５ｇ、還元麦芽糖５ｇ、ビタミンＣ１ｇ、ビタミンＢ2０．０５ｇ、ビタミンＢ6０．０５ｇ、精製水で１００mlにした。
【００２９】
〔実施例９（錠剤の調製）〕実施例２０において製造例１の抽出
物を製造例３の抽出物に変えて調製した。
【００３０】
〔実施例１０（ドリンクの調製）〕実施例２１において製造例２の
抽出物を製造例４の抽出物に変えて調製した。
【００３１】
〔実施例１１（錠剤の調製）〕実施例２０において製造例１の抽出
物を製造例５の抽出物に変えて調製した。
【００３２】
〔実施例１２（ドリンクの調製）〕実施例２１において製造例２の
抽出物を製造例６の抽出物に変えて調製した。
【００３３】
チロシナーゼ活性阻害試験（ＤＯＰＡ基質）
（試験方法）
リン酸緩衝液（ｐＨ６．８、３０ｍＭ） １．８ml、０．０５％Ｌ−β−（３，４−ジヒドロキシフェニル）アラニン(L-β-(3,4-Dihydroxy-phenyl)alanine)溶液 1.0ml、実施例の水またはジメチルスルホキシド溶液０．１ml、をスクリューバイアルにとり、２５℃恒温水槽中で１０分以上恒温にした。
チロシナーゼ溶液（Sigma 社製、マッシュルーム由来、)０．１mlを加え、攪拌し、３０秒後に４７５nm で吸光度を１５秒ごとに１１回測定した。（吸光度測定セルは２５℃に保ちつつ）
対照として、上記試料液のかわりに純水またはジメチルスルホキシドを加え同様に測定した。
計算式
結果を表１に示す。
チロシナーゼ活性阻害試験（チロシン基質）
（試験方法）
リン酸緩衝液（ｐＨ６．８、３０ｍＭ） 0.9ml、1.66mMチロシン(Tyrosine)溶液 1.0ml、実施例の水またはジメチルスルホキシド溶液０．１ml、精製水０．９mlをスクリューバイアルにとり、37℃恒温水槽中で５分以上加温した。
チロシナーゼ溶液（Sigma 社製、マッシュルーム由来、914 ユニット/ml) 0.1mlを加え、37℃恒温水槽中で保温し、10分後に475nm で吸光度を測定した。
対照として、上記試料液のかわりに純水またはジメチルスルホキシドを加え同様に測定した。
（計算式）
チロシナーゼ活性阻害率（チロシン基質）()=｛B-(A-P)｝/B×100
但し Ａ：試料検体の吸光度
Ｂ：対照の吸光度
Ｐ：試料検体の着色による吸光度（３倍希釈）
結果を表２に示す。
【００３６】
Ｂ−１６メラノーマ細胞試験
検体を所定の濃度になるように、ＥａｇｌｅｓＭＥＭ培地に加え、除菌フィルターでろ過後、牛胎児血清が１０％なるように加え、ｐＨを７．６±０．１になるように炭酸水素ナトリウムで調整し、シャーレに６ｍｌ分注し、Ｂ−１６メラノーマ細胞浮遊液（１×１０６ｃｅｌｌ／ｍｌ）を０．０５ｍｌ加え、５％ＣＯ2、９５％ａｉｒの条件下で３７℃で３日間培養した。さらに、培地交換（上記の検体が入った１０％牛胎児血清含有ＥａｇｌｅｓＭＥＭ培地）を行い、３日間培養した。（このとき、細胞増殖を判定する）
細胞を剥離し、遠心分離して、細胞を集め、肉眼で白色度の判定を行った。
下記の判定基準に従い判定した結果を表３に示す。
【００３８】
判定基準
白色度
ブランクと同程度 ±
わずかに白色化傾向 ＋
明らかに白色化傾向 ＋＋
強い白色化傾向 ＋＋＋
細胞増殖
ブランクの８０％以上 Ａ
ブランクの６０〜８０％ Ｂ
ブランクの３０〜６０％ Ｃ
ブランクの３０％以下 Ｄ
【００３９】
（活性酸素抑制試験）活性酸素を抑制する効果を測定する方法は各
種あるが、今回以下の方法を利用した。
ｐＨ８．２緩衝液（リン酸二水素ナトリウム６５ｍＭ、ホウ酸ソーダ３５ｍＭ、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム０．５ｍＭ）を０．２ml、０．５ｍＭキサンチンを０．２ml、１ｍＭヒドロキシルアミン塩酸塩水溶液０．１ml、水０．１mlをバイヤル瓶に加えて攪拌し、検体（製造例の１％水溶液）０．１mlを加えてさらに水０．１mlを加えて攪拌し、キサンチンオキシダーゼ水溶液（ミルク製、６unit／ml）を０．２mlを加えて、３７℃で３０分間放置した。これに発色液を２．０ml加えて室温で放置３０分〜１８０分の間に５５０ｎｍの吸光度を測定した。（検体の変わりに水を測定し、ブランクとした）
結果を表４に示す。
【００４１】
（使用テストの１）女性８名の顔面を左右に分け、一方に、実施例のローションとクリームをセットにして、他方には比較例のローションとクリームをセットにして毎日、１回以上使用してもらって、３カ月後に、美白、肌荒れ防止、肌のつや、クスミの改善及び肌のはりについて評価した。なお、比較例は実施例より製造例の各種抽出物を水に代えたものである（比較例１、２）。なお、２４名を３班にわけ、下記表５に示される試料を使って試験した。
評価は、下記の評価基準により評価し、その結果をまとめたのが下記の表６である。
（評価基準）
実施例の方が非常によい ３
実施例の方がかなりよい ２
実施例の方がややよい １
差がない ０
比較例の方がややよい −１
比較例の方がかなりよい −２
比較例の方が非常によい −３
【００４４】
（使用テストの２）女性６名に実施例の錠剤２錠とドリンク１００mlを１日１回毎日、３カ月食してもらった。なお、１８名を３班にわけ、下記表７に示される試料を使って試験した。
評価は、下記の評価基準により評価し、その結果をまとめたのが下記の表８である。
（評価基準）
試験後の方が非常によい ３
試験後の方がかなりよい ２
試験後の方がややよい １
差がない ０
試験前の方がややよい −１
試験前の方がかなりよい −２
試験前の方が非常によい −３
【効果】
ゴルドロボ、クアチャララテ、コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボ、ピルルの抽出物を配合した化粧料、医薬部外品、医薬品、食品は酸化防止作用や美白作用が効果を発揮し、美白、肌荒れ防止、肌のつや、クスミの改善及び肌のはりに効果がある。
Claims (1)
- コスティラス、イステカ、ヒエルバデルサボの抽出物を配合した化粧品
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Applications Claiming Priority (1)
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| JP04954799A JP4198260B2 (ja) | 1999-02-26 | 1999-02-26 | 化粧料、医薬部外品、医薬品、食品 |
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