JP3632951B2 - マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 - Google Patents

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤に関し、さらに詳しくは、皮膚の老化に大きな影響を与える特定のマトリックスメタロプロテアーゼ（Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ；ＭＭＰｓ）の活性を阻害して皮膚の老化を防止することのできるマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤に関する。本発明のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤は、基礎化粧品をはじめ、メイクアップ化粧品、頭髪用化粧品、浴剤などに好適に使用しうるものである。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
皮膚の老化に伴う変化、即ち、シワ、くすみ、きめの消失、弾力性の低下等に、従来より紫外線が大きく関与していることが知られている。これらの変化をミクロ的に見れば、コラーゲン、エラスチン等の真皮マトリックス成分の減少、変性、さらには基底膜損傷や表皮肥厚が起こっている。
【０００３】
近年研究が進み、この変化を誘導する因子として、特にマトリックスプロテアーゼの関与が指摘されてきている。マトリックスプロテアーゼには多くの種類が知られており、構造的、機能的特徴に共通点を有してはいるものの、それぞれの基質蛋白が異なっている（宮崎香，生化学６８巻１２号，ＰＰ１７９１−１８０７（１９９６））。マトリックスメタロプロテアーゼの中でも、ＭＭＰ１は、皮膚真皮マトリックスの主な構成成分であるタイプＩ，ＩＩＩコラーゲンを分解し、ゼラチナーゼ群に属するＭＭＰ２，９は基底膜成分であるタイプＩＶコラーゲンやラミニン、真皮マトリックス成分のエラスチン等を分解し、さらにストロムライシン群に属するＭＭＰ３，１０はプロテオグリカンやタイプＩＶコラーゲン、ラミニン等を分解する酵素として知られているが、その発現は紫外線の照射により大きく増加し、紫外線による細胞外マトリックスの減少変性の原因の一つとなり、皮膚のシワの形成等の大きな要因の一つであると考えられている（Ｇａｒｙ Ｊ．Ｆｉｓｈｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｎａｔｕｒｅ，３７９（２５），３３５（１９９６）；Ｇａｒｙ Ｊ．Ｆｉｓｈｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，３３７（２０），１４１９（１９９７））。このようにＭＭＰｓ活性の阻害は種々の細胞外マトリックスを保護し、皮膚の老化を防ぐうえで重要である。
ところが、従来の抗老化薬剤には、線維芽細胞を活性化し、コラーゲンの産生量を増加させる機序を持ったものは多く認められるが、各々のＭＭＰｓ活性の阻害に着目したものは存在していない。そこで、我々は、より効果的な抗老化薬剤の開発をめざして、各々のＭＭＰｓの阻害作用を有するマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤の開発を行った。
したがって、本発明の目的は、皮膚の老化の予防や改善作用に優れ、かつ安全性の高いマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
そこで本発明者らは、これらの問題を解決するため、広く種々の物質について各々のＭＭＰｓ活性阻害に基づく抗老化作用を検討した結果、イブキジャコウソウ（学名：Ｔｈｙｍｕｓ ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ Ｌ．）の抽出物が優れたＭＭＰｓ活性阻害性を有していることを見出し、本発明を完成した。
【０００５】
すなわち本発明は、イブキジャコウソウ（学名：Ｔｈｙｍｕｓ ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ Ｌ．）の抽出物よりなることを特徴とするゼラチナーゼ群に属するマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰｓ）阻害剤、およびイブキジャコウソウ（学名：Ｔｈｙｍｕｓ ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ Ｌ．）の抽出物よりなることを特徴とするストロムライシン群に属するマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰｓ）阻害剤である。
【０００６】
本発明において、ゼラチナーゼ群に属するマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰｓ）阻害剤の応用としては、エラスチン分解抑制剤、ラミニン分解抑制剤および基底膜分解抑制剤としての適用が可能である。また、ストロムライシン群に属するマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰｓ）阻害剤の応用としては、プロテオグリカン分解抑制剤およびラミニン分解抑制剤としての適用が可能である。また、これらはシワの防御と改善を目的とした抗シワ剤としても適用が可能である。
【０００７】
以下、本発明の構成について詳述する。
本発明に用いられるイブキジャコウソウ（学名：Ｔｈｙｍｕｓ ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ Ｌ．）は、シソ科タイム属に属する植物である。イブキジャコウソウの抽出物がゼラチナーゼ群に属するＭＭＰｓ活性阻害およびストロムライシン群に属するＭＭＰｓ活性阻害に基づく抗老化作用を有していることは今まで知られておらず、今回本発明者らがはじめて見い出したものである。
【０００８】
本発明に用いられるイブキジャコウソウの抽出物は、植物全草を抽出溶媒と共に浸漬または加熱還流した後、濾過し、濃縮して得られる。本発明に用いられる抽出溶媒は、通常抽出に用いられる溶媒であれば何でもよく、特にメタノール、エタノール等のアルコール類、含水アルコール類、アセトン、酢酸エチルエステル、１，３−ブチレングリコール等の有機溶媒を単独あるいは組み合わせて用いることができる。
【０００９】
本発明のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤は老化防止化粧料として用いることを好適とし、その場合のイブキジャコウソウの抽出物の配合量は、外用剤全量中、乾燥物として０．０００１〜２０．０重量％、好ましくは０．００１〜１０．０重量％である。０．０００１重量％未満であると、本発明でいう効果が十分に発揮されず、２０．０重量％を超えると製剤化が難しいので好ましくない。また、１０．０重量％以上配合してもさほど大きな効果の向上はみられない。
【００１０】
また、本発明のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤には、上記必須成分以外に、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば、美白剤、保湿剤、酸化防止剤、油性成分、紫外線吸収剤、界面活性剤、増粘剤、アルコール類、粉末成分、色剤、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００１１】
その他、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属封鎖剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム酸およびその誘導体、甘草抽出物、グラブリジン、カリンの果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその塩等の薬剤、ビタミンＣ、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウジ酸等の他の美白剤、グルコース、フルクトース、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類なども適宜配合することができる。
【００１２】
本発明のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤は、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等、従来皮膚外用剤に用いるものであればいずれでもよく、剤型は特に問わない。
【００１３】
【実施例】
次に実施例によって本発明をさらに詳細に説明する。なお、本発明はこれにより限定されるものではない。配合量は重量％である。実施例に先立ち、本発明の植物抽出物のＭＭＰ９およびＭＭＰ３活性阻害効果に関する試験方法とその結果について説明する。
【００１４】
１．試料の調製
（１） イブキジャコウソウ抽出液
イブキジャコウソウの全草５０ｇを、室温で１週間エタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、エタノール抽出物１．５ｇを得た。この抽出物をＤＭＳＯに２％溶かし、この溶液を希釈して濃度を調整し、これを用いて以下の実験を行った。
【００１５】
２．ＭＭＰｓ活性阻害効果の試験方法およびその結果
測定にはヤガイ製のＩＶ型コラゲナーゼ、ストロメリシン−１測定キットを用いた。被験物質をジメチルスルホキシドに溶解し、２重量％溶液とし、測定用緩衝液（０．４Ｍ ＮａＣｌ，１０ｍＭ ＣａＣｌ_２を含むｐＨ７．４の０．１Ｍトリス）で所定濃度に希釈した。用いた酵素はヤガイ製のヒト細胞由来のＭＭＰ３，ＭＭＰ９である。被験物質を含んでいない反応系での基質分解率に対する被験物質を含んだ系での基質分解率の割合より、被験物質の活性阻害率を測定した。その結果を表１に示す。
また参考例として、ＭＭＰｓ阻害作用がよく知られている物質であるエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）についても、上記と同様の試験を行った。その結果を併せて表１に記す。
【００１６】
【表１】

【００１７】
表１より明らかなように、イブキジャコウソウ抽出物のＭＭＰ９およびＭＭＰ３阻害効果は、ＥＤＴＡのＭＭＰ９およびＭＭＰ３阻害効果と同等以上であった。
以下に、種々の剤型の本発明によるマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤の処方例を実施例として説明する。
【００１８】
実施例１ クリーム
（処方）

（製法）
イオン交換水にプロピレングリコールとイブキジャコウソウ１，３−ブチレングリコール５０％水溶液抽出物と苛性カリを加え溶解し、加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を徐々に加え、全部加え終わってからしばらくその温度に保ち反応を起こさせる。その後、ホモミキサーで均一に乳化し、よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。
【００１９】
実施例２ クリーム
（処方）

（製法）
イオン交換水にプロピレングリコールを加え、加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。
【００２０】
実施例３ クリーム
（処方）

（製法）
イオン交換水に石けん粉末と硼砂を加え、加熱溶解して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相をかきまぜながら徐々に加え反応を行う。反応終了後、ホモミキサーで均一に乳化し、乳化後よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。
【００２１】
実施例４ 乳液
（処方）

（製法）
少量のイオン交換水にカルボキシビニルポリマーを溶解する（Ａ相）。残りのイオン交換水にポリエチレングリコール１５００とトリエタノールアミンを加え、加熱溶解して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備乳化を行い、Ａ相を加えホモミキサーで均一乳化し、乳化後よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。
【００２２】
実施例５ 乳液
（処方）

（製法）
イオン交換水にプロピレングリコールを加え、加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。油相をかきまぜながらこれに水相を徐々に加え、ホモミキサーで均一に乳化する。乳化後よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。
【００２３】
実施例６ ゼリー
（処方）

（製法）
イオン交換水にカーボポール９４０を均一に溶解し、一方、９５％エタノールにイブキジャコウソウ５０％エタノール水溶液抽出物、ポリオキシエチレン（５０モル）オレイルアルコールエーテルを溶解し、水相に添加する。次いで、その他の成分を加えたのち苛性ソーダ、Ｌ−アルギニンで中和させ増粘する。
【００２４】
実施例７ 美容液
（処方）
（Ａ相）

（製法）
Ａ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ｃ相にＡ相を加えて可溶化する。次いでＢ相を加えたのち充填を行う。
【００２５】
実施例８ パック
（処方）

（製法）
Ａ相、Ｂ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ａ相にＢ相を加えて可溶化する。次いでこれをＣ相に加えたのち充填を行う。
【００２６】
実施例９ 固形ファンデーション
（処方）
タルク ４３．１ 重量％
カオリン １５．０
セリサイト １０．０
亜鉛華 ７．０
二酸化チタン ３．８
黄色酸化鉄 ２．９
黒色酸化鉄 ０．２
スクワラン ８．０
イソステアリン酸 ４．０
モノオレイン酸ＰＯＥソルビタン ３．０
オクタン酸イソセチル ２．０
イブキジャコウソウエタノール抽出物 １．０
防腐剤 適量
香料 適量
（製法）
タルク〜黒色酸化鉄の粉末成分をブレンダーで十分混合し、これにスクワラン〜オクタン酸イソセチルの油性成分、イブキジャコウソウエタノール抽出物、防腐剤、香料を加え良く混練した後、容器に充填、成型する。
【００２７】
実施例１０ 乳化型ファンデーション（クリームタイプ）
（処方）
（粉体部）
二酸化チタン １０．３ 重量％
セリサイト ５．４
カオリン ３．０
黄色酸化鉄 ０．８
ベンガラ ０．３
黒色酸化鉄 ０．２
（油相）
デカメチルシクロペンタシロキサン １１．５
流動パラフィン ４．５
ポリオキシエチレン変性ジメチルポリシロキサン ４．０
（水相）
精製水 ５０．０
１，３−ブチレングルコール ４．５
イブキジャコウソウエタノール抽出物 １．５
ソルビタンセスキオレイン酸エステル ３．０
防腐剤 適量
香料 適量
（製法）
水相を加熱撹拌後、十分に混合粉砕した粉体部を添加してホモミキサー処理する。更に加熱混合した油相を加えてホモミキサー処理した後、撹拌しながら香料を添加して室温まで冷却する。
【００２８】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤は、優れたＭＭＰ９活性阻害効果およびＭＭＰ３活性阻害効果を有しており、ＭＭＰｓによる皮膚細胞外マトリックス成分の分解を防止して、弾力のある、シワやたるみのない皮膚を維持することができ、皮膚の老化を防止し、若々しい肌の状態を維持することのできるものである。

Claims (6)

1. イブキジャコウソウ（学名：Ｔｈｙｍｕｓ ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ Ｌ．）の抽出物よりなることを特徴とするゼラチナーゼ群に属するマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰｓ）阻害剤。
2. 請求項１記載の抽出物よりなることを特徴とするエラスチン分解抑制剤。
3. 請求項１記載の抽出物よりなることを特徴とするラミニン分解抑制剤。
4. 請求項１記載の抽出物よりなることを特徴とする基底膜分解抑制剤。
5. イブキジャコウソウ（学名：Ｔｈｙｍｕｓ ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ Ｌ．）の抽出物よりなることを特徴とするストロムライシン群に属するマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰｓ）阻害剤。
6. 請求項５記載の抽出物よりなることを特徴とするプロテオグリカン分解抑制剤。