JP3429563B2 - 新規微生物 - Google Patents
新規微生物Info
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- JP3429563B2 JP3429563B2 JP15207894A JP15207894A JP3429563B2 JP 3429563 B2 JP3429563 B2 JP 3429563B2 JP 15207894 A JP15207894 A JP 15207894A JP 15207894 A JP15207894 A JP 15207894A JP 3429563 B2 JP3429563 B2 JP 3429563B2
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- Japan
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- astaxanthin
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- bacterium
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は新規な微生物に関する。
【０００２】
【従来の技術】カロチノイド色素を生産する細菌を天然
から分離していた過程で、全く新規な微生物を分離する
ことに成功し、さらにその微生物群は今までに報告され
ているどの属とも性質が異なる新属を形成することが確
認された。
から分離していた過程で、全く新規な微生物を分離する
ことに成功し、さらにその微生物群は今までに報告され
ているどの属とも性質が異なる新属を形成することが確
認された。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明は新規な微生物
を提供しようとするものである。
を提供しようとするものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく種々検討した結果、公知の属に属さな
い、すなわち新規な属に属する細菌株を見出し、本発明
を完成した。したがって、本発明は新規な属に属する細
菌を提供するものである。
題を解決すべく種々検討した結果、公知の属に属さな
い、すなわち新規な属に属する細菌株を見出し、本発明
を完成した。したがって、本発明は新規な属に属する細
菌を提供するものである。
【０００５】
【具体的な説明】本発明の新規細菌は、次の性質を有す
る新規な属に属する細菌である。
る新規な属に属する細菌である。
【０００６】
【表２】
上記の性質を具備する細菌はバージーズ・マニュアル・
オブ・システマティク・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅ
ｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ
Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）、２巻、１９８４年を参照
した結果、従来報告されているいずれの属にも該当しな
い新規な属の細菌群であると確認された。
オブ・システマティク・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅ
ｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ
Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）、２巻、１９８４年を参照
した結果、従来報告されているいずれの属にも該当しな
い新規な属の細菌群であると確認された。
【０００７】好気性のグラム陰性の桿菌で運動性があ
り、しかもキノン系がＱ−１０である性質を有する属は
プロテオバクテリア（Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ）
のα−サブクラス（α ｓｕｂｃｌａｓｓ）に属するア
グロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属細
菌あるいは光合成能を有する細菌であるロドシュードモ
ナス（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属細菌、ロ
ドバクター（Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ）属細菌、ロドブ
ラム（Ｒｈｏｄｏｖｕｌｕｍ）属細菌、ロゼオバクター
（Ｒｏｓｅｏｂａｃｔｅｒ）属細菌、エリスロバクター
（Ｅｒｙｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）属細菌がある。
り、しかもキノン系がＱ−１０である性質を有する属は
プロテオバクテリア（Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ）
のα−サブクラス（α ｓｕｂｃｌａｓｓ）に属するア
グロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属細
菌あるいは光合成能を有する細菌であるロドシュードモ
ナス（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属細菌、ロ
ドバクター（Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ）属細菌、ロドブ
ラム（Ｒｈｏｄｏｖｕｌｕｍ）属細菌、ロゼオバクター
（Ｒｏｓｅｏｂａｃｔｅｒ）属細菌、エリスロバクター
（Ｅｒｙｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）属細菌がある。
【０００８】しかしながらアグロバクテリウムはスライ
ムを形成するが本発明の微生物は形成しない点で異な
る。よって本発明の微生物はアグロバクテリウムではな
い。また光合成能を有する上記の細菌はいずれもバクテ
リオクロロフィルを生成するが本発明の微生物は生成し
ない点から本発明の微生物は光合成細菌ではない。以上
のように上記の性質を具備する細菌は新規な属に属する
細菌と確認された。
ムを形成するが本発明の微生物は形成しない点で異な
る。よって本発明の微生物はアグロバクテリウムではな
い。また光合成能を有する上記の細菌はいずれもバクテ
リオクロロフィルを生成するが本発明の微生物は生成し
ない点から本発明の微生物は光合成細菌ではない。以上
のように上記の性質を具備する細菌は新規な属に属する
細菌と確認された。
【０００９】具体的な微生物としてはＥ−３９６株を挙
げることができる。この菌株は、発明者らが新しく単離
したものであり、工業技術院生命工学工業技術研究所に
平成５年４月２７日にＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３として
寄託された。この菌株は、次の菌学的性質を有する。
げることができる。この菌株は、発明者らが新しく単離
したものであり、工業技術院生命工学工業技術研究所に
平成５年４月２７日にＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３として
寄託された。この菌株は、次の菌学的性質を有する。
【００１０】
【表３】
【００１１】
【表４】
【００１２】
【表５】
【００１３】
【表６】
【００１４】
【表７】
【００１５】
【表８】
【００１６】１６ＳリボソームＲＮＡをコードするＤ
ＮＡの塩基配列 配列番号：１に示す。以上の結果からＥ−３９６株（Ｆ
ＥＲＭ ＢＰ−４２８３）は下記の性質を具備する新属
に属する細菌であることが確認された。
ＮＡの塩基配列 配列番号：１に示す。以上の結果からＥ−３９６株（Ｆ
ＥＲＭ ＢＰ−４２８３）は下記の性質を具備する新属
に属する細菌であることが確認された。
【００１７】
【表９】
【００１８】Ｅ−３９６株は好気性のグラム陰性の桿菌
で周毛を有していることからアグロバクテリウム（Ａｇ
ｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属細菌と思われたが色素産生
能とスライム形成能、およびＤＮＡ−ＤＮＡ相同性の結
果から否定された。また集落の色調からスフィンゴモナ
ス（Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ）属細菌や光合成細菌の
可能性も考えられたが、スフィンゴ脂質およびバクテリ
オクロロフィルが検出されずいずれの属の菌株でもない
ことが分かった。
で周毛を有していることからアグロバクテリウム（Ａｇ
ｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属細菌と思われたが色素産生
能とスライム形成能、およびＤＮＡ−ＤＮＡ相同性の結
果から否定された。また集落の色調からスフィンゴモナ
ス（Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ）属細菌や光合成細菌の
可能性も考えられたが、スフィンゴ脂質およびバクテリ
オクロロフィルが検出されずいずれの属の菌株でもない
ことが分かった。
【００１９】集落の色調、周毛、ＧＣ含量、キノン系か
らＥ−３９６株と近縁と推定される各菌種の保存菌株と
ＤＮＡ−ＤＮＡ相同性を調べたが高い相同値を示した属
は得られなかった。さらにＥ−３９６株の１６Ｓリボソ
ームＲＮＡの塩基配列から近隣結合法により分子系統樹
（図１）を作成した。その結果Ｅ−３９６株は近縁のい
ずれの属とも系統的に独立していることが分かった。よ
ってＥ−３９６株は既知の属ではない全く新規な属に属
する細菌であることが確認された。
らＥ−３９６株と近縁と推定される各菌種の保存菌株と
ＤＮＡ−ＤＮＡ相同性を調べたが高い相同値を示した属
は得られなかった。さらにＥ−３９６株の１６Ｓリボソ
ームＲＮＡの塩基配列から近隣結合法により分子系統樹
（図１）を作成した。その結果Ｅ−３９６株は近縁のい
ずれの属とも系統的に独立していることが分かった。よ
ってＥ−３９６株は既知の属ではない全く新規な属に属
する細菌であることが確認された。
【００２０】さらに具体的な微生物としてはＡ−５８１
−１株を挙げることができる。この菌株は、発明者らが
新しく単離したものであり、工業技術院生命工学工業技
術研究所に平成６年５月２０日にＦＥＲＭ ＢＰ−４６
７１として寄託された。この菌株は、次の菌学的性質を
有する。
−１株を挙げることができる。この菌株は、発明者らが
新しく単離したものであり、工業技術院生命工学工業技
術研究所に平成６年５月２０日にＦＥＲＭ ＢＰ−４６
７１として寄託された。この菌株は、次の菌学的性質を
有する。
【００２１】
【表１０】
【００２２】
【表１１】
【００２３】
【表１２】
【００２４】
【表１３】
【００２５】
【表１４】
【００２６】以上の結果からＡ−５８１−１株はＥ−３
９６株と同様に下記の性質を具備することおよびＥ−３
９６株とのＤＮＡ−ＤＮＡ相同性が高いことからＥ−３
９６株と同一の新規な属に属する細菌であると判断され
た。
９６株と同様に下記の性質を具備することおよびＥ−３
９６株とのＤＮＡ−ＤＮＡ相同性が高いことからＥ−３
９６株と同一の新規な属に属する細菌であると判断され
た。
【００２７】
【表１５】
【００２８】本発明の微生物は例えばカロチノイド系色
素を生産できるものであり、カロチノイド色素の製造の
ために用いることができる。この様なカロチノイドとし
ては、例えばアスタキサンチン、アドニキサンチン、β
−カロチン、エキネノン、カンタキサンチン及びゼアキ
サンチンを挙げることができ、これらのカロチノイドは
次の式により表わされる。
素を生産できるものであり、カロチノイド色素の製造の
ために用いることができる。この様なカロチノイドとし
ては、例えばアスタキサンチン、アドニキサンチン、β
−カロチン、エキネノン、カンタキサンチン及びゼアキ
サンチンを挙げることができ、これらのカロチノイドは
次の式により表わされる。
【００２９】
【化１】
【００３０】
【化２】
【００３１】カロチノイドを本発明の菌株により製造す
るための培地は、例えば次の通りである。すなわち、生
産菌が生育に必要な炭素源、窒素源、無機塩、および必
要であれば特殊な要求物質（例えば、ビタミン、アミノ
酸、核酸塩基等）を含む。炭素源としてはグルコース、
シュークロース、ラクトース、フルクトース、トレハロ
ース、マンノース、マンニトール、マルトース等の糖
類、酢酸、フマル酸、クエン酸、プロピオン酸、リンゴ
酸、マロン酸、ピルビン酸等の有機酸、エタノール、プ
ロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノー
ル、イソブタノール、グリセロール等のアルコール類、
大豆油、ヌカ油、オリーブ油、トウモロコシ油、ゴマ
油、アマニ油等の油脂類等が挙げられる。添加割合は炭
素源の種類により異なるが、通常培地１Ｌ当たり１〜１
００ｇ、好ましくは２〜５０ｇである。
るための培地は、例えば次の通りである。すなわち、生
産菌が生育に必要な炭素源、窒素源、無機塩、および必
要であれば特殊な要求物質（例えば、ビタミン、アミノ
酸、核酸塩基等）を含む。炭素源としてはグルコース、
シュークロース、ラクトース、フルクトース、トレハロ
ース、マンノース、マンニトール、マルトース等の糖
類、酢酸、フマル酸、クエン酸、プロピオン酸、リンゴ
酸、マロン酸、ピルビン酸等の有機酸、エタノール、プ
ロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノー
ル、イソブタノール、グリセロール等のアルコール類、
大豆油、ヌカ油、オリーブ油、トウモロコシ油、ゴマ
油、アマニ油等の油脂類等が挙げられる。添加割合は炭
素源の種類により異なるが、通常培地１Ｌ当たり１〜１
００ｇ、好ましくは２〜５０ｇである。
【００３２】窒素源としては、例えば硝酸カリウム、硝
酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム、リン酸アンモニウム、アンモニア、尿素等の１種ま
たは２種以上が用いられる。添加割合は窒素源の種類に
より異なるが、通常培地１Ｌに対し０．１ｇ〜３０ｇ、
好ましくは１〜１０ｇである。無機塩としてはリン酸二
水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸水素二ナ
トリウム、硫酸マグネシウム、塩化マグネシウム、硫酸
鉄、塩化鉄、硫酸マンガン、塩化マンガン、硫酸亜鉛、
塩化鉛、硫酸銅、塩化カルシウム、炭酸カルシウム、炭
酸ナトリウム等の１種または２種以上が用いられる。添
加割合は無機塩の種類により異なるが、通常培地１Ｌに
対し０．００１〜１０ｇである。
酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム、リン酸アンモニウム、アンモニア、尿素等の１種ま
たは２種以上が用いられる。添加割合は窒素源の種類に
より異なるが、通常培地１Ｌに対し０．１ｇ〜３０ｇ、
好ましくは１〜１０ｇである。無機塩としてはリン酸二
水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸水素二ナ
トリウム、硫酸マグネシウム、塩化マグネシウム、硫酸
鉄、塩化鉄、硫酸マンガン、塩化マンガン、硫酸亜鉛、
塩化鉛、硫酸銅、塩化カルシウム、炭酸カルシウム、炭
酸ナトリウム等の１種または２種以上が用いられる。添
加割合は無機塩の種類により異なるが、通常培地１Ｌに
対し０．００１〜１０ｇである。
【００３３】特殊な要求物質としてはビタミン類、核酸
類、酵母エキス、ペプトン、肉エキス、麦芽エキス、コ
ーンスチープリカー、乾燥酵母、大豆粕、等の１種また
は２種以上が用いられる。添加割合は物質の種類により
異なるが、通常、培地１Ｌに対し０．２ｇ〜２００ｇ、
好ましくは３〜１００ｇである。培地のpHは２〜１２、
好ましくは６〜９に調整する。培養条件は１５〜８０
℃、好ましくは２０〜３５℃の温度であり、通常１日〜
２０日間、好ましくは２〜８日間振とう培養あるいは通
気攪拌培養を行う。
類、酵母エキス、ペプトン、肉エキス、麦芽エキス、コ
ーンスチープリカー、乾燥酵母、大豆粕、等の１種また
は２種以上が用いられる。添加割合は物質の種類により
異なるが、通常、培地１Ｌに対し０．２ｇ〜２００ｇ、
好ましくは３〜１００ｇである。培地のpHは２〜１２、
好ましくは６〜９に調整する。培養条件は１５〜８０
℃、好ましくは２０〜３５℃の温度であり、通常１日〜
２０日間、好ましくは２〜８日間振とう培養あるいは通
気攪拌培養を行う。
【００３４】最後に培養物より分離精製してカロチノイ
ド色素を得る。すなわち培養物より直接または遠心分
離、濾過等により菌体を分離したのち菌体から溶剤で抽
出する。また、培養上清にも色素が若干溶解しているの
で、それらも回収することができる。ここで用いる溶剤
はカロチノイド色素が溶解する化合物であればいずれの
溶剤を使用することができる。
ド色素を得る。すなわち培養物より直接または遠心分
離、濾過等により菌体を分離したのち菌体から溶剤で抽
出する。また、培養上清にも色素が若干溶解しているの
で、それらも回収することができる。ここで用いる溶剤
はカロチノイド色素が溶解する化合物であればいずれの
溶剤を使用することができる。
【００３５】例えばアセトン、クロロホルム、ジクロロ
メタン、ヘキサン、シクロヘキサン、メタノール、エタ
ノール、イソプロピルアルコール、ベンゼン、二硫化炭
素、ジエチルエーテル等の有機溶剤が用いられ、好まし
くはクロロホルム、ジクロロメタン、アセトン、メタノ
ール、エタノール、イソプロピルアルコールが用いられ
る。精製には吸着、溶出、溶解などの通常の方法を用い
ることができる。
メタン、ヘキサン、シクロヘキサン、メタノール、エタ
ノール、イソプロピルアルコール、ベンゼン、二硫化炭
素、ジエチルエーテル等の有機溶剤が用いられ、好まし
くはクロロホルム、ジクロロメタン、アセトン、メタノ
ール、エタノール、イソプロピルアルコールが用いられ
る。精製には吸着、溶出、溶解などの通常の方法を用い
ることができる。
【００３６】本発明の微生物によれば、多くの場合、ア
スタキサンチン、アドニキサンチン、β−カロテン、エ
キネノン、カンタキサンチン及びゼアキサンチンは同時
に生産され、培養物中に共存している。従って、前記の
精製法により、前記カロチノイド色素を単独で得ること
ができる。他方、前記カロチノイド色素を相互に分離す
ることなく、それらを含む混合物として得ることができ
る。この様に、前記の個々のカロチノイド色素を単独に
製造する方法に加えて、前記カロチノイド色素２種類以
上を含む混合物としてカロチノイドを製造することも可
能である。
スタキサンチン、アドニキサンチン、β−カロテン、エ
キネノン、カンタキサンチン及びゼアキサンチンは同時
に生産され、培養物中に共存している。従って、前記の
精製法により、前記カロチノイド色素を単独で得ること
ができる。他方、前記カロチノイド色素を相互に分離す
ることなく、それらを含む混合物として得ることができ
る。この様に、前記の個々のカロチノイド色素を単独に
製造する方法に加えて、前記カロチノイド色素２種類以
上を含む混合物としてカロチノイドを製造することも可
能である。
【００３７】アスタキサンチンとアドニキサンチンの相
互分離は、カロチノイド色素成分の相互分離に常用され
ている方法、例えば吸着分離カラムクロマトグラフィー
法、分別抽出法、向流分配抽出法、分別結晶法等を用い
て行うことができる。また、個々のカロチノイド色素を
製造するためには、培地組成、培養条件等を調整するこ
とにより、所望のカロチノイド色素を優先的に生産させ
ることができる。
互分離は、カロチノイド色素成分の相互分離に常用され
ている方法、例えば吸着分離カラムクロマトグラフィー
法、分別抽出法、向流分配抽出法、分別結晶法等を用い
て行うことができる。また、個々のカロチノイド色素を
製造するためには、培地組成、培養条件等を調整するこ
とにより、所望のカロチノイド色素を優先的に生産させ
ることができる。
【００３８】例えば、培養における好気性条件を変える
ことにより、カロチノイド色素の生成量比を変えること
ができる。例えばフラスコ振とう培養においては液量や
振とう速度を変えることにより、また通気・攪拌培養に
より通気や攪拌条件を変えることによりカロチノイド色
素の生成比を変えることができる。一例としてフラスコ
振とう培養において、フラスコ当りの液量を増加するこ
とによりアスタキサンチンの生成量は増加する傾向にあ
り、アドニキサンチンの生産量は減少する。
ことにより、カロチノイド色素の生成量比を変えること
ができる。例えばフラスコ振とう培養においては液量や
振とう速度を変えることにより、また通気・攪拌培養に
より通気や攪拌条件を変えることによりカロチノイド色
素の生成比を変えることができる。一例としてフラスコ
振とう培養において、フラスコ当りの液量を増加するこ
とによりアスタキサンチンの生成量は増加する傾向にあ
り、アドニキサンチンの生産量は減少する。
【００３９】他の方法として、カロチノイド色素の特定
のものを優先的に製造するためには、生産菌株を変異、
例えば人為的変異処理により、一方の成分を他方の成分
より優先的に生産するように改良することができる。こ
の様な変異処理としては、例えばＸ線照射、紫外線照射
のごとき物理的方法、化学的変異剤、例えばＮ−メチル
−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）、
エチルメタンスルホネート（ＥＭＳ）等による変異処理
のごとき化学的方法、遺伝子組換え法等の生物学的方法
を用いることができる。これらの方法、又は他の方法に
より改良された生産株も、本発明の微生物に属する。
のものを優先的に製造するためには、生産菌株を変異、
例えば人為的変異処理により、一方の成分を他方の成分
より優先的に生産するように改良することができる。こ
の様な変異処理としては、例えばＸ線照射、紫外線照射
のごとき物理的方法、化学的変異剤、例えばＮ−メチル
−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）、
エチルメタンスルホネート（ＥＭＳ）等による変異処理
のごとき化学的方法、遺伝子組換え法等の生物学的方法
を用いることができる。これらの方法、又は他の方法に
より改良された生産株も、本発明の微生物に属する。
【００４０】前記のごとき方法により製造されたアスタ
キサンチンは（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンであ
りその純度はほぼ１００％である。天然物であるザリガ
ニ、ヘマトコッカス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、
サケ、マス、マダイに存在するアスタキサンチンは（３
Ｓ，３′Ｓ）体の含有率が高いことが知られている。一
方ファフィア・ロドチマ（Ｐｈａｆｆｉａ ｒｈｏｄｏ
ｚｙｍａ）は（３Ｒ，３′Ｒ）体の含有率が高く天然に
多く存在するアスタキサンチンとは反対の絶対配置を持
つことが知られている。
キサンチンは（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンであ
りその純度はほぼ１００％である。天然物であるザリガ
ニ、ヘマトコッカス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、
サケ、マス、マダイに存在するアスタキサンチンは（３
Ｓ，３′Ｓ）体の含有率が高いことが知られている。一
方ファフィア・ロドチマ（Ｐｈａｆｆｉａ ｒｈｏｄｏ
ｚｙｍａ）は（３Ｒ，３′Ｒ）体の含有率が高く天然に
多く存在するアスタキサンチンとは反対の絶対配置を持
つことが知られている。
【００４１】本微生物により生産したアスタキサンチン
は１００％の（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンであ
り天然において多数を締めるアスタキサンチンと同じ絶
対配置を有することは産業上価値が高い。また化学合成
法による（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンの製造法
（Helv.Chim.Acta, 61，2609, 1978) が知られているが
光学活性な（４Ｒ，６Ｒ）−４−ヒドロキシ−２，２，
６−トリメチルシクロヘキサノンを原料とするためコス
トが高く工業化には問題がある。
は１００％の（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンであ
り天然において多数を締めるアスタキサンチンと同じ絶
対配置を有することは産業上価値が高い。また化学合成
法による（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンの製造法
（Helv.Chim.Acta, 61，2609, 1978) が知られているが
光学活性な（４Ｒ，６Ｒ）−４−ヒドロキシ−２，２，
６−トリメチルシクロヘキサノンを原料とするためコス
トが高く工業化には問題がある。
【００４２】また本微生物により生産したアスタキサン
チンはａｌｌ−ｔｒａｎｓ体のアスタキサンチンの含有
率が高いことが特徴でａｌｌ−ｔｒａｎｓ：ｃｉｓの比
は９２：８〜９６：４である。ａｌｌ−ｔｒａｎｓ体の
アスタキサンチンは天然型であり本微生物は天然型のア
スタキサンチンを生産する点ですぐれている。ｃｉｓ体
のアスタキサンチンが必要であれば公知の方法によりａ
ｌｌ−ｔｒａｎｓ体から合成できる。しかしｃｉｓ体か
らａｌｌ−ｔｒａｎｓ体のアスタキサンチンを合成する
ことは困難である。
チンはａｌｌ−ｔｒａｎｓ体のアスタキサンチンの含有
率が高いことが特徴でａｌｌ−ｔｒａｎｓ：ｃｉｓの比
は９２：８〜９６：４である。ａｌｌ−ｔｒａｎｓ体の
アスタキサンチンは天然型であり本微生物は天然型のア
スタキサンチンを生産する点ですぐれている。ｃｉｓ体
のアスタキサンチンが必要であれば公知の方法によりａ
ｌｌ−ｔｒａｎｓ体から合成できる。しかしｃｉｓ体か
らａｌｌ−ｔｒａｎｓ体のアスタキサンチンを合成する
ことは困難である。
【００４３】本発明の微生物により製造される化合物ア
スタキサンチンの13Ｃ核磁気共鳴スペクトルを図２に、
そして質量スペクトルを図３に示す。また、アドニキサ
ンチンの13Ｃ核磁気共鳴スペクトルを図４に、そして質
量スペクトルを図５に示す。
スタキサンチンの13Ｃ核磁気共鳴スペクトルを図２に、
そして質量スペクトルを図３に示す。また、アドニキサ
ンチンの13Ｃ核磁気共鳴スペクトルを図４に、そして質
量スペクトルを図５に示す。
【００４４】
【実施例】以下、実施例により本発明をさらに詳しく説
明するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるも
のではない。
明するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるも
のではない。
【００４５】実施例１．神奈川県緑区の土壌を１ｇを滅
菌生理食塩水５mLに懸濁し、上清を１００倍希釈し肉汁
平板寒天培地に塗末し３０℃で３日間培養した。オレン
ジ色の集落を選択した。上記の方法によりＥ−３９６株
（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を取得することができ
た。この菌株は、前記の菌学的性質を有する。前記の性
質からＥ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）は全
く新規な属に属する細菌であることが確認された。
菌生理食塩水５mLに懸濁し、上清を１００倍希釈し肉汁
平板寒天培地に塗末し３０℃で３日間培養した。オレン
ジ色の集落を選択した。上記の方法によりＥ−３９６株
（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を取得することができ
た。この菌株は、前記の菌学的性質を有する。前記の性
質からＥ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）は全
く新規な属に属する細菌であることが確認された。
【００４６】実施例２．神奈川県緑区の土壌を１ｇを滅
菌生理食塩水５mLに懸濁し、上清を１００倍希釈し肉汁
平板寒天培地に塗末し３０℃で５日間培養した。オレン
ジ色の集落を選択した。上記の方法によりＡ−５８１−
１（ＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１）を取得することができ
た。この菌株は、前記の菌学的性質を有する。前記の結
果からＡ−５８１−１株はＥ−３９６株と同様の性質を
具備することおよびＥ−３９６株とのＤＮＡ−ＤＮＡ相
同性が高いことからＥ−３９６株と同一の新規な属に属
する細菌であると判断された。以下、参考例により本発
明の細菌の用途を説明する。
菌生理食塩水５mLに懸濁し、上清を１００倍希釈し肉汁
平板寒天培地に塗末し３０℃で５日間培養した。オレン
ジ色の集落を選択した。上記の方法によりＡ−５８１−
１（ＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１）を取得することができ
た。この菌株は、前記の菌学的性質を有する。前記の結
果からＡ−５８１−１株はＥ−３９６株と同様の性質を
具備することおよびＥ−３９６株とのＤＮＡ−ＤＮＡ相
同性が高いことからＥ−３９６株と同一の新規な属に属
する細菌であると判断された。以下、参考例により本発
明の細菌の用途を説明する。
【００４７】参考例１．グルコース２ｇ／Ｌ、肉エキス
３ｇ／Ｌ、ペプトン１０ｇ／Ｌ、塩化ナトリウム５ｇ／
Ｌの組成からなる培地１０mLを直径１８mmの試験管に入
れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これにＥ−３９６
株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白金耳植菌し３０
℃で６日間、３００rpm の往復振とう培養を行った。こ
の培養液１００本分（１Ｌ）を遠心分離し得た菌体をア
セトン５００mLで抽出した後、ヘキサン５００mLおよび
０．８５％食塩水５００mLを加え攪拌し、上層を分取し
た後、溶剤を３５℃、減圧下で留去した。
３ｇ／Ｌ、ペプトン１０ｇ／Ｌ、塩化ナトリウム５ｇ／
Ｌの組成からなる培地１０mLを直径１８mmの試験管に入
れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これにＥ−３９６
株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白金耳植菌し３０
℃で６日間、３００rpm の往復振とう培養を行った。こ
の培養液１００本分（１Ｌ）を遠心分離し得た菌体をア
セトン５００mLで抽出した後、ヘキサン５００mLおよび
０．８５％食塩水５００mLを加え攪拌し、上層を分取し
た後、溶剤を３５℃、減圧下で留去した。
【００４８】得られた色素抽出物をシリカゲルのカラム
に吸着させ、ベンゼン：酢酸エチル：メタノール（１
５：４：１）の溶剤でアスタキサンチン画分を溶出させ
溶剤を減圧下で留去した。抽出物を少量のピリジンに溶
解し水を滴下してアスタキサンチンを結晶化させ、アス
タキサンチンの結晶１．２mgを得た。このようにして得
られたアスタキサンチンは赤外吸収スペクトル、質量分
析、13Ｃ核磁気共鳴スペクトル、吸収スペクトルにおい
て公知のものと一致した。参考例２． 表１６の組成からなる培地１０mLを直径１８
mmの試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。
に吸着させ、ベンゼン：酢酸エチル：メタノール（１
５：４：１）の溶剤でアスタキサンチン画分を溶出させ
溶剤を減圧下で留去した。抽出物を少量のピリジンに溶
解し水を滴下してアスタキサンチンを結晶化させ、アス
タキサンチンの結晶１．２mgを得た。このようにして得
られたアスタキサンチンは赤外吸収スペクトル、質量分
析、13Ｃ核磁気共鳴スペクトル、吸収スペクトルにおい
て公知のものと一致した。参考例２． 表１６の組成からなる培地１０mLを直径１８
mmの試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。
【００４９】
【表１６】
【００５０】これにＥ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４
２８３）を１白金耳植菌し３０℃で２日間、３００rpm
の往復振とう培養を行った。この培養液１０mLを上と同
組成の培地が１００mL入った５００mL容量の坂口フラス
コに植菌し３０℃、２日間、１００rpm の往復振とう培
養を行った。次にこの培養液１００mLを上と同組成の培
地が３．０Ｌ入った５．０Ｌ容量の発酵槽に植菌し３０
℃，５００rpm ，１．０vvm の好気培養を５２時間行っ
た。
２８３）を１白金耳植菌し３０℃で２日間、３００rpm
の往復振とう培養を行った。この培養液１０mLを上と同
組成の培地が１００mL入った５００mL容量の坂口フラス
コに植菌し３０℃、２日間、１００rpm の往復振とう培
養を行った。次にこの培養液１００mLを上と同組成の培
地が３．０Ｌ入った５．０Ｌ容量の発酵槽に植菌し３０
℃，５００rpm ，１．０vvm の好気培養を５２時間行っ
た。
【００５１】次にこの培養液３Ｌを上と同組成（ただし
酵母エキス１０ｇ／Ｌ、シュークロース２０ｇ／Ｌ、Ｎ
Ｈ4 ＮＯ3 ２．５ｇ／Ｌ）の培地が３５Ｌ入った５０
Ｌ容量の発酵槽に植菌し３０℃，２５０rpm ，１．０vv
m の好気培養を１８時間行った。得られた培養液３３Ｌ
を遠心分離し湿菌体７９０ｇを得、これをメタノール
１．３Ｌで洗浄し０．８Ｌのクロロホルムで３回抽出し
た。色素抽出物からのアスタキサンチンの精製は参考例
１と同様の方法により行い、アスタキサンチンの結晶１
０mgを得た。
酵母エキス１０ｇ／Ｌ、シュークロース２０ｇ／Ｌ、Ｎ
Ｈ4 ＮＯ3 ２．５ｇ／Ｌ）の培地が３５Ｌ入った５０
Ｌ容量の発酵槽に植菌し３０℃，２５０rpm ，１．０vv
m の好気培養を１８時間行った。得られた培養液３３Ｌ
を遠心分離し湿菌体７９０ｇを得、これをメタノール
１．３Ｌで洗浄し０．８Ｌのクロロホルムで３回抽出し
た。色素抽出物からのアスタキサンチンの精製は参考例
１と同様の方法により行い、アスタキサンチンの結晶１
０mgを得た。
【００５２】このようにして得られたアスタキサンチン
は赤外吸収スペクトル、質量分析、 13Ｃ核磁気共鳴スペ
クトル、吸収スペクトルにおいて公知のものと一致し
た。さらに得られたアスタキサンチンの絶対配置を公知
の方法(J.High Resolut.Chromatogr.Chromatogr Commu
n., 2, 195, 1979)により決定し（３Ｓ，３′Ｓ）−ア
スタキサンチンが１００％でありａｌｌ−ｔｒａｎｓ体
とｃｉｓ体との比は９５：５であることが確認された。
比較のために他の製法により製造したアスタキサンチン
の分析結果を次の表１７に示す。
は赤外吸収スペクトル、質量分析、 13Ｃ核磁気共鳴スペ
クトル、吸収スペクトルにおいて公知のものと一致し
た。さらに得られたアスタキサンチンの絶対配置を公知
の方法(J.High Resolut.Chromatogr.Chromatogr Commu
n., 2, 195, 1979)により決定し（３Ｓ，３′Ｓ）−ア
スタキサンチンが１００％でありａｌｌ−ｔｒａｎｓ体
とｃｉｓ体との比は９５：５であることが確認された。
比較のために他の製法により製造したアスタキサンチン
の分析結果を次の表１７に示す。
【００５３】
【表１７】
【００５４】参考例３．表１６の組成からなる培地（た
だしシュークロース３０ｇ／Ｌ）１０mLを直径１８mmの
試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これに
Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白金耳
植菌し２５℃で５日間、３００rpm の往復振とう培養を
行った。この培養液の遠心分離によって得た菌体１０mL
分をアセトン１０mLで抽出した後、ヘキサン１０mLおよ
び０．８５％食塩水１０mLを加え攪拌し、上層を分取し
た後溶剤を３５℃、減圧下で留去した。
だしシュークロース３０ｇ／Ｌ）１０mLを直径１８mmの
試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これに
Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白金耳
植菌し２５℃で５日間、３００rpm の往復振とう培養を
行った。この培養液の遠心分離によって得た菌体１０mL
分をアセトン１０mLで抽出した後、ヘキサン１０mLおよ
び０．８５％食塩水１０mLを加え攪拌し、上層を分取し
た後溶剤を３５℃、減圧下で留去した。
【００５５】得られた色素抽出物のカロチノイド量を高
速液体クロマトグラフィーにより分析したところ表１８
のようになった。分析条件は、カラムにＷａｋｏｓｉｌ
５ＳＩＬ−１２０（和光純薬工業株式会社製）４．６
mmI.D.×２５０mmを二連結して用い、移動相はヘキサ
ン：ジクロロメタン：メタノール（１０：８：１）を用
いた。カロチノイドの検出は４７０nmにおける吸収で行
い、定量は試料と標準物質のアスタキサンチンとの高速
液体クロマトグラフィーにおけるピーク面積比から算出
した。さらに得られたアスタキサンチンの絶対配置を参
考例２に示した方法で決定し（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタ
キサンチンが１００％でありａｌｌ−ｔｒａｎｓ体とｃ
ｉｓ体との比は９５：５であることが確認された。
速液体クロマトグラフィーにより分析したところ表１８
のようになった。分析条件は、カラムにＷａｋｏｓｉｌ
５ＳＩＬ−１２０（和光純薬工業株式会社製）４．６
mmI.D.×２５０mmを二連結して用い、移動相はヘキサ
ン：ジクロロメタン：メタノール（１０：８：１）を用
いた。カロチノイドの検出は４７０nmにおける吸収で行
い、定量は試料と標準物質のアスタキサンチンとの高速
液体クロマトグラフィーにおけるピーク面積比から算出
した。さらに得られたアスタキサンチンの絶対配置を参
考例２に示した方法で決定し（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタ
キサンチンが１００％でありａｌｌ−ｔｒａｎｓ体とｃ
ｉｓ体との比は９５：５であることが確認された。
【００５６】
【表１８】
【００５７】参考例４．表１６の組成からなる培地（た
だしシュークロース３０ｇ／Ｌ）１０mLを直径１８mmの
試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これに
Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白金耳
植菌し２５℃で２日間３００rpm の往復振とう培養を行
った。この培養液を上と同組成の培地が２５〜２００mL
入った５００mL容量の三角フラスコに１容量％になるよ
うに植菌し２５℃、５日間１２０rpm の回転振とう培養
を行った。培養液からのカロチノイドの抽出および分析
は参考例３の方法により行ったところアスタキサンチ
ン、アドニキサンチンおよび総カロチノイド量は表１９
のようになった。
だしシュークロース３０ｇ／Ｌ）１０mLを直径１８mmの
試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これに
Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白金耳
植菌し２５℃で２日間３００rpm の往復振とう培養を行
った。この培養液を上と同組成の培地が２５〜２００mL
入った５００mL容量の三角フラスコに１容量％になるよ
うに植菌し２５℃、５日間１２０rpm の回転振とう培養
を行った。培養液からのカロチノイドの抽出および分析
は参考例３の方法により行ったところアスタキサンチ
ン、アドニキサンチンおよび総カロチノイド量は表１９
のようになった。
【００５８】
【表１９】
【００５９】参考例５．参考例２で得られた色素抽出物
をシリカゲルのカラムに吸着させ、ベンゼン：酢酸エチ
ル：メタノール（１５：４：１）の溶剤でアドニキサン
チン画分を溶出させ溶剤を減圧下で留去した。抽出物を
エタノールに５０℃で溶解し４℃で１日間放置すること
により結晶化させ、アドニキサンチンの結晶１９０mgを
得た。このようにして得られたアドニキサンチンは赤外
吸収スペクトル、質量分析、13Ｃ核磁気共鳴スペクト
ル、吸収スペクトルにおいて公知のものと一致した。
をシリカゲルのカラムに吸着させ、ベンゼン：酢酸エチ
ル：メタノール（１５：４：１）の溶剤でアドニキサン
チン画分を溶出させ溶剤を減圧下で留去した。抽出物を
エタノールに５０℃で溶解し４℃で１日間放置すること
により結晶化させ、アドニキサンチンの結晶１９０mgを
得た。このようにして得られたアドニキサンチンは赤外
吸収スペクトル、質量分析、13Ｃ核磁気共鳴スペクト
ル、吸収スペクトルにおいて公知のものと一致した。
【００６０】参考例６．表１６の組成からなる培地（た
だしシュークロース３０ｇ／Ｌ）１０mLを直径１８mmの
試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これに
Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白金耳
植菌し２８℃で５日間振とう培養した。この培養液から
参考例３の方法によりカロチノイドを抽出し、高速液体
クロマトグラフィーにより分析したところ、ピークの溶
出時間、及び各ピークの溶離剤と同じ溶剤中での極大吸
収波長は、表２０に示す通りであった。なお、この場合
の溶出のプロフィールを図６に示す。
だしシュークロース３０ｇ／Ｌ）１０mLを直径１８mmの
試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これに
Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白金耳
植菌し２８℃で５日間振とう培養した。この培養液から
参考例３の方法によりカロチノイドを抽出し、高速液体
クロマトグラフィーにより分析したところ、ピークの溶
出時間、及び各ピークの溶離剤と同じ溶剤中での極大吸
収波長は、表２０に示す通りであった。なお、この場合
の溶出のプロフィールを図６に示す。
【００６１】
【表２０】
【００６２】β−カロテン及びカンタキサンチンについ
ては標準物質を用い、それらの前記と同一条件での溶出
時間及び極大吸収波長を測定したところ、これらの測定
値はピークNo. １及びピークNo. ３の測定値とよく一致
し、ピークNo. １はβ−カロテンを示し、そしてピーク
No. ３はカンタキサンチンを示すものと同定された。ま
た、エキネノン及びゼアキサンチンについては、前記の
結果と文献〔Davies B.H.1976, Carotenoids, 38-165,
In T.W.Goodwin(ed.), Chemistry and Biochemistry of
Plant Pigments, Vol.2, Academic Press, Inc.(Londo
n), Ltd., London. 〕記載の極大吸収とを比較したとこ
ろ、ピークNo. ２はエキネノンを示し、そしてピークN
o. ４はゼアキサンチンを示すものと同定された。
ては標準物質を用い、それらの前記と同一条件での溶出
時間及び極大吸収波長を測定したところ、これらの測定
値はピークNo. １及びピークNo. ３の測定値とよく一致
し、ピークNo. １はβ−カロテンを示し、そしてピーク
No. ３はカンタキサンチンを示すものと同定された。ま
た、エキネノン及びゼアキサンチンについては、前記の
結果と文献〔Davies B.H.1976, Carotenoids, 38-165,
In T.W.Goodwin(ed.), Chemistry and Biochemistry of
Plant Pigments, Vol.2, Academic Press, Inc.(Londo
n), Ltd., London. 〕記載の極大吸収とを比較したとこ
ろ、ピークNo. ２はエキネノンを示し、そしてピークN
o. ４はゼアキサンチンを示すものと同定された。
【００６３】参考例７．ブレインハートインフュジョン
ブイヨン培地（栄研化学株式会社製、ただしＮａ2 ＣＯ
3 でpHを１０に調整）１０mLを直径１８mmの試験管に入
れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これにＡ−５８１
−１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１）を１白金耳植菌し
３３℃で４日間振とう培養した。この培養液から参考例
３の方法によりカロチノイドを抽出し、高速液体クロマ
トグラフィーにより定量分析したところ表２１のように
なった。
ブイヨン培地（栄研化学株式会社製、ただしＮａ2 ＣＯ
3 でpHを１０に調整）１０mLを直径１８mmの試験管に入
れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これにＡ−５８１
−１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１）を１白金耳植菌し
３３℃で４日間振とう培養した。この培養液から参考例
３の方法によりカロチノイドを抽出し、高速液体クロマ
トグラフィーにより定量分析したところ表２１のように
なった。
【００６４】
【表２１】
さらに得られたアスタキサンチンの絶体配置を参考例２
に示した方法で決定し（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサン
チンが１００％でありａｌｌ−ｔｒａｎｓ体とｃｉｓ体
の比は９５：５であることが確認された（表２２）。
に示した方法で決定し（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサン
チンが１００％でありａｌｌ−ｔｒａｎｓ体とｃｉｓ体
の比は９５：５であることが確認された（表２２）。
【００６５】
【表２２】
参考例８．表２３の組成からなる培地１０mLを直径１８
mmの試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。
mmの試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。
【００６６】
【表２３】
これにＡ−５８１−１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１）
を１白金耳植菌し２８℃で４日間振とう培養した。この
培養液から参考例３の方法によりカロチノイドを抽出
し、高速液体クロマトグラフィーにより定量分析したと
ころ表２４のようになった。
を１白金耳植菌し２８℃で４日間振とう培養した。この
培養液から参考例３の方法によりカロチノイドを抽出
し、高速液体クロマトグラフィーにより定量分析したと
ころ表２４のようになった。
【００６７】
【表２４】
【００６８】
配列番号：１
配列の長さ：１４５２
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
配列の種類：ｒＲＮＡをコードするＤＮＡ
AGTTTGATCC TGGCTCAGAA CGAACGCTGG CGGCAGGCTT AACACATGCA 50
AGTCGAGCGA GACCTTCGGG TCTAGCGGCG GACGGGTGAG TAACGCGTGG 100
GAACGTGCCC TTCTCTACGG AATAGCCCCG GGAAACTGGG AGTAATACCG 150
TATACGCCCT TTGGGGGAAA GATTTATCGG AGAAGGATCG GCCCGCGTTG 200
GATTAGGTAG TTGGTGGGGT AATGGCCCAC CAAGCCGACG ATCCATAGCT 250
GGTTTGAGAG GATGATCAGC CACACTGGGA CTGAGACACG GCCCAGACTC 300
CTACGGGAGG CAGCAGTGGG GAATCTTAGA CAATGGGGGC AACCCTGATC 350
TAGCCATGCC GCGTGAGTGA TGAAGGCCTT AGGGTTGTAA AGCTCTTTCA 400
GCTGGGAAGA TAATGACGGT ACCAGCAGAA GAAGCCCCGG CTAACTCCGT 450
GCCAGCAGCC GCGGTAATAC GGAGGGGGCT AGCGTTGTTC GGAATTACTG 500
GGCGTAAAGC GCACGTAGGC GGACTGGAAA GTCAGAGGTG AAATCCCAGG 550
GCTCAACCTT GGAACTGCCT TTGAAACTAT CAGTCTGGAG TTCGAGAGAG 600
GTGAGTGGAA TTCCGAGTGT AGAGGTGAAA TTCGTAGATA TTCGGAGGAA 650
CACCAGTGGC GAAGGCGGCT CACTGGCTCG ATACTGACGC TGAGGTGCGA 700
AAGCGTGGGG AGCAAACAGG ATTAGATACC CTGGTAGTCC ACGCCGTAAA 750
CGATGAATGC CAGACGTCGG CAAGCATGCT TGTCGGTGTC ACACCTAACG 800
GATTAAGCAT TCCGCCTGGG GAGTACGGTC GCAAGATTAA AACTCAAAGG 850
AATTGACGGG GGCCCGCACA AGCGGTGGAG CATGTGGTTT AATTCGAAGC 900
AACGCGCAGA ACCTTACCAA CCCTTGACAT GGCAGGACCG CTGGAGAGAT 950
TCAGCTTTCT CGTAAGAGAC CTGCACACAG GTGCTGCATG GCTGTCGTCA 1000
GCTCGTGTCG TGAGATGTTC GGTTAAGTCC GGCAACGAGC GCAACCCACG 1050
TCCCTAGTTG CCAGCAATTC AGTTGGGAAC TCTATGGAAA CTGCCGATGA 1100
TAAGTCGGAG GAAGGTGTGG ATGACGTCAA GTCCTCATGG GCCTTACGGG 1150
TTGGGCTACA CACGTGCTAC AATGGTGGTG ACAGTGGGTT AATCCCCAAA 1200
AGCCATCTCA GTTCGGATTG TCCTCTGCAA CTCGAGGGCA TGAAGTTGGA 1250
ATCGCTAGTA ATCGCGGAAC AGCATGCCGC GGTGAATACG TTCCCGGGCC 1300
TTGTACACAC CGCCCGTCAC ACCATGGGAG TTGGTTCTAC CCGACGACGN 1350
TGCGCTAACC TTCGGGGGGC AGGCGGCCAC GGTAGGATCA GCGACTGGGG 1400
TGAAGTCGTA ACAAGGTAGC CGTAGGGGAA CCTGCGGCTG GATCACCTCC 1450
TT 1452
【図１】図１は、Ｅ−３９６株と近縁種の系統樹を示す
図である。
図である。
【図２】図２は、本発明の方法により製造したアスタキ
サンチンの13Ｃ核磁気共鳴スペクトルを示す図である。
サンチンの13Ｃ核磁気共鳴スペクトルを示す図である。
【図３】図３は、本発明の方法により製造したアスタキ
サンチンの質量スペクトルを示す図である。
サンチンの質量スペクトルを示す図である。
【図４】図４は、本発明の方法により製造したアドニキ
サンチンの13Ｃ核磁気共鳴スペクトルを示す図である。
サンチンの13Ｃ核磁気共鳴スペクトルを示す図である。
【図５】図５は、本発明の方法により製造したアドニキ
サンチンの質量スペクトルを示す図である。
サンチンの質量スペクトルを示す図である。
【図６】図６は、本発明のカロチノイド色素の高速液体
クロマトグラフィーにおける溶出の様子を示す図であ
る。
クロマトグラフィーにおける溶出の様子を示す図であ
る。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(72)発明者 高木 幹弘
神奈川県横浜市中区千鳥町８番地 日本
石油株式会社 中央技術研究所内
(72)発明者 清田 隆
神奈川県横浜市中区千鳥町８番地 日本
石油株式会社 中央技術研究所内
(56)参考文献 特開 平６−105679（ＪＰ，Ａ)
特表 平５−508532（ＪＰ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
C12N 1/00 - 1/38
Claims (4)
- 【請求項１】 次の性質： 【表１】 を具備し、カロチノイド色素を生産することができる細
菌。 - 【請求項２】 １６ＳリボゾームＲＮＡをコードする、
配列番号：１に記載の塩基配列を有するＤＮＡを含み、
且つカロチノイド色素を生産することができる細菌。 - 【請求項３】 アスタキサンチン、アドニキサンチン、
β−カロチン、エキネノン、カンタキサンチン及びゼア
キサンチンから成る群から選択された少なくともいずれ
か１種のカロチノイド色素を生産することができる、請
求項１又は２に記載の細菌。 - 【請求項４】 生命工学工業技術研究所にＦＥＲＭ Ｂ
Ｐ−４２８３として寄託されたＥ−３９６株または同研
究所にＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１として寄託されたＡ−
５８１−１株である細菌。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15207894A JP3429563B2 (ja) | 1994-07-04 | 1994-07-04 | 新規微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15207894A JP3429563B2 (ja) | 1994-07-04 | 1994-07-04 | 新規微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH089964A JPH089964A (ja) | 1996-01-16 |
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Family
ID=15532577
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15207894A Expired - Lifetime JP3429563B2 (ja) | 1994-07-04 | 1994-07-04 | 新規微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3429563B2 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4463347B2 (ja) * | 1999-09-30 | 2010-05-19 | 新日本石油株式会社 | 飼料添加用色素含有物 |
| JP4427167B2 (ja) | 2000-06-12 | 2010-03-03 | 新日本石油株式会社 | カロテノイド色素の製法 |
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1994
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