JP3350794B2 - 改変したダニ主要アレルゲン - Google Patents
改変したダニ主要アレルゲンInfo
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、遺伝子工学によるヒョ
ウヒダニの主要アレルゲン（Der f II）を改変した改変
アレルゲンに関するものであり、この改変アレルゲン
は、アレルギー疾患の治療薬として応用できる。
ウヒダニの主要アレルゲン（Der f II）を改変した改変
アレルゲンに関するものであり、この改変アレルゲン
は、アレルギー疾患の治療薬として応用できる。
【０００２】
【従来の技術】アレルギー疾患の多くは、その疾患の原
因抗原に感作されることにより、血清及び組織でアレル
ゲンに特異的なＩｇＥ抗体が産生され、再びその抗原に
暴露されることにより、各組織上で抗原とＩｇＥ抗体が
抗原抗体反応を起こし、その際に生じる種々の症状によ
るものと考えられている。特に、肥満細胞上のＩｇＥ抗
体に抗原が結合しＩｇＥ抗体間に架橋が起こることによ
って肥満細胞から種々の化学伝達物質が放出されて即時
型あるいは遅発型反応が生じることに起因すると考えら
れている。
因抗原に感作されることにより、血清及び組織でアレル
ゲンに特異的なＩｇＥ抗体が産生され、再びその抗原に
暴露されることにより、各組織上で抗原とＩｇＥ抗体が
抗原抗体反応を起こし、その際に生じる種々の症状によ
るものと考えられている。特に、肥満細胞上のＩｇＥ抗
体に抗原が結合しＩｇＥ抗体間に架橋が起こることによ
って肥満細胞から種々の化学伝達物質が放出されて即時
型あるいは遅発型反応が生じることに起因すると考えら
れている。
【０００３】このアレルギー疾患を治療する方法とし
て、抗原がＩｇＥ抗体に結合することを抑制する方法が
考えられている。抗原がＩｇＥ抗体に結合することを抑
制すれば、肥満細胞上のＩｇＥ抗体間の架橋が起こらな
いため化学物質の放出が抑制されて治療効果が得られる
ものと考えられている。一方、気管支喘息、小児喘息、
アトピー性皮膚炎などのアレルギー疾患は、室内塵中に
生息しているダニに対するアレルギーが主な原因である
ことが明らかになっており、既にいくつかのダニ主要ア
レルゲン蛋白質が同定されている（プラッツミルズ（Pl
atts-Mills）ら、ザ・ジャーナル・オブ・アレルギー・
アンド・クリニカル・イムノロジー（J. Allergy Clin.
Immunol.、80巻、755頁、1987年）。また、精製ダニ主
要アレルゲンを多量に調製する方法も既に開示されてい
る（結城ら、アレルギー（Japanese J. Allergolog
y）、39巻、557頁、1990年及び特願平３−２５４６８
３）。さらに、前述の精製ダニ主要アレルゲンの一部を
改変したアレルゲンおよび製造方法も出願されている
（特願平５−１３９７９３）。
て、抗原がＩｇＥ抗体に結合することを抑制する方法が
考えられている。抗原がＩｇＥ抗体に結合することを抑
制すれば、肥満細胞上のＩｇＥ抗体間の架橋が起こらな
いため化学物質の放出が抑制されて治療効果が得られる
ものと考えられている。一方、気管支喘息、小児喘息、
アトピー性皮膚炎などのアレルギー疾患は、室内塵中に
生息しているダニに対するアレルギーが主な原因である
ことが明らかになっており、既にいくつかのダニ主要ア
レルゲン蛋白質が同定されている（プラッツミルズ（Pl
atts-Mills）ら、ザ・ジャーナル・オブ・アレルギー・
アンド・クリニカル・イムノロジー（J. Allergy Clin.
Immunol.、80巻、755頁、1987年）。また、精製ダニ主
要アレルゲンを多量に調製する方法も既に開示されてい
る（結城ら、アレルギー（Japanese J. Allergolog
y）、39巻、557頁、1990年及び特願平３−２５４６８
３）。さらに、前述の精製ダニ主要アレルゲンの一部を
改変したアレルゲンおよび製造方法も出願されている
（特願平５−１３９７９３）。
【０００４】しかしながら、これまで報告されている同
定されたダニ主要アレルゲンタンパク質あるいは精製ダ
ニ主要アレルゲンにおいては、アレルゲンとしての活性
が高いため減感作療法を行った場合にアレルギー反応で
あるアナフィラキシーショックを起こすケースがあっ
た。一方、ＩｇＥ抗体との結合活性もしくはアレルゲン
活性が低下し、かつ抗原（Der f II）とＩｇＥ抗体の結
合を阻害する改変ダニ主要アレルゲンが得られれば抗原
投与によるアレルギー反応のアナフィラキシーショック
が生じることがなく、かつ抗原に特異的であるために他
の免疫系に影響を及ぼさないなどの特徴を有しているた
めアレルギー治療上極めて有効な方法であると考えられ
ている。改変ダニ主要アレルゲンとしてはすでに特願平
５−１３９７９３があるが、このアレルゲンは改変した
アミノ酸残基によって立体構造が大幅に変わってしまっ
たため免疫原性の維持の点で問題が残っており、ＩｇＥ
抗体との結合活性もしくはアレルゲン活性を大幅に低下
させ、かつ免疫原性を維持した改変ダニ主要アレルゲン
を調製することは課題であった。
定されたダニ主要アレルゲンタンパク質あるいは精製ダ
ニ主要アレルゲンにおいては、アレルゲンとしての活性
が高いため減感作療法を行った場合にアレルギー反応で
あるアナフィラキシーショックを起こすケースがあっ
た。一方、ＩｇＥ抗体との結合活性もしくはアレルゲン
活性が低下し、かつ抗原（Der f II）とＩｇＥ抗体の結
合を阻害する改変ダニ主要アレルゲンが得られれば抗原
投与によるアレルギー反応のアナフィラキシーショック
が生じることがなく、かつ抗原に特異的であるために他
の免疫系に影響を及ぼさないなどの特徴を有しているた
めアレルギー治療上極めて有効な方法であると考えられ
ている。改変ダニ主要アレルゲンとしてはすでに特願平
５−１３９７９３があるが、このアレルゲンは改変した
アミノ酸残基によって立体構造が大幅に変わってしまっ
たため免疫原性の維持の点で問題が残っており、ＩｇＥ
抗体との結合活性もしくはアレルゲン活性を大幅に低下
させ、かつ免疫原性を維持した改変ダニ主要アレルゲン
を調製することは課題であった。
【０００５】
【本発明が解決しようとする課題】本発明者らは、既に
開示されているダニ主要アレルゲンDer f IIの特定の１
つのアミノ酸残基をアラニン残基に置換することによ
り、ＩｇＥ抗体結合活性を変化させうることを見いだし
た。また、その改変ダニ主要アレルゲンの中には、抗原
（Der f II）がＩｇＥ抗体に結合することを阻害する活
性が野生型Der f IIとほとんど差異がないものがあるこ
とを見いだしたのである。
開示されているダニ主要アレルゲンDer f IIの特定の１
つのアミノ酸残基をアラニン残基に置換することによ
り、ＩｇＥ抗体結合活性を変化させうることを見いだし
た。また、その改変ダニ主要アレルゲンの中には、抗原
（Der f II）がＩｇＥ抗体に結合することを阻害する活
性が野生型Der f IIとほとんど差異がないものがあるこ
とを見いだしたのである。
【０００６】それ故、本発明の目的は、遺伝子工学を用
いてダニ主要アレルゲンDer f IIの１以上のアミノ酸残
基を他のアミノ酸残基に置換した改変ダニ主要アレルゲ
ン、すなわち、ダニアレルゲンに起因するアレルギー疾
患の治療薬に応用できる物質を製造することを目的とす
る。
いてダニ主要アレルゲンDer f IIの１以上のアミノ酸残
基を他のアミノ酸残基に置換した改変ダニ主要アレルゲ
ン、すなわち、ダニアレルゲンに起因するアレルギー疾
患の治療薬に応用できる物質を製造することを目的とす
る。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明は、配列番号１
(１−ａ(Clone 11))または配列番号２(１−ｂ(Clone
１ ))または配列番号３(１−ｃ(Clone ２))のいずれか１
つの配列で示されるダニ主要アレルゲンDer f IIのＮ末
端から４番目、６番目、７番目、１０番目、１１番目、
１２番目、１２８番目または１２９番目のアミノ酸のい
ずれか１つをアラニンに置換したことを特徴とするポリ
ペプチドである。
(１−ａ(Clone 11))または配列番号２(１−ｂ(Clone
１ ))または配列番号３(１−ｃ(Clone ２))のいずれか１
つの配列で示されるダニ主要アレルゲンDer f IIのＮ末
端から４番目、６番目、７番目、１０番目、１１番目、
１２番目、１２８番目または１２９番目のアミノ酸のい
ずれか１つをアラニンに置換したことを特徴とするポリ
ペプチドである。
【０００８】ダニ主要アレルゲンDer f IIは、6個のシ
ステイン残基を有しジスルフィド結合によって分子内架
橋を3箇所所有すること（アミノ酸残基8番目と119番
目、21番目と27番目、73番目と78番目）が既に開示され
ている（西山ら、インターナショナル アーカイブス
オブ アレルギー アンド イムノロジー（ Internati
onal Archives of Allergy and Immunology），101巻，
159頁，1993年）。また、遺伝子工学的手法を用いて分
子内のジスルフィド結合の数を３箇所から２箇所に減ら
した置換体の解析、すなわち Der f IIの６箇所のシス
テイン残基のうち、ジスルフィド結合を形成している２
箇所のシステイン残基をそれぞれセリン残基に置換した
３種類（８番目と１１９番目（Ｃ８／１１９Ｓ）、２１
番目と２７番目（Ｃ２１／２７Ｓ）、７３番目と７８番
目（Ｃ７３／７８Ｓ））の改変体の解析の結果、８番目
と１１９番目のジスルフィド結合がDer f IIのＩｇＥ抗
体結合活性に大きく影響することも既に開示されている
（高井ら、日本農芸化学会1993年度大会要旨集、48頁、
1993年）。このことから、本発明者らはDer f IIのアミ
ノ酸残基を順次、他のアミノ酸残基に置換することでＩ
ｇＥ抗体結合に大きく影響するアミノ酸残基を特定でき
ると考え本研究に着手した。ダニ主要アレルゲンDer f
IIをコードする遺伝子及びその調製法は、既に結城らに
より開示されている（アレルギー（Japanese J. Allerg
ology）39巻、 557頁、1990年）。この遺伝子を遺伝子
工学的手法によって改変し、１番目のアスパラギン酸残
基から順次、システイン残基を除く他のアミノ酸残基に
置換した。これによって、特定のアミノ酸残基のみ他の
アミノ酸残基に置換された改変Der f IIが調製でき、そ
れらのなかからＩｇＥ抗体との結合活性の低下したも
の、また抗原（Der f II）がＩｇＥ抗体に結合すること
を抑制するものを選択し本発明を完成した。
ステイン残基を有しジスルフィド結合によって分子内架
橋を3箇所所有すること（アミノ酸残基8番目と119番
目、21番目と27番目、73番目と78番目）が既に開示され
ている（西山ら、インターナショナル アーカイブス
オブ アレルギー アンド イムノロジー（ Internati
onal Archives of Allergy and Immunology），101巻，
159頁，1993年）。また、遺伝子工学的手法を用いて分
子内のジスルフィド結合の数を３箇所から２箇所に減ら
した置換体の解析、すなわち Der f IIの６箇所のシス
テイン残基のうち、ジスルフィド結合を形成している２
箇所のシステイン残基をそれぞれセリン残基に置換した
３種類（８番目と１１９番目（Ｃ８／１１９Ｓ）、２１
番目と２７番目（Ｃ２１／２７Ｓ）、７３番目と７８番
目（Ｃ７３／７８Ｓ））の改変体の解析の結果、８番目
と１１９番目のジスルフィド結合がDer f IIのＩｇＥ抗
体結合活性に大きく影響することも既に開示されている
（高井ら、日本農芸化学会1993年度大会要旨集、48頁、
1993年）。このことから、本発明者らはDer f IIのアミ
ノ酸残基を順次、他のアミノ酸残基に置換することでＩ
ｇＥ抗体結合に大きく影響するアミノ酸残基を特定でき
ると考え本研究に着手した。ダニ主要アレルゲンDer f
IIをコードする遺伝子及びその調製法は、既に結城らに
より開示されている（アレルギー（Japanese J. Allerg
ology）39巻、 557頁、1990年）。この遺伝子を遺伝子
工学的手法によって改変し、１番目のアスパラギン酸残
基から順次、システイン残基を除く他のアミノ酸残基に
置換した。これによって、特定のアミノ酸残基のみ他の
アミノ酸残基に置換された改変Der f IIが調製でき、そ
れらのなかからＩｇＥ抗体との結合活性の低下したも
の、また抗原（Der f II）がＩｇＥ抗体に結合すること
を抑制するものを選択し本発明を完成した。
【０００９】本発明の置換体は合目的的な任意の方法で
製造することができるが、部位特異的変異の方法が望ま
しい。部位特異的変異をおこなう手法は既に確立されて
おりさまざまな方法があるがＰＣＲ法を用いるのが簡便
である（伊藤ら、ジーン（gene）102 巻、67頁、1991
年）。ダニ主要アレルゲンＤｅｒ ｆ IIをコードする遺
伝子には、配列表の配列番号１（１−ａ(Clone 11))、
配列番号２(１−ｂ(Clone１))および配列番号３(１−ｃ
(Clone ２))の３種のクローンがあることが知られてい
る。例えば配列表の配列番号１(１−ａ(Clone 11))に示
したＤＮＡ鎖より１番目のアスパラギン酸残基をアラニ
ン残基に置換する方法を一例として示すと次の通りであ
る。配列表１から１番目のアスパラギン酸残基に対応す
るコドンは GATである。このコドンをアラニン残基に対
応するコドン、例えば GCTに置き換えかえることとし
た。そのためにアスパラギン酸残基周辺のＤＮＡ配列と
同一でかつ、アスパラギン酸残基のコドン（GAT）のみ
アラニン残基のコドン（GCT）に置換したオリゴヌクレ
オチドを合成した（表１ F-D1A）。この合成は、既知の
合成法によって合成することができるが、自動合成機を
用いることが便利である（例えば model381A DNA Synt
hesizer; Applied Biosystems社製）。
製造することができるが、部位特異的変異の方法が望ま
しい。部位特異的変異をおこなう手法は既に確立されて
おりさまざまな方法があるがＰＣＲ法を用いるのが簡便
である（伊藤ら、ジーン（gene）102 巻、67頁、1991
年）。ダニ主要アレルゲンＤｅｒ ｆ IIをコードする遺
伝子には、配列表の配列番号１（１−ａ(Clone 11))、
配列番号２(１−ｂ(Clone１))および配列番号３(１−ｃ
(Clone ２))の３種のクローンがあることが知られてい
る。例えば配列表の配列番号１(１−ａ(Clone 11))に示
したＤＮＡ鎖より１番目のアスパラギン酸残基をアラニ
ン残基に置換する方法を一例として示すと次の通りであ
る。配列表１から１番目のアスパラギン酸残基に対応す
るコドンは GATである。このコドンをアラニン残基に対
応するコドン、例えば GCTに置き換えかえることとし
た。そのためにアスパラギン酸残基周辺のＤＮＡ配列と
同一でかつ、アスパラギン酸残基のコドン（GAT）のみ
アラニン残基のコドン（GCT）に置換したオリゴヌクレ
オチドを合成した（表１ F-D1A）。この合成は、既知の
合成法によって合成することができるが、自動合成機を
用いることが便利である（例えば model381A DNA Synt
hesizer; Applied Biosystems社製）。
【００１０】ＰＣＲ法による増幅のための鋳型ＤＮＡは
配列表１に示したDer f IIのｃＤＮＡを含んでいれば任
意のＤＮＡ鎖が利用できるが、ここではpFLT11（図１）
を使用した。鋳型ととするpFLT11に対し、pFLT11上、De
r f IIをクローニングしている部位の下流側にあるHind
III認識配列を含む領域と同じ配列の合成ヌクレオチド
R1（表１）と前述の合成ヌクレオチド F-D1Aをプライマ
ーとして用いＰＣＲ反応を行った。ＰＣＲ反応後、得ら
れる増幅ＤＮＡ断片はダイデオキシ法（サンガー（Sang
er）ら、ジャーナル オブ モレキュラー バイオロジ
ー（J. Mol. Biol.）, 162巻, 729-773頁, 1982年）な
どを用いてその塩基配列を決定できる。
配列表１に示したDer f IIのｃＤＮＡを含んでいれば任
意のＤＮＡ鎖が利用できるが、ここではpFLT11（図１）
を使用した。鋳型ととするpFLT11に対し、pFLT11上、De
r f IIをクローニングしている部位の下流側にあるHind
III認識配列を含む領域と同じ配列の合成ヌクレオチド
R1（表１）と前述の合成ヌクレオチド F-D1Aをプライマ
ーとして用いＰＣＲ反応を行った。ＰＣＲ反応後、得ら
れる増幅ＤＮＡ断片はダイデオキシ法（サンガー（Sang
er）ら、ジャーナル オブ モレキュラー バイオロジ
ー（J. Mol. Biol.）, 162巻, 729-773頁, 1982年）な
どを用いてその塩基配列を決定できる。
【００１１】かくして、確かに変異が導入されているこ
とを確認した置換ＤＮＡは適当な発現ベクターのクロー
ニング部位に挿入して、改変Der f IIを発現させること
ができる。この発現には大腸菌で安定的に存在するプラ
スミドベクターならば任意であるが、例えば pGEMEX1
（Promega社製）を用いるのが便利である。本ベクター
は発現プロモーターにT7プロモーターを用いており、そ
の発現量が非常に多く、組換えタンパクは大腸菌中で封
入体として蓄積することが知られている。これらの一連
の操作は従来用いられてきた種々の方法を使うことが可
能である（マニアチス（Maniatis）ら、モレキュラー
クローニング（Molecular Cloning）、コールド スプリ
ング ハーバー ラボラトリー（ Cold Spring Habor Lab
oratory ）,1982年）。また本ＤＮＡは適当なベクタ
ー、例えば YEp13（ブローチ（Broach）ら、ジーン（Ge
ne）, 8巻, 121-133頁, 1979年）などを用いて、酵母中
で発現させることができる。本発明に従った改変Der f
II遺伝子を伴う発現カセットを持つ酵母ベクターを用い
適当な酵母細胞を形質転換することができる。この目的
のため、本発明に従ったＤＮＡ配列は、大腸菌プロモー
ターではなく、強力な真核性プロモーター、たとえばΔ
Ｐ８（大竹ら、アグリカルチャラル アンド バイオロ
ジカル ケミストリー（ Agric. Biol. Chem.）, 52巻,
2753-2762頁, 1988年）などの制御下におかなければな
らない。
とを確認した置換ＤＮＡは適当な発現ベクターのクロー
ニング部位に挿入して、改変Der f IIを発現させること
ができる。この発現には大腸菌で安定的に存在するプラ
スミドベクターならば任意であるが、例えば pGEMEX1
（Promega社製）を用いるのが便利である。本ベクター
は発現プロモーターにT7プロモーターを用いており、そ
の発現量が非常に多く、組換えタンパクは大腸菌中で封
入体として蓄積することが知られている。これらの一連
の操作は従来用いられてきた種々の方法を使うことが可
能である（マニアチス（Maniatis）ら、モレキュラー
クローニング（Molecular Cloning）、コールド スプリ
ング ハーバー ラボラトリー（ Cold Spring Habor Lab
oratory ）,1982年）。また本ＤＮＡは適当なベクタ
ー、例えば YEp13（ブローチ（Broach）ら、ジーン（Ge
ne）, 8巻, 121-133頁, 1979年）などを用いて、酵母中
で発現させることができる。本発明に従った改変Der f
II遺伝子を伴う発現カセットを持つ酵母ベクターを用い
適当な酵母細胞を形質転換することができる。この目的
のため、本発明に従ったＤＮＡ配列は、大腸菌プロモー
ターではなく、強力な真核性プロモーター、たとえばΔ
Ｐ８（大竹ら、アグリカルチャラル アンド バイオロ
ジカル ケミストリー（ Agric. Biol. Chem.）, 52巻,
2753-2762頁, 1988年）などの制御下におかなければな
らない。
【００１２】このようにして、Der f IIの１番目のアス
パラギン酸残基から１３番目のイソロイシン残基まで、
１２３番目のスレオニン残基から１２９番目のアスパラ
ギン酸残基まで、それぞれアラニン残基に置換した（８
番目のシステイン残基と９、１２５番目のアラニン残基
は除く）、合計１７種類（アミノ酸番号 それぞれ１番
目（配列番号４(D1A)）、２番目（配列番号５(Q2A)）、
３番目（配列番号６(V3A)）、４番目（配列番号７(D4
A)）、５番目（配列番号８(V5A)）、６番目（配列番号
９(K6A)）、７番目（配列番号１０(D7A)）、１０番目
（配列番号１１(N10A)）、１１番目（配列番号１２(N11
A)）、１２番目（配列番号１３(E12A)）、１３番目（配
列番号１４(I13A)）、１２３番目（配列番号２７(T123
A)）、１２４番目（配列番号２８(H124A)）、１２６番
目（配列番号２９(K126A)）、 １２７番目（配列番号３
０(I127A)）、１２８番目（配列番号３１(R128A)）、１
２９番目（配列番号３２(D129A)） ）の置換改変プラス
ミドを作製し、それぞれを大腸菌で発現させた。
パラギン酸残基から１３番目のイソロイシン残基まで、
１２３番目のスレオニン残基から１２９番目のアスパラ
ギン酸残基まで、それぞれアラニン残基に置換した（８
番目のシステイン残基と９、１２５番目のアラニン残基
は除く）、合計１７種類（アミノ酸番号 それぞれ１番
目（配列番号４(D1A)）、２番目（配列番号５(Q2A)）、
３番目（配列番号６(V3A)）、４番目（配列番号７(D4
A)）、５番目（配列番号８(V5A)）、６番目（配列番号
９(K6A)）、７番目（配列番号１０(D7A)）、１０番目
（配列番号１１(N10A)）、１１番目（配列番号１２(N11
A)）、１２番目（配列番号１３(E12A)）、１３番目（配
列番号１４(I13A)）、１２３番目（配列番号２７(T123
A)）、１２４番目（配列番号２８(H124A)）、１２６番
目（配列番号２９(K126A)）、 １２７番目（配列番号３
０(I127A)）、１２８番目（配列番号３１(R128A)）、１
２９番目（配列番号３２(D129A)） ）の置換改変プラス
ミドを作製し、それぞれを大腸菌で発現させた。
【００１３】次に、改変Der f IIのＩｇＥ抗体結合活性
を定量的に測定した。それに先だって、それぞれの改変
Der f IIのタンパク質精製が必要になる。その概略を以
下に示す。発現誘導後のホスト大腸菌BL21の菌体を回収
し、超音波により菌体を破砕後、遠心分離して封入体の
形で存在するDer f IIタンパク質を回収した。６Ｍ尿素
で封入体を可溶化した後、20mM トリス塩酸緩衝液(pH8.
5)に透析し尿素を除去するとともにタンパク質の再生を
行った。次に、陰イオン交換カラムクロマトグラフィー
によりDer f II画分を分離精製した。すなわち、再生画
分をDEAE-TOYOPEARL（TOSOH社）カラムに吸着させ、NaC
l濃度 80mMで溶出させると、Der f IIは単一のタンパク
質として溶出された。
を定量的に測定した。それに先だって、それぞれの改変
Der f IIのタンパク質精製が必要になる。その概略を以
下に示す。発現誘導後のホスト大腸菌BL21の菌体を回収
し、超音波により菌体を破砕後、遠心分離して封入体の
形で存在するDer f IIタンパク質を回収した。６Ｍ尿素
で封入体を可溶化した後、20mM トリス塩酸緩衝液(pH8.
5)に透析し尿素を除去するとともにタンパク質の再生を
行った。次に、陰イオン交換カラムクロマトグラフィー
によりDer f II画分を分離精製した。すなわち、再生画
分をDEAE-TOYOPEARL（TOSOH社）カラムに吸着させ、NaC
l濃度 80mMで溶出させると、Der f IIは単一のタンパク
質として溶出された。
【００１４】こうして得られた精製改変Der f IIを用い
ＩｇＥ抗体結合活性を定量的に測定した。これにはRAST
EIA キット（Pharmacia社製）を用いるのが最も簡便で
ある。まず、0.1M ほう酸緩衝液(pH8.5)で希釈した精製
改変Der f II溶液 50μlにブロモシアン活性化濾紙１枚
を浸し室温で一晩静置して、タンパク質を吸着させた。
洗浄した後、キット付属の緩衝液で４倍希釈したダニア
レルギー患者血清 50μlに濾紙を浸し、37 ℃で2時間、
静置することで血清中のヒト抗Der f II ＩｇＥ抗体と
濾紙に吸着している抗原を結合させた。この後、キット
の反応プロトコールに従い反応を進めた。全反応終了後
の試料の 420nmでの吸光度がＩｇＥ抗体結合能の指標に
なる。この結果を相対値として図２に示す。アラニンに
置換してもＩｇＥ抗体結合能に影響を及ぼさないアミノ
酸が存在する一方、配列番号７(D4A), 配列番号９(K6
A)、配列番号１０(D7A)、配列番号１１(N10A), 配列番
号１２(N11A)、配列番号１３(E12A), 配列番号３１(R12
8A)，配列番号３２(D129A)といった改変Der f IIでは、
野生型と比べてＩｇＥ抗体結合活性が 50%以下に低下し
ていることが判明した。これらの改変Der f IIはアレル
ゲン活性も低下していることが期待される。
ＩｇＥ抗体結合活性を定量的に測定した。これにはRAST
EIA キット（Pharmacia社製）を用いるのが最も簡便で
ある。まず、0.1M ほう酸緩衝液(pH8.5)で希釈した精製
改変Der f II溶液 50μlにブロモシアン活性化濾紙１枚
を浸し室温で一晩静置して、タンパク質を吸着させた。
洗浄した後、キット付属の緩衝液で４倍希釈したダニア
レルギー患者血清 50μlに濾紙を浸し、37 ℃で2時間、
静置することで血清中のヒト抗Der f II ＩｇＥ抗体と
濾紙に吸着している抗原を結合させた。この後、キット
の反応プロトコールに従い反応を進めた。全反応終了後
の試料の 420nmでの吸光度がＩｇＥ抗体結合能の指標に
なる。この結果を相対値として図２に示す。アラニンに
置換してもＩｇＥ抗体結合能に影響を及ぼさないアミノ
酸が存在する一方、配列番号７(D4A), 配列番号９(K6
A)、配列番号１０(D7A)、配列番号１１(N10A), 配列番
号１２(N11A)、配列番号１３(E12A), 配列番号３１(R12
8A)，配列番号３２(D129A)といった改変Der f IIでは、
野生型と比べてＩｇＥ抗体結合活性が 50%以下に低下し
ていることが判明した。これらの改変Der f IIはアレル
ゲン活性も低下していることが期待される。
【００１５】次に、ＩｇＥ抗体結合活性が低下した改変
Der f II（配列番号７(D4A), 配列番号９(K6A)、配列番
号１０(D7A)）を用いて、野生型Der f IIとヒトＩｇＥ
抗体との結合阻害活性を測定した。方法は前述したRAST
-EIA法に従うが、活性化濾紙には一律 50ng/mlの野生型
Der f IIを吸着させた。通常のRAST-EIA法では次に患者
血清を加えるが、ここでは先に改変Der f IIを加えて室
温で２〜３時間放置した患者血清を使用する。この血清
溶液を通常のRAST-EIA法と同様に活性化濾紙に添加し、
以下は同様に操作をおこなった。改変Der f IIの代わり
に野生型Der f IIを患者血清に加えた場合、最終の 420
nmの吸光度は、ほぼブランク値になる。吸光度がブラン
ク値となった場合を100%阻害としたとき、野生型Der f
II及び改変Der f IIの阻害活性を相対値として図３に示
す。用いた改変Der f IIはすべて、野生型とほぼ同等の
阻害活性を示した。
Der f II（配列番号７(D4A), 配列番号９(K6A)、配列番
号１０(D7A)）を用いて、野生型Der f IIとヒトＩｇＥ
抗体との結合阻害活性を測定した。方法は前述したRAST
-EIA法に従うが、活性化濾紙には一律 50ng/mlの野生型
Der f IIを吸着させた。通常のRAST-EIA法では次に患者
血清を加えるが、ここでは先に改変Der f IIを加えて室
温で２〜３時間放置した患者血清を使用する。この血清
溶液を通常のRAST-EIA法と同様に活性化濾紙に添加し、
以下は同様に操作をおこなった。改変Der f IIの代わり
に野生型Der f IIを患者血清に加えた場合、最終の 420
nmの吸光度は、ほぼブランク値になる。吸光度がブラン
ク値となった場合を100%阻害としたとき、野生型Der f
II及び改変Der f IIの阻害活性を相対値として図３に示
す。用いた改変Der f IIはすべて、野生型とほぼ同等の
阻害活性を示した。
【００１６】遺伝子工学的に調製した本発明に従う改変
Der f IIは、最小限の変異（ 129アミノ酸中１アミノ
酸）で、そのＩｇＥ抗体結合活性が低下し、また野生型
Der fIIのＩｇＥ抗体結合を阻害し、大腸菌で大量に調
製することができ、ダニに起因する各種のアレルギー疾
患の治療あるいは診断に使用できる。
Der f IIは、最小限の変異（ 129アミノ酸中１アミノ
酸）で、そのＩｇＥ抗体結合活性が低下し、また野生型
Der fIIのＩｇＥ抗体結合を阻害し、大腸菌で大量に調
製することができ、ダニに起因する各種のアレルギー疾
患の治療あるいは診断に使用できる。
【００１７】
【実施例】次にあげる実施例で本発明をより詳細に説明
するが、特許請求の範囲は、この実施例により限定され
るものではない。 実施例１ Der f IIアミノ酸置換変異体の発現ベクターの構築 Der f IIの特定のアミノ酸残基をアラニンに置換した改
変Der f IIはＰＣＲ法を用いた部位特異的変異で作製し
た。ＰＣＲ法をおこなうにあたり合成したオリゴヌクレ
オチドは、表１に示すとおりである。変異部位がDer f
IIのＮ末端側１番目から７番目のアミノ酸の場合、合成
オリゴヌクレオチドは、変異させる目的のアミノ酸のコ
ドンをアラニンのコドンとする以外は野生型Der f IIと
同じ配列とし、さらに開始コドンの上流に制限酵素NdeI
の認識配列を新たに導入するように設計した（表１； F
-D1A、F-Q2A、F-V3A、F-D4A、F-V5A、F-K6A、F-D7A）。
鋳型ＤＮＡとしては野生型Der f IIの発現ベクターpFLT
11（図１）を用いた。pFLT11上、Der f IIをクローニン
グしている部位の下流側にある HindIII認識配列を含む
領域と相補的な配列である合成ヌクレオチドR1と前述の
変異導入合成ヌクレオチドF-D1A、F-Q2A、F-V3A、F-D4
A、F-V5A、F-K6A、あるいは F-D7Aのいずれかをプライ
マーとしてＰＣＲ反応をおこなった。
するが、特許請求の範囲は、この実施例により限定され
るものではない。 実施例１ Der f IIアミノ酸置換変異体の発現ベクターの構築 Der f IIの特定のアミノ酸残基をアラニンに置換した改
変Der f IIはＰＣＲ法を用いた部位特異的変異で作製し
た。ＰＣＲ法をおこなうにあたり合成したオリゴヌクレ
オチドは、表１に示すとおりである。変異部位がDer f
IIのＮ末端側１番目から７番目のアミノ酸の場合、合成
オリゴヌクレオチドは、変異させる目的のアミノ酸のコ
ドンをアラニンのコドンとする以外は野生型Der f IIと
同じ配列とし、さらに開始コドンの上流に制限酵素NdeI
の認識配列を新たに導入するように設計した（表１； F
-D1A、F-Q2A、F-V3A、F-D4A、F-V5A、F-K6A、F-D7A）。
鋳型ＤＮＡとしては野生型Der f IIの発現ベクターpFLT
11（図１）を用いた。pFLT11上、Der f IIをクローニン
グしている部位の下流側にある HindIII認識配列を含む
領域と相補的な配列である合成ヌクレオチドR1と前述の
変異導入合成ヌクレオチドF-D1A、F-Q2A、F-V3A、F-D4
A、F-V5A、F-K6A、あるいは F-D7Aのいずれかをプライ
マーとしてＰＣＲ反応をおこなった。
【表１】 合成ヌクレオチド 配列（５’側から３'側へ） *) ＮｄｅI F-D1A GGCATATGGCTCAAGTCGATGTTAAAGAT F-Q2A CCCATATGGATGCAGTCGATGTTAAAGAT F-V3A GCCATATGGATCAAGCCGATGTTAAAGAT F-D4A CGCATATGGATCAAGCCGCTGTTAAAGAT F-V5A GGCATATGGATCAAGTCGATGCTAAAGATTG F-K6A CCCATATGGATCAAGTCGATGCTGCAGATTGTG F-D7A GCCATATGGATCAAGTCGATGCTAAAGCTTGTGC R-N10A GATTTCATTGGCGGCACAATC R-N11A TTTGATTTCAGCGTTGGCACA R-E12A TTTTTTGATTGCATTGTTGG R-I13A TACTTTTTTGGCTTCATTGTT ＨｉｎｄIII R-T123A CGCAAGCTTAATCACGGATTTTAGCGTGGGCAGCAA R-H124A GCGAAGCTTAATCACGGATTTTAGCGGCGGTAGC R-K126A GCGAAGCTTAATCACGGATTGCAGCGTGGG R-I127A GCGAAGCTTAATCACGGGCTTTAG R-R128A CGCAAGCTTAATCAGCGATTTT R-D129A GCGAAGCTTAAGCACGGAT R1 ATCAAGCTGGGATTTAGGTG F1 CCGATTCATTAATGCAGCCC F2 CCCCGCGCGTTGGCCGATTC F3 GCCCGGGAGTTCTCGATCCC *) アラニンへの変異のための（野生種と異なる）配列
を下線で示した。
を下線で示した。
【００１８】変異部位がDer f IIのＣ末端側１２３番目
から１２９番目のアミノ酸の場合、合成オリゴヌクレオ
チドは、変異させるアミノ酸のコドンをアラニンのコド
ンとする以外は野生型Der f IIと相補的な配列とし、さ
らに終止コドンの下流に制限酵素HindIIIの認識配列を
新たに導入するように設計した（表１；R-T123A, R-H12
4A, R-K126A, R-I127A, R-R128A, R-D129A）。もう一方
のプライマーは pFLT11上のBglII切断部位より15bp上流
付近と同じ配列の合成ヌクレオチドF1を用いた。やはり
pFLT1を鋳型とし、F1とR-T123A、R-H124A、R-K126A、R-
I127A, R-R128A、あるいはR-D129Aのいずれかをプライ
マーとして用いＰＣＲ反応をおこなった。
から１２９番目のアミノ酸の場合、合成オリゴヌクレオ
チドは、変異させるアミノ酸のコドンをアラニンのコド
ンとする以外は野生型Der f IIと相補的な配列とし、さ
らに終止コドンの下流に制限酵素HindIIIの認識配列を
新たに導入するように設計した（表１；R-T123A, R-H12
4A, R-K126A, R-I127A, R-R128A, R-D129A）。もう一方
のプライマーは pFLT11上のBglII切断部位より15bp上流
付近と同じ配列の合成ヌクレオチドF1を用いた。やはり
pFLT1を鋳型とし、F1とR-T123A、R-H124A、R-K126A、R-
I127A, R-R128A、あるいはR-D129Aのいずれかをプライ
マーとして用いＰＣＲ反応をおこなった。
【００１９】ＰＣＲ反応溶液は以下に示すとおりであ
る。鋳型となるpFLT11 1ngに、２種類のプライマーを１
μgずつ加え、Taq DNAポリメラーゼ（東洋紡）添付の10
倍濃度反応溶液、および 25mM MgCl2溶液を10μlずつ、
dATP、dCTP、dGTP、dTTPをそれぞれ最終濃度 200mMとな
るように添加し、蒸留水で反応溶液の容量を100μlとし
た後、Taq DNAポリメラーゼを 2.5ユニット加えた。こ
の溶液を 94℃で１分保持して鋳型の２本鎖ＤＮＡを変
性させ１本鎖とした後、37℃にて２分保持して１本鎖の
鋳型にプライマーをアニーリングし、続く72℃３分間の
反応でポリメラーゼによる相補鎖ＤＮＡの合成をおこな
う。以上の工程を25サイクル繰り返して目的ＤＮＡフラ
グメントの増幅をおこなった。
る。鋳型となるpFLT11 1ngに、２種類のプライマーを１
μgずつ加え、Taq DNAポリメラーゼ（東洋紡）添付の10
倍濃度反応溶液、および 25mM MgCl2溶液を10μlずつ、
dATP、dCTP、dGTP、dTTPをそれぞれ最終濃度 200mMとな
るように添加し、蒸留水で反応溶液の容量を100μlとし
た後、Taq DNAポリメラーゼを 2.5ユニット加えた。こ
の溶液を 94℃で１分保持して鋳型の２本鎖ＤＮＡを変
性させ１本鎖とした後、37℃にて２分保持して１本鎖の
鋳型にプライマーをアニーリングし、続く72℃３分間の
反応でポリメラーゼによる相補鎖ＤＮＡの合成をおこな
う。以上の工程を25サイクル繰り返して目的ＤＮＡフラ
グメントの増幅をおこなった。
【００２０】変異Der f II遺伝子の大腸菌の発現にはプ
ラスミドベクターpGEMEX1（Promega社）を用いた。変異
遺伝子挿入に先だってpGEMEX1をNdeIで部分消化しT4 DN
A ポリメラーゼによる末端平滑化後、再ライゲイション
し、T7プロモーター直下のNdeIサイトは保持している
が、もう一つのNdeIサイトを欠失しているプラスミドを
作製した（pGEMEX1ー△NdeI）。R1とF-D1A、F-Q2A、F-V
3A、F-D4A、F-V5A、F-K6A、あるいはF-D7Aを用いて増幅
したDNAフラグメントをNdeI及びHindIIIで切断後、pGEM
EX1-△NdeIのNdeI、HindIII部位に挿入してそれぞれ変
異体の発現ベクターpFLT11-D1A、pFLT11-Q2A、pFLT11-V
3A、pFLT11-D4A、pFLT11-V5A、pFLT11-K6A、pFLT11-D7A
とした。一方、F1とR-T123A, R-H124A, R-K126A, R-I12
7A, R-R128A,あるいはR-D129Aのいずれかを用いて増幅
したDNAフラグメントをBglII及びHindIIIで切断後、pGE
MEX1-△NdeIのBglII、HindIII部位に挿入して、pFLT11-
T123A、pFLT11-H124A、pFLT11-K126A、pFLT11-I127A、p
FLT11-R128A、pFLT11-D129Aとした。
ラスミドベクターpGEMEX1（Promega社）を用いた。変異
遺伝子挿入に先だってpGEMEX1をNdeIで部分消化しT4 DN
A ポリメラーゼによる末端平滑化後、再ライゲイション
し、T7プロモーター直下のNdeIサイトは保持している
が、もう一つのNdeIサイトを欠失しているプラスミドを
作製した（pGEMEX1ー△NdeI）。R1とF-D1A、F-Q2A、F-V
3A、F-D4A、F-V5A、F-K6A、あるいはF-D7Aを用いて増幅
したDNAフラグメントをNdeI及びHindIIIで切断後、pGEM
EX1-△NdeIのNdeI、HindIII部位に挿入してそれぞれ変
異体の発現ベクターpFLT11-D1A、pFLT11-Q2A、pFLT11-V
3A、pFLT11-D4A、pFLT11-V5A、pFLT11-K6A、pFLT11-D7A
とした。一方、F1とR-T123A, R-H124A, R-K126A, R-I12
7A, R-R128A,あるいはR-D129Aのいずれかを用いて増幅
したDNAフラグメントをBglII及びHindIIIで切断後、pGE
MEX1-△NdeIのBglII、HindIII部位に挿入して、pFLT11-
T123A、pFLT11-H124A、pFLT11-K126A、pFLT11-I127A、p
FLT11-R128A、pFLT11-D129Aとした。
【００２１】一方、10番目から13番目のアミノ酸を各々
アラニンに置換する場合は、つぎに示す二段階のＰＣＲ
反応をおこなった。即ち、表に示すとおり変異を導入す
る目的のアミノ酸残基のコドンのみアラニンのコドンと
し、それ以外は野生型Der fIIと相補的な配列の合成ヌ
クレオチドR-N10A、R-N11A、R-E12A、R-I13Aを作製し、
これらのいずれかとpFLT11のBglII切断部位より 30bp上
流付近と同一な配列の合成ヌクレオチドF2をプライマー
とし、pFLT11を鋳型として用いてＰＣＲ反応をおこなっ
た。同時に、pFLT11上の BglII部位を同酵素で切断不可
能な配列となるように設計したF3と前述のR1をプライマ
ーとして用い、同じくpFLT11を鋳型としてＰＣＲ反応を
おこなった。ＰＣＲ反応で得られたこれら２種類のＤＮ
Ａフラグメント10ngずつを、先のＰＣＲ反応溶液からプ
ライマーとポリメラーゼを除いた溶液中に加え、94℃で
10分間反応させた後、30分間で37℃まで緩やかに冷却し
最後に37℃で15分保持することにより２本のフラグメン
トのアニーリングをおこなった。続いてTaq ポリメラー
ゼを2.5ユニット加え60℃で3分保持することにより、２
本のＤＮＡフラグメントの伸長をおこなった。ここに、
先の２種類のプライマーR1とF2を0.5μgずつ加えた後Ｐ
ＣＲ反応を20サイクルおこなってフラグメントを増幅し
た。以上の操作で、同じ長さの２種類のＤＮＡフラグメ
ントが得られた。
アラニンに置換する場合は、つぎに示す二段階のＰＣＲ
反応をおこなった。即ち、表に示すとおり変異を導入す
る目的のアミノ酸残基のコドンのみアラニンのコドンと
し、それ以外は野生型Der fIIと相補的な配列の合成ヌ
クレオチドR-N10A、R-N11A、R-E12A、R-I13Aを作製し、
これらのいずれかとpFLT11のBglII切断部位より 30bp上
流付近と同一な配列の合成ヌクレオチドF2をプライマー
とし、pFLT11を鋳型として用いてＰＣＲ反応をおこなっ
た。同時に、pFLT11上の BglII部位を同酵素で切断不可
能な配列となるように設計したF3と前述のR1をプライマ
ーとして用い、同じくpFLT11を鋳型としてＰＣＲ反応を
おこなった。ＰＣＲ反応で得られたこれら２種類のＤＮ
Ａフラグメント10ngずつを、先のＰＣＲ反応溶液からプ
ライマーとポリメラーゼを除いた溶液中に加え、94℃で
10分間反応させた後、30分間で37℃まで緩やかに冷却し
最後に37℃で15分保持することにより２本のフラグメン
トのアニーリングをおこなった。続いてTaq ポリメラー
ゼを2.5ユニット加え60℃で3分保持することにより、２
本のＤＮＡフラグメントの伸長をおこなった。ここに、
先の２種類のプライマーR1とF2を0.5μgずつ加えた後Ｐ
ＣＲ反応を20サイクルおこなってフラグメントを増幅し
た。以上の操作で、同じ長さの２種類のＤＮＡフラグメ
ントが得られた。
【００２２】一つは、BglII認識配列を持ち目的のアミ
ノ酸部位に変異が導入されたもので、もう一つは目的の
アミノ酸の配列が野生型と同じで BglII認識配列が切断
不可能に変異したものである。これらを BglII及び Hin
dIIIで切断後、同じく BglIIとHindIIIで処理した pGEM
EX1-△NdeIに連結することによりアラニン置換変異が導
入されたベクターのみが得られた。このようにして10番
目から13番目までのアミノ酸をそれぞれアラニンに置換
した変異型Der f IIの発現ベクター、pFLT11-N10A、pFL
T11-N11A、pFLT11-E12A、pFLT11-I13Aを作製した。
ノ酸部位に変異が導入されたもので、もう一つは目的の
アミノ酸の配列が野生型と同じで BglII認識配列が切断
不可能に変異したものである。これらを BglII及び Hin
dIIIで切断後、同じく BglIIとHindIIIで処理した pGEM
EX1-△NdeIに連結することによりアラニン置換変異が導
入されたベクターのみが得られた。このようにして10番
目から13番目までのアミノ酸をそれぞれアラニンに置換
した変異型Der f IIの発現ベクター、pFLT11-N10A、pFL
T11-N11A、pFLT11-E12A、pFLT11-I13Aを作製した。
【００２３】変異の導入の確認はＤＮＡシーケンシング
によりおこなった。即ち、変異を導入した発現ベクター
DNAを鋳型として、T7 primerあるいはSP6 primerを用い
てTaq DNA polymeraseにより反応をおこない、 Applied
Biosystems 370A DNA sequencer により塩基配列を決
定した（スミス（Smith）ら、ネイチャー（Nature）、3
21巻、674頁、1986年）。
によりおこなった。即ち、変異を導入した発現ベクター
DNAを鋳型として、T7 primerあるいはSP6 primerを用い
てTaq DNA polymeraseにより反応をおこない、 Applied
Biosystems 370A DNA sequencer により塩基配列を決
定した（スミス（Smith）ら、ネイチャー（Nature）、3
21巻、674頁、1986年）。
【００２４】実施例２ RAST-EIA法によるアミノ酸置換改変Der f IIのＩｇＥ抗
体結合能の比較 実施例１で作成した17種類のDer f II変異体の発現ベク
ター（pFLT11-D1A, pFLT11-Q2A,pFLT11-V3A, pFLT11-D4
A, pFLT11-V5A, pFLT11-K6A, pFLT11-D7A, pFLT11-N10
A,pFLT11-N11A, pFLT11-E12A, pFLT11-I13A, pFLT11-T1
23A, pFLT11-H124A、pFLT11-K126A、pFLT11-I127A、pFL
T11-R128A、pFLT11-D129A）のそれぞれにより形質転換
した大腸菌BL21をアンピシリン入りＬ寒天培地（1％バ
クトトリプトン、0.5％イーストエキストラクト、0.5％
塩化ナトリウム、1.5％バクトアガー（以上すべて単位
は(W/V)、50μg/mlアンピシリン、pH7.4）上に生育させ
た後に生じたコロニーを適宜アンピシリン入りＬ液体培
地（アンピシリン入りＬ寒天培地より寒天を除いたも
の） 5mlへ接種した。30℃で一晩振盪培養した後、これ
をアンピシリン入りＬ液体培地500mlに添加して更に30
℃で振盪培養をおこなった。
体結合能の比較 実施例１で作成した17種類のDer f II変異体の発現ベク
ター（pFLT11-D1A, pFLT11-Q2A,pFLT11-V3A, pFLT11-D4
A, pFLT11-V5A, pFLT11-K6A, pFLT11-D7A, pFLT11-N10
A,pFLT11-N11A, pFLT11-E12A, pFLT11-I13A, pFLT11-T1
23A, pFLT11-H124A、pFLT11-K126A、pFLT11-I127A、pFL
T11-R128A、pFLT11-D129A）のそれぞれにより形質転換
した大腸菌BL21をアンピシリン入りＬ寒天培地（1％バ
クトトリプトン、0.5％イーストエキストラクト、0.5％
塩化ナトリウム、1.5％バクトアガー（以上すべて単位
は(W/V)、50μg/mlアンピシリン、pH7.4）上に生育させ
た後に生じたコロニーを適宜アンピシリン入りＬ液体培
地（アンピシリン入りＬ寒天培地より寒天を除いたも
の） 5mlへ接種した。30℃で一晩振盪培養した後、これ
をアンピシリン入りＬ液体培地500mlに添加して更に30
℃で振盪培養をおこなった。
【００２５】この培養液の、600nmに於ける吸光度が0.4
に達したところでイソプロピル−β−チオガラクトピラ
ノシド（IPTG）を0.1mMとなるように加え更に5時間振盪
培養を継続することにより、目的タンパク質の発現誘導
をおこなった。つぎに各改変Der f IIを発現した大腸菌
BL21の菌体を遠心分離で回収し、超音波破砕で菌体を破
壊した後、再び遠心分離をおこなって封入体となってい
る改変Der f IIタンパク質を回収した。尿素を含む緩衝
液（ 6M尿素、100mMトリス塩酸、10mMエチレンジアミン
４酢酸（EDTA）、pH7.5）で封入体を可溶化した後、20m
M トリス塩酸緩衝液（ pH8.5）に透析することにより再
生をおこなった。この後、陰イオン交換カラムクロマト
グラフィーをおこない、改変Der f IIを精製した。イオ
ン交換体にはDEAE-TOYOPEARL 650M（TOSOH社）を用い
た。この再生タンパク質溶液を、上記トリス緩衝液で平
衡化したイオン交換カラムへ供し吸着させた後、塩化ナ
トリウムの濃度勾配（0から100mM）にて溶出をおこなっ
た。塩濃度約80mMにて溶出された画分をSDS-PAGEに供し
た結果、分子量約14,000の単一バンドが観察され、これ
を精製標品とした。
に達したところでイソプロピル−β−チオガラクトピラ
ノシド（IPTG）を0.1mMとなるように加え更に5時間振盪
培養を継続することにより、目的タンパク質の発現誘導
をおこなった。つぎに各改変Der f IIを発現した大腸菌
BL21の菌体を遠心分離で回収し、超音波破砕で菌体を破
壊した後、再び遠心分離をおこなって封入体となってい
る改変Der f IIタンパク質を回収した。尿素を含む緩衝
液（ 6M尿素、100mMトリス塩酸、10mMエチレンジアミン
４酢酸（EDTA）、pH7.5）で封入体を可溶化した後、20m
M トリス塩酸緩衝液（ pH8.5）に透析することにより再
生をおこなった。この後、陰イオン交換カラムクロマト
グラフィーをおこない、改変Der f IIを精製した。イオ
ン交換体にはDEAE-TOYOPEARL 650M（TOSOH社）を用い
た。この再生タンパク質溶液を、上記トリス緩衝液で平
衡化したイオン交換カラムへ供し吸着させた後、塩化ナ
トリウムの濃度勾配（0から100mM）にて溶出をおこなっ
た。塩濃度約80mMにて溶出された画分をSDS-PAGEに供し
た結果、分子量約14,000の単一バンドが観察され、これ
を精製標品とした。
【００２６】野生型Der f II及び各アラニン置換改変De
r f IIについてそれぞれヒトＩｇＥ抗体結合活性をファ
ルマシア社製RAST-EIAキットを用いて測定した。操作は
以下に示す通り、まず0.1Mほう酸緩衝液（pH8.5）にて
希釈した精製標品溶液50μlにブロモシアンで活性化し
た濾紙を浸積し室温で一晩放置することにより濾紙にDe
r f IIタンパク質を吸着させた。つぎに標品溶液を除
き、0.1M炭酸水素ナトリウム溶液 500μlで濾紙の洗浄
をおこなった後、1M β−エタノールアミン（pH9.0）25
0μl中に濾紙を浸し室温で３時間静置して濾紙上への非
特異的吸着を防ぐブロッキング操作をおこなった。エタ
ノールアミン溶液を除き、0.1M炭酸水素ナトリウム溶液
500μlで１回、0.1M酢酸ナトリウム緩衝液（pH4.0）500
μlで3回、キット付属の緩衝液500μlで２回の計６回洗
浄をおこなった後、同じくキット付属の緩衝液で４倍に
希釈したダニアレルギー患者血清 50μlを添加し、37℃
で２時間静置して血清中の抗Der f II IgE抗体と濾紙に
吸着している抗原を結合させた。
r f IIについてそれぞれヒトＩｇＥ抗体結合活性をファ
ルマシア社製RAST-EIAキットを用いて測定した。操作は
以下に示す通り、まず0.1Mほう酸緩衝液（pH8.5）にて
希釈した精製標品溶液50μlにブロモシアンで活性化し
た濾紙を浸積し室温で一晩放置することにより濾紙にDe
r f IIタンパク質を吸着させた。つぎに標品溶液を除
き、0.1M炭酸水素ナトリウム溶液 500μlで濾紙の洗浄
をおこなった後、1M β−エタノールアミン（pH9.0）25
0μl中に濾紙を浸し室温で３時間静置して濾紙上への非
特異的吸着を防ぐブロッキング操作をおこなった。エタ
ノールアミン溶液を除き、0.1M炭酸水素ナトリウム溶液
500μlで１回、0.1M酢酸ナトリウム緩衝液（pH4.0）500
μlで3回、キット付属の緩衝液500μlで２回の計６回洗
浄をおこなった後、同じくキット付属の緩衝液で４倍に
希釈したダニアレルギー患者血清 50μlを添加し、37℃
で２時間静置して血清中の抗Der f II IgE抗体と濾紙に
吸着している抗原を結合させた。
【００２７】抗原抗体反応後血清を除き、キット付属の
洗浄液 2.5ml中に濾紙を10分間浸して洗浄する操作を3
回繰り返した後、キット付属のβ−D−ガラクトシダー
ゼ標識した抗ヒトＩｇＥ抗体ウサギ抗体溶液50μlを加
えて室温にて16−20時間静置することにより抗原に吸着
しているＩｇＥ抗体との結合反応をおこなった。酵素標
識抗体溶液を除いて前述と同様の方法で濾紙を洗浄し、
基質であるキット付属のo‐ニトロフェニル−β−D−ガ
ラクトピラノシド溶液200μlを加えて37℃で2時間反応
させた。最後にキット付属の停止液２mlを加えて酵素反
応を停止した後、同反応液の420nmにおける吸光度を測
定し、この値を抗原 Der f IIとヒトＩｇＥ抗体結合活
性として評価をおこなった。この結果は、図２に示すと
おりである。アラニンに置換してもＩｇＥ抗体結合能に
影響を及ぼさないアミノ酸が存在する一方、配列番号７
(D4A), 配列番号９(K6A)、配列番号１０(D7A)、配列番
号１１(N10A), 配列番号１２(N11A)、配列番号１３(E12
A), 配列番号３１(R128A)，配列番号３２(D129A)といっ
た改変Der f IIでは、野生型と比べてＩｇＥ抗体結合活
性が 50%以下に低下していることが判明した。このこと
から、この患者血清中に存在するＩｇＥ抗体が認識して
いる領域の形成には、少なくともDer f IIのＮ末端側４
番目のアスパラギン酸、６番目のリジン、７番目のアス
パラギン酸、１０、１１番目のアスパラギン、Ｃ末端側
１２８番目のアルギニン、１２９番目のアスパラギン酸
が関与していると推定される。これらのアミノ酸残基を
アラニンに置換することによりＩｇＥ抗体との結合力が
低下し、その程度は、置換するアミノ酸残基の種類や部
位によって異なることが期待される。
洗浄液 2.5ml中に濾紙を10分間浸して洗浄する操作を3
回繰り返した後、キット付属のβ−D−ガラクトシダー
ゼ標識した抗ヒトＩｇＥ抗体ウサギ抗体溶液50μlを加
えて室温にて16−20時間静置することにより抗原に吸着
しているＩｇＥ抗体との結合反応をおこなった。酵素標
識抗体溶液を除いて前述と同様の方法で濾紙を洗浄し、
基質であるキット付属のo‐ニトロフェニル−β−D−ガ
ラクトピラノシド溶液200μlを加えて37℃で2時間反応
させた。最後にキット付属の停止液２mlを加えて酵素反
応を停止した後、同反応液の420nmにおける吸光度を測
定し、この値を抗原 Der f IIとヒトＩｇＥ抗体結合活
性として評価をおこなった。この結果は、図２に示すと
おりである。アラニンに置換してもＩｇＥ抗体結合能に
影響を及ぼさないアミノ酸が存在する一方、配列番号７
(D4A), 配列番号９(K6A)、配列番号１０(D7A)、配列番
号１１(N10A), 配列番号１２(N11A)、配列番号１３(E12
A), 配列番号３１(R128A)，配列番号３２(D129A)といっ
た改変Der f IIでは、野生型と比べてＩｇＥ抗体結合活
性が 50%以下に低下していることが判明した。このこと
から、この患者血清中に存在するＩｇＥ抗体が認識して
いる領域の形成には、少なくともDer f IIのＮ末端側４
番目のアスパラギン酸、６番目のリジン、７番目のアス
パラギン酸、１０、１１番目のアスパラギン、Ｃ末端側
１２８番目のアルギニン、１２９番目のアスパラギン酸
が関与していると推定される。これらのアミノ酸残基を
アラニンに置換することによりＩｇＥ抗体との結合力が
低下し、その程度は、置換するアミノ酸残基の種類や部
位によって異なることが期待される。
【００２８】実施例３ 改変Der f IIによる野生型Der f IIとヒトＩｇＥ抗体結
合阻害活性 RAST-EIA法を用いて、野生型Der f IIとヒトＩｇＥ抗体
間の抗原抗体反応に対する阻害活性をヒトＩｇＥ抗体結
合活性の大きく低下した改変Der f II ３種（配列番号
７(D4A), 配列番号９(K6A)、配列番号１０(D7A)）につ
いて調べた。方法は実施例２で前述したRAST-EIA法に従
うが、濾紙には一律 50ng/mlの野生型Derf IIを吸着さ
せた。異なる濃度の野生型あるいは改変Der f IIを患者
血清に加えて室温で２〜３時間放置した。血清濃度は最
終的に４倍希釈となるように調製した。この血清溶液を
野生型Der f IIを吸着している濾紙に添加し、以下同様
の方法で反応、吸光度を測定した。どの改変Der f IIを
血清に添加した場合も、血清をそのまま使用した時に比
べて吸光度が低下した。このことは野生型Der f IIとヒ
トＩｇＥ抗体結合を改変Der f IIが阻害した結果だと考
えられる。吸光度がブランク値になった場合を100%とし
た場合、野生型Der f II及び改変Der f IIの相対阻害活
性を図３に示す。測定した改変Der f IIはどれも野生型
とほぼ同等の阻害率を示すことが明らかになった。
合阻害活性 RAST-EIA法を用いて、野生型Der f IIとヒトＩｇＥ抗体
間の抗原抗体反応に対する阻害活性をヒトＩｇＥ抗体結
合活性の大きく低下した改変Der f II ３種（配列番号
７(D4A), 配列番号９(K6A)、配列番号１０(D7A)）につ
いて調べた。方法は実施例２で前述したRAST-EIA法に従
うが、濾紙には一律 50ng/mlの野生型Derf IIを吸着さ
せた。異なる濃度の野生型あるいは改変Der f IIを患者
血清に加えて室温で２〜３時間放置した。血清濃度は最
終的に４倍希釈となるように調製した。この血清溶液を
野生型Der f IIを吸着している濾紙に添加し、以下同様
の方法で反応、吸光度を測定した。どの改変Der f IIを
血清に添加した場合も、血清をそのまま使用した時に比
べて吸光度が低下した。このことは野生型Der f IIとヒ
トＩｇＥ抗体結合を改変Der f IIが阻害した結果だと考
えられる。吸光度がブランク値になった場合を100%とし
た場合、野生型Der f II及び改変Der f IIの相対阻害活
性を図３に示す。測定した改変Der f IIはどれも野生型
とほぼ同等の阻害率を示すことが明らかになった。
【発明の効果】
本発明によれば、遺伝子工学を使ってヒ
ョウヒダニ主要アレルゲンタンパク質Der f IIを最小限
の改変で、そのＩｇＥ抗体結合活性を低下させることが
可能になった。また、改変Der f IIは野生型Der f IIと
ヒトＩｇＥ抗体との結合を阻害した。これらの改変Der
f IIは大腸菌等を用いて大量に製造することができ、そ
れゆえ、これらの改変Der f IIを用いて各種アレルギー
疾患の治療あるいは診断に利用することができる。
ョウヒダニ主要アレルゲンタンパク質Der f IIを最小限
の改変で、そのＩｇＥ抗体結合活性を低下させることが
可能になった。また、改変Der f IIは野生型Der f IIと
ヒトＩｇＥ抗体との結合を阻害した。これらの改変Der
f IIは大腸菌等を用いて大量に製造することができ、そ
れゆえ、これらの改変Der f IIを用いて各種アレルギー
疾患の治療あるいは診断に利用することができる。
【００２９】
【配列表】配列番号:１（１−ａ（Clone11）） 配列の長さ：390 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３０】配列番号:２（１−ｂ(Clone1)） 配列の長さ：390 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Val Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT GTC AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ile Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT ATC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Ile Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT ATC GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Gly Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAT GGT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Val Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT GTC AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ile Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT ATC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Ile Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT ATC GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Gly Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAT GGT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３１】配列番号:３（１−ｃ(Clone2)） 配列の長さ：390 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ile Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT ATC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Ile Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT ATC GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Gly Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAT GGT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ile Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT ATC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Ile Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT ATC GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Gly Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAT GGT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３２】配列番号：４（D1A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Ala Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GCT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Ala Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GCT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３３】配列番号：５（Q2A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 ASP Ala Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT GCA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 ASP Ala Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT GCA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３４】配列番号：６（V3A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 ASP Gln Ala Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CCA GCC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 ASP Gln Ala Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CCA GCC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３５】配列番号：７（D4A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Ala Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GCT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Ala Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GCT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３６】配列番号：８（V5A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Ala Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GCT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Ala Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GCT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３７】配列番号：９（K6A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Ala Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT GCA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Ala Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT GCA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３８】配列番号：１０（D7A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Ala Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GCT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Ala Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GCT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００３９】配列番号：１１（N10A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Ala Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC GCC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Ala Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC GCC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４０】配列番号：１２（N11A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Ala Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC GCT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Ala Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC GCT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４１】配列番号：１３（E12A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Ala Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GCA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Ala Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GCA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４２】配列番号：１４（I13A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ala Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA GCC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ala Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA GCC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４３】配列番号：１５（K14A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Ala Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC GCA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Ala Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC GCA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４４】配列番号：１６（K15A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Ala Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA GCA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Ala Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA GCA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４５】配列番号：１７（V16A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Ala 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GCA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Ala 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GCA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４６】配列番号：１８（M17A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Ala Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 GCG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Ala Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 GCG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４７】配列番号：１９（V18A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Ala Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GCC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Ala Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GCC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４８】配列番号：２０（D19A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
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oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Ala Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GCT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００４９】配列番号：２１（G20A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Ala Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GCT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Ala Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GCT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５０】配列番号：２２（N114A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Ala Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT GCT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Ala Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT GCT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５１】配列番号：２３（G115A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Ala Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GCT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Ala Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GCT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５２】配列番号：２４（V116A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Ala Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GCT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Ala Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GCT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５２】配列番号：２５（L117A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Ala Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT GCG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Ala Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT GCG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５３】配列番号：２６（I121A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ala Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT GCT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ala Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT GCT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５４】配列番号：２７（T123A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Ala His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT GCC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Ala His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT GCC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５５】配列番号：２８（H124A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr Ala Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC GCC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr Ala Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC GCC GCT AAA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５６】配列番号：２９（K126A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Ala Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT GCA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Ala Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT GCA ATC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５７】配列番号：３０（I127A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ala Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA GCC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ala Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA GCC CGT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５８】配列番号：３１（R128A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Ala 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC GCT 129 Asp *** 385 GAT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Ala 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC GCT 129 Asp *** 385 GAT TAA
【００５９】配列番号：３２（D129A） 配列の長さ： 3 9 0 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA to mRNA 配列の特徴 起源：デルマトファゴイデス ファリナエ（Dermatophag
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Ala *** 385 GCT TAA
oides farinae） 特徴を決定した方法：Ｅ 配列 1 Asp Gln Val Asp Val Lys Asp Cys Ala Asn Asn Glu Ile Lys Lys Val 1 GAT CAA GTC GAT GTT AAA GAT TGT GCC AAC AAT GAA ATC AAA AAA GTA 17 Met Val Asp Gly Cys His Gly Ser Asp Pro Cys Ile Ile His Arg Gly 49 ATG GTC GAT GGT TGC CAT GGT TCT GAT CCA TGC ATC ATC CAT CGT GGT 33 Lys Pro Phe Thr Leu Glu Ala Leu Phe Asp Ala Asn Gln Asn Thr Lys 97 AAA CCA TTC ACT TTG GAA GCC TTA TTC GAT GCC AAC CAA AAC ACT AAA 49 Thr Ala Lys Ile Glu Ile Lys Ala Ser Leu Asp Gly Leu Glu Ile Asp 145 ACC GCT AAA ATT GAA ATC AAA GCC AGC CTC GAT GGT CTT GAA ATT GAT 65 Val Pro Gly Ile Asp Thr Asn Ala Cys His Phe Met Lys Cys Pro Leu 193 GTT CCC GGT ATC GAT ACC AAT GCT TGC CAT TTT ATG AAA TGT CCA TTG 81 Val Lys Gly Gln Gln Tyr Asp Ala Lys Tyr Thr Trp Asn Val Pro Lys 241 GTT AAA GGT CAA CAA TAT GAT GCC AAA TAT ACA TGG AAT GTG CCG AAA 97 Ile Ala Pro Lys Ser Glu Asn Val Val Val Thr Val Lys Leu Val Gly 289 ATT GCA CCA AAA TCT GAA AAC GTT GTC GTT ACA GTC AAA CTT GTT GGT 113 Asp Asn Gly Val Leu Ala Cys Ala Ile Ala Thr His Ala Lys Ile Arg 337 GAT AAT GGT GTT TTG GCT TGC GCT ATT GCT ACC CAC GCT AAA ATC CGT 129 Ala *** 385 GCT TAA
【図１】実施例１において、Der f IIの特定アミノ酸を
アラニンに置換した変異Der fIIの発現ベクターｐＦＬ
Ｔ１１を構築するまでの工程を示す説明図である。
アラニンに置換した変異Der fIIの発現ベクターｐＦＬ
Ｔ１１を構築するまでの工程を示す説明図である。
【図２】実施例２において、改変Der f IIのヒトＩｇＥ
抗体との親和性を示した図である。
抗体との親和性を示した図である。
【図３】実施例３において、改変Der f IIによる野生型
Der f IIとヒトＩｇＥ抗体との結合阻害活性を示した図
である。●は野生型Der f IIを、○はD4Aを、△はK6A
を、□はD7Aを表す。
Der f IIとヒトＩｇＥ抗体との結合阻害活性を示した図
である。●は野生型Der f IIを、○はD4Aを、△はK6A
を、□はD7Aを表す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 結城 敏文 東京都大田区大森北２−13−１ アサヒ ビール株式会社中央研究所内 (72)発明者 奥村 康 東京都大田区大森北２−13−１ アサヒ ビール株式会社中央研究所内 (72)発明者 渋谷 一郎 干葉県柏市増尾字松山967 ニッカウヰ スキー株式会社生産技術研究所内 (56)参考文献 特開 平３−254683（ＪＰ，Ａ) 国際公開92／4445（ＷＯ，Ａ１) 国際公開93／8279（ＷＯ，Ａ１) Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．, Ｖｏｌ．55，Ｎｏ．５，ｐ．1233−1238 （1991) Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．101，Ｎｏ. ２，ｐ．159−166（1993．07．08) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ／ＰＩＲ／ＧｅｎｅＳ ｅｑ ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＣＡ（ＳＴＮ) ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ) ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)
Claims (10)
- 【請求項１】 配列番号１(１−ａ(Clone 11))または配
列番号２(１−ｂ(Clone １))または配列番号３(１−ｃ
(Clone ２))のいずれか１つの配列で示されるダニ主要
アレルゲンDer f IIのＮ末端から４番目、６番目、７番
目、１０番目、１１番目、１２番目、１２８番目または
１２９番目のアミノ酸のいずれか１つをアラニンに置換
したことを特徴とするポリペプチド。 - 【請求項２】 Ｎ末端から４番目のアミノ酸をアラニン
に置換した配列が配列番号７（Ｄ４Ａ）である請求項１
記載のポリペプチド。 - 【請求項３】 Ｎ末端から６番目のアミノ酸をアラニン
に置換した配列が配列番号９（Ｋ６４Ａ）である請求項
１記載のポリペプチド。 - 【請求項４】 Ｎ末端から７番目のアミノ酸をアラニン
に置換した配列が配列番号１０（Ｄ７Ａ）である請求項
１記載のポリペプチド。 - 【請求項５】 Ｎ末端から１０番目のアミノ酸をアラニ
ンに置換した配列が配列番号１１（Ｎ１０Ａ）である請
求項１記載のポリペプチド。 - 【請求項６】 Ｎ末端から１１番目のアミノ酸をアラニ
ンに置換した配列が配列番号１２（Ｎ１１Ａ）である請
求項１記載のポリペプチド。 - 【請求項７】 Ｎ末端から１２番目のアミノ酸をアラニ
ンに置換した配列が配列番号１３（Ｎ１２Ａ）である請
求項１記載のポリペプチド。 - 【請求項８】 Ｎ末端から１２８番目のアミノ酸をアラ
ニンに置換した配列が配列番号３１（Ｒ１２８Ａ）であ
る請求項１記載のポリペプチド。 - 【請求項９】 Ｎ末端から１２９番目のアミノ酸をアラ
ニンに置換した配列が配列番号３２（Ｄ１２９Ａ）であ
る請求項１記載のポリペプチド。 - 【請求項１０】 請求項１〜９のいずれか１項記載のポ
リペプチドをコードするＤＮＡ鎖。
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|---|---|---|---|
| JP27589793A JP3350794B2 (ja) | 1993-09-29 | 1993-09-29 | 改変したダニ主要アレルゲン |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27589793A JP3350794B2 (ja) | 1993-09-29 | 1993-09-29 | 改変したダニ主要アレルゲン |
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Family
ID=17561968
Family Applications (1)
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| JP (1) | JP3350794B2 (ja) |
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-
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| Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．１０１，Ｎｏ．２，ｐ．１５９−１６６（１９９３．０７．０８） |
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