JP3289131B2 - 酸化還元反応に基づくｐｏｄ様活性物質測定用組成物 - Google Patents
酸化還元反応に基づくｐｏｄ様活性物質測定用組成物Info
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ＰＯＤ様活性を用
いた目的物質と発色剤との発色作用で、目的物質を判定
する酸化還元反応に関する。更に詳しくは、臨床上の多
くの目的物質、例えば、血液中のコレステロール，トリ
グリセリド，ブドウ糖，尿酸，リン脂質，胆汁酸，ま
た、尿中の潜血，ブドウ糖等の検出において用いられ
る、酸化還元反応の際に影響を及ぼす、還元性物質や酸
化性物質といった妨害物質を除去するための試薬を吸収
性担体に含浸し、前記担体を支持体に貼付したことから
成る試験片に関する。
いた目的物質と発色剤との発色作用で、目的物質を判定
する酸化還元反応に関する。更に詳しくは、臨床上の多
くの目的物質、例えば、血液中のコレステロール，トリ
グリセリド，ブドウ糖，尿酸，リン脂質，胆汁酸，ま
た、尿中の潜血，ブドウ糖等の検出において用いられ
る、酸化還元反応の際に影響を及ぼす、還元性物質や酸
化性物質といった妨害物質を除去するための試薬を吸収
性担体に含浸し、前記担体を支持体に貼付したことから
成る試験片に関する。
【０００２】
【従来の技術】酸化還元反応の際に影響を及ぼす、還元
性物質や酸化性物質といった妨害物質を除去するための
防止法、低減法としては、アスコルビン酸オキシターゼ
を添加する方法が、ＤＥ．Ｐ２６２５８３４．４に開示
されている。また、沃素酸や過沃素酸を添加する方法
が、ＤＥ．Ｐ３０１２８６８．３，特公平４−２９３６
０に開示されている。また、金属錯体を添加する方法
が、ＵＳ．４７９１２６，ＵＳ．５７５７２５，ＵＳ．
１５５２１５，ＵＳ．３７１２５３，特開昭６１−８８
１５３に開示されている。
性物質や酸化性物質といった妨害物質を除去するための
防止法、低減法としては、アスコルビン酸オキシターゼ
を添加する方法が、ＤＥ．Ｐ２６２５８３４．４に開示
されている。また、沃素酸や過沃素酸を添加する方法
が、ＤＥ．Ｐ３０１２８６８．３，特公平４−２９３６
０に開示されている。また、金属錯体を添加する方法
が、ＵＳ．４７９１２６，ＵＳ．５７５７２５，ＵＳ．
１５５２１５，ＵＳ．３７１２５３，特開昭６１−８８
１５３に開示されている。
【０００３】しかしながら、アスコルビン酸オキシター
ゼによるアスコルビン酸の消費は、選択特異的に生じる
ものの、アスコルビン酸オキシターゼを多量に添加しな
いと短時間で作用しない。また、アスコルビン酸オキシ
ターゼの量により安定性も大きく左右され、また価格的
にも高価であり不経済である。
ゼによるアスコルビン酸の消費は、選択特異的に生じる
ものの、アスコルビン酸オキシターゼを多量に添加しな
いと短時間で作用しない。また、アスコルビン酸オキシ
ターゼの量により安定性も大きく左右され、また価格的
にも高価であり不経済である。
【０００４】また、沃素酸及び過沃素酸によるアスコル
ビン酸の消費は、選択特異性に欠けるため、発色剤の劣
化をまねき外観変色や誤発色を生じる。これを防ぐため
に特開平５−２３６９９６，特開平３−１０３１９４，
特公昭５８−３６７９には、更に安定剤を添加させる対
策が開示されているが、これらにおいても安定剤の効果
が不十分であり実用的ではないものである。
ビン酸の消費は、選択特異性に欠けるため、発色剤の劣
化をまねき外観変色や誤発色を生じる。これを防ぐため
に特開平５−２３６９９６，特開平３−１０３１９４，
特公昭５８−３６７９には、更に安定剤を添加させる対
策が開示されているが、これらにおいても安定剤の効果
が不十分であり実用的ではないものである。
【０００５】また、金属錯体によるアスコルビン酸の消
費においては、選択特異性に欠け、また発色剤の劣化や
誤発色が生じるため、沃素酸や過沃素酸の場合と同様に
更に安定剤を添加する必要がある。
費においては、選択特異性に欠け、また発色剤の劣化や
誤発色が生じるため、沃素酸や過沃素酸の場合と同様に
更に安定剤を添加する必要がある。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は従来のかかる
実情に鑑みてなされたもので、酸化還元反応の際に影響
を及ぼす、還元性物質（アスコルビン酸等）や酸化性物
質といった妨害物質を除去し、発色反応に影響を与えな
い、結果として反応特異性や安定性に優れた作用を奏す
る試験片を提供するものである。
実情に鑑みてなされたもので、酸化還元反応の際に影響
を及ぼす、還元性物質（アスコルビン酸等）や酸化性物
質といった妨害物質を除去し、発色反応に影響を与えな
い、結果として反応特異性や安定性に優れた作用を奏す
る試験片を提供するものである。
【０００７】
【課題を解決しようとする手段】本発明は、酸化還元反
応における妨害物質である還元性物質や酸化性物質の影
響を除去してＰＯＤ様活性物質を正確に測定するため、
下記に記す化合物Ａを、発色剤Ｂと緩衝剤Ｃと共に吸収
性担体に含浸し、前記担体を支持体に貼付したことから
成るＰＯＤ様活性物質測定用試験片を得るものである。
応における妨害物質である還元性物質や酸化性物質の影
響を除去してＰＯＤ様活性物質を正確に測定するため、
下記に記す化合物Ａを、発色剤Ｂと緩衝剤Ｃと共に吸収
性担体に含浸し、前記担体を支持体に貼付したことから
成るＰＯＤ様活性物質測定用試験片を得るものである。
【０００８】 ＞Ｓ−Ｏ（スルフィニル基）、＞ＳＯ２（スルホニル
基）又は＞Ｎ−ＳＯ３，＞Ｓ−ＳＯ３，−Ｘ１又は−Ｚ
−Ｘ１，−Ｒ１〜−Ｒ４を持つ下記化学式化１、化２、
化３、化４、化５、化６、化７、化８、化９、化１０、
化１１、化１２で表される。
基）又は＞Ｎ−ＳＯ３，＞Ｓ−ＳＯ３，−Ｘ１又は−Ｚ
−Ｘ１，−Ｒ１〜−Ｒ４を持つ下記化学式化１、化２、
化３、化４、化５、化６、化７、化８、化９、化１０、
化１１、化１２で表される。
【０００９】
【化１】
【００１０】
【化２】
【００１１】
【化３】
【００１２】
【化４】
【００１３】
【化５】
【００１４】
【化６】
【００１５】
【化７】
【００１６】
【化８】
【００１７】
【化９】
【００１８】
【化１０】
【００１９】
【化１１】
【００２０】
【化１２】
【００２１】前記各式中−Ｘ１は、水素原予（−Ｈ），
アミノ基（−ＮＨ２），アセトアミノ基（−ＮＨＣＯＣ
Ｈ３），ハロゲン化アセトアミノ基（−ＮＨＣＯＣＨ２
Ｙ，Ｙ：ハロゲン），アセチル基（−ＣＯＣＨ３），ア
ルキル基（−ＣｎＨｍ，ｎ：１〜３０），シアノ基（−
ＣＮ），イソチオシアネート基（−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ），アル
コキシル基（−ＯＲ，Ｒ：アルキル基），ニトロ基（−
ＮＯ２），カルボニル基（＞Ｃ＝Ｏ），ヒドロキシル基
（−ＯＨ），カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）の置換基を
含んで成り、
アミノ基（−ＮＨ２），アセトアミノ基（−ＮＨＣＯＣ
Ｈ３），ハロゲン化アセトアミノ基（−ＮＨＣＯＣＨ２
Ｙ，Ｙ：ハロゲン），アセチル基（−ＣＯＣＨ３），ア
ルキル基（−ＣｎＨｍ，ｎ：１〜３０），シアノ基（−
ＣＮ），イソチオシアネート基（−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ），アル
コキシル基（−ＯＲ，Ｒ：アルキル基），ニトロ基（−
ＮＯ２），カルボニル基（＞Ｃ＝Ｏ），ヒドロキシル基
（−ＯＨ），カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）の置換基を
含んで成り、
【００２２】各式中−Ｒ１〜−Ｒ４は、水素原子（−
Ｈ），ハロゲン（−Ｙ），カルボニル基（＞Ｃ＝Ｏ），
カルボキシル基（−ＣＯＯＨ），−ＣｎＨｍ（ｎ：１〜
３０）の置換基を含んで成り、
Ｈ），ハロゲン（−Ｙ），カルボニル基（＞Ｃ＝Ｏ），
カルボキシル基（−ＣＯＯＨ），−ＣｎＨｍ（ｎ：１〜
３０）の置換基を含んで成り、
【００２３】各式中−Ｚは、−ＣｎＨｍ（ｎ：１〜３
０），１級〜３級アミン，ハロゲン，アルコキシル基
（−ＯＲ，Ｒはアルキル基），カルバモイル基（−ＣＯ
ＮＨ２），リン化合物，硫黄化合物の置換基を含んで成
る。そして、それらの各構造式で表される化合物Ａと、
発色剤Ｂと、緩衝剤Ｃを、吸収性担体に含浸し、前記担
体を支持体に貼付したことから成るＰＯＤ様活性物質測
定用試験片である。
０），１級〜３級アミン，ハロゲン，アルコキシル基
（−ＯＲ，Ｒはアルキル基），カルバモイル基（−ＣＯ
ＮＨ２），リン化合物，硫黄化合物の置換基を含んで成
る。そして、それらの各構造式で表される化合物Ａと、
発色剤Ｂと、緩衝剤Ｃを、吸収性担体に含浸し、前記担
体を支持体に貼付したことから成るＰＯＤ様活性物質測
定用試験片である。
【００２４】また、前記化学式化１〜化１２で表される
化合物Ａの主環に−Ｏ−，−ＮＲ５−，−Ｓ−が結合
し、式中−Ｒ５は水素原子、又はアルキル基であること
を特徴とするものである。
化合物Ａの主環に−Ｏ−，−ＮＲ５−，−Ｓ−が結合
し、式中−Ｒ５は水素原子、又はアルキル基であること
を特徴とするものである。
【００２５】さらに、前記化学式化１〜化１２で表され
る化合物Ａの主環に二重結合を有するものである。
る化合物Ａの主環に二重結合を有するものである。
【００２６】さらにまた、上記構成において、上記組成
物の配合量は、発色剤Ｂ１ｇに対して化合物Ａが０．０
１ｍｇ〜５．０ｇである。
物の配合量は、発色剤Ｂ１ｇに対して化合物Ａが０．０
１ｍｇ〜５．０ｇである。
【００２７】
【発明の実施の形態】本発明を実施するために上記化１
乃至化１２に表される化合物Ａと共に用いられる発色剤
Ｂや緩衝剤Ｃは、ＰＯＤ様活性を用いた酸化還元反応を
至適かつ効果的に進行させる必須成分であり、それらの
成分や配合比は以下の如くであるが、それらは特に限定
されるものではなく、一種または数種類を使用すること
も可能である。
乃至化１２に表される化合物Ａと共に用いられる発色剤
Ｂや緩衝剤Ｃは、ＰＯＤ様活性を用いた酸化還元反応を
至適かつ効果的に進行させる必須成分であり、それらの
成分や配合比は以下の如くであるが、それらは特に限定
されるものではなく、一種または数種類を使用すること
も可能である。
【００２８】前記化１に表される化合物Ａは、例えば下
記化１３、化１４、化１５に表される下記化合物であ
る。
記化１３、化１４、化１５に表される下記化合物であ
る。
【００２９】
【化１３】
【００３０】４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチ
ルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
ルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
【００３１】
【化１４】
【００３２】４−アセトアミド−２，２，６，６−テト
ラメチルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
ラメチルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
【００３３】
【化１５】
【００３４】４−メトキシ−２，２，６，６−テトラメ
チルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
チルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
【００３５】前記化２に表される化合物Ａは、例えば下
記化１６、化１７に表される下記化合物である。
記化１６、化１７に表される下記化合物である。
【００３６】
【化１６】
【００３７】３−カルボキシ−２，２，５，５−テトラ
メチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
メチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
【００３８】
【化１７】
【００３９】３−シアノ−２，２，５，５−テトラメチ
ル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
ル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
【００４０】前記化１１、化１２に表される化合物Ａ
は、例えば下記化１８、化１９に表される下記化合物で
ある。
は、例えば下記化１８、化１９に表される下記化合物で
ある。
【００４１】
【化１８】
【００４２】４−（４−ニトロベンゾイロキシ）−２，
２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシフ
リーラジカル
２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシフ
リーラジカル
【００４３】
【化１９】
【００４４】３−アミノメチル−２，２，５，５−テト
ラメチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
ラメチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
【００４５】前記化学式化１又は化２で表される化合物
（Ａ）の主環に−Ｏ−，−ＮＲ５−，−Ｓ−が結合し、
式中−Ｒ５は水素原子、又はアルキル基である化合物Ａ
は、例えば下記化２０、化２１に表される下記化合物で
ある。
（Ａ）の主環に−Ｏ−，−ＮＲ５−，−Ｓ−が結合し、
式中−Ｒ５は水素原子、又はアルキル基である化合物Ａ
は、例えば下記化２０、化２１に表される下記化合物で
ある。
【００４６】
【化２０】
【００４７】２−ブチル−４，４−ジメチル−２−ペン
チル−３−オキサゾリジニルオキシフリーラジカル
チル−３−オキサゾリジニルオキシフリーラジカル
【００４８】
【化２１】
【００４９】２−（４−メトキシ−４−オキソブチル）
−４，４−ジメチル−２−トリデシル−３−オキサゾリ
ジニルオキシフリーラジカル
−４，４−ジメチル−２−トリデシル−３−オキサゾリ
ジニルオキシフリーラジカル
【００５０】前記化３乃至化６に表される化合物Ａは、
例えば下記化２２、化２３に表される下記化合物であ
る。
例えば下記化２２、化２３に表される下記化合物であ
る。
【００５１】
【化２２】
【００５２】テトラメチレンスルフォキシド
【００５３】
【化２３】
【００５４】３，４−ジブロモテトラヒドロチオペン−
１，１−ジオキサイド
１，１−ジオキサイド
【００５５】前記化７乃至化１０に表される化合物Ａ
は、例えば下記化２４、化２５に表される下記化合物で
ある。
は、例えば下記化２４、化２５に表される下記化合物で
ある。
【００５６】
【化２４】
【００５７】５，５−ジメチル−１−ピロリン−Ｎ−オ
キサイド
キサイド
【００５８】
【化２５】
【００５９】ピリジンサルファトリオキサイド
【００６０】緩衝剤Ｃとしては、例えば尿中潜血測定用
試験片の場合、クエン酸塩、リンゴ酸塩、リン酸塩であ
り、その量としては組成物全量に対して１〜１０量部を
用いることができる。
試験片の場合、クエン酸塩、リンゴ酸塩、リン酸塩であ
り、その量としては組成物全量に対して１〜１０量部を
用いることができる。
【００６１】前記発色剤Ｂの配合量は、好ましくは発色
剤Ｂ１ｇに対して化合物Ａが０．０１ｍｇ〜５．０ｇで
あり、特に好ましくは、０．１ｇ〜２．０ｇである。例
えば０−トリジン、ベンジジン、ロイコマラカイドグリ
ーンであり、その量としては組成物全量に対して０．０
１〜２量部を用いることができる。
剤Ｂ１ｇに対して化合物Ａが０．０１ｍｇ〜５．０ｇで
あり、特に好ましくは、０．１ｇ〜２．０ｇである。例
えば０−トリジン、ベンジジン、ロイコマラカイドグリ
ーンであり、その量としては組成物全量に対して０．０
１〜２量部を用いることができる。
【００６２】また、これらの組成物と測定項目に必要な
試薬を吸収性担体に含浸し、支持体に貼付し試験片とし
てもよい。吸収性担体としては、濾紙，不織布，化学繊
維等の使用が可能であるが、濾紙の使用が最も有用であ
る。
試薬を吸収性担体に含浸し、支持体に貼付し試験片とし
てもよい。吸収性担体としては、濾紙，不織布，化学繊
維等の使用が可能であるが、濾紙の使用が最も有用であ
る。
【００６３】この試験片の使用法には、試験片を液体試
料に浸し、直ちに引き上げ、一定時間後に呈色を予め作
成しておいた標準比色表と肉眼で比較する方法。また
は、色調測定のできる機械にて測定し検量線より濃度を
求める方法等がある。
料に浸し、直ちに引き上げ、一定時間後に呈色を予め作
成しておいた標準比色表と肉眼で比較する方法。また
は、色調測定のできる機械にて測定し検量線より濃度を
求める方法等がある。
【００６４】以下、実施の形態に基づき本発明を詳細に
説明する。
説明する。
【００６５】
【実施例１】［尿中潜血測定用試験片の製造］ 濾紙に下記１次液を含浸し、４０℃で６０分間乾燥す
る。次いで下記２次液を含浸し、５０℃で３０分間乾燥
する。それを適当な大きさに切断し支持体に貼付し試験
片を得た。
る。次いで下記２次液を含浸し、５０℃で３０分間乾燥
する。それを適当な大きさに切断し支持体に貼付し試験
片を得た。
【００６６】 ＜１次液＞ ４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピヘ゜リシ゛ン −１−オキシルフリーラシ゛カル ０．１ｇ クメンヒドロペルオキシド １．５ｍｌ トリトンＸ−１００ １．０ｇ ＥＤＴＡ−２Ｎａ ０．３ｇ １．０Ｍクエン酸緩衝液 ｐＨ５．５〜６．５となるように調整 蒸留水 全量１００ｍｌ
【００６７】 ＜２次液＞ ｏ−トリジン ０．３ｇ ３−アミノキノリン ０．３ｇ ヒドロキシプロピルセルロース ２．０ｇ アセトン １００ｍｌ
【００６８】
【実施例２】実施例１の４−アミノ−２，２，６，６−
テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
の代わりに、４−アセトアミノ−２，２，６，６−テト
ラメチルピペリジン−１−オキシルフリーラジカルを用
いた以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を得た。
テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
の代わりに、４−アセトアミノ−２，２，６，６−テト
ラメチルピペリジン−１−オキシルフリーラジカルを用
いた以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を得た。
【００６９】
【実施例３】実施例１の４−アミノ−２，２，６，６−
テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
の代わりに、４−メトキシ−２，２，６，６−テトラメ
チルピペリジン−１−オキシルフリーラジカルを用いた
以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を得た。
テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリーラジカル
の代わりに、４−メトキシ−２，２，６，６−テトラメ
チルピペリジン−１−オキシルフリーラジカルを用いた
以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を得た。
【００７０】
【比較例１】実施例１の１次液の４−アミノ−２，２，
６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリー
ラジカルの代わりに、沃素酸を用いた以外は実施例１と
同様の操作を行い試験片を得た。
６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリー
ラジカルの代わりに、沃素酸を用いた以外は実施例１と
同様の操作を行い試験片を得た。
【００７１】
【実施例４】実施例１の１次液の４−アミノ−２，２，
６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリー
ラジカルの代わりに３−カルボキシ−２，２，５，５−
テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
を用いた以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を得
た。
６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリー
ラジカルの代わりに３−カルボキシ−２，２，５，５−
テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
を用いた以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を得
た。
【００７２】
【実施例５】実施例４の１次液の３−カルボキシ−２，
２，５，５−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフ
リーラジカルの代わりに３−シアノ−２，２，５，５−
テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
を用いた以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を得
た。
２，５，５−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフ
リーラジカルの代わりに３−シアノ−２，２，５，５−
テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカル
を用いた以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を得
た。
【００７３】
【実施例６】実施例１の１次液の４−アミノ−２，２，
６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリー
ラジカルの代わりに３−アミノメチル−２，２，５，５
−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカ
ルを用いた以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を
得た。
６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシルフリー
ラジカルの代わりに３−アミノメチル−２，２，５，５
−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフリーラジカ
ルを用いた以外は実施例１と同様の操作を行い試験片を
得た。
【００７４】
【実施例７】実施例６の３−アミノメチル−２，２，
５，５−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフリー
ラジカルの代わりに４−（４−ニトロベンゾイロキシ）
−２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオ
キシフリーラジカルを用いた以外は実施例１と同様の操
作を行い試験片を得た。
５，５−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシフリー
ラジカルの代わりに４−（４−ニトロベンゾイロキシ）
−２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオ
キシフリーラジカルを用いた以外は実施例１と同様の操
作を行い試験片を得た。
【００７５】
【実施例１〜７及び比較例１の試験結果】実施例１〜７
及び比較例１に基づき製造した試験片を、種々の濃度の
ヘモグロビン含有尿に浸漬した結果、製造直後は、全て
濃度に相応して異なる強さの青色を呈し、アスコルビン
酸とヘモグロビンを含有した尿に浸漬しても、アスコル
ビン酸の影響を受けなかった。しかし、比較例１に基づ
き製造した試験片は、ヘモグロビン陰性尿に浸漬しても
発色した。また、全ての試験片を空気中に放置（室温２
５℃，湿度６０％）した結果、比較例１に基づき製造し
た試験片は数分で外観変色が起こったが、実施例１〜７
に基づき製造した試験片には起こらなかった。
及び比較例１に基づき製造した試験片を、種々の濃度の
ヘモグロビン含有尿に浸漬した結果、製造直後は、全て
濃度に相応して異なる強さの青色を呈し、アスコルビン
酸とヘモグロビンを含有した尿に浸漬しても、アスコル
ビン酸の影響を受けなかった。しかし、比較例１に基づ
き製造した試験片は、ヘモグロビン陰性尿に浸漬しても
発色した。また、全ての試験片を空気中に放置（室温２
５℃，湿度６０％）した結果、比較例１に基づき製造し
た試験片は数分で外観変色が起こったが、実施例１〜７
に基づき製造した試験片には起こらなかった。
【００７６】
【実施例８】 ［尿中ブドウ糖測定用試験片の製造］ 濾紙に下記１次液を含浸し５０℃で４０分間乾燥する。
次いで下記２次液を含浸し、５０℃で３０分間乾燥す
る。それを適当な大きさに切断し支持体に貼付し試験片
を得た。
次いで下記２次液を含浸し、５０℃で３０分間乾燥す
る。それを適当な大きさに切断し支持体に貼付し試験片
を得た。
【００７７】 ＜１次液＞ グルコースオキシダーゼ ０．３ｇ ペルオキシダーゼ ０．１ｇ ２−フ゛チル−４，４−シ゛メチル−２−ヘ゜ンチル− ３−オキサソ゛リシ゛ニルオキシフリーラシ゛カル ０．０５ｇ アルギン酸ナトリウム ０．０５ｇ １．０Ｍクエン酸緩衝液 ｐＨ５．５〜６．５となるように調整 蒸留水 全量１００ｍｌ
【００７８】 ＜２次液＞ ｏ−トリジン ０．５ｇ ポリビニルピロリドン（Ｋ−３０） １．０ｇ アセトン １００ｍｌ
【００７９】
【比較例２】実施例８の１次液の２−ブチル−４，４−
ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキシ
フリーラジカルの代わりに、過沃素酸を用いた以外は実
施例８と同様の操作を行い試験片を得た。
ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキシ
フリーラジカルの代わりに、過沃素酸を用いた以外は実
施例８と同様の操作を行い試験片を得た。
【００８０】
【実験例９】実施例８の１次液の２−ブチル−４，４−
ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキシ
フリーラジカルの代わりに２−（４−メトキシ−４−オ
キソブチル）−４，４−ジメチル−２−トリデシル−３
−オキサゾリジニルオキシフリーラジカルを用いた以外
は実施例８と同様の操作を行い試験片を得た。
ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキシ
フリーラジカルの代わりに２−（４−メトキシ−４−オ
キソブチル）−４，４−ジメチル−２−トリデシル−３
−オキサゾリジニルオキシフリーラジカルを用いた以外
は実施例８と同様の操作を行い試験片を得た。
【００８１】
【実施例１０】実施例８の１次液の２−ブチル−４，４
−ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキ
シフリーラジカルの代わりにテトラメチレンスルフォキ
シドを用いた以外は実施例８と同様の操作を行い試験片
を得た。
−ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキ
シフリーラジカルの代わりにテトラメチレンスルフォキ
シドを用いた以外は実施例８と同様の操作を行い試験片
を得た。
【００８２】
【実施例１１】実施例８の１次液の２−ブチル−４，４
−ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキ
シフリーラジカルの代わりに３，４−ジブロモテトラヒ
ドロチオペン−１，１−ジオキサイドを用いた以外は実
施例８と同様の操作を行い試験片を得た。
−ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキ
シフリーラジカルの代わりに３，４−ジブロモテトラヒ
ドロチオペン−１，１−ジオキサイドを用いた以外は実
施例８と同様の操作を行い試験片を得た。
【００８３】
【実施例１２】実施例８の１次液の２−ブチル−４，４
−ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキ
シフリーラジカルの代わりに５，５−ジメチル−１−ピ
ロリン−Ｎ−オキサイドを用いた以外は実施例８と同様
の操作を行い試験片を得た。
−ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジニルオキ
シフリーラジカルの代わりに５，５−ジメチル−１−ピ
ロリン−Ｎ−オキサイドを用いた以外は実施例８と同様
の操作を行い試験片を得た。
【００８４】
【実施例１３】実施例８の１次液の２−ブチル−４，４
−ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジン−１−
オキシルフリーラジカルの代わりにピリジンサルファト
リオキサイドを用いた以外は実施例８と同様の操作を行
い試験片を得た。
−ジメチル−２−ペンチル−３−オキサゾリジン−１−
オキシルフリーラジカルの代わりにピリジンサルファト
リオキサイドを用いた以外は実施例８と同様の操作を行
い試験片を得た。
【００８５】
【実施例８〜１３及び比較例２の試験結果】実施例８〜
１３及び比較例２に基づき製造した試験片を種々の濃度
のブドウ糖含有尿に浸漬した結果、製造直後は、実施例
８〜１３及び比較例２共に、濃度に相応して異なる強さ
の青色を呈し、アスコルビン酸とブドウ糖を含有した尿
に浸漬しても、アスコルビン酸の影響を受けなかった。
しかし、比較例２に基づき製造した試験片では、ブドウ
糖陰性尿に浸漬しても発色した。また、実施例８〜１３
及び比較例２に基づき製造した試験片を空気中に放置
（室温２５℃，湿度６０％）した結果、比較例２に基づ
き製造した試験片は数十分で外観変色や感度の低下が起
こったが、実施例８〜１３に基づき製造した試験片には
起こらなかった。
１３及び比較例２に基づき製造した試験片を種々の濃度
のブドウ糖含有尿に浸漬した結果、製造直後は、実施例
８〜１３及び比較例２共に、濃度に相応して異なる強さ
の青色を呈し、アスコルビン酸とブドウ糖を含有した尿
に浸漬しても、アスコルビン酸の影響を受けなかった。
しかし、比較例２に基づき製造した試験片では、ブドウ
糖陰性尿に浸漬しても発色した。また、実施例８〜１３
及び比較例２に基づき製造した試験片を空気中に放置
（室温２５℃，湿度６０％）した結果、比較例２に基づ
き製造した試験片は数十分で外観変色や感度の低下が起
こったが、実施例８〜１３に基づき製造した試験片には
起こらなかった。
【００８６】
【発明の効果】以上より本発明のＰＯＤ様活性物質測定
用試験片は、臨床上の多くの検出目的物質、例えば、血
液中のコレステロール，尿酸等、また尿中の潜血，ブド
ウ糖等の検出において、ＰＯＤ様活性を用いて検出目的
物質と発色剤とを酸化還元反応させ、その化学反応によ
って起こる発色現象を利用し、その発色状態によって検
出目的物質の血液や尿等の体液中の存在濃度等を判定し
ようとする際に、酸化還元反応に影響を及ぼす還元性物
質（アスコルビン酸等）の妨害物質や酸化性物質といっ
た妨害物質（目的物質の測定を妨害する発色剤の劣化や
誤発色を起こす原因となる妨害物質）を除去することに
よって発色反応に影響を与えない、結果として反応特異
性や安定性に優れた作用を奏することが可能となり、検
出目的物質の正確な検出測定ができるようになった。
用試験片は、臨床上の多くの検出目的物質、例えば、血
液中のコレステロール，尿酸等、また尿中の潜血，ブド
ウ糖等の検出において、ＰＯＤ様活性を用いて検出目的
物質と発色剤とを酸化還元反応させ、その化学反応によ
って起こる発色現象を利用し、その発色状態によって検
出目的物質の血液や尿等の体液中の存在濃度等を判定し
ようとする際に、酸化還元反応に影響を及ぼす還元性物
質（アスコルビン酸等）の妨害物質や酸化性物質といっ
た妨害物質（目的物質の測定を妨害する発色剤の劣化や
誤発色を起こす原因となる妨害物質）を除去することに
よって発色反応に影響を与えない、結果として反応特異
性や安定性に優れた作用を奏することが可能となり、検
出目的物質の正確な検出測定ができるようになった。
フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12Q 1/00 - 1/66 ＣＡ（ＳＴＮ) ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (4)
- 【請求項１】 酸化還元反応における妨害物質である還
元性物質や酸化性物質の影響を除去するため、五員環又
は六員環の構造式中に＞Ｎ−Ｏ（ニトロシル基）、＞Ｓ
−Ｏ（スルフィニル基）、＞ＳＯ２（スルホニル基）又
は＞Ｎ−ＳＯ３，＞Ｓ−ＳＯ３，−Ｘ１又は−Ｚ−
Ｘ１，−Ｒ１〜−Ｒ４を持つ化学式［化１］［化２］
［化３］［化４］［化５］［化６］［化７］［化８］
［化９］［化１０］［化１１］［化１２］で表され、式
中−Ｘ１は、水素原子（−Ｈ），アミノ基（−Ｎ
Ｈ２），アセトアミノ基（−ＮＨＣＯＣＨ３），ハロゲ
ン化アセトアミノ基（−ＮＨＣＯＣＨ２Ｙ，Ｙ：ハロゲ
ン），アセチル基（−ＣＯＣＨ３），アルキル基（−Ｃ
ｎＨｍ，ｎ：１〜３０），シアノ基（−ＣＮ），イソチ
オシアネート基（−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ），基（＞Ｃ＝Ｏ），ヒ
ドロキシル基（−ＯＨ），カルボキシル基（−ＣＯＯ
Ｈ）の置換基を含んで成り、式中−Ｒ１〜−Ｒ４は、水
素原子（−Ｈ），ハロゲン（−Ｙ），カルボニル基（＞
Ｃ＝Ｏ），カルボキシル基（−ＣＯＯＨ），−ＣｎＨｍ
（ｎ：１〜３０）の置換基を含んで成り、式中−Ｚは、
−ＣｎＨｍ（ｎ：１〜３０），１級〜３級アミン，ハロ
ゲン，アルコキシル基（−ＯＲ，Ｒはアルキル基），カ
ルバモイル基（−ＣＯＮＨ２），リン化合物，硫黄化合
物の置換基を含んで成り、それらの構造式で表される化
合物（Ａ）と、発色剤（Ｂ）と、緩衝剤（Ｃ）を、吸収
性担体に含浸し、前記担体を支持体に貼付したことから
成るＰＯＤ様活性物質測定用試験片。 - 【請求項２】 主環に−Ｏ−，−ＮＲ５−，−Ｓ−が結
合し、式中−Ｒ５は水素原子、又はアルキル基であるこ
とを特徴とする請求項１のＰＯＤ様活性物質測定用試験
片。 - 【請求項３】 主環に二重結合を有することを特徴とす
る請求項１又は２のＰＯＤ様活性物質測定用試験片。 - 【請求項４】 発色剤（Ｂ）１ｇあたり化合物（Ａ）を
０．０１ｍｇ〜５．０ｇの配合量で添加することを特徴
とする請求項１乃全３のうちいづれか一項記載のＰＯＤ
様活性物質測定用試験片。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24886296A JP3289131B2 (ja) | 1996-08-29 | 1996-08-29 | 酸化還元反応に基づくｐｏｄ様活性物質測定用組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24886296A JP3289131B2 (ja) | 1996-08-29 | 1996-08-29 | 酸化還元反応に基づくｐｏｄ様活性物質測定用組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1070996A JPH1070996A (ja) | 1998-03-17 |
| JP3289131B2 true JP3289131B2 (ja) | 2002-06-04 |
Family
ID=17184537
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24886296A Expired - Lifetime JP3289131B2 (ja) | 1996-08-29 | 1996-08-29 | 酸化還元反応に基づくｐｏｄ様活性物質測定用組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3289131B2 (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6459268B2 (ja) * | 2014-07-15 | 2019-01-30 | 東洋紡株式会社 | 生体成分の測定方法および測定用組成物 |
| JP6569193B2 (ja) * | 2014-07-15 | 2019-09-04 | 東洋紡株式会社 | 生体成分の測定方法および測定用組成物 |
| JP6446875B2 (ja) * | 2014-07-15 | 2019-01-09 | 東洋紡株式会社 | 生体成分の測定方法および測定用組成物 |
| JP6913956B2 (ja) * | 2016-09-26 | 2021-08-04 | 池田食研株式会社 | Ｌ−キヌレニンの測定方法及び測定キット |
-
1996
- 1996-08-29 JP JP24886296A patent/JP3289131B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH1070996A (ja) | 1998-03-17 |
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